Comenta

rios

Lisosomas: Fusión y función

J. Paul Luzio*, Paul R. Pryory Nicholas un. Brillante*
| abstracto Los lisosomas son orgánulos dinámicos que reciben y macromoléculas degradantes de la

Wellcome Trust/MRC Building, Addenbrooke's Hospital,

Endomas Hills Road, Cambridge, CB2 0XY, Reino Unido. Los lysosomes son orgánulos unidos a membrana que
Un compartimento unido a •
Departamento de Biología (Área 9), Universidad de York, están presentes en las células animales y contienen
membrana (orgánulo) al P.O. BOX 373, York, YO10 5YW, Reino Unido. Correspondencia a J.P.L. hidrolasa ácida. Se pueden distinguir de los endomas
que se entregan correo electrónico: jpl10@cam.ac.uk doi:10.1038/nrm2217 por la falta de receptores de fosfato (MPR) de nariz-
Publicado en línea el 18 de julio de 2007 hombre. Los lysosomas fueron descubiertos por
ligandos,
Christian de Duve hace más de 50 años como
componentes de resultado del estudio de la distribución intracelular
membrana y líquido tras
la internalización
de enzimas utilizando el fraccionamiento centrífugo 1
(endocitosis) de la (BOX 1). La microscopía electrónica, que no se utilizó en
su descubrimiento inicial, mostró posteriormente que
superficie celular. los litosomas constituyen hasta el 5% del volumen
intracelular y son de tamaño heterogéneo y
Verticilo de membrana
Una estructura morfología; a menudo contienen depósitos densos en
electrones y membrana whorls2. A los pocos años de
membranosa que tiene su descubrimiento, los litosomas fueron reconocidos
la apariencia de ser multi-
lamelar o dispuesta en
como el compartimento degradante terminal de la
espirales cuando se observa vía endocítica; también son necesarios para la
en sección transversal. digestión del material intracelular que se segrega
durante el proceso de autofagia3. Se demostró que
autofagia los lysosomas tenían ATPases vacuolar que bombean
Un proceso por el cual protones, que mantienen el entorno lumenal a un pH
los componentes
citoplasmáticos,
de 4,6–5,0 (REF. 4).
incluidos los orgánulos, Una vez identificados también los endomas 5, se
pueden ser estableció que muchas macromoléculas
secuestrados en endocitosadas, como la lipoproteína de baja densidad,
autofagosomas y se entregan al lyso- algunos después de su paso
posteriormente
secuencial a través de endomas tempranos y tardíos6,7.
degradados.
Sin embargo, el mecanismo de transferencia de material
endocitosado de endosomas a litosomas siguió siendo
*Instituto de controvertido, con varias teorías propuestas (FIG. 1a).
Investigación Médica Estos incluían la maduración (del endomas en un
de lysosoma), el transporte vesicular (con vesículas que
transportan carga de endomas a lysosomas), besos y
Cambridge y corridas (un ciclo continuo de contactos
Departamen transitorios o 'besos' entre endosomas y lysosomas,
durante el cual el material se transfiere entre los
to de Bioquímica
orgánulos y cada contacto es seguido por una
Clínica,
Universidad de Cambridge,
disociacióno'run'), fusión directa (del endoma al
naturaleza Comentarios | molecular celda biología volumen 8 | Agosto 2007 | 1
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Comenta
lysosome para formar
rios
un orgánulo híbrido) y
fusión y beso y carrera, en la que los lysosomas se
vuelven a formar a partir de orgánulos híbridos
fusión-fisión (una
como resultado de eventos de fisión) 8-11.
variación de
Recientemente, los experimentos de microscopía
confocal de lapso de tiempo han demostrado que
los eventos de besos y fusión directa
contribuyen a la mezcla del contenido de
endomas y lysosomas en las células vivas 12. Estos
experimentos, junto con estudios anteriores de
electrones y microscopía y la investigación de
interacciones libres de células de endomas y
lysosomes, han dado lugar a una comprensión
mucho mayor de la dinámica de las orgánulos
endocíticos tardías. La fusión de endomas con
lysosomas crea orgánulos híbridos en los que se
degrada la mayor parte de la carga
endocytosed. La reforma de los lysosomes de estos
orgánulos híbridos requiere la recuperación y/o
reciclaje de algunas proteínas de membrana por
tráfico vesicular12,13. Este view de lysosomes como
orgánulos fusogénicos es consistente con otros
datos que muestran que los lysosomas también
pueden fusionarse con fagosomas, autofagosomas y
la membrana plasmática bajo appro-
circunstancias priadas (FIG. 1b). Aquí, resumimos las
rutas del tráfico de membranas a los lysosomas y
discutimos nuestra comprensión actual del
mecanismo por el cual el lyso- algunos se fusionan
con otros orgánulos. Se analiza la función de estos
eventos de fusión, junto con los mecanismos por
los cuales los microorganismos fagocitos pueden
evadir el parto a los litosomas.

Rutas de tráfico de membranas a lysosomas

Ahora hay información considerable sobre
cómo las hidrolasas recién sintetizadas y las pro-
teins de membrana se entregan desde la red
trans-Golgi (TGN) a los litosomas en las células
de mamíferos. Muchas de las proteínas de la
maquinaria de tráfico de mamíferos son
ortoólogos de las utilizadas por Saccharomyces
cerevisiae para el parto desde el Golgi hasta la
vacuola (el equivalente a levadura del
lysosoma mamífero) 10,11,14.

2 | Agosto 2007 | volumen 8 www.nature.com/reviews/molcellbio

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 Caja 1 | El Descubrimiento de lisosomas
El descubrimiento de lysosomas hace más de 50 años fue un triunfo para el fraccionamiento subcelular criterios estrictamente bioq
de homogeneidad bioquímica y localización Único. Estos que cada uno tipo de orgánulo citoplasmático o partícula tiene u
Aunque estos postulados ahora son reconocidos Como Seguir siendo importantes para la pureza de las fracciones s
El expediente de esa reunión3 es importante, no sólo porque reunió lo que se sabía sobre los lysosomes en ese momento, sino también

las moléculas de carga se clasifican en Suministro de proteínas lisosomales a lisosomas. En

diferentes destinos secretos. las células mamma-lian, muchas hidrolasas ácidas
recién sintetizadas se entregan a los lysosomes después
Cuerpo multivesicular de que son etiquetados con menosa- 6-fosfato en el
Un endoma que contiene muchas vesículas en el lúmenes de cis-Golgi y posteriormente se unen a los MPR en el
cada orgánulo. También se puede llamar un endoma tardío. TGN. Las hidrolasas unidas se entregan primero a los
endomas, donde se desvinculande los receptores como
resultado del pH lumenal ácido; esto permite a los
receptores reciclar de nuevo al TGN15 y las hidro-
lases continúan hacia los lysosomes. Clathrin, su
adaptador hetero-tetramérico AP1 (proteína
adaptadora-1) y los adaptadores monoméricos
conocidos como GGAs (Golgi localizado,
-que contiene oídos, ADP ribosylation factor-binding
pro- teins) son necesarios para el tráfico MPR
desde el TGN a endomas16,17.
Fagosoma
A diferencia de las hidrolasas solubles, la
Un compartimento unido administración de proteínas de membrana lisosomal
a la membrana que recién sintetizadas del TGN no requiere su unión a los
MPR, y se produce ya sea por una vía indirecta a
contiene partículas como
través de la membrana plasmática o por una vía
bacterias, levaduras o
intracelular directa. La ruta directa mejor
parásitos que han sido
interiorizados de la estudiada es la que requiere el adaptador
heterotetramérico AP3 (proteína adaptadora-3) (REFS
superficie celular por
18,19), aunque esto también puede funcionar en la
el proceso de vía indirecta porque su principal sitio de acción se
fagocitosis. encuentra en endosomas tubulares. Los complejos
proteicos de mamíferos que no tienen ortoólogos de
Autofagosome levadura, como la biogénesis del complejo de
Un compartimento
intracelular que se forma
orgánulos relacionados con el lysosoma-1 (BLOC1),
cuando una membrana doble también podrían estar involucrados en el tráfico
secuestra una porción de mediante la interinversión con AP3 (REFS 20,21). Una
citoplasma que a menudo proteína de membrana lysosomal, la proteína
incluye orgánulos.
asociada al lisosoma transmembrana-5 (LAPTM5), se
Los autofagosomas ha demostrado que el tráfico directamente desde el
posteriormente se fusionan TGN a lisosomas como resultado de una
con lysosomas. asociación con una ligaasa de ubiquitina y GGA3,
aunque LAPTM5 no es en sí mismo ubiquitinado22.
red trans-Golgi Todas las proteínas lisosomales recién sintetizadas, ya
Una estructura sea traficando directa o indirectamente a endosomas,
tubulovesicular en el utilizan una vía de parto común desde endosomas
lado trans de la pila tardíos hasta lisosomas.
de Golgi cisternae donde Entrega de proteínas de membrana endocitosas.
Algunos ligandos
reciclaje de los receptores vacíos a la superficie
endocitosados, como la
celular. Otros ligandos, como el factor de
lipoproteína de baja
crecimiento epidérmico (EGF), permanecen unidos
densidad, se
a sus receptores (que son ubiquitilados23,24) y,
desvinculan de sus
después de la endocitosis, los complejos receptor-
receptores en el
ligando seernalizan desde la superficie del endoma
lúmenes ácidos del
en vesículas lumenales. Los endosomas tardíos que
endoma temprano y se
contienen estas vesículas lumenales se fusionan con
entregan al litosoma
lysosomas.
para su degradación.
El mecanismo por el cual se forman endomas
Este proceso también
tardíos a partir de primeros endomas ha sido
permite
objeto de disputa con dos modelos emergentes:
un modelode maduración 25,26 y un modelo en el
que las vesículas portadoras endocíticas 27, formadas
como resultado de la contratación de proteínas
de capa citosólica a endosomas tempranos, son
necesarias para el traslado de carga a endomas
tardíos. Estudios recientes de imágenes en células
vivas han reconciliado aspectos mecanicistas de
ambos modelos, con la observación de que las
vesículas grandes (400-800 nm) surgen de una
dinámica endosome network y se someten a una
conversión en la que pierden el pequeño GTPase
RAB5 y reclutan RAB7 (REF. 28). Los endosomas
tardíos contienen más vesículas lumenales que los
primeros endomas y a menudo se describen como
cuerpos multivesiculares (MVBs). Las vesículas de
membrana lumenal se enriquecen en lysobisphos-
ácido fátido o fosfatidylinositol 3-fosfato29. Hay
evidencia de que no todos los MVBs son
funcionalmente equivalentes. Por ejemplo, el EGF
y el receptor EGF (EGFR) tráfico a través de una
subpoblación de MVBs que son
morfológicamente idénticos a otros MVBs pero se
distinguen por contener annexin-1 y carecer de
ácido lysobisphosphatidic 30.
El mecanismo por el cual se forman los MVBs y la
clasificación de proteínas de membrana ubiquitiladas
en sus vesículas lumenales ha sido objeto de una
investigaciónmuy reciente31-35. En levadura, 12
proteínas de clasificación de proteínas vacuolares
solubles (Vps) se organizan en cuatro com-
plexes ESCRT (complejos de clasificación
endosomal necesarios para el puerto trans) —
ESCRT-0, -I, -II y -III — que son necesarios para el
tráfico de proteínas al vacuole. Las proteínas
Vps solubles adicionales asociadas con ESCRT-III
también son importantes para este proceso. Los
modelos actuales sugieren que ESCRT-0 se une a
proteínas de carga ubiquitiladas y recluta ESCRT-I,
que, a su vez, recluta ESCRT-II
 Comenta
rios y ESCRT-III. La carga se
un desubiquitila y los
modelo híbrido vesicular
complejos ESCRT se retiran
vesiculardemaduración
de la membrana, lo que
permite clasificar la carga
Membrana Membrana plasmática en la vesícula en ciernes
hacia adentro. Quedan
Vesícula endocítica muchos detalles de la vía
escrt que deben establecerse
en la levadura; se siguen
Endoma temprano encontrando nuevos
componentes 36–39 y queda
Endomas tardíos
Orgánulo Híbrido por aclarar el mecanismo
de incipiente interior.
En las células de
mamíferos, se cree que
lisosoma
el reclutamiento, montaje
y desmontaje de complejos
ESCRT es similar a la
levadura, pero es
probablemente más
complejo, ya que

Reparación de
Membrana Membrana plasmática
Fagosoma

Endoma temprano

Endomas tardíos Autofagosome

lisosoma
Figura 1 | Entrega a lisosomas y fusión lisosomal |. La carga endocítica se
interioriza desde la membrana plasmática primero hasta los primeros endomas
y luego a los endosomas tardíos. Los endosomas tardíos entregan su carga
a los lysosomas de carga se degradan. Se han
donde las moléculas
propuesto diferentes modelos para explicar cómo se trafica la carga desde
endosomas tardíos hasta lysosomas. En el primer modelo (maduración), los
endomas tardíos maduran en lisosomas por la adición gradual de
componentes lisosomales y el removal de componentes endomas
tardíos. En un segundo modelo vesicular, las vesículas pueden brotar
del endoma tardío que entrega su contenido al lioma. En el tercer
modelo, los endosomas tardíos y los lysosomes pueden fusionarse
transitoriamente (beso), permitiendo el intercambio de contenidos entre
ellos, antes de partir de nuevo (correr). En el modelo final (híbrido), los
endomas y los lysosomes pueden fusionarse permanentemente para formar
un orgánulo híbrido que contiene componentes de lysosome y endomas
tardíos. Los lysosomas se vuelven a formar mediante la recuperación
selectiva de
componentes endomas tardíos. b | Los lysosomes pueden fusionarse con
diferentes membranas celulares: con endosomas, autofagosomas, fagosomas y
la membrana plasmática (con el propósito de la reparación de
membranas).

624 | Agosto 2007 | volumen 8 www.nature.com/reviews/molcellbio

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 Comenta
sugerido por la existencia de múltiples homólogos de algunas de las proteínas
rios
únicas de levadura Vps. La contratación de la maquinaria ESCRT y la
formación inicial de vesículas lumenales se produce en los primeros
endomas, pero contin- ues en endomas tardíos. Algunas cargas
endocitosadas y ubiquitiladas aparentemente no requieren todos los com-
plexes ESCRT para la degradación lisosomal en células de mamíferos, lo que
implica la existencia de víasde clasificación ESCRT específicas de carga 40,41.
Una pregunta interesante es si el correcto funcionamiento de la vía ESCRT es
necesario para eventos de fusión subsecuentes conlysosomes. En las células
cultivadas, el agotamiento de la proteína humana ESCRT-III VPS24 por
interferencia de ARN resulta en la acumulación de EGFR en MVBs42. Esto
fue interpretado como el resultado de la fusión inhibida entre los MVBs y
los lysosomes, lo que implica una función para el VPS24 de mamíferos que es
distinta de su papel en la biogénesis MVB y la clasificación. Otros datos
publicados también sugieren que un endoma debe estar adecuadamente
preparado para fusionarse con un lysosome 28,43. En sistemas libres de células, se
ha observado poca o ninguna fusión entre endosomas tempranos y endosomas
tardíos o lysosomes44,45.

Fusión endorosa con lysosomas

Aunque los eventos de fusión de lysosomas (particularmente aquellos con
fagosomas) fueron descritos en el trabajo temprano 2,3, requirió el
advenimiento de nuevas técnicas, incluyendo microscopía inmunoelectrón y
datos de ensayos de mezcla de contenido sin células, para proporcionar
buena evidencia de que los endosomas tardíos o los MVBs se fusionan
directamente con los lysosomes 45-48. Gran parte de esta fusión se produce en la
región yuxtanuclear de la célula porque los endosomas tardíos y los
litosomas se concentran cerca del centrode organización de microtúbulos.
Los orgánulos a menudo se observan muy cerca mediante microscopía
electrónica (FIG. 2a). Recientemente ha sido posible abordar cómo las
macromoléculas endocitosadas se entregan a los litosomas en las células
vivas.
Brillante et al. utilizó microscopía confocal de células vivas para mostrar
que la mezcla de contenido se produjo entre endosomas y lysosomes en
células fibroblastas normales de riñón de rata (NRK), y que la fusión
endorosa-lysosome tenía sev- borrar las características12. En primer lugar,
la mezcla de contenido sólo se observó cuando los orgánulos estaban en
contacto físico: no se observó el tráfico mediado por vesículas entre orgánulos.
En segundo lugar, los orgánulos se fusionan transitoriamente (eventos de besos)
o se someten a una fusión permanente. Los eventos de besos a menudo, pero no
siempre, preceden a la fusi completa. En tercer lugar, los contenidos a veces se
intercambiaban entre orgánulos por túbulos que se producían a partir de
cualquier tipo de orgánulo. Tubules puede facilitar el intercambio de contenidos
entre orgánulos tanto por besos como por eventos de fusión completos 12.
Utilizando microscopía correlativa de células vivas y electrones, las imágenes
se han capturado en el punto de fusión, que muestran contenido lisosomal
denso en electrones que se difusión en el lumen endosome 12 (FIG. 2b). (Para
intrigas matic anima- tions de fusión directa y eventos 'kiss-and-run', ver la
página web de interacciones lysosome-endosome.)
Los estudios con células vivas, junto con estudios en sistemas libres de
células y células cultivadas transfectadas, han establecido la maquinaria
proteica y los pasos mecanicistas que

naturaleza Comentarios | molecular celda biología volumen 8 | Agosto 2007 | 625

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a b c

fusión endosoma-lysosome. un | Los litosomas de núcleo

Figura 2 | Microscopía electrónica de
denso en de riñón de rata (NRK) fueron cargados con oro coloidal conjugado
células normales
con albúmina sérica bovina durante 4 h seguido de una persecución de 24 h. Los litosomas
(gris oscuro) se pueden comparar con un endoma tardío menos denso en el centro de la
imagen. b | Un litosoma electron-denso (punta de flecha) en una célula NRK se captura en el proceso de
fusión directa con un endoma electrones-lucente mediante imágenes correlativas de células vivas y
microscopía electrónica. El image mostrado es de una sección serial de 50 nm inmediatamente adyacente
a la que se muestra en Bright et al. (REF. 12). c | Microscopía electrónica de inmunogold de
lisosomas densos de una preparación hepática de rata (etiquetada con un marcador lisosomal catésina D;
oro de 15 nm). Los esteosomas se aislaron tras un ensayo in vitro de mezcla de contenido48. La
imagen muestra que varios lisosomas pueden formar archivos adjuntos robustos (flechas externas) con un
endosome (punta de flecha central). El endoma fue cargado con asialofetuina-avidina durante 6 minutos y
posteriormente fue inmuno-etiquetado con oro coloidal de 10 nm. La barra de escala en la parte
a es de 500 nm; las partes b y c son la misma escala que la parte a.

de endomas tardíos y
implicados en la fusión de endosomas tardíos con lysosomes51,52
lyso- algunos (FIG. 3). En común con otros eventos y el agotamiento de VPS18
de fusión en las vías secretas y endocíticas, la fusión resultó en un desperfectode orgánulo -
de endosomas tardíos y lysosomes requiere la
presencia de N-ethylmaleimide sensitive factor
(NSF), proteínas de apego NSF solubles (SNAPs) y
un pequeño GTPase de la familia Rab,
probablemente RAB7 (REF. 48). Al igual que otros
eventos de fusión, el proceso puede considerarse como
tener tres pasos secuenciales: el anclaje, la formación
de un co mplex trans-SNARE (receptor SNAP)que
se unea través de los dos orgánulos y la fusión de
membranas.

Tethering. Un requisito previo para la fusión del

orgánulo es el anclaje del organelle, mediante el
cual dos orgánulos forman vínculos entre sí que se
extienden a distancias de >25 nm de una
superficie de membrana determinada. La existencia
física de ataduras entre orgánulos endocíticos tardíos
estaba implícita por observaciones morfológicas de
estriaciones finas entre endosomas tardíos
adyacentes y litosomas en célulascultivadas46,47,49,
así como por la capacidad de mostrar
interacciones endorosas- gliosomas en sistemas
libres de células50 (FIG. 2c). No se ha establecido la
composición de los amarres, pero el complejo de
fusión homotípica de mamíferos y clasificación de
proteínas vacuole (HOPS), que es reclutado por
RAB7, es un buen candidato (FIG. 3a). La
sobreexpresión de los componentes complejos hops
mam-malienses VPS18 y VPS39 causó agrupación

Cabe señalar que el tethering es un proceso separado del que
provoca la acumulación de endoscopios tardíos y lysosomes en la región
yuxtanuclear alrededor del centro de organización de microtúbulos, aunque esto
también podría aumentar la eficiencia de la entrega de macromoléculas
endocitosadas a los ly sosomes. Yxtanuclear accumu- lación refleja el
equilibrio del movimiento bidireccional de largo alcance en microtúbulos y
movimiento de corto alcance en filamentos de actina. Este movimiento está
mediado por proteínas motoras y proteínas que son necesarias para el accesorio
óptimo de estos motores a orgánulos endocíticos tardíos, incluyendo la
proteína lisosomal (RILP)56 y BLOC3 (REF. 57) que interactúa con rab7.
Formación compleja Trans-SNARE. Después del anclaje, debe formarse un
complejo trans-SNARE en el que la hélice ~16 vueltas de un SNARE envuelve
Mutante dominante negativo sion52. Sin embargo, está claro que estos
Una proteína codificada por componentes no son específicos para la fusión
un gen mutado que heterotípica tardía endomasoma-lysosome y que
previene la función de la también funcionan en fusión endorosa homotípica
proteína de tipo salvaje incluso en la primera parte de la vía endocítica 53.
La sobreexpresión de RAB7 y algunostírs afeccionar
en las células en RAB7 también puede causar agrupación de
las que se expresan al orgánulos endocíticos tardíos 54,55, y los mutantes
dominantes-negativos de RAB7 causan dispersión54.
mismo tiempo las
proteínas mutantes y de
tipo salvaje.
helices similares en otros tres SNAREs para formar
un paquete paralelo de cuatro hélices llamado
SNAREpin, que es esencial para la
fusióndemembrana 58. El centro del paquete de
cuatro hélices contiene una capa iónica que
comprende un residuo de arginina (R) y tres
glutaminas (Q), cada uno aportado por un SNARE
diferente. Estos residuos se denominan R-SNARE
y Qa-, Qb-yQc- SNAREs, respectivamente59,60. Un
complejo func- tional trans-SNARE debe contener
una hélice de cada tipo61. Los experimentos de
bloqueo de funciones mediados por anticuerpos en
sistemas libres de células han proporcionado la
evidencia más convincente de que los mismos Qa,
Qb y Qc
Los SNAREs —syntaxin-7, VTI1B (VPS10 tail
interactor- 1B) y syntaxin-8, respectivamente, son
necesarios tanto para fusiones homotípicas endorosas
tardías como para fusiones heterotípicas tardías-
fusiones lysosome 62–64. Lo que distingue los dos
eventos de fusión es el R-SNARE, que es la proteína
de membrana asociada a la vesícula-8 (VAMP8) para
la fusión endorosa tardía homotípica, y vamp7
(también conocido como
 a Tethering y acoplamiento b trampa ensamblaje c fusión
Endomas tardíos
Fusión homotípica
Fusión heterotípica
Endomas tardíos
RAB7Lumenal
NsfCa Lumenal Ca2+ fusión directa entre los dos orgánulos es consistente
2+
chasquearcalmodulina Orgánulo Híbrido
condensación
lisosoma recuperación
Figura 3 | Modelos esquemáticos de fusión heterotípica tardía endomasomas-
lysosome y fusión homotípica endorosa tardía. un | El pequeño GTPase
RAB7, posiblemente en conjunto con el complejo de fusión homotípica
de mamíferos y la clasificación de proteínas de vacuole (HOPS),
se cree que tether endomas y lysosomes (o endomas con endomas).
La fusión de endosomas y lysomas tardíos requiere N-etillmaleimida
factor sensible (NSF) y proteínas de apego solubles NSF (SNAPs). b
| La formación compleja trans-SNARE (receptor SNAP)
sintaxisin-7, VTI1B (Vps10 tail interactor-1B) y syntaxin-8 tanto en
fusiones homotípicas endorosas tardías como en fusiones heterotípicas tardías
de endomas.lysosome. Mientras que la proteína de membrana asociada a la
vesícula-8 (VAMP8) es necesaria para la fusión endorosa tardía homotípica,
VAMP7 es necesaria para fusiones heterotípicas tardías endomas- lysosomas.
Se muestran dos complejos combinatoriales trans-SNARE diferentes.
c | El lanzamiento de lumenal Ca2+ (que se muestra sólo para
heterotípica) conduce a la fusión bicapa fosfolípida.
lysosomes de los orgánulos híbridos requiere la pérdida de receptores de
manosa-6-fosfato, recuperación SNARE y condensación de contenido lumenal
para producir lysomas de núcleo denso. Cabe señalar que los cinco
ARN SN mostrados se han observado tanto en endomas tardíos como
en lysosomes. La liberación del lumenal Ca2+,que es necesaria para la
fusión por membrana entreendosomas y lysosomes, probablemente es
promovida por la formación compleja trans-SNARE, como se ha
descrito para la fusión homónoma vacuole en levadura133.
En el caso de la fusión heterotípica de endosomas
con lysosomas, hay evidencia de ensayos de mezcla
de contenido libre de células que dicen que la
fusión de membranas depende de Ca2+ y
calmodulina 13. Ca2+ se libera del lúmenes de los
Amarres Trampas: orgánulos fusionadores tarde en la vía
VAMP8 VAMP7 mecanicista de la fusión (FIG. 3c).
Sintaxisin-7 VTI1B
Sintaxisin-8
Orgánulos híbridos. El producto inmediato de la
fusión directa y completa entre un endoma tardío y
un lisosoma es un orgánulo híbrido que contiene un
com- plemento completo de enzimas lisosomales pero
todavía contiene algunos MPRs. Este orgánulo
híbrido es el sitio de degradación de las
macromoléculas endocitosadas. La demostración de
con la idea de que los lisosomas son,
fundamentalmente, férulas- gránulos de edad para
enzimas lisosomales maduras, y que periódicamente
se fusionan con endosomas tardíos para formar un
compartimento, a veces conocido como un 'estómago
celular', en el que la degradación ocurre66. No esin
hielo que el lyso- algunos se asemejan
morfológicamente a los gránulos secretos regulados
66
, y su contenido bien podría ser menos acuoso que el
citoplasma o el lúmenes del endoma. También se sabe
que los lysosomas se comportan como orgánulos
densos después de ultracentrifugación isopycnic en
una variedad de gradientes de densidad
utilizados para el fraccionamiento subcelular. Los
orgánulos híbridos tienen una densidad intermedia
entre los de los lysosomas y los endomas tardíos 48.
requiere
Reforma de lysosomas a partir de híbridos. El
fusidirecto y completode los endosomas tardíos con
lysosomas consumiría ambos orgánulos si no se
produjera ninguna recuperación pro-cess. Por lo
tanto, la reforma lisosoma de los orgánulos híbridos
es necesaria y requiere condensación de contenido
y un proceso de recuperación de membrana para
la fusión eliminar las proteínas de membrana endosomal y
reciclar SNAREs. Los lysosomes se pueden
La reforma de los
reformar a partir de orgánulos híbridos en un
sistema libre de celdas, en el que la
condensación de contenido requiere un ATPase de
bombeo de protones y ca2+ lumenal (REF. 13). En un
estudio de endocitosis de asialoglycoprotein y
degradación en hepatocitos de rata, también se
sugirió que se requiere actividad fosfoinositida-3-
quinasa para la reforma de los lysosomes densos de
orgánulos híbridos 67. En experimentos de células
vivas fol-

liposoma (orgánulos o macromoléculas) en un gradiente de densidad algunas vías retrógradas de tráfico de membranas que
Una vesícula lipídica artificial

que encierra un hasta alcanzar un equilibrio, de modo que la entregan carga de endomas a la redtrans-Golgi.
densidad de la muestra es la misma que la
interior acuoso.
parte del gradiente de densidad en la que se
Centrifugación equilibra.

isopycnic Complejo retromer

ultracentrígena Un complejo de proteínas citoplasmáticas que se requieren para
de muestras
VAMP insensible al fusión endomasas y lysosome, pequeñas vesiculares
tétanos-neurotoxina se han observado estructuras tubulares en ciernes
(TI-VAMP)
de orgánulos híbridos, consistentes con un
o synaptobrevina-like-
procesode reforma- ation 12. También se
1 (SYBL1)) para
observaron vesículas positivas vamp7 en ciernes a
fusiones heterotípicas
partir de compart- mentos endocíticos terminales
tardías endomas-
en un estudio de células vivas de orgánulos que
lysosome 64 (FIG. 3b).
contienen la proteína Niemann-Pick C1 68.
Como se describe a
continuación y en BOX En general, el proceso de reforma del lysosome
será uno de maduración y, por definición, es sólo
2, VAMP7 se
en el punto en el que no se detecta ningún MPR
encuentra en
en los orgánulos que se pueden llamar lysosomes.
numerosos complejos
Uno de los candidatos a la maquinaria que media
SNARE com-
la recuperación de membranas de los orgánulos
binatoriales, varios de
híbridos es el complejo retromer. Este complejo
los cuales involucran
fue descrito por primera vez en levadura como un
lysosomes. VAMP7 es
complejo de Vps5, Vps17, Vps26, Vps29 y Vps35. El
un R-SNARE inusual
agotamiento del orto- logue Vps26 en células de
porque tiene una
mamíferos conduce a un fenotipo en el que hay
extensión de terminal
algo de hinchazón y vacuolarización de
N relativamente larga
compartimentos lisosomales 15,69.
(~110 aminoácidos)
que podría funcionar
como un dominio
regulador. Este
llamado dominio
longin es necesario
para la entrega de
VAMP7 a
compartimentos
endocíticos tardíos
como resultado de la
vinculación a AP3
(REF. 65).

Fusión de membrana.
No se ha
demostrado si la
formación compleja
trans- SNARE por sí
sola es suficiente para
dar lugar a la fusión
de bicapas fosfolípidos
entre membranas
endorosas y glisomas.
Loscomplejos Trans-
SNARE pueden
causar fusión de
liposomas, pero se han
notificado diferencias
cinéticas con
reacciones de fusión
biológica61.
e N-ethylmaleimide (SNARE) en el complejo trans-SNARE. Estas proteínas se denominan R-SNARE y Qa-, Qb- y Qc-SNAREs, respectivamente.
uno de Qa Qb y Qc. Los helices Qb y qc pueden ser aportados por SNAREs separados, pero las proteínas asociadas al sinaptosoma de 25 kDa y de 23 kDa (SNAP25 y SNAP2

Qa Qb QC Qb/c Fusión de membranas y función propuesta

SNARE SNARE SNARE SNARE
Sintaxi VTI1B Sintaxisin Lysosome–endosome tardío 64.
sin-7 -8
Sintaxi Vti1 Sintaxisin Macropinosoma fusión (Dictyostelium
sin-7 -8 discoideum)95.
Sintaxi SNAP23 Lysosome–membrana plasmática77. Función en
sin-4 reparación de membranas, crecimiento de
neurites 130 y exocitosis de gránulos 81,82.
Sintaxi SNAP23 Vesícula–membrana plasmática apical131.
sin-3
Sintaxi SNAP25 Vesícula-membrana plasmática neurite65, 132
.
sin-1 Función en crecimiento de neurites.

Vti interactor de cola VPS10.

Defectos en la reforma lysosome. Se ha sugerido ese el

Syntaxin-4 contiene un motivo Qa-SNARE y
ausencia de el lisosomal transportador de catión
SNAP23 contiene un motivo Qb y qc unido
mucolipina-1 (REF. 70) en células de pacientes con el
por un vinculador flexible (BOX 2). La exocitosis
autosómico recesivo enfermedad mucolipidosis tipo
lysosome está regulada por el sensor Ca2+
Iv (ML IV), y su cup-5 ortopágeno en Caenorhabditis
synaptotagmin-VII, que puede ser necesaria para el
elegans, resulta en la falta de reforma de los
control temporal y geométrico del poro de fusión
lysosomes de híbridos que por lo tanto causa
que se forma en la superficie celular. Synaptotagmin-
enfermedades71. Esto podría ocurrir porque
VII restringe tanto la cinética como la extensión de
intraorganellar Ca2+ es Obligatorio para el
Ca2+- fusión dependiente 76.
condensadores- ación de contenido cuando
Lisosomas volver a formarse De híbrido Organelos.
Lysosomes secretos. Algunos tipos de células contienen
Sin embargo, la pérdida de mucolipina-1 o CUP-5
compartimentos lisosomalesespecializados que
también podría causar defectos en la recuperación de
almacenanproteínas secretas hesized recientemente
componentes de híbridos endomas-lysosomas,
sintetizadas, que se conocen como lisosomas
posiblemente por inhib- iting la formación de
secretores u orgánulos relacionados con el
vesículas de transporte específicas o otros
lisosoma. Estos incluyen melanomas, compartimentos
interMedia. En consonancia con esta hipótesis, el
complejosde histocompatibilidad mayor clase II 78,
tráfico defectuoso de lactosilceramida, un
gránulos basófilos, gránulos azurófilos neutrófilos,
glicosfingolipid, De tarde endocítico Organelos Para
gránulos densos en plaquetas, gránulos secretos de
el complejo golgi en las células del ML IV puede ser
mastocelular, gránulos específicos de eosinófilos y
rescatado por el
Vacuola supervivencia y crecimiento. expresión de una forma correctamente localizada de
parasitofórica mucolipina-1 con un poro cation intacto 72.
Melanosome
Un orgánulo unido a
Un orgánulo unido a membrana que contiene melanina Fusión de esteosoma con la membrana
membrana que y se forma en melanocitos.
plasmática
contiene un Basófilo granule
En los últimos años, se ha reconocido que en muchos
tipos de células, los litosomas convencionales podrían
parásito intracelular; la Un gránulo en glóbulos blancos que mancha con tintes fusionarse con la membrana plasmática en respuesta
membrana que rodea el
basófilos.
a un aumento en la concentración- ción de ca
orgánulo se deriva de la citosósica2 + que desencadena la exocitosis lysosome73.
Sinapsis inmunológica Esta exocitosis lysosome proporciona la membrana
es
célula huésped pero
Un área de contacto especializada entre un linfocito T y una
adicional para la reparación de heridas de membrana
modificada por célula que presenta antígenos. plasmática 74 y permite la mezcla de una vacuola
el parásito para parasitoforosa; por ejemplo, durante la invasión de
células por Trypanosoma cruzi75.
facilitar su
Información sobre el gránulos citotóxicos linfocitos T líticos 79. En los
mecanismo. Al igual linfocitos T citotóxicos, los gránulos líticos son los
que la fusión de únicos organelles de tipo citotóxico presentes y
lysosomas con cumplen una doble función: actúan como el
endosomas, la fusión almacén de hidrolasas ácidas para la digestión de
con la membrana macromoléculas endocitosadas, y contienen
plasmática también productos secretos, como la perforina, que
está controlada por funcionan en el pH neutro que se encuentra
SNAREs. La fusión de cuando los gránulos se fusionan con la membrana
lysosomas con la plasmática. En otros tipos de células (por ejemplo,
membrana plasmática melanocitos), los orgánulos relacionados con el
en células NRK lysosoma existen junto con los lysosomes
requiere el R-SNARE convencionales y su bigénesis es distinta pero está
VAMP7. En esta relacionada con la de los lysosomas.
situación, VAMP7 En los linfocitos T citotóxicos, los gránulos
forma un complejo líticos se entregan a la sinapsis inmunológica que se
trans- SNARE con la forma entre el linfocito y la célula objetivo. Tras el
sintaxis Q-SNAREs reconocimiento de un antígeno extraño, el linfocito
syntaxin-4 y proteína centro- algunos polarizan hacia la célula objetivo
asociada al y hace contacto con el interior de la membrana
sinaptosoma de 23 plasmática linfocito80. Los lysosomes secretos son
kDa (SNAP23)77. entonces transported a lo largo de microtúbulos
hacia el centrosoma en la sinapsis inmuno-lógica
(FIG. 4). La maquinaria que se requiere
 Sinapsis
Linfocito T citotóxico inmunol que presenta
Célula
ógica antígenos
microtúbulo

+ pSMAC
Oreja endorosa
Secretor lysosome

FasL Fas
+ Granzymes
endocitosis Perforin
–
Endomas tardíos
–
Centrio–les
cSMAC
polarización
Reguladores conocidos de la fusión
Golgi
núcleo
Munc-13-4 RAB27A
pSMAC

Figura 4 | Esteosomas secretos en linfocitos citotóxicos de T. En los linfocitos T citotóxicos, los litosomas tienen un
doble propósito: pueden degradar el material endocitosado y también pueden fusionarse con
lamembrana plas ma en la sinapsis inmunológica para liberar su contenido de gránulos
lícitos lumenales. La fusión del lysosome ocurre cuando el receptor de células T reconoce el antígeno en
una célula que presenta antígenos. La activación de la célula T hace que el centromere se mueva
a la membrana plasmática, llevando los lysomas secretos (que están unidos a microtúbulos) a
una proximidad cercana con la membrana plasmática para ayudar a la fusión organelle-plasma-
membrana. Los reguladores conocidos del proceso de fusión son el pequeño GTPase RAB27A y su efector
Munc-13-4. La fusión del lysosome se produce junto al complejo central de activación supra-molecular
(cSMAC), donde
Los receptores de células T están involucrados en el reconocimiento de células objetivo.
cSMAC está rodeado de moléculas de adhesión celular que forman el periférico (p)SMAC. Los

gránulos líticos que inducen la apoptosis de la célula que presenta antígenos contienen ligando
Fas ligando (FasL)unido a la membrana, la proteína que forma el poro perforina y proteasas
(granzymes).

crecimiento, proteínas de coagulación y la molécula de

para la fusión de estos gránulos líticos con la
adhesión P-selectina. membrana plasmática se ha estudiado más
ampliamente que la exocitosis de cualquier otro lioma
Copa felomal secreto, sobre todo debido a la disponibilidad de
Una estructura en forma de taza, formada principalmente por la células de pacientes con mutaciones en los genes
necesarios para el procesode ti. RAB27A se ha
invaginación de la membrana plasmática durante las implicado en el acoplamiento de gránulos líticos a la
primeras etapas de la absorción fagocítica de membrana plasmática, y su efector Munc-13-4 se
ha implicado en un paso de cebado necesario para
partículas por células. Membrana que se origina en otros
la fusión, aunque las proteínas SNARE que se
orgánulos se puede añadir a ella.
requieren aún no han sido identificadas. Se ha
propuesto que los orgánulos de eosinófilos y neutros
relacionados con el liosoma - phils requieren VAMP7
para la liberación de gránulos81,82 pero, en el caso de
plaquetas, el estudio de células de ratones deficientes
vamp8 ha implicado VAMP8 como un R-SNARE
necesario para la fusión de gránulos densos, gránulos
Gránulo alfa alfa y lyso- algunos con la membrana plasmática 83.
Un gránulo plaquetario que Es posible que los SNAREs involucrados puedan
varios
contiene ser específicos del tipo de célula.
factores de Fusión de lysosome con fagosomas
La fagocitosis es un
proceso esencial por el Ahora es ampliamente aceptado que el fagoma
cual las células de 'madura' por múltiples interacciones transitorias con
tamaño especial com- partments endosomales, incluyendo lisosomas,
envuelven patógenos para formar un orgánulo híbrido llamado
invasores, células faagolísoma84. La función principal del fagosoma es
apoptóticas y otras degradar la partícula fago-citosada. Reticulum
partículas extrañas membrane endoplasmático también podría
que tienen un incorporarse al fagoma recién formado, pero esto es
diámetro de 0,5 m. controvertido85. Se ha sug- gested que la
Esto ocurre a menudo membrana adicional que se requiere para la
por un mecanismo de formación de tazas fleocómicas (cuando hay una
cremallera, en el que alta carga de partículas fagocíticas) podría
los pseudopodes derivarse de lisosomas que se fusionan con la
(protuberancias membrana plasmática por un proceso que puede
accionadas por actina ser similar a la calcio- y sinaptotagmina -VII-
de la membrana exocitosis dependiente de liso- algunos86. In
plasmática) envuelven vitro,los fagosomas son capaces de fusionarse con
a un objetivo por endosomas tempranos y tardíos y con lysosomes 87,88,
interacciones repetidas como lo demuestran varios ensayos diferentes que
entre receptores y demuestran estas capacidades87-90.
ligandos. La fagocitosis
desencadena la Mecanismos de amarre y acoplamiento. La
activación de vías de complejidad de la maduración fagorosa ha hecho
señalización difícil diseccionar los eventos moleculares precisos
transmembrana multi- que conducen a fagoliso- algunos biogénesis, pero
ple que conducen a la se sabe que procede a través de teth- ering y
reorganización del pasos de acoplamiento89. Se han notificado los
citoesqueleto actin y la requisitos para RAB5 (REF. 87),RAB7 y su efector
formación de un RILP91,y el actofilamentoso en92. Se ha demostrado
compartimento que el paso de anclaje requiere polimerización de
intracelular sellado — actina y calmodu- lin89. Las células que están
el fagosoma. agotadas de proteína de membrana asociada a
lisosomal-1 (LAMP1) y LAMP2 muestran

Partícula > 0,5 m o patógeno fagocitosis
Membrana Membrana plasmática
endocitosis
1 2
Fagoma temprano
Autofagosome
Endoma temprano
4 fusión tiene Similitudes con homotípico fusión
3 vacuole, y los SNAREs Vam3 y Vti1 (para que los
Endomas tardíos
Fagoma maduro
5
orgánulo híbrido o faagolísoma
lisosoma
lisosoma
Figura 5 | Supervivencia patógena evitando los lysosomas. Maduración
fagorosa
incluye múltiples interacciones con compartimentos endocíticos que
eventualmente dan lugar a un fagoma maduro. Este organelle fusiona con
lysosomes para formar un orgánulo similar a un orgánulo híbrido, a saber, el
fagosoma, donde se produce la digestión de la partícula fagocítica. Los
patógenos han desarrollado múltiples estrategias para evitar el parto y/o
la posterior degradación en el fagosoma. Estos incluyen lisis de la
membrana phagosomal y escape en el citosol (1) con posterior
evitación de la autofagia (2); un retraso en la maduración felomal
ayuda al desarrollo del nicho replicativo (3); la subversión de la vía
fagocítica (4); y la supervivencia en el duro entorno faagolysosomal (5).
maduración fagorosa anormal93;los fagosomas no
reclutan RAB7 y no se fusionan con lysosomas, lo
que es posiblemente debido a un movimiento
deteriorado a lo largo de microtúbulos. Durante la
fusión fagosoma-lysosome normal, algunos
fusiencendidos se producen por las extensiones
tubulares delgadas91 y los eventos posteriores al
acoplamiento requieren Ca2+ (REF. 89). Estas
características son similares a las que se producen
durante la fusión endomasoma-lysosome tardía.
Se desconoce la identidad del complejo SNARE
para la fusión fagosoma-lysosome, aunque syntaxin-
7 se ha implicado94.
Durante la fagocitosis, a menudo se forman
macropinosomas, y algunas formas de fagocitosis que
no utilizan cremallera se han argumentado como
similares a la macro-
Macropinosoma
menudo de ~0,5 m de diámetro o más grande. Se forma
Un compartimento unido a durante la absorción de fase fluida, particularmente en
membrana (orgánulo), a
regiones de la célula donde se produce el volante
enzimas. Es importante en muchos procesos
fisiológicos 96, incluyendo la respuesta a la inanición,
el crecimiento celular y la inmunidad innata; un
ejemplo es la eliminación de bacterias patógenas
cuando han sido liberadas después de la endocitosis
por célulasno fagocíticas 97 (ver más abajo).
Mecanismos de fusión. en autofagia doble membrana
Vesículas llamado autofagosomas secuestrar parte de el
cyto- plasma y entonces fusible con Lisosomas Para
forma híbrido como orgánulos llamados autolitosomas
(FIG. 1b). en S. cerevisiae, en el que los mecanismos
moleculares de la autofagia son mejor entendido
autofagosomas fusible con el vacuola. el mecanismo de
probables ortoólogos mamíferos son sintaxisin-7 y
VTI1B, respectivamente) han sido implicados en el
fusión de autofagosomas con el levadura vacuola98,99.
Los miembros del complejo HOPS también hanen
mostrado Para ser importante en la fusión
autofagosome-vacuole en S. cerevisiae y la fusión
autofagosoma-lysosoma en Drosophila melanogaster100–
102
. levadura vacuola homotípica fusión y
autofagosome-vacuole fusión Además requerir a
complejo de Dos proteínas Mon1 (monensin
sensibilidad-1) y Ccz1 (calcio cafeína zinc
sensibilidad-1), pero el función de estos proteínas es
no claro 103,104. en mam-
células malienses, RAB7 se ha implicado en la fusión de
autofagosomas con lysosomes105. La fusión se reduce
en las células que se agotan de LAMP1 y LAMP2,
aunque el mecanismo detrás de este efecto no está
infra-puesto 106. Al menos algunas otras proteínas que
se requieren para la fusión autofagosoma-lysosoma
en células de mamíferos son probablemente las
mismas que las necesarias para la fusión
endosoma tardío- lysosome.
que Evasión de la fusión lysosome por microbios
Varios microorganismos patógenos necesitan
alcanzar un compartimento intracelular o el
citoplasma de una célula objetivo para su
supervivencia y replicación. Sin embargo, la entrada
celular generalmente requiere el uso de vías
endocíticas y fagocíticas que terminan en fusión con
lysosomes. Por lo tanto, la supervivencia del
microorganismo implica evitar el litosoma o, en el
caso de las especies de Leishmania, sobrevivir al
duro entorno del lysosoma mismo. Los patógenos
utilizan varias estrategias para ayudar a su
supervivencia intracelular 107, 108 (FIG. 5).
Prevención de la fusión de lysosomas. Diferentes
mecanismos han evolucionado por los cuales los
patógenos fagocitos pueden prevenir la biogénesis
fagolisoma. Uno de los más sencillos
de membrana plasmática.
 ácido polisiálico vinculado a -2,8
Un homopolímero lineal de
N -monómeros de ácido
neuraminico de acetil que
están vinculados por
-2,8 enlaces cetosídicos.
pinocitosis91. En Dictyostelium discoideum,en elque
los macropinosomas se fusionan con vesículas que
contienen enzimas lisosomales, se ha identificado
un complejo trans-SNARE que comprende syntaxin-7,
syntaxin-8, Vti1 y Vamp7 como necesario para
eventos de fusión homotípicos y heterotípicos en la
vía macropinocítica 95.
Fusión de lysosome con autofagosomas
Autofagia — o para ser más específico,
macroautofagia
— es un mecanismo importante para la degradación
de los componentes citoplasmáticos, incluidos los
orgánulos, y durante mucho tiempo se ha sabido que
implica la degradación por lisosomal
ejemplos es el utilizado por Escherichia coli K1, que
trans-citos a través de las células endoteliales
microvasculares cerebrales en un vacuole cerrado
que no se fusiona con los lysosomas109. El único
determinante bacteriano que previene la fusión del
lysosome es la cápsula K1, que consiste en
cadenas largas de
 ácido polisiálico vinculado a -2,8. Sin embargo, no está
claro cómo esta cápsula previene la maduración y
fusión con lysosomas cuando está presente en el
lúmenes de vacuole.
Retraso de la biogénesis faagolisoma. El retraso
de la biogénesis fagolísoma por los patógenos
Salmonella enterica y Mycobacterium tuberculosis
ha sido
C omentarios

Ambos
110.111.
organismos pro- duce proteínas
Conclusiones y direcciones futuras
como fosfatasas fosfatiidas fosfoinositidas que alteran
Ahora hay pruebas convincentes de que los
las concentraciones de fosfato fosfoinositide en la
lysosomas pueden fusionarse con endosomas
membrana fagosoma y por lo tanto retardan el fago-
tardíos, la membrana plasmática, fagomas y
alguna maduración112–115. En el caso de la salmonela
autofagosomas. Los eventos de besos y la fusión
fagocitosida enterica serovar Typhimurium, la
directa con endosomas tardíos son los medios por
maduración fagorosa se retrasa y se previene la
los cuales las macromoléculas endocitos y recién
fusión con lysosomas como resultado de la
sintetizadas se entregan a los lysosomas. Tras la fusión,
modulación de la red de proteínas Rab que se
que se logra tras la formación de un
reclutan para el fagosoma116.
complejotrans-SNARE específico, el organelle
híbrido resultante es el sitio de degradación de las
Escapar del fagosoma. Algunos patógenos,
macromoléculas endocitosadas. Los lysosomes se
incluyen- ing ejemplos de los géneros Listeria,
vuelven a formar a partir del orgánulo híbrido
Shigella y Rickettsia,escapan rápidamente de su
mediante un proceso de matura- tion. Aunque se
vacuole intracelular degradando la membrana
han establecido las características esenciales de la
felomal y escapando hacia el citosol. Listeria
fusión lysosoma con endosomas tardíos y la
monocytogenes ha sido stud-ied extensamente117 y
membrana plasmática, la regulación de estos
su escape del fagosoma se media, en parte, por la
procesos, y de la fusión lysosome con otros
secreción de la toxina formando poros listeriolysin
orgánulos, está lejos de ser clara. Hay un
O118. Listeriolysin O ralentiza la matura- ción del
desconocimiento sobre las vías de señalización que
compartimento phagosomal causandora- ciones de
desencadenan la fusión del lysosome con la membrana
altetanto en el pH vacuolar como enla
plasmática en respuesta al daño de la membrana y
concentraciónCa2+ 119, dando así a la bacteria
la afluencia de Ca2+. Poco se sabe acerca de lo que
tiempo para escapar al citosol120. Escapar de un
'prepara' un endo- algunos, autofagosome o fagosoma
compartimento fenosomal en el citosol no es un
para la fusión con un lysosoma. También hay muchos
método a prueba de fallos para evitar el lisosoma
detalles mecanicistas para añadir a lo que
debido a la posibilidad de la autofagia, que actúa
actualmente entendemos sobre el proceso de
como parte del sistema de defensa innata contra
fusión lisosomal, en particular con respecto a la
patógenos invasores 97.121. Por ejemplo, Streptococcus
fusión con autofagosomas y fagosomas.
pyogenes es asesinado por la autofagia por
lysosomes97,pero sobrevive y se multiplica en células Lasations implílicas de una mayor comprensión
deficientes en autofagia 97. del lyso- alguna fusión son considerables. Por
ejemplo, sería de gran beneficio tener el conocimiento
M. tuberculosis, que normalmente reside en un fago-
para superar la incapacidad de los lysosomes para
algunos, también puede ser asesinado por la
fusionarse con vacuoles que contienen
estimulación de la vía de autofagia 122.
microorganismos que sobreviven y se multiplican en
Algunos patógenos pueden evitar la detección
un nicho endocíticopodrido. Al encontrar mejores
autofágica. Un ejemplo es L. monocytogenes, que
formas de regular las vías autofágicas y la formación
sólo se auto-fagocitos después de la liberación de
de autofago- lisosomas, proteínas citosólicas
fagosomas si se hace metabólicamente inactivo por
propensas a agregados que causan una gama de
tratamiento de cloranfenicol- ment123. Shigella flexneri
proteinopatías incluyendo la enfermedad de
también evade la elivery autofagic d al lisosoma
Huntington y la enfermedad de Parkinson podrían
por un mecanismo que depende de la secreción
eliminarse 127. El reconocimiento de que los lysomas
de IcsB,que camufla la bacteria del sistemade defensa
maduros deben considerarse orgánulos de
huésped autofágica 124.125. Otros patógenos,
almacenamiento para enzimas degradantes, con la
incluyendo Legionella pneumophila, Coxiella brunetti
hidrólisis de los sustratos que se producen en
y Brucella abortus, pueden residir en un autofago-
orgánulos híbridos, subraya la importancia de
compartimento somal donde se multiplican, pero
entender los orgánulos híbridos ho w. Esto nos
los mecanismos precisos por los cuales retrasan la
permitirá lograr una comprensión apuesta-ter de
progresión a un autolosoma no están claros126.
la función del lysosome, ya sea en las tareas
convencionales de proteína, lípidos y degradación de
carbohidratos 128 después de la endocitosis, la
autofagia y la fagocitosis, o en los roles
recientemente reconocidos como la muerte celular
necrótica 129 y la reparación de la superficie celular.

Cooperación
de la
Hubbard, A. Endosomas. Tendencias
Bioquímica. La ciencia. 8, 245-250 (1983).
1. de Duve, C. El lysosome cumple Internacional en 6. Mellman, yo. Endocitosis y clasificación
cincuenta años. Célula natural Biol. Investigación Médica y molecular. Annu. Reverendo Cell Dev. Biol. 12,
7, 847-849 (2005). 575-625 (1996).
Química: Lysosomes (J. & A. Churchill, 7. Mukherjee, S., Ghosh, R. N. & Maxfield, F. R.
Una mirada perceptiva y retrospectiva al descubrimiento de Londres, 1963).
lysosomas. Endocitosis. Physiol. Rev. 77, 759–803 (1997).
4. Mellman, I., Fuchs, R. & Helenius, A. 8. Storrie,B. & Desjardins, M. La biogénesis de los
2. Holtzman, E. Lysosomes (Plenum, Nueva York,
1989). Acidificación de las vías endocíticas y un beso y un
lysosomas: ¿es
exocíticas. Annu. Bioquímica . 55, 663-700
3. De Reuck, A. V. S. & Cameron, M. P. (eds).
(1986). proceso de beso y correr, fusión
Fundación Ciba para la Promoción 5. Helenius, A., Mellman, I., Wall, D. & continua y fisión? Bioessays 18, 895–903
630 | Agosto 2007 | volumen 8 www.nature.com/reviews/molcellbio
© 2007 naturaleza editorial grupo
 (1996).
9. Luzio, J. P. et al. Fusión lysosoma-endorosa y 14. Ghosh, P., Dahms, N. M. & Kornfeld, S.
biogénesis lysosoma. J. Cell Sci. 113, 1515-
1524 (2000). Receptores de la nariz de mano de 6
fosfatos: nuevos giros en la historia.
10. Mullins, C. & Bonifacino, J. S. La maquinaria Mol. Biol celular. 4, 202–212 (2003).

molecular para la biogénesis 15. Marinero, M. N. La clasificación endosomal

lysosome. Bioessays 23, 333–343 (2001).
selectiva de carga para la
11. Luzio, J. P. et al. Dinámica de membrana y la recuperación del Golgi requiere retromer. J. Cell
biogénesis de los lysosomas. El mol. Biol. 165, 111-122 (2004).
Membr. Biol. 20, 141-154 (2003). 16. Doray, B., Ghosh, P., Griffith, J., Geuze,H. J. &
12. Brillante, N. A., Gratian, M. J. & Luzio,J. P. Kornfeld, S. Cooperación de GGAs y AP-1 en mprs
Entrega endocítica a lysosomas mediados por
de embalaje en la red trans-Golgi.
eventos simultáneos de fusión ybesos Ciencia 297, 1700–1703 (2002).
en células vivas. Curr. Biol. 15, 360-365 17. Bonifacino, J. S. Las proteínas GGA:
(2005). adaptadores en movimiento. Mol. Biol
Un estudio que muestra que la transferencia de celular. 5, 23-32
(2004).
entre endosomas y lysosomas se
contenidos
18. Peden, A. A. et al. La localización del
produce besando eventos y fusión directa complejo adaptador AP-3 define un
en células vivas.
nuevo sitio de salida endosomal
13. Pryor, P. R., Mullock, B. M., Brillante, N. A., para proteínas de membrana lisosomal. J. Cell
Gray, S. R. & Luzio, J. P. El papel del Biol. 164, 1065-1076 (2004).
intraorganellar Ca2+ en
fusión heterotípica endomas-lysosome tardía y en la 19. Ihrke,G., Kyttala,A., Russell, M. R., Rous, B. A. &

reforma de los lysosomes delos orgánulos híbridos. ,

Luzio J. P. Uso diferencial de dos vías mediadas
J. Biol celular. 149, 1053-1062
(2000). por AP-3 mediante proteínas de
membrana lisosomal. Tráfico 5, 946-962
(2004).

naturaleza Comentarios | molecular celda biología volumen 8 | Agosto 2007 | 631

© 2007 naturaleza editorial grupo

La deficiencia compleja
20. Salazar, G. et al.
BLOC-1altera la focalización
de las cargas complejas de
proteínas adaptadoras-3. Biol. Celda 17,
4014–4026 (2006).
21. Di Pietro, S.M. et al. BLOC-1 interactúa con BLOC-2
y el complejo AP-3 para facilitar el tráfico
de proteínas en endomas. El mol. Biol. Celda
17, 4027–4038 (2006).
22. Pak, Y., Glowacka, W. K., Bruce, M.C., Pham, N. &
Rotin, D. Transporte de LAPTM5 a lysosomes
requiere asociación con la ligasa
de ubiquitina Nedd4, pero no la ubiquitinación
LAPTM5. J. Cell Biol. 175, 631-645 (2006).
23. Haglund, K. et al. La monoubiquitinación
múltiple de rtks es
suficiente para su endocitosis y
degradación. Célula natural Biol. 5, 461-466
(2003).
24. Huang, F., Kirkpatrick, D., Jiang, X., Gygi,S. &
Sorkin, A. Regulación diferencial del
receptor EGF
internalización ydegradación por multiubiquitinación
dentro del dominio quinasa. Celda 21,737–748 (2006).
25. Murphy, R. F. Modelos de maduración
biogénesis endorosa
y lysosome.
Tendencias Cell Biol. 1, 77-82 (1991).
26. Stoorvogel, W., Strous, G. J., Geuze, H. J.,
Oorschot, V. & Schwartz, A. L. Los endosomas
tardíos derivan de endosomas tempranos por
maduración. Celda 65, 417–427 (1991).
27. Gu, F. & Gruenberg, J. Biogénesis de intermedios
de transporte en la vía
endocítica. FEBS Lett. 452, 61-66
(1999).
,
28. Pista, J., Ghigo, E., Kalaidzidis,Y. & Zerial M. La
conversión de rab
como mecanismo de
progresión desde principios hasta finales
de endomas. Celda 122, 735–749 (2005).
Un estudio de células vivas que muestra la pérdida de RAB5 y
la contratación de RAB7 durante la progresión de los
endomas tempranos a tardíos.
29. Gillooly, D. J. et al. Localización de
fosfatidilinositol 3-fosfato en levaduras y células de
mamíferos. EMBO J. 19, 4577-4588 (2000).
30. Blanco, yo. J., Bailey, L. M., Aghakhani, M. R.,
Moss, S. E. & Futter, C. E. E. EGF estimula la
dependiente de la
vesícula interna
anexión 1 en una
subpoblación endorosa multivesicular.
EMBO J. 25, 1–12 (2006).
31. Gruenberg, J. & Stenmark,H. La biogénesis de los
endosomas multivesiculares. Mol. Biol
celular. 5, 317-323 (2004).
32. Bowers, K. & Stevens, T. H.
Transporte proteico desde el Golgi
tardío hasta la vacuola en la levadura
Saccharomyces cerevisiae. Bioquimo. Biofis.
Acta 1744, 438-454 (2005).
33. Escoriasvold, T., Pattni, K., Malerod, L. &
y no
Stenmark, H. Funciones endosomales
endosomales de las
proteínas ESCRT. Tendencias Cell
Biol. 16, 317-326 (2006).
34. Hurley, J. H. & Emr, S. D. Los complejos ESCRT:
estructura y mecanismo
de una red de tráfico de membranas.
Annu. Biofis. Biomol. Struct. 35, 277-298
(2006).
35. Kostelansky, M. S. et al. Arquitectura molecular
y modelo funcional de la
levadura completa ESCRT-I
heterotetramer. Celda 129, 485–498 (2007).
, N Receptores de proteínas de unión de factores sensibles a la
36. Chu, T., Sol, J., Saksena, S. & Emr S. D. El nuevo
componente de ESCRT-I regula el montaje
complejo de clasificación
endosomal. J. Biol celular. 175,
815-823 (2006).
37. Oestreich, A. J., Davies, B. A., Payne, J. A. &
Katzmann, D. J. Mvb12 es un nuevo
miembro de ESCRT-I involucrado en la
selección de carga por la vía MVB.
mol. Biol. Celda (2006).
38. Curtiss, M., Jones, C. & Babst, M. Clasificación
eficiente de carga por ESCRT-I y la
posterior liberación de ESCRT-I de MVBs requiere el
subunidad Mvb12. Biol. Celda (2006).
39. Horii, M. et al. CHMP7, una novedosa proteína
relacionada con ESCRT-III, culosociatos con
CHMP4b y funciones en la vía de
clasificación endosomal. Bioquímica. J.
para 400, 23–32 (2006).
40. Bowers, K. et al. La degradación
del factor de crecimiento
epidérmico endocitosado y el
complejo de histocompatibilidad
mayor ubiquitinado viralmente clase I es
independiente de escrtii mamífero. J. Biol.
El químico. 281, 5094-5105 (2006).
41. Langelier,C. et al. Complejo humano ESCRT-II y su
papel en la liberación del virus de
inmunodeficiencia humana tipo 1. J. Virol.
80, 9465-9480 (2006).
42. Bache, K. G. et al. El SUBUNIT ESCRT-III hVps24
es necesario para la degradación, pero no
silenciamiento del receptor del factor
de crecimiento epidérmico. El mol. Biol.
Celda 17, 2513–2523 (2006).
43. Hirst, J., Futter, C. E. & Hopkins, C. R. La
cinética de la mano de la mano de mano
6-fosfato receptor tráfico en la vía endocítica en
células HEp-2: el receptor entra
rápidamente deja endomas
multivesiculares sin acumularse en un
compartimento presomsómico.
Biol. Celda 9, 809–816 (1998).
Come ntarios
44. Aniento, F., Emans, N., Griffiths, G. &
Gruenberg, J. Transporte vesicular
dependiente de la dynein
citoplasmática desde principios hasta tarde. J. Cell
Biol. 123, 1373-1387 (1993).
45. Ward, D. M., Pevsner, J., Scullion, M. A.,
Vaughn, M. & Kaplan, J. Syntaxin 7 y VAMP-7
son solubles
necesarios para la
etlmaleimida
fusión lysosoma y lysosome homotípica en
macrófagos alveolares. El mol. Biol. Celda 11, 2327–2333
(2000).
46. Futter, C. E., Pearse, A., Hewlett, L. J. &
Hopkins, C. R. Endosomas multivesiculares que
complejos de receptores EGF-
contienen
EGF interiorizados maduran
El y luego se fusionan
directamente con lysosomas. J. Cell
Biol. 132, 1011–1023 (1996).
Estudio electrones-microscópico que apoya el
concepto de fusión directa entre
endosomas tardíos y lysosomes y también demuestra
ataduras entre los orgánulos.
47. Brillante, N. R., Reaves, B. J., Mullock, B. M. &
Luzio, J. P. Los lysosomes de núcleo denso pueden
fusionarse con endosomas tardíos y se vuelven a
formar a partir de los orgánulos híbridos
resultantes. J. Ciencia celular. 110, 2027-2040
(1997).
48. Mullock, B. M., Brillante, N. A., Fearon, C. W.,
Gray, S. R. & Luzio, J. P. La fusión de
lysosomas con endosomas tardíos produce
un orgánulo híbrido de densidad intermedia y
depende de la NSF. J. Cell Biol. 140, 591-
601 (1998).
49. van Deurs, B., Holm, P. K., Kayser,L. & Sandvig K. ,
La entrega a lysosomas en la línea celular
de carcinoma humano HEp-2 implica una fusión
entre
con filamentos de actina
endosomas maduros y
lysosomas preexistres. Eur. J. Biol celular. 66,
309-323 (1995).
50. Mullock, B. M., Rama, W. J., van Schaik, M.,
Gilbert,
L. K. & Luzio, J. P. Reconstitución de una interacción
endomasa- lysosoma en un sistema libre
y de células. J. Biol celular. 108, 2093-2099 (1989).
51. Caplan, S., Hartnell, L. M., Aguilar, R. C.,
Naslavsky,
N. & Bonifacino, J. S. Human Vam6p promueve la
agrupación de lysosomas y la fusión in vivo. J. Biol
celular. 154, 109–122 (2001).
52. Poupon, V., Stewart, A., Gray, S. R., Piper, R.C. &
la
Luzio, J. P. El papel de mVps18p en
y localización
agrupación, fusión
intracelular de orgánulos
endocíticos tardíos. El mol. Biol. Celda 14,
4015–4027 (2003).
53. Richardson, S. C., Winistorfer, S. C., Poupon, V.,
Luzio,
J. P. & Piper, R.C. Los orólogos de clasificación de proteínas
vacuole tardías de mamíferos participan en la fusión
endosomal temprana e interactúan con
citoesqueleto. El mol. Biol. Celda 15, 1197–1210 (2004).
el
54. Bucci, C., Thomsen, P., Nicoziani, P.,
McCarthy, J. & van Deurs, B. Rab7: una clave
para la biogénesis lysosome. El mol. Biol. Celda
11, 467–480 (2000).
55. Marsman, M. et al. Una variante de empalme de
 agrupación lisosomal
RILP induce 65. Martinez-Arca, S. et al. Un mecanismo dual la sinapsis inmunológica
de lysomas secretos a para la

independientemente del que controla la localización y función fusión con la membrana plasmática.
reclutamiento de dynein. de los V-SNAREs exocíticos. El proc. Natl 81. Logan, M. R. et al. Un papel crítico para la
Acad. La ciencia. Estados Unidos 100, 9011-
Bioquímica. Biofis. Res. Commun. 344, 747-
756 (2006). 9016 (2003). proteína de membrana
asociada a la vesícula-7 en la exocitosis de
56. Jordens,yo. et al. La proteína efectora Rab7 RILP 66. Griffiths, G. Sobre vesículas y compartimentos de
controla el transporte lisosomal induciendo el membrana.
Protoplasma 195, 37–58 (1996). eosinófilos humanos y neutrófilos. Alergia 61,777-
reclutamiento de motores dynein-dynactin. 784 (2006).
Curr. Biol. 11, 1680-1685 (2001). 67. Mousavi, S. A., Brech,A., Berg, T. & Kjeken R. , 82. Mollinedo, F. et al. Las tez combinatorias SNARE
57. Falcon-Perez, J.M., Nazarian, R., Sabatti,C. & Fosfoinositida 3-quinasa regula la maduración modulan la secreción de gránulos citoplasmáticos
en neutrófilos humanos. J. Inmunol. 177, 2831-
Dell'Angelica, E.C. Distribución y dynamics de
de los esteosomas en 2841 (2006).
orgánulos endocíticos que hepatocitos de rata. Bioquímica. J. 372, 83. Ren, Q. et al. Endobrevin/VAMP-8 es la
861-869 (2003).
contienen Lamp1 en fibroblastos 68. Ko, D.C., Gordon, M. D., Jin,J. Y. & Scott, M. P. v-SNARE para la reacción de liberación

deficientes en BLOC-3. J. Cell Sci. 118, 5243-

Movimientos dinámicos de orgánulos que plaquetaria. El mol. Biol. Celda 18, 24–33 (2007).

5255 (2005). contienen proteína Niemann-Pick C1: 84. Desjardins, M. Biogénesis de faagolisomas: la
hipótesis del "beso y correr". Tendencias Cell
58. Weber, T. et al. SNAREpins: maquinaria
eventos
participación NPC1 en endocíticos Biol. 5, 183-186 (1995).
mínima para la fusión de tardíos. El mol. Biol. Celda 12, 601–614 Una exposición clara de la hipótesis de que la maduración
membranas. Celda 92, 759–772 (1998). (2001). fagorosa se produce como resultado de una serie de
59. Bock, J. B., Matern, H. T., Peden, A. R. &
Scheller, R. H. Una perspectiva genómica sobre la 69. Arighi, C. N., Hartnell, L. M., Aguilar, R. eventos de "beso y correr" con orgánulos endocíticos.
C., Haft, C. R. & Bonifacino, J. S. Papel
organización del 85. Touret, N. et al. Evaluación cuantitativa y
del retromer mamífero en la clasificación dinámica de la contribución de urgencias a
compartimento de membrana.
Naturaleza 409, 839–841 (2001). de la nariz de mano la formación de fagosomas. Celda

60. Yoshizawa, A.C. et al. Extracción de independiente de la catión

123, 157–170 (2005).
86. Czibener, C. et al. Ca2+
y sinaptotagmin VII-
Receptor de fosfato de 6. J. Cell Biol. 165, 123–133
motivos de secuencia y las (2004).
entrega dependiente de membrana lisosomal a
fagosomas nacientes. J. Biol celular. 174,
características 70. Vergarajauregui,S. & Puertollano, R. Dos motivos de
di-leucina regulan el tráfico de mucolipina-1
997-1007 (2006).
87. Jahraus, A. et al. Fusión in vitro de
filogenéticas del tráfico a los
lysosomas. Tráfico 7, 337-353 fagosomas con diferentes orgánulos
de membrana dependiente de SNARE. (2006).
71. Treusch,S. Caenorhabditis elegans ortoagüe
endocíticos de macrófagos J774. J. Biol. El
Tráfico 7, 1104-1118 (2006). químico. 273, 30379–30390 (1998).
funcional de la proteína humana h-mucolipin-
61. Jahn, R. & Scheller, R. H. SNAREs — 1 es necesario para la biogénesis
motores para la fusión de lysosoma. Pr. Natl Acad. Ciencia USA 101,
4483-4488 (2004).
membranas. Mol. Cell Biol. 7, 631-643
72. Pryor, P. R., Reimann, F., Gribble, F.M. & Luzio, J.
(2006).
62. Antonin, W. et al. Una fusión mediadora P. Mucolipin-1 es una proteína de
compleja SNARE de endosomas tardíos define las

la
propiedades conservadas de
membrana lisosomal necesaria para el
estructura y función SNARE. tráfico intracelular de lactosilceramida.
Tráfico 7, 1388-1398 (2006).
EMBO J. 19, 6453-6464 (2000). 73. Rodríguez, A., Webster, P., Ortego, J. &
63. Antonin, W., Fasshauer,D., Becker, S., Jahn, R. & Andrews, N. W. Los esteosomas se comportan
Schneider, T. R. Estructura cristalina del

complejo endosomal SNARE revela como vesículas exocíticas reguladas de Ca 2+

en fibroblastos y células epiteliales. J. Cell Biol.

principios estructurales comunes 137, 93–104 (1997).
74. McNeil, P. L. & Kirchhausen, T. Un equipo de
de todos los SNAREs. Estructura de la
naturaleza. Biol. 9, 107–111 (2002).
emergencia para la
respuesta de

64. Pryor, P. R. et al. Los complejos combinatorias reparación de membranas. Mol.

SNARE con VAMP7 o VAMP8 definen Biol celular. 6, 499-505 (2005).
diferentes eventos de fusión endocítica 75. Andrade, L. O. & Andrews, N. W. El Trypanosoma
cruzi–interacción entre celdas de host: ubicación,
tardía. 5, 590–595 (2004).
invasión, retención. Microbiol. 3, 819-823
Identificación de los SNAREs que se requieren para la
(2005).
fusión heterotípica de endosomas tardíos con
lysosomas. 76. Rao, S. K., Huynh, C., Proux-Gillardeaux, V.,
Galli, T. & Andrews, N. W. Identificación de

la exocitosis lisosomal
SNAREs involucrados en

regulada por synaptotagmin VII.

J. Biol. El químico. 279, 20471–20479 (2004).
Identificación de los SNAREs que se requieren para la fusión
de lysosoma con la membrana plasmática.
77. Jaiswal, J. K., Chakrabarti, S., Andrews, N. W. &
Simon, S. M. Synaptotagmin VII restringe la
expansión del poro de fusión durante la
exocitosis lisosomal. PLoS Biol. 2, e233
(2004).
78. Chow, A., Toomre,D., Garrett, W. &
Mellman,yo. La maduración celular dendrítica
desencadena el transporte retrógrado de MHC

clase II de los litosomas a la

membrana plasmática.
Naturaleza 418, 988–994 (2002).
79. Blott, E. J. & Griffiths, G. M. Lysosomes
secretos.
Mol. Biol celular. 3, 122–131 (2002).

80. Stinchcombe, J. C., Majorovits, E., Bossi, G.,

Fuller, S. & Griffiths, G.M. La polarización
centrosome entrega gránulos secretos a la
sinapsis inmunológica. Naturaleza 443, 462–
465 (2006).
Un estudio que muestra que el movimiento del centrosoma
en linfocitos T citotóxicos es necesario para la administración
C omentarios

Una demostración de las propiedades fusogénicas de los J. Cell Biol. 138, 517-529 (1997).
104. Wang, C. W., Stromhaug, P. E., Kauffman, E. J.,
fagosomas con orgánulos endocíticos incluyendo 99. Fischer von Mollard,G. & Stevens, T. H. El

lysosomes.
Saccharomyces cerevisiae v-SNARE Vti1p es Weisman, L. S. & Klionsky D. J. , La fusión
para múltiples vías
necesario
de vacuola homotípica de levadura
88. Mayorga, L. S., Bertini,F. & Stahl, P. D. Fusión de
fagosomas recién formados con endomas en de transporte de requiere el complejo Ccz1-Mon1 durante la

células intactas y en un membrana a la vacuola. El mol. etapa de anclaje/acoplamiento. J. Biol

celular. 163, 973-985 (2003).
sistema libre de células. J. Biol.
Biol. Celda 10, 1719–1732 (1999).
105. Jager, S. et al. Papel para Rab7 en la
266, 6511-6517 (1991). 100. Rieder, S. E. & Emr, S. D. Un nuevo maduración de vacuoles autofágicas tardías.
J. Cell Sci. 117, 4837-4848 (2004).
Los requisitos
89. Stockinger, W. et al. complejo de proteínas ring para los
106. Gonzalez-Polo, R. A. et al. La paradoja de
la
diferenciales para dedos esencial para un paso la apoptosis/autofagia: vacuolización autofágica
polimerización de actina, calmodulina tardío en el transporte de proteínas a antes de la muerte apoptótica.
118, 3091-3102 (2005).
J. Ciencia celular.

definen distintas etapas de la

la vacuola de levadura. Mol. Biol. Celular 8, 2307–
y Ca 2+
2327 (1997). 107. Behnia,R. & Munro, S. Organelle identidad y las
orientación lysosoma/fagosoma. Biol. 101. Lindmo, K. et al. Una doble función para
naranja profundo en autofagia programada en señales para el tráfico de
Celda 17, 1697–1710 (2006). membrana. Naturaleza 438, 597–604
90. Peyron,P., Maridonneau-Parini,I. & Stegmann, T. el cuerpo de grasa Drosophila (2005).
Fusión de fagosomas neutrófilos humanos con melanogaster. Exp. Cell Res. 312, 2018- 108. Gruenberg, J. & van der Goot, F. G.
lisosomas in vitro: afectación de las 2027 (2006).
102. Pulipparacharuvil, S. Drosophila Vps16A es de entrada de
Mecanismos
quinasas tirosina de la familia Src e
inhibición por micobacterias. J. Biol. El necesario para el tráfico a liomas y patógenos a través de los
químico. 276, 35512–35517 (2001).
91. Harrison, R. E., Bucci, C., Vieira, O. V.,
biogénesis de gránulos pigmentados. J. Cell Sci.
118, 3663–3673 (2005).
compartimentos endosomales.
Schroer, T. R. & Grinstein, S. Phagosomes se 103. Wang, C. W., Stromhaug,P. E., Shima,J. & Mol. Biol celular. (2006).
fusiona con endosomas tardíos y/o lysosomes por Klionsky, D. J. El complejo proteico Ccz1- 109. Kim, K. J., Elliott, S. J., Di Cello, F., Stins,M. F. &
Kim, K. S. La cápsula K1 modula el tráfico
extensión de Mon1 es
para el paso tardío de múltiples vías de entrega de vacuole. de
protuberancias de J. Biol. El químico. 277, 47917-47927 (2002). y mejora la
E. coli-que contiene vacuoles

membrana a lo largo de supervivencia bacteriana intracelular en

microtúbulos: papel de Rab7 y RILP. El mol. La
celda. Biol. 23, 6494-6506 (2003). células endoteliales microvasculares del cerebro
Una demostración del papel de rab7 y proteínas motoras humano. La celda. Microbiol. 5, 245-252 (2003).

microtúbulos en la promoción de la extensión de los 110. Brumell, J. H. & Grinstein, S. Salmonella

tubulos feosmales, que se fusionan con endomas tardíos o
lisosomas. redirige la maduración feagosomal.
92. Kjeken,R. et al. Fusión entre fagosomas, Curr. Opin. Microbiol. 7, 78-84 (2004).
endosomas tempranos y tardíos: un papel 111. Deretic, V. mycobacterium tuberculosis
para actuar en fusión entre la
inhibición de la biogénesis fagolisoma y
orgánulos endocíticos tardíos, pero no
autofagia como mecanismo
tempranos. El mol. Biol. Celda 15, 345–358
(2004). de defensa del huésped. La celda.
93. Huynh, K. K. et al. Se requieren proteínas LAMP Microbiol. 8, 719-727 (2006).
para la fusión de lysosomas con fagosomas. 112. Hernández, L. D., Hueffer, K., Wenk, M. R. &
EMBO J. 26, 313-324 (2007). Galán, J. E. Salmonella modula el tráfico vesicular
94. Collins, R. F., Schreiber, A. D., Grinstein, S. & alterando el metabolismo de los fosfoinositidas. Ciencia 304,
Trimble, 1805-1807 (2004).
W. S. Syntaxins 13 y 7 funcionan en pasos distintos
durante la fagocitosis. J. Inmunol. 169, 3250-3256 Salmonella fagocitostased secreta una fosfatasa

(2002). fosfoinositidaque mantiene altos niveles de

95. Bogdanovic, A. et al. Syntaxin 7, syntaxin 8, fosfatidilinositol-3-fosfato en la membrana fagosoma y retrasa
de membrana
Vti1 y VAMP7 (proteína
la formación del fagosoma.

asociada a vesícula 7) forman un 113. Vergne, I., Chua, J. & Deretic, V. La toxina tuberculosis

complejo SNARE activo para la que bloquea la maduración fagosa inhibe una

nueva cascada Ca / calmodulina-PI3K

fusión temprana de
2+

hVPS34. J. Exp. Med. 198, 653-659 (2003).

compartimentos macropinocíticos en
Dictyostelium discoideum. Bioquímica. J. 368, 114. Vergne, yo. et al. Mecanismo de
29–39 (2002).
96. Levine, B. & Klionsky, D. J. Desarrollo por auto- bloqueo de biogénesis faagolisoma
mecanismos
digestión: por Mycobacterium tuberculosisviable.
Pr. Natl Acad. Ciencia EE.UU. 102, 4033-
moleculares y funciones biológicas 4038 (2005).
de la autofagia. Dev. Celda 6, 463–477
(2004). 115. Fratti, R. A., Backer, J.M., Gruenberg, J., Corvera, S.
97. Nakagawa, yo. et al. La autofagia defiende
& Deretic, V. Papel de los efectores
las células contra el grupo invasor A fosfatidilinositol 3-quinasa y Rab5 en biogénesis
Streptococcus. Ciencia 306, 1037–1040
(2004). feagosomal ydescomponimiento de maduración de
Una clara demostración de que la maquinaria autofagica fagosoma micobacteriano. J. Cell Biol. 154, 631-
644 (2001).
puede actuar como un sistema de defensa innato 116. Smith, A. C. et al. Una red de Rab GTPases
contra patógenos invasores.
controla la
maduración fagorosa y es modulada por
98. Darsow, T., Rieder, S. E. & Emr, S. D. Una Salmonella enterica serovar Typhimurium. J. Biol

sintaxis multiespecífica en homologo, celular. 176, 263-268 (2007).

117. Hamon, M., Bierne,H. & Cossart,P. Listeria
Vam3p, esencial para el monocytogenes: un modelo polifacético.
transporte de proteínas autofágicas y
Microbiol. 4, 423-434 (2006).
biosintéticas a la vacuola. 118. Cossart, P. et al. Listeriolysin O es esencial para
632 | Agosto 2007 | volumen 8 www.nature.com/reviews/molcellbio
© 2007 naturaleza editorial grupo
 la virulencia de Listeria monocytogenes:
122. Gutiérrez, M. G. et al. La autofagia es un
cuenta con el apoyo de un Premio Estratégico
del Wellcome Trust. Le damos las gracias a M. Gratian para
evidencia directa obtenida por mecanismo de defensa
complementación genética. Infecto. Immun. 57, obtener ayuda con la creación de imágenes en
3629-3636 (1989). que inhibe la supervivencia del BCG células vivas y la preparación de las animaciones
119. Shaughnessy, L.M., Hoppe, A. D., Christensen, K. A.
& Swanson, J. A. Las perforaciones de membrana y mycobacterium tuberculosis en del lysosome-endosome.
inhiben la fusión lisosoma alterando el pH y el calcio macrófagos infectados. Celda 119, 753–
en Listeria monocytogenes vacuoles. La celda.
Microbiol. 8, 781-792 (2006).
766 (2004). Declaración de intereses en competencia
123. Rich, K. A., Burkett, C. & Webster, bacterias P. Los autores no declaran intereses financieros competidores.
120. Henry, R. et al. Retardo dependiente de la cito lisina citoplasmáticas pueden ser dianas para
de maduración de vacuola la autofagia. La celda. Microbiol. 5, 455-468
Bases
en macrófagos infectados con Listeria (2003). Pérdida términos de este artículo están Vinculados en línea un: OMIM: h
monocytogenes. La celda. Microbiol. 8, 107–119 124. Ogawa, M. & Sasakawa, C. Supervivencia
(2006). intracelular de la enfermedad de Huntington | mucolipidosis tipo Iv | Enfermed
Shigella. Microbiol celular 8, 177–184 (2006). UniProtKB: http://ca.expasy.org/sprot
121. Kirkegaard, K., Taylor, M. P. & Jackson, W.
125. Ogawa, M. et al. Escape de Shigella | Sintaxis RAB7in-7 | syntaxin-8 | VAMP7 | VAMP8 | VTI1B
T. Autofagia celular: rendición, evitación y
intracelular de la autofagia. Ciencia 307, MÁS INFORMACIÓN
subversión por microorganismos. Microbiol.
727–731 (2005).
2, 301-314 (2004). de Pablo Luzio: http://www.cimr.cam.ac.uk/
126. Ogawa, M. & Sasakawa, C. Evasión bacteriana Página de inicio Investigado

del sistema de defensa autofágica. Página principal de Paul Pryor: http://bioltfws1.york.ac.uk/biostaff/ staffdetail.p
Curr. Opin. Microbiol. 9, 62-68 (2006).
Lysosome–endoalguna vez Fusión: Investigadores http://www.cimr.cam.ac.uk//
las vías
127. Rubinsztein, D.C. Los roles de
El acceso un este cuadro de enlaces está Disponible en línea.
intracelulares de
degradación de proteínas en la
neurodegeneración. Naturaleza 443, 780–
786 (2006).
Este trabajo revisa el papel de la autofagia en la
degradación de las proteínas citosólicas propensas a
y propone que la regulación de la autofagy
agregados

de valor terapéutico
podría ser

en una gama de enfermedades

neurodegenerativas.
128. Winchester, B. Metabolismo lisosomal de las
glucoproteínas.
Gluciología 15, 1R–15R (2005).
129. Artal-Sanz, M., Samara, C., Syntichaki,P. &

Tavernarakis, N.La biogénesis lisosomal y

la función son fundamentales

para la muerte de células

necróticas en Caenorhabditis elegans. J. Biol
celular. 173, 231-239 (2006).

130. Arantes, R.M. & Andrews, N. W. Un papel para

la regulada por
exocitosis

synaptotagmin VII de los

esteosomas en el
crecimiento de neurites de
las neuronas simpáticas primarias.
J. Neurosci. 26, 4630-4637 (2006).

131. Lafont, F. et al. Asociación de

balsas de receptores SNAP que actúan en

el tráfico apical en Madin–Darby células
renales caninas. Pr. Natl Acad. Ciencia USA
96, 3734–3738 (1999).
132. Martínez-Arca, S., Alberts, P., Zahraoui,A.,
Louvard, D. & Galli, T. Papel de la

proteína de membrana
insensible a la vesícula
insensible al tétanos (TI-
VAMP) en el transporte vesicular

mediando la consecuencia
neurite. J. Biol celular. 149, 889-900
(2000).

133. Merz, A. J. & Wickner, W. T. Las

interacciones trans-SNARE provocan eflujo Ca2+
del lúmenes de vacuola de levadura. J. Cell Biol.
164, 195–206 (2004).

Agradecimientos
inédito mencionado en este
El trabajo experimental

artículo fue financiado por una Beca

de Investigación a J.P.L del Consejo
de Investigación Médica. El Instituto de
Investigación Médica de Cambridge