FIGURA 1

Se crearon mutantes de Flik, que varían entre 310 a 785 aminoácidos de longitud, usando
inserciones de partes α-helicoidales de una regla molecular homóloga del sistema de secreción
de tipo III asociado a virulencia de Yersinia, o deleciones del dominio helicoidal central de
FliK.
FIGURA 2
Todos los mutantes de Flik fueron secretados y conservaron la habilidad de inducir el cambio en
la especificidad de secreción a la secreción tardía de sustrato, como es evidenciado por los
niveles comparables de flagelina externa FliC y la inducción de un informador genético de
Clase 3
FIGURA 3
Los niveles de flagelación de los mutantes de Flik no fueron significativamente diferentes a los
del tipo salvaje, que tienen 3.6 flagelos por celula, los mutantes tuvieron 3.8, excepto para las
variantes de Flik más cortos 310 y 377.
FIGURA 4
Se purificó complejos del gancho-cuerpo basal (HBB) de las variaciones mutantes de Flik y se
determinó la longitud de los ganchos mediante microscopía electrónica de transmisión. Los
mutantes FliK que varían de 363 a 785 aa de longitud mantuvieron un control estricto de la
longitud del gancho de 42 nm a 135 nm, con un aumento lineal en la longitud del gancho de 0.2
nm por aminoácido insertado.  Los dos mutantes FliK más cortos, FliK 310 y FliK 335 , mostraron
longitudes de gancho parcialmente no controladas, lo que indica que se necesita una longitud
mínima de FliK para un control efectivo de la longitud del gancho.

Microscopio de electrones
Las muestras de gancho se almacenaron a 4 ° C para enderezar los ganchos y facilitar las
mediciones de longitud. Las muestras se tiñeron negativamente con acetato de uranilo acuoso al
2% sobre una película de carbono.