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GUÍAS DE

PRÁCTICAS DE Práctica No.: 6


LABORATORIOS
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CENTROS DE Centro de
Taller: Laboratorio: X
SIMULACIÓN Simulación

UNIDAD ACADÉMICA DE SALUD Y BIENESTAR


Carrera de: Biofarmacia Período Lectivo: octubre 2020-marzo2021

Asignatura: Análisis Clínico I


Docente: Lic. Lenys Buela M.Sc.

Curso/Ciclo: septimo Paralelo: B


Laboratorio: Análisis Clínico y Toxicológico Fecha:
Bloque Temático 2 Función renal, perfil hepático, función pancreática.
Título:
Nº:
Tema de la Análisis de la función renal
práctica:

1.INTRODUCCIÓN
La creatinina, ácido úrico y la urea son sustancias nitrogenadas, que forman parte de los estudios
de química sanguínea, que son de gran utilidad para determinar la funcionalidad renal, aunque su
aumento no siempre reflejará daño renal, ya que también pueden alterarse por razones
metabólicas o congénitas.
La creatinina debe ser eliminada por orina a través de la filtración glomerular sin ser reabsorbida.
Cuando los niveles en plasma aumentan podría tratarse de un cuadro clínico como insuficiencia
renal.
El ácido úrico es un producto de desecho derivado de purinas de la dieta.
La urea es el principal producto nitrogenado del catabolismo de las proteínas, sólo se sintetiza en
hígado y es excretada por la orina a través de los riñones. Una elevación de la concentración
sérica de urea, refleja generalmente como una posible disfunción renal.
Marco Teórico:
El ácido úrico es el metabolito final del catabolismo de las bases púricas y su elevación está asociada
a la gota. En los pacientes con valores elevados, se observan cristales de ácido úrico en las
articulaciones y en los tendones, que da origen a manifestaciones reumáticas características.
Niveles altos de ácido úrico también se relacionan con patologías renales por retención de productos
nitrogenados, prestándose en estos casos a valores altos de urea y de creatinina.

La creatinina es un producto final del metabolismo muscular. Se origina a partir de la creatina por
pérdida de una molécula de agua. La eliminación de creatinina tiene lugar casi exclusivamente a
través de la filtración glomerular, por lo que su determinación es un importante índice del
funcionalismo renal. La eliminación de creatinina en 24 horas es un valor constante, que depende
principalmente de la masa muscular del individuo.

La urea se sintetiza en el hígado, y es el producto final del catabolismo proteico, se consideran


cifras normales valores entre 12 y 54 mg/dl. La elevación en el nitrógeno ureico sérico no implica
necesariamente daño renal, puesto que la deshidratación puede llevar a concentraciones de
nitrógeno ureico.
2. OBJETIVO
Analizar la función renal a través de pruebas bioquímicas en muestras sanguíneas.
3.INSTRUCCIONES / METODOLOGÍA
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Aplicar el manejo adecuado de la técnica para las determinaciones de creatinina, urea y ácido
úrico en una muestra sanguínea.
Conocer los valores de referencia de creatinina, urea y ácido úrico y comparar con el valor de la
muestra analizada.
Interpretar los resultados según tenemos valores normales, altos o bajos en la muestra del
paciente.
Metodología: Científico-experimental.

4.MATERIALES / HERRAMIENTAS / EQUIPO


o Kit de reactivo de Creatinina
o Kit de reactivo de ácido úrico
o Kit de reactivo de urea
o Pipetas serológicas.
o Puntas para pipetas.
o Baño maría.
o Espectrofotómetro.
o Cubetas para espectrofotómetro.
o Suero o plasma del paciente.
o EVEA
5.ACTIVIDADES POR DESARROLLAR.
Actividades previas a la actividad práctica.
1.- Elaborar el protocolo de trabajo para la determinación de creatinina a partir del respectivo
inserto (Anexos en el EVEA).
Procedimiento:
Muestras: suero o plasma Estabilidad del analito:24h a 2-8C

Blanco Patrón Control Muestra


(Paciente)
Reactivo (mL) 1.0 1000 μL 1000 μL 1000 μL
Patrón (µL) - 100 μL - -
Muestra (µL) - - 100 μL 100 μL

Mezclar, incubar 37°C por min.


Leer a 492 nm contra blanco de agua destilada.

Límite de detección 0.000 mg/dL Limite de linealidad 35mg/dL


2.- Elaborar el protocolo de trabajo para la determinación de ácido úrico a partir del respectivo
inserto (Anexos en el EVEA).
Procedimiento:
Muestras: suero o plasma Estabilidad del analito3-5 dias a 2-8 °C y 6 meses a -20°C
Blanco Patrón Control Muestra
(Paciente)
Reactivo (mL) 1000 ul 1000 ul 1000 ul 1000 ul
Patrón (µL) - 25 ul - -
Muestra (µL) - - 25ul 25ul

Mezclar, incubar 37 °C/20-25 °C por 5/10 min.


Leer a 520 nm contra blanco de agua destilada.

Límite de detección 0.03mg/dl Limite de linealidad 25mg/dL

3.- Elaborar el protocolo de trabajo para la determinación de urea a partir del respectivo inserto
(Anexo en el EVEA). Usar protocolo de punto final.
Procedimiento:

Muestras: suero o plasma Estabilidad del analito:5 días 2-8°C

Blanco Patrón Muestra


(Paciente)
Reactivo 1 (mL) 1.0 1.0 1.0
Patrón (µL) - 50 -
Muestra (µL) - - 50

Mezclar y añadir:

Reactivo 2 (mL) 1.0 1.0 1.0

Mezclar, incubar 37 °C por 1 min.


Leer a 600 nm contra blanco de agua destilada.

Límite de detección 1.3 mg/dL Limite de linealidad 300 mg&dL


4.- Prepare los reactivos que sea necesarios siguiendo las instrucciones del inserto.
5.- Realice las determinaciones según el protocolo elaborado.
6.RESULTADOS OBTENIDOS ( Informe de resultados de acuerdo al formato)
1. Un paciente adulto del sexo masculino de 63 años, diagnosticado de diabetes tipo 2 hace 10 año y
quien recibió inicialmente un tratamiento dietético acompañado de ejercicio y metfornina. Además,
tiene antecedentes personales de tabaquismo, obesidad, hipertensión arterial. Sin embargo,
después de unos años manifestó intolerancia a la metformina por alteraciones gastrointestinales y
muy mal control metabólico (HbA1c 14,2%). El paciente acude al servicio de urgencia por presentar
cara, manos y miembros inferiores más edematizados, y una disminución de la diuresis. El médico
tratante solicita análisis de laboratorio.

El paciente acude a un laboratorio y el Bioquímico Farmacéutico para realiza los siguientes análisis de
laboratorio: glucemia, creatinina, urea y HbAc1.

Concentración de Glucosa: 287,77mg/d

Al realizar la determinación de HbAc1 por el método rápido de separación por resina de intercambio
iónico, el resultado fue de 14,4%

2. Al efectuar la determinación de urea usando el método de punto final. Las lecturas obtenidas en un
espectrofotómetro que fue ajustado a cero con un blanco de agua destilada a una longitud de onda
de 510 nm, son las siguientes:

Blanco: 0,140 Patrón: 0,349 Paciente: 0,409.

La concentración del patrón: 50 mg/dL

Realice los cálculos de la correspondientes (deben estar adjuntos) y señale la concentración de urea del
paciente:
Blanco : 0,140
Patrón 0,349
Muestra 0,409.
Valores normales
Suero: de 15 a 45 mg/dL (
Patrón 0,349- 0,140=0,209

muestra 0,409- 0,140=0,269

A (Muestra) x concentración de Patrón = mg/dL


A (Patrón
0,269/0,209,x 50mg/dL=64.35mg/dL

3. Al efectuar la determinación de creatinina. Las lecturas obtenidas en un espectrofotómetro que fue


ajustado a cero con un blanco de reactivo a una longitud de onda de 492 nm. Se procedió a Leer la
absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos y al cabo de 90 segundos (A2) de la adición de la muestra.
Los resultados del delta de absorbancia (A2-A1) son los siguientes:

Delta de Abs Patron: 0.031 Delta de Abs. Paciente: 0.039

Cont. Patrón: 2 mg/dL


Otras terminaciones complementarias demostraron que el paciente tenía las siguientes concentraciones
de albúmina 2,5 g/dl y de proteínas totales 4,5 g/dl. Con estos resultados adicionales y los anteriores que
patología estaría asociada a la diabetes Mellitus tipo 2. Justifique su respuesta.

Delta de Abs Patron: 0.031


Delta de Abs. Paciente 0.039
Cont. Patrón 2 mg/dL
valores referenciales:
Suero o plasma:
Hombres 0,7 - 1,4 mg/dL
Mujeres 0,6 - 1,1 mg/dL
A (Muestra) x concentración de Patrón = mg/dL
A (Patrón
MUESTRA 0.039

PATRÓN 0.031

(0.039/0.031) x 2 mg/dL= 2.512 mg/dL


Creatinina alta

7.CONCLUSIONES

1. El paciente presenta contracciones altas de glucosa, HbAc1. y creatina 14,4%


2. paciente concentraciones altas de urea 64.35mg/dL
3. paciente concentraciones altas en creatinina 2.512 mg/dL
Parámetro Resultado Valores normales
Creatina 2.512 mg/dL 0,7 - 1,4 mg/dL
Urea 64.35mg/dL 15 a 45 mg/dL
HbA1c 14,2% 5-6.5%

El paciente en sus antecedentes presenta obesidad, diabetes, hipertensión y es intolerante a la


metformina, ya que el análisis de la química sanguínea nos reveló que la glucosa y HbAc1 están con
valores altos, con respectos a los valores referenciales, a causa de la diabetes tipo 2 y la obesidad.
Además, los valores de creatinina nos indican que tiene problemas en la función renal por la diabetes y
la hipertensión arterial debido a eso tiene una disminución en la diuresis y retiene líquidos en las
extremidades, también los valores de urea, albúmina y proteínas totales, nos indican que presentan un
fallo hepático, con una hipoalbuminemia ya que además retiene líquidos en las extremidades y en el
rostro.
8.RECOMENDACIONES
Considerar las medidas de bioseguridad.
Usar de manera obligatoria elementos de protección personal.
Imprimir guía práctica como requisito para ingresar al laboratorio.
Completar los protocolos de trabajo de cada uno de los analitos
9.BIBLIOGRAFÍA
http://www.ral-sa.com/files/hu10051.pdf
http://www.ral-sa.com/files/hu10521.pdf
http://www.ral-sa.com/files/hu10690.pdf
Prieto, J. (2010). La clínica y el laboratorio. En P. Valtueña, La clínica y el laboratorio . España: 21.
10.EVALUACIÓN
Rubrica de evaluación socializada previamente. Realizar el respectivo informe de prácticas de
laboratorio.
11. NOMBRE Y FIRMA DE LOS ESTUDIANTES

Jonnathan Segarra

Antonio Moscoso

Dayana Niguela

Karina Guachichulca
Anexo registro de alumnos de prácticas de laboratorio.
12. RESPONSABILIDAD ACADÉMICA

DIRECTOR DE CARRERA FIRMA DEL DOCENTE

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