Microbiología II

Virus RNA monocatenario

sentido positivo

Picornaviridae, Coronaviridae,
Arteriviridae, Flaviviridae
 Familia Picornaviridae
Introducción
 Constituye una de las más estudiadas
 Su nombre deriva de PICO= pequeño
 Son virus de gran interés en clínica humana
y veterinaria
 Esta familia incluye 9 géneros:
En Medicina Veterinaria:
Aftovirus (virus de fiebre aftosa)
Enterovirus (porcino, bovino y aviar)
Cardiovirus (encefaliomiocarditis murina)
Rinovirus (rinovirus bovino).
 Familia Picornaviridae
Estructura:
 Diámetro 18 a 30 nm
 Cápside: 60 protómeros, estructura
icosaédrica.
 Protómeros: 4 polipéptidos que derivan del
clivaje de una proteína de mayor peso
molecular (1ABCD): VP1, VP2 y VP3 que
son proteínas externas y VP4 que es
interna.
 En la superficie viral, existen zonas
prominentes y zonas deprimidas o
“cañones”
 No poseen envoltura
 Familia Picornaviridae
Estructura:
 Genoma: una molécula de RNA
de sentido positivo [RNA(+)],
aproximadamente 8 kilobases.
 En extremo 5’ una pequeña
proteína denominada VPg y en
su extremo 3’ una secuencia de
ácido poliadenílico (Poly A).
Picornavirus: esquemas
Picornavirus: ME
 Picornavirus: replicación

•Unión: “cañón” + receptor celular

•Desnudamiento
•Liberación del RNA en el citoplasma
•RNA policistrónico –polipéptido-
•El virus codifica la síntesis de una RNA-
polimerasa para sintetizar la cadena de RNA(-).
•El ECP más frecuente en cultivos celulares es
la lisis.
Picornavirus: replicación
 Picornavirus: patogenia
 Variedad de signos, meningitis, resfríos, conjuntivitis
 Infección es por inhalación o por vía genital.
 Contagio por contacto a través de distintos vehículos.
 Enterovirus, Rinovirus. Importante el nombre con la patogenia
 Replicación inicial viremia otros órganos
sucesivas replicaciones.
 La sintomatología es consecuencia del daño del epitelio del
órgano en cuestión.
 Una de las características de la fiebre aftosa, es que el virus se
elimina por leche y que se produce una infección persistente en
rumiantes.
 Picornavirus en Med.Vet.
 Fiebre aftosa: 7 serotipos: A, O, C, Sat1, Sat2, Sat3,
Asia1 y un número variable de subtipos. Produce
lesiones vesiculares principalmente en boca y región
interdigital (biungulados).
 Los Rinovirus equinos producen signos respiratorios.
 Los Cardiovirus (encefalomiocarditis en ratas) producen
signos nerviosos y a nivel del corazón.
 En porcinos, la enfermedad vesicular es indiferenciable
clínicamente de la aftosa, mientras que otro
Enterovirus, produce polioencefalomielitis (Enfermedad
de Teschen) con predominio de signos nerviosos.
 Picornavirus: prevención
Diagnóstico-Vacunas:
 Aftovirus: la inmunidad humoral es la más importante
y cumple un papel fundamental en la prevención,
aunque por su corta duración deja vulnerable al
hospedador frente a sucesivas exposiciones.
 Las muestras provendrán de los órganos blanco donde
el virus replique y durante el período agudo: material
de aftas, heces, hisopados nasofaríngeos.
 Las pruebas serológicas aplicables para el diagnóstico
son: virus neutralización y ELISA. Muestras de suero
provenientes de la etapa aguda y convaleciente.
Familia Coronaviridae
 Familia Coronaviridae

Introducción:
 Virus con envoltura y espículas
 Su nombre deriva de la apariencia de “corona” al ME
 2 géneros (Coronavirus y Torovirus) y 3 grupos.
 Son agentes etiológicos de enfermedades
respiratorias, entéricas, hepáticas y cardíacas
 Por su mecanismo particular de replicación, junto con
la familia Arteriviridae se incluyen en el orden de los
Nidovirales.
 Familia Coronaviridae
Estructura:
 Son virus esféricos-pleomórficos de 60 a 220 nm.
 Son sensibles a los solventes orgánicos.
 El RNA está contenido en una cápside helicoidal.
 Contienen 4 proteínas estructurales principales: la gp
de la espícula (S), la gp de matriz (M), la proteína de la
envoltura (E) y la proteína de la nucleocápside (N).
 El RNA es de 30 kb con un Cap en el extremo 5’ y un
polyA en el 3’; funciona como mRNA y por sí solo es
infeccioso [RNA(+)].
Coronavirus:esquema
Coronavirus: ME
 Coronavirus: replicación
 Unión de la proteína S del virión a la membrana de la
célula susceptible (epitelios respiratorio, entérico y
células neuronales y gliales).
 Fusión de la envoltura viral con la membrana
plasmática.
 Cambios conformacionales, pérdida de cápside,
liberación de RNA genómico al citoplasma
 Transcripción que involucra varias rondas de traducción
para completar un ciclo de replicación. Esta es la
particularidad de los Nidovirales, sintetizan entre 5 a 7
mRNAs subgenómicos que son traducidos a una o más
proteínas.
 Coronavirus: replicación
 Las proteínas se traducen de cada mRNA en forma
individual, transportadas hacia el RER o Golgi,
uniónde la proteína N al RNA viral para formar las
nucleocápsides helicoidales, liberación por exocitosis
 Por este particular mecanismo de replicación, tienen
una alta frecuencia de recombinación.
 Los virus pueden replicar en una amplia variedad de
cultivos celulares derivados de equinos, conejos y
cerdos. Aunque es escaso el ECP, cuando es visible se
produce principalmente redondeamiento y
desprendimiento celular.
Coronavirus: replicación
 Coronavirus: patogenia
 Causan más comúnmente enfermedades respiratorias,
gastrointestinal o neurológico.
 Las células epiteliales son los blancos principales
 Morbilidad muy alta, la mortalidad puede variar de 0 a 100%
dependiendo de la cepa y del hospedador.
 El período de incubación es corto, de 24 a 36 horas.
 Las cepas respiratorias replican principalmente en el tracto
respiratorio superior y producen lesiones características en la
tráquea, y luego se diseminan al tracto respiratorio inferior. Las
cepas gastrointestinales replican en el epitelio intestinal
produciendo descamación y desprendimiento de las células
infectadas.
 Coronavirus en Med.Vet.
Principales enfermedades:
 Uno de los modelos es la Bronquitis Infecciosa
Aviar. El virus replica en tracto respiratorio
superior y luego de un período de viremia,
produce alteraciones en órganos reproductivos
y riñones.
 Otro virus de esta familia es el del
Gastroenteritis transmisible porcina, que
ocasiona vómitos y diarreas y es de alta
mortalidad en neonatos.
 Coronavirus: prevención
Diagnóstico-Vacunas:
 Las 4 proteínas estructurales son inductoras de una
fuerte respuesta inmune humoral. VN y ELISA.
 En cultivos celulares, el ECP es escaso
 Las muestras deben ser tomadas en el período agudo
de la enfermedad (hisopados)
 Para determinar su presencia es la RT-PCR, diseñadas
para amplificar el gen de la proteína S.
 Muchas de la infecciones pueden controlarse por
vacunación, aunque la inmunización nunca puede ser
sustituto de un buen manejo.
Familia Arteriviridae
 Familia Arteriviridae
Introducción
 Está formada por un único género, Arterivirus, cuya
especie tipo es el virus de la Arteritis Equina
 Las infecciones naturales producidas por los Arterivirus
se restringen a una sola especie hospedadora.
 Se incluye el virus del Síndrome Respiratorio y
Reproductivo porcino (PRRSV).
 Por su mecanismo particular de replicación, junto con
la familia Coronaviridae se incluyen en el orden de los
Nidovirales.
 Una de las características de esta familia es que
producen infecciones persistentes asintomáticas
 Familia Arteriviridae
Estructura
 Las partículas poseen envoltura, entre 40-60 nm.
 El RNA de un 12 a 15 kb con Cap en 5’ y polyA en 3’.
 Cápside de simetría icosaédrica y está formada por
una única proteína, N o proteína de la nucleocápside.
 En la envoltura se encuentra un número variable de
proteínas, la mayoría glicosilada (gp), M, E, GP2,
GP3, GP4 y GP5.
 Debido a la composición lipoproteica de la envoltura,
son sensibles a los solventes lipídicos y detergentes,
mientras que permanecen infecciosos a pH entre 6 y
7,5.
Arterivirus: esquemas
Arterivirus: ME
 Arterivirus: replicación
 Replican primariamente en el área perinuclear de los
macrófagos (AVE) y células espermáticas (PRRSV).
 La adsorción se realiza mediante la interacción de
algunas gp y receptores específicos celulares.
 Continúa la endocitosis y la formación del endosoma
 Liberación del genoma en el citoplasma. El ciclo de
replicación comienza con la expresión del gen de la
replicasa viral (RNA polimerasa RNA dependiente) y la
transcripción de RNA complementario (-).
 Se transcriben una serie de RNAs mensajeros sg que se
traducen en las proteínas estructurales.
 Son ensamblados a través del REL y/o Golgi, donde
adquieren la envoltura y se liberan por exocitosis
. L
Arterivirus: replicación
 Arterivirus: patogenia
 La puerta de entrada es respiratoria o venérea y su diseminación
se produce a través de las células blancas sanguíneas.
 Inicialmente replican en los macrófagos alveolares, luego ocurre
una segunda replicación en los nódulos linfáticos regionales y
posteriormente ocurre la diseminación a través de los macrófagos
sanguíneos (viremia) infectando células de distintos órganos y
sistemas. En el caso de AVE se infectan posteriormente células
endoteliales de todos los componentes del sistema circulatorio y
músculo liso de arterias, miometrio, epitelio tubular renal, etc.
 La infección puede causar abortos, dificultades respiratorias o bien
ser asintomáticas y producir un estado de portador persistente.
 Una característica es que pueden persistir en el semen de machos
infectados, lo cual hace a la transmisión sexual una ruta
secundaria muy importante de infección.
 Arterivirus en Med.Vet.
 AVE: signos respiratorios, asintomática o abortos.
Replican inicialmente en macrófagos alveolares, luego
en nódulos linfáticos bronquiales para luego por vía
sanguínea infectar endotelio y mesotelio (de alli su
nombre).
 PRRSV: es la denominada oreja azul o “mystery”. Una
de las principales características es producción de
aborto de fetos momificados.
 AVE ha sido declarada en nuestro país y está
autorizado el uso de vacunas. Se realiza control
serológico y de semen, mientras que por ahora, PRRSV
no ha sido aislado.
 Arterivirus: diagnóstico
 Los Ac se detectan en las 1as semanas PI, son
altamente neutralizantes y protectivos contra AVE, y de
menor persistencia en PRRSV.
 Serología: inmunofluorescencia, VN y ELISA. Deben
extraerse en forma estéril y en el momento adecuado:
hisopados nasofaríngeos, fetos, sangre y semen.
AVE
AVE
PRRSV
Familia Flaviviridae
 Familia Flaviviridae
Introducción
 Flavus = del latin amarillo, virus que infectan
artrópodos y vertebrados.
 3 géneros, el género Pestivirus es el más importante en
medicina veterinaria ya que comprende un grupo de
patógenos animales económicamente muy importante,
causantes de enfermedades de mayor impacto en la
industria ganadera mundial. Peste porcina clásica
(PPC) y la diarrea viral bovina (VDVB)/enfermedad de
las mucosas (EM).
 Familia Flaviviridae
Estructura
 Partículas envueltas, 40 a 60 nm y con pequeñas
proyecciones.
 En la envoltura se encuentra una gp responsable de la
generación de anticuerpos neutralizantes (E) y 3 a 4
proteínas más. Se inactiva rápidamente tanto con
solventes orgánicos, como cloroformo y éter, como
con detergentes. También es sensible a la acción de
radiaciones ultravioletas y a pH extremos.
 RNA de 9 a 12 kb, cápside icosaédrica. El RNA de por
sí solo es infeccioso y varía la presencia de polyA en
su extremo 3’ y Cap en 5’ según los géneros.
Flavivirus: esquema
 Flavivirus: replicación
 Pestivirus con un especial tropismo por células mitóticamente
activas, como linfocitos, fagocitos mononucleares y células
epiteliales.
 Adhesión de E al receptor glicoproteico de la célula hospedadora
(endocitosis mediada por receptor).
 Desnudamiento de la cápside y liberación del genoma al citosol.
 La replicación involucra la síntesis de RNA(-) complementario que
a su vez sirve de molde para la síntesis de RNA(+) viral. El RNA de
sentido positivo se comporta como un RNA policistrónico, es decir,
el genoma es traducido directamente en el ribosoma a una
poliproteína.
 El ensamblaje en el REL o Golgi, donde los viriones adquieren su
envoltura lipídica y se liberan por exocitosis o lisis celular.
 Replican según el género en una amplia variedad de cultivos
celulares.
Flavivirus: replicación
 Flavivirus: patogenia
 Pestivirus infectan a biungulados. Penetran por via digestiva, oral y sexual
y replican primariamente en amígdalas o ganglios linfáticos regionales a la
puerta de entrada.

 Viremia -- órganos blanco (bazo, ganglios, riñón, pulmón, médula ósea)

donde se producen nuevas replicaciones víricas.

 El virus puede atravesar placenta, que de acuerdo al momento en que

ocurre la infección intrauterina, conducirá al aborto, muerte perinatal o
malformaciones. Variantes de virus no citopáticos de establecer
infecciones persistentes por lo general inaparentes clínicamente, en el
caso de los rumiantes y con signos clínicos seguidos de muerte en los
cerdos. La importancia de los animales persistentemente infectados, es
que son eliminadores de virus, por lo tanto son los animales de mayor
importancia en la epidemiología de las enfermedades producidas por
Pestivirus.
 Flavivirus: prevención
Diagnóstico-Vacunas
 El diagnóstico se basa en el aislamiento del virus o la
detección del antígeno viral específico y la detección de
anticuerpos séricos. La replicación del virus de PPC en
las distintas líneas celulares no produce ECP en un 90%
de los casos, por lo que para su detección deben ser
utilizados anticuerpos conjugados. Lo mismo ocurre en
los biotipos no citopáticos de VDBV. Pueden realizarse
además pruebas de ELISA y virusneutralización.
 En nuestro país se utiliza una vacuna inactivada contra
VDVB y vacuna atenuada contra PPC.
DVBV
PPC
PPC
 RESUMEN
 Picorna (18-30nm) sin envoltura.
RNA policistrónico 8 kb
 Corona (60-220nm) con envoltura.
Nidovirales 30 kb
 Arteri (40-60nm) con envoltura.
Nidovirales 12-15 kb
 Flavi (40-60nm) con envoltura. RNA
Policistrónico 9-12 kb