Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y

Triglicéridos
ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa
(GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3
GPO-POD. Enzimático fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a

colorimétrico FUNDAMENTO dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO. Al
final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona (4-AF) y
p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración
roja.

MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o
analizador para lecturas a 505
nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso
de luz.
- Equipamiento habitual de
laboratorio.
R1: Tampón
PIGOOD pH 7,5_____50 mmol/L
TRIGLICERIDOS CAL p-Clorofenol______2 mmol/L
Patrón primario acuoso de R2: ENZIMAS REACTIVO
Triglicéridos 200 mg/dL Lipoprotein lipasa (LPL)______150000 U/L
Glicerol quinasa (GK)_________500 U/L
Glicerol-3-oxidasa (GPO)_______2500 U/L
Peroxidasa (POD)_________440 U/L
4 – Aminofenazona (4-AF)_____0,1 mmol/L
MUESTRAS ATP_______ 0,1 mmol/L
Suero y plasma heparinizado o EDTA.
PROCEDIMIENTO
Estabilidad de la muestra: 5 días a 2-8oC.

3.-Pipetear en la
cubeta. 1.-CONDICIONES DEL ENSAYO.
2.-Ajustar el espectrofotometro a LONGITUD DE ONDA…….505 (490-550) NM
CUBETA……..1CM DE PASO DE LUZ.
cero frente a agua destilada TEMPERATURA……… 37°C / 15-25°C

A Muestra/ A Patrón x 200 (Conc. Patrón) =

5.-Leer la absorbancia (A) del
Mezclar e incubar 5 minutos a Patrón y la muestra, frente al CALCULOS mg/dL de triglicéridos en la muestra

37°C o 10 min. a temperatura Blanco de reactivo. El color es

Factor de conversión: mg/dL x 0,0113 = mmol/L.
ambiente. estable como mínimo 30 minutos.

Hombres: 40 – 160 mg/dL

VALORES DE
Mujeres: 35 – 135 mg/dL REFERENCIA
GONZALEZ VARGAS ITZEBEL M
5IM5