La Academia al servicio de la Vida

ANDREA CAROLINA PEREZ PEREZ

CODIGO: 1118563630
HISTOLOGIA ANI MAL Y VEGETAL
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

1. FIJACION: En los campos de la histología, patología y biología

celular, la fijación es un paso clave en la preparación de cortes de
tejido, que puede proteger los tejidos biológicos de la
descomposición y prevenir la autólisis o pudrirse. La estructura del
tejido está determinada por la forma y el tamaño de las
macromoléculas dentro y alrededor de la célula. Las principales
macromoléculas de las células son las proteínas y los ácidos
nucleicos. La fijación terminará cualquier reacción bioquímica en
curso y también puede aumentar la resistencia mecánica o la
estabilidad del tejido que se está tratando. El objetivo general de la
fijación de tejidos es preservar las células y los componentes del
tejido, y proceder de una manera que permita preparar secciones
delgadas teñidas.

2. DESHIDRATACION: Es un cambio metabólico que altera las

funciones orgánicas debido a la pérdida de electrolitos y agua. Las
causas más comunes son las enfermedades gastrointestinales,
especialmente la gastroenteritis aguda (GEA) y los síndromes de
malabsorción con baja incidencia: golpe de calor, metabolismo,
pérdida excesiva de agua y electrolitos, se realiza empleando
diferentes soluciones de alcohol a concentraciones crecientes hasta
llegar a alcohol puro. La técnica de la parafina, para cortar
fácilmente. Después de fijar la muestra, se retira el fijador y se
deshidrata. Dado que muchos tejidos están compuestos de agua, se
debe utilizar una serie de soluciones acuosas de agentes
deshidratantes, desde el más pequeño al más grande, esto para el
caso de histología.

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3. ACLARAMIENTO: Una vez deshidratado el tejido, se entrega a

una solución de una sustancia que es miscible con alcohol y el
medio de inclusión (en la mayoría de los casos, se utiliza parafina
líquida como medio de inclusión). a sustancia comúnmente
utilizadas el Xileno o Xilol. Debido a que el tejido se vuelve
transparente o transparente en xileno, se le llama aclaramiento,
porque cambia su índice de refracción. También se pueden utilizar
tolueno, benceno o cloroformo como medios de limpieza.

4. IMPREGNACION EN PARAFINA: Para obtener una sección lo

suficientemente delgada para la observación al microscopio, el
tejido debe envolverse y envolverse con una sustancia firme y
densa. Las sustancias utilizadas para este fin son: gelatina y cera de
parafina. La inclusión se logra sumergiendo parafina líquida o
cualquier medio líquido de inclusión en el tejido, lo que disuelve el
medio de eliminación y penetra en el tejido. Por lo general, la
muestra de tejido se coloca en un recipiente y se agrega parafina
fundida a 60ºC, y la muestra se coloca en un horno de 30 minutos a
6 horas, manteniendo la temperatura a 60ºC. Como resultado del
calentamiento, el xileno o benzoato se evaporará y el espacio que
antes ocupaban ahora lo ocupa la parafina. Luego coloque este
fragmento y un poco de parafina fundida en un molde rectangular
de papel o metal y déjelo solidificar a temperatura ambiente para
formar un bloque de parafina sólido, que incluye un pedazo de
toalla de papel, que se llama Taco.

5. HISTOTECNIA: Las técnicas histológicas son una serie ordenada

de pasos que permiten la preparación de tejidos para su observación
a través de un microscopio. Prepare el tejido para la observación de
acuerdo con el tipo de microscopio que se utilizará Bajo un
microscopio de campo claro, la técnica de preparación de muestras
más común es la histología ordinaria o la técnica de inclusión en
parafina. En este proceso, la muestra se sumerge en parafina para
que tenga la consistencia suficiente para obtener un bloque con la
muestra o espécimen. Después de instalar el bloque (incluido), se
corta en una máquina llamada microtomo y se usa para obtener
cortes muy finos (espesor de micras) para que se pueda observar la
estructura celular y tisular. El otro paso que brinda la información
más detallada corresponde al momento en el que se aplica el tinte,

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que imparte color a la muestra, por lo que se pueden identificar

diversas estructuras observando estas preparaciones con un
microscopio de campo claro.

6. METODOS Y TIPOS DE COLORACION: Hay dos teorías para

explicar el procedimiento del Colorante
Teoría física: Tenga en cuenta que la coloración es un proceso
físico de adsorción. Por tanto, las partículas de la sustancia
colorante disuelta penetran en los espacios intracelulares e
intercelulares donde permanecen adheridas debido a la cohesión
molecular. Por ejemplo, las manchas de grasa o lípidos son
manchas de adsorción. Sudán III o IV pueden decolorar las grasas
porque se disuelven fácilmente.
Teoría de la química. El tinte se combina con la sustancia que se
puede teñir y, debido a la presencia de grupos moleculares ácidos o
básicos en la célula o los componentes del tejido, se combina
estrechamente con los cromógenos básicos y ácidos del tinte para
formar una sal insoluble. Resulta que combinar el colorante con
Un componente que puede ejercer su efecto antiincrustante incluso
cuando se utilizan líquidos solventes.

METODOS:

Tinción directa o tinción directa: este es el nombre de la tinción

que se aplica a las células y tejidos cuando están en contacto con la
solución de tinción, el resultado muestra que existe una verdadera
afinidad entre el tejido y la tinción. Por ejemplo: el azul de metileno
tiñe el núcleo.
Teñido indirecto o descriptivo: Para que el teñido sea efectivo, se
debe utilizar una sustancia intermedia que ayude al tinte a adherirse
a la estructura del tejido. La sustancia intermedia utilizada se
denomina "medio". El mordiente se aplica antes de usar la solución
colorante, o puede ser parte de ella. La combinación que se produce
entre el mordiente y el colorante se denomina "laca". La mayoría de
las soluciones de tinción de hematoxilina requieren mordaz para
aportar color.
Coloración progresiva: Se refiere al proceso de coloración en sí.
Pon toallas de papel en contacto con la solución de tinción para que
a medida que transcurre el tiempo de tinción, el tejido alcance

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gradualmente la intensidad de tinción requerida; en ese momento, la

tinción se detiene lavando y eliminando el exceso de tinción.
Coloración Regresiva: En este caso, se colorean con un tinte, y
luego se es somete a una función denominada discriminador, que
extrae una parte del tinte, y al observar al microscopio, cuando los
componentes alcanzan la tinción deseada, se detiene el proceso de
diferenciación.
Tinción simple: proceso de tinción de determinadas células o
componentes de tejido con un solo tinte.
Colorante compuesto o combinado: Aplique varios tintes a
muestras de tejidos u órganos para resaltar la estructura específica
de una parte con diferentes colores.
Simultanea: Al mismo tiempo, en la misma solución Se mezclan
varios colorantes. En este caso, el tejido se teñirá en un solo evento.
Ejemplo: algunas soluciones de sombreado Tricolor, como Van
Gieson (fucsina ácida y ácido pícrico) o Mallory (azul anilina y
naranja G) o Shorr (verde brillante, fucsia ácido y naranja G).
Sucesiva: consiste en aplicar soluciones continuas de varios tintes
al tejido, con el objetivo de que algunos de ellos tiñan determinados
componentes. El ejemplo más típico es el teñido con hematoxilina.
La eosina, cuyo núcleo se tiñe con hematoxilina, y luego la eosina
es responsable de la tinción del citoplasma.
Coloración ortocromática: Es el efecto de coloración que ejercen
los tintes cuando colorean estructuras específicas con sus propios
colores. La mayoría de los colorantes producen colores
ortocromáticos.
Coloración Metacromática: Es una especie de teñido, además de
darle a la estructura celular o tejido su propio color, el tinte también
tiñe un color diferente al de otras estructuras. El núcleo azul de
tioína y toluidina es azul.
Coloración Pancromática: Es de la actividad teñida de tintes
neutros. En este caso, las partes alcalinas y ácidas ejercerán su
efecto de teñido, pero, además, algunos componentes de la celda se
teñirán de un color diferente al de los componentes originales para
obtener tonos producidos por mezcla.

TIPOS: Existen varios criterios para clasificar a los colorantes:

A) Por su origen. pueden ser naturales y artificiales

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1 animales. Como el carmín, Parásitos artrópodos en el tallo de la

cochinilla (atún). El carmín (rojo oscuro) es uno de los colorantes
naturales más utilizados en las industrias alimentaria y cosmética.
En técnicas histológicas, el carmín de Best se usa para mostrar
glucógeno, el carmín de Meyer se usa para mostrar mucina; el
carmín de litio (tinción in vivo) puede probar fagocitos.

2 verduras. Al igual que la hematoxilina obtenida de la corteza,

"palo de campeche" (Haematoxilum campechanum), azafrán
Se extrae del propóleo obtenido de las Liliáceas (el pistilo de la flor
del azafrán) o del liquen.

B) Colorantes artificiales o sintéticos: Son productos extraídos

del carbón o de la destilación del carbón. Generalmente, se
denominan tintes derivados de la anilina. El color artificial es la sal.
Se clasifican en:

Ácido: Es una sal cuya parte básica es incolora y el componente

ácido tiene color. Por lo tanto, en los colorantes de eosina o eosina
sódica, el rendimiento colorante se debe a la eosina en lugar de al
sodio alcalino.
Ejemplos: la eosina, el amarillo de metanilo, la fucsina ácida, el
ácido pícrico, el verde rápido, el naranja G, la safranina, el azul de
anilina, etc.

Alcalina: La sal es una base coloreada, y la parte ácida es incolora;

por ejemplo, azul de metileno o clorhidrato de azul de metileno, sus
propiedades colorantes se atribuyen a la base de azul de metileno en
lugar del ácido clorhídrico incoloro.
Ejemplos: la hematoxilina, el rojo nuclear, el azul de metileno, la
tionina, el azul de toluidina, la fucsina básica.

Neutras: son sales en las que tanto la parte básica como la parte
ácida aportan color. Por ejemplo, eosina azul de metileno o eosina
azur de metileno.
Forman parte de las fórmulas colorantes para frotis de sangre como
los colorantes de Wright, May Grünwald, Giemsa, Leischman, etc.

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Indiferente: No forman sal. No son compuestos. Los iones no se

pueden disociar electrolíticamente.
Los ejemplos son: El sudan negro, el sudán III y el sudán IV, El
rojo oleoso.

7. MICROTOMOS: La sección delgada o "corte" se obtiene

utilizando un instrumento mecánico diseñado para cortar más o
menos automáticamente el bloque de parafina en secciones
delgadas de espesor uniforme. Estos instrumentos se denominan
"Microtomos”. El sistema de funcionamiento de los microtomos
consta de cuatro mecanismos principales:
 sujeción del bloque de parafina.
 sujeción de la navaja.
 El que permite que el filo de la navaja seccione al bloque
en cortes delgados y de grosor uniforme.
 El de avance del bloque en un número determinado de
micrómetros después que se ha obtenido un corte.

Los microtomos se clasifican de acuerdo a la manera como se desplaza el

bloque que contiene el tejido incluido; así, existen:

Microtomo rotatorio tipo Minot: A través de una manivela redonda

llamada volante, el mecanismo que sostiene el bloque de parafina se mueve
frente al borde de la navaja, moviéndose verticalmente de arriba a abajo y
viceversa.
Microtomo de Deslizamiento: El movimiento para obtener el corte es
horizontal, es decir, de atrás hacia adelante y viceversa. Generalmente, el
mecanismo de sujeción de bloques de parafina es Muévete y la hoja
permanece estacionaria
En cualquier laboratorio para examen técnico histológico, especialmente
cuando el tejido está incrustado en parafina, el microtomo Minot es el más
utilizado. Por otro lado, la cortadora deslizante se utiliza cuando el tejido
está incrustado con citocinas o cuando grandes partes que contienen tejidos
y órganos están incrustadas en parafina.

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BIBLIOGRAFIA

1. https://copro.com.ar/Fijacion_(histologia).html
2. http://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/2-fijacion.php
3. https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/4-mparafina.php
4. https://histo-inmediata.webnode.es/news/tipos-de-tincion/

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