1: Explique el mecanismo químico de la tinción de Gram, refiriendo la
reacción entre los reactivos y los componentes de la pared celular. Para la realización de una tinción de gram se utilizan dos colorantes. Uno de carácter primario, como es el cristal violeta, y otro de contraste, como la safranina. También se utiliza un mordiente para la safranina, como es el lugol, y un decolorante como el alcohol/acetona.
Esta tinción pone de manifiesto la afinidad tintorial de la pared, la cual depende
de su composición para que el microorganismo sea considerado gram+ o gram-. Los microorganismos grampositivos se diferencian de los gramnegativos en que tienen más mureína, una pared celular monoestratificada y presencia de ácidos teitoicos. Los gram- tienen menos mureína, una pared celular biestratificada y no tienen ácidos teitoicos. Esta técnica sirve, junto a la morfología, para clasificar las bacterias como:
2.Investigue a qué se debe la afinidad de los colorantes básicos por las
bacterias, y a qué la de los ácidos. Los colorantes utilizados a menudo son sales . Los colorantes básicos, consisten de cationes teñidos con un anión incoloro, ocurre lo contrario con los colorantes ácidos. Las células bacterianas son ricas en ácidos nucleicos y portan cargas negativas en los grupos fosfato. Esta se combina con las cargas positivas de los colorantes básicos. Los colorantes ácidos no tiñen a las células bacterianas y por tanto pueden utilizarse para teñir el material de fondo a fin de proporcionar un contraste de color. Los colorantes básicos tiñen las células bacterianas de manera uniforme a menos que en primer lugar se destruya el RNA citoplasmático. Sin embargo, pueden utilizarse técnicas de tinción especial para diferenciar los flagelos, capsulas, pared celular, membranas celulares, gránulos, nucleoides y esporas. 3. ¿Por qué los colorantes negativos no penetran a la bacteria Se utilizan estos colorantes porque las células bacterianas están débilmente cargadas en su superficie con cargas negativas. Los más utilizados son el Cristal Violeta, el Azul de Metileno y la Safranina .