Universidad Latina – Sede Veraguas

Facultad de Ciencias Dr. William C Gorgas

Carrera de Tecnología Médica

Guía N°4
Determinación de Amilasa (AMI) en muestras de suero y orina

Objetivos:
- Conocer el significado clínico que nos permite evaluar y/o diagnosticar la
determinación cuantitativa de Amilasa (AMI) en muestras de sangre y orina.
- Aprender los fundamentos del método para determinar el analito de AMI.

Introducción

La amilasa o ptialina, es un enzimahidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción

de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-Amilasa al digerir el glucógeno y el
almidón para formar azúcares simples. Se produce principalmente en las glándulas
salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad
enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la
pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre
(amilasemia). Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por Anselme Payen en
1833, quien la bautizó en un principio con el nombre de "diastasa".

El rango normal en suero es de 23 a 85 unidades por litro (U/L). El rango normal en orina
es de 2.6 a 21.2 unidades internacionales por hora (UI/h).

Sirve en el diagnóstico de enfermedades determinando sus niveles en plasma para saber si

se puede producir una pancreatitis. Sus niveles pueden estar elevados por un daño a las
células productoras de la enzima en el páncreas, o bien, por una deficiencia renal
(excreción reducida).

¿Qué es la hiperamilasemia?La hiperamilasemia es un exceso de la enzima pancreática

amilasa en la sangre. La digestión de carbohidratos y grasa requiere la acción de la
amilasa, que ya se encuentra en la saliva, para comenzar la digestión de almidones. Al
mismo tiempo, la lipasa en las secreciones gástricas rompe la grasa de los alimentos.
Los niveles de amilasa y lipasa en sangre ayudan a diagnosticar una pancreatitis. Cuando el
páncreas se inflama, los niveles de amilasa y lipasa (enzimas pancreáticas) en sangre,
aumentan.

Existen muchas causas que pueden provocar hiperamilasemia. Algunas son:

1. Pancreatitis o inflamación del páncreas. Esto hace que los niveles de amilasa y lipasa
aumenten hasta 3 veces el límite normal. Ambos valores deben estar altos para hacer el
diagnóstico de pancreatitis.
2. Tumores: los niveles de la enzima amilasa pueden aumentar en algunos tumores
pancreáticos, salivales, prostáticos, pulmonares y ováricos.
3. Infección de la vesícula biliar: la inflamación de la vesícula biliar (colecistitis) puede causar
niveles altos de amilasa (hiperamilasemia).
4. La insuficiencia renal puede resultar en hiperamilasemia.
5. Una reciente colangio-pancreatografía retrógrada endoscópica (CPRE) puede resultar en
hiperamilasemia.
6. Medicamentos: algunos pueden provocar pancreatitis con causar hiperamilasemia e
hiperlipasemia.
7. El médico diagnosticará hiperamilasemia o hiperlipasemia mediante un análisis de sangre.
Si se sospecha vesícula biliar, problemas del páncreas o renales, se puede realizar una
ecografía de la vesícula o del páncreas o una tomografía axial computarizada del
abdomen.
Un paciente tendrá riesgo de pancreatitis, incluso hiperamilasemia e hiperlipasemia, si:
a. Tiene demasiado sobrepeso (es obeso)
b. Tiene niveles altos de triglicéridos en sangre
c. Bebe demasiado alcohol
d. Le han diagnosticado cálculos en la vesícula (que pueden bloquear el flujo de
secreciones del páncreas a los intestinos)
e. Tiene historia familiar de pancreatitis.

Los medicamentos que pueden aumentar las mediciones de amilasa son, entre otros:

 Asparaginasa
 Ácido acetilsalicílico (aspirin)
 Píldoras anticonceptivas
 Colinérgicos
 Ácido etacrínico
 Metildopa
 Opiáceos (codeína, meperidina, morfina)
 Diuréticos tiazídicos

Significado de los resultados anormales.Los niveles elevados de amilasa pueden ocurrir

debido a:

 Pancreatitis aguda
 Cáncer del páncreas, ovarios o pulmones
 Colecistitis
 Ataque de la vesícula biliar causado por enfermedad
 Gastroenteritis (grave)
 Infección de las glándulas salivales (como paperas) o una obstrucción
 Oclusión intestinal
 Macroamilasemia
 Obstrucción de las vías biliares o pancreáticas
 Úlcera perforada
 Embarazo ectópico (puede romperse)

La disminución de los niveles de amilasa puede ocurrir debido a:

 Cáncer pancreático
 Daño al páncreas
 Nefropatía
 Toxemia del embarazo

Amilasa en orina. Definición

Éste es un examen que mide la cantidad de amilasa en la orina. La amilasa es una enzima
que ayuda a digerir carbohidratos, y es producida principalmente en el páncreas y en las
glándulas que producen la saliva.Se necesita una muestra de orina de 24 horas. El examen
se puede realizar usando una sola muestra de orina (al azar) o una recolección de orina
durante 24 horas. Para obtener mayor información sobre la forma de recoger la muestra
de orina.

Recolección de la muestra de Orina

Niños o adultos:Después de limpiar el área genital, orine una pequeña cantidad dentro de
la taza del inodoro para limpiar la uretra de contaminantes. Luego, recoja una muestra de
orina en un recipiente limpio o estéril. Se necesitan aproximadamente de 30 a 60 ml (una
o dos onzas) para el examen. Retire el recipiente del chorro de orina sin detener el flujo.
Usted puede terminar de orinar en la taza del inodoro. Lleve la muestra al médico de
acuerdo con las instrucciones.

Bebés: Se fija un dispositivo de recolección al bebé para recoger la orina.Lave

completamente el área alrededor de la uretra. Abra una bolsa de recolección de orina
(una bolsa plástica con una cinta adhesiva en un extremo) y colóquela sobre el bebé. Para
los niños, se puede colocar todo el pene dentro de la bolsa y pegar el adhesivo a la piel;
para las niñas, la bolsa se coloca sobre los labios mayores. Coloque el pañal como de
costumbre, cubriendo y asegurando la bolsa. Revise al bebé frecuentemente y retire la
bolsa después de que haya orinado en ella. Los bebés activos pueden desplazar la bolsa,
de manera que se puede necesitar más de un intento para obtener la muestra. Vierta la
orina dentro de un recipiente y entréguesela al médico de acuerdo con las instrucciones.

No utilice antisépticos, ya que pueden impedir la proliferación de las bacterias durante el

cultivo.

Investigue: Qué relación tiene las enzima lipasa con la amilasa y cuál es el
comportamiento (sérico y urinario) de esta enzima ante una pancreatitis aguda?
PRINCIPIO DEL MÉTODO

Materiales

1. Espectrofotómetro

2. Centrífugas

3. Incubadora

4. Materiales para el para realizar

flebotomía. (guantes, jeringuillas,
tubos, etc)

5. Tubos de ensayo de vidrio

6. Tubos de lectura para el

espectrofotómetro.

7. Gradillas

8. Pipetas manuales serológicas.

9. Micropipetas

10. Puntas de polipropileno

11. Reactivos provistos para determinar

ácido úrico en sangre
Procedimiento:

1. Conecte y encienda el espectrofotómetro en la mesa de trabajo.

2. Realice el procedimiento de Flebotomía según la pareja de trabajo que le corresponde.

3. Leer el inserto o instrucciones que le provee su reactivo de trabajo y seguir

cuidadosamente las especificaciones, pautas y procedimientos que indica el fabricante.

4. Centrifugar las muestras, para obtener el suero de trabajo

5. Rotule los tubos de lectura del espectrofotómetro como indica la siguiente tabla; o siga el
procedimiento que le indica el inserto que continua en la siguiente página.

Tubos ------------ Blanco (B) (Standard) Muestras

Reactivo
Standard o Patrón
Muestra
NOTA: Los volúmenes en cada tubo van a depender del proveedor de su reactivo.

6. Lea cuidadosamente el inserto que le provee su reactivo, para la determinación de éste

analito; de tal manera que debe seguir cada punto del procedimiento como lo indica el
proveedor, verificando las condiciones de trabajo y los volúmenes de muestras, patrones o
estándares y controles.

7. Mezclar e incubar de acuerdo a las especificaciones del inserto según sea su reactivo de
trabajo.

8. Leer las absorbancias en el espectrofotómetro.

9. Realizar los cálculos necesarios para obtener las concentraciones cada muestra, patrón y
controles.

10. Entregue su reporte al profesor, llenando el formulario siguiente:

 Experiencia Nº ____
Laboratorio de Química Clínica I
Reporte de los Resultados
Facilitadora: Licda. Blanche O. Núñez

Determinación de ______________________________
Metodología_________________________________

Integrantes del Grupo de Trabajo:

_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________
_______________________________________

Indicaciones: Escriba al lado de la A, las absorbancias obtenidas según su lectura en el

espectrofotómetro y al lado de la C escriba la concentración calculada según sea el factor que
le indica la metodología.
Prueba de Amilasa en Suero
Blanco ___ Muestra:________
A: C: A1 A2 A3 Abs. Prom. C:

Escriba el Factor utilizado para los cálculos:__________ y la Longitud de Onda: ____________

Prueba de Amilasa en Orina
Blanco ___ Muestra:________
A: C: A1 A2 A3 Abs. Prom. C:

Escriba el Factor utilizado para los cálculos:___________ y la longitud de Onda: ___________

Conteste las siguientes preguntas: (Refiérase a las instrucciones o inserto de reactivo)

1. Cuál es el nombre del control que se debería utilizar según el reactivo que utilizó en su
experiencia?
2. Mencione las sustancias que podrían interferir en la determinación de las Amilasa según el
reactivo que utilizó?
3. Escriba el rango de linealidad de ésta prueba según la metodología, de acuerdo a los
reactivos utilizados.
4. Escriba los intervalos de referencia que establece el inserto del reactivo que utilizó para
determinar amilasa en suero y en orina.