Revista Científica Odontológica

ISSN: 1659-1992
comite_editorial@colegiodentistas.org
Colegio de Cirujanos Dentistas de Costa Rica
Costa Rica

Jiménez-Badilla, Karen Marcela; Montero-Aguilar, Mauricio; Cortés-Villalobos, César; Rojas-Campos,

Norman; Zeledón-Mayorga, Rodolfo
EFICIENCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN DE CONOS DE GUTAPERCHA
CON NAOCL, ANTE LAS ESPECIES S. AUREUS Y E. FAECALIS
Revista Científica Odontológica, vol. 10, núm. 1, enero-junio, 2014, pp. 37-41
Colegio de Cirujanos Dentistas de Costa Rica
San José, Costa Rica

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“EFICIENCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN DE
CONOS DE GUTAPERCHA CON NAOCL, ANTE LAS ESPECIES
S. AUREUS Y E. FAECALIS ”
“EFFICIENCY OF DIFFERENT NAOCL DISINFECTION PROTOCOLS ON GUTTA-PERCHA CONES
AGAINST THE SPECIES S. AUREUS AND E. FAECALIS”
Jiménez-Badilla Montero-Aguilar Cortés-Villalobos
Karen Marcela Mauricio César
Práctica privada Universidad de Costa Práctica privada
Costa Rica Rica, Facultad de Costa Rica
Odontología
Costa Rica
Fecha de ingreso: 15.05.14 / Fecha de aceptación: 03.11.14
RESUMEN
Objetivo: el propósito del presente estudio fue analizar el
protocolo de desinfección más eficiente, ante las especies
S. aureus y E. faecalis en concentraciones de 1.5x105 UFC/
ml y 1.5x108 UFC/ml, de acuerdo al tiempo de exposición
y concentración de la solución desinfectante de
hipoclorito de sodio. Materiales y métodos: se tomaron
72 conos de gutapercha al azar, se contaminaron con los
microorganismos S. aureus y E. faecalis, posteriormente
se desinfectaron utilizando NaOCl al 3,7% y 5,8%,
durante 1 y 3 minutos, luego se realizó recuento de las
Unidades Formadoras de Colonias (UFC) bacterianas.
Resultados: los conos de gutapercha desinfectados
con NaOCl al 3,7% y NaOCl al 5,8%, no mostraron
diferencias estadísticamente significativas en el conteo
de UFC bacterianas entre sí, aunque si con el grupo de
control negativo. Tampoco se observaron diferencias
significativas entre los grupos desinfectados durante 1 o 3
minutos. Conclusiones: todos los protocolos de NaOCl
resultaron ser efectivos contra los microorganismos
estudiados por lo que los protocolos de 1 minuto de
exposición al agente desinfectante, resultaron ser más
eficientes.
PALABRAS CLAVE
Desinfección, conos de gutapercha, hipoclorito de sodio,
staphylococcus aureus, enterococcus faecalis
Investigación
Rojas-Campos Zeledón-Mayorga
Norman Rodolfo
Universidad de Costa Universidad de Costa
Rica, Facultad de Rica, Facultad de
Microbiología Odontología
Costa Rica Costa Rica
ABSTRACT
Objective: the aim of the present study was to analyze
the most efficient disinfection protocol against 1.5x105
UFC/ml and 1.5x108 UFC/ml concentrations of S.
aureus and E. faecalis species, according to exposure time
and concentration of sodium hypochlorite disinfectant
solution. Materials and methods: 72 gutta-percha
cones were sampled randomly and then inoculated with
standardized pure cultures of S. aureus and E. faecalis,
afterwards the cones were disinfected with 3.7% and
5,8% NaOCl during 1 and 3 minutes, and the colony
forming units (CFU) were counted. Results: gutta-
percha cones disinfected with 3,7% and 5,8% NaOCl
showed no statiscally significant differences in CFU
count between them, but when compared to the control
group, both protocols showed statistically differences in
efficacy. Also, no difference were shown between the
groups disinfected during 1 or 3 minutes. Conclusion:
All NaOCl protocols were effective against the studied
microorganisms, therefore the 1 minute exposure
protocols were more efficient.
KEYWORDS
Disinfection, gutta-percha cones, sodyum hypochlorite,
staphylococcus aureus, enterococcus faecalis
Rev. Cient. Odontol., Vol.10 / No. 1, Enero a Junio 2014 37
JIMÉNEZ K., MONTERO M., CORTÉS C., ROJAS N., ZELEDÓN R., “EFICIENCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN DE CONOS
DE GUTAPERCHA CON NAOCL, ANTE LAS ESPECIES S. AUREUS Y E. FAECALIS” INVESTIGACIÓN. REV. CIENT. ODONTOL. 10 (1): 37-41

INTRODUCCIÓN En la literatura científica endodóntica, se encuentran es-

Uno de los principales objetivos de la terapia endodóntica
es prevenir la infección o reinfección, con microorganis-
mos, del sistema de conductos radiculares y/o los tejidos
peri radiculares (Siqueira & Rocas, 2009). Materiales de
obturación contaminados podrían introducir microorga-
nismos a un sistema de conductos previamente desinfec-
tado e impedir el éxito del tratamiento (Subba, Prabhakar,
Minu Koshy, Abinaya, Prabu & Lavanya Thangavelu,
2013). Estudios han demostrado que los conos de guta-
percha, utilizados para la obturación, pueden presentar
contaminación al ser tomados directamente del empaque,
aún sellado y recién abierto; y que después de romper el
sello de fábrica, estas puntas son fácilmente colonizadas
por microorganismos (Gomes et al, 2005) (Kayaoglu,
Gürel, Ömürlü, Bek & Sadik, 2009) (Seabra & Siqueira
Jr, 2010). Por sus características termoplásticas, la guta-
percha no puede ser esterilizada con calor, ya que puede
causar alteraciones a su estructura, por lo que es necesario
desinfectarla antes de ser introducida en los conductos
radiculares (Brito, Vasconcelos & Oliveira, 2013) (Gomes
et al., 2005). Un procedimiento de desinfección de guta-
percha que consuma mucho tiempo no es favorable en
la práctica clínica, por lo que es necesaria la implementa-
ción de un método confiable, económico, y eficiente, que
produzca los mejores resultados en la menor cantidad de
tiempo (Siqueira, Pereira da Silva, Cerque ira, López & de
Uzeda, 1998) (Gomes et al., 2005).
El S. aureus es uno de los microorganismos frecuentemen-
te encontrados en conos de gutapercha contaminados en
su empaque original y junto con otros del género Staphylo-
coccus, en conos después de ser manipulados con guantes
(Gomes et al., 2005). Por otra parte, estudios tanto de-
pendientes como independientes de cultivo bacteriano en
tratamientos fallidos, han revelado que el E. faecalis es la
especie más frecuente en piezas dentales con tratamiento
de conductos, con una prevalencia superior al 90% de los
casos (Molander, Reit, Dahlén & Kvist, 1998), (Sundqvist
& Fidgor, 1998), (Pinheiro, Gomes, Ferraz, Sousa, Tei-
xeira, Souza-Filho, 2003), (Sakamoto, Siqueira, Rocas &
Benno 2008), (Love, 2001).
tudios que prueban la eficiencia desinfectante de distin-
tos productos químicos, sin llegar a un consenso acerca
de cuál es el mejor. Entre las sustancias probadas se en-
contraron estudios con peróxido de hidrógeno, yodopo-
vidona, alcohol etílico y glutaraldehído, sin embargo la
mayoría de los estudios concluyen en que no son efec-
tivas incluso después de tiempos de exposición de has-
ta 10 minutos. La clorhexidina, ha mostrado resultados
controvertidos, ya que algunos estudios afirman que es
efectiva después de 1, 5 y 10 minutos mientras que otros
afirman que no es efectiva incluso después 72 horas de
exposición (Stabholz, 1987) (Siqueira et al 1998) (Cardo-
so, Redmerski, Bittencourt, & Kotaka, 2000) (Da Motta
et al., 2001) (Gomes et al., 2005) (Özalp, Ökte, & Özce-
lik, 2006) (Pina-Vaz, Espinar, Noites & Carvalho, 2008)
(Nabeshima, de Lima Machado, Borges Britto & Pallotta
2011) (Taha, AL-Sabawi, & Shehab, 2010). El hipoclorito
de sodio (NaOCl), por su parte, en concentraciones de
5,25%, ha mostrado ser efectivo en tiempos que van des-
de los 15 segundos hasta los 10 minutos (Gómes et al.,
2005) (Senia, Marraro, Mitchell, Lewis, & Thomas,, 1975)
(Stabholz, Friedman, Heling, I. & Sela, 1987) (Siqueira et
al 1998) (Souza, Souza, Sousa-Neto & Pietro, 2003). En
concentraciones de 2,5% Motta et al. (2001) y Stabholz
et al. (2006) coinciden en que es efectivo a los 5 minutos.
Al 3% no eliminó Staphylococcus aureus incluso después
de 5 minutos (Pina Vaz et al., 2008). Al 1% mostró no
ser efectivo contra esporas, Enterococcus faecalis y Candida
albicans después de 1 minuto, pero si a los 5, 10 y 10 minu-
tos respectivamente (Taha, AL-Sabawi, & Shehab, 2010)
(Cardoso, et al., 2000) (Nabeshima et al., 2011). Y al 0.5%
se obtuvo el resultado deseado hasta los 30 minutos de
exposición de acuerdo a Gómes et al. (2005).
Esta diferencia en los resultados que presentan los estu-
dios, se debe en gran medida a la variabilidad de concen-
traciones del producto desinfectante y concentraciones
del microorganismo bajo estudio. Esto, a su vez, provoca
que no exista un consenso acerca de cuál es el mejor mé-
todo de desinfección de conos de gutapercha, a pesar de
que el NaOCl parece ser la opción más eficaz, práctica y
económica. El objetivo del presente estudio es analizar el

RECUENTO FINAL (UFC/ML)

TIEMPO DE
MICROORGANISMO CONTACTO
CONTROL NAOCL NAOCL
(MINUTOS) 3,7%
5,8%

E. faecalis 1 G1 G2 G3
ATCC 29212 1.5 x 108 3 G4 G5 G6

S. aureus 1 G7 G8 G9
ATCC 25923 1.5 x 108 3 G 10 G 11 G 12

E. faecalis 1 G 13 G14 G 15
ATCC 29212 1.5 x 105 3 G16 G 17 G18

S. aureus 1 G 19 G 20 G 21
ATCC 25923 1.5 x 105 3 G 22 G 23 G 24

Cuadro 1. Distribución de grupos experimentales según concentración de microorganismos, concentración de solución desin-
fectante y tiempo de exposición al desinfectante.

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 JIMÉNEZ K., MONTERO M., CORTÉS C., ROJAS N., ZELEDÓN R., “EFICIENCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN DE CONOS DE
GUTAPERCHA CON NAOCL, ANTE LAS ESPECIES S. AUREUS Y E. FAECALIS” INVESTIGACIÓN. REV. CIENT. ODONTOL. 10 (1): 37-41

TIEMPO DE RECUENTO FINAL (UFC/ML)

MICROORGANISMO CONTACTO CONTROL
(MIN) NAOCL AL 3,7% NAOCL AL 5,8%
(AGUA)
5
1 1.4x10 <10 <10
Enterococcus faecalis
ATCC29212 5
3 1.4x10 <10 <10
5
1 1.1x10 <10 <10
Staphylococcus aureus
ATCC 25923 5
3 1.1x10 <10 <10

Cuadro 2. Resultados con dosis infectante inicial 1.5x 108 UFC/ml

protocolo de desinfección más eficiente, ante las especies
S. aureus y E. faecalis, a distintas concentraciones, de acuer-
do al tiempo de exposición y concentración de la solución
desinfectante de NaOCl.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se realizó un estudio de tipo experimental in vitro, el cual
se llevó a cabo en la Facultad de Odontología y Facultad
de Microbiología, de la Universidad de Costa Rica en el
segundo semestre del año 2012. Se utilizó una caja nueva
de 100 conos de gutapercha calibre 45, de 30 mm de lon-
gitud y terminal plana (HYGENIC® Coltène/Whaledent
Inc.) lote 280551 y sello de fábrica intacto. Se selecciona-
ron al azar 72 conos de gutapercha para pasar por el pro-
ceso de contaminación en el Centro de Investigación en
Enfermedades Tropicales, Departamento de Bacteriolo-
gía Médica de la Facultad de Microbiología. Las muestras
se contaminaron sumergiendo los conos completamente
durante 30 segundos, en un tubo de ensayo con 5 ml de
cada solución contaminante. Las soluciones contaminan-
tes utilizadas fueron cepas de Enterococcus faecalis (ATCC
29212) en concentraciones de 1.5x105 UFC/ml y 1.5x108
UFC/ml y de Staphylococcus aureus (ATCC 25923) en con-
centraciones de 1.5x105 UFC/ml y 1.5x108 UFC/ml. En
total se contaminaron 72 conos que fueron divididos en
24 grupos de acuerdo al tiempo de exposición, concentra-
ción bacteriana y concentración del NaOCl; las pruebas
a cada grupo se hicieron por triplicado. La distribución
de los grupos experimentales y sus respectivos controles
negativos se presenta en el cuadro 1.
Las soluciones desinfectantes utilizadas fueron tituladas y
caracterizadas en la Escuela de Química de la Universidad
de Costa Rica. El protocolo de contaminación, desinfec-
ción y cultivo, se realizó bajo las estrictas condiciones del
Laboratorio de Bacteriología Médica y consistió en colo-
car cada cono de gutapercha dentro de un primer tubo
que contenía la solución contaminante, durante 30 segun-
dos, inmediatamente después se trasladó a un segundo
tubo que contenía la solución desinfectante, o agua desti-
lada en el caso de los controles, transcurrido el tiempo de
contacto indicado para cada grupo, se trasladó el cono a
una gaza estéril donde se dejó secar al ambiente durante
30 segundos. Posteriormente se sumergió en 1 ml de so-
lución salina estéril y se sometió a agitación vortical en un
agitador marca Vortex®. De la solución obtenida de la
sumersión final de cada cono, se tomaron alicuotas de 10
μl y 100 μl, medidas con una micro pipeta, y se cultivaron
en agar sangre durante 4 días. Este paso se realizó por
triplicado para cada muestra y se promediaron los resul-
tados. Pasado el tiempo de cultivo de 4 días en un medio
de agar sangre, se contaron, las unidades formadoras de
colonias (UFC) de cada placa.
El análisis estadístico utilizado incluyó estadística descrip-
tiva para demostrar la distribución de los resultados de
UFC entre los grupos. También se utilizó un ANOVA
de una vía y análisis de Tukey para la comparación entre
grupos. Para todos los análisis, se utilizó un nivel de signi-
ficancia estadística del 95%.
RESULTADOS
Los resultados de los conteos de UFC para cada grupo
se presentan según las concentraciones de los contami-
nantes usados, el tiempo de exposición al desinfectante y
la concentración de la solución desinfectante en los cua-

TIEMPO DE RECUENTO FINAL (UFC/ML)

MICROORGANISMO CONTACTO
(MIN) CONTROL NAOCL AL NAOCL AL
(AGUA) 3,7% 5,8%
2
1 1.4x10 <10 <10
Enterococcus faecalis
ATCC29212 2
3 1.4x10 <10 <10
3
1 1.1x10 <10 <10
Staphylococcus aureus
ATCC 25923 3
3 1.1x10 <10 <10

Cuadro 3. Resultados con dosis infectante inicial: 1.5x 105 UFC/ml

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JIMÉNEZ K., MONTERO M., CORTÉS C., ROJAS N., ZELEDÓN R., “EFICIENCIA DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN DE CONOS
DE GUTAPERCHA CON NAOCL, ANTE LAS ESPECIES S. AUREUS Y E. FAECALIS” INVESTIGACIÓN. REV. CIENT. ODONTOL. 10 (1): 37-41
Figura 1. Cultivos en agar sangre mostrando las UFC de (a) grupo control y (b) grupo de NaOCl 3,7% por 1 minuto.
dros 2 y 3. Para ambos casos, se encontraron diferencias
estadísticamente significativas entre las UFC encontradas
en los grupos control y los grupos tratados con las dos
concentraciones de NaOCl; no así entre los grupos trata-
dos con NaOCl a distintas concentraciones. En la figura
1 se muestran los cultivos agar sangre, después de 4 días
de incubación. Se observan las UFC de los grupos in-
fectados con E. faecalis 1.5x 108 UFC/ml después de ser
sometidos a los tratamientos control (a) y el NaOCl 3,7%
por 1 minuto (b).
DISCUSIÓN
El objetivo del presente estudio fue determinar el proto-
colo de desinfección de conos de gutapercha con NaOCl
más eficiente ante las especies S. Aureus y E. Faecalis. Se
analizaron las variables tiempo de exposición a la solución
desinfectante, concentración de la solución desinfectante
de NaOCl y concentración de los microorganismos que
infectarían los conos de gutapercha. La literatura científica
recomienda la desinfección de los conos de gutapercha con
agentes químicos. La selección del agente desinfectante en
el presente estudio se basó en que el NaOCl es el desinfec-
tante de conductos más ampliamente utilizado en endodon-
cia, además de ser el más económico (Taha et al, 2010).
Se demostró que tanto el hipoclorito de sodio al 3,7%
como al 5,8% de concentración, fueron igualmente efec-
tivos en la desinfección de conos de gutapercha, ante la
especies estudiadas. La variable tiempo de exposición a la
solución desinfectante no fue un factor determinante de
la eficacia ya que no se encontraron diferencias entre los
grupos tratados durante 1 minuto o 3 minutos. Estos resul-
tados son compatibles con los obtenidos por otros estudios
como por ejemplo (Taha et al., 2010) (Gomes et al., 2005),
(Stabholz et al., 1987), (Doolittle, Rubel & Fried, 1995)
(Kotaka, Redmerski, Queiroz & Cardoso,1998) (Motta
et al., 2001) (Siqueira et al.,1998) ) (Özalp et al., 2006) que
probaron que el hipoclorito es un desinfectante efectivo,
sobre conos de gutapercha, utilizado en diferentes tiempos
y concentraciones. También coincide con los resultados
obtenidos por Gomes en el 2001, donde demostraron que
al utilizar hipoclorito de sodio al 5.25% ante el E. Faecalis,
tomó menos de 30 segundos lograr una desinfección ade-
cuada del cono.
Bajo las condiciones del presente estudio in vitro, se puede
señalar que para la desinfección de conos de gutapercha
contaminados con los microorganismos estudiados a las
40 Rev. Cient. Odontol., Vol.10 / No. 1, Enero a Junio 2014
concentraciones indicadas, sumergir el cono de gutapercha
en el hipoclorito de sodio al 3,7% de concentración durante
1 minuto fue suficiente para lograr un resultado aceptable.
Sin embargo, como todo estudio controlado experimental
in vitro, los resultados obtenidos no deben ser automáti-
camente trasladados al ambiente clínico. Existen factores
del agente antimicrobiano, del huésped y del microorga-
nismo, que hacen indispensable la confirmación clínica de
los resultados obtenidos en estudios in vitro de este tipo.
Específicamente en los estudios de desinfección de conos
de gutapercha existen condiciones clínicas como el secado
y limpieza posterior de los conos, manipulación del cono
y condiciones propias del conducto radicular que podrían
variar los resultados finales de la obturación y que deben
ser contemplados a la hora de planificar un estudio clínico.
CONCLUSIÓN
Del presente estudio, se puede concluir que todos los pro-
tocolos de NaOCl utilizados para la desinfección de conos
de gutapercha contaminados con 2 distintas concentracio-
nes de E. Faecalis y S. Aureus fueron efectivos, por lo que los
protocolos que utilizaron 1 minuto de exposición al agente
desinfectante resultaron ser más eficientes.
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CALIDADES
Karen Marcela Jiménez-Badilla
Licenciatura en Odontología
Correo: jimenezbadilla@hotmail.com
Mauricio Montero-Aguilar
Licenciatura en Odontología, maestría en Ciencias en
Investigación Clínica.
Correo: mauricio.monteroaguilar@ucr.ac.cr
César Cortés-Villalobos
Licenciatura en Odontología
Correo: cealcovi@yahoo.com
Norman Rojas-Campos
Licenciatura en Microbiología y Química Clínica,
maestría en Ciencias Biomédicas, docente, Facultad de
Microbiología, Universidad de Costa Rica.
Correo: norman.rojas@ucr.ac.cr
Rodolfo Zeledón-Mayorga
Licenciatura en Odontología, especialidad en Endodoncia.
Docente, Facultad de Odontología, Universidad de
Costa Rica.
Correo: rodolfo.zeledon@ucr.ac.cr
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