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Códex Medicamentarius Argentino - IV PDF
Códex Medicamentarius Argentino - IV PDF
)$50$&23($
$5*(17,1$
SÉPTIMA EDICIÓN
VOLUMEN
IV
)$50$&23($
$5*(17,1$
SÉPTIMA EDICIÓN
$10$7
Administración Nacional de Medicamentos, Alimentos y Tecnología Médica
,1$0(
Instituto Nacional de Medicamentos
FARMACOPEA
ARGENTINA
SÉPTIMA EDICIÓN
Presidente de la Nación
Dra. Cristina Fernández de Kirchner
SÉPTIMA EDICIÓN
VOLUMEN
IV
&20,6,Ï13(50$1(17(
)$50$&23($$5*(17,1$
&RPLVLyQ3HUPDQHQWHGHOD)DUPDFRSHD$UJHQWLQD
6(&5(7$5Ë$7e&1,&$
92&$/(6
ÍNDICE GENERAL
Consideraciones Generales <590> - Límite de metales pesados
Métodos Generales de Análisis <625> - Métodos de análisis para Gases
Medicinales
<10> - Análisis estadístico de resultados de
ensayos biológicos <635> - Métodos inmunoquímicos
<20> - Análisis térmico <740> - Uniformidad de unidades de
dosificación
<70> - Conductividad
<745> - Vacunas de uso humano
<75> - Conductividad en agua calidad
farmacéutica
<90> - Control microbiológico de productos no Textos de Información General
obligatoriamente estériles <1005> - Agua Calidad Farmacéutica
<225> - Determinación del índice de peróxidos <1013> - Buenas prácticas de dispensación en
<335> - Ensayo de micobacterias la farmacia oficinal comunitaria y
hospitalaria
<336> - Ensayo de micoplasmas
<1025> - Buenas prácticas para la manipulación
<339> - Ensayo de neurovirulencia para
de medicamentos citostáticos
vacunas a virus vivo
endovenosos en centros asistenciales
<345> - Ensayo de Salmonella/fracción
<1027> - Buenas prácticas de preparación de
microsomal (Test de Ames) para
medicamentos magistrales
detección de mutagenicidad
<1030> - Criaderos de pollos libres de
<360> - Ensayo de toxicidad anormal
patógenos especificados para la
<370> - Ensayos de esterilidad producción y control de calidad de las
vacunas
<383> - Ensayos de suturas
<1033> - Cuidados paliativos
<385> - Ensayos en hemoderivados
<1035> - Equivalencia entre medicamentos
<415> - Ensayo para agentes extraños en
vacunas virales <1050> - Formas farmacéuticas
<420> - Envases primarios de plástico <1095> - Polimorfismo
<435> - Envases para productos médicos <1125> - Sustratos celulares para la producción
estériles de vacunas de uso humano
<475> - Esterilización
NUEVAS CONSIDERACIONES GENERALES
18(9$6&216,'(5$&,21(6*(1(5$/(6
La Farmacopea es el texto oficial que codifica Argentina cuando cumple con todos los requisitos
los principios activos, excipientes y productos establecidos en la monografía respectiva.
farmacéuticos y contiene las especificaciones que Los ensayos elegidos se han ideado para
éstos deben cumplir para demostrar su calidad y detectar o determinar las impurezas más
resguardar la salud de la población. significativas y para fijar el contenido límite de
aquellas.
*HQHUDOLGDGHV 'HILQLFLRQHV
Estas consideraciones generales se aplicarán a Medicamento: toda preparación o producto
las monografías, capítulos generales u otros textos farmacéutico empleado para la prevención,
incluidos en esta Farmacopea. diagnóstico y/o tratamiento de una enfermedad o
La expresión “Oficial” significa “de la estado patológico, o para modificar sistemas
Farmacopea Argentina” y se refiere a cualquier fisiológicos en beneficio de la persona a quien se le
título, sustancia, preparación o ensayo incluido en administra.
las monografías y capítulos. Principio activo o droga farmacéutica: toda
Las iniciales FA, acompañando al nombre sustancia química o mezcla de sustancias
oficial en el rótulo de un producto, indica que el relacionadas, de origen natural o sintético, que
mismo cumple con las especificaciones de la poseyendo un efecto farmacológico específico, se
Farmacopea Argentina, aunque esto no constituye emplea en medicina humana.
una certificación por parte de la misma. Especialidad medicinal o farmacéutica: todo
El uso del título de una monografía supone que medicamento, designado por un nombre
la sustancia, preparación o producto así designado convencional, sea o no una marca de fábrica o
se ajusta a las especificaciones de la monografía comercial, o por el nombre genérico que
correspondiente. Tales referencias en los textos de corresponda a su composición y contenido,
la Farmacopea se indican mediante el título de la preparado y envasado uniformemente para su
monografía en letra cursiva. distribución y expendio, de composición
Tanto las monografías como los capítulos cuantitativa definida declarada y verificable, de
generales pueden contener excepciones a estas forma farmacéutica estable y acción terapéutica
Consideraciones Generales, las mismas serán comprobable.
señaladas explícitamente, al igual que el Nombre genérico: denominación de un principio
procedimiento a seguir en cada caso. Para destacar activo o droga farmacéutica o, cuando corresponda,
la existencia de excepciones, se agregará la de una asociación o combinación de principios
expresión: “A menos que se especifique de otro activos a dosis fijas, adoptada por la Autoridad
modo”. Asimismo, en caso de ausencia de una Sanitaria Nacional o, en su defecto, la
excepción explícita, las expresiones deberán denominación común internacional de un principio
interpretarse como se indica en este documento. activo recomendada por la Organización Mundial
Los ensayos y valoraciones descriptos son los de la Salud.
métodos oficiales sobre los cuales se fundamentan Excipiente: es toda sustancia de origen natural o
las especificaciones de la Farmacopea. sintética presente en una preparación farmacéutica
Para evitar repetir instrucciones comunes a un incorporada sin propósito terapéutico.
ensayo determinado, en las monografías, se Producto farmacéutico: es un preparado que
establecen los requisitos en forma abreviada, contiene uno o varios principios activos y
indicando el nombre del capítulo correspondiente excipientes, formulados bajo una determinada
con un número de orden asignado entre los forma farmacéutica. Suele emplearse “preparación
símbolos <y>, como por ej. <100>. Cromatografía, farmacéutica” como sinónimo de “producto
que luego es apropiadamente desarrollado en la farmacéutico”, para referirse tanto al producto a
sección Métodos Generales de Análisis. granel como al producto terminado.
Todas las declaraciones contenidas en las Forma Farmacéutica: Es el producto
monografías, con las excepciones dadas más proveniente de la transformación de un principio
adelante, constituyen normas para las sustancias activo o de una asociación de los mismos mediante
oficiales. Una sustancia es de calidad Farmacopea procedimientos fármacotécnicos, a fin de
conferirles características físicas y morfológicas
particulares para su adecuada dosificación y
conservación, y que faciliten su administración y blanco para todas las valoraciones volumétricas
acción farmacológica. según corresponda (ver 780. Volumetría).
Cuando el resultado deba calcularse con
,QWHUSUHWDFLyQGHORVUHTXLVLWRV referencia a la sustancia seca, se hará uso de las
Las normas farmacopeicas definen las condiciones de secado que se indiquen en el ensayo
características de un producto y establecen los Pérdida por secado en la monografía. Cuando el
ensayos que permiten demostrar que el mismo resultado se calcule con referencia a la sustancia
satisface los requisitos elementales de calidad, anhidra, el contenido de agua será determinado por
exigidos por la Autoridad Sanitaria. el método descripto en la monografía bajo el
Estas normas se aplican en cualquier momento subtítulo Agua.
de la vida útil del producto, desde la elaboración
hasta su fecha de vencimiento. $FWXDOL]DFLRQHV
No debe entenderse que el cumplimiento de las Se considera una actualización total cuando
especificaciones establecidas en la monografía a todo el texto reemplaza al de la edición anterior; por
muestras de un lote de producción asegure el ej., <590>. Límite de metales pesados,
cumplimiento de las normas farmacopeicas de todos identificándose con un asterisco en el índice
los componentes del lote. alfabético (*) y, en el título del texto actualizado, se
Los datos obtenidos a partir de estudios de encontrará la leyenda “Actualización total”. Se
validación del proceso de fabricación y de controles considera una actualización parcial cuando sólo
efectuados durante el proceso pueden dar mayores una parte del texto ha sido modificada,
garantías del cumplimiento de los requisitos de una identificándose con un asterisco en el índice
monografía en particular, que la información alfabético (*) y, en el título del texto actualizado, se
obtenida a partir del examen de un número encontrará la leyenda “Actualización parcial”. En
determinado de unidades de ese lote. este último caso se encontrará subrayado el
Las tolerancias y límites expresados en las fragmento del texto que ha sido actualizado.
definiciones de las monografías son para compensar
las variaciones inevitables durante la preparación ([SUHVLyQGHFRQFHQWUDFLRQHV
del producto y el deterioro normal que se produce Los porcentajes de concentración se expresan de
durante la vida útil del mismo. la siguiente manera:
Cuando se expresan límites en forma numérica, Porcentaje peso en peso (% p/p): expresa el
los límites superior e inferior de un intervalo número de gramos de un soluto en 100 g de
incluyen esos dos valores y todos los valores solución o mezcla.
intermedios. Porcentaje peso en volumen (% p/v): expresa el
Es recomendable para la liberación de lotes, número de gramos de un soluto en 100 ml de
establecer especificaciones más estrictas que las solución, y se utiliza prescindiendo de que el
contempladas bajo el titulo Definición, a fin de que diluyente en cuestión sea agua u otro líquido.
el contenido del producto se encuentre siempre Porcentaje volumen en volumen (% v/v): ex-
dentro de los límites establecidos pese a la caída de presa el número de mililitros de un soluto en 100 ml
título normal que puede ocurrir durante la vida útil de solución.
del producto. Dichas especificaciones para la La expresión porcentaje empleada sin otro
liberación deberían surgir a partir de los datos calificativo significa: porcentaje peso en peso para
obtenidos durante el estudio de estabilidad del mezclas de sólidos y semisólidos, porcentaje peso
producto (ver 1040.Estudios de estabilidad). en volumen para soluciones o suspensiones de
Los límites expresados en las definiciones de las sólidos en líquidos, porcentaje volumen en volumen
monografías y en las especificaciones de los para soluciones de líquidos en líquidos y porcentaje
ensayos, independientemente de que éstos estén peso en volumen para soluciones de gases en
expresados en porcentajes o valores absolutos, son líquidos.
valores significativos hasta el último dígito.
En los procedimientos volumétricos, se 6XVWDQFLDVGH5HIHUHQFLD
establece el peso de la sustancia analizada que Sustancia de Referencia Farmacopea Argentina
equivale a cada mililitro del valorante >SR-FA@ - Material de uniformidad comprobada,
estandarizado. En estos casos, se entiende que el cuya monografía ha sido incluida en la Farmacopea
número de cifras significativas en la concentración Argentina, desarrollado a través de ensayos
del valorante corresponde al número de cifras colaborativos avalados por esta Farmacopea y
significativas en el peso de la sustancia analizada. A.N.M.A.T – I.NA.ME, cuyo empleo se reserva a
Se deberán hacer las correcciones con respecto al ensayos químicos y físicos específicos en los que se
comparan sus propiedades con las de un producto dadas en la monografía respectiva o bajo el título
problema y que posee un grado de pureza adecuado Soluciones volumétricas en Reactivos y Soluciones.
para el uso al que se destina. La sigla (SL) corresponde a Solución Límite e
Cuando una Sustancia de Referencia indica que dicha solución es empleada para ensayos
Farmacopea Argentina no esté disponible, deberá límite.
emplearse aquélla equivalente reconocida por esta
Farmacopea. $JXD
La expresión agua, empleada sin otra
6XVWDQFLDVDX[LOLDUHV
calificación significa Agua purificada y agua libre
Se denomina Sustancia auxiliar a cualquier
de dióxido de carbono, es Agua purificada que ha
sustancia incorporada a las preparaciones oficiales,
sido calentada a ebullición durante al menos
tales como colorantes, conservantes saborizantes.
5 minutos y enfriada en forma tal de evitar la
La misma deberá ser inocua o agregada en una
absorción de dióxido de carbono atmosférico.
proporción que garantice la inocuidad, no tener
Agua purificada estéril - Es el Agua purificada
influencia adversa sobre la seguridad y eficacia
esterilizada. Se emplea en la preparación de formas
terapéutica de los principios activos y no interferir
farmacéuticas líquidas no parenterales en las que se
en los ensayos y valoraciones.
requiera una forma estéril de Agua purificada.
Sustancia oficial es aquella que no contiene
Agua para inyectables - La fuente de agua es
sustancias auxiliares agregadas salvo que se permita
agua potable, previamente purificada y sometida a
específicamente en la monografía correspondiente.
destilación u ósmosis reversa de doble paso. Debe
En este caso, el rótulo deberá indicar los nombres y
cumplir con todos los requisitos de Agua purificada
las cantidades de las sustancias auxiliares
y además con los requisitos del ensayo de
agregadas.
endotoxinas bacterianas (ver 330. Ensayo de
Colorantes: son sustancias auxiliares
endotoxinas bacterianas).
incorporadas a las preparaciones oficiales
Agua estéril para inyectables - Es Agua para
exclusivamente para dar color. Deberán satisfacer
inyectables esterilizada. Se emplea principalmente
las especificaciones establecidas (ver 50.
como solvente de productos parenterales.
Colorantes de uso farmacéutico).
Agua bacteriostática para inyectables - Es Agua
Conservantes: son sustancias auxiliares que se
estéril para inyectables a la cual se le ha agregado
agregan a las preparaciones oficiales para
uno o varios conservantes apropiados. Se utiliza
protegerlas de la contaminación microbiana. La
como solvente de preparados parenterales. Puede
expresión “conservante antimicrobiano apropiado”
envasarse en envases monodosis o multidosis de un
implica que puede agregarse al preparado una
tamaño no mayor a 30 ml.
sustancia auxiliar, siempre que cumplan con las
Agua estéril para irrigación - Es Agua para
especificaciones establecidas (ver 80.
inyectables esterilizada en envases monodosis de
Conservantes).
más de 1 litro destinados a una rápida descarga del
contenido. No necesita cumplir con el ensayo
5HDFWLYRV
650. Partículas en inyectables.
La realización correcta de ensayos y
Agua estéril para inhalación - Es Agua para
valoraciones de esta Farmacopea, así como la
inyectables envasada en envases monodosis no
obtención de resultados reproducibles y confiables,
mayores a 20 ml y esterilizada. Se emplea en
depende de la calidad de los reactivos empleados.
nebulizadores y en la preparación de soluciones
Todos los reactivos requeridos para los ensayos
para nebulizar.
y valoraciones se definen en Reactivos y
Soluciones.
6ROXFLyQILVLROyJLFD
Cuando en las monografías o capítulos
$EUHYLDWXUDV
generales se indique Solución fisiológica emplear
La sigla SR-FA corresponde a Sustancia de
una solución de cloruro de sodio al 0,9 % en agua
referencia de la FA.
purificada.
Las siglas (SC) y (SR) corresponden a Solución
Solución fisiológica estéril - Es una solución de
Colorimétrica y Solución de Reactivo,
cloruro de sodio al 0,9 % en agua para inyectables
respectivamente indicadas en Reactivos y
que cumple con los requisitos de 370. Ensayo de
Soluciones.
Esterilidad.
La sigla (SV) corresponde a Solución
Solución fisiológica para nebulizar - Es una
Volumétrica e indica que tal solución está
solución de cloruro de sodio al 0,90 % en agua
estandarizada de acuerdo con las instrucciones
purificada preparada sin el agregado de
conservantes, conservada en envases monodosis de inodoro, prácticamente inodoro, con un débil olor
hasta 20 ml, con ausencia de gérmenes característico o expresiones semejantes, se aplican
revivificables en un mililitro y en cuyo rótulo se al examen después de la exposición al aire durante
indica: “Solución fisiológica para nebulizar. No 15 minutos de un envase recientemente abierto del
inyectable”. producto (envases que contengan no más de 25 g) o
de una porción de aproximadamente 25 g del
0212*5$)Ë$6 producto (en caso de envases más grandes) que
)yUPXOD4XtPLFD haya sido trasladada de su envase a un cristalizador,
Cuando se conoce la composición química de con una capacidad de aproximadamente 100 ml.
una sustancia oficial, se especifica a título Solo se hará mención a este tipo de características
informativo la fórmula molecular y desarrollada, el cuando la misma sea un elemento relevante en la
peso molecular y el número CAS (Chemical descripción del principio activo.
Abstracts Service). Esta información se refiere a la
sustancia químicamente pura y no se considera un 6ROXELOLGDG
indicador de la pureza del material oficial. El término parcialmente soluble se emplea en el
Cuando se especifica la configuración caso de una mezcla en la que sólo una parte de sus
estereoquímica absoluta, se emplean los sistemas de componentes se disuelve. El término miscible se
designación propuestos por la Unión Internacional emplea para describir un líquido que es miscible en
de Química Pura y Aplicada (IUPAC) R/S y E/Z. todas las proporciones con el solvente indicado.
El nombre químico será otorgado según las Las indicaciones de solubilidad que figuran bajo
reglas propuestas por la Unión Internacional de el epígrafe Caracteres generales se expresan en
Química Pura y Aplicada (IUPAC). términos cuyo significado, referido a una
temperatura entre 15 y 30 qC, es el siguiente:
&DUDFWHUHV*HQHUDOHV
Las afirmaciones comprendidas bajo el subtítulo
Caracteres generales referidas a términos como
,GHQWLILFDFLyQ
Los ensayos de la Farmacopea que figuran
después del subtítulo Identificación no están (QVD\RV\YDORUDFLRQHV
destinados a proporcionar una confirmación Los ensayos y las valoraciones descriptas en
completa de la estructura química o composición esta Farmacopea constituyen los métodos oficiales
del producto; su objeto es confirmar que el producto de análisis. Se podrá emplear ensayos alternativos,
se ajusta a la descripción dada en el rótulo del previamente validados (ver 1130. Validación de
envase. Cuando un producto no satisface los métodos analíticos), si éstos demuestran otorgar
requisitos de un ensayo de identificación descripto, ventajas desde el punto de vista de la exactitud,
indica que el mismo no cumple con las precisión, sensibilidad, selectividad o simplifican el
especificaciones. Otros ensayos o especificaciones procedimiento sin modificar los atributos anteriores.
en la monografía a menudo contribuyen a establecer Sin embargo, en caso de indecisión o litigio, los
o confirmar la identidad del producto ensayado. ensayos descriptos en esta Farmacopea serán los
A menos que se indique lo contrario en la definitivos.
monografía individual, todos los ensayos La concentración de impurezas establecida en
identificatorios son de carácter obligatorio y por ciertos ensayos se expresa entre paréntesis como
ende, necesarios para demostrar que el producto porcentaje o partes por millón (ppm). En el caso
cumple con la descripción dada en el rótulo. que corresponda, el cumplimiento de este ensayo
será necesario para establecer la conformidad de un con ayuda de una fuente luminosa que los ilumine
producto. Cuando corresponda, deberán realizarse lateralmente.
análisis complementarios según se indica más abajo Cuantitativamente y en etapas: cuando se
en Atributos adicionales. indique que una solución debe ser diluida
Los materiales volumétricos, pesas y balanzas cuantitativamente y en etapas, una porción medida
deberán ajustarse a las especificaciones establecidas con exactitud será disuelta en agua u otro solvente
en los capítulos <620>. Materiales volumétricos y en la proporción indicada en uno o más pasos. La
<690>. Pesas y balanzas. elección del material volumétrico a emplearse
Cuando en un ensayo o valoración se indique deberá tener en cuenta los errores relativamente
que se debe examinar una cierta cantidad de grandes que generalmente se asocian a materiales
sustancia o un número exacto de unidades de volumétricos de volumen pequeño (ver
dosificación, la cantidad especificada representa un 620. Materiales volumétricos).
número mínimo que se elige únicamente para Densidad relativa: cuando no se indique lo
facilitar la manipulación analítica. Esto de ninguna contrario, la densidad relativa se calculará como la
manera limita la cantidad total de material a relación entre el peso de un volumen determinado
emplear. de una sustancia en el aire a 25 °C y el peso de un
volumen igual de agua a esa misma temperatura.
3URFHGLPLHQWRV Desecador: la expresión en un desecador
En todos los ensayos descriptos en esta especifica el empleo de un recipiente perfecta-
Farmacopea, se deberá cumplir estrictamente con mente cerrado, de tamaño y forma apropiados, que
las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL). mantenga una atmósfera de bajo contenido de
La utilización de las siguientes expresiones se humedad mediante gel de sílice u otro desecante
refieren a: apropiado.
Blanco: cuando se indique que se deben hacer Filtrar: cuando se indique filtrar, sin otra
las correcciones necesarias por medio de una calificación, se entenderá que el líquido debe ser
determinación con un control, tal determinación se filtrado a través de papel de filtro apropiado o con
hará empleando las mismas cantidades de los un medio equivalente de modo que el filtrado sea
reactivos tratados de igual manera que la solución o claro.
mezcla que contiene la sustancia bajo valoración o Ignición hasta peso constante: significa que
ensayo, pero omitiendo dicha sustancia. deberá continuarse la ignición a 800 ± 25 °C a
Baño de agua: cuando se indique el empleo de menos que se indique de otro modo, hasta que dos
baño de agua, se empleará un baño de agua a pesadas consecutivas no difieran en más de 0,50 mg
ebullición salvo que se indique una temperatura por gramo de sustancia ensayada, haciendo la
distinta. segunda pesada después de un período de
Baño de vapor: cuando se indique el empleo de 15 minutos de ignición adicional.
baño de vapor, podrá emplearse la exposición al Indicador: cuando una solución de reactivo se
vapor vivo fluente u otra forma de calor regulado, a utilice como indicador, se agregarán
una temperatura equivalente a la del vapor fluente. aproximadamente 0,2 ml o 3 gotas de la solución,
Cepas microbianas: cuando se cita una cepa generalmente cerca del punto final, a menos que se
microbiana y se la identifica por el número de indique de otro modo.
catálogo ATCC (American Type Culture Medidas de presión: el término mm Hg
Collection) o de otra colección similar, la cepa empleado en referencia a mediciones de presión se
específica se empleará directamente o, si se refiere al uso de un manómetro apropiado o un
subcultiva, se emplearán no más de cinco pasajes a barómetro calibrado en términos de la presión
partir de la cepa original. ejercida por una columna de mercurio de la altura
Comparación de color: cuando se indique una indicada.
comparación visual de color o de turbidez, deberán Pesar y medir exactamente: las expresiones
emplearse tubos de comparación de fondo plano pesar exactamente alrededor de o medir
(tubos de Nessler) cuyas medidas internas se exactamente alrededor de indican que se debe
correspondan lo más estrechamente posible. Para la tomar una cantidad dentro de 100 ± 10 % del peso o
comparación del color, los tubos en posición volumen especificado. Sin embargo, el peso o
vertical deberán ser observados longitudinalmente a volumen que se tome deberá ser determinado con
lo largo del tubo con una fuente de luz difusa sobre exactitud y el resultado calculado sobre la base de
un fondo blanco, mientras que para la comparación la cantidad que se haya tomado. Se pueden tomar
de turbidez deberán ser observados cantidades proporcionalmente mayores o menores
transversalmente, colocados sobre un fondo oscuro, que los pesos y volúmenes especificados, tanto para
la Sustancia de Referencia como para la sustancia desecación al vacío sobre un desecante, se deberá
en ensayo, siempre que la medida se tome con emplear un desecador al vacío, una pistola para
exactitud y que se ajusten a los pasos siguientes, desecar al vacío u otro instrumento apropiado para
para proporcionar concentraciones equivalentes a este fin.
las descriptas. Expresiones tales como 25,0 ml y
25,0 mg se emplean en relación a medidas de $75,%8726$',&,21$/(6
volumen o de peso e indican que la cantidad debe
ser medida o pesada exactamente dentro de los Además de cumplir los requisitos de los ensayos
límites establecidos en los capítulos de Sustancias relacionadas, Pureza cromatográfica y
<620>. Materiales volumétricos o <690>. Pesas y Límite de impurezas, descriptos en las monografías
balanzas. correspondientes, el análisis de las materias primas
Pipetas: cuando se indique el uso de una pipeta deberá complementarse mediante la búsqueda de
para medir un volumen, aquélla deberá cumplir con impurezas de síntesis y sustancias relacionadas
los requisitos establecidos en el capítulo <620>. según su origen.
Materiales volumétricos y deberá emplearse de
manera que el error no exceda el límite establecido 0e72'26*(1(5$/(6
para una pipeta del tamaño especificado. Cuando '($1È/,6,6
se especifica el empleo de una pipeta, ésta puede Cada capítulo general es designado por un
sustituirse por una bureta apropiada que cumpla con número de orden seguido del nombre del mismo.
los requisitos especificados en <620>. Materiales Estos capítulos que incluyen los requerimientos
volumétricos. generales para ensayos y valoraciones son
Secado hasta peso constante: significa que numerados de 1 a 990 y los capítulos que forman
deberá continuarse el secado a menos que se los textos de información general son numerados a
indique de otro modo, hasta que dos pesadas partir de 1000.
consecutivas no difieran en más de 0,50 mg por
gramo de sustancia ensayada, haciendo la segunda 81,'$'(6'(327(1&,$
pesada después de una hora adicional de secado; %,2/Ï*,&$
según la metodología establecida en la monografía
correspondiente. Para las sustancias que no puedan ser
Soluciones: la expresión 1 en 10 significa que 1 caracterizadas completamente por medios químicos
parte en volumen de un líquido debe diluirse con, o o físicos, podrá ser necesario expresar la actividad
1 parte en peso de un sólido debe disolverse en en unidades de potencia biológica.
suficiente solvente para que el volumen de la Las unidades de potencia biológica definidas
solución final sea de 10 partes en volumen. por la Organización Mundial de la Salud (OMS) a
La expresión 10:6:1 significa que los números través de Estándares Biológicos Internacionales y
respectivos de partes, en volumen, de los líquidos Preparaciones Biológicas de Referencia
señalados deberán mezclarse, a menos que se Internacionales son denominadas Unidades
indique de otro modo. Internacionales (UI). Las unidades definidas en la
La expresión partes por millón (ppm) sin otra FA son Unidades Internacionales y las monografías
precisión, se refiere a peso con respecto a un millón correspondientes se refieren a éstas.
de partes en peso. Para los antibióticos cuya potencia se expresa
Solventes: cuando no se menciona en unidades, éstas son definidas por las
explícitamente el solvente, se entiende que la correspondientes Sustancias de referencia SR-FA.
muestra es disuelta en agua. Cada unidad es en general establecida, basada en la
Temperaturas: todas las temperaturas en esta definición de la Unidad Internacional de la OMS.
Farmacopea se expresan en grados centígrados Sin embargo, para la mayoría de los antibióticos no
(Celsius) y todas las mediciones se hacen a 25 °C, a son necesarias las unidades biológicas de potencia y
menos que se especifique de otro modo. su actividad se expresa en unidades métricas
Tiempo límite: al efectuar ensayos y (microgramos o miligramos) en función de
valoraciones se aguardará 5 minutos para que se sustancias químicamente definidas descriptas en las
produzca la reacción, a menos que se especifique de monografías correspondientes.
otro modo.
Vacío: el término al vacío especifica la (/$%25$&,Ï1
exposición a una presión menor de 20 mmHg, a '(352'8&726)$50$&e87,&26
menos que se indique de otro modo. Cuando se La elaboración de productos farmacéuticos
especifique en la monografía correspondiente la deberá realizarse cumpliendo con la normativa
vigente de Buenas prácticas de fabricación, la calidad de los mismos. Este concepto debe
establecidas por la Autoridad Sanitaria y el extenderse a la distribución y transporte.
producto resultante deberá cumplir con los Las sustancias y las preparaciones descriptas
requisitos técnicos establecidos en esta Farmacopea. deberán almacenarse a temperatura ambiente, a
menos que se especifique de otro modo.
&216(59$&,Ï1 El empleo de las siguientes expresiones
descriptas en esta Farmacopea se refieren a:
(QYDVHV Almacenar en un freezer: corresponde al
Los requisitos farmacopeicos para el empleo de
almacenamiento del producto a una temperatura
envases se especifican en las monografías
establecida entre - 25 y – 10 °C.
correspondientes.
Almacenar en un sitio frío: corresponde al
El empleo de las siguientes expresiones
almacenamiento del producto a una temperatura que
descriptas en esta Farmacopea se refieren a:
no exceda los 8 °C. Una heladera/refrigerador es
Envase con cierre inviolable: es aquél provisto
un sitio frío con una temperatura que se mantiene
de un dispositivo especial que revela
termostáticamente entre 2 y 8 °C.
inequívocamente si ha sido abierto.
Almacenar en un sitio fresco: corresponde al
Envase inactínico: es aquél que protege el
almacenamiento del producto a temperatura entre 8
contenido de los efectos de la luz, gracias a las
y 15 °C. Las cámaras frías permiten obtener estas
propiedades específicas de los materiales con que
condiciones.
está compuesto.
Almacenar a temperatura ambiente:
Envase bien cerrado: es el que evita el ingreso
corresponde al almacenamiento a temperatura entre
de sólidos extraños y la pérdida del contenido bajo
15 y 30 °C. Este concepto esta relacionado al
las condiciones usuales de manejo,
almacenamiento en depósitos de laboratorios de
almacenamiento, distribución y transporte.
especialidades medicinales y distribuidoras.
Envase de cierre perfecto: es aquél que protege
Almacenar a temperatura ambiente controlada:
el contenido de la contaminación con sustancias
corresponde al almacenamiento de un producto a
extrañas y evita la entrada de humedad, impidiendo
temperatura termostáticamente controlada entre 20
la efervescencia, delicuescencia o evaporación bajo
y 25 °C.
las condiciones usuales de manejo,
En algunas monografías pueden indicarse las
almacenamiento, transporte, manteniendo su
siguientes expresiones:
condición de cierre perfecto después de su
“Evitar almacenar en ambientes cálidos”
manipulación.
definiendo cálido a temperatura entre 30 y 40 °C.
Envase hermético: es aquel que no permite la
“Evitar el calor excesivo”, definiendo calor
entrada de sólidos, líquidos o gases en las
excesivo a temperatura superior a 40 °C.
condiciones usuales de manejo, almacenamiento,
“Evitar el congelamiento” en los casos en que
distribución y transporte.
el mismo ocasionara la pérdida de potencia o
Envase seguro para niños: es aquel que posee
cambio en las características fisicoquímicas de un
un mecanismo tal que dificulta su apertura directa.
producto.
Dichos envases sólo pueden ser abiertos luego de
Indicaciones generales:
recibir las instrucciones pertinentes.
- No deben retirarse los medicamentos de
Envase monodosis: es aquel que está diseñado
sus envases primario y secundario.
para contener una cantidad de sustancia destinada a
- No deben exponerse los productos al sol ni
administrarse en una única dosis, inmediatamente
a las temperaturas extremas.
después de abierto.
- Se debe evitar almacenar los
Envase multidosis: es aquel que permite la
medicamentos en ambientes húmedos.
extracción de porciones sucesivas del contenido sin
- No deben almacenarse medicamentos en
cambios en la potencia, calidad o pureza de la
heladera excepto que dicha condición se
porción remanente.
encuentre indicada en el rótulo, prospecto
y/o envase.
&RQGLFLRQHVGHDOPDFHQDPLHQWR
El almacenamiento de productos debe ser
5278/$'2
realizado en condiciones adecuadas de temperatura,
humedad e iluminación de acuerdo con las El rótulo de cada producto deberá establecer el
instrucciones del fabricante, de manera de no contenido del o de los principios activos expresados
afectar adversamente de forma directa o indirecta, en las monografías.
Cantidad de principio activo por unidad de producto, durante el cual el mismo deberá cumplir
dosificación: la potencia de un producto se expresa con los requisitos establecidos en la presente
en el rótulo del envase como microgramos, Farmacopea, siempre que se conserve en las
miligramos, gramos, porcentaje del ingrediente, o condiciones de almacenamiento establecidas.
unidad internacional terapéuticamente activa Todos los productos deberán exhibir la fecha de
presente en la preparación. vencimiento en el rótulo y en su envase primario, la
Las formas farmacéuticas como cápsulas, cual es asignada a través de estudios de estabilidad
comprimidos u otras formas de dosificación realizados para esa formulación en un envase
deberán rotularse de modo que expresen la cantidad predefinido y autorizado por la Autoridad Sanitaria.
de cada principio activo contenido en cada unidad Cuando la fecha de vencimiento se indique como
de dosificación. Mes/Año, la misma incluye hasta el último día del
En el caso de líquidos de administración oral o mes indicado.
sólidos para reconstituir, deberán rotularse en
términos, como por ej., cada 5 mililitros del líquido 81,'$'(6'(/6,67(0$
o del preparado resultante. ,17(51$&,21$/6,<(48,9$/(1&,$
Rotulado de electrolitos: la concentración y &21275$681,'$'(6'(0(','$
dosificación de electrolitos para terapias de re-
posición deberá especificarse en miliequivalentes- Los nombres y símbolos empleados en la
gramo (mEq). Farmacopea Argentina para las unidades de
Rotulado del contenido alcohólico: el con- medición son los del Sistema Internacional de
tenido de alcohol en una preparación líquida deberá Unidades (SI), establecido por la Conferencia
especificarse como % v/v de etanol. General de Pesas y Medidas. Comprende tres
Fecha de vencimiento: la fecha de vencimiento clases de unidades: unidades básicas, unidades
identifica el fin del período de vida útil del derivadas y unidades complementarias.
Cantidad Unidad
Nombre Símbolo Nombre Símbolo
Longitud l metro M
Masa m kilogramo Kg
Tiempo t segundo S
Corriente eléctrica I amperio A
Temperatura termodinámica T kelvin K
Cantidad de sustancia n mol Mol
Intensidad luminosa Iv candela Cd
8QLGDGHVXWLOL]DGDVFRQHO6,
Cantidad Unidad Valor en unidades SI
Nombre Símbolo
Minuto min 1 min = 60 s
Tiempo Hora h 1 h = 60 min = 3.600 s
Día d 1d = 24 h = 86.400 s
Ángulo plano Grado ° 1° = (S/180) rad
Volumen Litro l 1 l = 1 dm3 = 10-3 m3
Masa Tonelada t 1 t = 103 kg
Frecuencia de giro revolución por minuto rpm 1 rpm = (1/60) s-1
0~OWLSORV\VXEP~OWLSORVGHFLPDOHVGHODVXQLGDGHV
Factor Prefijo Símbolo Factor Prefijo Símbolo
18 -1
10 exa E 10 deci d
15 -2
10 peta P 10 centi c
1012 tera T 10-3 mili m
9 -6
10 giga G 10 micro µ
6 -9
10 mega M 10 nano n
3 -12
10 kilo k 10 pico p
102 hecto h 10-15 femto f
101 deca da 10-18 atto a
8QLGDGHV6,XWLOL]DGDVHQODFarmacopea Argentina\VXHTXLYDOHQFLDFRQRWUDVXQLGDGHV
Cantidad Unidad
Conversión de otras unidades
Expresión en Expresión en en unidades SI
Nombre Símbolo Nombre Símbolo
unidades SI básicas otras unidades SI
Número de onda Q uno por metro 1/m m-1
micrómetro µm 10-6m
Longitud de onda O
nanómetro Nm 10-9m
Frecuencia Q hertz Hz s-1
Área A, S metro cuadrado m2 m2
Volumen V metro cúbico m3 m3 1 ml = 1 cm3 = 10-6m3
Densidad kilogramo por
U metro cúbico
kg/m3 kg m-3 1g/ml=1g/cm3=103kg/m3
(concentración de masa)
Velocidad v metro por segundo m/s m s-1
1 dina=1g cm s-2=105N
Fuerza F newton N m kg s2
1 kp = 9,80665 N
1 dina/cm2 =10-1Pa=10-1 N m-2
1atm = 101.325 Pa = 101,325 kPa
1 bar = 105 kPa = 0,1 Mpa
Presión P pascal Pa m-1 kg s-2 N m-2
1 mmHg = 133,322387 Pa
1 Torr = 133,322368 Pa
1 psi = 6,894757 kPa
1 P = 10-1 Pa s = 10-1 N s m2
Viscosidad absoluta K pascal segundo Pa s m-1 kg s-1 N s m-2
1 cP = 1 mPa s
3 -1
metro cuadrado Pa s m kg
Viscosidad cinemática Q m2/s m2 s-1 1 St = 1 cm2 s-1 = 10-4 m2 s-1
por segundo N m s kg-1
1 erg = 1 cm3 g s-2 = 1 dina cm = 10-1 J
Energía W joule J m2 km s-2 Nm
1 cal = 4,1868 J
-1
Potencia Nms 1 erg/s = 1 dina cm s-1 = 10-7 W =
P watio W m2 km s-3 -1
(flujo de radiación) Js 10-7 N m s-1 = 10-7 J s-1
Dosis absorbida
D gray Gy m2 s-2 J kg-1 1 rad = 10-2 Gy
(energía radiante)
Potencial eléctrico
U volt V m2 kg s-3 A-1 W A-1
(fuerza electromotriz)
Resistencia eléctrica R ohm : m2 kg s-3 A-2 V A-1
Cantidad de electricidad Q coulomb C As
Actividad de un A becquerel Bq s-1 1 Ci = 37u109 Bq = 37u10-9 s-1
radionuceído
Concentración molar M molaridad mol/dm3 103 mol m-3 1 mol/l = 1 M = 1 mol/dm3 = 103 mol m-3
MÉTODOS GENERALES DE ANÁLISIS
$1È/,6,6 (67$'Ë67,&2 '( 5(68/7$'26 '( (16$<26
%,2/Ï*,&26
CONTENIDOS
,1752'8&&,Ï1
'LVHxRJHQHUDO\SUHFLVLyQ
$/($725,=$&,Ï1(,1'(3(1'(1&,$'(/2675$7$0,(1726,1',9,'8$/(6
(16$<2648('(3(1'(1'(5(638(67$6&8$17,7$7,9$6
0RGHORVHVWDGtVWLFRV
3.1.1 Principios generales
3.1.2 Ensayos de rutina
3.1.3 Cálculos y restricciones
0RGHORGHOtQHDVSDUDOHODV
3.2.1 Introducción
3.2.2 Diseño del ensayo
3.2.2.1 Diseño completamente aleatorizado
3.2.2.2 Diseño en bloques aleatorizados
3.2.2.3 Diseño cuadrado latino
3.2.2.4 Diseño cruzado
3.2.3 Análisis de varianza
3.2.4 Criterios de validez
3.2.5 Estimación de la potencia y límites de confianza
3.2.6 Valores perdidos
0RGHORGHUHODFLyQGHSHQGLHQWHV
3.3.1 Introducción
3.3.2 Diseño del ensayo
3.3.3 Análisis de varianza
3.3.3.1 Diseño (hd + 1)
3.3.3.2 Diseño (hd)
3.3.4 Criterios de validez
3.3.5 Estimación de la potencia y límites de confianza
3.3.5.1 Diseño (hd + 1)
3.3.5.2 Diseño (hd)
(16$<2648('(3(1'(1'(5(638(67$6&8$17$/(6
,QWURGXFFLyQ
0pWRGRGHSURELWRV
4.2.1 Tabulación de resultados
4.2.2 Criterios de validez
4.2.3 Estimación de la potencia y límites de confianza
4.2.4 Ensayos no válidos
0pWRGRGHORJLWRV
2WUDVIRUPDVGHODFXUYD
'RVLVPHGLDQDHIHFWLYD
(-(03/26
0RGHORGHOtQHDVSDUDOHODV
5.1.1 Ensayo múltiple de tres dosis con diseño completamente aleatorizado
5.1.2 Ensayo múltiple de cinco dosis con diseño completamente aleatorizado
5.1.3 Ensayo de dos dosis con diseño de cuadrado latino y sin replicación
0RGHORGHUHODFLyQGHSHQGLHQWHV
5.2.1 Ensayo completamente aleatorizado con diseño (1,3,3)
5.2.2 Ensayo completamente aleatorizado con diseño (0,4,4,4)
&20%,1$&,Ï1'(5(68/7$'26'((16$<26
,QWURGXFFLyQ
&RPELQDFLyQSRQGHUDGDGHUHVXOWDGRVGHHQVD\RV
6.2.1 Cálculo de los coeficientes de ponderación
6.2.2 Homogeneidad de las estimaciones de potencia
6.2.3 Cálculo de la media ponderada y límites de confianza
6.2.4 Media ponderada y límites de confianza basados en la variación intra e inter ensayo
&RPELQDFLyQQRSRQGHUDGDGHUHVXOWDGRVGHHQVD\RV
(MHPSORGHSRWHQFLDPHGLDSRQGHUDGD\OtPLWHVGHFRQILDQ]DGHHQVD\RVGHOtQHDVSDUDOHODV
(MHPSORGHSRWHQFLDPHGLDSRQGHUDGD\OtPLWHVGHFRQILDQ]DGHHQVD\RVGHUHODFLyQGHSHQGLHQWHV
FRQLJXDOSRWHQFLDVXSXHVWD
7$%/$
'LVWULEXFLyQF
'LVWULEXFLyQt
'LVWULEXFLyQF2
'LVWULEXFLyQ)
*/26$5,2'(6,0%2/26
,1752'8&&,Ï1
Este capítulo proporciona una guía para el diseño de los ensayos biológicos especificados en la Farmacopea
Argentina (FA) y para el análisis de sus resultados. Puede ser empleado por personas cuya especialidad no es la
estadística pero tienen la responsabilidad del análisis e interpretación de resultados de estos ensayos a menudo
sin la ayuda y consejo de un estadístico. Los métodos de cálculo descriptos en el presente capítulo no son obliga-
torios para analizar los ensayos biológicos que constituyen en sí mismos una parte obligatoria de la FA. Pueden
usarse métodos alternativos siempre que no sean menos confiables que los descriptos en este documento. Existe
una gran variedad de programas de computación disponibles y pueden ser útiles dependiendo de la disponibilidad
y de la habilidad del analista.
Se debería asegurar el asesoramiento de un experto en estadística cuando: la investigación o desarrollo de
nuevos productos requiera un adecuado diseño y un análisis estadístico específico; cuando se requiera analizar
amplias curvas dosis-respuesta no lineales, por ejemplo en inmunoensayos; o cuando no se puedan cumplimentar
las restricciones impuestas al diseño en este capítulo, por ejemplo igual número de dosis igualmente espaciadas.
• 'HVFRQRFLGR
• •
• •
•
Respuesta\
•
• •
• •
•
•
•
•
ln dosis (x)
)LJXUD,0RGHORGHOtQHDVSDUDOHODVSDUDXQHQVD\R
>NOTA:DORODUJRGHOWH[WRVHXWLOL]DUiHOORJDULWPRQHSHULDQROQ'RQGHDSDUH]FDHOWpUPLQR³DQWLOR
JDULWPR´VLJQLILFDODex. Sin embargo, los Briggs o logaritmos “comunes” (log o log10) pueden ser igualmente
empleados. En este caso el antilogaritmo correspondiente es 10x ].
Para que un ensayo sea satisfactorio la potencia asumida de la preparación desconocida debe estar próxima a
la verdadera potencia. Sobre el supuesto de esta potencia asumida y la potencia asignada del estándar se prepa-
ran dosis equipotentes (si es posible), esto es, que las dosis correspondientes del estándar y del desconocido se
espera que den la misma respuesta. Si no se dispone de información sobre la potencia asumida, se realizan ensa-
yos preliminares sobre un amplio rango de dosis para determinar el intervalo en el que la curva es lineal.
Cuanto más próxima esté la potencia estimada de una preparación desconocida a la potencia asumida tanto
más próximas estarán las dos rectas, para lo cual deberán dar igual respuesta a igual dosis. La distancia horizon-
tal entre las líneas representa la exactitud de la potencia estimada con respecto a la potencia asumida. A mayor
distancia entre las dos líneas habrá menor exactitud en la asignación de la potencia asumida. Si la línea corres-
pondiente a la preparación desconocida está situada a la derecha de la línea del estándar, la potencia asumida
estará sobrestimada y los cálculos indicarán una potencia estimada inferior a la potencia asumida. De la misma
manera, si la línea de la preparación desconocida está situada a la izquierda de la línea del estándar, la potencia
asumida estará subestimada y los cálculos indicarán una potencia estimada superior a la potencia asumida.
(dosis 2)
I ln ln dosis 2 ln dosis 1 (3.2.5.-1)
(dosis 1)
La pendiente común b, para ensayos con d dosis de cada preparación, se obtiene a partir de la fórmula
H L ( L S LT ...)
b
I n h (3.2.5.-2)
El logaritmo de la relación de potencia de una preparación desconocida, por ejemplo T, es M T'
PT PS
M T' (3.2.5.-3)
d b
La potencia estimada es una estimación puntual de la verdadera potencia y los límites de confianza pueden
calcularse por la fórmula (3.2.5.-4)
M T' sup
CM T' r (C 1)(CM T'2 2V ) (3.2.5.-4)
M T' inf
SC reg
V (3.2.5.-6)
b2d n
Los valores de t se obtienen a partir de la Tabla 8.2 para p = 0,05 y grados de libertad igual a los del error re-
sidual.
La potencia estimada y los límites de confianza, asociados a ella, se calculan multiplicando los antilogarit-
mos de M T' ; M T' superior y M T' inferior por la potencia supuesta AT.
Si las soluciones existentes no son equipotentes en base a potencias asumida y asignada es necesario un factor
de corrección.
3.2.6 Valores perdidos
En un ensayo equilibrado, un accidente sin ninguna relación con los tratamientos aplicados puede llevar a la
pérdida de una o más respuestas, por ejemplo debido a la muerte de un animal. Si se considera que el accidente
no está relacionado de ninguna manera con la composición de la preparación administrada, los cálculos exactos
pueden aún realizarse pero las fórmulas son necesariamente más complicadas y solamente se pueden dar dentro
del marco de trabajo de los modelos lineales generales. No obstante, existe un método aproximado que mantiene
la simplicidad del diseño equilibrado sustituyendo la respuesta perdida por un valor calculado. La pérdida de
información se tiene en cuenta disminuyendo los grados de libertad de la suma total de cuadrados y para el error
residual en una unidad y empleando una de las fórmulas proporcionadas más adelante para el valor perdido. Se
debe tener en mente que éste es sólo un método aproximado y que debe ser preferido el método exacto.
Si se pierde más de una información se puede emplear la misma fórmula. El procedimiento consiste en hacer
una estimación grosera para todos los valores perdidos excepto uno y emplear la propia fórmula apropiada para
éste, empleando todos los valores restantes incluidas las estimaciones groseras. Incluir el valor calculado. Con-
tinuar de forma similar calculando un valor para la primera aproximación grosera. Después de calcular todos los
valores perdidos de la misma manera se repite el ciclo completo desde el principio, empleando en cada cálculo el
valor estimado o calculado más reciente para todas las respuestas a las que se está aplicando la fórmula. Se con-
tinúa hasta que dos ciclos consecutivos dan los mismos valores, normalmente la convergencia es rápida.
Siempre que el número de valores reemplazados sea pequeño con relación al número total de observaciones
en el experimento completo (digamos inferior al 5 %), la aproximación implicada en este reemplazo y la reduc-
ción de grados de libertad por el número de valores perdidos así reemplazados es normalmente bastante satisfac-
toria. Sin embargo, el análisis debe ser interpretado con gran cuidado, especialmente si existe una preponderan-
cia de valores perdidos en un tratamiento o bloque, y se debe consultar a un especialista en estadística si se en-
cuentra alguna característica inusual.
Diseño completamente aleatorizado.
En un ensayo completamente aleatorizado, el valor perdido puede ser sustituido por la media aritmética de las
otras respuestas al mismo tratamiento.
Diseño en bloques aleatorizados.
El valor perdido y' se obtiene aplicando la ecuación:
n B' k T 'G '
y' (3.2.6.-I)
(n 1)(k 1)
en la que B ' es la suma de las respuestas del bloque que contiene el valor perdido, T ' es el total del tratamiento
correspondiente y G ' es la suma de todas las respuestas registradas en el ensayo.
Diseño en cuadrado latino.
El valor perdido y' se obtiene a partir de:
k ( B 'C 'T ' ) 2G '
y'
(k 1)(k 2) (3.2.6.-II)
donde B' y C ' son las sumas de las respuestas en la fila y columna que contiene el valor perdido. En este caso
k = n.
Diseño cruzado.
Cuando accidentalmente se produce una pérdida de valores en un diseño cruzado, se debe consultar un libro
de estadística (por ejemplo, D. J. Finney, ver Sección 10), ya que las fórmulas apropiadas dependen de las com-
binaciones particulares de tratamientos.
3.3 Modelo de relación de pendientes
3.3.1 Introducción
Este modelo es apropiado, por ejemplo, para algunos ensayos microbiológicos cuando la variable indepen-
diente es la concentración de un factor de crecimiento esencial por debajo de la concentración óptima del medio.
El modelo se ilustra en la Figura 3.3.1.-I
•
•
(VWiQGDU
•
•
• •
'HVFRQRFLGR
Respuesta (y)
•
•
•
•
• •
• •
••
•
•
•
•
•
dosis (x)
)LJXUD,0RGHORGHUHODFLyQGHSHQGLHQWHVSDUDXQGLVHxRu
Las dosis se representan en el eje de abscisas y las respuestas se representan en el eje de ordenadas. Las res-
puestas individuales a cada tratamiento se señalan con puntos negros. Las dos líneas son las relaciones dosis-
respuesta calculadas para la preparación estándar y para la desconocida bajo el supuesto de que ambas se cortan
en el cero de dosis. A diferencia del modelo de líneas paralelas, las dosis no se transforman a logaritmos.
Al igual que en el caso de un ensayo basado en el modelo de líneas paralelas, es importante que la potencia
asumida esté cerca de la verdadera potencia y preparar diluciones equipotentes de las preparaciones desconocida
y del estándar (si es posible). Cuanto más próxima esté la potencia asumida del desconocido a la verdadera po-
tencia, más cerca estarán las dos líneas. La relación de las pendientes representa la “verdadera” potencia del
desconocido, relativa a su potencia asumida. Si la pendiente de la preparación desconocida es mayor que la del
estándar, la potencia ha sido subestimada y los cálculos indicarán una potencia estimada superior a la potencia
asumida. De la misma manera, si la pendiente del desconocido es menor que la del estándar, la potencia ha sido
sobrestimada y los cálculos indicarán una potencia estimada inferior a la potencia asumida.
En un ensayo todas las respuestas deben ser examinadas para que satisfagan las condiciones 1, 2 y 3 de la
Sección 3.1. El análisis de varianza que ha de desarrollarse rutinariamente se describe en la Sección 3.3.3, por lo
que el cumplimiento de las condiciones 4B y 5B de la Sección 3.1 puede ser examinado.
Tabla 3.3.3.1.-I.
Fórmulas aplicables al modelo de Relación de pendientes con d dosis para cada preparación y un blanco
Estándar Preparación Preparación
T U, etc
Respuesta media de la dosis menor S1 T1 U1
Respuesta media de la segunda dosis S2 T2 U2
… … …
Respuesta media de la dosis mayor Sd Td Ud
Total de la preparación PS = S1+S2+…+Sd PT = T1+T2+…+Td PU = U1+U2+…+Ud
Contraste lineal LS =1S1+2S2+…+dSd LT = 1T1+2T2+…+dTd LU = 1U1+2U2+…+dUd
Valor de la intersección aS = (4d + 2)PS - 6LS aT = (4d + 2)PT - 6LT aU = (4d + 2)PU - 6LU
Valor de la pendiente bS =2LS - (d + 1)PS bT = 2LT - (d + 1)PT bU = 2LU - (d + 1)PU
2 2 2 2
Valor del tratamiento GS =S1 + …+ Sd GT =T1 + …+ Td GU = U12 + …+ Ud2
2 2 2 2 2 2
PS 3b PT 3b PU 3 b
No linealidad
) JS GS 3 S JT GT 3 T JU GU 3 U
d d d d d d d d d
)
No calculado para ensayos de dos dosis
(*)
No se calcula para el diseño completamente aleatorizado.
(**)
Sólo se calcula para el diseño Cuadrado Latino.
(***)
Depende del tipo de diseño.
3.3.3.2 Diseño (hd)
Las fórmulas son básicamente las mismas que las empleadas para el diseño (hd + 1), pero existen algunas pe-
queñas diferencias.
x B es descartado en la totalidad de las fórmulas.
x K n( PS PT ...)
2
hd
x SCblanco se elimina del análisis de varianza.
x El número de grados de libertad para los tratamientos se transforma en hd – 1.
x El número de grados de libertad del error residual y la varianza total se calcula de la forma descripta para
el modelo de líneas paralelas (ver Tabla 3.2.3.-IV)
La validez del ensayo, la potencia y el intervalo de confianza se determinan como se describe en las Seccio-
nes 3.3.4 y 3.3.5.
la cual ha de ser multiplicada por AT, la potencia asumida de la preparación a ensayar, para determinar la potencia
estimada RT. Si el paso entre dosis adyacentes no fuera idéntico para el estándar y la preparación desconocida, la
potencia tiene que ser multiplicada por IS /IT. Nótese que a diferencia del análisis de líneas paralelas, no se calcu-
lan antilogaritmos.
El intervalo de confianza para R'T se calcula a partir de
2
Donde b' S
C
b' S s t V1
2 2 2
y K'= (C – 1) V2
V1 y V2 están relacionados con la varianza y covarianza del numerador y del denominador de R'T. Se pueden
obtener a partir de
6 ª 1 3 º
V1 « » (3.3.5.1.-5)
n(2d 1) ¬ d (d 1) 2(2d 1) hd (d 1) ¼
3d (d 1)
V2 (3.3.5.1.-6)
(3d 1)(d 2) hd (d 1)
6 ª 1 3 º
V1 « » (3.3.5.2.-2)
nd (2d 1) ¬ d 1 h(d 1) ¼
3(d 1)
V2 (3.3.5.2.-3)
3(d 1) h(d 1)
(16$<2648('(3(1'(1'(5(638(67$6&8$17$/(6
4.1 Introducción
En ciertos ensayos es imposible o excesivamente laborioso medir el efecto sobre cada unidad experimental en
una escala cuantitativa. En cambio, un efecto (respuesta) tal como la muerte o síntomas de hipoglucemia, se
pueden observar como que “ocurren” o “no ocurren” en cada unidad y el resultado depende del número de uni-
dades en las cuales ocurre. Tales ensayos se llaman cuantales o del todo-o-nada.
La situación es muy similar a lo descripto para ensayos cuantitativos en la Sección 3.1, pero en lugar de n
respuestas separadas para cada tratamiento se registra un valor único, esto es, la fracción de unidades en cada
grupo de tratamiento que muestra una respuesta. Cuando estas fracciones son representadas frente al logaritmo
de las dosis la curva resultante tiende a ser sigmoidea más que lineal. Se emplea una función matemática que
represente esta curvatura sigmoidea para estimar la curva dosis-respuesta. La función más comúnmente emplea-
da es la función de distribución normal acumulada. Esta función tiene ventajas teóricas y es quizá la mejor elec-
ción si la respuesta es un reflejo de la tolerancia de las unidades. Si la respuesta tiende más a depender de un
proceso de crecimiento, se prefiere el modelo de distribución logística, aunque entre los dos modelos la diferen-
cia en el resultado es muy pequeña.
Los estimadores de máxima verosimilitud de la pendiente y localización de las curvas se pueden determinar
únicamente aplicando un procedimiento iterativo. Existen muchos procedimientos que conducen al mismo resul-
tado, pero difieren en eficiencia debido a la velocidad de convergencia. Uno de los métodos más rápidos es la
optimización directa de la función de máxima verosimilitud, lo cual puede ser fácilmente realizado con progra-
mas de computación que contengan un procedimiento interno elaborado con esta finalidad. Desafortunadamente,
la mayoría de estos procedimientos no proporcionan una estimación del intervalo de confianza y la técnica de
obtención es demasiado complicada para ser descripta aquí. La técnica descripta a continuación no es la más
rápida pero ha sido elegida por su simplicidad comparada con las otras alternativas. Puede ser empleada en en-
sayos en los que una o más preparaciones se comparan al estándar en los que además han de cumplimentarse las
siguientes condiciones:
1) La relación entre el logaritmo de la dosis y la respuesta se puede representar por una curva de distribu-
ción normal acumulada.
2) Las curvas para el estándar y para la preparación muestra son paralelas, es decir, tienen una forma idén-
tica y pueden diferir solamente en su localización horizontal.
3) En teoría, naturalmente no hay respuesta a dosis extremadamente bajas y no hay respuesta a dosis ex-
tremadamente altas.
4.2 Método de probitos
La curva sigmoidea se puede transformar en una recta sustituyendo cada respuesta, esto es la proporción de
respuestas positivas por grupo, por el correspondiente valor de la distribución normal estándar acumulada. Este
valor, a menudo llamado“normito”, toma valores teóricos entre - f a + f. Tiempo atrás se proponía añadir 5 a
cada normito para obtener “probito”. Esto facilitaba los cálculos hechos a mano ya que se evitaban los valores
negativos. Con la llegada de las computadoras la necesidad de sumar 5 a los normitos ha desaparecido. El térmi-
no “método de normitos” sería más apropiado para el método descripto a continuación. No obstante, ya que el
termino “análisis de probitos” está tan ampliamente difundido se mantendrá dicho término en el texto por razones
históricas.
Una vez que las respuestas han sido linealizadas, debiera ser posible aplicar el análisis de líneas paralelas co-
mo se describe en la Sección 3.2. Desafortunadamente, la validez de condición de homogeneidad de la varianza
para cada dosis no se cumple. La varianza es mínima para normito = 0 y crece para valores tanto positivos como
negativos del normito. Por tanto, es necesario dar más peso a las respuestas en la parte media de la curva y me-
nos peso en las partes más extremas de la misma. Este método, el análisis de varianza, la estimación de la poten-
cia y del intervalo de confianza se describen a continuación.
4.2.1 Tabulación de resultados
La Tabla 4.2.1.-I se emplea para introducir datos en las columnas indicadas por números:
(1) Dosis del estándar o de la preparación desconocido
(2) Número n de unidades sometidas a ese tratamiento.
(3) Número de unidades r que dan respuesta positiva al tratamiento.
(4) Logaritmo x de la dosis.
(5) Proporción p = r / n de respuestas positivas por grupo.
El primer ciclo empieza aquí.
(6) La columna Y se completa con ceros en la primera iteración.
(7) El valor correspondiente a ) = )(Y) de la función de distribución normal estándar acumulada
(ver Tabla 7.4).
Las columnas (8) a (10) se calculan con las siguientes fórmulas:
e Y
2
/2
(8) Z (4.2.1.-1)
2S
n z2
(10) w (4.2.1.-3)
) )2
Las columnas (11) a (15) se pueden calcular fácilmente a partir de las columnas (4), (9) y (10) como wx, wy,
wx2, wy2 y wxy respectivamente y la sumatoria de cada una de las columnas (10) a (15) se calcula separadamente
para cada una de las preparaciones.
Las sumas calculadas en la Tabla 4.2.1.-I se transfieren a las columnas (1) a (6) de la Tabla 4.2.1.-II y se cal-
culan seis columnas adicionales (7) a (12) como sigue.
Tabla 4.2.1.-I Primer tabla de trabajo
(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) (13) (14) (15)
dosis n r x p Y ) Z y w wx wy wx2 wy2 wxy
S . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . .
6= 6= 6= 6= 6= 6=
T . . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . . .
6= 6= 6= 6= 6= 6=
etc.
(¦ wx) 2
(7) S xx ¦ wx 2 (4.2.1.-4)
¦w
(¦ wx)(¦ wy )
(8) S xy ¦ wxy (4.2.1.-5)
¦w
(¦ wy ) 2
(9) S yy ¦ wy 2 (4.2.1.-6)
¦w
¦ wx
(10) x (4.2.1.-7)
¦w
¦ wy
(11) y (4.2.1.-8)
¦w
La columna (6) de la primera tabla de trabajo puede ser ahora sustituida por Y = a + bx y el ciclo se va repi-
tiendo hasta que la diferencia entre dos ciclos se ha hecho pequeña (por ejemplo, la máxima diferencia de Y entre
dos ciclos consecutivos es inferior a 10 –8).
4.2.2 Criterios de validez
Antes de calcular las potencias e intervalos de confianza, debe ser evaluada la validez del ensayo. Si se han
incluido al menos tres dosis para cada preparación, las desviaciones de la linealidad se pueden medir como sigue:
añadir una columna 13 a la Tabla 4.2.1.-II y completarla según la expresión:
S xy2
S yy (4.2.2.-1)
S xx
El total de columna es una medida de las desviaciones de la linealidad y se distribuye, aproximadamente, co-
mo una F2 con N – 2h grados de libertad. La significación de este valor puede establecerse con la Tabla 7.3 o con
una adecuada subrutina en un programa de computación. Si el valor es significativo a un nivel de probabilidad
de 0,05, el ensayo debe probablemente ser rechazado (ver Sección 4.2.4).
Cuando el ensayo anterior no indica desviación significativa de regresión lineal, se contrastan las desviacio-
nes del paralelismo, a un nivel de significación del 0,05, con:
S xy2 (¦ S xy ) 2
F2 ¦ (4.2.2.-2)
S xx ¦ S xx
donde b 2 ¦ S xx
C
b ¦ S xx s 2 t 2
2
y 1 1
V
¦w
S
¦w
T
e Y
Z (4.3.-2)
(1 e Y ) 2
) 1 e e
Y
e Y e
Y
Z
4.5 Dosis mediana efectiva
En algunos tipos de ensayos interesa determinar la dosis mediana efectiva, que es la dosis que produce una
respuesta en el 50 % de las unidades. Se puede utilizar el método de probitos para determinar esta dosis mediana
efectiva (ED50), pero ya que no es necesario expresar esta dosis relativa a un estándar, las fórmulas son ligera-
mente diferentes.
[NOTA: se puede incluir opcionalmente un estándar con objeto de validar el ensayo. Normalmente el ensayo
se considera válido si el valor calculado ED50 del estándar está suficientemente cercano al valor asignado ED50.
El significado de "suficientemente cercano", en este contexto, depende de los requerimientos especificados en la
monografía.]
La tabulación de las respuestas para las preparaciones desconocidas y opcionalmente para el estándar, se hace
como se describe en la Sección 4.2.1. La prueba de linealidad es como se describe en la Sección 4.2.2. Para este
tipo de ensayo no es necesario una prueba de paralelismo. La ED50 de la preparación desconocida T y análoga-
mente de las otras muestras se obtiene, como se describe en la Sección 4.2.3, con las siguientes modificaciones
en las fórmulas 4.2.3.-1 y 4.2.3.-2.
aT
M T'
b (4.5.-1)
donde 1
V
¦w
T
45
6 7 8
45 45
40 40 40
35 35 35
30 30 30
N° de reticulocitos
25 25 25
20 20 20
15 15 15
10 10 10
5 5 5
0 0 0
Las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-I y 3.2.3.-II proporcionan:
PS = 69,7 LS = 16,7
PT = 65,9 LT = 15,9
PU= 80,4 LU = 20,0
10 120
HP 3,333333 HL 5
3 24
K = 51840
El análisis de varianza se puede ahora completar con las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-III y 3.2.3.-IV. Este se
muestra en la Tabla 5.1.1.-II.
Tabla 5.1.1.-II. Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Tratamientos 8 5041,6
Total 89 5370
El análisis confirma una regresión lineal altamente significativa. La falta de paralelismo es también significa-
tiva (p = 0,0043). La preparación U es por tanto rechazada y el análisis se repite utilizando únicamente la prepa-
ración T y la preparación estándar. El valor K es ahora 30645,6.
Tabla 5.1.1.-III. Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Tratamientos 5 2683,4
Total 59 2928,4
El análisis sin la preparación U cumple los requerimientos con respecto a la regresión, linealidad y paralelis-
mo por lo tanto la potencia puede ser calculada. Aplicando las fórmulas de la Sección 3.2.5 se obtiene:
Para la pendiente común
5 u (16,7 15,9)
b 7,4148
ln 3 u 10 u 2
El ln de la relación de potencias es
65,9 69,7
M T' 0,1707
3 u 7,4184
2656,9
C 1,0069
2656,9 4,5370 u 2,005 2
2656,9
V 1,6093
7,4184 2 u 3 u 10
Los ln de los límites de confianza para la preparación T son:
0,1719 r 0,0069 u (0,0293 3,2186) 0,1719 r 0,1497
Tomando antilogaritmos encontramos una relación de potencias de 0,8430 con límites de confianza, del 95
por ciento, de 0,7250 y 0,9780.
Multiplicando por la potencia asumida de la preparación T resulta una potencia de 1686 UI/ml con límites de
confianza, del 95 por ciento, de 1450 y 1956 UI/ml.
5.1.2 Ensayo múltiple de cinco dosis con diseño completamente aleatorizado
Ensayo in vitro de tres vacunas de hepatitis B frente a un estándar
De cada una de las vacunas y del estándar se prepararon tres series independientes de cinco diluciones, en
progresión geométrica (al medio). Después de algunos pasos adicionales en el procedimiento del ensayo, se
midieron las absorbancias. Los resultados se muestran en la Tabla 5.1.2.-I.
1:16000 0,043 0,045 0,051 0,097 0,097 0,094 0,086 0,071 0,073 0,082 0,082 0,086
1:8000 0,093 0,099 0,082 0,167 0,157 0,178 0,127 0,146 0,133 0,145 0,144 0,173
1:4000 0,159 0,154 0,166 0,327 0,355 0,345 0,277 0,268 0,269 0,318 0,306 0,316
1:2000 0,283 0,295 0,362 0,501 0,665 0,576 0,586 0,489 0,546 0,552 0,551 0,624
1:1000 0,514 0,531 0,545 1,140 1,386 1,051 0,957 0,866 1,045 1,037 1,039 1,068
Es conocido que los logaritmos de las densidades ópticas tienen una relación lineal con los logaritmos de las
dosis. En la Tabla 5.1.2.-II figuran las respuestas medias de las densidades ópticas logaritmicamente transfor-
madas.
Tabla 5.1.2.-II. Medias de las transformaciones ln de las absorbancias
6 -3,075 7 -2,343 8 -2,572 9 -2,485
6 -2,396 7 -1,789 8 -2,002 9 -1,874
6 -1,835 7 -1,073 8 -1,305 9 -1,161
6 -1,166 7 -0,550 8 -0,618 9 -0,554
6 -0,635 7 0,169 8 -0,048 95 0,047
Las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-I y 3.2.3.-II proporcionan:
PS = -9,108 LS = 6,109
PT = -5,586 LT = 6,264
PU =-6,544 LU = 6,431
PV =-6,027 LV = 6,384
3 36
HP 0,6 HL 0,3
5 120
K = 111,52
)LJXUD,
0,5
6 7
0
-0,5
OQDEVRUEDQFLD
-1
-1,5
-2
-2,5
-3
-3,5
8 9
0,5
-0,5
OQDEVRUEDQFLD
-1
-1,5
-2
-2,5
-3
-3,5
El análisis de varianza ya puede ser completado con las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-III y 3.2.3.-IV. El resul-
tado se presenta en la Tabla 5.1.2.-III.
Tabla 5.1.2.-III. Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Preparaciones 3 4,475 1,492
Regresión 1 47,58 47,58 7126 0,000
No paralelismo 3 0,0187 0,006 0,933 0,434
No linealidad 12 0,0742 0,006 0,926 0,531
Tratamientos 19 52,152
Error Residual 40 0,267 0,0067
Total 59 52,42
Una regresión altamente significativa y un desvío de paralelismo y linealidad no significativa, confirma que
las potencias pueden ser calculadas satisfactoriamente. Aplicando las fórmulas de la Sección 3.2.5 dan:
0,3 u (6,109 6,264 6,431 6,384)
b 0,90848
ln 2 u 3 u 4
El ln de la relación de potencias para la preparación T es
5,586 (9,108)
M T' 0,7752
5 u 0,90848
47,58
C 1,00057
47,58 0,0067 u 2,0212
47,58
V 3,8436
0,90852 u 5 u 3
Tomando antilogaritmos se calcula una relación de potencias de 2,171 con límites de confianza, del 95 por
ciento, de 2,027 y 2,327. Todas las muestras tienen una potencia asignada de 20 µg proteína/ml y por tanto una
potencia de 43,4 µg proteína/ml se encuentra para la preparación desconocida T con límites de confianza, del 95
por ciento, de 40,5 y 46,5 µg proteína/ml.
El mismo procedimiento se sigue para estimar la potencia y los límites de confianza de las otras preparacio-
nes ensayadas. Los resultados se muestran en la Tabla 5.1.2.-IV.
Tabla 5.1.2.-IV
Potencia final estimada e intervalos de confianza del 95% del ensayo de vacunas (en Pg proteína/ml)
Límite inferior Estimación Límite superior
5.1.3 Ensayo de dos dosis con diseño de cuadrado latino y sin replicación
Ensayo de Ocitocina usando órgano aislado
Tabla 5.1.3.-I Disposiciones de tratamientos (Cuadrado latino)
Columnas
Filas
S1 S2 T1 T2
S2 T1 T2 S1
T1 T2 S1 S2
T2 S1 S2 T1
La preparación estándar se administró en dosis de 0,001UI/ml y 0,003 UI/ml. Se prepararon dosis equivalen-
tes de las preparaciones T basándose en una potencia supuesta de 10 UI/ml. Cada uno de los cuatro tratamientos
se aplicó una vez en cada fila y una vez en cada columna.
Tabla 5.1.3.-II Medida de contracción del útero en milímetros.
Columnas Media de las filas R
Filas
26 31 20 33
31,5 18 29 23
17 22 16 28
24 14 24 16
Media de las
columnas C
Tabla 5.1.3.-III Medias de los tratamientos
Estándar S Preparación T
S S T T
Media 19,75 28,625 17,75 27,00
35
30
25
Contracción (mm)
20
S
T
15
10
)LJXUD,
Las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-I y 3.2.3.-II proporcionan:
PS= 48,375 LS = 4,4375
PT = 44,75 LT = 4,625
HP = 2 HL
48
8
6
K= 8672,265625
El análisis de varianza ya puede ser completado con las fórmulas de las Tablas 3.2.3.-III y 3.2.3.-IV. El resul-
tado se muestra en la Tabla 5.1.3.-IV.
Tabla 5.1.3.-IV Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Preparaciones 1 13,1406 13,1406
Regresión 1 328,5156 328,5156 512,8248 0,0000
No paralelismo 1 0,1406 0,1406 0,2195 0,6560
Tratamientos 3 341,7969 113,9323
Filas 3 171,5469 57,1823 89,2637 0,0000
Columnas 3 39,7969 13,2656 20,7081 0,0014
Error Residual 6 3,8436 0,6406
Total 15 556,9843 37,1323
El análisis de varianza demostró diferencias significativas entre las filas y las columnas. Esto indica el au-
mento de precisión conseguido mediante el uso de un diseño cuadrado latino en lugar de un diseño completamen-
te aleatorizado.
La regresión altamente significativa y el desvío del paralelismo no significativo, confirman que el ensayo es
válido y se calcula la potencia aplicando las fórmulas de la Sección 3.2.5.
8 u (4,4375 4,625)
b 8,2491
ln 3 u 4 u 2
El ln de la relación de potencia para la preparación T es
44,75 48,375
M T' 0,2197
2 u 8,2491
328,5156
C 1,0118
328,5156 0,6406 u 5,9878
328,5156
V 0,6035
4 u 2 u (8,2491) 2
)LJXUD,
Las fórmulas de las Tablas 3.3.3.1.-I y 3.3.3.1.-II proporcionan
PS = 2186,50 PT = 2267
LS = 4842,50 LT = 5060,5
aS = 1556,00 aT = 1375
bS = 939,00 bT = 1053
GS = 1703849,25 GT = 1851907,5
JS = 40,042 JT = 210,042
HB = 0,923076923 HI = 0,023809523
a = 244,25 K = 6302032,071
El análisis de varianza ya puede ser completado con las fórmulas de las Tablas 3.3.3.1.-III y 3.3.3.1.-IV. El
resultado se muestra en la Tabla 5.2.1.-II.
Tablas 5.2.1.-II Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Regresión 2 926687,8068 463343,9034 861,3460 0,0000
Blancos 1 1,4423 1,4423 0,0027 0,9600
Intersección 1 390,0119 390,0119 0,7250 0,4227
No linealidad 2 500,1680 250,0840 0,4649 0,6463
Tratamientos 6 927579,4290 154596,5715
Error Residual 7 3765,5000 537,938
Total 13 931344,9290
Una regresión altamente significativa y desviaciones no significativas de linealidad e intersección indica que
puede ser calculada la potencia. Además se observa el cumplimiento de blancos.
Aplicando las fórmulas de la Sección 3.3.5 se obtiene:
a ' 243,5769
Pendiente del estándar
6 u 4842,50 9 u 4 u 243,5769
bS' 241,5028
2 u 27 9 u 3 3
Pendiente de la preparación desconocida
6 u 5060,50 9 u 4 u 243,5769
bT' 257,0742
2 u 27 9 u 3 3
La relación de potencia para la preparación T es
RT' 1,0645
241,50282
C 1,0044
241,5028 537,938 u 2,36462 u 0,0852
2
Se calcula una relación de potencias de 1,0645 con límites de confianza, del 95 por ciento, de 1,0037 y
1,1295. Como la preparación analizada tiene una potencia asumida de 250 UI/vial, por lo tanto su potencia esti-
mada es de 266,12 UI/vial con límites de confianza de 250,92 UI/vial y 282,37 UI/vial. Nótese que a diferencia
del análisis de líneas paralelas no se calculan los antilogaritmos.
5.2.2 Ensayo completamente aleatorizado con diseño (3u 4)
Un ensayo in vitro de vacunas de influenza
El contenido en antígeno hemaglutinina (HA) de dos vacunas de influenza es determinado por inmunodifu-
sión radial simple. Ambas tienen una potencia en rótulo de 15 Pg HA por dosis, que equivale a un contenido de
30 Pg HA/ml. El estándar tiene un contenido asignado de 39 Pg HA/ml.
Se aplica el estándar y las dos vacunas problema en cuatro concentraciones duplicadas las cuales están prepa-
radas sobre la base de los contenidos asignado y declarado respectivamente. Cuando se establece el equilibrio
entre los reactantes, externo e interno, se mide la zona del área de precipitación anular. Los resultados se mues-
tran en la Tabla 5.2.2.-I.
Tabla 5.2.2.1 Zona de precipitación area (mm 2)
Concentración Estándar Preparación T Preparación U
(Pg/ml)
I II I II I II
7,5 18,0 18,0 15,1 16,8 15,4 15,7
15,0 22,8 24,5 23,1 24,2 20,2 18,6
22,5 30,4 30,4 28,9 27,4 24,2 23,1
30,0 35,7 36,6 34,4 37,8 27,4 27,0
40 S4
35
S3
Área de precipitación anular (mm)
30 T4
S2 T3
25 U4
T2 U3
20 S1
T1 U2
15
U1
10
5
0
)LJXUD,
Una representación gráfica de los datos no muestra hechos inusuales. Aplicando las fórmulas de las Tablas
3.3.3.1.-I y 3.3.3.1.-II se obtiene:
PS = 108,2 PT = 103,85 PU = 85,8
LS = 301,1 LT = 292,1 LU = 234,1
aS = 141,0 aT = 116,7 aU = 139,8
bS = 61,2 bT = 64,95 bU = 39,2
GS = 3114,3 GT = 2909,4 GU = 1917,3
JS = 0,223 JT = 2,227 JU = 0,083
HI = 0,00925926 a' = 11,0416667 K = 14785,7704
y el análisis de varianza se completa con las fórmulas de las Tablas 3.3.3.1.-III y 3.3.3.1.-IV. Esto se muestra en
la Tabla 5.2.2.-II.
Tabla 5.2.2.-II Análisis de varianza
Fuente de Grado de Suma de Cuadrado Razón F Probabilidad
variación libertad cuadrados medio
Regresión 3 1087,66519 362,55065 339,497525 0,0000
Intersección 2 3,47388889 1,7369444 1,62647939 0,2371
No linealidad 6 5,0655 0,84425 0,79055794 0,5943
Tratamientos 11 1096,20458
Error Residual 12 12,815 1,06791667
Total 23 1109,01958
Una regresión altamente significativa y desviaciones no significativa de linealidad e intersección indica que
puede ser calculada la potencia.
Esto proporciona una relación de potencias de 0,95280 para la vacuna T y 0,64863 para la vacuna U.
6,356112
C 1,00561
6,35611 1,06791667 u 2,179 2 u 0,4444
2
Para la vacuna U son: 0,64877 r 0,00561 u 1,42308 0,0035 u (1,30104) 0,64877 r 0,05856
El contenido HA por dosis se puede determinar multiplicando las razones de potencias y límites de confianza
por la potencia asumida, 15 µg/dosis. Los resultados están dados en la Tabla 5.2.2.-III
Tabla 5.2.2.-III Estimación de potencia HA (µg/dosis)
Límite inferior Potencia estimada Límite superior
&20%,1$&,Ï1'(5(68/7$'26'((16$<26
6.1 Introducción
Con frecuencia es necesario la repetición de ensayos independientes y la combinación de sus resultados para
cumplir los requisitos de este Código. La cuestión que surge es, si es apropiado combinar los resultados de tales
ensayos y si es así, de qué forma debe hacerse.
Dos ensayos pueden ser considerados mutuamente independientes cuando la ejecución de uno no afecta las
probabilidades de los posibles resultados del otro. Esto implica que los errores aleatorios en la totalidad de los
factores esenciales que influyen sobre el resultado (por ejemplo, diluciones del estándar y de la preparación que
se va a examinar, la sensibilidad del indicador biológico) en un ensayo, tienen que ser independientes de los
correspondientes errores aleatorios en el otro. Los ensayos, en días sucesivos, usando las diluciones originales y
retenidas del estándar no son ensayos independientes.
Existen diversos métodos para combinar los resultados de ensayos independientes, cuanto más aceptable sea
teóricamente el método más difícil será de aplicar. A continuación se describen tres (6.2.3 ó 6.2.4 y 6.3) métodos
simples de aproximación, se pueden utilizar otros, siempre que se cumplan las condiciones necesarias.
Cuando se combinan potencias de ensayos provenientes de modelo de líneas paralelas las mismas deben ser
transformadas a logaritmos (M) y cuando provienen de ensayos de modelo relación de pendientes, las potencias
(R) se usan como tal. Ya que los modelos de líneas paralelas son más comunes que los basados en el modelo de
relación de pendientes, el símbolo M que denota el logaritmo de la potencia se usa en las fórmulas de esta sec-
ción. En ensayos de relación de pendientes se usan las mismas formulas y R, pero corregidas por la potencia
asumida en cada ensayo previo a la combinación..
6.2 Combinación ponderada de resultados de ensayos
Este método se puede usar siempre que se cumplan las siguientes condiciones:
1 - las estimaciones de la potencia derivan de ensayos independientes;
2 - para cada ensayo, C está próximo a 1 (inferior a 1,1);
3 - el número de grados de libertad de los errores residuales individuales no es inferior a 6, pero preferible-
mente es mayor de 15.
4 - las potencias individuales estimadas forman un conjunto homogéneo (ver Sección 6.2.2).
Cuando estas condiciones no se cumplen esté método no se puede aplicar. Entonces puede utilizarse el méto-
do descripto en la Sección 6.3 para obtener la mejor estimación de la potencia media.
6.2.1 Cálculo de los coeficientes de ponderación
Se asume que los resultados de cada uno de los n’ ensayos han sido analizados para dar n’ valores de M con
los límites de confianza asociados. Para cada ensayo se obtiene la longitud del intervalo de confianza logarítmi-
co, L, restando el límite inferior del superior. El peso W para cada valor de M se calcula a partir de la ecuación
6.2.2.-I, en la que t tiene el mismo valor que el utilizado para el cálculo de los límites de confianza.
4t 2
W
L2 (6.2.1.-I)
donde M
¦WM
¦W
Si el F2 calculado es inferior al valor tabulado correspondiente con (n'–1) grados de libertad las potencias son
homogéneas y tendrán sentido calcular la potencia media y los límites de confianza por el método de la Sección
6.2.3.
Si el valor calculado de este estadístico es superior al valor tabulado, las potencias son heterogéneas. Esto
significa que la variación entre las estimaciones individuales de M es mayor que la que se podría predecir a partir
de las estimaciones de los límites de confianza, esto es, que existe una variabilidad significativa entre los ensa-
yos. Bajo estas circunstancias la condición 4 no se cumple y las ecuaciones de la Sección 6.2.3 ya no se pueden
aplicar. En cambio se pueden usar las fórmulas de la Sección 6.2.4.
6.2.3 Cálculo de la media ponderada y límites de confianza
Se forman los productos WM para cada ensayo y su suma se divide por el peso total de todos los ensayos para
dar el logaritmo de la potencia media ponderada.
M
¦WM
¦W (6.2.3.-1)
El error estándar del ln (potencia media) se calcula como la raíz cuadrada de la inversa del peso total:
1
SM
¦W (6.2.3.-2)
y se obtienen los límites de confianza aproximados a partir de los antilogaritmos de los valores dados por
M r t sM (6.2.3.-3)
donde el número de grados de libertad de t es igual a la suma del número de grados de libertad de los cuadrados
medios del error de los ensayos individuales.
6.2.4 Media ponderada y límites de confianza basados en la variación intra e inter ensayo
Cuando los resultados de varios ensayos repetidos se combinan, el valor F2 puede ser significativo. Se consi-
dera entonces que la variación observada tiene dos componentes:
- La variación intra ensayo 1
sM2
W
n' (n'1)
donde M es la media no ponderada. La primera componente varía de ensayo a ensayo mientras que la última es
común para todo M.
Para cada M se calcula entonces un coeficiente de ponderación como sigue
1
W'
s sM2
2
M
sM2
¦ (M M ) 2
Se evalúa la homogeneidad de las potencias estimadas con la fórmula 6.2.2.-1 la cual da un F2 de 4,42 con 5
grados de libertad. Esto es, no significativo (p = 0,49) por lo que se cumplen todas las condiciones.
La potencia media ponderada se calcula con la fórmula 6.2.3.-1, resulta 9,8085.
La fórmula 6.2.3.-2 da una desviación estándar de 0,00673 y límites de confianza, del 95 %, de 9,7951 y
9,8218 que se calculan con la fórmula 6.2.3.-3 donde t tiene 120 grados de libertad.
Al tomar los antilogaritmos se obtiene una potencia de 18187 IU/vial con límites de confianza de 17946
UI/vial y 18431 IU/vial.
Ejemplo de potencia media ponderada y límites de confianza de ensayos de relación de pendientes con
igual potencia asumida
En la Tabla 6.5.-I se especifican seis estimaciones independientes de potencia de la misma preparación, con
igual potencia asumida (250UI/vial), la potencia corregida por potencia asumida con sus límites de confianza del
95% y el número de grados de libertad de la varianza del error. Cumplen las condiciones 1,2 y 3 de la Sección
6.2.
Tabla 6.5.-I Potencia estimada y peso de cuatro ensayos independientes
Potencia estimada Potencia corregida por potencia asumida Grados de libertad Peso
R R
W
Se evalúa la homogeneidad de las potencias estimadas con la formula 6.2.2.-1 la cual da un F2 de 2,8584 con
5 grados de libertad, esto es “no significativo”, el F2 de tabla es 11,070 por lo que se cumplen todas las condicio-
nes.
La potencia media ponderada se calcula con la fórmula 6.2.3.-1, multiplicada por la potencia supuesta resulta
ser 257,25 UI/ vial.
La fórmula 6.2.3.2 da una desviación estándar de 0,02013 y los limites de confianza, del 95%, obtenidos por
la formula 6.2.3.3, donde t tiene 42 grados de libertad, dan un resultado de 247,08 UI/vial y 267,41 UI/ vial
cuando se multiplican por la potencia supuesta.
7$%/$6
Las tablas de esta sección proporcionan un listado de valores críticos para los números de grados de libertad
más frecuentes. Si un valor crítico no está en la lista debe buscarse en tablas más completas. Muchos programas
de ordenador incluyen funciones estadísticas y se recomienda su uso en lugar de las tablas de esta sección.
7.1 Distribución F
Si un valor observado es mayor que el valor de la tabla se considera que es significativo (líneas superiores,
p=0,05) y muy significativo (líneas inferiores, p=0,01). gl 1 es el número de grados de libertad del numerador y
gl 2 es el número de grados de libertad del denominador.
gl 1 2 3 4 5 6 8 10 12 15 20 f
1o
gl
2p
10 4,965 4,103 3,708 3,478 3,326 3,217 3,072 2,978 2,913 2,845 2,774 2,538
10,044 7,559 6,552 5,994 5,636 5,386 5,057 4,849 4,706 4,558 4,405 3,909
12 4,747 3,885 3,490 3,259 3,106 2,996 2,849 2,753 2,687 2,617 2,544 2,296
9,330 6,927 5,953 5,412 5,064 4,821 4,499 4,296 4,155 4,010 3,858 3,361
15 4,543 3,682 3,287 3,056 2,901 2,790 2,641 2,544 2,475 2,403 2,328 2,066
8,683 6,359 5,417 4,893 4,556 4,318 4,004 3,805 3,666 3,522 3,372 2,868
20 4,351 3,493 3,098 2,866 2,711 2,599 2,447 2,348 2,278 2,203 2,124 1,843
8,096 5,849 4,938 4,431 4,103 3,871 3,564 3,368 3,231 3,088 2,938 2,421
25 4,242 3,385 2,991 2,759 2,603 2,490 2,337 2,236 2,165 2,089 2,007 1,711
7,770 5,568 4,675 4,177 3,855 3,627 3,324 3,129 2,993 2,850 2,699 2,169
30 4,171 3,316 2,922 2,690 2,534 2,421 2,266 2,165 2,092 2,015 1,932 1,622
7,562 5,390 4,510 4,018 3,699 3,473 3,173 2,979 2,843 2,700 2,549 2,006
50 4,034 3,183 2,790 2,557 2,400 2,286 2,130 2,026 1,952 1,871 1,784 1,438
7,171 5,057 4,199 3,720 3,408 3,186 2,890 2,698 2,563 2,419 2,265 1,683
f 3,841 2,996 2,605 2,372 2,214 2,099 1,938 1,831 1,752 1,666 1,571 1,000
6,635 4,605 3,782 3,319 3,017 2,802 2,511 2,321 2,185 2,039 1,878 1,000
7.2 Distribución t
Si un valor observado es superior al tabulado, se considera que es significativo (p = 0,05) y muy significativo
(p = 0,01).
Tabla 7.2 Niveles de significación de t (valores absolutos)
gl p p gl p p
Durante los análisis, las propiedades medidas por cada método son registradas en función de la
temperatura y/o el tiempo, permitiendo, para las cuatro primeras técnicas presentadas, la visualización de los
barridos en gráficos cuya interpretación contribuye en gran medida a la elaboración de las conclusiones.
La información producida por los gráficos antedichos, se resume en la Tabla 2, excepto para el Análisis
Térmico Diferencial, cuyas aplicaciones varían según las características de los aparatos.
Tabla 2.
Información CDB ATG ATM
Calor específico SI
en
Temperatura de fusión SI
polímeros
Calor de fusión, cristalinidad SI
Evolución de la fusión, fracción líquida SI
Análisis de la composición SI SI
Identificación y pureza de cristales (material no
SI SI
polimérico)
Evaporación, desorción, secado, sublimación SI SI
Polimorfismo SI SI
Pseudopolimorfismo SI SI
Calores de transición SI
Transiciones polimórficas SI
Mesofases en cristales líquidos SI
Transiciones vítreas, suavizado SI SI
Estabilidad y descomposición térmica, pirólisis,
SI SI SI
despolimerización
Análisis de productos de descomposición SI
gaseosos liberados(por asociación con otros
equipos)
Coeficiente de expansión lineal SI
Comportamiento viscoelástico SI
Compatibilidad de sustancias entre sí y de en
SI SI
sustancias con el material de empaque polímeros
Polimerización, curado SI SI
Cinética de reacción SI SI
7DEOD(WDSD. Requisitos de conductividad y temperatura
(para medidas de conductividad no compensada por temperatura)
Tabla 2. Antagonistas
Sustancia de Interferencia Agentes Neutralizantes Potenciales / Método
Glutaraldehido, Mercuriales Sulfito Acido de Sodio ( Bisulfito de Sodio)
Fenólicos, Alcohol, Aldehídos, Sorbato Dilución
Aldehídos Glicina
Compuestos de Amonio Cuaternarios (CAC), Pa- Lecitina
rahidroxibenzoatos (Parabenos), Biguanidas
CAC, Yodo, Parabenos Polisorbato
Mercuriales Tioglicolato
Mercuriales, Halógenos, Aldehídos Tiosulfato
EDTA (Edetato) Iones de Mg o Ca
Agar Digerido
Agar Digerido
Pseudomonas Agar Digerido de Caseína-Soja
de Caseína-
aeruginosa de Caseína- y Caldo
Soja / NMP
Por ejemplo Soja o Caldo Digerido de
Caldo Digerido
ATCC 9027, Digerido de Caseína-Soja
de Caseína-Soja
NCIMB 8626, Caseína-Soja XIF
XIF
CIP 82.118 o 30 - 35 ºC 30 - 35 ºC
30 - 35 ºC
NBRC 13275 18 - 24 horas GtDV
GtDV
Agar Digerido
Agar Digerido
Agar Digerido de Caseína-Soja
Bacillus Subtilis de Caseína-
de Caseína- y Caldo
Por ejemplo Soja / NMP
Soja o Caldo Digerido de
ATCC 6633, Caldo Digerido
Digerido de Caseína-Soja
NCIMB 8054, de Caseína-Soja
Caseína-Soja XIF
CIP 52.62 o XIF
30 - 35 ºC 30 - 35 ºC
NBRC 3134 30 - 35 ºC
18 - 24 horas GtDV
GtDV
Agar Sabou-
Candida albicans raud Dextrosa Agar Digerido Agar Agar Digerido Agar
Por ejemplo o Caldo Sa- de Caseína-Soja Sabouraud de Caseína-Soja Sabouraud
ATCC 10231, bouraud Dex- XIF Dextrosa XIF Dextrosa
NCPF 3179, trosa 30 - 35 ºC XIF 30-35 ºC XIF
IP 48.72 o 20 - 25 ºC GtDV 20 - 25 ºC GtDV 20 - 25 ºC
NBRC 1594 2 - 3 días GtDV NMP: no aplica GtDV
Agar Sabou-
raud Dextrosa
Aspergillus
o Agar Papa Agar Digerido Agar Agar Digerido Agar
brasiliensis
Dextrosa de Caseína-Soja Sabouraud de Caseína-Soja Sabouraud
Por ejemplo
20 - 25 ºC XIF Dextrosa XIF Dextrosa
ATCC 16404,
5.-7 días o 30 - 35 ºC XIF 30 - 35 ºC XIF
IMI 149007,
hasta alcanzar GtDV 20 - 25 ºC GtDV 20 - 25 ºC
IP 1431.83 o
una buena GtDV NMP: no aplica GtDV
NBRC 9455
esporulación
El índice de peróxidos Ip de una sustancia es de una mezcla de ácido acético glacial y trimetil-
el valor que expresa, en miliequivalentes de oxí- pentano (3:2), colocar el tapón y agitar hasta
geno activo, la cantidad de peróxidos presentes en disolver. Agregar 0,5 ml de una solución satura-
1.000 g de muestra. da de ioduro de potasio, colocar el tapón, dejar
A menos que se especifique de otro modo en reposar aproximadamente durante 1 minuto, agi-
la monografía correspondiente, determinar el tar en forma continua y agregar 30 ml de agua.
Índice de peróxidos por el Método I. Titular la solución con tiosulfato de so-
dio 0,01 N (SV), agregado lentamente y con agi-
0pWRGR,
tación continua y vigorosa, hasta que el color
Procedimiento - Transferir aproximadamente amarillo del iodo desaparezca casi por completo.
5,0 g de muestra a un erlenmeyer con tapón esme- Agregar aproximadamente 0,5 ml Solución de
rilado de 250 ml, agregar 30 ml de una mezcla de almidón y continuar la titulación agitando cons-
ácido acético glacial y cloroformo (3:2), agitar tantemente especialmente en las proximidades del
hasta disolver y agregar 0,5 ml de una solución punto final de la titulación para liberar todo el
saturada de ioduro de potasio. Agitar exactamen- iodo de la capa del solvente. Agregar tiosulfato
te durante 1 minuto, agregar 30 ml de agua y de sodio 0,01 N (SV) hasta que el color azul des-
titular con tiosulfato de sodio 0,01 N (SV), agre- aparezca. Realizar una determinación con un
gado lentamente y sin dejar de agitar, hasta que el blanco y hacer las correcciones necesarias (ver
color amarillo desaparezca. Agregar 5 ml de Titulaciones residuales en 780. Volumetría).
almidón (SR) y continuar la titulación con tiosul- [NOTA 1: la titulación del blanco no debe con-
fato de sodio 0,01 N (SV) agitando vigorosamen- sumir más de 0,1 ml de tiosulfato de so-
te hasta que el color desaparezca. Realizar una dio 0,01 N (SV)]. [NOTA 2: cuando el contenido
determinación con un blanco y hacer las correc- de peróxidos en la sustancia en ensayo es mayor o
ciones necesarias (ver Titulaciones residuales en igual a 70, existe un retraso de 15 a 30 segundos
780. Volumetría). El volumen consumido en en la neutralización del indicador de almidón por
mililitros de tiosulfato de sodio 0,01 N (SV) mul- la tendencia del trimetilpentano a separarse del
tiplicado por 10 y dividido por el peso en gramos medio acuoso y el tiempo requerido para mezclar
de la muestra es el Índice de peróxidos. adecuadamente el solvente y la solución valorante
[NOTA: la titulación del blanco no debe con- y liberar las últimas trazas de iodo; se puede
sumir más de 0,1 ml de tiosulfato de sodio agregar una cantidad de 0,5 a 1,0 % de un emul-
0,01 N (SV)]. sionante de elevado balance hidrofilia-lipofilia
0pWRGR,, (BHL), como por ej., polisorbato 60, a la mezcla
para retardar la separación de fases y reducir el
[NOTA: realizar el ensayo protegido de la tiempo que tarda en liberar el iodo. Cuando el
luz]. contenido de peróxidos en la sustancia en ensayo
Solución de almidón - Agregar 1 g de al- es mayor a 150 se debe utilizar tiosulfato de so-
midón a una porción de agua fría, mezclar y diluir dio 0,1 N (SV)]. Calcular el Índice de peróxidos
a 200 ml con agua en ebullición agitando conti- por la fórmula siguiente:
nuamente. Agregar 250 mg de Ácido Salicílico y
1.000VC/P
calentar a ebullición durante 3 minutos. Retirar
inmediatamente del calor y enfriar. en la cual V es el volumen en ml de tisulfato de
Procedimiento - Transferir aproximadamente sodio (SV) consumido, C es la normalidad de
la cantidad de muestra indicada en la Tabla a un tiosulfato de sodio empleado y P es el peso en g
erlenmeyer con tapón esmerilado, agregar 50 ml de la sustancia en ensayo.
7DEOD
Peso de muestra a examinar
Índice de peróxidos esperado
(g)
0 - 12 2,00 - 5,00
12 - 20 1,20 - 2,00
20 - 30 0,80 - 1,20
30 - 50 0,500 - 0,800
50 - 90 0,300 - 0,500
(16$<2'(0,&2%$&7(5,$6
Si la muestra en ensayo puede estar Determinar la fertilidad de los medios en
contaminada con otros microorganismos diferentes presencia de la preparación en ensayo inoculando
a micobacterias, tratar la muestra con una solución una cepa adecuada de Mycobacterium sp, como
descontaminante apropiada, como solución de BCG y, de ser necesario, usar una solución
hidróxido de sodio -acetilcisteína o solución de neutralizante.
laurilsulfato de sodio. Si se produce desarrollo de un microorganismo
Inocular 0,2 ml de la muestra por triplicado en contaminante durante los primeros 8 días de
dos medios sólidos apropiados (Lôwenstein-Jensen incubación, repetir el ensayo y realizar al mismo
y Middlebrook 7H10). Inocular 0,5 ml de la tiempo un ensayo de esterilidad de la muestra.
muestra por triplicado en un medio líquido La preparación cumple con los requisitos si al
apropiado. Incubar todos los medios a 37 ºC cabo del periodo de incubación no se desarrolla
durante 56 días. crecimiento de micobacterias.
(16$<2'(0,&23/$60$6
Cuando se indica para un banco maestro de condiciones que serán usadas para el ensayo sobre
células, un banco de trabajo de células, un lote de producto. El medio cumple con el ensayo para
semilla de virus o para controles de células, propiedades nutritivas si se verifica un apropiado
proceder según se indica en Método de cultivo y crecimiento del organismo y un apropiado cambio
Método del indicador en cultivos celulares. de color del medio líquido.
Cuando se indica para cosechas virales, graneles de
6XVWDQFLDVLQKLELWRULDV
vacuna o lotes finales de producto proceder según
Realizar el ensayo de propiedades nutritivas en
se indica en Método de cultivo.
presencia del producto en ensayo. Si el crecimiento
0e72'2'(&8/7,92 del organismo elegido es menor que el encontrado
en ausencia del producto, éste contiene sustancias
(OHFFLyQGHOPpWRGRGHFXOWLYR
Realizar el ensayo usando un número suficiente inhibitorias que deben ser neutralizadas antes de
de medios líquidos y sólidos que asegure el realizar el ensayo para micoplasmas. La efectividad
crecimiento en las condiciones de incubación de la neutralización u otro proceso debe ser
elegidas de un pequeño número de micoplasmas comprobada repitiendo el ensayo para sustancias
que puede estar presente en el material a ser inhibitorias después de la neutralización.
examinado. Los medios líquidos deben contener (QVD\R SDUD PLFRSODVPDV HQ HO SURGXFWR D
rojo fenol. Las propiedades nutritivas de cada VHUH[DPLQDGR
nuevo lote de medio se deben verificar usando los Para medios sólidos usar placas de 60 mm de
siguientes organismos: diámetro conteniendo 9 ml de medio. Inocular
Acholeplasma laidlawii: para vacunas a las que 0,2 ml del producto a ser examinado en cada una de
se les ha agregado antibiótico durante su por lo menos dos placas de medio sólido. Para
producción. medios líquidos inocular 10 ml de producto cada
Mycoplasma gallisepticum: cuando se ha usado 100 ml de medio. Incubar entre 35 y 38 ºC en
material de origen aviar durante la elaboración. condiciones de aerobiosis y de microaerofilia,
Mycoplasma orale: para vacunas de uso durante 21 días; paralelamente incubar una porción
humano. de 100 ml de cada medio sin inocular para usar
Mycoplasma pneumoniae: para vacunas de uso como control. Si durante el agregado del producto
humano. en ensayo se produce cualquier cambio de pH,
Mycoplasma synoviae: para vacunas de uso restaurar el valor de pH del medio de cultivo
humano. mediante el agregado de una solución de hidróxido
de sodio o de ácido clorhídrico.
&RQGLFLRQHVGHLQFXEDFLyQ Al primero, segundo y tercer día después de la
Dividir los medios inoculados en dos porciones inoculación subcultivar cada cultivo líquido por
iguales e incubar una en condiciones aeróbicas y la inoculación de 0,2 ml en cada una de dos placas de
otra en condiciones de microaerofilia; para medios cada medio sólido utilizado e incubar entre 35 y
sólidos mantener una atmósfera de adecuada 38 ºC en aerobiosis y microaerofilia durante no
humedad para prevenir la evaporación de la menos de 21 días. Repetir este procedimiento al
superficie. Para medios sólidos en condiciones sexto, séptimo y octavo día y nuevamente a los
aeróbicas, incubar en una atmósfera de aire que trece o catorce días de iniciado el ensayo. Observar
contenga entre 5 y 10 %de dióxido de carbono. Para los medios líquidos cada dos o tres días y si se
medios sólidos en condiciones de microaerofilia produce cualquier cambio de color subcultivar
incubar en una atmósfera de nitrógeno que contenga inmediatamente. Observar los medios sólidos una
entre 5 y 10 % de dióxido de carbono. vez a la semana.
3URSLHGDGHVQXWULWLYDV Si los medios líquidos evidencian
Realizar la determinación de las propiedades contaminación fúngica o bacteriana repetir el
nutritivas para cada nuevo lote de medio. Inocular ensayo. Si, no antes de los 7 días después de la
el medio elegido con el organismo de ensayo inoculación, no más de una placa de cada paso del
correspondiente; usar no más de 100 ufc por placa ensayo se contamina con hongos o bacterias o se
de 60 mm conteniendo 9 ml de medio sólido y no rompe, esa placa debe ser ignorada si se comprueba
más de 40 ufc por envase de medio líquido por examinación inmediata que no presenta
conteniendo 100 ml; usar placas separadas para evidencia de crecimiento de micoplasmas. Si, en
cada organismo ensayado. Incubar los medios en las cualquier paso del ensayo más de una placa se
contamina accidentalmente con hongos o bacterias citopático, el virus puede ser neutralizado usando
o se rompe, el ensayo no es válido y debe repetirse. un antisuero específico que no tenga efecto
Incluir en el ensayo controles positivos inhibitorio sobre micoplasmas o el sustrato celular y
preparados inoculando no más de 100 ufc de que no permita el crecimiento de los virus. Para
especies como M. orale o M. pneumoniae. demostrar la ausencia de efectos inhibitorios en el
Al finalizar el periodo de incubación, examinar suero, llevar a cabo controles positivos en presencia
microscópicamente todos los medios sólidos y en ausencia del antisuero.
inoculados para la presencia de micoplasmas. El Procedimiento
producto cumple el ensayo si no se produce Sembrar el cultivo celular a una densidad
crecimiento de micoplasmas en todos los medios regular (2x104 a 2x105 cel/ml o 4x103 a 2,5x104
inoculados. Si se produce crecimiento de cel/cm2) e incubar a 36 ± 1 ºC durante por lo menos
micoplasma, el ensayo debe ser repetido una vez 2 días. Inocular el producto en ensayo e incubar
usando el doble de la cantidad de inóculo, medios y durante por lo menos 2 días; realizar no menos de
placas, si no se produce crecimiento de un subcultivo. Permitir el crecimiento del último
micoplasmas el producto cumple el ensayo. El subcultivo en una superficie apropiada para el
ensayo es no válido si no se produce crecimiento en procedimiento del ensayo. No permitir que el
los controles positivos. último subcultivo alcance a ser confluente ya que
esto podría inhibir la tinción e impedir la
0e72'2'(/,1',&$'25
visualización de los micoplasmas. Descartar el
(1&8/7,92&(/8/$5
medio. Enjuagar la monocapa con Solución
Los cultivos celulares se tiñen con un colorante reguladora fosfato salina pH 7,4 luego con una
que se une al ADN. Los micoplasmas se detectan mezcla de iguales volúmenes del mismo solvente y
por su patrón particulado o filamentoso de una solución fijadora apropiada y por último con la
fluorescencia sobre la superficie de la célula y, en solución fijadora. Agregar la solución fijadora y
los casos de contaminación abundante también en dejar reposar durante 10 minutos. Eliminar y
las áreas circundantes. descartar la solución fijadora. Si la monocapa va a
9HULILFDFLyQGHOVXVWUDWR ser teñida posteriormente, secar completamente y si
Usando un cultivo de células Vero como la monocapa va a ser teñida directamente, eliminar
sustrato, preensayar el procedimiento usando un la solución fijadora con dos lavados con agua
inóculo de no más de 100 ufc de una cepa que destilada estéril y descartar el agua. Agregar
crezca en medio sólido o líquido y desafiar su bisbenzimida diluida (SR) o cualquier otro
capacidad para detectar contaminación potencia por colorante para ADN y dejar reposar durante
micoplasmas tales como Mycoplasma hyorhinis y 10 minutos. Eliminar el colorante y lavar la
Mycoplasma orale. Puede utilizarse un sustrato monocapa con agua.
celular diferente, por ejemplo la línea celular de Examinar por epifluorescencia (filtro de
producción, si se ha demostrado que provee la excitación a 300 nm/380 nm, filtro barrera LP
misma sensibilidad para la detectación de potencial 440 nm) con un aumento entre 100 y 400 u o
contaminación por micoplasmas. mayor. Comparar la apariencia microscópica del
cultivo de ensayo con los controles positivos y
0pWRGR negativos, examinando la fluorescencia
Emplear no más de 1 ml del producto en ensayo extranuclear. Los micoplasmas se visualizan como
para inocular por duplicado un área no menor a puntos o filamentos sobre el citoplasma celular y,
25 cm2 del cultivo celular indicador creciendo en algunos casos en los espacios intercelulares.
confluente. Incluir en el ensayo un control negativo El producto a ser examinado cumple con el
(no infectado) y dos controles positivos de ensayo si no se exhibe evidencia de la presencia de
micoplasmas tales como Mycoplasma hyorhinis y micoplasmas en los cultivos de ensayo inoculados
Mycoplasma orale. Usar un inóculo de no más de con el producto. El ensayo sólo es válido si los
100 ufc para los controles positivos. controles positivos exhiben evidencia de la
Si para suspensiones virales la interpretación de presencia de micoplasma.
los resultados se ve afectada por el efecto
(16$<2'(1(8529,58/(1&,$
3$5$9$&81$6$9,5869,92
Tabla 1
Mutación operón
Cepa Reversión bio 'uvrB LPS Plásmido
histidina
Corrimiento de
TA 97a hisD6610 Deleción rfa pKM101
armazón
Corrimiento de
TA 98 hisD3052 Deleción rfa pKM101
armazón
TA 100 his G46 Sustitución Deleción rfa pKM101
Transición
TA 102 hisG428 Tipo salvaje rfa pKM101, pAQ1
/transversión
TA 1535 his G46 Sustitución Deleción rfa -
Corrimiento de
TA 1538 hisD3052 Deleción rfa -
armazón
En el caso del 2-Amino antraceno es necesario ensayar en ausencia y presencia de la Mezcla S-9 ya que adquiere
actividad mutagénica al ser metabolizado.
Los mutágenos que figuran en esta tabla tienen actividad mutagénica per se.
Se pueden emplear otros mutágenos de probada acción sobre la cepa de interés.
Contenido del envase Cantidad mínima de cada envase para cada medio
< 50 mg Contenido completo
50 mg - < 300 mg Mitad del contenido pero no menos de 50 mg
300 mg - d 5 g 150 mg
>5 g 500 mg
Antibióticos 150 mg
Algodón, gasa 100 mg
Suturas y otros materiales Envase completo
Descartables
Dispositivos médicos Dispositivo completo
(16$<26'(68785$6
,'(17,),&$&,Ï1 ,GHQWLILFDFLyQ
Las suturas no absorbibles pueden identificarse $ - Calentar 50 mg de sutura con 0,5 ml de
con ensayos químicos. Los materiales de origen ácido clorhídrico 25 % p/p en un tubo de ensayo
natural pueden identificarse también mediante cerrado a 110º C durante 18 horas, y luego dejar
examen microscópico de la morfología de estas reposar durante 6 horas. No deben observarse
fibras. Para materiales sintéticos, puede utilizarse cristales.
también la identificación por espectrofotometría de % - 50 mg de sutura se disuelven en 20 ml de
absorción en el infrarrojo o calorimetría diferencial una solución 70 % p/p de ácido fórmico anhidro.
de barrido. 0RQyPHURV\ROLJyPHURV
La poliamida-6 cumple con un ensayo adicional:
/LQR
en un aparato de extracción continua tratar 1 g de
'HILQLFLyQ - La sutura de lino estéril se sutura con 30 ml de metanol efectuando tres
compone de las fibras pericíclicas del tallo de extracciones por hora durante 7 horas, evaporar a
Linum usitatissimum L. Las fibras básicas de 2,5 a sequedad y secar el residuo a 110 °C durante
5 cm de largo se ensamblan en haces de 30 a 80 cm 10 minutos, dejar enfriar en un desecador y pesar.
de longitud y se hilan en longitudes continuas de El residuo no debe pesar más de 20 mg (2 %).
diámetro predeterminado.
3ROLDPLGD
,GHQWLILFDFLyQ
$ - Cortar el extremo de una sutura. Separar 'HILQLFLyQ - La sutura quirúrgica estéril de
algunas fibras con una aguja o una pinza fina. poliamida 6/6 está constituida por monofilamentos
Cuando se examina al microscopio deben cilíndricos lisos o filamentos trenzados lisos, o bien
observarse fibras de 12 a 31 µm de ancho, y a lo hilos ligeramente retorcidos revestidos en el mismo
largo de su longitud presentan paredes gruesas, material. Se obtiene por pasaje a través de una
marcadas algunas veces con finas estriaciones matriz determinada de un material plástico sintético
longitudinales y un lumen estrecho. Las fibras se proveniente de la policondensación de
estrechan gradualmente, terminando en una punta hexametilenediamina y ácido adípico. Las suturas
fina. Algunas veces se encuentran engrosamientos pueden teñirse con un colorante atóxico
unilaterales con líneas transversales. &DUDFWHUHV JHQHUDOHV - Es prácticamente
% - Impregnar las fibras aisladas con solución insoluble en solventes orgánicos. No es atacada por
de cloruro de zinc iodado (SR). ). Las fibras deben soluciones alcalinas diluidas (ej. solución de
tomar un color azul-violeta. hidróxido de sodio al 10 %) pero es atacada por
ácidos minerales diluidos (ej. solución de ácido
3ROLDPLGD
sulfúrico al 2 %), ácido acético glacial caliente y
'HILQLFLyQ - La sutura quirúrgica estéril de solución 80 % p/p de ácido fórmico anhidro.
poliamida-6 está constituida por monofilamentos
cilíndricos lisos o filamentos trenzados lisos, o bien ,GHQWLILFDFLyQ
hilos ligeramente retorcidos revestidos en el mismo $ - Al contacto con la llama se funde y arde
material. Se obtiene pasando a través de una matriz formando un glóbulo residual duro y emite un olor
determinada un material plástico sintético característico parecido al apio.
proveniente de la polimerización de İ-caprolactama. % - Colocar 50 mg de sutura en un tubo de
Las suturas pueden teñirse con un colorante atóxico ignición sostenido en posición vertical y calentar
suavemente hasta que se desprenda un humo
&DUDFWHUHV JHQHUDOHV - Es prácticamente espeso, cuando el humo llena el tubo retirar de la
insoluble en solventes orgánicos. No es atacada por llama e introducir una tira de papel de
soluciones alcalinas diluidas (ej. solución de nitrobenzaldehído (Sumergir la mitad inferior de
hidróxido de sodio al 10 %) pero es atacada por una tira de papel de filtro de 10 cm de largo y de 0,8
ácidos minerales diluidos (ej. solución de ácido a 1 cm de ancho, en una solución preparada una
sulfúrico al 2 %), ácido acético glacial caliente y hora antes de su uso, disolviendo 0,2 g de
solución 70 % p/p de ácido fórmico anhidro. nitrobenzaldehído en 10 ml de una solución de
[NOTA: * el nombre Nylon -6 como sinónimo de hidróxido de sodio 200 g en un litro. Absorber el
poliamida-6 puede usarse en algunos países y no en exceso de reactivo entre dos hojas de papel de filtro
otros por derechos de propiedad exclusivos.] y emplear inmediatamente). Aparece lentamente un
color pardo violeta en el papel que se esfuma determinada con una balanza hidrostática, debe
lentamente en el aire. El color desaparece de estar comprendida entre 0,89 y 0,91 g/ml. <160>
inmediato por lavado con ácido sulfúrico 1 M.
6HGDWUHQ]DGD
& - A 50 mg de sutura agregar 10 ml de ácido
clorhídrico 25 %p/p. El material se desintegra en 'HILQLFLyQ - La Sutura Seda Trenzada, se
frío y se disuelve en pocos minutos. obtiene trenzando un número de hebras según el
' – 50 mg no se disuelven en 20 ml de solución diámetro requerido de la seda desgomada obtenida
de ácido fórmico anhidro al 70 % p/p pero se de los capullos del gusano de seda Bombix mori L.
disuelven en 20 ml de solución de ácido fórmico La sutura puede colorearse con pigmentos o
anhidro al 80 % p/p. colorantes aprobados. Ver 50. Colorantes de uso
farmacéutico.
3ROLHWLOHQWHUHIWDODWRSROLpVWHU
,GHQWLILFDFLyQ
'HILQLFLyQ - Se obtiene trenzando un número
$ - Cortar el extremo de una sutura. Aislar
determinado de filamentos muy finos, obtenidos por
algunas hebras con una aguja o pinza fina. Cuando
pasaje de polietilentereftalato a través de una matriz
se examinan al microscopio las hebras pueden
predeterminada; pudiendo ser blanquecino o
presentar estriaciones longitudinales muy finas,
coloreado con colorantes o pigmentos autorizados
paralelas a su eje, la sección transversal es
&DUDFWHUHV JHQHUDOHV - Es prácticamente aproximadamente triangular o semicircular, con los
insoluble en la mayoría de los solventes orgánicos, extremos redondeados y sin lumen.
pero es atacado por soluciones alcalinas fuertes. Es % - Impregnar algunas hebras aisladas con
incompatible con fenoles. solución iodada de ioduro de potasio, preparada
,GHQWLILFDFLyQ disolviendo 2 g de yodo y 4 g de ioduro de potasio
$ - 50 mg de sutura se disuelven con dificultad en 10 ml de agua, completar a 100 ml con agua.
al calentar con 50 ml de dimetilformamida. Las mismas toman un color amarillo pálido.
%- Añadir 10 ml de ácido clorhídrico 25 % p/p $FHURLQR[LGDEOH
a 50 mg de sutura. El material debe permanecer
'HILQLFLyQ – Las suturas quirúrgicas estériles
intacto después de 6 hs de inmersión.
de acero inoxidable mono y multifilamento tienen
3ROLSURSLOHQR una composición química según normas
'HILQLFLyQ - La sutura de polipropileno se internacionales vigentes. Están formadas por
obtiene pasándola a través de una matriz monofilamentos cilíndricos, o filamentos retorcidos
predeterminada. Se presenta como monofilamentos o trenzados lisos.
cilíndricos. ,GHQWLILFDFLyQ
Se identifican verificando que su composición
&DUDFWHUHV JHQHUDOHV - El polipropileno es
está de acuerdo con normas internacionales
soluble en decahidronaftaleno, 1-cloronaftaleno y
vigentes.
tricloroetileno. No es soluble en alcohol, éter y
ciclohexanona.
',È0(752
,GHQWLILFDFLyQ
$ - Se ablanda entre 160 y 170 ºC. Arde con Se utiliza calibrador del tipo de peso muerto,
llama azul, emitiendo un olor de parafina quemada mecánico o eléctrico, equipado con un dial de
y de alcohol octílico. lectura directa, un visor digital o una impresora.
% - Añadir 10 ml de tolueno a 0,25 g de sutura Emplear un calibre graduado de 0,002 mm o menor.
y calentar a reflujo durante 15 minutos. Llevar a El yunque es de aproximadamente 50 mm de
ebullición con un condensador de reflujo durante diámetro, y el pie compresor es aproximadamente
aproximadamente 15 minutos. Colocar unas gotas de 12,70 de diámetro. Graduar el pie compresor y
de la solución sobre un disco de cloruro de sodio, las partes móviles conectadas a éste de manera que
correr y evaporar el solvente en estufa a 80 ºC. se aplique una carga total de 210 ± 3 g a la muestra.
Examinar por espectrofotometría infrarroja <460>. Las superficies del pie compresor y del yunque son
Espectrofotometría infrarroja), comparándolo con planas, con desviaciones no mayores de 0,005 mm,
el espectro obtenido para el polipropileno. y paralelas entre sí con una aproximación de
& - Añadir 100 ml de agua a 2 g de sutura y 0,005 mm. Para medir el diámetro de las suturas de
hervir bajo condensador de reflujo durante 2 horas. 0,4 mm y menor tamaño métrico, retirar el peso
Dejar enfriar. La densidad relativa de la muestra adicional del pie compresor para que la carga total
sobre la sutura no exceda de 60 g.
Sutura de colágeno - Se mide el diámetro tensión por medios adecuados, como por ejemplo,
inmediatamente después de haberla retirado del pasando el extremo libre del hilo alrededor de un
envase primario y extendido sin irregularidades ni cilindro o polea uniéndolo a una pesa de
tensión. Colocar el hilo entre el centro del yunque aproximadamente la mitad del valor mínimo de
y el pie compresor y bajar suavemente el pie hasta resistencia a la tensión para la sutura de Clase 1 del
que todo su peso descanse sobre la sutura. Medir el tamaño en cuestión, con cuidado de no dejar que el
diámetro de cada hilo en tres puntos hilo, si fuera retorcido, pierda la torsión. Medir el
correspondientes, aproximadamente a un cuarto, a diámetro en los puntos designados en el hilo y
la mitad y a tres cuartos de su longitud. calcular el diámetro promedio según las
Sutura quirúrgica no absorbible - Colocar el indicaciones dadas.
hilo a través del centro del yunque y el pie (1*$5=$'2'($*8-$6
compresor y bajar suavemente el pie hasta que todo
Las suturas quirúrgicas absorbibles (de colágeno
su peso descanse sobre la sutura. Medir las suturas
y sintéticas) y las no absorbibles pueden tener
no absorbibles, ya sea que estén envasadas en seco
agujas sujetas firmemente.
o en líquido, inmediatamente después de haberlas
Procedimiento - Tomar cinco suturas y colocar
retirado del envase, sin secado ni
una por una en el tensilómetro, sujetando la aguja
acondicionamiento previo. Se mide el diámetro de
con la pinza fija, dejando toda la parte engarzada
la sutura en tres puntos correspondientes,
expuesta, y en la misma dirección de la fuerza que
aproximadamente a un cuarto, a la mitad y a tres
ejerce la pinza móvil sobre la sutura. Determinar la
cuartos de su longitud. En el caso de suturas
fuerza necesaria para desprender la sutura de la
trenzadas de tamaños mayores de 000 (tamaño
aguja. La sutura puede romperse sin desprenderse
métrico 2), hacer dos mediciones en cada punto,
de la aguja. El engarzado cumple con los requisitos
una en ángulo recto respecto de la otra, y emplear el
si el promedio de los cinco valores y ningún valor
promedio como el diámetro observado en ese punto.
individual es inferior al límite fijado para el tamaño
Sutura quirúrgica absorbible sintética - Se
especificado en la Tabla.
procede según se indica para Sutura quirúrgica no
Si no más de uno de los valores individuales se
absorbible.
encuentra fuera de los límites establecidos, repetir
Suturas de multifilamento - Fijar una porción de la prueba con diez suturas adicionales. Cumple con
la sección designada del hilo en una pinza fija, de los requisitos si ninguno de los diez valores
manera que el hilo quede sobre el centro del adicionales se encuentra fuera de los requisitos del
yunque. Mientras se sostiene el hilo en el mismo límite individual.
plano que la superficie del yunque, someter el hilo a
7DEOD Engarzado de aguja estándar para suturas absorbibles y no absorbibles
NÚMERO Diámetro (mm) Límites de engarzado de aguja
Sutura no Promedio (mínimo) Individual (mínimo)
Sutura
absorbible y
convencional absorbible de
absorbible
colágeno (kgf) (Newton) (kgf) (Newton)
sintética
11/0 0,1 0,007 0,069 0,005 0,049
10/0 0,2 0,014 0,137 0,010 0,098
9/0 0,4 0,3 0,021 0,206 0,015 0,147
8/0 0,5 0,4 0,050 0,490 0,025 0,245
7/0 0,7 0,5 0,080 0,784 0,040 0,392
6/0 1 0,7 0,17 1,67 0,08 0,784
5/0 1,5 1 0,23 2,25 0,11 1,08
4/0 2 1,5 0,45 4,41 0,23 2,25
3/0 3 2 0,68 6,67 0,34 3,33
2/0 3,5 3 1,10 10,8 0,45 4,41
0 4 3,5 1,50 14,7 0,45 4,41
1 5 4 1,80 17,6 0,60 5,88
2 y superior 6 y superior 5 y superior 1,80 17,6 0,70 6,86
5(6,67(1&,$$/$7(16,Ï1
Determinar la resistencia a la tensión de las velocidad de inclinación del plano es tal que
suturas quirúrgicas en un instrumento que emplee el alcanza su inclinación máxima de 30° sobre la
principio de velocidad de carga constante sobre la horizontal en 60 ± 5 segundos desde el comienzo de
muestra o el principio de velocidad de elongación la prueba.
constante de la muestra, según se describe a
Salvo cuando en la monografía individual se
continuación. El aparato tiene dos pinzas para
indica tracción recta, sin nudo, atar la sutura de
sostener un hilo de la sutura. Una de estas pinzas es
prueba realizando un nudo de cirujano con una
móvil. Las pinzas están diseñadas para que la
vuelta de sutura, alrededor de un tubo de goma
sutura que se va a probar pueda ser fijada sin que se
flexible con un diámetro interno de 6,5 mm y un
deslice. La longitud ensayada se define como la
espesor de pared de 1,6 mm. El nudo de cirujano es
distancia interior entre las dos pinzas. Debe ser
un nudo en el cual el extremo libre se pasa primero
entre 125 a 200 mm y la pinza móvil ser accionada
dos veces por el lazo, en lugar de una vez, y se
a una velocidad de elongación constante de
ajusta tirante, luego se pasa una vez por un segundo
30 ± 5 cm por minuto. Medir la resistencia a la
lazo y se tensan los extremos de manera que quede
tensión de la sutura, ya sea que esté envasada en
un nudo sencillo superpuesto a un nudo doble.
seco o con líquido, inmediatamente después de
Comenzar el primer nudo con el extremo izquierdo
haberla retirado del envase, sin secado ni
sobre el extremo derecho, ejerciendo tensión
acondicionamientos previos. Sujetar uno de los
suficiente para atar el nudo con firmeza. Cuando la
extremos de la sutura a la pinza del extremo de
muestra de prueba incluya un nudo, colocar la
carga de la máquina, pasar el otro extremo a través
muestra en el dispositivo de prueba con el nudo
de la pinza opuesta, aplicando tensión suficiente
aproximadamente a media distancia entre las
para que la muestra quede tirante entre las pinzas, y
pinzas. Dejar el tubo de goma flexible en su lugar
cerrar la segunda pinza. Realizar tantas
mientras dure la prueba.
determinaciones como las especificadas en la
monografía individual. Si la ruptura ocurre en Procedimiento para un instrumento que opera
cualquiera de las pinzas, descartar la lectura de la por el principio de velocidad de elongación
muestra. constante de la muestra - Excepto cuando en la
monografía individual se indique tracción recta, sin
Procedimiento para un instrumento que opera
nudo, atar la sutura de prueba por medio de un nudo
por el principio de velocidad de carga constante
simple, colocando un extremo del hilo, sostenido
sobre la muestra - Esta descripción se aplica al
con la mano derecha, por encima del otro extremo,
instrumento conocido como Comprobador de Plano
sostenido con la mano izquierda, pasando un
inclinado. El carro empleado en cualquier prueba
extremo sobre el hilo y a través del lazo que se
es de un peso tal que al ocurrir la ruptura, la
formó y luego ajustando el nudo con firmeza. La
posición de la pluma registradora sobre la gráfica
muestra se coloca en el dispositivo de prueba con el
queda entre 20 y 80 % de la capacidad que pueda
nudo aproximadamente a media distancia entre las
registrarse en la gráfica. La fricción en el carro es
pinzas.
suficientemente baja como para permitir que la
pluma registradora se aparte de la línea cero de la [NOTA: Calibre: se puede expresar en forma de
gráfica en un punto que no exceda el 2,5 % de la calibre métrico que representa el grosor de la sutura
capacidad de la gráfica cuando no haya ninguna en décimas de milímetro: métrico 0,1
muestra sujeta entre las pinzas. (0,010-0,019 mm) a métrico 10 (1,00-1,09 mm), o
bien, en calibre convencional, que expresa el grosor
Para suturas quirúrgicas de tamaños intermedios
en forma convencional: 11/0 (0,010-0,019 mm) a
y más gruesas, la pinza para sostener la muestra es
calibre 6 (1,00-1,09 mm).@
del tipo rodillo, con una superficie de sujeción
plana. El rodillo tiene un diámetro de 19 mm y la
superficie de sujeción plana no es menor de 25 mm
de longitud. La longitud de la muestra, una vez que
se inserta en las pinzas, es de por lo menos 127 mm
de un extremo a otro. La velocidad de inclinación
del plano del comprobador es tal que alcanza su
inclinación máxima de 30° sobre la horizontal en
20 ± 1 segundo desde el comienzo de la prueba.
Para suturas quirúrgicas de menor calibre, la
pinza apropiada tiene una superficie de sujeción
plana de no menos de 13 mm de longitud. La
(16$<26(1+(02'(5,9$'26
9$/25$&,Ï1'($17,7520%,1$,,, Precalentar 200 µl de cada dilución de la Prepara-
+80$1$ ción muestra y de la Preparación estándar a 37 °C
Estimar la potencia del Concentrado de Anti- durante 1 a 2 minutos. Agregar a cada dilución
trombina III Humana por comparación de su habili- 200 µl de Solución de trombina bovina, mezclar y
dad para inactivar trombina en presencia de un mantener a 37 °C durante 1 minuto. Agregar 500 µl
exceso de heparina con la misma habilidad de una de Sustrato cromogénico diluido hasta una concen-
sustancia de referencia de antitrombina III humana tración apropiada para el ensayo usando solución
calibrada en UI. Mezclar cantidades variables de reguladora Tris-EDTA BSA pH 8,4 (sin albúmina).
antitrombina III con una cantidad dada de trombina Medir inmediatamente el cambio de las absorban-
y determinar el remanente de trombina mediante cias a 405 nm durante al menos 30 segundos. Cal-
un sustrato cromogénico apropiado. cular el valor de 'A/min. Alternativamente puede
La Unidad Internacional es la actividad de anti- llevarse a cabo un ensayo de punto final deteniendo
trombina III de una cantidad establecida de Patrón la reacción con ácido acético y midiendo la absor-
Internacional de antitrombina III. La equivalencia bancia a 405 nm o también es posible detener la
en Unidades Internacionales del Patrón Internacio- reacción de hidrólisis tras un intervalo apropiado
nal la establece la Organización Mundial de la Sa- bajando el pH mediante el agregado de un reactivo
lud. apropiado, como ácido acético al 50 %v/v o una
solución de citrato 1 M a pH 3. El valor de cambio
Aplicar la siguiente técnica. de absorbancia ('A/min) o A es inversamente pro-
Soluciones reguladoras - Emplear Tris-EDTA porcional a la actividad de antitrombina III. Calcu-
pH 8,4 y Tris-EDTA BSA pH 8,4 (ver Soluciones lar la potencia de la muestra a examinar y compro-
reguladoras en Reactivos y Soluciones). bar la validez del ensayo empleando los métodos
Solución reguladora para dilución - Preparar estadísticos habituales (ver 10. Análisis estadístico
una solución de Tris-EDTA BSA pH 8,4 que con- de resultados de ensayos biológicos).
tenga 15 UI de heparina por ml.
Solución de trombina bovina - Preparar una so- 9$/25$&,Ï1'(+(3$5,1$(1
lución que contenga 2 UI de trombina bovina por )$&725(6'(&2$*8/$&,Ï1
ml de solución reguladora Tris-EDTA BSA pH 8,4. El método para determinar la actividad de hepa-
Sustrato cromogénico - D-fenilalanil- rina en factores de coagulación es un ensayo cro-
L-pipecolil-L-arginina-4-nitroanilida reconstituido mogénico en el cual se estima su actividad por su
en agua para obtener una solución 4 mmol por litro. efecto inhibitorio sobre el factor Xa (actividad anti-
Preparación estándar - Diluir la sustancia de Xa). La potencia de heparina se estima comparan-
referencia de antitrombina III humana calibrada en do su actividad inhibitoria con un Patrón Interna-
UI con Solución reguladora para dilución para cional o Patrón Nacional calibrado en Unidades
obtener una solución que contenga una 1 UI de Internacionales.
antitrombina III por ml. Realizar por duplicado y La Unidad Internacional es la actividad de hepa-
en forma independiente por lo menos tres dilucio- rina en una cantidad establecida de patrón Interna-
nes en el rango de 1/75 a 1/200 en progresión ge- cional. La equivalencia en Unidades Internaciona-
ométrica o aritmética utilizando la misma Solución les del Patrón Internacional la establece la Organi-
reguladora. zación Mundial de la Salud.
Preparación muestra - Diluir El Concentrado El método cromogénico de valoración consiste
de Antitrombina III Humana con Solución regula- en los siguientes pasos: la formación del complejo
dora para obtener una solución que contenga 1 UI heparina-antitrombina III, en el cual se debe asegu-
de antitrombina III por ml. Realizar por duplicado y rar un exceso de antitrombina III en el medio en el
en forma independiente por lo menos tres dilucio- que se produce la reacción, la formación del com-
nes en el rango de 1/75 a 1/200 en progresión ge- plejo heparina antitrombina III-factor Xa, en el cual
ométrica o aritmética utilizando la misma Solución el factor Xa debe estar en exceso, y el clivaje en-
reguladora. zimático de un sustrato cromogénico específico
Procedimiento - Según el ensayo se realice en para factor Xa (residual) para dar un cromóforo que
tubos o en microplacas, ajustar los volúmenes de puede ser cuantificado espectrofotométricamente.
manera que se mantengan las proporciones de la Bajo condiciones adecuadas, existe una relación
mezcla. Realizar dos reacciones de cada dilución.
inversamente proporcional entre la actividad de mejora en la linealidad de la relación dosis-
heparina y el clivaje del sustrato cromogénico. respuesta.
5HDFWLYRV Método cinético - Agregar 40 Pl de una solu-
Solución reguladora para diluciones - Solución ción 2 mmol por litro de Sustrato cromogénico del
de 6,05 g por litro de factor Xa, incubar a 37 °C y cuantificar la velocidad
Tris(hidroximetil)aminometano, si es necesario, de liberación del sustrato, que debe ser inversamen-
ajustar el pH a 8,4 con ácido clorhídrico. te proporcional a la concentración de heparina,
Sustrato cromogénico del factor Xa - Un sustra- midiendo en un espectrofotómetro el cambio de
to cromogénico específico para factor Xa tal como absorbancia a una longitud de onda apropiada por
cloruro de N-benzoil-L-isoleucil-L-glutamil-glicil- monitoreo continuo de la absorbancia. Determinar
L-arginina-4-nitroanilida. Reconstituir según se la velocidad de cambio de absorbancia a 405 nm
indica en el rótulo. continuamente por un período de tiempo y obtener
Solución de antitrombina III la velocidad media del cambio de absorbancia
Solución de factor Xa bovino ('A/min).
Plasma humano normal Comprobar la validez del ensayo y calcular la
actividad de heparina en la preparación a examinar
Preparación estándar - Diluir con Solución re- por los métodos estadísticos habituales para un
guladora para diluciones para obtener una solución ensayo de relación de pendientes (ver 10. Análisis
de 0,1 UI por ml de heparina. estadístico de resultados de ensayos biológicos).
Preparación muestra - Diluir la preparación en
ensayo con Solución reguladora para diluciones )$&725(6'(&2$*8/$&,Ï1
para obtener una solución de 0,1 UI de heparina por $&7,9$'26
ml. [NOTA: cuando corresponda, determinar la can-
Procedimiento - Las siguientes condiciones de tidad de heparina presente y neutralizarla por agre-
trabajo se aplican a placas de 96 pocillos. Si el gado de sulfato de protamina (10 ȝJ GH VXOIDWR GH
ensayo es llevado a cabo en tubos, los volúmenes protamina neutralizan 1 UI de heparina).]
deben ser ajustados manteniendo la proporción en Preparar diluciones 1 en 10 y 1 en 100 de la
la mezcla. Inmediatamente antes de iniciar el ensa- preparación en ensayo empleando una solución
yo, calentar todas las soluciones en un baño de agua reguladora tris(hidroximetil)aminometano pH 7,5
a 37 °C. Distribuir en una serie de tubos o pocillos (ver Soluciones reguladoras en Reactivos y Solu-
de la placa, preferentemente por duplicado, 20 Pl de ciones). Colocar en un baño de agua a 37 °C una
Plasma humano normal y 20 Pl de Solución de serie de tubos de poliestireno y agregar a cada tubo
antitrombina III. Agregar a los tubos o pocillos 0,1 ml de plasma pobre en plaquetas y 0,1 ml de
volúmenes crecientes en progresión aritmética (por una dilución apropiada de cefalina o sustituto de
ejemplo 20 Pl, 60 Pl, 100 Pl y 140 Pl) de la Prepa- plaquetas. Dejar en reposo durante 60 segundos.
ración muestra o la Preparación estándar y com- Agregar a cada tubo 0,1 ml de una de las diluciones
pletar a un volumen final de 200 Pl empleando o 0,1 ml de solución reguladora (tubo control).
Solución reguladora para diluciones (0,02 a Inmediatamente agregar a cada tubo 0,1 ml de una
0,08 UI por ml de heparina en la mezcla final de solución de cloruro de calcio 3,7 g por litro (preca-
reacción). Las concentraciones se pueden modifi- lentada a 37 °C) y medir el tiempo que transcurre
car si con ellas se obtienen una mejor linealidad en entre el agregado del cloruro de calcio y la forma-
la relación dosis-respuesta. Transferir 40 Pl de cada ción de un coágulo. El ensayo debe realizarse en un
tubo o pocillo a una segunda serie de los pocillos, tiempo no mayor a 30 minutos luego de haber reali-
agregar 20 Pl de Solución de factor Xa bovino e zado la dilución original. El ensayo solo es válido
incubar a 37 °C durante 30 segundos. si el tiempo de coagulación medido para el tubo
Método de punto final - Agregar 40 Pl de una control esté entre 200 y 350 segundos.
solución 1 mmol por litro de Sustrato cromogénico 9$/25$&,Ï1'(/)$&725,,'(
del factor Xa e incubar a 37 °C durante 3 minutos. &2$*8/$&,Ï16$1*8Ë1($
Finalizar la reacción disminuyendo el pH por agre-
El método para determinar la actividad de fac-
gado de un reactivo adecuado tal como una solución
tor II de coagulación es un ensayo cromogénico en
al 20 % v/v de ácido acético glacial y medir la ab-
sorbancia (ver 470. Espectrofotometría ultravioleta el cual se determina la actividad de factor II a través
de su activación específica y formación de fac-
y visible) a 405 nm. En general, los tiempos de
tor IIa. La potencia de la preparación de factor II se
reacción están comprendidos entre 3 y 15 minutos,
estima comparando su actividad con un Patrón
pero se admiten variaciones si así se obtiene una
Internacional o una sustancia de referencia calibra- 96 pocillos, si el ensayo se lleva a cabo en tubos, se
da en Unidades Internacionales. deben ajustar los volúmenes de manera que se man-
La Unidad Internacional es la actividad de factor tengan las proporciones de la mezcla; se deben
II de una cantidad establecida de Patrón Internacio- realizar dos reacciones de cada dilución. En una
nal que consiste en un concentrado liofilizado de placa de 96 pocillos mantenida a 37 °C, agregar por
factor II humano. La equivalencia en Unidades duplicado 25 µl de cada dilución de la Preparación
Internacionales del Patrón Internacional la establece muestra o la Preparación estándar a cada uno de
la Organización Mundial de la Salud. los pocillos. Agregar 125 µl de solución reguladora
El método cromogénico de valoración consiste a cada pocillo, luego 25 µl de Veneno de víbora
en dos pasos: la activación del factor II a factor IIa específico para activar factor II e incubar durante
dependiente de veneno de serpiente y el clivaje exactamente 2 minutos. A cada pocillo agregar
enzimático de un sustrato cromogénico específico 25 µl de Sustrato cromogénico para Factor IIa. Se
para factor IIa, para dar un cromóforo que puede ser admiten modificaciones de volúmenes de los reacti-
cuantificado espectrofotométricamente. Bajo con- vos si con ellas se obtiene una mejor linealidad en
diciones adecuadas, existe una relación lineal entre la relación dosis-respuesta. Determinar la veloci-
la actividad del factor IIa y el clivaje del sustrato dad de cambio de absorbancia (ver 470. Espectrofo-
cromogénico. tometría ultravioleta y visible) a 405 nm de forma
continua durante 3 minutos y obtener el promedio
5HDFWLYRV
Solución reguladora para dilución - Solución de velocidad de cambio de absorbancia ('A/min).
que contiene 6,06 g por litro de Si no se puede medir en forma continua, leer la
Tris(hidroximetil)aminometano, 17,53 por litro de absorbancia a 405 nm a intervalos consecutivos
cloruro de sodio, 2,79 g por litro de ácido (etilendi- adecuados, durante 40 segundos, graficar la absor-
nitrilo)tetracético y 1 g por litro de albúmina bovina bancia en función del tiempo y calcular 'A/min
o albúmina humana. Ajustar a pH 8,4 si fuera nece- como la pendiente de la recta. El método se puede
sario, con ácido clorhídrico. adaptar a una reacción de punto final deteniendo la
Veneno de víbora específico para activar fac- reacción de hidrólisis tras un intervalo apropiado
tor II (Ecarina) - Se trata de una proteína derivada bajando el pH por adición de un reactivo apropiado
del veneno de víbora (Echis carinatus) que activa como ácido acético (50 % v/v) o una solución de
específicamente el factor II. Reconstituir y almace- citrato 1M a pH 3. Ajustar el tiempo de hidrólisis
nar según se indica en el rótulo. para conseguir un incremento lineal del cromóforo
Sustrato cromogénico para Factor IIa - Sustra- a lo largo del tiempo. Con los valores de 'A/min o
tos cromogénicos específicos para factor IIa tales de A de cada dilución tanto de muestra como de
como: H-D-fenilalanil-L-pipecolil-L-arginina-4- estándar, calcular la potencia de la muestra a exa-
nitroanilida clorhidrato, 4-toluensulfonil-glicil- minar y comprobar la validez del ensayo empleando
prolil-L-arginina-4-nitroanilida, H-D- los métodos estadísticos habituales (ver 10. Análi-
ciclohexilglicil-D-aminobutiril-L-arginina-4- sis estadístico de resultados de ensayos biológicos).
nitroanilida, diacetato de D-ciclohexilglicil-L- 9$/25$&,Ï1'(/)$&7259,,'(
alanil-L-arginina-4-nitroanilida. Reconstituir según &2$*8/$&,Ï16$1*8Ë1($
se indica en el rótulo.
El método para determinar la actividad de fac-
Preparación estándar - Diluir con Solución re- tor VII de coagulación es un ensayo cromogénico
guladora para dilución para obtener una solución en el cual se determina su actividad biológica como
entre 0,015 y 0,16 UI por ml de factor II. Preparar, complejo factor VIIa-factor tisular en la activación
preferentemente por duplicado y en forma indepen- del factor X en presencia de iones calcio y fosfolí-
diente, al menos tres diluciones en progresión ge- pidos. La potencia de la preparación de factor VII
ométrica o aritmética empleando el mismo solvente. se estima comparando la cantidad necesaria para
Preparación muestra - Diluir con Solución re- alcanzar una cierta velocidad de formación del
guladora para dilución para obtener una solución factor Xa en una mezcla que contiene las sustancias
entre 0,015 y 0,16 UI por ml de factor II. Preparar, que intervienen en la activación del factor X y la
preferentemente por duplicado y en forma indepen- cantidad de Patrón Internacional o de una prepara-
diente, al menos tres diluciones en progresión ge- ción de referencia, calibrada en Unidades Interna-
ométrica o aritmética empleando el mismo solvente. cionales, requerida para producir la misma veloci-
Procedimiento - Precalentar todas las solucio- dad de formación de factor Xa. La Unidad Interna-
nes en un baño de agua a 37 °C inmediatamente cional se define como la actividad del factor VII de
antes de realizar el ensayo. Las siguientes condi- una cantidad establecida de Patrón Internacional,
ciones de ensayo se utilizan para placas de que consiste en un concentrado de factor VII huma-
no liofilizado. La equivalencia en Unidades Inter- segundo paso es el clivaje enzimático de un sustrato
nacionales del Patrón Internacional la establece la cromogénico específico para el factor Xa, para dar
Organización Mundial de la Salud. un cromóforo que se puede cuantificar espectrofo-
El método cromogénico consta de dos pasos tométricamente. En las condiciones adecuadas,
consecutivos: la activación del factor VII a factor existe una relación lineal entre la velocidad de for-
VIIa, por medio del factor tisular y calcio, la activa- mación del factor Xa y la concentración del factor
ción de factor X a factor Xa por la presencia de VII. El ensayo se resume en el siguiente esquema:
factor VIIa, calcio fosfolípidos y factor tisular y el
Etapa 1:
2+
a) Factor VII
Factor tisular + Ca
o Factor VIIa
2
Factor VIIa + Ca Factor tisular/ fosfolípidos
b) Factor X o Factor Xa
Etapa 2:
Sustrato cromogénico
Factor Xa
o Péptido + cromóforo
En ambas etapas se utilizan reactivos que pue- espectrofotométrica. El sustrato se disuelve nor-
den ser obtenidos comercialmente. La composición malmente en agua y se utiliza a una concentración
de cada reactivo puede estar sujeta a alguna varia- final entre 0,2 y 2 mmol por litro. El sustrato puede
ción, sus características esenciales se describen en contener también inhibidores para detener la forma-
las siguientes especificaciones: los reactivos contie- ción adicional de factor Xa (adición de edetato).
nen proteínas purificadas de origen humano o bovi- Preparación estándar - Reconstituir el conteni-
no. Éstas incluyen factor X, factor tisular y fosfolí- do completo de una ampolla de la preparación con
pidos como activador del factor VII. Estas proteí- el agregado de una cantidad apropiada de agua;
nas están parcialmente purificadas y no deben con- emplear las preparaciones reconstituidas dentro de
tener impurezas que interfieran en la activación del la hora de su preparación. Realizar una dilución
factor VII o del factor X. El factor X está presente con suficiente prediluyente para obtener una solu-
en cantidades cuya concentración final durante el ción que contenga entre 0,5 UI y 2,0 UI de factor
primer paso del ensayo esta comprendida entre 10 y VII por mililitro. Preparar las diluciones posterio-
350 nmol por litro (preferentemente de 14 a res empleando una solución reguladora isotónica y
70 nmol por litro). Tromboplastina de origen natu- no quelante que contenga 1 % de albúmina humana
ral (cerebro bovino o de conejo) o de origen sintéti- o bovina, regulada entre pH 7,3 y 8,0. Preparar
co, se puede usar como fuente de factor tisular y preferentemente por duplicado y en forma indepen-
fosfolípidos. La Tromboplastina adecuada para uso diente por lo menos tres diluciones en progresión
en la determinación del tiempo de protrombina se geométrica o aritmética. Las diluciones deben
diluye entre 1 en 5 y 1 en 50 en una solución regu- prepararse de forma tal que la concentración final
ladora tal que la concentración final de Ca2+ este de factor VII esté por debajo de 0,005 UI por ml.
comprendida entre 15 y 25 nmol por litro. La for- Preparación muestra - Reconstituir el conteni-
mación final de factor Xa es realizada en una solu- do completo de la ampolla según se indica en el
ción que contiene albúmina humana o bovina con rótulo. Emplear las preparaciones reconstituidas
una concentración tal que no se produzca pérdida dentro de la hora de su preparación. Hacer una
por adsorción y que está apropiadamente regulada a dilución con suficiente prediluyente para obtener
pH entre 7,3 y 8,0. En la mezcla de incubación una solución que contenga entre 0,5 UI y 2,0 UI de
final, el factor VII debe ser el único componente factor VII por mililitro. Preparar las diluciones
limitante de la velocidad y cada componente del posteriores empleando una solución reguladora
reactivo no debe tener capacidad de generar el fac- isotónica y no quelante que contenga 1 % de albú-
tor Xa por sí mismo. mina humana o bovina, regulada entre pH 7,3 y 8,0.
La segunda etapa comprende la cuantificación Preparar preferentemente por duplicado y en forma
del factor Xa por medio de un sustrato cromogénico independiente por lo menos tres diluciones en pro-
específico para el factor Xa. Este sustrato general- gresión geométrica o aritmética. Las diluciones
mente consiste de un péptido corto que tiene entre 3 deben prepararse de forma tal que la concentración
y 5 aminoácidos, unido a un grupo cromóforo. final de factor VII esté por debajo de 0,005 UI/ml.
Cuando se cliva este grupo del péptido sustrato, se Procedimiento - Preparar una solución control
produce un cambio de absorbancia a una longitud que incluya todos los componentes exceptuando el
de onda apropiada que permite su cuantificación factor VII (blanco).
[NOTA: preparar todas las diluciones en tubos se admiten variaciones si así se obtiene una mejora
de plástico y usarlas dentro de la hora de su prepa- en la linealidad de la relación dosis-respuesta.
ración; se deben realizar al menos dos reacciones de Comprobar la validez del ensayo y calcular la
cada dilución.] potencia de la preparación a examinar empleando
Etapa 1. Mezclar las diluciones de la prepara- los métodos estadísticos habituales (ver 10. Análi-
ción de referencia del factor VII y de la preparación sis estadístico de resultados de ensayos biológicos).
a examinar con un volumen apropiado del reactivo 9$/25$&,Ï1'(/)$&7259,,,'(
de factor de coagulación precalentado o con una &2$*8/$&,Ï16$1*8,1($
combinación de sus constituyentes separados, e
El método para determinar la actividad de factor
incubar la mezcla en tubos de plástico o en pocillos
VIII es un ensayo cromogénico en el cual se deter-
de microplaca a 37 °C. Las concentraciones de los
mina su actividad biológica como cofactor en la
diversos componentes durante la formación del
activación del factor X por el factor IX activado
factor Xa deben ser las especificadas en la descrip-
(factor IXa) en presencia de iones calcio y fosfolí-
ción de los reactivos. Dejar que la activación del
pidos. La potencia de la preparación del factor VIII
factor X proceda durante un tiempo apropiado,
se estima comparando la cantidad necesaria para
terminando la reacción antes de que la concentra-
alcanzar una cierta velocidad de formación del
ción del factor Xa alcance su nivel máximo, con el
factor Xa en una mezcla de reacción que contiene
fin de obtener una relación lineal satisfactoria entre
las sustancias que intervienen en la activación del
dosis y respuesta. Los tiempos adecuados de acti-
factor X y la cantidad de un Patrón Internacional o
vación están normalmente entre 2 y 5 minutos, pero
de una preparación de referencia calibrada en Uni-
se admiten desviaciones si con ellas se obtiene
dades Internacionales, requerida para producir el
mejor linealidad de la relación dosis-respuesta.
mismo efecto.
Etapa 2. Determinar el factor Xa por adición de
La Unidad Internacional es la actividad del fac-
un reactivo precalentado que contenga el sustrato
tor VIII de una cantidad establecida de Patrón In-
cromogénico. Cuantificar la velocidad de libera-
ternacional, que consiste en concentrado de factor
ción del sustrato, que debe ser proporcional a la
VIII humano liofilizado. La equivalencia en Uni-
concentración del factor Xa formado, midiendo en
dades Internacionales del Patrón Internacional la
un espectrofotómetro el cambio de absorbancia a
establece la Organización Mundial de la Salud.
una longitud de onda apropiada por monitoreo con-
El método cromogénico consta de dos pasos
tinuo de la absorbancia. Determinar la velocidad de
consecutivos: la activación del factor X a factor Xa
cambio de absorbancia a 405 nm continuamente por
que depende del factor VIII y el clivajeenzimático
un período de tiempo y obtener la velocidad media
de un sustrato cromogénico específico para el fac-
del cambio de absorbancia ('A/min) o detener la tor Xa, produciendo un cromóforo que se puede
reacción de hidrólisis por disminución del pH a 3, cuantificar espectrofotométricamente. En las con-
con un reactivo tal como ácido acético (500 g por diciones adecuadas, existe una relación lineal entre
litro) o solución de citrato 1 M tras un intervalo de la velocidad de formación del factor Xa y la con-
tiempo apropiado (A). Ajustar el tiempo de hidróli- centración del factor VIII. El resumen del ensayo
sis de modo tal de alcanzar un desarrollo lineal del se indica en el siguiente esquema:
cromóforo con el tiempo. En general los tiempos
de hidrólisis suelen estar entre 3 y 15 minutos, pero
Etapa 1:
a) Factor X
Factor VIII activado
Factor IXa + fosfolípidos + Ca 2
o Factor Xa
Etapa 2:
Sustrato cromogénico
Factor Xa
o Péptido + cromóforo
En ambas etapas se utilizan reactivos que pue- tas desviaciones de esta descripción únicamente si
den ser obtenidos comercialmente. La composición se ha comprobado, usando el Patrón Internacional
de cada reactivo puede estar sujeta a alguna varia- de factor VIII, que los resultados obtenidos no di-
ción, sus características esenciales se describen en fieren significativamente.
la siguiente especificación: pueden permitirse cier-
[NOTA: es importante demostrar por la valida- Realizar una dilución con suficiente cantidad de
ción, la adecuabilidad del kit usado, chequeando el Prediluyente para obtener una solución que conten-
tiempo de generación de factor X para determinar el ga entre 0,5 y 2,0 Unidades Internacionales por
tiempo necesario para alcanzar el 50 % de la gene- mililitro. Preparar las siguientes diluciones de la
ración máxima de factor X.] preparación estándar empleando una solución
Reactivo factor de coagulación - Contiene pro- isotónica regulada, no quelante que contenga 1 %
teínas purificadas de origen humano o bovino. de albúmina humana o bovina, por ejemplo,
Estas incluyen el factor X, factor IXa, y un activa- tris(hidroximetil)aminometano o imidazol. Preparar
dor del factor VIII usualmente trombina. Estas preferentemente por duplicado y en forma indepen-
proteínas parcialmente purificadas, al menos hasta diente por lo menos tres diluciones en progresión
el 50 %, no contienen impurezas que interfieren con geométrica o aritmética. Laconcentración final del
la activación del factor VIII o del factor X. La factor VIII deberá ser inferior a 0,01 UI por ml
trombina puede estar presente en su forma precur- durante el paso de formación del factor Xa.
sora protrombina, siempre que su activación en el Preparación muestra - Reconstituir el conteni-
reactivo sea suficientemente rápida para provocar la do de la ampolla según se indica en el rótulo y em-
activación completa y prácticamente instantánea del plear inmediatamente. Realizar una dilución con
factor VIII durante el ensayo. Los fosfolípidos se suficiente cantidad de Prediluyente para obtener
pueden obtener de un sustrato natural o pueden una solución que contenga entre 0,5 y 2,0 UI por
prepararse por síntesis, pero deben contener una mililitro. Preparar las siguientes diluciones emple-
proporción importante, de fosfatidilserina. Los ando una solución isotónica regulada, no quelante
componentes del reactivo completo suelen encon- que contenga 1 % de albúmina humana o bovina,
trarse separados en al menos dos reactivos distintos, por ejemplo, tris(hidroximetil)aminometano o imi-
carentes de la capacidad de formar el factor Xa por dazol. Preparar preferentemente por duplicado y
sí solos. Uno de los reactivos contiene iones calcio en forma independiente por lo menos tres dilucio-
Después de la reconstitución, éstos se pueden com- nes en progresión geométrica o aritmética. Lacon-
binar, siempre que se pruebe que no se generan centración final del factor VIII en la mezcla reac-
cantidades significativas de factor Xa en ausencia ción deberá ser inferior a 0,01 UI por ml durante el
del factor VIII. En la mezcla de incubación final, el paso de formación del factor Xa.
factor VIII debe ser el único componente limitante Procedimiento - Preparar una solución blanco
de la velocidad. que incluya todos los componentes excepto el fac-
El segundo paso comprende la cuantificación tor VIII. [NOTA: preparar todas las diluciones en
del factor Xa formado, empleando un sustrato cro- tubos de plástico y emplearlas inmediatamente. Se
mogénico específico para el factor Xa. General- debe realizar al menos dos replicas de cada dilu-
mente consiste en un péptido corto derivatizado, de ción.]
entre 3 y 5 aminoácidos, unido a un grupo cromófo- Etapa 1. Mezclar las diluciones precalentadas
ro. Cuando se cliva este grupo a partir del péptido de la Preparación estándar y la Preparación mues-
sustrato, se produce un cambio de absorbancia a tra con un volumen apropiado de Reactivo factor de
una longitud de onda apropiada que permite su coagulación, también precalentado, o con la combi-
cuantificación espectrofotométrica. El sustrato nación de sus constituyentes separados. Incubar en
debe contener también inhibidores apropiados para tubos de plástico o en pocillos de microplaca a
detener la formación adicional del factor Xa (por 37 °C. Las concentraciones de los distintos compo-
ejemplo agentes quelantes) y suprimir la actividad nentes durante la formación del factor Xa deben ser
de la trombina. las especificadas anteriormente en la descripción de
Prediluyente - Consiste de plasma de un pa- los reactivos. Permitir que la activación del factor
ciente con hemofilia A grave, o de un reactivo pre- X proceda durante un tiempo apropiado, terminan-
parado artificialmente que contenga suficiente fac- do la reacción (Etapa 2) cuando la concentración
tor von Willebrand y que de resultados que no difie- del factor Xa alcance aproximadamente el 50 % del
ren significativamente de los obtenidos empleando nivel máximo. Los tiempos de activación están
plasma hemofílico en las preparaciones patrón y normalmente entre 2 y 5 min.
problema. Los materiales prediluidos deben ser Etapa 2. Determinar el factor Xapor agregado
estables durante un tiempo superior al requerido del sustrato cromogénico precalentado. Cuantificar
para el ensayo. la proporción de sustrato escindido, que debe ser
Preparación estándar - Reconstituir el conteni- lineal con respecto a la concentración del factor Xa
do de la ampolla mediante el agregado de una can- formado, midiendo en un espectrofotómetro el
tidad apropiada de agua; usar inmediatamente. cambio de absorbancia a una longitud de onda
apropiada. Puede registrarse la absorbancia de
modo continuo,por medio de la lectura de la velo- de esta dilución preparar, preferentemente por du-
cidad de cambio de absorbancia a 405 nm conti- plicado y en forma independiente, al menos tres
nuamente por un período de tiempo y obtener la diluciones, en progresión geométrica utilizando
velocidad media del cambio de absorbancia solución reguladora adecuada (por ejemplo solución
('A/min) o también es posible detener la reacción reguladora de imidazol a pH 7,3 conteniendo 10 g
de hidrólisis tras un intervalo apropiado bajando el por litro de albúmina bovina o humana). Preparar
pH por adición de un reactivo apropiado, como estas diluciones con precisión y utilizarlas inmedia-
ácido acético al 50 % v/v o una solución de citrato tamente.
(1 mol por litro), a pH 3. Ajustar el tiempo de Preparación muestra - Reconstituir la prepara-
hidrólisis para conseguir un incremento lineal del ción en ensayo según se indica en el rótulo y utilizar
cromóforo a lo largo del tiempo. Los tiempos ade- inmediatamente. Cuando corresponda, determinar
cuados de hidrólisis suelen estar entre 3 y 15 min, la actividad de heparina presente y neutralizarla
pero se admiten variaciones si con ellas se obtiene mediante la adición de por ejemplo sulfato de pro-
una mejor linealidad en la reacción dosis-respuesta. tamina (10 µg de sulfato de protamina neutralizan
Comprobar la validez del ensayo y calcular la 1 UI de heparina). Diluir la preparación en ensayo
potencia de la preparación a examinar empleando con plasma carente de factor IX para obtener una
los métodos estadísticos usuales (ver 10. Análisis solución que contenga entre 0,5 y 2,0 UI por milili-
estadístico de resultados de ensayos biológicos). tro. Preparar diluciones en progresión geométrica
de igual manera que la preparación estándar.
9$/25$&,Ï1'(/)$&725,;'(
Procedimiento - Usar un aparato apropiado para
&2$*8/$&,Ï16$1*8Ë1($
medir tiempos de coagulación o realizar el ensayo
El método para determinar la actividad de fac- colocando los tubos en baño de agua a 37 °C. Rea-
tor IX es un ensayo de coagulación basado en la lizar la reacción por duplicado en el siguiente orden
capacidad del factor IX de reducir el tiempo de E1, E2, E3, M1, M2, M3 y con el otro juego de
coagulación de un plasma carente de factor IX. La diluciones continuar en el siguiente orden M1, M2,
reacción es acelerada por el agregado de un reactivo M3, E1, E2 y E3. Colocar en cada tubo 0,1 ml
que contenga fosfolípidos y un activador de contac- plasma carente de factor IX y 0,1 ml de una de las
to como por ejemplo caolín, sílica o ácido ellágico. diluciones de la Preparación estándaro de la Pre-
La potencia es determinada por comparación de la paración muestra. Añadir a cada tubo 0,1 ml de un
curva dosis-respuesta de la preparación muestra, reactivo que contenga fosfolípidos y un activador
con la de una preparación de referencia calibrada en de contacto apropiado para Tiempo de Tromboplas-
Unidades Internacionales. tina Parcial Activado (TTPA) e incubar el tiempo
La Unidad Internacional es la actividad de una recomendado a 37 °C. A cada tubo añadir 0,1 ml
cantidad establecida de Patrón Internacional, que de una solución 3,7 g por litro de cloruro de calcio
consiste en un concentrado liofilizado de factor IX previamente calentado a 37 °C. Utilizando un
de coagulación. La equivalencia en Unidades In- cronómetro, medir el tiempo de coagulación, es
ternacionales del Patrón Internacional la establece decir, el intervalo entre el momento de agregado del
la Organización Mundial de la Salud. cloruro de calcio y la primera indicación de forma-
5HDFWLYRV ción de fibrina. [NOTA: se recomienda utilizar
Plasma carente de factor IX material plástico; los volúmenes se pueden modifi-
Reactivo que contenga fosfolípidos (Cefalina) y car al igual que los tiempos de incubación; se pue-
un Activador de contacto (Caolín liviano (Sílica o den emplear reactivos comerciales siempre que se
Ácido ellágico)). compruebe que los resultados son iguales.] Calcu-
Cloruro de calcio lar la potencia empleando los métodos estadísticos
Solución Reguladora Imidazol pH 7,3 habituales (ver 10. Análisis estadístico de resulta-
Albúmina bovina o humana dos de ensayos biológicos).
Agregar 0,2 ml de Eritrocitos de carnero sensi- vidad en unidades hemolíticas (CH50/ml) de acuer-
bilizados a cada tubo, mezclar e incubar a 37 °C do con la fórmula siguiente:
durante 60 minutos. Enfriar los tubos en un baño de
Cd/5Ca
hielo y centrifugar a 1.000 g durante 5 minutos.
Medir la absorbancia del sobrenadante a 541 nm y en la cual Cd es el valor inverso de la dilución del
calcular el grado de hemólisis (Y) por la fórmula complemento, Ca es el volumen en mililitros del
siguiente: complemento diluido que produce un 50 % de
hemólisis y 5 el factor de escala para tener en cuen-
(Ac– A1) / (Ab – A1)
ta el número de eritrocitos.
en la cual Ac es la absorbancia de los Tubos 1 a 12, El ensayo no será válido a menos que el gráfico
Ab es la absorbancia media de los tres tubos con sea lineal entre el 15 % y el 85 % de hemólisis y
hemólisis al 100 % y A1 es la absorbancia media de que el valor de la pendiente esté comprendido entre
los tres tubos sin hemólisis. 0,15 y 0,40 (preferentemente entre 0,18 y 0,30).
Representar una curva sobre papel doble lo-
Ensayo de la actividad anticomplemento
garítmico con los valores de Y/(1-Y) en función al
Preparar una dilución del Complemento de co-
volumen de complemento diluido en mililitros.
bayo ya titulado con Solución reguladora gelatina-
Hallar la ecuación de la recta que mejor ajuste al
barbital para obtener 100 CH50/ml. Agregar la
conjunto de puntos y determinar el valor en ordena-
inmunoglobulina a examinar, ajustada a pH 7 si
das que corresponda al 50 % de dosis hemolítica del
fuera necesario. Preparar las mezclas siguientes de
complemento donde Y/(1-Y) = 1,0. Calcular la acti-
incubación para una inmunoglobulina que contenga
50 mg por ml:
Realizar en paralelo los ensayos sobre la in- preparación que contenga 30 mg por ml de inmu-
munoglobulina a examinar y sobre controles nega- noglobulina y 0,47 ml de Solución reguladora
tivos y positivos de AAC, preparados con inmu- gelatina-barbital para conseguir un volumen total
noglobulina humana según las indicaciones del de 0,8 ml. Tapar los tubos e incubar a 37 °C du-
prospecto que acompaña a la preparación de refe- rante 60 minutos. Agregar 0,2 ml de cada mezcla
rencia. Si la sustancia a examinar contiene más o de incubación a 9,8 ml de Solución reguladora
menos de 50 mg por ml de inmunoglobulina, gelatina-barbital para diluir el complemento.
ajustar adecuadamente los volúmenes de la prepa- Para determinar la actividad del complemento
ración y de la Solución reguladora gelatina- residual, realizar la Titulación del complemento en
barbital, por ejemplo, utilizar 0,33 ml de una cada tubo según se ha descrito anteriormente.
Calcular la actividad anticomplementaria (AAC) Centrifugar la mezcla a 3.600 g durante
de la sustancia a examinar empleando como refe- 5 minutos. Separar el plasma y centrifugar de
rencia el complemento control considerado como nuevo a 6.000 g durante 20 minutos para que
100 %, a partir de la fórmula siguiente: sedimenten las plaquetas. Separar el plasma po-
bre en plaquetas y dializar frente a 10 volúmenes
100(a-b)/a
de Solución reguladora A durante 20 horas. Des-
en la cual a es la media de la actividad del com- pués de la diálisis, aplicar el plasma sobre una
plemento (CH50/ml) del complemento control y b columna de cromatografía que contiene agarosa-
es la actividad del complemento (CH50/ml) de la DEAE para cromatografía de intercambio iónico,
sustancia a examinar. que haya sido equilibrada con Solución regulado-
El ensayo no es válido a menos que: ҏODVDFWLYi- ra A y cuyo volumen sea igual a dos veces el
dades anticomplementarias encontradas para los volumen del plasma. Eluir con Solución regula-
controles AAC negativos y los controles AAC dora A a un flujo de 20 ml/cm2/h. Recolectar el
positivos se sitúen en los límites indicados en el eluido en fracciones y medir la absorbancia a
prospecto que acompaña la preparación de refe- 280 nm. Reunir las fracciones que contengan el
rencia; la actividad del complemento control (a) primer pico de proteínas para obtener aproxima-
esté comprendida entre 80 y 120 CH50 por milili- damente un volumen de 1,2 veces el volumen del
tro. plasma pobre en plaquetas.
Para verificar que el sustrato está exento de ac-
$&7,9$'25'(35(&$/,&5(Ë1$ tividad de calicreína, mezclar 1 volumen del mis-
El activador de precalicreína (PCA) transfor- mo con 20 volúmenes de solución del sustrato
ma la precalicreína en calicreína y ésta puede cromogénico que será utilizado durante el ensayo
valorarse por su capacidad de escindir un cromó- precalentada e incubar a 37 °C durante 2 minutos.
foro a partir de un sustrato peptídico sintético. El El sustrato es adecuado si la absorbancia no au-
grado de clivaje se puede medir por espectrofoto- menta más de 0,001 por minuto. Agregar a la
metría y la concentración de PCA se calcula por solución de sustrato 7 g por litro de cloruro de
comparación con una preparación patrón calibrada sodio y filtrar utilizando un filtro de membrana de
en Unidades Internacionales. La Unidad Interna- 0,45 µm. Congelar el filtrado en alícuotas y con-
cional corresponde a la actividad de una determi- servar a –25 °C; el sustrato también puede liofili-
nada cantidad del Patrón Internacional, que está zarse para su conservación. >NOTA: efectuar
constituido por activador de la precalicreína liofi- todas las operaciones, desde el inicio de la croma-
lizado. La equivalencia en Unidades Internacio- tografía hasta la congelación en partes alícuotas,
nales de la muestra patrón internacional la esta- durante una misma jornada de trabajo.@
blece la Organización Mundial de la Salud.
9DORUDFLyQ
5HDFWLYRV Es preferible realizar la valoración utilizando
Solución reguladora A - Disolver 6,055 g de un analizador enzimático automatizado a 37 °C,
tris(hidroximetil)aminometano, 1,17 g de cloruro con volúmenes, concentraciones de sustrato y
de sodio, 50 mg de bromuro de hexadimetrina y tiempos de incubación ajustados para que la velo-
100 mg de azida de sodio en agua. Ajustar a cidad de reacción sea lineal al menos hasta
pH 8,0 con ácido clorhídrico 2 M y diluir hasta 35 UI/ml. Los patrones, las muestras y el sustrato
1 litro con agua. de la precalicreína pueden diluirse, si fuese nece-
Solución reguladora B - Disolver 6,055 g de sario, con Solución reguladora B.
tris(hidroximetil)aminometano y 8,77 g de cloruro Incubar los patrones o las muestras diluidos
de sodio en agua. Ajustar a pH 8,0 con ácido durante 10 minutos con sustrato de precalicreína,
clorhídrico 2 M y diluir hasta 1 litro con agua. de forma que el volumen del patrón o de la mues-
Preparación del sustrato de la precalicreína - tra sin diluir no sobrepase 1/10 del volumen total
>NOTA: para evitar que se active la coagulación, de la mezcla de incubación, para evitar errores
la sangre o el plasma utilizados para la prepara- producidos por la variación de la fuerza iónica y
ción de la precalicreína deben ponerse en contacto el pH. Incubar la mezcla o una parte de ella con
sólo con material plástico o de vidrio tratado con un volumen igual de una solución de un sustrato
silicona.@ Añadir 9 volúmenes de sangre humana cromogénico sintético que sea específico para la
sobre un volumen de una solución de anticoagu- calicreína (por ejemplo, acetato de N-benzoil-L-
lante (ACD, CPD o una solución de citrato de prolil-L-fenilalanil-L-arginina 4-nitroanilida o
sodio 38 g por litro) a la que se le ha agregado dihidrocloruro de D-prolil-L-fenilalanil-L-arginina
1 mg por mililitro de bromuro de hexadimetrina. 4-nitroanilida), disuelto en Solución reguladora B.
Medir la variación de la absorbancia por minuto
ǻA/min desde el minuto 2 al minuto 10, a la lon-
gitud de onda específica para el sustrato utilizado.
Preparar un blanco para cada mezcla de muestra o
de patrón utilizando la Solución reguladora B en
lugar del sustrato de precalicreína. Corregir
ǻA/min sustrayendo el valor obtenido para el
blanco correspondiente. Realizar una curva de
calibración utilizando los valores obtenidos con
los patrones y sus respectivas concentraciones;
utilizar la curva para determinar la actividad de
PCA de la sustancia a examinar.
(16$<23$5$$*(17(6(;75$f26
(19$&81$69,5$/(6
Vacuna contra la poliomielitis, oral
En aquellos ensayos que se requiere una que son observados diariamente por 14 días. El lote
neutralización previa del virus, utilizar anticuerpos semilla del virus cumple con el ensayo si ningún
específicos de origen no humano y no simio. Si el ratón muestra evidencia de infección atribuible al
virus ha sido propagado en tejidos de aves los lote semilla. El ensayo sólo es válido si por lo
anticuerpos deben ser también de origen no aviar. menos el 80 % de los ratones inoculados
Para preparar el antisuero utilizando un antígeno originalmente sobreviven el período de
inmunizante producido en cultivo celular de una observación.
especie diferente de la utilizada para la producción
&RED\RV
de la vacuna y libre de agentes extraños. Cuando se
Inocular intraperitonealmente, a por lo menos
indica el uso de huevos LPE, los huevos deben ser
cinco cobayos entre 350 a 450 g de peso, 5,0 ml del
obtenidos de un criadero libre de patógenos
lote semilla del virus. Observar los animales por lo
específicos.
menos durante 42 días para ver signos de
/27(6(0,//$'(/9,586 enfermedad. Realizar una autopsia a todos los
Tomar muestras de los lotes semilla del virus en cobayos que murieron después de las primeras
el momento de la cosecha, si no son utilizadas 24 horas del ensayo o que muestren signos de
inmediatamente conservar a una temperatura menor enfermedad y examinar macroscópicamente y por
cultivo para ver evidencia de infección. Matar los
de 40°C.
animales que sobrevivan al período de observación
5DWRQHVDGXOWRV y examinar de manera similar. El lote semilla del
Inocular por lo menos diez ratones adultos entre virus cumple con el ensayo si ningún cobayo
15 y 20 g de peso, intracerebralmente con 0,03 ml e muestra evidencia de infección atribuible al lote
intraperitonealmente con 0,5 ml del lote semilla del semilla. El ensayo sólo es válido si por lo menos el
virus. Observar los ratones por lo menos durante 80 % de los cobayos sobreviven el período de
21 días. Realizar una autopsia a todos los ratones observación.
que murieron después de las primeras 24 horas del
/27(6(0,//$'(/9,586
ensayo o que muestren signos de enfermedad y
<&26(&+$6'(/9,586
examinar para evidencia de infección viral, tanto
por observación macroscópica directa como por Tomar muestras en el momento de la cosecha y
subinoculación de una suspensión de tejido si no son utilizadas inmediatamente conservar a una
apropiada por rutas intracerebral e intraperitoneal temperatura menor de – 40 °C.
en por lo menos cinco ratones adicionales que son (VWHULOLGDGI~QJLFD\EDFWHULDQD
observados durante 21 días. El lote semilla del Una muestra de 10 ml debe cumplir con los
virus cumple con el ensayo si ningún ratón muestra requisitos de 370. Ensayo de esterilidad.
evidencia de infección atribuible al lote semilla. El
ensayo sólo es válido si por lo menos el 80 % de los (QVD\RGHPLFRSODVPDV<336>
ratones inoculados originalmente sobreviven el Una muestra de 10 ml debe cumplir con los
período de observación. requisitos.
5DWRQHVODFWDQWHV (QVD\RGHPLFREDFWHULDV<335>
Inocular por lo menos veinte ratones lactantes Emplear 5 ml de la muestra en ensayo para
de menos de 24 horas de edad, intracerebralmente verificar la ausencia de Mycobacterium ssp. por
con 0,01 ml e intraperitonealmente con no menos métodos de cultivos que sean sensibles a la
de 0,1 ml del lote semilla del virus. Observar los detección de estos organismos.
ratones diariamente por lo menos durante 14 días. &XOWLYRFHOXODUSDUDRWURVDJHQWHVH[WUDxRV
Realizar una autopsia a todos los ratones que Inocular muestras neutralizadas equivalentes a
murieron después de las primeras 24 horas del 500 dosis humanas de vacuna o 50 ml, en cultivos
ensayo o que muestren signos de enfermedad y continuos de riñón de simio y células humanas. Si
examinar para evidencia de infección viral, tanto el virus crece en células diploides humanas, la
por observación macroscópica directa como por cosecha viral neutralizada se debe inocular en un
subinoculación de una suspensión de tejido cultivo separado de células diploides. Si el virus de
apropiada por rutas intracerebral e intraperitoneal la vacuna es desarrollado en otro sistema celular
en por lo menos cinco ratones lactantes adicionales diferente a simio o humano, debe también
inocularse células de esa especie. Las células son células de riñón de simio o humanas. Si el virus de
incubadas a 36 r 1 °C y observadas durante 14 días. la vacuna desarrolla en un sistema celular deferente
El lote de semilla viral o la cosecha cumplen con al humano o simio, inocular células de esas especies
los requisitos si ninguno de los cultivos celulares pero de lotes diferentes. En cada sistema celular se
muestra evidencia de algún agente extraño no deben ensayar al menos 5 ml. Incubar los cultivos
atribuible a una contaminación accidental. El inoculados a una temperatura de 36 r 1 °C y
ensayo sólo es válido si por lo menos el 80 % de los observar por un período de 14 días. La muestra
cultivos celulares permanecen viables. cumple el ensayo si no se encuentra evidencia de la
presencia de agentes extraños.
9LUXVDYLDUHV
Si la producción de cultivos celulares se
>NOTA: realizar este ensayo solo en virus
mantiene a una temperatura diferente de 36 r 1 °C
propagados en tejidos aviares@.
realizar un ensayo suplementario para agentes
Neutralizar una mezcla equivalente a 100 dosis
extraños a la temperatura de producción utilizando
humanas o 10 ml. Inocular 0,5 ml de la muestra en
el mismo tipo de células que la usada para el
ensayo a sendos huevos de un primer grupo de
desarrollo del virus.
huevos LPE fertilizados de 9 y 11 días de edad por
vía alantoica y un segundo grupo de 5 a 7 días de 9LUXVGHODOHXFRVLVDYLDU
edad dentro del saco de la yema. Incubar durante >NOTA: realizar este ensayo solo en virus
7 días. El lote de semilla viral o la cosecha propagados en tejidos aviares@.
cumplen el ensayo si los fluidos alantoicos y el saco Realizar un ensayo para leucosis aviar
de la yema no muestran signos de presencia de utilizando 5 ml del fluido sobrenadante de las
cualquier agente hemaglutinante y si todos los células control.
embriones y las membranas coreoalantoicas
+8(926&21752/
examinadas son normales. El ensayo sólo es válido
si por lo menos el 80 % de los huevos inoculados $JHQWHVKHPDJOXWLQDQWHV
sobreviven durante 7 días. Examinar 0,25 ml del fluido alantoideos de cada
huevo para agentes hemaglutinantes por mezcla
&8/7,92&(/8/$5'(352'8&&,Ï1
directa con glóbulos rojos de pollo y después de un
Examinar microscópicamente las células control pasaje en huevos LPE, realizado por inoculación de
para verificar la ausencia de cualquier virus una muestra de 5 ml de la mezcla de fluidos
causante de efecto citopático a lo largo del tiempo alantoideos de los huevos en volúmenes de 0,5ml
de incubación de los cultivos celulares de dentro de la cavidad alantoidea y dentro de la
producción inoculados o como mínimo 14 días cavidad amniótica de los huevos SPF. Los huevos
después del momento de inoculación de los frascos control cumplen con el ensayo si no se encuentra
de producción. El ensayo sólo es válido si por lo evidencia de la presencia de agentes
menos el 80 % de los cultivos celulares control hemaglutinantes en ninguno de los ensayos.
sobreviven hasta el final del período de
9LUXVGHODOHXFRVLVDYLDU
observación. A los 14 días o en el momento de la
Utilizar una muestra de 10 ml de la mezcla de
última cosecha del virus, si el tiempo es mayor,
fluidos amnióticos de los huevos control. Realizar
proceder según se indica en Virus hemadsorbentes.
una amplificación mediante cinco pasajes en
9LUXVKHPDGVRUEHQWHV
cultivos celulares de embriones de pollo libres de
Examinar no menos de 25 % de los cultivos
leucosis. Realizar el ensayo para leucosis aviar
control para detectar la presencia de virus
utilizando células del quinto pasaje. Los huevos
hemadsorbentes por adición de glóbulos rojos de
control cumplen con el ensayo si no se encuentra
cobayo. Las células rojas sanguíneas de cobayo se
evidencia de la presencia de virus de la leucosis
deben almacenar a 5 r 3 °C durante no más de
aviar.
7 días. Examinar la mitad de los cultivos después
de la incubación a 5 r 3 °C durante 30 minutos y la 2WURVDJHQWHVH[WUDxRV
otra mitad después de la incubación entre 20 y Inocular 5 ml de muestra de las mezclas de
25 °C durante 30 minutos. La muestra cumple con fluidos amnióticos de los huevos control en cultivos
los requisitos si no se encuentra evidencia de la celulares humanos y de simios. Observar los
presencia de agentes hemadsorbentes. cultivos celulares durante 14 días. Los huevos
control cumplen con el ensayo si no se encuentra
&XOWLYRFHOXODUSDUDRWURVDJHQWHVH[WUDxRV evidencia de agentes extraños. El ensayo sólo es
Mezclar los sobrenadantes fluidos de las células válido si por lo menos el 80 % de los cultivos
control y examinar para detectar la presencia de inoculados sobreviven durante 7 días.
agentes extraños por inoculación de cultivos de
Actualización parcial
420. ENVASES PRIMARIOS DE PLÁSTICO
En este capítulo se describen los ensayos que produzcan cambios perjudiciales en cuanto a la
deben cumplir los envases plásticos de uso farmac- calidad de la preparación, se describen diversos
éutico, incluyendo los envases destinados a sangre y ensayos tales como la comprobación de la ausencia
hemoderivados, así como también las materias de cambios en las características físicas; la evalua-
primas con las cuales se fabrican. ción de cualquier pérdida o ganancia de materia
Los polímeros generalmente empleados para la debido a la permeabilidad del envase; la detección
fabricación de envases son el polietileno (de baja y de cambios de pH; la evaluación de cambios oca-
alta densidad), el polipropileno, el poli(cloruro de sionados por la luz; ensayos químicos y, si así se
vinilo), el terftalato de polietileno y copolímeros de requiere, ensayos biológicos.
etileno y acetato de vinilo.
MATERIALES EMPLEADOS PARA
La naturaleza y la cantidad de los aditivos está
FABRICACIÓN DE ENVASES PLÁSTICOS
determinada por el tipo de polímero, el proceso
empleado para la construcción del envase y el uso Los materiales que se describen a continuación
para el cual el mismo está destinado. Los aditivos se emplean para la fabricación de envases para uso
pueden ser antioxidantes, estabilizantes, plastifican- farmacéutico.
tes, lubricantes, colorantes, modificadores de im- Poli(cloruro de vinilo) plastificado para enva-
pacto, etc. Los agentes antiestáticos y desmoldan- ses destinados a sangre humana y hemoderiva-
tes pueden emplearse únicamente en aquellos enva- dos y para envases destinados a soluciones acuo-
ses que serán destinados a preparaciones de uso oral sas para perfusión intravenosa
o externo. Para cada tipo de material descripto en
este capítulo se indican los aditivos aceptados. Los materiales a base de poli(cloruro de vinilo)
El envase plástico elegido para cualquier prepa- plastificado contienen diversos aditivos, además del
ración debe ser tal que, los componentes del pro- polímero de alto peso molecular obtenido por poli-
ducto, que están en contacto con el material plástico merización de cloruro de vinilo.
no sean significativamente adsorbidos sobre su Los materiales a base de poli(cloruro de vinilo)
superficie y no se produzcan migraciones desde las plastificado para envases destinados a contener
paredes del envase. De la misma manera, el mate- sangre humana y hemoderivados y envases para
rial del envase no debe ceder cantidades apreciables soluciones acuosas para perfusión intravenosa se
de ninguna sustancia que pueda afectar la estabili- definen por la naturaleza y las proporciones de las
dad de la preparación o presentar un riesgo de toxi- sustancias empleadas en su fabricación.
cidad. A fin de confirmar la compatibilidad del Contienen no menos de 55 % de poli(cloruro de
envase con el contenido y para asegurar que no se vinilo) y pueden contener los siguientes aditivos:
LÍMITES DE ADITIVOS
ADITIVOS LÍMITES (%)
ftalato de bis(2-etilhexilo) 40
octanoato de cinc (2-etilhexanoato de cinc) 1
estearato de calcio o estearato de cinc o una mezcla de ambos 1
N,N´-diaciletilendiaminas (acil significa en particular palmitil y estearil) 1
no más de uno de los siguientes aceites epoxidados o una mezcla de ambos: 10
x aceite de soja epoxidado en el cual el contenido de oxígeno oxiránico es 6
a 8 % y el índice de iodo no es mayor a 6.
x Aceite de semilla de lino epoxidado en el cual el contenido de oxígeno
oxiránico no es mayor de 10 % y el índice de yodo no es mayor de 7
Ningún aditivo antioxidante debe agregarse al ningún colorante al poli(cloruro de vinilo) destinado
polímero. Cuando se agregan colorantes, sólo se a la fabricación de envases para sangre y hemoderi-
puede agregar azul ultramarino. No se debe agregar vados.
CARACTERÍSTICAS 254 nm. El valor de Rf e intensidad de la mancha
Polvo, perlas, gránulos o láminas translúcidas de obtenida a partir de la Solución muestra debe ser
espesor variable, incoloras o de color amarillo páli- similar a la obtenida a partir de la Solución están-
do. dar.
C – Absorción infrarroja <460> - Examinar el
IDENTIFICACIÓN - [NOTA: si es necesario,
residuo obtenido en el ensayo para Ftalato de bis(2-
cortar el material a ensayar en trozos de tamaño
etilhexilo) comparando con el espectro obtenido con
apropiado.]
A 2,0 g del material a ensayar agregar 200 ml de Ftalato de bis(2-etilhexil) SR-FA.
éter libre de peróxidos y calentar a reflujo durante ENSAYOS –
8 horas. Separar el residuo (B) y la solución (Solu- Solución indicadora - Disolver en alcohol
ción A) por filtración. 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de
Evaporar la Solución A a sequedad bajo presión metilo y 200 mg de fenolftaleína. Diluir a 100 ml
reducida en un baño de agua a 30 °C. Disolver el con el mismo solvente y filtrar.
residuo en 10 ml de tolueno (Solución A1). Disolver Solución S1 - Transferir 5,0 g del material a en-
el residuo B en 60 ml de dicloruro de etileno, calen- sayar a una cápsula. Agregar 30 ml de ácido sulfú-
tando en un baño de agua a reflujo y filtrar. Agre- rico y calentar hasta obtener una masa viscosa ne-
gar la solución gota a gota y con agitación enérgica gra. Enfriar y agregar con precaución 10 ml de
a 600 ml de heptano calentando a una temperatura solución de peróxido de hidrógeno al 30 % y calen-
menor a la temperatura de ebullición. Filtrar la tar suavemente. Dejar enfriar y agregar 1 ml de
mezcla en caliente a través de un filtro caliente para solución de peróxido de hidrógeno al 30 %, repetir
separar el material insolubilizado (B1) de la solu- el agregado y evaporación de la solución de peróxi-
ción orgánica. Dejar enfriar, separar el precipitado do de hidrógeno al 30 % hasta obtener un líquido
(B2) formado y filtrar a través de un filtro de vidrio incoloro. Reducir el volumen hasta 10 ml. Enfriar
sinterizado de porosidad media, previamente pesa- y diluir a 50,0 ml con agua.
do. Solución S2 - Transferir 25 g del material a en-
A - Absorción infrarroja <460>. Disolver el sayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato.
material insolubilizado B1 en 30 ml de tetrahidrofu- Agregar 500 ml de Agua para Inyectables y cubrir
rano y agregar, en pequeñas porciones con agita- la boca del erlenmeyer con un vaso de precipitados
ción, 40 ml de etanol. Separar el precipitado (B3) de vidrio al borosilicato. Calentar en autoclave a
por filtración y secar al vacío a una temperatura no 121 ± 2 °C durante 20 minutos. Dejar enfriar y
mayor de 50 °C sobre pentóxido de fósforo o cloru- decantar la solución. Diluir la solución a 500 ml.
ro de calcio anhidro. Disolver unos pocos mg del
Aspecto de la solución S2 - Debe ser transpa-
precipitado B3 en 1 ml de tetrahidrofurano. Colocar
rente e incolora.
algunas gotas de la solución obtenida sobre una
placa de cloruro de sodio y evaporar a sequedad Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solu-
entre 100 y 105 °C. Registrar el espectro de absor- ción S2, agregar 0,15 ml de Solución indicadora.
ción infrarroja y comparar con el espectro obtenido No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de
con poli(cloruro de vinilo) SR-FA. sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a
B - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica. azul. A 100 ml de Solución S2, agregar 0,2 ml de
Fase estacionaria - Emplear una placa para naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato- 1,0 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el
grafía) recubierta con gel de sílice para cromato- cambio de color del indicador de amarillo a anaran-
grafía de 0,25 mm de espesor. jado.
Fase móvil - Tolueno. Absorbancia - Evaporar 100 ml de Solución S2
Solución estándar - Disolver 0,8 g de ftalato de a sequedad. Disolver el residuo en 5 ml de hexano.
bis(2-etilhexilo) SR-FA en tolueno y diluir a 10 ml Entre 250 y 310 nm la absorbancia no debe ser
con el mismo solvente. mayor de 0,25.
Solución muestra - Solución A1.
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la Sustancias reductoras - Efectuar el ensayo de-
placa 5 µl de cada solución. Dejar secar las aplica- ntro de las 4 horas de preparada la Solución S2. A
ciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el 20,0 ml de Solución S2 agregar 1 ml de ácido sulfú-
frente del solvente haya recorrido aproximadamente rico diluido y 20,0 ml de permanganato de potasio
tres cuartos de la longitud de la placa. Retirar la 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y
placa de la cámara, marcar el frente del solvente y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de
dejarla secar. Examinar bajo luz ultravioleta a potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de
sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR)
como indicador. Realizar una determinación con un agitar ambas muestras durante 15 minutos con
blanco empleando 20 ml de Agua para Inyectables 40 ml de metanol. Filtrar y evaporar a sequedad.
y hacer las correcciones necesarias. La diferencia Pesar los dos residuos. La diferencia entre los pe-
entre los volúmenes consumidos no debe ser mayor sos no debe ser mayor de 10 mg.
de 2,0 ml.
Ftalato de bis(2-etilhexilo) - Examinar el cro-
Aminas aromáticas primarias – matograma obtenido en el ensayo para Aceites
Solución muestra - A 2,5 ml de Solución A1 ob- epoxidados bajo luz ultravioleta a 254 nm y locali-
tenida en la Identificación, agregar 6 ml de agua y zar la zona que corresponde a ftalato de
4 ml de ácido clorhídrico 0,1 M. Agitar vigorosa- bis(2-etilhexilo). Remover el área del gel de sílice
mente y descartar la fase orgánica. A la fase acuosa que corresponde a esta zona y agitarla con 40 ml de
agregar 0,4 ml de una solución de nitrito de sodio al éter. Filtrar sin pérdidas y evaporar a sequedad. El
1 % recientemente preparada. Mezclar y dejar en residuo obtenido no debe pesar más de 40 mg.
reposo durante 1 minuto. Agregar 0,8 ml de una
Cloruro de vinilo -
solución de sulfamato de amonio al 2,5 %, dejar en
Sistema cromatográfico (ver 100. Cromatograf-
reposo durante 1 minuto y agregar 2 ml de una
ía) - Emplear un cromatógrafo de gases equipado
solución de diclorhidrato de
con un detector de ionización a la llama, y una
N-(1-Naftil)etilendiamina al 0,5 %. [NOTA: reali-
columna de 3 m x 3 mm rellena con tierra de dia-
zar el ensayo a bajas temperaturas.] tomea silanizada para cromatografía impregnada
Solución estándar - Proceder según se indica con 5 % p/p de dimetil estearilamida y 5 % p/p de
para la Solución muestra, reemplazando la fase
polietilenglicol 400. Mantener la columna, el in-
acuosa por una mezcla de 1 ml de una solución de
yector y el detector a aproximadamente 45, 100 y
naftilamina 0,001 % en ácido clorhídrico 0,1 M,
150 °C, respectivamente. Se emplea nitrógeno
5 ml de agua y 4 ml de ácido clorhídrico 0,1 M como gas transportador con un caudal de aproxima-
(20 ppm). damente 30 ml por minuto.
Después de 30 minutos, el color de la Solución
Solución del estándar interno - Empleando una
muestra no debe ser más intenso que el de la Solu-
microjeringa, transferir 10 µl de éter en 20,0 ml de
ción estándar preparada al mismo tiempo.
N,N-Dimetilacetamida, sumergiendo la punta de la
N,N’-diaciletilendiaminas - Lavar con etanol aguja en el solvente. Inmediatamente antes de usar,
el precipitado B2 obtenido en la Identificación y diluir la solución 1 en 1.000 con
contenido en el filtro de vidrio sinterizado previa- N,N-Dimetilacetamida.
mente pesado. Secar hasta peso constante sobre Solución madre del estándar de cloruro de vini-
pentóxido de fósforo y pesar el filtro. El precipita- lo - Preparar bajo una campana extractora. Trans-
do no debe pesar más de 20 mg. ferir 50,0 ml de N,N-Dimetilacetamida a un reci-
Aceites epoxidados – piente de 50 ml, tapar el recipiente y pesar a la
Fase estacionaria - Emplear una placa para décima de mg. Llenar una jeringa de 50 ml de
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato- polietileno o polipropileno con cloruro de vinilo
grafía) recubierta con gel de sílice para cromato- gaseoso, dejar que el gas este en contacto con la
grafía de 1 mm de espesor. jeringa aproximadamente 3 minutos, vaciar la jerin-
Fase móvil - Tolueno. ga y llenar nuevamente con 50 ml de cloruro de
Procedimiento - Aplicar sobre la placa, en for- vinilo gaseoso. Adaptar una aguja hipodérmica a la
ma de banda de 30 mm por 3 mm, 0,5 ml de Solu- jeringa y reducir el volumen de gas en la jeringa
ción A1 obtenida en la Identificación. Dejar secar la hasta 25 ml. Inyectar estos 25 ml de cloruro de
aplicación y desarrollar el cromatograma hasta que vinilo lentamente en el recipiente y agitarlo suave-
el frente del solvente haya recorrido aproximada- mente evitando el contacto entre el líquido y la
mente tres cuartos de la longitud de la placa. Reti- aguja. Pesar el recipiente nuevamente, el aumento
rar la placa de la cámara, marcar el frente del sol- de peso es de aproximadamente 60 mg (1 µl de la
vente. Secar la placa cuidadosamente. Exponer la solución así obtenida contiene aproximadamente
placa a vapores de iodo durante 5 minutos. Exami- 1,2 µg de cloruro de vinilo).
Solución estándar de cloruro de vinilo - A
nar el cromatograma y localizar la banda con un Rf
de 0 y, si estuviera presente, la banda secundaria 1 volumen de Solución madre del estándar de clo-
con un Rf de aproximadamente 0,7, ambas corres- ruro de vinilo agregar 3 volúmenes de
N,N-Dimetilacetamida.
pondientes a aceites epoxidados. Remover el área
Soluciones estándar - Transferir 10,0 ml de So-
del gel de sílice que corresponde a la banda o ban-
lución del estándar interno a cada uno de seis reci-
das. En forma similar remover un área de gel de
pientes de 50 ml. Cerrar los recipientes. Inyectar 1;
sílice para preparar un blanco. Separadamente
2; 3; 5 y 10 µl, respectivamente, de Solución están- El ensayo es válido si la opalescencia de la So-
dar de cloruro de vinilo en cinco de los recipientes. lución muestra no es más intensa que la de la Solu-
Las seis soluciones así obtenidas contienen respec- ción estándar.
tivamente, 0 µg; aproximadamente 0,3; 0,6; 0,9; 1,5
Cadmio - (ver 440. Espectrofotometría de ab-
y 3 µg de cloruro de vinilo. Agitar, evitando el
sorción y emisión atómica).
contacto entre el tapón y el líquido. Colocar los
Solución madre del estándar - Disolver 0,100 g
recipientes en un baño de agua a 60 ± 1 °C durante
de cadmio en el menor volumen posible de una
2 horas.
mezcla de ácido clorhídrico y agua (50:50). Diluir
Solución muestra - Transferir 1,0 g del material
a 100,0 ml con ácido clorhídrico al 1 % v/v para
a ensayar a un recipiente de 50 ml y agregar 10,0 ml
obtener una solución de concentración conocida de
de Solución del estándar interno. Cerrar el reci-
0,1 % de Cd.
piente. Agitar, evitando el contacto entre el tapón y
Soluciones estándar - Preparar las soluciones
el líquido. Colocar el recipiente en un baño de agua
estándar empleando la Solución madre del estándar
a 60 ± 1 °C durante 2 horas.
diluida con ácido clorhídrico al 1 % v/v.
Procedimiento – Inyectar por separado en el
Solución muestra - Evaporar 10 ml de la Solu-
cromatógrafo 1 ml del espacio libre superior de
ción S1 a sequedad. Tomar el residuo con 5 ml de
cada recipiente, registrar los cromatogramas y me-
ácido clorhídrico al 1 % v/v, filtrar y diluir el filtra-
dir las respuestas de los picos principales. Calcular
do a 10,0 ml con el mismo ácido.
el contenido de cloruro de vinilo. No debe estar
Procedimiento - Medir la absorbancia a
presente más de 1 ppm de cloruro de vinilo. 228,8 nm empleando una lámpara de cadmio de
Fósforo total – cátodo hueco como fuente de radiación y una llama
Solución estándar - Mezclar 0,5 ml de una so- de aire-acetileno. No debe estar presente más de
lución de fosfato monobásico de potasio que con- 0,6 ppm de Cd.
tiene 0,219 g por litro, 10 ml de agua y 25 ml de Calcio - (ver 440. Espectrofotometría de ab-
molibdovanádico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua sorción y emisión atómica).
(100 ppm). Solución madre del estándar - Inmediatamente
Solución muestra - Calcinar 0,25 g del material antes de usar, diluir 1 en 10 con agua una solución
a ensayar en un crisol de platino con 0,2 g de car- preparada con 1,000 g de carbonato de calcio y
bonato de sodio anhidro y 50 mg de nitrato de pota- 23 ml de ácido clorhídrico 1 M y diluida a 100,0 ml
sio. Después de enfriar tomar el residuo con agua, con agua (400 ppm de Ca).
y transferir a un matraz aforado de 50 ml. Lavar el Soluciones estándar - Preparar las soluciones
crisol con agua, agregar los lavados al matraz, aci- estándar empleando la Solución madre del están-
dificar con ácido sulfúrico al 60 % p/p hasta que dar, diluida con agua.
cese la efervescencia. Agregar 25 ml de molibdo- Solución muestra - Calcinar 2,0 g del material a
vanádico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua. ensayar en un crisol de sílice. Mezclar el residuo
El ensayo es válido si la coloración amarilla con 10 ml de ácido clorhídrico y evaporar a seque-
producida en la Solución muestra no es más intensa dad en un baño de agua. Tomar este residuo con
que la de la Solución estándar. 5 ml de agua, filtrar y diluir a 25,0 ml con el mismo
Bario – solvente.
Solución estándar - Mezclar 1,2 ml de una so- Procedimiento - Medir la absorbancia a
lución, preparada disolviendo 0,178 g de cloruro de 422,7 nm empleando una lámpara de calcio de
bario dihidratado en 100,0 ml, diluida 1 en 20 cátodo hueco como fuente de radiación y una llama
(50 ppm de Ba); 0,8 ml de agua y 3 ml de solución de aire-acetileno. No debe estar presente más de
de sulfato de calcio, preparada agitando 5 g de 0,07 % de Ca.
sulfato de calcio con 100 ml de agua durante 1 hora, Metales pesados –
y filtrar. Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Disol-
Solución muestra - Calcinar 2,0 g del material a ver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua
ensayar en un crisol de sílice. Mezclar el residuo y agregar 38,0 ml de ácido clorhídrico al 25 %.
con 10 ml de ácido clorhídrico y evaporar a seque- Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con ácido
dad en un baño de agua. Tomar este residuo con clorhídrico 2 M o con amoníaco diluido y diluir a
dos porciones de 1 ml de agua. Filtrar y agregar 100 ml con agua.
3 ml de solución de sulfato de calcio preparada Solución estándar - Proceder según se indica
agitando 5 g de sulfato de calcio con 100 ml de para la Solución muestra empleando una mezcla de
agua durante 1 hora y filtrar. 10 ml de Solución estándar de plomo diluida 1:5
(ver 590. Límite de metales pesados) y 2 ml de la acético y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de
Solución muestra. esta solución a 10 ml con agua. Antes de usar diluir
Solución muestra - A 10 ml de Solución S1 1 ml de esta solución a 10 ml con agua (10 ppm de
agregar 0,5 ml de fenolftaleína (SR) y luego solu- Zn).
ción concentrada de hidróxido de sodio al 42 % Solución estándar - Proceder según se indica
hasta obtener un color rosa pálido. Diluir a 25 ml para la Solución muestra, empleando una mezcla de
con agua. A 12 ml de la solución así obtenida agre- 2 ml de una Solución madre del estándar y 8 ml de
gar 2 ml de Solución reguladora de acetato pH 3,5 agua (0,2 %).
y mezclar. A continuación agregar 1,2 ml de tioa- Después de 2 minutos, el color violeta de la fase
cetamida-glicerina básica (SR) y mezclar inmedia- inferior de la Solución muestra no debe ser más
tamente. intenso que el de la fase inferior de la Solución
Solución blanco - Proceder según se indica para estándar.
la Solución muestra empleando una mezcla de
Residuo de evaporación - Evaporar a seque-
10 ml de agua y 2 ml de la Solución muestra. dad 50 ml de Solución S2 en un baño de agua y
Después de 2 minutos, la coloración parda de la secar entre 100 y 150 °C. El residuo no debe pesar
Solución muestra no debe ser más intensa que la de
más de 7,5 mg (0,3 %).
la Solución estándar.
VALORACIÓN
Estaño – Llevar a cabo el método de combustión (ver 60.
Solución muestra - A 10 ml de Solución S1 Combustión en erlenmeyer con oxígeno), emplean-
agregar 0,3 ml de ácido tioglicólico y 30 ml de
do 50,0 mg del material a ensayar. Absorber los
agua. Mezclar y agregar 2 ml de una solución de
productos de combustión en 20 ml de hidróxido de
lauril sulfato de sodio al 1 % y 1 ml de una solución
sodio 1 N. A la solución obtenida agregar 2,5 ml de
de ditiol, recientemente preparada, que contiene ácido nítrico, 10,0 ml de nitrato de plata 0,1 N, 5 ml
5 g/l en etanol y diluir a 50 ml con agua. de sulfato férrico amónico (SR) y 1 ml de ftalato de
Solución madre del estándar - Disolver 0,500 g
dibutilo. Titular con tiocianato de amonio 0,05 N
de estaño en una mezcla de 5 ml de agua y 25 ml de
hasta obtener un color amarillo-rojizo. Realizar una
ácido clorhídrico, y diluir a 1 litro. Inmediatamente
determinación con un blanco y hacer las correccio-
antes de usar transferir 1 ml de esta solución a una
nes necesarias. Cada mililitro de nitrato de plata
matraz aforado de 100 ml y diluir a volumen con 0,1 N equivale a 6,25 mg de poli(cloruro de vinilo).
ácido clorhídrico al 2,5 %v/v (5 ppm de Sn).
Solución estándar - Proceder según se indica Poliolefinas
para la Solución muestra, empleando 10 ml de áci- Las poliolefinas se obtienen por polimerización
do sulfúrico al 20 % v/v y 6 ml de Solución madre de etileno o propileno o por copolimerización de
del estándar. estas sustancias con no más de 25 % de homólogos
Después de 15 minutos, el color de la Solución mayores (C4 a C10) o de ácidos carboxílicos o éste-
muestra no debe ser más intenso que el de la Solu- res. Ciertos materiales pueden ser mezclas de po-
ción estándar. liolefinas.
Cinc - [NOTA: preparar un blanco empleando Pueden contener hasta tres antioxidantes, uno o
10 ml de agua. El ensayo no es válido a menos que varios lubricantes o antibloqueantes. Cuando el
la fase inferior obtenida con el blanco sea de color material debe proveer protección de la luz se le
verde.] agregan agentes opacantes como el dióxido de tita-
Solución reguladora de acetato de pH 4,4 - Di- nio.
solver 136 g de acetato de sodio y 77 g de acetato Este texto es aplicable a todas las poliolefinas
de amonio en agua y diluir a 100 ml con el mismo empleadas para propósitos médico-farmacéuticos
solvente. Agregar 250,0 ml de ácido acético glacial con la excepción de los otros materiales poliolefíni-
y mezclar. cos descriptos en este capítulo.
Solución muestra - Diluir 1 ml de Solución S1 a CARACTERÍSTICAS
100 ml con agua. A 10 ml de la solución resultante Polvo, perlas, gránulos o, después de su trans-
agregar 5 ml de Solución reguladora de acetato de formación, láminas de espesor variable o envases.
pH 4,4; 1 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M y 5,0 ml Prácticamente insolubles en agua, etanol, hexano y
de una solución de ditizona en cloroformo que metanol; solubles en hidrocarburos aromáticos
contiene 0,01 g/1 y agitar. calientes. Se ablandan a temperaturas entre 65 y
Solución madre del estándar - Disolver una 165 °C. Se queman con una llama azul.
cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 0,440 g de
ZnSO4 . 7H2O, en agua. Agregar 1 ml de ácido IDENTIFICACIÓN
A - Absorción infrarroja <460>. A 0,25 g del Solución indicadora - Disolver en alcohol
material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y ca- 0,1 g de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de meti-
lentar a reflujo durante 15 minutos. Colocar algu- lo y 0,2 g de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el
nas gotas de la solución obtenida sobre una placa de mismo solvente y filtrar.
cloruro de sodio y evaporar el solvente en una estu-
Aspecto de la solución S1 - La Solución S1 de-
fa a 80 °C. El espectro del material presenta máxi-
be ser transparente e incolora.
mos de absorción a 2.920; 2.850; 1.475; 1.465;
1.380; 1.170; 735 y 720 cm1, el espectro obtenido Acidez o alcalinidad - A 100 ml de la Solu-
debe ser idéntico al espectro obtenido con el mate- ción S1 agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No
rial seleccionado como referencia. [NOTA: si el se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de
material a ensayar se presenta en forma de láminas, sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a
el espectro puede determinarse directamente sobre azul. A 100 ml de Solución S1 agregar 0,2 ml de
un trozo de tamaño apropiado.] naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de
B - Debe cumplir con los Ensayos suplementa- 1 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el
rios para los aditivos presentes. cambio de color del indicador de amarillo a anaran-
C - En un crisol de platino, mezclar aproxima- jado.
damente 20 mg del material a ensayar con 1 g de Absorbancia - Entre 220 y 340 nm, la absor-
sulfato ácido de potasio y calentar hasta fundir bancia de la Solución S1 no debe ser mayor de 0,2.
completamente. Dejar enfriar y agregar 20 ml de
ácido sulfúrico diluido. Calentar suavemente y Sustancias reductoras - A 20 ml de la Solu-
filtrar la solución resultante. Al filtrado agregar ción S1 agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y
1 ml de ácido fosfórico y 1 ml de solución de 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calen-
peróxido de hidrógeno al 30 %. Si la sustancia tar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediata-
contiene dióxido de titanio como opacante, se desa- mente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular
rrolla un color anaranjado-amarillento. inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N,
empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indica-
ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar las dor. Realizar una determinación con un blanco y
muestras del material a ensayar en trozos de tamaño hacer las correcciones necesarias. La diferencia
apropiado.] entre los volúmenes no debe ser mayor de 3,0 ml.
Solución S1 - Transferir 25 g del material a en-
sayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de Metales pesados extraíbles –
boca esmerilada. Agregar 500 ml de Agua para Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Disol-
Inyectables y calentar a reflujo durante 5 horas. ver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua
Dejar enfriar y decantar. Reservar una porción de y agregar 38,0 ml de ácido clorhídrico al 25 %.
la solución para el ensayo de Aspecto de la solu- Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con ácido
ción S1 y filtrar el resto a través de un filtro de vi- clorhídrico 2 M o con amoníaco diluido y diluir a
drio sinterizado de porosidad media. Emplear la 100 ml con agua.
Solución S1 dentro de las 4 horas de su preparación. Solución muestra - Concentrar 50 ml de Solu-
Solución S2 - Transferir 2,0 g del material a en- ción S3 hasta aproximadamente 5 ml en baño de
sayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de agua y diluir a 20 ml con agua. A 12 ml de la solu-
boca esmerilada. Agregar 80 ml de tolueno y calen- ción así obtenida agregar 2 ml de Solución regula-
tar a reflujo con agitación constante durante dora de acetato pH 3,5 y mezclar. A continuación
90 minutos. Enfriar a 60 °C y agregar, con agita- agregar 1,2 ml de tioacetamida-glicerina bási-
ción constante, 120 ml de metanol. Filtrar la solu- ca (SR) y mezclar inmediatamente.
ción a través de un filtro de vidrio sinterizado de Solución estándar - Proceder según se indica
porosidad media. Lavar el erlenmeyer y el filtro para la Solución muestra empleando una mezcla de
con 25 ml de una mezcla de 40 ml de tolueno y 2,5 ml de Solución estándar de plomo (ver 590.
60 ml de metanol, agregar el lavado al filtrado y Límite de metales pesados) y 2 ml de la Solución
diluir a 250 ml con la misma mezcla. Preparar un muestra.
blanco. Solución blanco - Proceder según se indica para
Solución S3 - Transferir 100 g del material a en- la Solución muestra empleando una mezcla de
sayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de 10 ml de agua y 2 ml de la Solución muestra.
boca esmerilada. Agregar 250 ml de ácido clorhí- Después de 2 minutos, la coloración parda de la
drico 0,1 M y calentar a reflujo con agitación cons- Solución muestra no debe ser más intensa que la de
tante durante 1 hora. Dejar enfriar y decantar la la Solución estándar. No deben encontrarse más de
solución. 2,5 ppm.
Residuo de ignición <270> - No más de 1,0 %, trilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta
determinado sobre 5,0 g. Este límite no se aplica a solución a 50 ml con el mismo solvente.
los materiales que contienen dióxido de titanio Solución estándar E - Disolver 60 mg de
como opacante. 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno
ENSAYOS SUPLEMENTARIOS - [NOTA: en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidro-
estos ensayos se realizan totalmente o en parte sólo furano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml
si son requeridos de acuerdo a la composición o el con el mismo solvente.
uso del material.] Solución estándar F - Disolver 60 mg de
1,3,5-tris[3,5di-ter-butil-4-hidroxibencil]-s-triazina-
Antioxidantes fenólicos – 2,4,6(1H,3H,5H)-triona en 10 ml de una mezcla de
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml
para cromatografía de líquidos con un detector de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de Solución estándar G - Disolver 60 mg de tetra-
25 cm u 4,6mm con fase estacionaria constituida kis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)pro-pionato]
por octadecilsilano químicamente unido a partículas de pentaeritritilo en 10 ml de una mezcla de aceto-
de sílice porosa de 5 µm de diámetro. nitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de
Fase móvil - Se puede emplear una de las cua- esta solución a 50 ml con el mismo solvente.
tro mezclas siguientes: Solución estándar H - Disolver 60 mg de
Fase móvil 1 - Acetonitrilo y agua (70:30) 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-
con un caudal de aproximadamente 2 ml por 1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de
minuto. una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano
Fase móvil 2 - Acetonitrilo, tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el
y agua (60:30:10) con un caudal de aproxi- mismo solvente.
madamente 1,5 ml por minuto. Solución estándar 1 - Disolver 60 mg de 3-(3,5-
Fase móvil 3 - Metanol, 2-propanol y agua di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo
(50:45:5) con un caudal de aproximadamente en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de
1,5 ml por minuto. esta solución a 50 ml con el mismo solvente.
Fase móvil 4 - Acetonitrilo y tetrahidrofura- Solución estándar J - Disolver 60 mg de fosfito
no (80:20) con un caudal de aproximadamen- de tris (2,4-di-ter-butilfenilo) en 10 ml de cloruro
te 1,5 ml por minuto. de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml
[NOTA: de las siguientes Soluciones estándar, con el mismo solvente.
preparar únicamente las necesarias para el ensayo Solución estándar K - Disolver 20 mg de
de los antioxidantes fenólicos declarados en la P-EPQ en 10 ml de una mezcla de volúmenes igua-
composición del material a ensayar.] les de acetonitrilo y una solución de hidroperóxido
Solución estándar A - Disolver 25 mg de butil- de terbutilo en tetrahidrofurano con una concentra-
hidroxitolueno y 60 mg de 3,3-bis(3-ter-butil-4- ción de 10 g/1. Dejar reposar en un recipiente ce-
hidroxifenil)butirato de etileno en 10 ml de una rrado durante 1 hora. Diluir 2 ml de esta solución a
mezcla acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). 50 ml con una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofu-
Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo rano (50:50).
solvente. Solución muestra S21 - Evaporar 50 ml de la So-
Solución estándar B - Disolver 60 mg de tetra- lución S2 a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el
kis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)-propionato] residuo en 5 ml de acetonitrilo y tetrahidrofurano
de pentaeritritilo y 60 mg de (50:50). Preparar una solución blanco a partir del
2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil- blanco correspondiente a la Solución S2.
1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de Solución muestra S22 - Evaporar 50 ml de la So-
una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano lución S2 a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el
(50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el residuo con 5 ml de cloruro de metileno. Preparar
mismo solvente. una solución blanco a partir de la solución blanco
Solución estándar C - Disolver 60 mg de que corresponde a la Solución S2.
3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de Solución muestra S23 - Evaporar 50 ml de la So-
octadecilo y 60 mg de fosfito tris(2,4-di-ter- lución S2 a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el
butilfenilo) en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir residuo con 5 ml de una mezcla de volúmenes igua-
2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solven- les de acetonitrilo y una solución de hidroperóxido
te. de terbutilo en tetrahidrofurano con una concentra-
Solución estándar D - Disolver 25 mg de butil- ción de 10 g/1. Cerrar el matraz y dejar reposar
hidroxitolueno en 10 ml de una mezcla de acetoni- durante 1 hora. Preparar una solución blanco a
partir de la solución blanco que corresponde a la estándar de antioxidantes de la lista anterior que
Solución S2. son declarados en la composición.
Aptitud del sistema - (ver 100. Cromatografía) Emplear Fase móvil 3 si el material a ensayar
- Cromatografiar la Solución estándar A, emplean- contiene 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil) propio-
do Fase móvil 1, registrar los cromatogramas y nato de octadecilo y/o fosfito de tris(2,4-di-
medir las respuestas de los picos según se indica en ter-butilfenilo). Inyectar por separado en el cro-
Procedimiento: la resolución, R, entre los picos de matógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
butilhidroxitolueno y 3,3-bis(3- 20 µl) de la Solución muestra S22, el blanco corres-
ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno no debe pondiente, la Solución estándar C, y la Solución
ser menor de 8. Cromatografiar la Solución están- estándar I o J o 20 µl de las Soluciones estándar I y
dar B, empleando Fase móvil 2, registrar los croma- J.
togramas y medir las respuestas de los picos según Emplear Fase móvil 4 si la sustancia a ensayar
se indica en Procedimiento: la resolución R entre contiene P-EPQ. Inyectar por separado en el cro-
los picos de tetrakis [3-(3,5-ter-butil-4- matógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
hidroxi-fenil)propionato] de pentaeritritilo y 20 µl) de la Solución muestra S23, el blanco corres-
2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-tri- pondiente y la Solución, estándar K.
metil-1,3,5-bencenotriil)tris-metileno]trifenol no En todos los casos registrar los cromatogramas
debe ser menor de 2. Cromatografiar la Solución durante 30 minutos. Los cromatogramas corres-
estándar C, empleando Fase móvil 3, registrar los pondientes a las Soluciones muestra S21, S22 y S23
cromatogramas y medir las respuestas de los picos deben presentar únicamente picos debidos a los
según se indica en Procedimiento: la resolución R antioxidantes declarados en la composición y otros
entre los picos de 3-(3,5-di-ter-butil-4- picos menores que también aparecen en los croma-
hidroxifenil)propionato de octadecilo y fosfito de togramas correspondientes a los blancos. Las res-
tris(2,4-di-ter-butilfenilo) no debe ser menor de 2. puestas de los picos de las Soluciones muestra S21,
Cromatografiar la Solución estándar E, empleando S22 y S23 deben ser menores que las respuestas co-
Fase móvil 4, registrar los cromatogramas y medir rrespondientes a los picos obtenidos a partir de las
las respuestas de los picos según se indica en Pro- Soluciones estándar D a K.
cedimiento: la resolución R entre los picos principa- Antioxidantes no-fenólicos –
les (con tiempos de retención de aproximadamente Fase estacionaria - Emplear una placa para
3,5 y 5,8) no debe ser menor de 6. cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato-
Procedimiento – grafía) recubierta con gel de sílice para cromato-
Emplear Fase móvil 1 si el material a ensayar grafía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm
contiene butilhidroxitolueno y/o 3,3-bis(3-ter-butil- de espesor.
4-hidroxifenil)-butirato de etileno. Inyectar por Fase móvil 1 - Hexano.
separado en el cromatógrafo volúmenes iguales Fase móvil 2 - Cloruro de metileno.
(aproximadamente 20 µl) de la Solución muestra Solución estándar L - Disolver 60 mg de 2,2'-
S21, el blanco correspondiente, la Solución estándar bis(octadeciloxi)-5,5'-espirobi [1,3,2-dioxa-
A, y las Soluciones estándar D o E o 20 Pl de las fosforinano] en 10 ml de cloruro de metileno. Di-
Soluciones estándar D y E. luir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de
Emplear Fase móvil 2 si el material a ensayar metileno acidificado (SR).
contiene uno o varios de los siguientes antioxidan- Solución estándar M - Disolver 60 mg de disul-
tes: furo de dioctadecilo en 10 ml de cloruro de metile-
- 1,3,5-tris(3,5-di-ter-butil-4-hidroxibencil)-s- no. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro
triazina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona, de metileno acidificado (SR).
- tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxi- Solución estándar N - Disolver 60 mg de 3,3'-
fenil)propionato] de pentaeritritilo, tiodipropionato de didodecilo en 10 ml de cloruro
- 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6- de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml
trimetil-1,3,5-bencenotriil) trismetileno] trilfenol, con cloruro de metileno acidificado (SR).
- 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de Solución estándar O - Disolver 60 mg de 3,3'-
octadecilo, tiodipropionato de dioctadecilo en 10 ml de cloruro
- fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo), de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml
Inyectar por separado en el cromatógrafo volú- con cloruro de metileno acidificado (SR).
menes iguales (aproximadamente 20 µl) de la Solu- Solución estándar P - Disolver 60 mg de 3,3'-
ción muestra S21, el blanco correspondiente, la tiodipropionato de didodecilo y 60 mg de 3,3'-
Solución estándar B y cada una de las Soluciones tiodipropionato de dioctadeciIo en 10 ml de cloruro
de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml Procedimiento - Aplicar sobre dos placas 10 µl
con cloruro de metileno acidificado (SR). de la Solución S24. Aplicar sobre la primera placa
Solución muestra S24 - Evaporar 100 ml de la 10 µl de la Solución estándar Q y aplicar sobre la
Solución S2 a sequedad en vacío a 45 °C. Disolver segunda placa 10 µl de las Soluciones estándar R y
el residuo en 2 ml de cloruro de metileno acidifica- S. Dejar secar las aplicaciones. Desarrollar la pri-
do (SR). mera placa, hasta que el frente del solvente haya
Revelador - Preparar una solución de iodo al recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase
1 % en etanol. móvil 1. Retirar la placa de la cámara, marcar el
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la frente del solvente y dejarla secar al aire. Pulveri-
placa 20 µl de la Solución muestra S24, 20 µl de la zar sobre la placa con Revelador 1. Calentar en una
Solución estándar P y 20 µl de cada una de las estufa a 120 °C durante unos minutos para intensi-
Soluciones estándar que corresponden a todos los ficar las manchas. Cualquier mancha que corres-
antioxidantes fenólicos y no-fenólicos presentes en ponda a ácido esteárico en el cromatograma de la
la composición del material a ensayar. Dejar secar Solución muestra S24 debe ser idéntica en posición
las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas (Rf aproximadamente de 0,5) pero no más intensa
hasta que el frente del solvente haya recorrido que la mancha obtenida a partir de la Solución
aproximadamente 18 cm empleando Fase móvil 1. estándar Q.
Retirar la placa de la cámara y dejar secar. Des- Desarrollar la segunda placa hasta que el frente
arrollar nuevamente los cromatogramas hasta que el del solvente haya recorrido aproximadamente
frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de
17 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara y dejar secar al aire. Desarrollar nueva-
la cámara, marcar el frente del solvente y dejar mente hasta que el frente del solvente haya recorri-
secar. Examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm. do aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil
Pulverizar sobre la placa con Revelador, dejar secar 3. Retirar la placa de la cámara y marcar el frente
durante 10 a 15 minutos y examinar bajo luz ultra- del solvente. Dejar secar la placa. Pulverizar sobre
violeta a 254 nm. Cualquier mancha en el cromato- la placa con Revelador 2. Calentar en una estufa a
grama de la Solución muestra S24 no debe ser más 120 °C hasta que aparezcan las manchas. Las man-
intensa que las manchas correspondientes obtenidas chas que corresponden a erucamida u oleamida en
a partir de las Soluciones estándar. El ensayo no es el cromatograma de la Solución muestra S24 deben
válido a menos que el cromatograma de la Solución ser idénticas en posición (Rf aproximadamente de
estándar P presente dos manchas claramente sepa- 0,2) pero no más intensas que las manchas obteni-
radas. das a partir de las Soluciones estándar R y S.
Amidas y estearatos – Sustancias solubles en hexano - Transferir
Fase estacionaria - Emplear una placa para 10 g del material a ensayar a un erlenmeyer de
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato- vidrio al borosilicato de 250 ml con boca esmerila-
grafía) recubierta con gel de sílice para cromato- da. Agregar 100 ml de hexano y calentar a reflujo
grafía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm durante 4 horas, agitando constantemente. Enfriar
de espesor. en un baño de hielo y filtrar rápidamente (el tiempo
Fase móvil 1 - 2,2,4-Trimetilpentano y etanol de filtración debe ser menor de 5 minutos, si es
(75:25). necesario la filtración puede ser acelerada aplicando
Fase móvil 2 - Hexano. presión sobre la solución) a través de un filtro de
Fase móvil 3 - Cloruro de metileno y metanol vidrio sinterizado de porosidad media manteniendo
(95:5). la solución a aproximadamente 0 °C. Evaporar
Solución estándar Q - Disolver 20 mg de ácido 20 ml del filtrado en un cristalizador previamente
esteárico en 10 ml de cloruro de metileno. pesado en un baño de agua. Secar el residuo en una
Solución estándar R - Disolver 40 mg de olea- estufa entre 100 y 105 °C durante 1 hora. El peso
mida en 20 ml de cloruro de metileno. del residuo obtenido debe ser igual al del residuo
Solución estándar S - Disolver 40 mg de eru- obtenido a partir del material de referencia, con una
camida en 20 ml de cloruro de metileno. desviación máxima de ± 10 % y dicho peso no debe
Solución muestra - Solución S24 preparada en ser mayor de 5 %.
Antioxidantes no fenólicos.
Aluminio extraíble - (ver 440. Espectrofoto-
Revelador 1 - Solución de 2,6-Dicloro-fenol- metría de absorción, y emisión atómica).
indofenol sódico al 0,2 % en etanol. Solución madre del estándar - Disolver en agua
Revelador 2 - Solución de ácido fosfomolíbdico
una cantidad de sulfato de potasio y aluminio, equi-
al 4 % en etanol.
valente a 352 mg de AlK(SO4)2 . 12H2O. Agregar
10 ml de ácido sulfúrico diluido y diluir a 100 ml Soluciones estándar - Preparar las soluciones
con agua (200 ppm de A1). estándar empleando la Solución madre del estándar
Soluciones estándar - Preparar las soluciones diluida con ácido clorhídrico 0,1 M.
estándar empleando la Solución madre del estándar Procedimiento - Medir la absorbancia a
diluida con ácido clorhídrico 0,1 M. 364,3 nm empleando una lámpara de titanio de
Solución muestra - Evaporar a sequedad 100 ml cátodo hueco como fuente de radiación y una llama
de Solución S3 en un baño de agua. Disolver el de óxido nitroso-acetileno. No debe contener más
residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a 10 ml de 1 ppm de Ti extraíble.
con ácido clorhídrico 0,1 M. Cinc extraíble - (ver 440. Espectrofotometría
Procedimiento - Medir la absorbancia a
de absorción y emisión atómica).
309,3 nm empleando una lámpara de aluminio de
Solución madre del estándar - Disolver una
cátodo hueco como fuente de radiación y una llama
cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 440 mg de
de óxido nitroso-acetileno. No debe contener más
ZnSO4 . 7H2O, en agua. Agregar 1 ml de ácido
de 1 ppm de Al extraíble. acético y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de
Titanio extraíble - (ver 440. Espectrofoto- esta solución a 10 ml con agua. Antes de usar,
metría de absorción y emisión atómica). diluir 1 ml de esta solución a 10 ml con agua
Solución muestra – Evaporar a sequedad (10 ppm de Zn).
100 ml de Solución S3 en un baño de agua. Disol- Soluciones estándar - Preparar las soluciones
ver el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a estándar empleando una Solución madre del están-
10,0 ml con ácido clorhídrico 0,1 M. dar diluida con ácido clorhídrico 0,1 M.
Solución madre del estándar - Disolver Solución muestra - Solución S3.
100,0 mg de titanio en 100 ml de ácido clorhídrico Procedimiento - Medir la absorbancia a
diluido hasta 150 ml con agua, calentando si fuera 213,9 nm empleando una lámpara de cinc de cátodo
necesario. Dejar enfriar y diluir a 1 litro con agua hueco como fuente de radiación y una llama de
(100 ppm de Ti). acetileno-aire. No debe contener más de
1 ppm de Zn extraíble.
LÍMITES DE ADITIVOS
ADITIVOS LÍMITES (%)
Aditivos antioxidantes –
butilhidroxitolueno 0,125
tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4 hidoxifenil)propionato] de pentaeritritilo 0,3
1,3,5-tris(3,5-di-ter-butil-4-hidroxibencil)-s-triazina-2,4,6-(1H,3H,5H)triona 0,3
3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo 0,3
3,3-bis(3-ter- butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno 0,3
disulfuro de dioctadecilo 0,3
2,2c,2s,6,6c,6s-hexa-ter-butil-4,4c,4s-[(2,4,6-trimetil-1,3,5-bencenotriil)trismetileno]trifenol 0,3
2,2’-bis(octadeciloxi)-5,5’-espirobi(1,3,2-dioxafosforinano) 0,3
3,3´-tiodopropionato de didodecilo 0,3
3,3´- tiodipropionato de dioctadecilo 0,3
fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo) 0,3
P-EPQ 0,1
copolímero de succinato de dimetilo y (4-hidroxi-2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-il)etanol 0,3
El total de de aditivos antioxidante enumerados anteriormente 0,3
Otros aditivos-
hidrocalcita 0,5
alcanoamidas 0,5
LÍMITES DE ADITIVOS – continuación
ADITIVOS LÍMITES (%)
alquenoamidas 0,5
silicio-aluminato de sodio 0,5
sílice 0,5
benzoato de sodio 0,5
ésteres o sales de ácidos grasos 0,5
fosfato trisódico 0,5
vaselina líquida 0,5
óxido de cinc 0,5
talco 0,5
estearato de calcio o cinc o una mezcla de ambos 0,5
dióxido de titanio 4
óxido de magnesio 0,2
1-Cabezal de ensayo.
2-manómetro. a- muestra
3-válvula de corte. b- abrazadera
4-válvulas reguladoras de presión. c- tornillo
5-válvula de corte. d- empaque de caucho.
6-depósito de aire.
7-suministro de aire.
(67(5,/,=$&,Ï1
Se denomina esterilización al proceso validado todos los componentes del equipo y planos;
por medio del cual se obtiene un producto libre de verificar la calidad, capacidad, presión, tipo y
microorganismos viables. El proceso de pureza (de ser aplicable) de todos los suministros.
esterilización debe ser diseñado, validado y llevado Los instrumentos destinados a evaluar las variables
a cabo de modo de asegurar que es capaz de críticas del proceso se deben calibrar frente a un
eliminar la carga microbiana del producto o un estándar o patrón de referencia nacional. En el caso
desafío más resistente. que exista un programa que ejecute el proceso de
Dado que la esterilidad no puede demostrarse de esterilización (microprocesador), el mismo debe
manera absoluta sin causar la destrucción completa validarse por un procedimiento establecido.
de todas las unidades del lote de producto
&DOLILFDFLyQRSHUDWLYD
terminado, se define la esterilidad en términos
Su objetivo es verificar que todos los
probabilísticos, en donde la probabilidad de que una
componentes del equipo funcionan de acuerdo a lo
unidad de producto esté contaminada es
especificado. Para este efecto se deben poner a
aceptablemente remota. Se considera que un
prueba de operación normal todos los dispositivos
producto crítico es estéril cuando la probabilidad de
del equipo y evaluar la uniformidad y
que un microorganismo esté presente en forma
reproducibilidad de las variables críticas del
activa o latente es igual o menor de 1 en 1.000.000
proceso, sin carga de producto.
(coeficiente de seguridad de esterilidad 10-6).
Para llevar a cabo los procesos de esterilización &DOLILFDFLyQRFHUWLILFDFLyQGHGHVHPSHxR
se requiere: Implica demostrar en forma documentada que el
- Instalaciones y suministros calificados; equipo produce un producto apropiado (coeficiente
- Equipamiento calificado y con de seguridad de esterilidad 10-6) cuando opera de
mantenimiento preventivo periódico; acuerdo con las especificaciones del proceso.
- Precauciones para disminuir la carga Para estos efectos, es necesario definir el tipo y
microbiana inicial del producto hasta un valor patrón de carga a esterilizar considerando los
mínimo; artículos y sus respectivos empaques. El patrón de
- Procesos de esterilización validados; carga es un aspecto crítico en relación a la
- Personal calificado y entrenado; distribución del calor o del agente esterilizante
- Controles sobre el ambiente y sobre el dentro de la cámara.
personal; La Calificación de desempeño incluye la
- Monitoreo y registro de los procesos de Calificación de Parámetros físicos y la Calificación
rutina. microbiológica
La validación es el procedimiento que permite Calificación de desempeño física - La primera
obtener, registrar e interpretar datos con el fin de fase en la Calificación de desempeño consiste en
demostrar que un equipo o proceso cumple en todas desarrollar perfiles de temperatura en la carga,
las ocasiones con las especificaciones evaluando la efectividad de la penetración del calor
predeterminadas. Aplicado a los procesos de en el producto, y caracterizar los cambios de
esterilización, la validación evalúa la aptitud del presión a lo largo del ciclo.
esterilizador y califica su funcionamiento con la
carga del producto. Consta de las siguientes Calificación de desempeño microbiológica -
actividades secuenciales documentadas: Consiste en validar los ciclos en cuanto a la
- Calificación de la Instalación capacidad de eliminación de microorganismos
- Calificación Operativa utilizando indicadores biológicos incorporados a los
- Calificación de Desempeño productos, o en su defecto utilizando productos
simulados inoculados con portadores biológicos.
&DOLILFDFLyQGHOD,QVWDODFLyQ Durante la calificación microbiológica se debe
Implica demostrar en forma documentada que verificar que finalizado el ciclo se ha alcanzado en
todos los aspectos de la instalación y los el producto la probabilidad de supervivencia de 10-6
suministros del equipo son los correctos y se Habitualmente cuando el producto es
cumplen las especificaciones del fabricante. termoestable se utiliza la aproximación de
Consiste en verificar el cumplimiento de las sobremuerte, en este enfoque no se tiene en cuenta
especificaciones de diseño y de las características el tipo ni la cantidad de microorganismos
de construcción, verificar la correspondencia de
contenidos inicialmente en el producto a esterilizar, tiempo y vapor saturado, siendo la temperatura de
utilizando como referencia solamente la población y referencia para el proceso 121 °C. La selección del
resistencia del bioindicador. tipo de ciclo de esterilización a emplear depende de
El segundo enfoque, aproximación de la configuración del producto y de la capacidad del
supervivencia, es aplicable solamente al desarrollo mismo y del empaque para soportar las
y validación de ciclos en los que el producto puede temperaturas, la presión y el calor transferidos. Los
ser alterado por el proceso de esterilización, por factores que pueden influenciar la esterilización de
ejemplo, la esterilización por calor húmedo de los productos son: tipo de empaque según su
productos sensibles al calor. densidad y porosidad, composición y complejidad
Se denomina esterilización terminal al proceso del dispositivo en cuanto a diseño y resistencia
aplicable cuando el producto se esteriliza en su térmica, y el tipo de carga en el esterilizador,
envase definitivo. Cuando la naturaleza del homogénea o heterogénea, volumen de la cámara
producto impide su esterilización terminal se debe ocupado, etc.
proceder a esterilizar en forma separada cada uno Los ejemplos de tiempos de exposición en ciclos
de sus componentes por cualquiera de los métodos de vapor saturado son 134 °C para un tiempo de
de esterilización terminal descriptos a continuación, exposición mínimo de 3 minutos y, 121 °C para un
seguido de un proceso de preparación aséptica del tiempo de exposición mínimo de 15 minutos.
producto final. Pueden ser utilizadas relaciones tiempo-temperatura
Los procesos de preparación aséptica de distintas de las mencionadas. En todos los casos
productos estériles a partir de componentes debe validarse cada proceso en particular.
preesterilizados deben también ser certificados y Un ciclo típico de esterilización por vapor
validados; algunos puntos críticos de la validación consta de una etapa inicial de eliminación previa del
del proceso incluyen ensayos de eficacia de los aire de la cámara y de los productos, lo que se
sistemas de filtración de aire y el procesamiento de consigue habitualmente por medio de vacío
un producto simulado estéril. fraccionado alternado con inyecciones de vapor
saturado, seguido de la etapa de esterilizado o
0pWRGRV\FRQGLFLRQHVGHHVWHULOL]DFLyQ
tiempo de contacto con el vapor saturado a la
Se debe llevar a cabo el proceso de
temperatura preestablecida; finalmente se procede
Esterilización por alguno de los métodos que se
al secado del material, etapa fundamental para
describen a continuación, teniendo en cuenta las
mantener las propiedades barrera del envase.
características del producto médico, como por
ejemplo su resistencia térmica. Cuando el material no admite ser sometido a la
acción del vacío se utiliza la remoción previa del
Clasificación aire por desplazamiento gravitacional; en estos
- Físicos casos se omite la etapa de secado posterior al
- Calor húmedo, esterilizado, ya que la naturaleza de los productos
- Calor seco, (generalmente líquidos en envases flexibles o
- Radio-esterilización, rígidos), no lo requiere.
- Filtración.
Controles de proceso
- Químicos
- Ensayo de eliminación del aire y penetración
- Óxido de etileno,
del vapor ó Test de Bowie-Dick,
- Vapor a baja temperatura con
formaldehído, - Temperatura en la cámara y en la carga,
- Presión en cámara,
- Plasma de peróxido de hidrógeno.
- Indicador químico de proceso,
(VWHULOL]DFLyQSRUFDORUK~PHGR - Indicador biológico.
9DSRUGHDJXDVDWXUDGR
No puede utilizarse para procesar materiales
Es el método de elección siempre que sea termosensibles, alterables por la humedad,
aplicable. Su efecto esterilizante se fundamenta en sustancias oleosas, grasas, polvos y materiales
la acción del calor transmitido por el vapor saturado eléctricos.
a presión superior a la normal sobre los
componentes celulares, produciendo coagulación Concepto de F0 y aplicación a la esterilización
por vapor
proteica, ruptura de DNA y RNA y pérdida de
El valor de F0 de un proceso de esterilización
material de bajo peso molecular , logrando así
por vapor saturado es la letalidad lograda en el
inactivación de los microorganismos. Los
producto en su envase definitivo, expresada en
parámetros críticos del proceso son temperatura,
términos de tiempo equivalente en minutos, a una El método de calor seco se utiliza también para
temperatura de 121 ºC, referenciando la carga la esterilización y despirogenación simultánea de
biológica del producto a la de un microorganismo envases de vidrio, ya sea operando en lotes o como
hipotético que posee un valor Z de 10 0C un proceso continuo, en este último caso como
El valor Z relaciona la resistencia al calor de un parte integral de un proceso de llenado aséptico de
microorganismo con los cambios de temperatura. producto. En los procesos de despirogenado las
Z se define como el cambio de temperatura en temperaturas empleadas son más elevadas que las
grados centígrados requerido para modificar el requeridas con fines de esterilización únicamente,
tiempo de reducción decimal D en un factor de 10, utilizándose habitualmente 250 °C por 5 minutos; la
siendo D para una dada temperatura de esterilizado, implementación de un proceso continuo como parte
el tiempo requerido para reducir el número de de un llenado aséptico requiere un control estricto
microorganismos viables a un 10 por ciento del de la calidad microbiológica del aire circulante en la
número original. cámara durante el esterilizado y el enfriamiento
La utilización del concepto matemático de Fo es posterior.
particularmente útil en la esterilización de Para los procesos de despirogenado, el programa
productos termosensibles a temperaturas inferiores de validación debe incluir en la calificación de
a 121 °C, ya que permite calcular el tiempo desempeño la demostración de la destrucción de
equivalente a 121 que produciría el mismo efecto endotoxinas por debajo del límite permitido en el
letal que el tiempo de exposición a las temperaturas ensayo de referencia (ver 330. Ensayo de
y condiciones reales a las que es sometido el endotoxinas bacterianas).
producto. Controles de proceso
El F0 total de un proceso tiene en cuenta las
- Temperatura en distintos puntos de la cámara y
fases de calentamiento y enfriamiento del ciclo y se
de la carga
puede calcular por integración de las tasas de
- Indicador químico de proceso e indicador
letalidad con respecto al tiempo, a intervalos
biológico.
distintos de temperatura a la que está siendo
sometido el producto a esterilizar. El método permite la esterilización de polvos,
Cuando se diseña y se valida un ciclo de aceites, soluciones no acuosas, y el despirogenado
esterilización por vapor tomando como base el de materiales resistentes al calor (ejemplo, envases
concepto de F0, el criterio microbiológico es el de de vidrio). Debido a que el aire caliente se
aproximación de supervivencia, en lugar del más estratifica debe utilizarse circulación forzada en los
habitual criterio de sobremuerte; debiendo el equipos.
proceso entregar al producto la mínima cantidad de (VWHULOL]DFLyQSRUUDGLDFLyQ
calor (Fo mínimo) para alcanzar el nivel de
seguridad de esterilidad de 10-6, sin afectar La radio-esterilización se basa en la aplicación
adversamente sus características por excesivo de radiación ionizante procedente de una fuente de
calentamiento. radioisótopos de Co60 o Cs137 emisoras de radiación
En estos procesos es preciso tomar precauciones gamma, o de un haz de electrones de alta energía,
para asegurar que se consigue en forma repetitiva obtenida con un acelerador de electrones o de un
una garantía adecuada de esterilidad, debiéndose generador de rayos X. En ambos casos el
demostrar que los parámetros microbiológicos parámetro crítico del proceso es la dosis absorbida
garantizan un nivel de aseguramiento de esterilidad por el producto.
de 10-6 o menor. Aunque históricamente se ha utilizado 25 kGy
como dosis absorbida de referencia, la preselección
(VWHULOL]DFLyQSRUFDORUVHFR de esta dosis debe ser convalidada
El mecanismo de acción microbicida se basa en experimentalmente; en muchos casos es
la acción oxidante del aire seco caliente que circula recomendable la utilización de dosis menores o
por convección forzada a través de los productos. mayores que la de referencia, dependiendo de las
Los parámetros críticos del proceso son propiedades del material, el grado de contaminación
temperatura y tiempo, siendo las relaciones del producto, y el coeficiente de seguridad de
sugeridas, 160 °C durante 2 horas y 170 °C durante esterilidad buscado.
1 hora. Estas temperaturas se relacionan con el En la radio-esterilización la determinación de la
tiempo de exposición después de haberse logrado la dosis se debe establecer dentro de un rango de dosis
temperatura específica en el punto más frío de la máxima-dosis mínima que asegure que las
carga y no incluye tiempos de calentamiento. propiedades del artículo no se vean alteradas.
La validación de un proceso de esterilización La integridad del dispositivo filtrante debe ser
por radiación incluye el estudio de la verificada antes y después del procedimiento a los
compatibilidad de los artículos a esterilizar con la efectos de determinar la eficacia del proceso.
radio-esterilización, evaluando el posible deterioro Dentro de las metodologías habitualmente
o degradación; el establecimiento del patrón de utilizadas para este fin se incluyen los ensayos de
carga del producto; la demostración mediante punto de burbuja, difusión y mantenimiento de la
dosímetros que se ha alcanzado la dosis de presión. Los valores de aceptación deben ser
esterilización preestablecida, el mapeo de dosis en provistos por el fabricante del dispositivo.
el contenedor de esterilización (incluyendo la La esterilización por filtración no garantiza la
identificación de zonas de dosis máxima y dosis eliminación de virus, micoplasmas ni priones. La
mínima); y la determinación del tiempo de presencia de estos agentes debe evitarse mediante
exposición para lograr esta distribución de dosis en selección, control y manejo adecuado de la materia
el producto. prima.
Es aplicable sobre una amplia variedad de
(VWHULOL]DFLyQSRUy[LGRGHHWLOHQR
productos, aunque se debe considerar la posibilidad
de cambios cualitativos luego de la aplicación de El óxido de etileno es un agente alquilante que
este método, puesto que produce ruptura de uniones reacciona con grupos químicos presentes de los
químicas en las macromoléculas, y formación de ácidos nucleicos y proteínas de los
especias reactivas (radicales libres) que pueden microorganismos. Su utilización como alternativa a
provocar alteraciones variadas en los materiales. métodos físicos se justifica exclusivamente cuando
por su naturaleza el producto pueda sufrir
)LOWUDFLyQ alteraciones por calor.
Este método está indicado para soluciones Los parámetros críticos del proceso son
lábiles al calor. Los microorganismos presentes son temperatura, concentración del gas, humedad
removidos mediante el pasaje de la solución a relativa porcentual y tiempo de esterilizado.
través de un medio filtrante de tamaño de poro El proceso de esterilización consta de varias
adecuado. Los elementos que entren en contacto etapas secuenciales:
con la solución deben ser estériles, el ambiente de - Preacondicionamiento del producto,
contaminación controlada y la técnica aséptica. - Ciclo propiamente dicho: remoción del
A pesar de que las sustancias que han sido aire, acondicionamiento del producto,
filtradas por este método se denominan “estériles”, inyección del gas, esterilizado y
por estar libres de bacterias y hongos y sus esporas, desgasificación o lavado del gas de la
éstas pueden contener virus activos que no son cámara,
removidos por el filtro. - Aireación forzada del producto, la que
Otros factores fundamentales a tener en cuenta puede efectuarse en la misma cámara del
son la posible adsorción de drogas, aditivos o esterilizador o en una cámara o recinto
conservadores por el material filtrante, el contenido independiente.
de endotoxinas y la carga microbiana de la Usualmente también se utilizan instalaciones
solución; éste último factor condiciona la selección independientes para preacondicionar la carga hasta
de otros parámetros críticos del proceso, tales como lograr la temperatura y humedad relativa requeridos
la presión de filtración y la velocidad de filtración. para el proceso, minimizando así el tiempo de
Los materiales de filtración disponibles acondicionamiento del producto en la cámara del
actualmente incluyen acetato de celulosa, nitrato de esterilizador.
celulosa, acrílicos, policarbonato, poliester, PVC, La validación del proceso exige requisitos
nylon, vinilo, PTFE, y membranas metálicas entre adicionales a los necesarios para procesos basados
otros. En todos los casos las membranas deben en la acción del calor; tales como la caracterización
tener la capacidad de retener el 100% de un cultivo estricta de las variaciones de presión en cámara a lo
de 107 de Pseudomonas diminuta (ATCC 19146) largo de las distintas etapas del ciclo, la medición
por cm2 de superficie de la membrana a una presión del tenor de humedad relativa en las etapas de
de no menos de 30 psi (2,0 bares). La clasificación preacondicionamiento y acondicionamiento, la
nominal de estas membranas es de 0,2 o 0,22 Pm medición de la concentración de gas en el
dependiendo del fabricante. esterilizado, y la determinación de las condiciones
Las membranas diseñadas para la retención de de aireación forzada de los productos esterilizados
Micoplasmas deben tener un tamaño nominal de de modo de lograr niveles de residuos y productos
0,1 Pm.
de reacción compatibles con los límites máximos El proceso es corto, no deja residuos tóxicos, y
permitidos. permite esterilizar a temperaturas iguales o menores
Controles de proceso de 50 °C.
- temperatura de la cámara y de la carga, El producto a procesar debe estar perfectamente
- control directo o indirecto de la humedad seco, existiendo restricciones de difusión del agente
relativa porcentual en cámara y de la esterilizante con respecto a los lúmenes; es
concentración de gas en cámara alcanzada incompatible con celulosa, polvos y líquidos.
en el esterilizado,
- tiempo de esterilizado, (VWHULOL]DFLyQFRQYDSRUDEDMDWHPSHUDWXUD\
- indicador químico de proceso e indicador IRUPDOGHKtGR
biológico.
El método basa su acción esterilizante en la
El método tiene aplicación sobre amplia
actividad alquilante del formaldehído, sustancia que
variedad de productos médicos, permitiendo operar
reacciona inactivando grupos químicos esenciales
aún a temperaturas inferiores a 40 °C. El óxido de
de los ácidos nucleicos y proteínas de los
etileno es tóxico, inflamable y explosivo, por lo que
microorganismos, en sinergismo con vapor de agua
se requiere para la operación de los esterilizadores
a presión subatmosférica.
establecimientos equipados con las instalaciones y
Los parámetros críticos del proceso son
medidas de seguridad necesarias para el
temperatura, concentración del formaldehído,
almacenamiento y manipuleo correcto de este
humedad relativa porcentual y tiempo de
producto.
esterilizado.
La emisión ambiental debe estar controlada, por
Básicamente el proceso consiste en realizar
tratarse de una sustancia cancerígena e irritante de
vacíos fraccionados alternados con inyecciones de
mucosas, piel y vías respiratorias. La aireación
solución de formaldehído, eliminando así el aire de
posterior a la esterilización implica tiempos de
la cámara y facilitando la penetración completa y
cuarentena prolongados.
reproducible del agente esterilizante en la carga.
La esterilización con óxido de etileno no es
En la etapa de esterilizado el producto
compatible con soluciones acuosas ni grasas; sin
permanece en contacto con el agente esterilizante a
embargo, está documentada la esterilización por
presión y temperatura constantes el tiempo
óxido de etileno de drogas en polvo alterables por
especificado para el proceso; por último se procede
radio-esterilización.
a la eliminación o lavado con vapor de agua de los
(VWHULOL]DFLyQFRQSODVPDGHSHUy[LGRGH residuos del agente químico del producto y de los
KLGUyJHQR empaques, seguido del secado final del producto.
Es un procedimiento de esterilización que se Controles de proceso
basa en la oxidación de moléculas biológicas - temperatura de la cámara,
mediante el plasma generado por acción de energía - control directo de la concentración del
de radiofrecuencia, utilizando como precursor vapor formaldehído,
de peróxido de hidrógeno, a baja temperatura y a - tiempo de esterilizado,
presión subatmosférica. El vapor de peróxido de - indicador químico de proceso e indicador
hidrógeno se disocia en la etapa de plasma del ciclo biológico.
de esterilización en radicales libres y otras especies
La temperatura del ciclo oscila en general entre
microbicidas activas. Tras la etapa de plasma se
60 y 80 °C
recombinan los radicales libres en forma de
moléculas estables, dando origen en su mayor parte La validación del proceso exige requisitos
a agua y oxígeno. adicionales a los necesarios para procesos basados
Los esterilizadores poseen un catalizador que en la acción del calor; tales como la caracterización
descompone el peróxido de hidrógeno para el estricta de las variaciones de presión en cámara a lo
tratamiento de los gases descargados de la cámara, largo de las distintas etapas del ciclo, la medición
garantizando de este modo una emisión ambiental de la concentración de gas en la etapa de
controlada para el operador. esterilización, y la determinación de las condiciones
Los parámetros críticos del proceso son de aireación de los productos esterilizados
concentración de peróxido de hidrógeno en cámara,
energía de radiofrecuencia, presión y tiempo en las Finalizado el proceso, quedan residuos de
etapas de difusión de la solución de peróxido de formaldehído y substancias de reacción aún
hidrógeno y de generación de plasma.
detectables en los productos, no estando aún de la resistencia del microorganismo de ensayo y la
claramente definidos los límites máximos fecha de vencimiento.
permitidos. El fabricante del bioindicador debe además
El método no es compatible con soluciones, suministrar con el producto instrucciones de uso,
grasas ni polvos. incluyendo las condiciones para la recuperación de
los organismos en ensayo después del proceso de
La emisión ambiental debe estar controlada, por
esterilización y las instrucciones para su disposición
tratarse de una sustancia cancerígena e irritante.
final.
Una tercera forma de bioindicadores la
$OPDFHQDPLHQWR constituyen suspensiones de esporas que se
La vida útil de los productos médicos estériles incorporan a unidades representativas del producto
estará determinada por el envejecimiento de los a esterilizar, o en su defecto a productos simulados.
componentes y por la integridad de su envase, por A estos bioindicadores se los llama productos
lo que el almacenamiento debe realizarse de manera inoculados, preparados a partir de suspensiones de
que se preserve la integridad del mismo, respetando esporas de población y resistencia conocida.
las condiciones ambientales indicadas por el La elección del organismo indicador para el
fabricante. método de esterilización se realiza de acuerdo a los
El riesgo de daño del envase se relaciona con el siguientes requisitos:
cuidado en la manipulación del mismo durante la - Resistencia elevada de la cepa de ensayo al
esterilización, el transporte y el almacenamiento. método de esterilización previsto, en comparación a
la resistencia de todos los microorganismos
,QGLFDGRUHVELROyJLFRV patógenos y de los que pueden producir
Los indicadores biológicos son preparaciones contaminación en el producto.
normalizadas de microorganismos seleccionados - La cepa de ensayo no debe ser patógena.
que se utilizan para valorar la eficacia de los - La cepa de ensayo debe poder cultivarse con
procedimientos de esterilización. Habitualmente se facilidad.
presentan bajo la forma de una población de esporas Se recomienda que se coloquen los indicadores
bacterianas dispuestas sobre un soporte inerte o biológicos en los lugares menos accesibles al agente
portador (disco o tira de papel de filtro, vidrio, o esterilizante y bajo las mismas condiciones de
plástico). Pueden emplearse también indicadores empaque que el material a procesar.
biológicos con más de una especie de bacteria sobre Después de la incubación, la existencia de
un mismo soporte. El portador inoculado se crecimiento de los microorganismos de referencia
encuentra dentro de un empaque o envase primario que han sido sometidos al proceso de esterilización
que lo protege de cualquier deterioro o demuestra que dicho procedimiento ha sido
contaminación, pero que permite el pasaje del ineficiente.
agente esterilizante. - Para esterilización por vapor se recomienda el
En otras presentaciones el indicador biológico uso de las esporas de Geobacillus
se presenta en un envase primario autocontenido stearothermophilus, ATCC 7953. El número de
que incluye un medio de cultivo estéril; en este caso esporas viables por soporte debe ser no menor de 1
el diseño del envase ofrece mínima resistencia al x 10 5 y el valor de D a 121 ºC superior a
paso del agente esterilizante. 1,5 minutos. Se debe verificar que luego de la
En ambos casos los envases primarios se exposición de los indicadores al calor húmedo a
vehiculizan en un envase secundario de forma que 121 ±1 ºC durante 6 minutos queden esporas
los bioindicadores puedan ser transportados y capaces de germinar y que no haya crecimiento del
almacenados en condiciones adecuadas. En el microorganismo de referencia después que los
rótulo de los indicadores biológicos deberá figurar indicadores biológicos hayan sido expuestos al
el nombre del organismo de ensayo empleado como agente esterilizante durante 15 minutos.
microorganismo de referencia, el nombre o - En el caso de la esterilización por calor seco,
abreviatura de la colección de cultivo y el número se recomiendan las esporas de Bacillus atrophaeus
de referencia de la especie, el número de lote, la ATCC 9372. El número de esporas viables por
indicación del método de esterilización para el cual soporte debe ser no menor de 1 u 105 y el valor D a
el indicador biológico puede ser utilizado, el 160 ºC debe estar comprendido entre 5 y
número de esporas viables por transportador, datos 10 minutos.
- Cuando se utiliza radiación ionizante, los poblaciones nominales mayores) y el valor D no
indicadores utilizados contienen esporas de Bacillus debe ser menor de 12,5 minutos cuando se
pumilus (ATCC27.142, NCTC 10327, NCIMB expongan a 600 ± 30 mg/l de óxido de etileno,
110692 o CIP 77.25). El número de esporas por 60 ± 10 % de humedad relativa y 30 ± 1 °C, y/o
soporte debe ser mayor de 1 u 107 y el valor de D 2,5 minutos cuando se expongan a 600 ± 30 mg/l de
mayor a 1,9 kGy. Se debe comprobar que no haya óxido de etileno, 60 ± 10 % de humedad relativa y
crecimiento de los microorganismos de referencia 54 ± 1 °C.
luego de una exposición de los indicadores - Cuando se utiliza el Vapor a baja temperatura
biológicos a 25 kGy (dosis mínima absorbida). con formaldehído se recomienda el uso de esporas
- Para el sistema de Esterilización por Plasma de Geobacillus stearothermophilus, NCBI 8224,
de peróxido de hidrógeno se recomienda el uso de DSM 6790, ATCC 7953, ATCC 10149 y ATCC
esporas de Geobacillus stearothermophilus, ATCC 12980. El número de esporas viables por soporte
7953. debe ser mayor de 1 u 10 5.
- En el caso de esterilización por óxido de
etileno se recomiendan las esporas de Bacillus (QVD\RGH(VWHULOLGDG
atrophaeus ATCC 9372. El número de esporas Proceder según se indica en 370. Ensayos de
viables por soporte debe ser superior a 1 u 106 Esterilidad.
(valores de población nominal mínima para uso en
monitoreos de rutina; para ensayos de validación o
aplicaciones especiales puede requerirse
Actualización total
590. LÍMITE DE METALES PESADOS
Este ensayo se emplea para establecer que el [NOTA: siempre que en una monografía indivi-
contenido de impurezas metálicas que reaccionan dual aparezca la denominación Solución estándar
con el ión sulfuro, bajo las condiciones especifica- de plomo sin ninguna especificación de concentra-
das, no excede el Límite de metales pesados especi- ción, se debe emplear la Solución estándar de plo-
ficado en la monografía correspondiente, expresado mo (10 ppm).]
como porcentaje (en peso) de plomo en la sustancia
Método I
en ensayo, determinado mediante comparación
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Disol-
visual (ver Comparación visual en Consideraciones
ver 50 g de acetato de amonio en 100 ml de ácido
generales) con un control preparado a partir de una
clorhídrico 6 N, ajustar a pH 3,5, si fuera necesario,
Solución estándar de plomo.
con hidróxido de amonio 6 N o ácido clorhídrico
[NOTA: los cationes que generalmente respon-
6 N y diluir con agua a 200 ml.
den a este ensayo son: plomo, mercurio, bismuto,
Solución estándar - Transferir 2 ml de Solución
arsénico, antimonio, estaño, cadmio, plata, cobre y
estándar de plomo (10 ppm), correspondientes a
molibdeno.]
20 µg de Pb, a un tubo de Nessler de 50 ml y diluir
A menos que se especifique de otro modo en la
con agua a 25 ml. Ajustar a pH entre 3,0 y 4,0 con
monografía correspondiente, emplear el Método I.
ácido acético 1 N o hidróxido de amonio 6 N, em-
Reactivos especiales pleando papel indicador de pH, diluir con agua a
Solución madre de nitrato de plomo - Disolver 40 ml y mezclar.
159,8 mg de nitrato de plomo en 100 ml de agua a Solución muestra - Transferir 25 ml de la solu-
la cual se le ha agregado 1 ml de ácido nítrico y ción preparada para el ensayo según se indica en la
diluir a 1 litro con agua. Preparar y almacenar esta monografía correspondiente a un tubo de Nessler de
solución en envases de vidrio exentos de sales de 50 ml. Alternativamente, cuando se indique en la
plomo solubles. monografía correspondiente, emplear el volumen de
Solución estándar de plomo (100 ppm) - Disol- ácido indicado, disolver la cantidad en g de mues-
ver 400 mg de nitrato de plomo en agua y diluir a tra, calculada por la fórmula siguiente:
250 ml con el mismo solvente. En el día del ensa-
2,0/(1.000L)
yo, diluir 1 ml de esta solución a 10 ml con agua.
Solución estándar de plomo (10 ppm) - En el en la cual L es el Límite de metales pesados, en
día del ensayo, diluir 10,0 ml de Solución madre de porcentaje. Diluir a 25 ml con agua y ajustar a pH
nitrato de plomo a 100,0 ml con agua. Cada ml de entre 3,0 y 4,0 con ácido acético 1 N o hidróxido de
Solución estándar de plomo (10 ppm) contiene el amonio 6 N, empleando papel indicador de pH,
equivalente a 10 µg de plomo. Una solución de diluir a 40 ml con agua y mezclar.
comparación preparada sobre la base de 100 µl de Solución control - Transferir 25 ml de una solu-
Solución estándar de plomo (10 ppm) por g de ción preparada según se indica para la Solución
muestra contiene el equivalente a 1 ppm de plomo. muestra a un tercer tubo de Nessler de 50 ml y
Solución estándar de plomo (2 ppm) - En el día agregar 2,0 ml de Solución estándar de plomo
del ensayo, diluir 1,0 ml de Solución estándar de (10 ppm). Ajustar a pH entre 3,0 y 4,0 con ácido
plomo (100 ppm) a 50,0 ml con agua. Cada ml de acético 1 N o hidróxido de amonio 6 N, empleando
Solución estándar de plomo (2 ppm) contiene el papel indicador de pH, diluir a 40 ml con agua y
equivalente a 2,0 µg de plomo. mezclar.
Solución estándar de plomo (1 ppm) - En el día Procedimiento - A cada uno de los tubos que
del ensayo, diluir 1,0 ml de Solución estándar de contienen la Solución estándar, la Solución muestra
plomo (100 ppm) a 100,0 ml con agua. Cada ml de y la Solución control, respectivamente, agregar
Solución estándar de plomo (1 ppm) contiene el 1,2 ml de tioacetamida-glicerina básica (SR) y 2 ml
equivalente a 1,0 µg de plomo. de Solución reguladora de acetato de pH 3,5, diluir
Solución estándar de plomo (0,1 ppm) - En el a 50 ml con agua, mezclar, dejar reposar durante
día del ensayo, diluir 1,0 ml de Solución estándar 5 minutos y observar longitudinalmente sobre una
de plomo (1 ppm) a 10 ml con agua. Cada ml de superficie blanca: el color de la solución obtenida a
Solución estándar de plomo (0,1 ppm) contiene el partir de la Solución muestra no debe ser más oscu-
equivalente a 0,1 µg de plomo. ro que el de la obtenida a partir de la Solución
estándar y la intensidad del color de la Solución
control debe ser igual o mayor que la de la Solución matraz de Kjeldahl de 100 ml. Agregar un volumen
estándar. adicional de ácido nítrico igual al agregado a la
[NOTA: si el color de la Solución control es Solución muestra. Calentar la solución hasta des-
más claro que el de la Solución estándar, emplear el prendimiento de vapores densos y blancos, enfriar y
Método II.] agregar con cuidado 10 ml de agua. Si se empleó
Método II peróxido de hidrógeno al 30 % al tratar la Solución
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa- muestra, agregar el mismo volumen de peróxido de
rar según se indica en Método I. hidrógeno y calentar a ebullición suavemente hasta
Solución estándar - Preparar según se indica en que se desprendan vapores densos y blancos. En-
Método I. friar a temperatura ambiente, agregar con cuidado
Solución muestra - Emplear una cantidad en g 5 ml de agua, mezclar y calentar a ebullición sua-
de muestra calculada por la fórmula siguiente: vemente hasta la producción de vapores blancos y
obtener un volumen de 2 a 3 ml. Enfriar, diluir con
2,0/(1.000L) cuidado con 2 a 5 ml de agua, agregar 2,0 ml de
en la cual L es el Límite de metales pesados, en Solución estándar de plomo (10 ppm), correspon-
porcentaje. Transferir la cantidad de muestra pesa- dientes a 20 µg de Pb, y mezclar. Transferir a un
da a un crisol, agregar suficiente ácido sulfúrico tubo de Nessler de 50 ml, lavar el matraz con agua,
para impregnar la sustancia y someter cuidadosa- agregando los lavados al tubo hasta completar un
mente a ignición hasta que la sustancia se carbonice volumen de 25 ml y mezclar.
por completo. [NOTA: cubrir el crisol parcialmente Solución muestra -
durante la carbonización.] Agregar a la masa car- Si la sustancia es sólida - Transferir la
bonizada 2 ml de ácido nítrico y 5 gotas de ácido cantidad de muestra especificada en la monografía
sulfúrico y calentar con cuidado hasta que no se correspondiente a un matraz de Kjeldahl de 100 ml.
desprendan vapores blancos. Someter a ignición, [NOTA: emplear un matraz de 300 ml si la reacción
en una mufla, entre 500 y 600 °C, hasta que el resi- genera espuma en exceso.] Inclinar el matraz a 45°
duo carbonoso desaparezca. Dejar enfriar a tempe- y agregar, con cuidado, cantidad suficiente de una
ratura ambiente. Agregar 4 ml de ácido clorhídrico mezcla de 8 ml de ácido sulfúrico y 10 ml de ácido
6 N, tapar el crisol y transferir a un baño de vapor nítrico para impregnar la muestra. Calentar suave-
durante 15 minutos. Destapar y evaporar lentamen- mente hasta que la reacción comience, dejar que la
te hasta sequedad. Agregar al residuo 1 gota de reacción disminuya y agregar porciones adicionales
ácido clorhídrico, 10 ml de agua caliente y digerir de la misma mezcla hasta un volumen final de
durante 2 minutos. Agregar hidróxido de amonio 18 ml. Calentar suavemente a ebullición hasta que
6 N, gota a gota, hasta que la solución sea alcalina la solución se oscurezca. Enfriar a temperatura
frente al papel de tornasol, diluir a 25 ml con agua y ambiente, agregar 2 ml de ácido nítrico y calentar
ajustar a pH entre 3,0 y 4,0 con ácido acético 1 N nuevamente hasta que la solución se oscurezca.
empleando papel indicador de pH de intervalo es- Continuar calentando luego del agregado de ácido
trecho. Filtrar, si fuera necesario, lavar el crisol y el nítrico hasta que la mezcla no presente oscureci-
filtro con 10 ml de agua, combinar el filtrado y el miento. Luego calentar fuertemente hasta la pro-
agua de lavado en un tubo de Nessler de 50 ml, ducción de vapores densos y blancos. Enfriar,
diluir a 40 ml con agua y mezclar. agregar con cuidado 5 ml de agua, calentar suave-
Procedimiento - A cada uno de los tubos que mente a ebullición hasta la producción de vapores
contienen la Solución estándar y la Solución mues- densos, blancos y continuar calentando hasta que el
tra, respectivamente, agregar 1,2 ml de tioacetami- volumen se reduzca a unos pocos ml. Enfriar a
da-glicerina básica (SR) y 2 ml de Solución regula- temperatura ambiente, agregar con cuidado 5 ml de
dora de acetato pH 3,5, diluir a 50 ml con agua, agua y examinar el color de la solución. Si el color
mezclar, dejar reposar durante 5 minutos y observar es amarillo, agregar con cuidado 1 ml de peróxido
longitudinalmente sobre una superficie blanca: el de hidrógeno al 30 % y nuevamente evaporar hasta
color de la solución obtenida a partir de la Solución la producción de vapores blancos y obtener un
muestra no debe ser más oscuro que el de la solu- volumen de 2 a 3 ml. Si la solución sigue siendo
ción obtenida a partir de la Solución estándar. amarilla, agregar 5 ml de agua y repetir el trata-
miento con peróxido de hidrógeno. Enfriar, diluir
Método III con cuidado con 2 a 5 ml de agua, lavar y transferir
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa- a un tubo de Nessler de 50 ml, teniendo cuidado
rar según se indica en Método I. que el volumen total no exceda los 25 ml.
Solución estándar - Transferir una mezcla de Si la sustancia es líquida - Transferir la
8 ml de ácido sulfúrico y 10 ml de ácido nítrico a un cantidad de muestra especificada en la monografía
correspondiente a un matraz de Kjeldahl de 100 ml. Solución estándar de plomo (100 ppm) por dilución
[NOTA: emplear un matraz de 300 ml si la reacción con el solvente especificado para preparar la Solu-
genera espuma en exceso.] Inclinar el matraz a 45° ción muestra, agregar 2 ml de Solución muestra y
y agregar, con cuidado, unos pocos ml de una mez- mezclar.
cla de 8 ml de ácido sulfúrico y 10 ml de ácido Solución muestra - Disolver la cantidad de sus-
nítrico. Calentar suavemente hasta que la reacción tancia a examinar en un solvente orgánico (dioxano,
comience, dejar que la reacción disminuya y proce- acetona, etc.) que contenga un mínimo porcentaje
der según se indica en Si la sustancia es un sólido, de agua (15 %), procediendo según se indica en la
comenzando donde dice "agregar porciones adi- monografía correspondiente. Emplear 12 ml de esta
cionales de la misma mezcla hasta un volumen final solución.
de 18 ml...". Solución control - A 10 ml del solvente em-
Procedimiento - Tratar la Solución muestra y la pleado para preparar la Solución muestra agregar
Solución estándar del siguiente modo: ajustar a pH 2 ml de Solución muestra y mezclar.
entre 3,0 y 4,0, empleando papel indicador de pH de Procedimiento - Proceder según se indica para
intervalo estrecho, con hidróxido de amonio (puede Método IV. La Solución estándar debe presentar
emplearse una solución de amoníaco diluido, cuan- una ligera coloración parda cuando se compara con
do el intervalo especificado es estrecho), agregar la Solución control. Dejar reposar durante aproxi-
agua hasta 40 ml y mezclar. Agregar a cada tubo madamente 2 minutos: si la Solución muestra pre-
1,2 ml de tioacetamida-glicerina básica (SR) y 2 ml sentase coloración parda, esta no debe ser más in-
de Solución reguladora de acetato pH 3,5, diluir a tensa que la de la Solución estándar.
50 ml con agua, mezclar, dejar reposar durante
Método VI
5 minutos y observar longitudinalmente sobre una
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa-
superficie blanca: el color de la Solución muestra
rar según se indica en Método I.
no debe ser más oscuro que el de la Solución están-
Solución estándar - Mezclar 4 ml de una solu-
dar.
ción de sulfato de magnesio al 25 % en ácido sulfú-
Método IV rico diluido y el volumen de Solución estándar de
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa- plomo (10 ppm) especificado en la monografía
rar según se indica en Método I. correspondiente. Mezclar con una varilla de vidrio
Solución estándar - A 10 ml de Solución están- y calentar cuidadosamente. Si la mezcla es líquida,
dar de plomo (1 ppm) o Solución estándar de plomo evaporar suavemente sobre un baño de agua hasta
(2 ppm), según se indique en la monografía corres- sequedad. Calentar hasta calcinación para obtener
pondiente, agregar 2 ml de Solución muestra y un residuo prácticamente blanco, o a lo sumo grisá-
mezclar. ceo, sin que la temperatura supere los 800 ºC. De-
Solución muestra - Preparar según se indica en jar secar y humedecer el residuo obtenido con unas
la monografía correspondiente. Emplear 12 ml de gotas de ácido sulfúrico diluido. Evaporar y calci-
esta solución. nar nuevamente y luego enfriar. [NOTA: la dura-
Solución control - A 10 ml de agua agregar ción total de la calcinación no debe ser mayor de 2
2 ml de la Solución muestra y mezclar. horas]. Recuperar el residuo empleando dos por-
Procedimiento - A cada uno de los tres tubos ciones de 5 ml de ácido clorhídrico diluido, agregar
que contienen la Solución estándar, la Solución 0,1 ml de fenoftaleína (SR1) y luego amoníaco
muestra y la Solución control, respectivamente, concentrado hasta coloración rosada. Enfriar, agre-
agregar 2 ml de Solución reguladora de acetato gar ácido acético glacial hasta decoloración y luego
pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida-glicerina bási- agregar 0,5 ml en exceso. Si fuera necesario, filtrar
ca (SR) y mezclar: la Solución estándar debe pre- y lavar el filtro. Diluir esta solución a 20 ml con
sentar una ligera coloración parda cuando se com- agua. Transferir 10 ml de esta solución a un tubo
para con la Solución control. Dejar reposar durante de ensayo y agregar 2 ml de solución muestra.
aproximadamente 2 minutos: si la Solución muestra Solución muestra - Introducir la cantidad de
presentase coloración parda, esta no debe ser más sustancia a examinar según se especifique en la
intensa que la de la Solución estándar. monografía correspondiente (como máximo 2 g) en
un crisol de sílice y agregar 4 ml de una solución de
Método V
sulfato de magnesio al 25 % en ácido sulfúrico
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa-
diluido. Proceder según se indica para la Solución
rar según se indica en Método I.
estándar, comenzando donde dice “Mezclar con
Solución estándar - A 10 ml de una solución de
una varilla fina...” hasta “Diluir esta solución a
plomo de 1 ó 2 ppm, según se indique en la mono-
20 ml con agua”. Emplear 12 ml de esta solución.
grafía correspondiente, preparada a partir de la
Solución control - A 10 ml de agua agregar Aparato - Preparar el dispositivo de filtración
2 ml de la Solución muestra y mezclar. indicado en la Figura, adaptando el tubo de una
Procedimiento - Proceder según se indica para jeringa de 50 ml, sin su émbolo, a un portafiltros
Método IV. La Solución estándar debe presentar que contenga una membrana filtrante de unos
una ligera coloración parda cuando se compara con 13 mm de diámetro y 3 µm de tamaño de poro y
la Solución control. Dejar reposar durante aproxi- sobre esta, un prefiltro del mismo diámetro.
madamente 2 minutos: si la Solución muestra pre- Solución estándar - Transferir el volumen de
sentase coloración parda, esta no debe ser más in- Solución estándar de plomo (1 ppm) según se espe-
tensa que la de la Solución estándar. cifique en la monografía correspondiente al tubo de
la jeringa, colocar el émbolo y aplicar una presión
Método VII
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa- uniforme hasta haber filtrado todo el líquido. Abrir
rar según se indica en Método I. el portafiltros, retirar el prefiltro y comprobar que la
Solución estándar - A 0,5 g de óxido de magne- membrana filtrante no esté contaminada con impu-
sio, agregar la cantidad de Solución estándar de rezas. Si la membrana estuviese contaminada,
plomo (10 ppm) según se especifique en la mono- reemplazarla y repetir la filtración en las mismas
grafía correspondiente y secar en estufa entre 100 y condiciones.
105 °C. Calcinar hasta obtener una masa homogé- Solución muestra - Disolver la cantidad de sus-
nea blanco o blanco-grisacea. Si luego de 30 minu- tancia a examinar según se especifique en la mono-
tos de calcinación la masa permanece coloreada, grafía correspondiente, en 30 ml de agua o el volu-
dejar enfriar, mezclar con una varilla fina de vidrio men indicado en la monografía correspondiente.
y calcinar nuevamente. Si fuera necesario, repetir Proceder según se indica para la Solución estándar.
esta operación. Calentar a 800 °C durante 1 hora y Procedimiento - Agregar 2 ml de Solución re-
recuperar el residuo empleando dos porciones de guladora de acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetami-
5 ml de una mezcla de agua y ácido clorhídrco al da-glicerina básica (SR), al filtrado o al volumen
25 % p/v (1:1). Agregar 0,1 ml de fenolftaleína especificado del mismo de la Solución muestra.
(SR1) y luego amoniaco concentrado hasta colora- Mezclar, dejar en reposo durante 10 minutos y
ción rosada. Enfriar, agregar ácido acético glacial filtrar nuevamente pero invirtiendo las posiciones
hasta decoloración y luego agregar 0,5 ml en exce- del prefiltro y la membrana filtrante, de modo que
so. Si fuera necesario, filtrar y lavar el filtro. Diluir el líquido pase primero por la membrana filtrante y
esta solución a 20 ml con agua. Transferir 10 ml de luego por el prefiltro [NOTA: esta operación debe
esta solución a un tubo de ensayo y agregar 2 ml de realizarse lenta y uniformemente, aplicando una
Solución muestra. presión moderada y constante sobre el émbolo de la
Solución muestra - Introducir la cantidad de jeringa]. Luego de haber filtrado todo el líquido,
sustancia a examinar según se especifique en la abrir el portafiltros, retirar la membrana filtrante y
monografía correspondiente en un crisol de sílice y secar con papel de filtro. Proceder del mismo modo
mezclar con 0,5 g de óxido de magnesio. Proceder con la Solución estándar. El color de la mancha
según se indica para la Solución estándar, comen- obtenida a partir de la Solución muestra no debe ser
zando donde dice “Calcinar hasta obtener una más intenso que el obtenido con la Solución están-
masa homogénea...” hasta “Diluir esta solución a dar.
20 ml con agua”. Emplear 12 ml de esta solución.
Solución control - A 10 ml de agua agregar
2 ml de la Solución muestra y mezclar.
Procedimiento - Proceder según se indica para
Método IV. La Solución estándar debe presentar
una ligera coloración parda cuando se compara con
la Solución control. Dejar reposar durante aproxi-
madamente 2 minutos: si la Solución muestra pre-
sentase coloración parda, esta no debe ser más in-
tensa que la de la Solución estándar.
Método VIII Figura. Dispositivo para prefiltrar y filtrar las soluciones
Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Prepa- de ensayo. Vista de la disposición del prefiltro y la mem-
rar según se indica en Método I. brana filtrante en las diferentes etapas del ensayo.
0e72'26'($1È/,6,63$5$*$6(60(',&,1$/(6
'(),1,&,21(6 para la determinación de Óxidos de Nitrógeno en
Gas blanco - Gas o mezcla de gases empleado Óxido Nitroso por quimioluminiscencia.
para realizar el ajuste de cero en la calibración de
0e72'26'($1È/,6,6
los instrumentos analíticos.
Gas estándar - Gas o mezcla de gases emplea- $QDOL]DGRU3DUDPDJQpWLFR3DUD2[tJHQR
do para realizar el ajuste de la escala en la calibra- Se emplea para determinar el contenido de oxí-
ción de los instrumentos analíticos. geno en gases medicinales.
6867$1&,$6'(5()(5(1&,$ El fundamento del método se basa en la propie-
dad que exhibe la molécula de oxígeno de ser fuer-
Dióxido de Carbono SR-FA- CO2 - (PM: 44,0) temente paramagnética. El oxígeno gaseoso se mide
- >124-38-9@ - Contiene no menos de 99,995 % v/v en base a la fuerza magnética que actúa sobre un
de CO2, menos de 5 ppm de Monóxido de Carbono cuerpo de prueba suspendido en un campo magnéti-
y menos de 25 ppm de Oxígeno. co no uniforme, cuando dicho cuerpo está rodeado
Monóxido de Carbono SR-FA - CO - por la muestra de gas. Dicha fuerza puede medirse
(PM: 28,0) - >630-08-0@ - Contiene no menos de electrónicamente y, una vez amplificada y trans-
99,97 % v/v de CO. formada, proporciona la concentración de oxígeno
Monóxido de Nitrógeno SR-FA - NO - en la muestra gaseosa.
(PM: 30,0) - [10102-43-9] - Contiene no menos de La medida de la concentración de oxígeno es
98,0% v/v de NO. dependiente de la presión y de la temperatura. Por
Nitrógeno SR-FA - N2 - (PM: 28,01) - >7727- lo tanto, el analizador debe calibrarse antes del uso,
37-9@ - Contiene no menos de 99,999 % v/v de N2, si el instrumento no compensa automáticamente las
menos de 0,5 ppm de Monóxido de Carbono y Di- variaciones de estos parámetros. El instrumento
óxido de Carbono y menos de 5 ppm de Oxígeno. debe permitir determinar el nivel de oxígeno con
Oxido Nitroso SR-FA - N2O - (PM: 44,01) - una sensibilidad mínima de 0,1 %.
[10024-97-2] - Contiene no menos de 99,99 % v/v
Calibración del instrumento -
de N2O, menos de 1 ppm de Monóxido de Nitróge-
Ajustar el cero de acuerdo a las instrucciones del
no y menos de 1 ppm de Monóxido de Carbono.
fabricante, pasando Nitrógeno SR-FA a un caudal
Oxígeno SR-FA- O2 - (PM: 32,00) - [7782-44-
apropiado hasta obtener una lectura estable.
7] - Contiene no menos de 99,99 % v/v de O2,
Ajustar la amplitud de la escala de acuerdo a las
menos de 100 ppm de Nitrógeno y Argón, menos de
instrucciones del fabricante, pasando el gas estándar
10 ppm de Dióxido de Carbono y menos de 0,5 ppm
a un caudal adecuado hasta obtener una lectura
de Monóxido de Carbono.
estable. Utilizar aire estándar u oxígeno estándar,
Mezcla que contenga 300 ppm v/v de Dióxido
según corresponda.
de Carbono SR-FA en Nitrógeno SR-FA - Se em-
plea para la determinación de Dióxido de Carbono Valoración -
en Oxígeno por analizador infrarrojo. Pasar el gas en ensayo en las mismas condicio-
Mezcla que contenga 300 ppm v/v de Dióxido de nes en las que fuera calibrado el instrumento hasta
Carbono SR-FA en Óxido Nitroso SR-FA - Se tener una lectura estable. Determinar el contenido
emplea para la determinación de Dióxido de Carbo- de oxígeno en el gas en ensayo.
no en Óxido Nitroso por cromatografía de gases. +LJUyPHWUR(OHFWUROtWLFR
Mezcla que contenga 5 ppm v/v de Monóxido de
Carbono SR-FA en Nitrógeno SR-FA - Se emplea Se emplea para determinar el contenido de va-
para la determinación de Monóxido de Carbono en por de agua en gases medicinales.
Oxígeno por analizador infrarrojo. La celda electrolítica de medición está provista
Mezcla que contenga 5 ppm v/v de Monóxido de de dos electrodos de alambre de platino, en forma
Carbono SR-FA en Óxido Nitroso SR-FA - Se de espiral, entrelazados y aislados entre sí, recubier-
emplea para la determinación de Monóxido de Car- tos por una capa delgada de pentóxido de fósforo.
bono en Óxido Nitroso por cromatografía de gases. El pentóxido de fósforo es altamente higroscópico y
reacciona con el vapor de agua contenido en el gas
Mezcla que contenga 2 ppm de Monóxido de en ensayo. A continuación, se aplica un voltaje
Nitrógeno SR-FA en Nitrógeno SR-FASe emplea continuo a través de los electrodos, lo que produce
la electrólisis del agua y una regeneración del
pentóxido de fósforo. Durante la electrólisis, se cantidad de óxidos de nitrógeno permitidos en
mide la corriente eléctrica que, de acuerdo con las la muestra.
leyes de Faraday, resulta proporcional al contenido Una cámara de reacción de monóxido de nitró-
de agua en el gas; no se requiere entonces calibra- geno y ozono.
ción contra estándar de humedad. Un sistema para la detección de la luz emitida,
consistente en un filtro óptico selectivo de
$QDOL]DGRUGH4XLPLROXPLQLVFHQFLD
1,2 Pm de longitud de onda y un tubo fotomul-
Se emplea para determinar el contenido total de tiplicador.
monóxido de nitrógeno y dióxido de nitrógeno en
gases medicinales. El gas bajo análisis ingresa a un caudal constan-
El instrumento consta de los siguientes compo- te, previo paso por el filtro de partículas, en la
nentes: cámara de reacción, donde se mezcla con un exceso
Un dispositivo para filtrar, controlar y regular el de ozono. Allí se forma la especie excitada NO*
flujo del gas bajo análisis. que, al decaer a su estado fundamental de energía,
Un convertidor que reduce el dióxido de nitró- emite una radiación cuya intensidad es proporcional
geno a monóxido de nitrógeno, para determinar a la cantidad de monóxido de nitrógeno presente en
el contenido total de monóxido y dióxido de la muestra. La energía luminosa se transforma en
nitrógeno. La eficiencia del convertidor debe una señal eléctrica por medio de un sistema de filtro
ser controlada antes de usar. y fotomultiplicador.
Un generador de ozono de caudal controlado. El El resultado obtenido debe multiplicarse por un
ozono se produce por descargas de corriente factor de corrección debido al efecto de atenuación
eléctrica de alto voltaje a través de dos electro- que causa la matriz de óxido nitroso en la señal
dos. El generador de ozono se alimenta con luminiscente. Dicho factor se determina empleando
oxígeno puro, o con aire ambiental deshidrata- una mezcla de referencia de monóxido de nitrógeno
do. Para asegurar que la reacción se lleve a ca- en óxido nitroso, comparando el contenido de la
bo en forma cuantitativa, la concentración de mezcla con la lectura indicada por el analizador.
ozono debe ser muy superior de 2 ppm, máxima
Regulador de flujo
Filtro Cámara de reacción
partículas
Convertidor Filtro O=1.2 Pm
Filtro de O3
Generador de O3 Fotomultiplicador
Control
NO NO+NO2 NO2
Celda de
muestra
)LJXUDAnalizador infrarrojo
1. (QYDVHGHJDV
2. 5HJXODGRUGHSUHVLyQ
3. 9iOYXODGHDJXMD
4. /ODYHGHFRQPXWDFLyQ
5. 7XERGHWHFWRU
6. %RPEDGRVLILFDGRUD
7. ([WUHPRDELHUWRDWPyVIHUD
)LJXUD
El envase que suministra el gas debe estar co- 5 ppm con una desviación estándar relativa máxima
nectado a un regulador de presión adecuado y a una de r 10 %.
válvula de aguja. Conectar a la válvula aguja un Tubo detector de Cloro - Contiene filtros ad-
tubo flexible provisto de una llave de conmutación. sorbentes y soportes adecuados para el indicador o-
Purgar el sistema con la llave 4 en la posición de toluidina. El valor mínimo indicado es 0,5 ppm con
purga (7) y ajustar el flujo del gas bajo análisis a un una desviación estándar relativa máxima de r 10 %.
valor apropiado. Tubo detector de Dióxido de Azufre - Contiene
Romper ambos extremos del tubo detector y co- filtros adsorbentes y soportes adecuados para los
nectar el tubo entre la bomba dosificadora y la indicadores yodo y almidón. El valor mínimo indi-
válvula 4, siguiendo las instrucciones del fabricante. cado es 0,5 ppm con una desviación estándar relati-
Operar la bomba 6 de manera de permitir el paso de va máxima de ± 15 %.
un volumen adecuado del gas bajo análisis a través Tubo detector de Dióxido de Carbono - Contie-
del tubo. Leer el valor correspondiente a la longitud ne filtros adsorbentes y soportes adecuados para los
de la capa coloreada o a la intensidad del color indicadores hidrazina y violeta cristal. El valor
sobre la escala graduada. Si el resultado obtenido es mínimo indicado es 100 ppm con una desviación
negativo, el tubo detector debe ser verificado con un estándar relativa máxima de ± 15 %.
gas de calibrado que contenga la sustancia a detec- Tubo detector de Monóxido de Carbono - Con-
tar. tiene filtros adsorbentes y soportes adecuados para
La bomba dosificadora 6 puede reemplazarse los indicadores pentóxido de iodo, dióxido de sele-
eventualmente por un caudalímetro apropiado. nio y ácido sulfúrico fumante. El valor mínimo
No utilizar el tubo detector para más de una de- indicado es 2,5 ppm con una desviación estándar
terminación. relativa máxima de ± 15 %.
7LSRVGHWXERV Tubo detector para Monóxido y Dióxido de
Nitrógeno - Contiene filtros adsorbentes y soportes
Tubo detector de Aceite - Contiene filtros ad- adecuados para una capa oxidante de una sal de
sorbentes y soportes adecuados para el indicador Cr (VI) y el indicador difenilbencidina. El valor
ácido sulfúrico. El valor mínimo indicado es mínimo indicado es 0,5 ppm con una desviación
0,1 mg/m3 con una desviación estándar relativa estándar relativa máxima de ± 15 %.
máxima de ± 30 %. Tubo detector de Sulfuro de Hidrógeno - Con-
[NOTA: debido a la gran diversidad de aceites tiene filtros adsorbentes y soportes adecuados para
para compresores, es necesario verificar la reactivi- un indicador apropiado de sal de plomo. El valor
dad de los tubos detectores de aceites frente al acei- mínimo indicado es 0,25 ppm con una desviación
te usado. La información sobre la reactividad de estándar relativa máxima de ± 10 %.
diversos aceites se da en el folleto suministrado con Tubo detector de Vapor de Agua - Contiene fil-
el tubo.] tros adsorbentes y soportes adecuados para el indi-
Tubo detector de Amoníaco - Contiene filtros cador perclorato de magnesio. El valor mínimo
adsorbentes y soportes adecuados para el indicador indicado es 0,05 mg de vapor de agua por litro con
azul de bromofenol. El valor mínimo indicado es una desviación estándar relativa máxima de ± 20 %.
0e72'26,1081248Ë0,&26
Los métodos inmunoquímicos se basan en la MÉTODOS EN LOS QUE SE EMPLEA UN
unión específica, reversible y no covalente entre ANTÍGENO O UN ANTICUERPO NO
antígenos y anticuerpos. Estos métodos se emplean MARCADO
para detectar o cuantificar tanto antígenos como
0pWRGRVGHLQPXQRSUHFLSLWDFLyQ
anticuerpos. La formación de un complejo antíge-
Los métodos de inmunoprecipitación incluyen
no-anticuerpo puede ser detectado y la cantidad del
las reacciones de floculación y precipitación.
complejo formado puede ser medida por varias
Cuando se mezcla una solución de antígeno con su
técnicas. Este método general se aplica a métodos
anticuerpo correspondiente, en las condiciones
inmunoquímicos que emplean, según el caso, reac-
apropiadas, los reactivos forman agregados flocu-
tivos marcados o no marcados.
lantes o precipitantes. La relación entre la cantidad
de los reactivos que produce el menor tiempo de
Los resultados de los métodos inmunoquímicos
floculación o la precipitación más acentuada se
dependen de las condiciones experimentales y de la
denomina la relación óptima, generalmente se ob-
naturaleza y calidad de los reactivos empleados. Es
tiene en presencia de cantidades equivalentes de
esencial estandarizar los componentes de un inmu-
antígeno y anticuerpo. La inmunoprecipitación
noensayo y emplear, cuando se hallen disponibles,
puede detectarse por observación visual o determi-
las Preparaciones Internacionales de Referencia
narse mediante técnicas de dispersión de la luz
para Inmunoensayos.
(ensayos nefelométricos o turbidimétricos). Es
posible lograr un incremento de la sensibilidad
Los reactivos necesarios para numerosos méto-
mediante el empleo, como soporte, de partículas
dos inmunoquímicos se hallan disponibles como
(por ej. látex) recubiertas de antígeno o anticuerpo.
kits comerciales, es decir, un conjunto que incluye
En los métodos de floculación se emplean dilu-
los reactivos (especialmente el antígeno o el anti-
ciones sucesivas de uno de los reactivos, mientras
cuerpo) y los materiales destinados al ensayo in
que en los métodos de inmunodifusión (ID), se
vitro de una sustancia específica, así como las ins-
obtiene la dilución del reactivo por su difusión en
trucciones para su correcto empleo. Los kits deben
un gel, se establecen gradientes de concentración de
emplearse siguiendo las intrucciones del fabricante;
uno o de ambos reactivos, para crear zonas en el gel
es importante asegurarse que el kit es apropiado
en las que la relación entre los reactivos favorece la
para el análisis de la preparación muestra, sobre
precipitación. Los métodos de floculación se llevan
todo en lo que se refiere a la especificidad y sensibi-
a cabo en tubos de ensayo, mientras que los méto-
lidad. Las recomendaciones relativas a los kits para
dos de ID pueden realizarse empleando diferentes
inmunoensayos son establecidas por la Organiza-
soportes como tubos, placas, portaobjetos, cubetas o
ción Mundial de la Salud, Serie de Informes Técni-
cámaras.
cos 658 (1981).
La inmunoprecipitación se denomina simple
MÉTODOS EN LOS QUE SE EMPLEA UN cuando un solo antígeno se combina con su corres-
ANTÍGENO MARCADO O UN ANTICUERPO pondiente anticuerpo; se denomina compleja cuan-
MARCADO do involucra reactivos relacionados pero no seroló-
gicamente idénticos y múltiple cuando intervienen
Los métodos que emplean sustancias marcadas
varios reactivos no relacionados serológicamente.
pueden emplear marcadores apropiados como en-
zimas, fluoróforos, luminóforos y radioisótopos. En los métodos de difusión simple se establece
Cuando el marcador es un radioisótopo, el método un gradiente de concentración para uno solo de los
se denomina radioinmunoensayo o ensayo de unión reactivos que difunde desde una fuente externa al
de radioligando. Las recomendaciones para la gel que contiene el reactivo correspondiente a una
medida de la radiactividad que se hallan en 1110. concentración relativamente baja.
Preparaciones radiofarmacéuticas son aplicables a La inmunodifusión radial simple (IDRS) es una
los inmunoensayos que involucran radioisótopos. técnica simple de inmunodifusión cuantitativa.
Todo trabajo que emplee materiales radiactivos Cuando se establece el equilibrio entre los reactivos
debe realizarse de acuerdo con las normas regulato- externo e interno, el área de precipitación circular
rias que rigen en la materia y las reglas de buenas que se origina desde el punto de aplicación del
prácticas internacionalmente aceptadas para la pro- reactivo externo, es directamente proporcional a la
tección frente a los riesgos de radiación. concentración del antígeno aplicado e inversamente
proporcional a la concentración de anticuerpo en el La contrainmunoelectroforesis es un método
gel. cuantitativo rápido que permite establecer gradien-
En los métodos de doble difusión se establecen tes de concentración de antígeno externo y anti-
gradientes de concentración para ambos reactivos. cuerpo externo en un campo eléctrico según sus
El antígeno y el anticuerpo difunden desde lugares diferentes cargas. Las diluciones de un estándar de
separados en un gel inicialmente neutro desde el calibración y las diluciones de la preparación mues-
punto de vista inmunológico. tra se introducen en una fila de orificios en el gel y
en una fila de orificios opuesta a la primera se in-
Los métodos comparativos de difusión doble se troduce una cantidad conocida del reactivo corres-
emplean para comparar, cualitativamente, diversos pondiente. El título de la preparación muestra en-
antígenos frente a un anticuerpo apropiado o vice- sayada se puede considerar como la dilución más
versa. La comparación se basa en la presencia o elevada que da lugar a línea de precipitación.
ausencia de interacción entre las líneas de precipita-
ción. Se pueden distinguir las reacciones de identi- Existen diversas modificaciones de la inmunoe-
dad, de no identidad o de identidad parcial de antí- lectroforesis cruzada y de los métodos de elec-
genos/anticuerpos. troinmunoensayo.
1
siendo éstos adquiridos a través de proveedores
debidamente habilitados por la autoridad sanitaria.
El Farmacéutico debe además cooperar en la de-
tección y denuncia de medicamentos ilegítimos y de
medicamentos con problemas de calidad o efectivi-
dad.
Custodia, almacenamiento y conservación: el
Farmacéutico asegurará que las condiciones de
almacenamiento y conservación sean las adecuadas
en cada caso e instrumentará los mecanismos para
detectar las fechas de vencimiento previas a la dis-
pensación. Asimismo el Farmacéutico tendrá bajo
su custodia todos los productos acorde a las norma-
tivas vigentes.
Descarte, devolución, destrucción: el Farmacéu-
tico evitará la adquisición y dispensación de medi-
camentos y productos para la salud que presenten
modificaciones no indicadas expresamente en sus
rótulos y/ o prospectos. Se considera que la detec-
ción de cambios en el aspecto físico de los medica-
mentos o sus envases podría ser evidencia de una
posible inestabilidad o alteración en su composi-
ción, por lo que se debe observar:
x cambios en caracteres físicos como modi-
ficaciones de color u olor, coberturas deterioradas,
cápsulas rotas, aparición de precipitados, separación
de emulsiones, polvos que no se reconstituyen ade-
cuadamente, entre otros;
x modificaciones en el envase primario co-
mo pérdida del contenido del envase, deterioro de
su aspecto, adulteraciones de fecha de vencimiento,
lote, partida o rótulos.
x modificaciones en el envase secundario,
como toda evidencia que permita suponer una mala
conservación, fallas de impresión, adulteraciones de
fecha de vencimiento, lote o partida, ó rótulos.
Comprobadas estas irregularidades, el Farmac-
éutico deberá abstenerse de dispensar estos medi-
camentos y notificar a la autoridad sanitaria compe-
tente sobre las anormalidades observadas o sospe-
chadas.
Deberá cumplir con los retiros del mercado in-
dicados por la autoridad sanitaria pertinentes e
instrumentará los mecanismos necesarios para la
devolución de los medicamentos, materias primas y
productos sanitarios, así como la eliminación de los
residuos peligrosos, acorde a la legislación vigente.
Preparación de medicamentos magistrales y
oficinales: el Farmacéutico es responsable de la
preparación de medicamentos magistrales y oficina-
les, dando cumplimiento a las Normas de Buenas
Prácticas de Preparación.
2
1025. BUENAS PRÁCTICAS PARA LA MANIPULACIÓN
DE MEDICAMENTOS CITOSTÁTICOS ENDOVENOSOS
EN CENTROS ASISTENCIALES
CONSIDERACIONES GLOSARIO
GENERALES
Agentes quimioterápicos antineoplásicos: son
activos capaces de dañar células malignas afectando
Los medicamentos citostáticos actúan alterando también a las células normales del organismo por lo
la capacidad de división celular en forma no selec- que se los denomina agentes citotóxicos y dado que
tiva, afectando las células tumorales y también poseen la propiedad de inhibir el crecimiento de
interfiriendo en los circuitos bioquímicos de las tumores malignos, por analogía se los llama ci-
células normales, en especial en los tejidos con tostáticos.
mayor recambio celular, como por ejemplo, piel, Carcinogénico: es toda aquella sustancia que
medula ósea, epitelio del tracto gastrointestinal, pueda producir cáncer .
folículos pilosos y estructuras embrionarias. Citotóxico: es todo aquel agente que tenga capa-
La eficacia de la terapia oncológica con fárma- cidad de producir genotoxicidad, oncogenicidad y
cos plantea diversos inconvenientes tal como la mutagenicidad.
toxicidad elevada que se manifiesta incluso cuando Desinfección: este término suele usarse para de-
la aplicación terapéutica es correcta y puede condu- signar los resultados de la aplicación de agentes
cir a consecuencias graves si se verifican errores en químicos sobre objetos inanimados con el fin de
la dosis, o en el proceso de reconstitución y admi- eliminar los microorganismos incluyendo formas
nistración o contaminación por manipuladores. esporuladas.
La mayoría de los tratamientos farmacológicos Dispensación: es el acto farmacéutico asociado
consisten en una terapéutica combinada con efecto a la entrega y distribución de los medicamentos con
sinérgico de los distintos principios activos citostá- las consecuentes prestaciones específicas, como
ticos, con diferente toxicidad, dosis limitante y son: el análisis de la orden médica, información
menor posibilidad de resistencias. para su correcta utilización y preparación de las
Los medicamentos que se utilizan para el trata- dosis que se deben administrar.
miento del cáncer pueden ser indicados con fines En este acto, el farmacéutico informa y orienta
curativos, paliativos, o como coadyuvantes de otras al paciente, enfermera o médico, sobre el uso ade-
terapias. cuado de dicho medicamento. Son elementos im-
Los pacientes con tratamiento oncológico pue- portantes de esta orientación, entre otros, el énfasis
den recibir medicación citostática en tres modalida- en el cumplimiento del régimen de dosificación, la
des diferentes de internación: hospitalizado, en influencia de los alimentos, la interacción con otros
internación ambulatoria (Servicio Hospital de Día) medicamentos, el reconocimiento de reacciones
y en internación domiciliaria. Esto dependerá del adversas potenciales y las condiciones de conserva-
estado general del paciente, de las patologías con- ción del producto.
comitantes y del tipo de medicación a recibir, y Distribución: es el sistema implementado para
tratándose de internación domiciliaria, de las condi- la entrega intrahospitalaria de los medicamentos
ciones culturales y socioeconómicas. requeridos por las unidades de internación u otros
Las unidades de reconstitución de citostáticos servicios del hospital para su posterior administra-
de los servicios de Farmacia Hospitalaria y los ción al paciente.
centros prestadores de Servicios de Farmacia Hos- Dispositivos médicos (material descartable):
pitalaria, son las responsables de proveer las mez- instrumento, aparato, implemento, máquina, arte-
clas intravenosas de los medicamentos utilizados en facto, implante u otro artículo similar o relacionado,
el tratamiento de cáncer para los tres tipos de inter- incluidos los componentes, partes o accesorios de
nación, prevenir la contaminación del medio am- éstos.
biente durante la reconstitución y proteger al per- Dosificación / posología: describe la dosis de un
sonal de salud durante la manipulación de princi- medicamento, los intervalos entre las administra-
pios activos citostáticos. ciones y la duración del tratamiento. No debe con-
fundirse con el término dosis.
Dosificación, régimen de: se define como la correcta y duración del tratamiento. En el caso de
magnitud de las dosis administradas de un medica- pacientes ambulatorios, el acto de prescripción se
mento, el número de ellas y los intervalos de admi- traduce en la elaboración de una receta médica; en
nistración. los pacientes hospitalizados, la prescripción es
Dosis: cantidad total de medicamento que se consignada en la historia clínica.
administra de una sola vez o total de las cantidades Reconstitución: es la adición del disolvente so-
fraccionarias administradas durante un período bre un producto en polvo o liofilizado, para lograr
determinado. su disolución.
Dosis, intervalo de: tiempo que transcurre entre Relación riesgo/beneficio: esta relación se apli-
una y otra administración de medicamentos en un ca al uso de un medicamento, está basada en los
régimen de dosificación de dosis múltiples. datos de eficacia y seguridad, además del uso po-
Dosis Terapéutica: es la que produce el efecto tencial indebido, severidad y evolución de una
deseado en el paciente; dosis mínima es la menor enfermedad, etc. El concepto puede ser aplicado a
dosis que produce el efecto terapéutico y dosis un solo medicamento o en comparaciones entre dos
máxima es la mayor dosis que puede ser tolerada o más medicamentos usados en la misma condición.
sin aparición de efectos adversos o tóxicos. Los Vida útil: es el intervalo de tiempo durante el
límites de dosis terapéuticas están dadas por la dosis cual se espera que un medicamento almacenado
máxima y dosis mínima e indican el margen de correctamente satisfaga las especificaciones prees-
utilización de las drogas. tablecidas.
Dosis Tóxica: es la que produce efectos inde-
seables o peligrosos. PREPARACIÓN DE CITOSTÁTICOS
Establecimiento asistencial: son establecimien- ENDOVENOSOS
tos con internación ya sean públicos o privados.
Esterilización: proceso por el cual se eliminan o PERSONAL
se destruyen todas las formas viables de microorga-
Selección del personal
nismos, basado en una función de probabilidad.
Farmacia hospitalaria: es una especialidad far- El personal debe ser seleccionado y previamente
macéutica que se ocupa de la selección, prepara- entrenado en la técnica de preparación y manejo de
ción, adquisición, control, dispensación, informa- citostáticos.
ción de medicamentos y otras actividades orienta- No podrán ingresar al área personal con proce-
das a conseguir una utilización apropiada, segura y sos infecciosos ni personal dedicado a otras tareas
costo-efectiva de los medicamentos y productos de riesgo ocupacional, como por ejemplo, técnicos
sanitarios, en beneficio de los pacientes atendidos radiólogos.
en los establecimientos asistenciales. Las mujeres que amamantan o embarazadas no
Farmacovigilancia: identificación y valoración deben trabajar con relación a la manipulación de
de los efectos del uso, agudo y crónico, de los tra- estos fármacos.
tamientos farmacológicos en el conjunto de una Exámenes de salud para el personal
población o en subgrupos de pacientes expuestos a
tratamientos específicos. Se debe distinguir entre Uno de los aspectos relacionados con este tema,
monitorización y farmacovigilancia. es el riesgo a que está expuesto el personal sanitario
Forma farmacéutica: es la forma del producto que debe manipular citostáticos. Éste ha sido un
farmacéutico completo. (Por ejemplo. comprimido, motivo de preocupación creciente en los últimos
cápsula, supositorio, etc.). años que tiene su origen en la abundante evidencia
Filtro HEPA: filtro de alta eficiencia de partícu- científica internacional que indica que la exposición
las de aire compuesto por pliegues de filtros medios crónica y masiva con estos activos, puede causar
separados por lámina o papel corrugado o hoja de efectos mutagénicos, carcinogénicos y teratogéni-
aluminio en el que el flujo directo del aire es forza- cos. Estos efectos nombrados precedentemente sólo
do a través del filtro en un flujo paralelo uniforme. se producen en casos de exposiciones muy altas y
Los filtros HEPA retienen el 99,99 % de las partícu- no existe evidencia de que ocurran en el caso de
las mayores a 0,3 micrones de diámetro. niveles bajos exposición. Sin embargo, debe consti-
Mutagénico: agente químico o físico que induce tuir un llamado de atención sobre los posibles peli-
o incrementa mutaciones genéticas por cambios gros que enfrentan los profesionales relacionados a
causados en el ADN. la manipulación de citostáticos.
Prescripción: es el acto de expresar qué medi- Existen pocas dudas de que los trabajadores ex-
camento debe recibir el paciente, la dosificación puestos a agentes citotóxicos al preparar y adminis-
trar las dosis terapéuticas para ser utilizados en la sar irritación local en caso de citotóxicos irritan-
quimioterapia de pacientes con cáncer, pueden tes y ulceración con posterior necrosis de la zo-
absorber cantidades mensurables de los mismos. La na en el caso de activos vesicantes, como por
absorción se puede realizar por piel, mucosas o ejemplo, antraciclinas.
pulmones. Adicionalmente, es objeto de controver- Sistémicos
sia los daños que puede causar la absorción invo- Son los que se producen tras un largo
luntaria de pequeñas cantidades de estos agentes. período de tiempo por repetidas exposiciones a
bajas dosis. En este caso es más difícil demos-
Distintas variables determinan la posibilidad de trar la relación causa-efecto por las dificultades
intoxicación de los individuos con respecto a estos que plantea su estudio.
activos:
x Características de los Principios Activos El servicio de Higiene y Medicina Laboral de-
El riesgo potencial depende de las propiedades berá ser informado de todos los accidentes debidos
fisicoquímicas de los fármacos. No todos los ci- a manipulación de agentes citotóxicos.
tostáticos son igualmente agresivos. Según diferen- El riesgo demostrado de estos agentes de produ-
tes estudios realizados tienen mayor potencial car- cir los efectos previamente mencionados, unido al
cinogénico y teratogénico los agentes alquilantes y hecho de que estas sustancias pueden ser absorbidas
los derivados de la vinca, considerándose los menos como consecuencia de exposiciones profesionales,
agresivos los antimetabolitos. justifica la adopción de controles periódicos de
x Susceptibilidad del individuo salud sugiriéndose su realización por lo menos una
Las distintas generalidades relacionadas con es- vez al año.
tas variables son la edad, el sexo, el origen étnico, Deben existir registros de los resultados de los
etc. exámenes de salud a los que es sometido el personal
x Cofactores en el ámbito del sector.
Tales como hábitos alimentarios o hábitos de
vida, como el fumar, pueden alterar la susceptibili- INSTALACIONES
dad del individuo a los efectos de estos fármacos.
Es recomendable que el servicio de reconstitu-
x Número de exposiciones
ción y formulación de citostáticos esté compuesto
Tiene que ver con la magnitud de la expo-
por los siguientes sectores:
sición o la suma acumulada de las mismas.
x Vestuario general para el acceso exclusivo
x Vías de exposición y efectos del personal del servicio o personas autori-
zadas.
Vías de exposición
x Pasillo interno que se comunique con la
Ingestión
oficina técnica, depósitos, sector de prepa-
Se puede producir por el consumo de
ración de materiales y el vestuario especí-
alimentos o bebidas, o el uso de cigarrillos o
fico.
cosméticos contaminados. x Depósito de medicamentos.
Inhalatoria x Depósito de materiales.
Por las partículas aerosolizadas que se
x Sector de preparación de materiales.
forman durante el proceso de reconstitución y
x Vestuario específico que comunique el pa-
preparación de las dosis terapéuticas, ya sea al
sillo interno con el área de preparación de
retirar la aguja del vial, al romper una ampolla, soluciones.
etc. x Sector de preparación de soluciones, donde
Absorción dérmica
se efectuará la reconstitución y / o formula-
Por contacto con derrames por ruptura
ción de citostáticos.
de ampollas o contaminación de los equipos du-
x Sector de almacenamiento de soluciones
rante la manipulación, administración, limpieza
terminadas.
rutinaria o eliminación de los desechos.
Características edilicias de cada sector:
Efectos
Locales Vestuario general
Son los que se producen como conse- Deberá ser de acceso restricto, y se instaurará
cuencia de derrames o accidentes que ponen al un sistema de registro de control de ingreso.
citostático en contacto con la piel o las mucosas. En el mismo, el personal se quitará la ropa de
Según las características del activo pueden cau- calle y se colocará ropa diferenciada del resto de los
sectores para tener acceso a los sectores de depósito Sector de almacenamiento de soluciones termi-
de materiales, depósito de medicamentos, sector de nadas
preparación de materiales y sector de almacena- En este sector se reciben, almacenan y distribu-
miento de soluciones terminadas. yen las soluciones terminadas.
Debe poseer una superficie de apoyo de dimen-
Pasillo interno siones adecuadas para disponer en forma ordenada
Su función es comunicar los diferentes sectores dichas soluciones, ya rotuladas dentro del sector de
de acceso común y servir de ingreso a través de un preparación de soluciones, de modo de evitar con-
vestuario específico al área restringida (área de fusiones.
preparación de soluciones). Deberá estar equipado con una heladera de ser
necesario, una selladora térmica de plásticos para el
Depósito de materiales cierre hermético del envase protector de la mezcla
Deberá ser de acceso restricto. preparada o bolsas plásticas con sistemas de auto
Poseerá estanterías metálicas o armarios donde sellado.
almacenar los materiales que se utilizarán en las
tareas de reconstitución durante un período no ma- Sector de preparación de soluciones
yor a una semana. Vestuario específico: es recomendable que cons-
te de dos etapas, en la primera de las cuales el per-
Depósito de medicamentos sonal que ingrese al sector de preparación de mate-
Deberá cumplir con lo especificado para el de- riales se quitará la ropa de circulación, en la segun-
pósito de materiales. En caso de utilizarse medica- da etapa se colocará la ropa estéril incluyendo, cofia
mentos que requieran refrigeración deberá contar o escafandra, cubrebotas y se lavará las manos con
con una heladera de capacidad adecuada al volumen solución jabonosa desinfectante, colocándose un
de los medicamentos a almacenar. primer par de guantes quirúrgicos sin talco ubicados
Deberá controlarse y registrarse periódicamente por encima del puño y protección respiratoria si
la temperatura a fin de verificar que la misma con- fuese necesario. Luego pasará al área de prepara-
diga con la necesaria para los productos allí alma- ción donde se colocará el segundo par de guantes.
cenados. El personal, al salir del área de preparación, de-
berá disponer la vestimenta utilizada de forma de
Sector de preparación de materiales ser inactivada previo a la salida del sector de prepa-
Se utilizará para la desinfección externa de los ración para ser luego lavada, secada y esterilizada
medicamentos y envases a introducir al sector de por procedimientos específicos.
preparación. Es recomendable que este vestuario cuente con
Deberá contar con una pileta con provisión de un sistema de duchas para ser utilizadas por el per-
agua fría y caliente, y con sifón sanitario. sonal después de retirarse la ropa específica del área
Se comunicará con el pasillo interno o con el de preparación y antes de colocarse la de circula-
depósito y con el sector de preparación de solucio- ción general.
nes mediante pasa bandejas con doble puerta y Los materiales constructivos y los detalles de
sistema de enclavamiento que impida la apertura terminación deben ser similares a los ya descriptos
simultánea de las mismas. para los sectores de preparación de materiales.
Todas las superficies de trabajo serán lisas y li- Area de preparación: es el local donde se efec-
bres de discontinuidades. Deberán ser de materiales tuará la reconstitución y/o formulación de los ci-
resistentes a los productos de trabajo y a los desin- tostáticos.
fectantes de rutina e inactivantes de uso en caso de El mismo deberá poseer la amplitud necesaria
derrames. para asegurar el movimiento del personal y los
El piso y paredes estarán construidos con mate- materiales, y facilitar las tareas de limpieza y des-
riales que presenten superficies lisas y libres de contaminación de todas las superficies.
discontinuidades, y recubiertos por materiales que Las características referentes a superficies de
resistan el tránsito y los agentes desinfectantes. trabajo, piso, paredes y encuentros cóncavos entre
Los encuentros cóncavos entre piso, paredes y piso, paredes y cielorraso deberán ser las mismas
cielorraso deberán ser redondeados con un radio de que las descriptas para Sector de preparación de
curvatura no inferior a los 5 cm para facilitar su materiales.
limpieza. El sistema de ventilación asegurará una tempe-
El sistema de ventilación asegurará una tempe- ratura ambiente de 20 ± 2°C, y el local cumplirá
ratura de 20 ± 2°C.
con un nivel de limpieza clase D o mejor (clase de realizar modificaciones en el área, reparaciones o
10.000). servicios técnicos de mantenimiento en cabinas de
La inyección se realizará mediante filtros HEPA flujo laminar o cualquier otro cambio significativo.
terminales, que serán verificados en forma periódi- Se establecerán niveles de alerta y acción, con
ca por personal especializado. exhaustiva revisión para determinar causales, y
El aire podrá recircularse sólo si no se generan medidas correctivas, aplicadas de manera rigurosa
gases o vapores tóxicos, inflamables o explosivos para volver a los niveles preestablecidos.
dentro del sector. No se recirculará el aire a otros Controles al personal
sectores.
x Determinación de las destrezas del personal
Si el aire o parte de él debe expulsarse al exte-
Método: para este fin se prepararán equipos de
rior, se hará mediante filtros HEPA colocados en
entrenamiento que deberán contar con ampollas
las bocas de extracción del local (en forma previa al
conteniendo una solución fluorescente incolora a la
motoventilador de extracción) y con un sistema de
luz visible. Se procederá a realizar una simulación
cambio que evite la exposición del operador a los
de trasvasamiento de contenidos y operaciones de
productos allí retenidos.
llenado aséptico observando, luego de finalizada la
Este local poseerá una presión diferencial nega-
tarea, la superficie de la cabina o lugar de simula-
tiva de 15 a 25 Pa respecto del vestuario.
ción con luz ultravioleta. En caso de no cumplirse el
El sistema de iluminación deberá ser de tipo es-
estándar de calidad interno se procederá a un nuevo
tanco y quedar a ras del cielorraso.
entrenamiento del personal. Se deberá establecer un
Todas las acometidas de servicios deberán ser
monitoreo cada seis meses registrándose los datos
selladas en su punto de ingreso al sector, a fin de
obtenidos.
evitar la entrada de contaminantes.
Los residuos peligrosos se deben descartar en
envases plásticos de cierre hermético y luego en EQUIPAMIENTO
bolsas rojas de 50 a 100 Pm para su posterior inci- El equipamiento necesario para la Reconstitu-
neración. ción de medicamentos citostáticos incluye equipos
Las operaciones que involucren citostáticos de- de aire unidireccional vertical o Cabinas de se-
berán ser realizadas dentro de gabinetes de seguri- guridad biológica de Clase II .
dad biológica clase II del tipo adecuado, siendo de Los gabinetes de seguridad biológica Clase II
extracción total (tipo B2) si durante las operaciones son equipos que se distinguen por poseer una aber-
se generan gases o vapores peligrosos. tura anterior, por la que el operador introduce sus
En caso contrario, será suficiente con un gabine- manos y antebrazos para manipular objetos en su
te clase II tipo A/B3. interior.
Los mismos deberán ser construidos de acuerdo En estos equipos se combinan dos necesidades o
a la normativa vigente, y deberán ser reverificados características: se protege al producto del operador
por personal especializado en forma periódica. y del ambiente, y se protege al operador y al am-
Controles ambientales biente del producto.
x Controles de partículas Si bien todos los gabinetes de seguridad biológi-
Se deberá efectuar un control de la cantidad de ca Clase II poseen un flujo laminar vertical, hay que
partículas inertes y tamaño de las mismas por medio considerar que existen equipos de flujo laminar
de instrumental electrónico. Dicho control debe vertical para protección del producto que no prote-
efectuarse, al menos, una vez al año y toda vez que gen ni al operador ni al ambiente.
dentro del área se produzcan modificaciones signi- Los gabinetes de seguridad biológica Clase II ti-
ficativas. po B3 poseen un filtro HEPA de inyección ubicado
en la cara superior de la zona de trabajo, que envía
x Controles microbiológicos aire en flujo unidireccional sobre la superficie de
Los controles ambientales se realizarán por cap- trabajo. La velocidad de aire de esta cortina no debe
tación espontánea mediante placas de Petri o capta- ser, en ningún punto, inferior a los 0,50 m/s. El aire
ción forzada para determinar la biocarga del área. aspirado se distribuye un 70 % hacia el filtro HEPA
Los controles de superficies planas se harán me- de inyección recirculando internamente, mientras
diante placas de impresión y los de superficies que el 30 %, que es el mismo caudal aspirado desde
irregulares (manijas de puertas y aberturas) median- el exterior, es expulsado al exterior del ambiente a
te hisopado de las mismas. través de un segundo filtro HEPA de extracción.
Estos controles deberán ser efectuados como
mínimo cada seis meses o inmediatamente después
SANEAMIENTO otro contenedor de material apropiado (que no libe-
La limpieza del área y equipos debe ser realiza- re partículas).
da por personal calificado perteneciente a la unidad, Se deberá llevar un informe escrito de las pres-
con una frecuencia diaria, previo al inicio de las cripciones médicas que se reciban y deberán ser
actividades y al finalizar la jornada de trabajo o interpretadas por el profesional farmacéutico del
cuando se requiera de acuerdo a las manipulaciones servicio.
realizadas. El farmacéutico debe validar la prescripción,
Dada la índole de trabajo realizado en la zona de cuando se observe alguna diferencia en la dosis,
cabinas de flujo laminar de la Unidad de Reconsti- inestabilidad por el tipo de solvente indicado o falta
tución de Citostáticos y el riesgo que puede impli- de algún dato del paciente se comunicará con el
car para los pacientes la acumulación de partículas, médico tratante.
la limpieza de dicha zona se hará de acuerdo a Se confeccionará una Planilla de Registro por
Normas que se establezcan en el sector para dar paciente donde conste número de historia clínica,
cumplimiento a los indicadores de calidad preesta- nombre del médico, datos de filiación del paciente,
blecidos verificando que la misma sea efectiva. Se diagnóstico, ubicación dentro de la institución o el
deberá contar con los registros correspondientes. domicilio (si se trata de un paciente ambulatorio),
nombre genérico del medicamento a preparar, dosis,
vehículo, volumen total, vía de administración,
PROCEDIMIENTOS DE MANIPULACIÓN protocolo de indicación médica y día del ciclo.
Se entiende como manejo de citostáticos al con- A partir de la prescripción médica se confeccio-
junto de operaciones que incluyen desde la recep- nará una Orden de Preparación que deberá incluir,
ción del medicamento hasta la eliminación de los además de los datos mencionados anteriormente, las
residuos. La manipulación debe realizarse de modo dosis del medicamento en las unidades correspon-
de asegurar la protección al paciente, al ambiente y dientes (g, mg, UI, etc.), el solvente para la recons-
al personal de salud encargado de la preparación de titución (si se trata de un frasco ampolla con liofili-
estos fármacos. zado o polvo), el volumen a utilizar de esa reconsti-
tución y el volumen total en ml y tipo de solvente
Comprende las siguientes operaciones para hacer la dilución. También se deben registrar,
x Recepción y almacenamiento de medica- tanto en la Orden de Preparación, para información
mentos del farmacéutico, como en el rótulo, para comuni-
x Control farmacéutico de la indicación cación a enfermería, las alertas de incompatibilida-
médica des, estabilidad, condiciones de conservación, ritmo
x Generación de la orden de preparación, re- de infusión, fecha y horario de caducidad, y otras
constitución de citostáticos y preparación observaciones.
de la dosis terapéutica Se recomienda redactar un manual de procedi-
x Dispensación y distribución mientos donde se contemplen todas las operaciones
x Recomendaciones para la administración. que se realizan en el servicio.
Los viales deben ser venteados con una aguja
La recepción de medicamentos citostáticos se para eliminar presiones que pudieran provocar
realizará siguiendo el mismo procedimiento que proyecciones del activo o aerosoles hacia el opera-
para otras especialidades medicinales (en lo referen- dor. Para evitar sobrepresiones en la etapa de re-
te al aspecto, integridad del envase, caducidad, etc.) constitución de los viales con el objeto de reducir el
Para su almacenamiento se deberá reservar un riesgo de formación de aerosoles, se recomienda
sector especial separado para este tipo de fármacos utilizar agujas con filtro de venteo o la técnica de
y contar con un refrigerador , de ser necesario. Los presión negativa introduciendo dentro del vial un
envases deberán disponerse de forma tal que se volumen de aire idéntico al volumen del liquido a
prevenga su ruptura por causas accidentales. Se extraer. Colocar una gasa estéril alrededor de la
tendrán en cuenta las características de cada medi- aguja y sobre el tapón del vial cuando se retira la
camento: termolábiles, fotosensibles, etc. solución de citostático del mismo. Las proyecciones
de medicamentos citostáticos hacia las paredes o el
El material deberá ser almacenado en el depósi- filtro de la cabina de flujo laminar puede provocar
to correspondiente, limpio y cuando corresponda, su deterioro y riesgo de toxicidad. El volumen final
estéril. en la jeringa se mide antes de retirar la aguja del
Cuando el material sea recibido en cajas, las vial, con el fin de no descartar medicación al medio
mismas deberán ser eliminadas y reemplazadas por ambiente. Las jeringas y los recipientes que contie-
nen las soluciones deben ser rotuladas de inmediato. El profesional farmacéutico es responsable de la
Las jeringas y agujas usadas deben ser descartadas distribución y dispensación de los medicamentos
en un dispositivo dispuesto para ese fin no reutili- citostáticos preparados:
zable. Todos los elementos utilizados deben ser x Se deberán entregar corroborando nombre
desechados en bolsas rojas reservadas para tal fin. del paciente y número de cama o habitación
Se debe registrar inmediatamente las preparaciones y servicio, dispuestos dentro de un envase
efectuadas, indicando cantidad preparada, datos del herméticamente cerrado y rotulado.
paciente y técnico responsable en un libro habilita- x Se confeccionará un listado global diario de
do a tal fin. los pacientes que reciben tratamiento y de
los medicamentos citostáticos preparados.
ESTABILIDAD Estos listados servirán como control de dis-
pensación y serán firmados por la enferme-
Se recomienda consultar bibliografía específica ra o auxiliar que los reciba.
y confeccionar protocolos de estabilidad y compati- x Se recomienda que el producto terminado
bilidad de los medicamentos citostáticos. sea entregado con el dispositivo médico
adecuado.
CONTROL DE CALIDAD
Se deberá establecer un programa de control pe- ADMINISTRACIÓN
riódico referente a la identificación del principio La administración estará a cargo del personal de
activo y las dosis. enfermería calificado.
La reconstitución de fármacos citostáticos puede El farmacéutico especializado en oncología, tra-
ocasionar errores de medicación que impliquen bajará en forma conjunta con el equipo de salud
graves consecuencias para los pacientes debido a su para lograr la administración óptima del medica-
estrecho margen terapéutico. En el proceso global mento al paciente.
de tratamiento con quimioterapia existen distintos Se enumerarán a continuación algunas reco-
pasos en los cuales se puede producir un error po- mendaciones generales para la administración por
tencial. Por este motivo, es necesario establecer parte del personal de enfermería y sobre el manejo
estrategias para reducir la probabilidad de que esto de las excretas.
último ocurra. La preparación es uno de los puntos
más críticos de todo el proceso, y por tanto resulta
imprescindible la implementación de controles de Recomendaciones para la administración de
calidad para reducir la probabilidad de que se pro- citostáticos
duzca un error. Se han establecido diferentes siste- x Utilizar guantes estériles y descartarlos
mas para controlar la calidad de los preparados: después de cada uso.
control de volúmenes, control de viales utilizados, x Utilizar barbijo para protección de pacien-
control de pesada y controles de rótulo. No obstan- tes inmunocomprometidos.
te, no existe hasta el momento ningún método infa- x Usar camisolín de mangas largas con puños
lible para detectar errores de dosificación. elastizados, tener en cuenta que los guantes
x Inspección visual deben ir por debajo del puño del camisolín.
Se deberá inspeccionar cambio de coloración, x Controlar la administración, para detectar
presencia de partículas visibles, turbidez, formación posibles extravasaciones.
de gas, integridad del envase y del cierre. x La orina y heces de estos pacientes deben
manipularse con sumo cuidado y usando
guantes.
x Control de rótulo
En el proceso de preparación, además de esta-
blecer medidas para disminuir errores de dosifica- BIOSEGURIDAD
ción con el rotulado de los viales previo a su prepa-
Exposición accidental
ración, también es importante establecer un control
Después de una exposición sin contacto con la
de etiquetado previo a la dispensación por compa-
piel, se deben quitar los guantes y prendas contami-
ración del rótulo con la prescripción y la orden de
nadas, lavar las manos y colocar guantes nuevos. Si
preparación. el citostático tomara contacto directo con la piel del
manipulador se recomienda seguir las indicaciones
DISTRIBUCIÓN Y DISPENSACIÓN descriptas en la Tabla . Si el área afectada está
lacerada o irritada es conveniente consultar inme-
diatamente al médico. En el caso de producirse un x Protocolo de actuación en caso de derrames
corte con aguja o con vidrio hay que lavar la zona x Barbijo de baja porosidad
con abundante agua tibia y jabón, y consultar inme- x Anteojos protectores
diatamente al médico. x Doble par de guantes, de polivinilo o neo-
Derrames preno
Pueden producirse derrames por accidente, du- x Botas o cubre calzados
rante la preparación, administración o transporte de x Pala para recolectar restos de material y vi-
los medicamentos citotóxicos. Todo el personal drios
implicado en la limpieza de un derrame debe llevar x Doble bolsa descartable para restos de ci-
material protector (barbijo de baja porosidad, doble tostáticos
guante y camisolín). El material conteniendo el x Paños y gasas absorbentes
agente citotóxico, se considerará contaminado y por x Escobilla recolectora
tanto, se colocará en una bolsa, de polietileno color x Kit de neutralizantes químicos
rojo de no menos de 100 µm de espesor, para su x Sachet de agua
destrucción.
Desechos
El equipo para derrames estará convenientemen- Los desechos deben colocarse en recipientes de
te acondicionado e identificado en un lugar fácil- paredes rígidas para su posterior incineración.
mente accesible. Nunca deberán arrojarse medicamentos ni dese-
chos citostáticos a la red cloacal o desagües.
Composición:
[NOTA: en todos los casos de contacto con citostáticos se recomienda consultar rápidamente al servicio de Medi-
cina Laboral.]
Farmaco Acción en la piel Norma de actuación en caso de contacto con la Piel
Sumergir 10´ en buffer fosfato , luego lavar con agua y
Actinomicina - D Vesicante
jabón
Amsacrina Vesicante Lavar con agua y jabón
Bleomicina Tóxico local , Alegógeno Lavar enérgicamente con agua y jabón
Carboplatino No Irritante Lavar con agua
Lavar con agua . Si aparece irritación aplicar solución de
Carmustina Vesicante
CO3HNa
Ciclofosfamida Irritante Lavar con agua
Cisplatino Potencial alergénico Lavar con abundante agua
Citarabina Irritante Lavar con abundante agua y jabón
Dacarbazina Irritante Lavar con agua y jabón
Daunorubicina Irritante - Vesicante Lavar rápidamente con agua y jabón
Doxorubicina Irritante - Vesicante Lavado abundante con agua y jabón
Epirubicina Irritante - Vesicante Lavado abundante con agua y jabón
Etopósido Irritante Lavar con abundante agua
Fluorouracilo Inflamación en la piel Lavar con agua
Idarubicina Irritante - Vesicante Lavado abundante con agua y jabón
Ifosfamida Irritante Lavar con agua
Irinotecan No Irritante Lavar con agua
L - Asparaginasa No Irritante Lavar con agua
Mecloretamina Vesicante Lavar rápidamente con agua y jabón
Melfalán Vesicante Lavar rápidamente con agua y jabón
Metotrexato No Vesicante Lavado con abundante agua
Lavar con CO3HNa 1M , luego con abundante agua y
Mitomicina Vesicante
jabón
Mitoxantrona Irritante Lavar con agua
Oxaliplatino No Irritante Lavar con agua
Paclitaxel Irritante Lavar con abundante agua
Tenipósido Irritante Lavar con abundante agua
Thiotepa No Irritante Lavar con agua
Vinblastina Irritante - Vesicante Lavar con abundante agua
Vincristina Irritante - Vesicante Lavar con abundante agua
Vindesina Irritante - Vesicante Lavar con abundante agua
1027. BUENAS PRÁCTICAS DE PREPARACIÓN DE
MEDICAMENTOS MAGISTRALES
ALCANCE Y DEFINICIONES parte de éste de las Buenas Prácticas de Preparación
de Medicamentos Magistrales.
Buenas Prácticas de Preparación de
medicamentos magistrales: es el conjunto de CAPÍTULO 2º
normas y procedimientos que contribuyen a
LOS PREPARADOS MAGISTRALES
asegurar la calidad de los medicamentos Para la preparación de cada medicamento
magistrales.
magistral es necesario contar con la receta
Medicamento magistral: es todo medicamento correspondiente, la cual deberá estar completa en
prescripto en una receta magistral para un paciente todas sus partes y contener toda la información
individualizado, posteriormente preparado, necesaria para llevar a cabo la preparación y rotular
envasado y rotulado por un Farmacéutico en el adecuadamente la misma, correspondiendo al
laboratorio de su Farmacia y dispensado en la Director Técnico completar la fórmula con los
misma. excipientes adecuados, debiendo respetar las dosis
Receta magistral: la receta magistral debe habituales y máximas recomendadas para los
indicar claramente la composición cuali-cuantitativa principios activos.
de los principios activos, utilizando los nombres La preparación del medicamento magistral debe
establecidos en la Farmacopea Argentina o la registrarse en el libro recetario.
Denominación Común Internacional (DCI) de la Por la propia naturaleza de estos medicamentos
OMS. Sólo se aceptan sinonimias contempladas en y el conocimiento específico que dispone el
la Farmacopea Argentina. Debe respetar las dosis Farmacéutico que lo prepara, es de su competencia
habituales y máximas, indicadas en la Farmacopea proveer al paciente la información necesaria para su
o, en su ausencia en bibliografía internacional de correcta utilización y conservación.
referencia.
CAPÍTULO 3o
Debe indicar la vía e indicaciones de
administración, los datos completos del profesional LABORATORIOS
prescriptor, los datos del paciente y la fecha de 3-1 Consideraciones generales
emisión. La preparación y el control de los preparados
magistrales deben efectuarse en laboratorios que
forman parte de la estructura edilicia de la Farmacia
CAPÍTULO 1o y estar emplazados en salas totalmente
PERSONAL independientes del lugar de atención al público,
La preparación de medicamentos magistrales separados del depósito y aislados de otras
puede ser efectuada por el Farmacéutico Director dependencias de la Farmacia.
Técnico o por los Farmacéuticos Auxiliares. La Todas las áreas de la Farmacia destinadas a las
Farmacia debe estar debidamente habilitada a tal preparaciones magistrales deben contar con
efecto por la Autoridad Sanitaria jurisdiccional espacios adecuados para la disposición ordenada de
competente. los equipos y materiales, y deben poseer
El Director Técnico es el responsable de la condiciones de temperatura y humedad apropiadas.
calidad y seguridad de los preparados magistrales, 3-2 Instalaciones
siendo por ello responsable del origen, la calidad y Para la preparación de medicamentos
la pureza de los principios activos, excipientes, magistrales la Farmacia debe disponer de un
envases y otros materiales que utilice, del diseño laboratorio general, destinado a la preparación de
galénico, de la preparación de los productos y del formas farmacéuticas no estériles, al
aseguramiento de su calidad. fraccionamiento de materias primas y excipientes y
El Director Técnico debe organizar las tareas al aseguramiento de la calidad, pudiendo contar con
relacionadas con la preparación de medicamentos otros laboratorios especiales.
magistrales, debiendo precisar por escrito las 3-3 Características
funciones de los Farmacéuticos Auxiliares y del El laboratorio debe contar con buena
resto del personal, y supervisar su cumplimiento. iluminación, adecuada renovación de aire y mallas
El Director Técnico debe asegurar la aptitud de metálicas en todas las aberturas de ventilación e
todo el personal involucrado en la preparación de instrumentos para medir la temperatura y humedad
medicamentos magistrales y el cumplimiento por del ambiente de trabajo. Sus pisos, paredes y
techos deben ser lisos con bordes sanitarios y las La Farmacia debe poseer procedimientos
mesas de trabajo deben ser lisas, impermeables y operativos estandarizados para el uso de cada uno
resistentes a agentes químicos. de sus equipos, para la preparación de
Los laboratorios especiales deben cumplir con medicamentos magistrales de uso corriente y para
requisitos adicionales que los hagan aptos para la las actividades de limpieza, disposición de residuos,
actividad a desarrollar. higiene y seguridad.
3-4 Materiales y Equipos La Farmacia debe contar con registros
Deben ser acordes con el tipo de medicamentos individuales de entrenamiento y calificación del
a preparar, suficientes en cantidad y calidad y personal.
apropiadamente acondicionados e instalados. En los En la Farmacia se deben almacenar los registros
equipos que requieren calibración, ésta debe de mantenimiento y calificación de equipos, y los
realizarse con la periodicidad adecuada y su registros que permitan verificar el cumplimiento de
calibración debe verificarse y documentarse las actividades de limpieza, disposición de residuos,
regularmente. higiene y seguridad.
3-5 Higiene y Seguridad En la Farmacia se debe llevar todo libro oficial
La Farmacia debe contar con directrices escritas que asegure y avale el debido cumplimiento de las
sobre higiene y seguridad, las cuales deben ser regulaciones vigentes.
acordes con el tipo de medicamento a preparar y 4-3 Materias primas, envases y materiales de
exhibirse en lugar visible del laboratorio. El acondicionamiento
Director Técnico es responsable de generar, Todos los materiales que ingresan a la Farmacia
documentar, hacer cumplir y llevar un registro del para ser empleados en la preparación, envasado y
cumplimiento de dichas directrices. acondicionamiento de medicamentos deben contar
3-6 Limpieza con una ficha individual de registro que incluya la
La Farmacia debe contar con procedimientos de fecha de ingreso.
limpieza del área de preparación de medicamentos Toda materia prima y excipiente que ingresa a la
magistrales acordes con el tipo de preparaciones Farmacia debe contar con su correspondiente
que se realicen. El Director Técnico es el certificado de análisis del proveedor firmado por su
responsable de generar y documentar dichos Director Técnico; caso contrario, el Director
procedimientos y de asegurar y documentar Técnico de la Farmacia deberá realizar los controles
debidamente su cumplimiento. pertinentes.
3-7 Residuos La documentación correspondiente a todos los
La Farmacia deberá contar con mecanismos materiales utilizados en la preparación de los
para el manejo interno y la disposición de residuos medicamentos magistrales debe ser debidamente
considerados peligrosos. El Director Técnico es archivada.
responsable de generar e implementar los
CAPÍTULO 5º
procedimientos apropiados y necesarios para tal fin
y de asegurar y documentar debidamente su MATERIAS PRIMAS, ENVASES Y
cumplimiento. MATERIAL DE ACONDICIONAMIENTO
La calidad de las materias primas, envases y
CAPÍTULO 4º
materiales de acondicionamiento inciden en la
DOCUMENTACIÓN calidad del producto final, por lo que el
4-1 General Farmacéutico debe tener especial cuidado en todos
La documentación constituye una parte los aspectos del manejo de los mismos.
fundamental del sistema de aseguramiento de la 5-1 Materias primas
calidad. Son aceptables los registros Sólo pueden ser empleadas aquellas materias
computarizados y los producidos mediante primas, principios activos y excipientes, codificadas
microfilmación. en el Código ANMAT o descriptas en textos de
Toda la documentación referida a materias reconocida jerarquía.
primas y excipientes debe utilizar los nombres Todas las materias primas que ingresan a la
oficiales de la FA o la Denominación Común Farmacia deben ser puestas en cuarentena,
Internacional (DCI) para sustancias no codificadas. debidamente rotuladas y en una ubicación especial,
4-2 Manuales, procedimientos y registros hasta tanto se haya verificado su identidad con la
La Farmacia debe contar con un manual documentación que respalda su calidad. El Director
operativo general y manuales de uso, Técnico es responsable de la realización de todo
mantenimiento y calificación de sus equipos. esfuerzo razonable en procura de la identificación
de toda materia prima que ingresa a la Farmacia. El establecida en el presente Código o en la
período de cuarentena finaliza con la aceptación o bibliografía internacional de referencia.
rechazo de la materia prima.
Las materias primas rechazadas deben ser 6-2 Preparación del medicamento magistral
almacenadas separadamente, hasta su disposición Debe hacerse en una zona de trabajo limpia y
como residuo o devolución al proveedor. libre de cualquier producto, material o documento
Toda materia prima que haya superado la fecha ajeno a la preparación, debiendo estar asegurada
de reválida o reanálisis, (ver 1040. Estudios de previamente la provisión de todos los elementos y
Estabilidad) debe ser puesta en cuarentena hasta documentación necesarios como así la limpieza y el
tanto se determine analíticamente su aptitud y una adecuado funcionamiento de los equipos a utilizar.
nueva fecha de reanálisis; en caso de no ser apta 6-3 Vencimiento del medicamento magistral
debe almacenarse separadamente para su Los preparados magistrales se realizan para una
disposición como residuo. administración a plazo definido y corto, por lo que
La utilización, en casos debidamente deben poseer fechas de vencimiento asignadas
justificados, de una especialidad medicinal como acordes al período de tratamiento.
materia prima, para la preparación de un 6-4 Rotulado
medicamento magistral, quedará a criterio del Los medicamentos magistrales deben estar
Director Técnico. debidamente rotulados (ver Consideraciones
5-2 Rotulado Generales) para asegurar su correcta identificación,
Todo envase de materia prima o excipiente debe haciendo constar en el rótulo la composición cuali-
contener todos los datos que permitan su correcta cuantitativa de sus principios activos, la
identificación, debiendo consignarse de manera composición cualitativa de sus excipientes, su
obligatoria su nombre, proveedor, número de lote o forma farmacéutica y su vía de administración,
partida, fecha de reanálisis y número de registro. posología y condiciones de conservación, fecha de
5-3 Almacenamiento preparación y vencimiento, y su número de registro
Las materias primas deben ser almacenadas bajo en el libro recetario, como así datos del paciente,
condiciones apropiadas, que aseguren su estabilidad del médico que lo prescribió, la Farmacia donde se
durante su período de vida útil. (ver preparó y su Director Técnico.
Consideraciones Generales)
CAPÍTULO 7º
5-4 Envases
El medicamento magistral debe ser envasado en ASEGURAMIENTO DE CALIDAD
envase apto (ver Consideraciones Generales, 420. Se debe poner especial énfasis en asegurar la
Envases primarios de plástico y 430. Envases de calidad de todos los pasos de la preparación,
vidrio), de acuerdo a las propiedades físicas y documentando apropiadamente cada uno.
químicas del preparado farmacéutico, de modo de Para las diferentes formas farmacéuticas, se
evitar se alteren la calidad, la concentración o la exigen los siguientes ensayos:
pureza de la preparación. Se debe considerar la 7-1 Cápsulas y comprimidos
posible interacción de los productos activos con el Aspecto
envase. Control de peso
CAPÍTULO 6º Prueba de desintegración
7-2 Polvos
PREPARACIÓN Aspecto
6-1 Diseño de la fórmula Control de peso
La correcta preparación de una fórmula Reconstitución: en el caso que sea aplicable.
magistral comienza con el diseño de la misma, tras 7-3 Inyectables en ampollas y viales
la recepción de la receta magistral. Aspecto y examen de partículas por observación
La fórmula debe evaluarse para determinar la visual.
factibilidad de su preparación y debe emplearse un pH del inyectable.
diseño galénico que tenga en cuenta el Control de cierre de las ampollas.
comportamiento fisicoquímico de sus componentes, Control de contenido.
sus posibles incompatibilidades y las eventuales Control de esterilidad, para inyectables
interacciones con el envase. obtenidos por llenado aséptico.
Para el ajuste de la fórmula cuantitativa se debe Validación de procesos de esterilización para
tener en cuenta la expresión correcta de la dosis inyectables obtenidos por esterilización final.
Control de endotoxinas bacterianas. Se debe
realizar para aquellos preparados que por la
naturaleza de sus componentes, por el volumen de
administración, o por las particularidades del
tratamiento, así lo justifiquen.
7-4 Cremas, geles, ungüentos y pastas
Aspecto
pH
Control de contenido.
7-5 Supositorios y óvulos
Aspecto y homogeneidad por examen visual
Control de peso
Tiempo de fusión o Prueba de Disgregación
7-6 Soluciones, suspensiones y emulsiones
(orales y tópicas)
Aspecto
pH
Hermeticidad del cierre
Control de contenido
7-7 Observaciones
Los preparados no inyectables estériles deben
cumplir con el ensayo de esterilidad o la validación
del proceso de esterilización según corresponda.
Los colirios deben cumplir las condiciones de
inyectables con excepción de endotoxinas
bacterianas.
CAPÍTULO 8o
FUENTES DE INFORMACIÓN
La Farmacia debe disponer de la última edición
de la FA, recomendándose además otros códigos y
textos actualizados de reconocida jerarquía, que
provean una razonable cobertura de información
específica.
Deberá contemplar disponer de los medios
apropiados para acceder a bases de datos y centros
de información sobre medicamentos que provean
información farmacéutica y farmacoterapéutica
actualizada y pertinente que contribuyan a
garantizar la calidad y seguridad de los
medicamentos.
CAPÍTULO 9°
Las Farmacias que preparan medicamentos
magistrales, además de cumplir las Buenas
Prácticas de Preparación de medicamentos
magistrales establecidas en este Código, deberán
cumplimentar los requerimientos legales
establecidos por la Autoridad Sanitaria
jurisdiccional competente para este tipo de
actividades.
&5,$'(526'(32//26/,%5(6
'(3$72*(126(63(&,),&$'263$5$/$352'8&&,Ï1
<&21752/'(&$/,'$''(/$69$&81$6
Cuando se especifica en una monografía, los El personal cuya entrada esté autorizada no debe
pollos, embriones o cultivos de células utilizados tener ningún contacto con otras aves o con agentes
para la producción o control de calidad de vacunas que pudieran infectar al criadero. Se recomienda al
se deben obtener a partir de huevos producidos por personal al cuidado del criadero ducharse y
criaderos de pollos libres de patógenos cambiarse de ropa o vestir ropa de protección antes
especificados (LPE). de entrar en la instalación de cría de los pollos.
Los objetos que se introducen en el gallinero
35,1&,3,26*(1(5$/(6<0e72'26
deben estar esterilizados. El alimento debe
Un grupo de pollos LPE se define como aquel someterse a un tratamiento adecuado a fin de evitar
conjunto de aves de un mismo criadero y que por la introducción de microorganismos indeseables, y
tanto comparten el mismo ambiente y son atendidos el agua debe ser clorada. No se debe administrar
por las mismas personas, las cuales no tienen medicación que pueda interferir con la detección de
contacto con ningún otro grupo de pollos que no sea enfermedades en el criadero.
LPE. Debe llevarse un registro permanente del estado
Para los criaderos LPE establecidos sobre una de salud general del criadero, investigándose
base de rotación, la eclosión y la cría de todos los cualquier anormalidad que surja. Los factores
reemplazos se deben realizar siempre en el gallinero objeto de seguimiento incluyen la morbilidad, la
de ambiente controlado. mortalidad, el estado físico general, el consumo de
El criadero debe mantenerse en condiciones que alimento, la producción diaria de huevos y la
reduzcan al mínimo el riesgo de contaminación. No calidad, fertilidad y capacidad de eclosión de los
puede estar situado en la proximidad de criaderos mismos. Los huevos sucios deben descartarse;
de aves no-LPE, debiendo disponer de instalación puede desinfectarse la superficie de los huevos
de aislamiento provista de aire filtrado con presión limpios mientras están todavía calientes.
positiva. Se deben tomar las medidas oportunas El criadero se inicia con animales, para los que
para impedir el acceso de roedores, aves silvestres, se haya demostrado que están libres de agentes
insectos y personas no autorizadas. infecciosos de transmisión vertical.
&8,'$'263$/,$7,926
7DEODTipos y mecanismos del dolor
5HODFLyQGH5HVSXHVWDDQDOJpVLFDYV0HFDQLVPRGHOGRORU
1RFLFHSWLYR 1HXURSiWLFR
$O~PLQD DFWLYDGD - Emplear uno de grado D$PLODVD - Emplear uno de grado apropiado.
apropiado. $PLQRDQWLSLULQD - C11H13N3O - (PM: 203,3)
$OXPLQLR - Al - (PA: 26,98) - Emplear un - Polvo cristalino amarillo brillante. 500 mg se
reactivo analítico apropiado, que también cumpla disuelven completamente en 30 ml de agua,
con los requisitos del ensayo se indica a proporcionando una solución transparente.
continuación. Intervalo de fusión <260> - Entre 108 y 110 °C.
Arsénico - Transferir 750 mg a un generador $PLQREHQ]RDWR GH PHWLOR - C8H9NO2 -
(ver Arsénico en Ensayos parar Reactivos), (PM: 151,2) - Polvo casi blanco.
omitiendo la torunda de algodón. Agregar 10 ml de Valoración - Disolver aproximadamente 38 mg,
agua y 10 ml de solución de hidróxido de sodio exactamente pesados, en 50 ml de ácido acético
(3 en 10) y dejar que la reacción proceda durante glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
30 minutos: una mancha apenas perceptible se determinando el punto final potenciométricamente.
produce en el papel de bromuro mercúrico. Realizar una determinación con un blanco y hacer
$PDOJDPD GH FLQF - Agregar 54 g de cinc las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido
granular o en granallas a 100 ml de mercurio en un perclórico 0,1 N equivale a 15,12 mg de C8H9NO2.
vaso de precipitados. Calentar, con agitación, en Contiene no menos de 99,0 %.
una placa calefactora bajo una campana extractora Intervalo de fusión <260> - Entre 108 y 110 °C.
[Precaución - Los vapores de mercurio son $PLQREXWDQRO - Líquido oleoso, miscible con
sumamente tóxicos] hasta que el cinc se disuelva agua; soluble en alcohol.
totalmente o prácticamente todo. Dejar enfriar a Densidad relativa <160> - Aproximadamente
temperatura ambiente y, si fuera necesario, agregar 0,94, a 20 °C.
mercurio suficiente para impedir la solidificación de Índice de refracción <230> - Aproximadamente
la amalgama. Transferir la amalgama a una botella 1,453, a 20 °C.
con tapón de vidrio y agitar unas pocas veces con Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
ácido clorhídrico diluido (1 en 2), para remover el Entre 178 y 182 °C.
óxido de cinc formado.
$PLQRFORUREHQFHQRGLVXOIRQDPLGD -
$PDULOOR GH WLD]RO - C28H19N5Na2O6S4 - C6H8ClN3O4S2 - (PM: 285,7) - Polvo blanco,
(PM: 695,7) - Polvo pardo amarillento. Soluble en inodoro. Insoluble en agua y cloroformo; soluble en
agua y alcohol para proporcionar en cada caso una amoníaco (SR).
solución amarilla; soluble en álcali diluido para Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
proporcionar una solución roja pardusca. No más de 2 mg, determinado sobre 2 g (0,1 %).
Almacenar en envases inactínicos. Absorbancia - Una solución (1 en 200.000) en
Solubilidad - 200 mg mezclados con 50 ml de metanol presenta máximos de absorbancia a
agua no presentan más que una ligera turbidez. aproximadamente 223, 265 y 312 nm. Su
Residuo de ignición - Pesar exactamente absortividad (ver 470. Espectrofotometría
alrededor de 1,5 g, previamente secados a 105 °C ultravioleta y visible) a 265 nm es
durante 2 horas, y someter a ignición hasta aproximadamente 64,0.
carbonización completa. Enfriar, agregar 2 ml de
$PLQRFORUREHQ]RIHQRQD - (2-Amino-
ácido nítrico y 2 ml de ácido sulfúrico, someter a
5-clorobenzofenona) - C13H10ClNO - (PM: 231,7) –
ignición suavemente para liberar el exceso de ácido,
Polvo cristalino amarillo; fácilmente soluble en
luego de 600 a 800 °C hasta peso constante: el
agua, soluble en alcohol, prácticamente insoluble.
residuo de sulfato de sodio (Na2SO4) está entre 19,8
Intervalo de fusión <260> - Aproximadamente
y 21,5 % del peso de la muestra (el teórico es 20,4
97 °C.
%).
$PLQRHWLOGLIHQLOERULQDWR - C14H16BNO de sodio 0,1 N empleado, calcular el volumen, en
(PM: 225,09) Polvo cristalino blanco. Emplear ml, de bromo 0,1 N consumido por la muestra.
uno de grado apropiado. Cada mililitro de bromo 0,1 N equivale a 1,819 mg
$PLQRHWLOSLSHUD]LQD - C6H15N3 - de C6H7NO. Contiene no menos de 99,5 %.
Intervalo de fusión <260> - Entre 121 y 123 °C.
(PM: 129,2) - Líquido viscoso, incoloro.
Pérdida por secado <680> - Secar sobre
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
cloruro de calcio durante 4 horas: la pérdida de peso
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
equipado con un detector de ionización a la llama y es mínima.
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
Inapreciable, determinado sobre 2 g.
con goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
inyector y el detector a aproximadamente 280 y p$PLQRIHQRO - C6H7NO - (PM: 109,1) -
300 °C, respectivamente. La temperatura de la Polvo fino, amarillento, cristalino. Poco soluble en
columna se mantiene a 180 °C, se programa un agua y alcohol.
ascenso de 10 °C por minuto y se mantiene a esa Intervalo de fusión <260> - Entre 187 y 189 °C.
temperatura durante 10 minutos. Se emplea helio
1$PLQRKH[DPHWLOHQLPLQD -
como gas transportador. El área del pico principal
(N-Aminohomopiperidina;
no es menor de 97 % del área total.
1-Aminohomopiperidina) - C6H14N2 - (PM: 114,2)
Índice de refracción - Entre 1,4978 y 1,5010, a - Líquido incoloro.
20 °C. Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
$PLQRIHQRO - C6H7NO - (PM: 129,2) - un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
Polvo color casi blanco. equipado con un detector de ionización a la llama y
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) con goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
equipado con un detector de ionización a la llama y inyector y el detector a aproximadamente 180 y
una columna capilar de 0,25 mm × 30 m recubierta 300 ºC, respectivamente. La temperatura de la
con una capa de 1 µm de goma de columna se mantiene a 80 °C y se programa un
dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el ascenso de 10 °C por minuto hasta 230 °C,
detector a aproximadamente 280 y 300 °C, manteniéndose a esa temperatura durante 5
respectivamente. La temperatura de la columna se minutos. Se emplea helio como gas transportador.
mantiene a 130 °C y se programa un ascenso de El área del pico principal no es menor de 95 % del
10 °C por minuto hasta alcanzar los 280 °C. Se área total.
emplea helio como gas transportador. El área del Índice de refracción - Entre 1,4840 y 1,4860, a
pico de C6H7NO no es menor de 97 % del área 20 °C.
total. $PLQRQLWUREHQ]RIHQRQD -
Intervalo de fusión <260> - Entre 174 y 177 °C.
(2-Amino-5-nitrobenzofenona) - C13H10N2O3 -
m$PLQRIHQRO - C6H7NO - (PM: 109,1) - Polvo cristalino amarillo; soluble en
Escamas de color crema a amarillo pálido. tetrahidrofurano, poco soluble en metanol,
Moderadamente soluble en agua fría; fácilmente prácticamente insoluble en agua.
soluble en agua caliente, alcohol y éter. Punto de fusión - Aprox. 160 °C.
Valoración - Disolver aproximadamente 1,5 g, Absorción ultravioleta - Determinar la
exactamente pesados, en 400 ml de agua en un absorbancia de una solución al 1 % en metanol en
matraz aforado de 500 ml, completar a volumen con una celda de 1 cm a 233 nm con un
agua y mezclar. Transferir 25,0 ml de esta solución espectrofotómetro. El coeficiente de absorción
a un matraz para iodo, agregar 50,0 ml de bromo debe estar comprendido entre 690 y 720.
0,1 N (SV), diluir con 50 ml de agua, agregar 5 ml
$PLQRSLUD]RORQD (4-Amino-1-fenil-2,3-
de ácido clorhídrico e insertar el tapón en el matraz
dimetil-3-pirazolin-5-ona) - C11H13N3O -
de inmediato. Agitar durante 1 minuto, dejar
(PM: 203,2) - Polvo o agujas amarillo pálido.
reposar durante 2 minutos y agregar 5 ml de ioduro Fácilmente soluble en alcohol; moderadamente
de potasio (SR) a través del tapón aflojado. Agitar soluble en agua; poco soluble en éter.
vigorosamente, dejar reposar durante 5 minutos,
Punto de fusión - Aprox. 108 °C.
remover el tapón y lavar éste y el cuello del matraz
con 20 ml de agua, agregando el lavado al matraz. $PRQtDFR - NH3 - (PM:17,03) - Contiene no
Titular el iodo liberado con tiosulfato de sodio menos de 17 % p/v y no más de 18 % p/v de
0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) cerca amoníaco gas NH3.
del punto final. A partir del volumen de tiosulfato
$PRQtDFRFRQFHQWUDGR - NH3 - (PM: 17,03) - ácido clorhídrico 1 N empleando como indicador
La solución concentrada de amoníaco contiene no 0,5 ml de fenolftaleína (SR). Calcular el volumen,
menos de 25,0 % p/p y no más de 30,0 % p/p de en ml, de hidróxido de sodio 1 N empleados para 1
amoníaco. g (n2). Calcular el contenido porcentual en
(CH3CO)2O empleando la expresión siguiente:
$PRQtDFRGLOXLGR - Disolver 41 g de amoníaco
concentrado y diluir a 100 ml con agua. 10,2 (n1 - n2)
$PRQLR IRUPLDWR GH - Ver formiato de $QKtGULGR IWiOLFR - C8H4O3 - (PM: 148,1) -
amonio. Emplear un reactivo analítico apropiado.
$QHWRO - (1-Metoxi-4-(1-propenil)benceno) - $QKtGULGRSURSLyQLFR - C6H10O3 - (PM: 130,1)
C10H12O - (PM: 148,2) - Masa blanca cristalina - Líquido incoloro, de olor acre. Se descompone en
hasta los 20-21 ºC. Líquida por encima de los agua. Soluble en metanol, alcohol, éter y
23ººC. Fácilmente soluble en alcohol, soluble en cloroformo.
acetato de etilo y éter de petróleo, prácticamente Valoración - Pesar exactamente 350 mg en un
insoluble en agua. erlenmeyer previamente pesado, con tapón de
Índice de refracción <230> - Aprox. 1,56. vidrio que contenga 50 ml de dimetilformamida
Punto de ebullición (Ensayo para reactivos) - previamente neutralizada a punto final de azul de
Aprox. 230 ºC. timol con metóxido de sodio 0,1 N en metanol
Para uso en cromatografía de gases, debe (SV). Titular con metóxido de sodio 0,1 N en
cumplir con el siguiente ensayo. metanol (SV) al punto final de azul de timol.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en Realizar una determinación con un blanco y hacer
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) las correcciones necesarias. Cada mililitro de
equipado con un detector de ionización a la llama y metóxido de sodio 0,1 N equivale a 13,014 mg de
una columna capilar de 30 a 60 m × 0,3 mm C6H10O3. Contiene no menos de 97,0%.
recubierta con una capa de fase estacionaria Índice de refracción - Entre 1,4035 y 1,4045, a
constituida por polietilenglicol 20.000. Mantener el 20 °C.
inyector a una temperatura comprendida entre 180 y $QKtGULGR WULIOXRURDFpWLFR - (F3CCO)2O -
200 ºC, y el detector entre 220 y 250 °C. La
(PM: 210,0) - Líquido incoloro. Hierve entre 40 y
temperatura de la columna se debe mantener a
42 °C. Sumamente volátil. Evitar la exposición al
60 °C durante 4 minutos, se programa un ascenso aire o a la humedad.
de 2 °C por minuto hasta 210 °C, y mantener a esa Valoración - Transferir aproximadamente
temperatura durante 15 minutos. Se emplea helio 800 mg, exactamente pesados, a un erlenmeyer con
como gas transportador. La respuesta del pico tapón de vidrio que contiene 50 ml de metanol.
principal correspondiente a trans-anetol con un
Agregar 500 mg de fenolftaleína y titular con
tiempo de retención aproximadamente 41 minutos metóxido de sodio 0,1 N (SV) hasta punto final
no debe ser menor de 99 % de la suma de las rosado. Calcular A por la fórmula siguiente:
respuestas de todos los picos.
V/P
$QKtGULGRDFpWLFR - (CH3CO)2O - (PM: 102,1)
- Contiene no menos de 97,0 % p/p de (CH3CO)2O. en la cual V es el volumen, en ml, de metóxido de
Líquido incoloro y transparente. sodio 0,1 N y P es el peso, en mg, de muestra. A un
Intervalo de ebullición - Entre 136 a 142 °C. segundo erlenmeyer con tapón de vidrio que
Valoración - En un erlenmeyer con boca contiene 50 ml de una mezcla de dimetilformamida
esmerilada, disolver 2,00 g de anhídrido acético en y agua (1:1) transferir 400 mg de muestra,
50 ml de hidróxido de sodio 1 M y calentar a reflujo exactamente pesados, agregar 500 mg de
durante 1 hora. Valorar con ácido clorhídrico 1 M, fenolftaleína y titular con hidróxido de sodio 0,1 N
empleando como indicador 0,5 ml de fenolftaleína (SV) hasta punto final rosado. Calcular B por la
(SR). Calcular el volumen, en ml, de hidróxido de fórmula siguiente:
sodio 1 M empleados para 1 g (n1). V1/P1
En un erlenmeyer con boca esmerilada, disolver
2,00 g de anhídrido acético en 20 ml de en la cual V1 es el volumen, en ml, de hidróxido de
ciclohexano; dejar enfriar en un baño de agua-hielo sodio 0,1 N y P1 es el peso de muestra, en mg.
y agregar una mezcla enfriada de 10 ml de anilina y Calcular el porcentaje de (F3CCO)2O por la fórmula
20 ml de ciclohexano. Calentar a reflujo durante 1 siguiente:
hora, agregar 50 ml de una solución de hidróxido de 2100,3(B A).
sodio 1 N y agitar vigorosamente. Valorar con
Contiene no menos de 97 %. Si 2 A es mayor Antitrombina-III por mg de proteína en presencia
que B, calcular el porcentaje de F3CCOOH por la de heparina.
fórmula siguiente: Ausencia de heparina - A una solución que
contenga 1 UI de Antitrombina III por ml, agregar
1140,3(2A - B).
1 µl de solución de azul de toluidina: no se detecta
$QLOLQD - C6H5NH2 - (PM: 93,1) - Emplear un heparina. [NOTA: en presencia de heparina el
reactivo analítico apropiado. color cambia de azul a púrpura.]
$QLVDOGHKtGR - (4-Metoxibenzaldehído) - $QWUDFHQR - C14H10 - (PM: 178,2) - Cristales
C8H8O2 - (PM: 136,1) - Líquido oleoso, muy poco o laminillas blancas o casi blancas. Se oscurece a la
soluble en agua, miscible con alcohol y éter. luz solar. Insoluble en agua; moderadamente
Punto de ebullición (Ensayo para reactivos) - soluble en alcohol, benceno y cloroformo.
Aprox. 248 °C. Intervalo de fusión <260> - Entre 215 y 218 °C.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
$QWURQD - C14H10O - (PM: 194,2) - Emplear
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatorafía)
un reactivo analítico apropiado.
equipado con un detector de ionización a la llama y
una columna de vidrio de 30 a 60 m u 0,3 mm de $SLJHQLQD - (4’,5,7-Trihidroxiflavona) -
diámetro interno recubierta con polietilenglicol C15H10O5 - (PM: 270,2) - Polvo ligeramente
20.000. Mantener la temperatura de la columna a amarillento; moderadamente soluble en alcohol,
60 °C durante 4 minutos y programar un ascenso de prácticamente insoluble en agua.
2 °C por minuto hasta 210 °C y mantener a esta Punto de fusión <260> - Aprox. 310 °C, con
temperatura durante 15 minutos. Mantener la descomposición.
temperatura del inyector entre 180 y 200 °C, y la Cromatografía - Proceder según se indica en
del detector entre 220 y 250 °C. Emplear helio Flores de Manzanilla, aplicando 10 µl de una
como gas transportador. La respuesta del pico solución de 0,25 mg de apigenina por ml de
principal no debe ser menor de 99,0 % de la suma metanol. El cromatograma debe presentar en su
de las respuestas de todos los picos. tercio central una banda principal de fluorescencia
verde amarillenta.
$QLVRO - CH3OC6H5 - (PM: 108,1) - Líquido
incoloro. $SLJHQLQDJOXFyVLGR - (7-O-Glucósido de
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada apigenina) - C21H20O10 - (PM: 432,6) - Polvo
(aproximadamente 0,5 µl) en un cromatógrafo de ligeramente amarillento; moderadamente soluble en
gases (ver 100. Cromatografía) equipado con un alcohol, prácticamente insoluble en agua.
detector de ionización a la llama y una columna Intervalo de fusión <260> - Entre 198 y 201 °C.
capilar de 30 m recubierta con una fase estacionaria Cromatografía - Proceder según se indica en
constituida por 50 % de fenilsilicona y 50 % de Flores de Manzanilla, aplicando 10 µl de una
metilpolisiloxano. Mantener el inyector y el solución de 0,25 mg de apigenina-7-glucósido por
detector a 140 y 300 °C, respectivamente. La ml de metanol. El cromatograma debe presentar en
temperatura de la columna se mantiene en 70 °C y su tercio central una banda principal de
se programa un ascenso de 10 °C por minuto hasta fluorescencia amarillenta.
170 °C. Se emplea nitrógeno como gas $SUREDUELWDO - C10H14N2O3 - (PM: 210,2) -
transportador. El área del pico de anisol no es Polvo fino cristalino blanco. Poco soluble en agua
menor de 99 % del área total. fría; soluble en alcohol, cloroformo y éter.
Índice de refracción <230> - Aproximadamente Valoración - Disolver aproximadamente
1,5160, a 20 °C. 200 mg, previamente secados a 105 °C durante
$QWLWURPELQD,,,SDUDHOHQVD\RGHDQWLIDFWRU 2 horas y exactamente pesados, en 20 ml de
;a - La antitrombina-III es un inhibidor de proteasa dimetilformamida en un erlenmeyer de 100 ml.
de serina obtenida de plasma bovino, que inhibe el Agregar 4 gotas de solución azul de timol (1 en 200
Factor Xa de la enzima y otros factores de en metanol) y titular con metóxido de litio 0,1 N
coagulación sanguínea. Es una glicoproteína que empleando una bureta de 10 ml, un agitador
tiene un peso molecular de 58.000. Por magnético y una cubierta para el erlenmeyer para
electroforesis en gel (ver 300. Electroforesis) la proteger la solución del dióxido de carbono
proteína principal de interés constituye no menos de atmosférico. Realizar una determinación con un
90 % de las cantidad total de zonas proteicas. blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
Actividad específica - Una solución que mililitro de metóxido de litio 0,1 N equivale a 21,02
contiene 0,25 mg de equivalente proteico y 0,1 UI mg de C10H14N2O3. Contiene entre 98,5 y 101,0 %
de Heparina por ml contiene no menos de 4 UI de de C10H14N2O3.
Intervalo de fusión <260> - Entre 140 y 143 °C. $UHQDHVWiQGDUD P - Arena de sílice,
L$UDELQLWRO - (L-Arabitol; 1, 2, 3, 4, 5- compuesta casi completamente de granos
pentanopentol) - C4H12O5 - (PM: 152,2) - Cristales naturalmente redondeados prácticamente de cuarzo
blancos o polvo cristalino. Estable en el aire. puro. Con un tamaño de partícula tal que pasa por
Fácilmente soluble en agua proporcionando una un tamiz de 850 µm (N° 20) (pasando entre 85 y
solución transparente, incolora. Almacenar en sitio 100 %) y se retiene por un tamiz de 600 µm (N° 30)
fresco o a temperatura ambiente en un área seca. (pasando entre 0 y 5 %).
Intervalo de fusión <260> - Entre 102 y 104 °C. $UHQDODYDGD - Puede prepararse del siguiente
Agua <120> - Titulación volumétrica directa. modo. Digerir arena limpia a temperatura ambiente
No más de 0,5 %. con una mezcla de 1 parte de ácido clorhídrico y
Residuo de ignición <270> - No más de 0,1 %. 2 partes de agua (aproximadamente 13 % de HCl)
$UEXWLQD - (Arbutosia; durante varios días o a una temperatura elevada
durante varias horas. Recolectar la arena en un
4-Hidroxifenil-E-D-glucopiranósido) - C12H16O7 -
filtro y lavar con agua hasta que los lavados sean
(PM: 272,3) - Agujas finas blancas brillantes, muy
neutros y proporcionen sólo una leve reacción ante
solubles en agua caliente, fácilmente solubles en
el cloruro y finalmente secar. La arena lavada
agua, solubles en alcohol, prácticamente insolubles
cumple los siguientes ensayos.
en éter.
Sustancias solubles en ácido clorhídrico -
Rotación específica <170> - Aprox. 64º,
Digerir 10 g con una mezcla de 10 ml de ácido
determinado sobre una solución de 20 g por litro.
clorhídrico y 40 ml de agua en un baño de vapor
Punto de fusión <260> - Aprox. 200 ºC.
durante 4 horas, reemplazando esporádicamente el
Valoración -
agua perdida por evaporación. Filtrar y agregar a
Fase estacionaria - Emplear una placa para
25 ml del filtrado, 5 gotas de ácido sulfúrico,
cromatografía en capa delgada (ver 100.
evaporar y someter a ignición hasta peso constante:
Cromatografía), recubierta con gel de sílice para
el residuo no pesa más de 8 mg (0,16 %).
cromatografía con indicador de fluorescencia con
Cloruro (Ensayo para reactivos) - Agitar 1 g
0,25 mm de espesor.
con 20 ml de agua durante 5 minutos, filtrar y
Fase móvil - Acetato de etilo, agua y ácido
agregar al filtrado 1 ml de ácido nítrico y 1 ml de
fórmico anhidro (88:6:6).
nitrato de plata (SR): cualquier turbidez producida
Revelador 1 - Preparar una solución de 10 g
corresponde a no más de 0,03 mg de Cl (0,003 %).
dicloroquinonaclorimida por litro en metanol.
Revelador 2 - Preparar una solución de 20 g de $UJLQLQD- Emplear Arginina.
carbonato de sodio anhidro por litro. $UVHQLWR GH VRGLR - NaAsO2 - (PM: 129,9) -
Procedimiento - Aplicar sobre la placa una Polvo blanco, cristalino, inodoro. Soluble en agua;
solución de 2,5 mg de arbutina por ml de metanol. poco soluble en alcohol.
Desarrollar el cromatograma hasta que el frente de Valoración - Transferir aproximadamente 5,5 g,
solvente haya recorrido aproximadamente tres exactamente pesados, a un matraz aforado de
cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la 500 ml, disolver en agua, completar a volumen con
placa de la cámara, secar entre 105 y 110 ºC, agua y mezclar. Transferir 25 ml de esta solución a
pulverizar sobre la placa con Revelador 1. un envase apropiado, agregar 50 ml de agua y 5 g
Pulverizar sobre la placa con Revelador 2: el de fosfato dibásico de sodio, agitar por rotación
cromatograma debe presentar sólo una mancha hasta disolver y titular con iodo 0,1 N (SV),
principal. agregando 3 ml de almidón (SR) cerca del punto
Para uso en cromatografía de líquidos, debe final. Cada mililitro de iodo 0,1 N equivale a 3,746
cumplir con el siguiente ensayo. mg de As. Contiene entre 57,0 y 60,5 %
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en (equivalente a 98,8 a 104,9 % de NaAsO2).
un equipo para cromatografía de líquido (ver 100. Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no
Cromatografía) equipado con un detector presenta más de 0,10 mg de Cl (0,01 %).
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de Metales pesados - Disolver 200 mg en 8 ml de
25 cm × 4,0 mm recubierta con fase estacionaria ácido clorhídrico diluido (3 en 8) y evaporar en un
constituida por octadecilsilano desactivado para baño de vapor hasta sequedad. Disolver el residuo
bases de 5 µm. El caudal debe ser en 5 ml de ácido clorhídrico diluido (2 en 5) y
aproximadamente 1,2 ml por minuto con fase móvil nuevamente evaporar hasta sequedad. Disolver el
constituida por agua y metanol (90:10). El residuo en 10 ml de agua y agregar 2 ml de ácido
contenido de arbutina no debe ser menor de 95,0 %, acético diluido y 10 ml de sulfuro de hidrógeno
calculado por el procedimiento de normalización. (SR). Ningún color pardo que se produzca debe ser
más oscuro que el de un control que contenga L$VSDUDJLQD - (Ácido L-2-
0,01 mg de Pb (0,005%). Aminosuccinámico) - COOHCH(NH2)CH2CONH2
Hierro - Disolver 1 g en 20 ml de ácido . H2O - (PM: 150,1) - Cristales incoloros,
clorhídrico diluido (1 en 5) y agregar, gota a gota, inodoros. Moderadamente soluble en agua; soluble
un ligero exceso de bromo (SR). Calentar a en ácidos y álcalis; insoluble en alcohol y éter. Sus
ebullición la solución para eliminar el exceso de soluciones neutras o alcalinas son levorotatorias;
bromo, enfriar, diluir con agua a 40 ml y agregar sus soluciones ácidas son dextrorotatorias.
10 ml de solución de tiocianato de amonio (3 en Rotación específica <170> - Entre + 31° y +
10). Ningún color rojo que se produzca debe ser 33°, determinada en una solución en ácido
más oscuro que el de un control que contenga clorhídrico diluido que contiene el equivalente de 5
0,02 mg de Fe (0,02 %). g (calculado sobre la sustancia anhidra, secada a
Sulfuro - Disolver 1 g en 20 ml de agua y 105 °C durante 5 horas) en cada 100 ml.
agregar 5 gotas de acetato de plomo (SR): no se Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
produce ningún color pardo (aproximadamente No más de 0,1 %.
0,0005 %). Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método II. presenta más que 0,03 mg de Cl (0,003 %).
Disolver 5 g en 100 ml de agua, agregar naranja de Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método I. 1 g
metilo (SR), neutralizar con ácido clorhídrico 1 N, no presenta más que 0,05 mg de SO4 (0,005 %).
agregar 3 ml del ácido en exceso y filtrar: el filtrado Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No
proporciona no más de 3 mg de residuo (0,02 %). más de 0,002 %.
Determinación de nitrógeno <200> - Método II.
$VHUUtQ SXULILFDGR - Puede prepararse del
Contiene entre 18,4 y 18,8 % de N.
siguiente modo. Extraer aserrín en un percolador,
primero con solución de hidróxido de sodio $]LGDGH VRGLR - NaN3 - (PM: 65,0) - Polvo
(1 en 100) y luego con ácido clorhídrico diluido cristalino blanco o cristales fácilmente solubles en
(1 en 100) hasta que el percolado ácido no cumpla agua, poco solubles en alcohol, prácticamente
el ensayo para alcaloides con iodomercuriato de insoluble en éter.
potasio (SR) o con iodo (SR). Luego lavar con agua $]RPHWLQR + -
hasta eliminar el ácido y las sales solubles y secar. (Hidrógeno-4-hidroxi-5-(2-hidroxibencilidenamino)
El aserrín purificado cumple el siguiente ensayo. -2,7-naftalendisulfonato de sodio) - (PM: 445,4) -
Alcaloides - Agregar a 5 g de aserrín purificado C17H12NNaO8S2 - Emplear un reactivo analítico
contenido en un erlenmeyer, 10 ml de amoníaco apropiado.
(SR) y 50 ml de una mezcla de éter y cloroformo
(2:1) y agitar frecuentemente durante 2 horas. $]XIUH - Emplear Azufre precipitado.
Decantar 20ml del extracto etéreo-clorofórmico $]XO EULOODQWH GH &RRPDVVLH 5 -
transparente y evaporar hasta sequedad. Disolver el (PM:826,0) - C45H44N3O7S2Na - Polvo marrón.
residuo en 2 ml de ácido clorhídrico diluido (1 en (CI 42660).
12) y dividir en dos porciones. Agregar a una
porción iodomercuriato de potasio (SR) y agregar a $]XO GH DQLOLQD - Colorante soluble en agua
la otra iodo (SR): no se produce turbidez en que consiste en una mezcla de trisulfonatos de
ninguna de las porciones. trifenilpararosanilina y de difenilrosanilina.
$VLDWLFyVLGR - $]XO GH KLGUR[LQDIWRO C20H12N2O11S3Na2 -
(2D,3E23-trihidróxi-4D-urs-12-en-28-oato-deO-6-d (PM: 598,50) - Emplear un reactivo analítico
esoxi-D-L-manopiranosil-(1o4)-O-E-D-glucopiran apropiado.
osil(1o6)-E-D-glucopiranosilo) - C48H78O19 - $]XO GH PHWLOHQR - C16H18ClN3S . 3H2O -
(PM: 959,0) - Polvo blanco, higroscópico, soluble (PM: 373,9) - Cristales verde oscuro o polvo
en metanol, poco soluble en alcohol, insoluble en cristalino, con brillo de color bronce. Soluble en
acetonitrilo. Proteger de la humedad. agua y cloroformo; moderadamente soluble en
Punto de fusión <260> - Aprox. 232 °C, con alcohol.
descomposición. Relación de absortividad - La relación entre la
Agua <120> - No más de 6,0 %. absortividad (ver 470. Espectrofotometría
Para uso en cromatografía de líquidos, debe ultravioleta y visible) a 635 y 665 nm, medidas en
cumplir con los requisitos de Valoración en una solución diluida del colorante en alcohol
Centella, hierba. Debe contener no menos de diluido, está comprendida entre 0,56 y 0,62.
97,0 %.
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - exactamente pesada y preparar mediante dilución en
Someter a ignición 1 g con 0,5 ml de ácido etapas una solución que contenga aproximadamente
sulfúrico: el residuo no pesa más de 10 mg (1 %). 10 µg por ml.
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C Procedimiento - Transferir porciones de 10, 15
durante 18 horas: no pierde más de 15,0 % de su y 20 ml de Solución estándar a erlenmeyer
peso. separados, con tapón de vidrio, de 50 ml. Agregar
10 ml y 5 ml, respectivamente, de alcohol a los
$]XO VXOIiQ - [[[(4-(Dietil-
amino)fenil](2,4-disulfonato fenil)metilén]-2,5-ci- erlenmeyer que contienen 10 y 15 ml de Solución
clohexadien-1-ilideno]dietilamonio de sodio. estándar y agitar por rotación para mezclar. A cada
uno de los erlenmeyer y a un cuarto que contiene 20
C27H31N2NaO6S2 - Polvo malva o púrpura,
soluble en agua. Las soluciones diluidas del azul ml de alcohol, agregar 2,0 ml de una solución
sulfán son azules y viran al amarillo por adición de preparada disolviendo 50 mg de azul de tetrazolio
ácido clorhídrico concentrado. en 10 ml de alcohol, mezclar y luego agregar 2,0 ml
de una solución preparada al diluir 1 ml de
$]XO GH WHWUD]ROLR - (3,3'-(3,3'-Dimetoxi[1,1'- hidróxido tetrametilamonio (SR) con alcohol a 10
bifenil]-4,4'-diil)bis[2,5-difenil-2H-tetrazolio] ml. Mezclar, dejar los erlenmeyer en la oscuridad
dicloruro) - C40H32Cl2N8O2 - (PM: 727,7) - durante 90 minutos y determinar las absorbancias
Cristales amarillo limón. Poco soluble en agua; de las tres Soluciones estándar a 525 nm, con un
fácilmente soluble en cloroformo y metanol; espectrofotómetro apropiado, empleando la
insoluble en acetona y éter. solución del cuarto erlenmeyer como blanco.
Solubilidad en metanol - Disolver 1 g en 100 Graficar las absorbancias en la abscisa y la cantidad
ml de metanol: se disuelve completamente de hidrocortisona en la ordenada sobre papel
proporcionando una solución clara. milimetrado y trazar la curva que mejor se ajuste: la
Color - Transferir una porción de la solución de absorbancia de cada solución es proporcional a la
metanol obtenida en el ensayo anterior a una celda concentración y la absorbancia de la solución que
de 1 cm y determinar su absorbancia a 525 nm, contiene 200 µg de hidrocortisona no es menor de
empleando agua como blanco: la absorbancia no 0,50.
excede 0,20.
Absortividad molar <470> - Su absortividad $]XO GH WROXLGLQD - (Cloruro de 3-amino-7-
molar en metanol, a 252 nm, no es menor a 50.000. dime-tilamino-2-metil-5-fenotiazinio) -
Ensayo de aptitud - C15H16ClN3S - (PM: 305,8) - Polvo verde oscuro.
Soluble en agua; poco soluble en alcohol
Solución estándar - Disolver en alcohol una
(CI 52040).
cantidad apropiada de Hidrocortisona SR-FA,
secada previamente a 105 °C durante 3 horas y
%
%DUEDORtQD - (1,8-Dihidroxi-3-hidroximetil-10- vidrio y pesar con exactitud. Aflojar la tapa y trans-
E-gluco-piranosil-10H-9-antracenona) - ferir el pesafiltro y su contenido a un erlenmeyer de
(PM: 436,4) - C21H22O9 . H2O - Emplear uno de 250 ml que contiene 25 ml de Solución alcohólica
grado apropiado. de clorhidrato de hidroxilamina. Empleando una
probeta para medir el volumen, lavar las paredes del
%DUELWDOVyGLFR- C8H11N2NaO3 - (PM: 206,2)
erlenmeyer con 50 ml adicionales de esta solución.
- Polvo cristalino blanco o cristales incoloros,
Dejar la solución en reposo durante 10 minutos,
fácilmente soluble en agua, poco soluble en alcohol,
agregar 1ml de azul de bromofenol (SR) y titular el
prácticamente insoluble en éter. Debe contener no
ácido clorhídrico liberado con hidróxido de sodio
menos de 98 % de la sal de sodio de la
1 N (SV). Realizar una determinación con un blan-
5,5-dietil-1H,3H,5H-piridina-2,4,6-triona.
co y hacer las correcciones necesarias. Cada milili-
%HQFHQR - C6H6 - (PM: 78,1) - Emplear un re- tro de hidróxido de sodio 1 N consumido equivale a
activo analítico apropiado. 106,1 mg de C7H6O. Contiene no menos de 98 %.
%HQFHQRVXOIRQDPLGD - C6H5SO2NH2 - Densidad relativa <160> - Entre 1,041 y 1,046.
(PM: 157,2) - Cristales blancos a marrón claro. Índice de refracción - Entre 1,5440 y 1,5465, a
Intervalo de fusión <260> - Entre 150 y 153 °C. 20 °C.
Ácido cianhídrico - Agitar 0,5 ml con 5 ml de
%HQFHQRVXOIRQLOR FORUXUR GH - C6H5SO2Cl - agua, agregar 0,5 ml de hidróxido de sodio (SR) y
(PM: 176,6) - Líquido oleoso, incoloro. Soluble en 0,1 ml de sulfato ferroso (SR) y calentar la mezcla
alcohol y éter; insoluble en agua fría. Solidifica a suavemente. Agregar un leve exceso de ácido
0 °C. clorhídrico: no se observa color azul verdoso o
Intervalo de fusión <260> - Entre 14 y 17 °C. precipitado azul dentro de los 15 minutos.
Intervalo de ebullición - Entre 251 y 252 °C.
%HQ]DQLOLGD - C13H11NO - (PM: 197,2) - Pol-
%HQFtOLFRiOFRKRO- Ver Alcohol bencílico. vo casi blanco, gris claro a verde grisáceo. Insolu-
%HQFLOLPLGD]RO - C10H10N2 - (PM: 158,2) - ble en agua; moderadamente soluble en alcohol;
Cristales blancos. poco soluble en éter.
Valoración - Transferir aproximadamente Intervalo de fusión <260> - Entre 162 y 165 °C.
40 mg, exactamente pesados, a un vaso de precipi- Solubilidad en acetona - 1,0 g se disuelve com-
tados de 100 ml. Disolver en 50 ml de ácido acético pletamente en 50 ml de acetona obteniéndose una
glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV), solución transparente.
determinando el punto final potenciométricamente %HQ]LGURO - (D-Fenilbencenometanol) -
empleando un electrodo combinado de calomel- C13H12O - (PM: 184,2) - Cristales de color blanco a
platino. Realizar una determinación con un blanco amarillo pálido. Poco soluble en agua; soluble en
y hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro alcohol, éter y cloroformo.
de ácido perclórico 0,1 N equivale a 15,82 mg de Intervalo de fusión <260> - Entre 65 y 67 °C,
C10H10N2. Contiene no menos de 99 %. con un intervalo de fusión no mayor de 2 °C.
%HQFLQDGHSHWUyOHR - Ver Éter de petróleo. %HQ]RDWR GH EHQFLOR - Ver Bencilo, Benzoato
%HQ]DOGHKtGR- C7H6O - (PM: 106,1) - Líqui- de.
do incoloro, fuertemente refractivo, tiene un olor %HQ]RDWRGHEXWLOR - C11H14O2 - (PM: 178,2) -
que se asemeja al de aceite de almendras amargas. Líquido espeso, aceitoso, incoloro a amarillo páli-
Soluble en agua; miscible con alcohol, éter y aceites do. Prácticamente insoluble en agua; soluble en
fijos y volátiles. alcohol y éter.
Solución alcohólica de clorhidrato de hidroxi- Valoración - Analizar por cromatografía gas-
lamina - Disolver 34,7 g de clorhidrato de hidroxi- líquido empleando un cromatógrafo de gases (ver
lamina en 160 ml de agua. Agregar alcohol hasta 100. Cromatografía) equipado con un detector de
obtener 1 litro y neutralizar frente al azul de bromo- ionización a la llama y una columna de acero inoxi-
fenol mediante el agregado de hidróxido de sodio dable de 1,8 m × 3 mm con fase estacionaria líquida
(SR). de 3-cianopropilpolisiloxano sobre soporte consti-
Valoración - Transferir aproximadamente 1 ml tuido por tierra silícea para cromatografía de gases
a un pesafiltro previamente pesado, con tapa de la cual ha sido calcinada mezclando diatomea con
Na2CO3 y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra p%HQ]RTXLQRQD- C6H4O2 - (PM: 108,1) - Pol-
silícea se lava con ácido luego se lava con agua vo amarillo oscuro con un tono verdoso. Poco
hasta neutralidad, pero no se lava con bases. La soluble en agua; soluble en alcohol, éter y solucio-
tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un nes de álcalis fijos. Puede oscurecerse con el tiem-
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los po. El material oscurecido puede ser purificado
grupos silanoles superficiales]. Mantener el inyec- mediante sublimación al vacío.
tor, el detector y la columna a aproximadamente Intervalo de fusión <260> - Entre 113 y 115 °C.
180, 280 y 190 °C, respectivamente. Emplear helio %HWDODFWDPDVD - La beta-lactamasa es una en-
como gas transportador. El tiempo de retención es zima producida por una variedad de bacterias se
aproximadamente 15 minutos. Presenta una pureza
obtiene generalmente a partir de los filtrados de
de no menos de 98 %.
cultivos de una cepa de Bacillus cereus. Tiene la
Índice de refracción - Entre 1,4980 y 1,5000, a
propiedad específica de inactivar penicilinas y cefa-
20 °C.
losporinas al romper el enlace que vincula el nitró-
%HQ]RDWR GH FROHVWHULOR - C34H50O2 - geno de la tiazolidina con el carbono carbonílico
(PM: 490,8)- Emplear uno de grado apropiado. adyacente.
Se presenta en la forma de pequeña piezas o
%HQ]RDWR GH HWLOR - C9H10O2 - (PM: 150,2) -
gránulos fácilmente pulverizables de color pardo.
Líquido transparente, incoloro. Tiene un olor
aromático. Prácticamente insoluble en agua; misci- Fácilmente soluble en agua, formando una solución
ble con alcohol, cloroformo y éter. algo opalescente que es prácticamente neutra frente
al papel de tornasol. Precipita de sus soluciones
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
acuosas en presencia de acetona, alcohol y dioxano
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
y se inactiva por contacto con estos solventes. Es
empleando una columna de acero inoxidable de
2,4 m × 3 mm que contiene una fase estacionaria inactivada rápidamente por el acetato de etilo y se
constituida por un compuesto de polietilenglicol al destruye irreversiblemente a una temperatura de
aproximadamente 80 °C.
20 % (p.m.p aproximadamente 15.000 [NOTA: un
La beta-lactamasa es analizada por un procedi-
compuesto de polietilenglicol de alto peso molecu-
miento basado en la determinación de la cantidad de
lar con un ligando diepóxido.]), sobre un soporte
penicilina G potásica o penicilina G sódica destrui-
constituido por tierra silícea para cromatografía de
gases la cual ha sido calcinada mezclando diatomea da a pH 7,0 en una solución de concentración tal
con Na2CO3 y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra que la inactivación procede como una reacción de
silícea se lava con ácido luego se lava con agua orden cero.
hasta neutralidad, pero no se lava con bases. La %HWDQDIWRO- Ver 2-Naftol.
tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un
%LEHQFLOR- (Dibencilo) - C14H14 - (PM: 182,3) -
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los Cristales incoloros. Fácilmente soluble en cloro-
grupos silanoles superficiales]. Mantener el inyec-
formo y éter; moderadamente soluble en alcohol;
tor, la columna y el detector a aproximadamente
prácticamente insoluble en agua.
180, 195 y 250 °C, respectivamente. Se emplea
Intervalo de fusión <260> - Entre 53 y 55 °C.
helio como gas transportador. El área del pico de
benzoato de etilo no es menor de 98 % del área del %LFDUERQDWR GH DPLQRJXDQLGLQD -
pico. (PM: 136,1) - CH6N4 . H2CO3 - Polvo blanco.
Índice de refracción - Entre 1,5048 y 1,5058, a Valoración - Disolver aproximadamente 34 mg,
20 °C. exactamente pesados, en 50 ml de ácido acético
glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
%HQ]RDWR GH WHVWRVWHURQD - C26H32O2 - determinando el punto final potenciométricamente.
(PM: 376,5) - Emplear uno de grado apropiado.
Realizar una determinación con un blanco y hacer
%HQ]RIHQRQD- (C6H5)2CO - (PM: 182,2) - Pol- las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido
vo blanco, cristalino. perclórico 0,1 N equivale a 13,61 mg de
Intervalo de fusión <260> - Entre 47 y 49 °C. CH6N4.H2CO3. Contiene no menos de 98,5 % de
CH6N4 . H2CO3.
%HQ]RtQD - (2-hidroxi-1,2-difeniletanona) -
Punto de fusión <260> - Aprox. 170 °C, con
C14H12O2 - (PM: 212,3) - Cristales ligeramente
descomposición.
amarillentos. Fácilmente soluble en acetona; solu-
ble en alcohol caliente; moderadamente soluble en %LFDUERQDWR GH SRWDVLR - KHCO3 - (PM:
éter; muy poco soluble en agua. 100,1) - Emplear un reactivo analítico apropiado.
Punto de fusión - Aprox. 137 °C.
%LFDUERQDWRGHVRGLR - NaHCO3 - (PM: 84,0) - transparente, incoloro. Se hidroliza fácilmente
Emplear un reactivo analítico apropiado. cuando es expuesto al aire húmedo. Manipular bajo
%LIHQLOR - C12H10 - (PM: 154,2) - Cristales inco- atmósfera de nitrógeno y almacenar en un sitio
fresco.
loros o blancos o polvo cristalino, de olor agrada-
Valoración - Emplear un cromatógrafo de gases
ble. Insoluble en agua; soluble en alcohol y éter.
equipado con un detector de conductividad térmica
Hierve aproximadamente a 254 °C.
y una columna de acero inoxidable de
Intervalo de fusión <260> - Entre 68 y 72 °C.
1,83 m × 3 mm conteniendo 5 % de fase estaciona-
%LIWDODWR GH SRWDVLR - (Ftalato ácido de pota- ria constituida por aceite de dimetilpolisiloxano
sio; Ácido ftálico monopotásico; Ftalato hidrógeno sobre soporte de tierra silícea para cromatografía de
de potasio, estándar acidimétrico) - gases la cual ha sido calcinada mezclando diatomea
KHC6H4(COO)2 - (PM: 204,2) - Emplear Ftalato con Na2CO3 y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra
ácido de potasio patrón primario. silícea se lava con ácido luego se lava con agua
%LSLULGLQD - (D,D’-Dipiridilo) - C10H8N2 - hasta neutralidad, no se lava con bases. La tierra
(PM: 156,2) - Polvo blanco o rosado, cristalino. silícea puede ser silanizada al tratarla con un agente
Soluble en agua y alcohol. Funde aproximadamen- como dimetildiclorosilano para bloquear los grupos
te a 69 °C y hierve aproximadamente a 272 °C. silanoles superficiales]. Mantener el inyector a
Sensibilidad - Preparar las siguientes solucio- aproximadamente 160 °C. La temperatura de la
nes: (A) Disolver 350 mg de sulfato ferroso amóni- columna se mantiene a 90 °C y se programa un
co en 50 ml de agua que contiene 1 ml de ácido ascenso de 4 °C por minuto hasta 160 °C. Se em-
sulfúrico y agregar 500 mg de sulfato de hidracina plea helio como gas transportador. Contiene no
luego agregar agua hasta obtener 500 ml. Antes de menos de 90 % de CH3CON[Si(CH3)3]2. El tiempo
usar, diluir 1 ml de esta solución a 100 ml con agua. de retención es de aproximadamente 15 minutos.
(B) Disolver 8,3 g de acetato de sodio y 12 ml de Índice de refracción - Entre 1,4150 y 1,4170, a
ácido acético glacial en agua para obtener 100 ml. 20 °C.
Agregar 1 ml de la solución muestra diluida %LVWULPHWLOVLOLOWULIOXRURDFHWDPLGD - (BSTFA)
(1 en 1.000) a una mezcla de 10 ml de agua y 1 ml - CF3CON[Si(CH3)3]2 - (PM: 257,4) - Líquido
de cada una de Soluciones A y B: se produce un transparente, incoloro. Se hidroliza fácilmente
color rosado de inmediato. cuando se expone al aire húmedo. Almacenar en un
Solubilidad - 100 mg se disuelve completamen- sitio fresco.
te en 10 ml de agua. Valoración - Emplear un cromatógrafo de gases
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - equipado con un detector de conductividad térmica
No más de 0,2 %. y una columna de acero inoxidable de
%LVEHQ]LPLGD - (Trihidrocloruro de 1,83 m × 3 mm conteniendo 5 % de fase estaciona-
4-[5-[5-(4-metilpiperazin-1-il)benzimidazol-2-il] ria constituida por aceite de dimetilpolisiloxano
benzimidazol-2-il]fenol pentahidrato) - sobre soporte de tierra silícea para cromatografía de
C25H27Cl3N6O . 5H2O - (PM: 624,0). Emplear un gases la cual ha sido calcinada mezclando diatomea
reactivo analítico apropiado. con Na2CO3 y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra
silícea se lava con ácido luego se lava con agua
ELVterEXWLOKLGUR[LIHQLOEXWLUDWR GH hasta neutralidad, no se lava con bases. La tierra
HWLOHQR - C50H66O8 - (PM: 795) - Polvo cristalino, silícea puede ser silanizada al tratarla con un agente
prácticamente insoluble en agua y éter de petróleo; como dimetildiclorosilano para bloquear los grupos
muy soluble en acetona, éter y metanol. silanoles superficiales]. Mantener el inyector a
%LVPXWR VXEQLWUDWR GH - [4BiNO3 (OH)2, aproximadamente 170 °C. La temperatura de la
BiO(OH)] - (PM: 1.462) - Polvo blanco, práctica- columna se mantiene a 90 °C y se programa un
mente insoluble en agua. ascenso de 4 °C por minuto hasta 140 °C. Se em-
plea helio como gas transportador. Contiene no
ELVRFWDGHFLOR[L
HVSLUREL > menos de 98 % de CF3CON[Si(CH3)3]2. El tiempo
GLR[DIRVIRULQDQR@ - C41H82O6P2 - (PM: 733) - de retención es de aproximadamente 15 minutos.
Sólido céreo blanco. Prácticamente insoluble en Índice de refracción - Entre 1,3820 y 1,3860, a
agua; soluble en hidrocarburos. 20 °C.
Intervalo de fusión -Entre 40 y 70 °C.
%LVWULPHWLOVLOLOWULIOXRURDFHWDPLGDFRQWULPH
%LVWULPHWLOVLOLODFHWDPLGD - (N,O- WLOFORURVLODQR- Emplear uno de grado apropiado.
Bis(trimetilsilil)acetamida; BSA) -
CH3CON[Si(CH3)3]2 - (PM: 203,4) - Líquido %LVXOIDWRGHDPRQLR - NH4HSO4 - (PM: 115,1)
- Cristales blancos. Fácilmente soluble en agua;
prácticamente insoluble en alcohol, acetona y piri- absorbancia entre 240 y 300 nm: no debe ser mayor
dina. a 0,05.
Valoración - Disolver aproximadamente 300 %LVXOILWR GH VRGLR - Emplear Metabisulfito de
mg, exactamente pesados, en 50 ml de una mezcla
sodio.
de agua y alcohol (25:25). Titular con hidróxido de
sodio 0,1 N (SV), determinando el punto final po- %LWDUWUDWR GH VRGLR - NaHC4H4O6 . H2O -
tenciométricamente. Realizar una determinación (PM: 190,1) - Cristales blancos o polvo cristalino.
con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Soluble en agua fría.
Cada mililitro de hidróxido de sodio 0,1 N equivale Valoración - Disolver aproximadamente
a 11,51 mg de NH4HSO4. Contiene no menos de 500 mg, exactamente pesados, en 30 ml de agua,
98 %. agregar fenolftaleína (SR). Titular con hidróxido de
sodio 0,1N (SV): cada mililitro de hidróxido de
%LVXOIDWR GH SRWDVLR - KHSO4 - (PM: 136,2) - sodio 0,1 N equivale a 19,01 mg de
Masas delicuescentes, blancas fundidas o gránulos. NaHC4H4O6 . H2O. Contiene entre 99 y 100,5 %.
Muy soluble en agua. Cuando se incinera, se gene-
Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
ran SO3 y H2O, cambiando primero a pirosulfato de
más de 1 mg, determinado sobre 10 g (0,01 %).
potasio luego a sulfato.
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no pre-
Acidez - Disolver 4 g, exactamente pesados, en
senta más de 0,2 mg de Cl (0,02 %).
50 ml de agua, agregar fenolftaleína (SR) y titular Metales pesados (Ensayo para reactivos) - Di-
con álcali 1 N: contiene entre 34 y 36 %, calculado solver 4 g en 25 ml de agua, agregar 2 gotas de
como H2SO4.
fenolftaleína (SR) y luego agregar amoníaco (SR),
Materia insoluble y precipitado de hidróxido de
gota a gota, hasta que la solución sea algo rosada.
amonio - Disolver 10 g en 100 ml de agua, agregar
Agregar 4 ml de ácido clorhídrico 1 N, diluir con
rojo de metilo (SR), alcalinizar con amoníaco (SR), agua a 40 ml y agregar 10 ml de sulfuro de hidró-
calentar a ebullición durante 1 minuto y digerir en geno (SR): ningún color pardo que se produzca
un baño de vapor durante 1 hora. Filtrar a través de
debe ser más oscuro que el de un control que con-
un crisol filtrante previamente pesado, lavar y secar
tenga 0,04 mg de Pb (0,001%).
a 105 °C durante 2 horas: el precipitado no pesa
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método I. 1 g
más de 1 mg (0,01 %).
no presenta más de 0,2 mg de SO4 (0,02 %).
Para los siguientes ensayos, preparar una Solu-
ción muestra del siguiente modo: disolver 6 g en %ROGLQD -
45 ml de agua, agregar 2 ml de ácido clorhídrico, (1,10-Dimetoxi-6-aD-aporfina-2,9-diol)-
calentar a ebullición suavemente durante 10 minu- C12H21NO4 - (PM: 327,1) - Polvo cristalino blan-
tos, enfriar y diluir con agua a 60 ml. co, soluble en alcohol y soluciones diluidas de áci-
Metales pesados (Ensayo para reactivos) - A dos, ligeramente soluble en agua.
30 ml de Solución muestra, agregar fenolftaleína Punto de fusión <260> - Aprox. 163 ºC.
(SR) y neutralizar con amoníaco (SR). Agregar Rotación específica <170> - Aprox. 127º, de-
0,5 ml de ácido acético glacial, diluir con agua a terminado sobre una solución de 1 g por litro en
40 ml y agregar 10 ml de sulfuro de hidrógeno metanol.
(SR): cualquier color pardo producido no es más Cromatografía -
oscuro que el de un control que contiene 10 ml de Fase estacionaria - Emplear una placa para
Solución muestra y 0,02 mg de Pb (0,001 %). cromatografía en placa delgada (ver 100. Cromato-
Hierro <580> - A 5 ml de Solución muestra, grafía), recubierta con gel de sílice para cromato-
agregar 2 ml de ácido clorhídrico y diluir con agua grafía con 0,25 mm de espesor.
a 47 ml: la solución no presenta más de 0,01 mg de Fase móvil - Tolueno, dietilamina y metanol
Fe (0,002 %). (80:10:10).
Revelador 1 - Iodobismutato de potasio (SR2).
%LVXOIDWR GH VRGLR - Ver Sulfato ácido de so-
Revelador 2 - Preparar una solución de 100 g
dio.
de nitrito de sodio por litro.
%LVXOIDWR GH WHWUDEXWLODPRQLR (Sulfato Procedimiento - Aplicar sobre la placa 10 µl de
Hidrogenado de Tetrabutilamonio) - C16H37NO4S - una solución de 0,4 mg de boldina por ml de meta-
(PM: 800) - Polvo cristalino o cristales incoloros. nol. Desarrollar el cromatograma hasta que el fren-
Fácilmente solubles en agua y metanol. te de solvente haya recorrido aproximadamente tres
Intervalo de fusión <260> - Entre 169 y 173 ºC. cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la
Absorbancia - Preparar una solución de 50 mg placa de la cámara, dejar secar, pulverizar sobre la
de Bisulfato de tetrabutilamonio por ml y medir la placa con Revelador 1. Dejar secar y pulverizar
sobre la placa con Revelador 2: el cromatograma D%URPRDFHWRQDIWRQD - (Bromometil
debe presentar sólo una mancha principal. 2-naftil cetona) - C12H9BrO - (PM: 249,1) - Crista-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en les de color rosado a tostado claro.
un equipo para cromatografía de líquido (ver 100. Intervalo de fusión <260> - Entre 81 y 83 °C.
Cromatografía) equipado con un detector ultravio-
p%URPRDQLOLQD - C6H6BrN - (PM: 172,0) -
leta ajustado a 304 nm y una columna de
Cristales blancos a casi blancos. Insoluble en agua;
250 cm × 4,6 mm recubierta con fase estacionaria
soluble en alcohol y éter.
constituida por octadecilsilano de 5 µm. El caudal
Valoración - Transferir aproximadamente
debe ser aproximadamente 1,5 ml por minuto con
650 mg, exactamente pesados, a un envase apropia-
fase móvil constituida por una mezcla de 84 volú-
do y disolver en 50 ml de ácido acético glacial
menes de una mezcla 99,8 ml de agua y 0,8 ml de
(SR). Agregar cristal violeta (SR) y titular con
dietilamina ajustado a pH 3,0 con ácido fórmico y
ácido perclórico 0,1 N (SV). Realizar una determi-
16 volúmenes de una solución preparada con
nación con un blanco y hacer las correcciones nece-
99,8 ml de acetonitrilo y 0,2 ml de dietilamina. La
sarias. Cada mililitro de ácido perclórico 0,1 N
respuesta del pico principal no debe ser menor de
equivale a 17,20 mg de C6H6BrN. Contiene no
99,0 % de la suma de las respuestas de todos los
menos de 98 %.
picos.
Intervalo de fusión <260> - Entre 60 y 65 °C,
%RUDWR GH VRGLR - (Bórax; Tetraborato de so- con un intervalo fusión no mayor de 2 °C.
dio) - Na2B4O7 . 10H2O - (PM: 381,4) - Emplear un
%URPRGHVR[LXULGLQD - C9H11BrN2O5 -
reactivo analítico apropiado.
(PM: 307,1).
%RURKLGUXUR GH VRGLR - NaBH4 - (PM: 37,8) - Punto de fusión <260> - Aprox. 194 °C.
Sólido blanco, cristalino. Fácilmente soluble en Cromatografía - Analizar según se indica en
agua; soluble (con reacción) en metanol. Sus solu- Sustancias relacionadas para Idoxiuridina deposi-
ciones se descomponen rápidamente por calenta- tando 5 µl de una solución de 5-iodouracilo de
miento a ebullición. 0,25 mg por ml. El cromatograma sólo presenta
Valoración - una mancha principal.
Solución de iodato de potasio (0,25 N) - Disol-
N%URPRVXFFLQLPLGD - C4H4BrNO2 -
ver 8,917 g, previamente secados a 110 °C hasta
(PM:178,0) - Cristales o polvo de color blanco o
peso constante y exactamente pesados, en agua para
casi blanco, de olor débil. Fácilmente soluble en
obtener 1 litro.
agua, acetona y ácido acético glacial. Precaución -
Procedimiento - Disolver aproximadamente
Sumamente irritante a los ojos, piel y mucosas.
500 mg, exactamente pesados, en 125 ml de solu-
Valoración - Transferir 200 mg, exactamente
ción de hidróxido de sodio (1 en 25) en un matraz
pesados, a un erlenmeyer, agregar 25 ml de
aforado de 250 ml, diluir a volumen con la solución
hidróxido de potasio alcohólico 0,5 N, cubrir con un
de hidróxido de sodio y mezclar. Transferir 10 ml
vidrio de reloj, calentar a ebullición durante 5 minu-
de la solución a un matraz para iodo de 250 ml,
tos. Enfriar, transferir la solución a un vaso de
agregar 35,0 ml de Solución de iodato de potasio y
precipitados, lavar el erlenmeyer con agua hasta que
mezclar. Agregar 2 g de ioduro de potasio, mez-
el volumen total de solución más los lavados sea de
clar, agregar 10 ml de ácido sulfúrico diluido
aproximadamente 100 ml y agregar 10 ml de ácido
(1 en 10), insertar el tapón en el matraz y dejar
acético glacial. Insertar electrodos apropiados y
reposar en la oscuridad durante 3 minutos. Titular
titular con nitrato de plata 0,1 N (SV), determinan-
la solución con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV),
do el punto final potenciométricamente. Cada mili-
agregando 3 ml de almidón (SR) cerca del punto
litro de nitrato de plata 0,1 N equivale a 17,80 mg
final. Calcular la cantidad, en mg, de NaBH4 en la
de C4H4BrNO2. Contiene no menos de 98 %.
muestra por la fórmula siguiente:
%URPXUR GH DPRQLR - NH4Br - (PM: 97,9) -
([(35,0)(0,25)] - 0,1V)4,729
Emplear un reactivo analítico apropiado.
en la cual V es el volumen, en ml, de tiosulfato de
%URPXURGHGLPLGLR
sodio 0,1 N empleado en la titulación. Contiene no
Bromuro de 3,8-diamino-5-metil-6-fenilfenan-
menos de 98 %.
tridinium.
%URPDWR GH SRWDVLR - KBrO3 - (PM: 167,0) - C20H18BrN3 - (PM: 380,3) - Cristales negro-
Emplear un reactivo analítico apropiado. rojizos. Levemente soluble en agua a 20 °C; poco
%URPR- Br - (PA: 79,90) - Emplear un reactivo soluble en agua a 60 °C y alcohol.
analítico apropiado.
%URPXURGHFLDQyJHQR - BrCN - (PM: 105,9) - Bromato - Disolver 1 g en 10 ml de agua, agre-
Cristales incoloros. Se volatiliza a temperatura gar 100 µl de solución de ioduro de potasio (1 en
ambiente. Sus vapores son altamente irritantes y 10), 1 ml de almidón (SR) y 25 µl de ácido sulfúri-
muy tóxicos. Funde aproximadamente a 52 °C. co diluido (1 en 36) y dejar reposar a 25 °C: no se
Fácilmente soluble en agua y alcohol. Almacenar produce color azul ni violeta dentro de los 10 minu-
en envases de cierre perfecto, en un sitio frío. tos (aproximadamente 0,001 %).
Solubilidad - Porciones separadas de 1 g se di- Calcio, magnesio y precipitado de R2O3- Agre-
suelven completamente en 10 ml de agua y en gar al filtrado del ensayo para Materia insoluble,
10 ml de alcohol, respectivamente, produciendo 5 ml de oxalato de amonio (SR), 2 ml de fosfato de
soluciones incoloras. amonio (SR) y 10 ml de hidróxido de amonio.
Dejar reposar durante aproximadamente 16 horas,
%URPXURGHLRGR - IBr - (PM: 206,8) - Crista-
filtrar, lavar con amoníaco (SR) diluido (1 en 4),
les negro-azulados o negro-parduscos. Fácilmente
someter a ignición y pesar: el peso del residuo no es
soluble en agua, alcohol, éter y ácido acético gla-
cial. Funde aproximadamente a 40 ºC. Punto de mayor de 1 mg (0,005%).
ebullición: aproximadamente a 116 ºC. Conservar Cloruro - Disolver 500 mg en 15 ml de ácido
nítrico diluido (1 en 3) en un erlenmeyer apropiado,
en envase inactínico, en un sitio fresco.
agregar 3 ml de peróxido de hidrógeno al 30 % y
%URPXURGHpQLWUREHQFLOR - NO2C6H4CH2Br - digerir en un baño de vapor hasta que la solución
(PM: 216,0) - Cristales de color casi blanco a ama- sea incolora. Lavar las paredes del erlenmeyer con
rillo pálido, se oscurece por exposición a la luz. agua, digerir durante un periodo adicional de
Prácticamente insoluble en agua; fácilmente soluble 15 minutos, enfriar y diluir con agua a 200 ml.
en alcohol, éter y ácido acético glacial. Almacenar Diluir una alícuota de 2 ml con agua a 25 ml y
en envases inactínicos de cierre perfecto. agregar 1 ml de ácido nítrico y 1 ml de nitrato de
Intervalo de fusión <260> - Entre 98 y 100 °C. plata (SR): si se produce turbidez no excede la de
Solubilidad - Porciones separadas de 200 mg un control que contenga 10 µg de ion cloruro
proporcionan soluciones transparentes en 5 ml de (0,2 %).
alcohol y en 5 ml de ácido acético glacial. Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - más de 0,0005 %.
Inapreciable, determinado sobre 200 mg. Hierro <580> - 2 g, disueltos en 47 ml de agua
%URPXUR GH SRWDVLR - KBr - (PM: 119,0) - que contenga 2 ml de ácido clorhídrico, no presen-
Emplear un reactivo analítico apropiado. tan más de 0,01 mg de Fe (5 ppm).
Compuestos nitrogenados (Ensayo para reacti-
%URPXURGHVRGLR - NaBr - (PM: 102,9) - Cris- vos) - 1 g no presenta más de 5 µg de N
tales cúbicos o polvo granular blanco, inodoro. (0,0005 %).
Soluble en agua; poco soluble en alcohol. Potasio (Ensayo para reactivos) -
Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - La Solución de ensayo - Disolver 10 g en agua, di-
materia insoluble a partir de 20 g, disuelta en luir con agua a 100 ml y mezclar.
150 ml de agua caliente, no pesa más de 1 mg Solución muestra - Diluir 10,0 ml de Solución
(0,005 %). de ensayo con agua a 100 ml y mezclar.
pH <250> - Entre 5,5 y 7,5, determinado en una Solución control - Agregar a 10,0 ml de Solu-
solución (1 en 20). ción de ensayo, 50 µg de ion potasio (K), diluir con
Bario - Disolver 6 g en 15 ml de agua, agregar agua a 100 ml y mezclar. No más de 0,005 %.
5 ml de ácido acético, 5 ml de peróxido de hidróge- Sulfato - Disolver 10 g en 100 ml de agua, fil-
no al 30 % y 1 ml de ácido clorhídrico y digerir en trar si fuera necesario y agregar 1 ml de ácido
un vaso de precipitados cubierto hasta que cese la clorhídrico: la solución proporciona no más de 1,2
reacción. Retirar la cubierta y evaporar hasta se- mg de residuo (0,005 %).
quedad. Disolver el residuo en 15 ml de agua,
filtrar si fuera necesario, diluir con agua a 23 ml y %URPXUR GH WHWUDEXWLODPRQLR - (C4H9)4NBr -
agregar 2 ml de solución de dicromato de potasio (PM: 322,4) - Polvo cristalino blanco.
(1 en 10). Agregar hidróxido de amonio hasta que Valoración - Disolver aproximadamente 34 mg,
se haya disipado el color anaranjado y el color ama- exactamente pesados, en 50 ml de ácido acético
rillo persista luego agregar 25 ml de metanol, agitar glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
vigorosamente y dejar reposar durante 10 minutos: determinando el punto final potenciométricamente.
cualquier turbidez que aparezca no excede la de un Realizar una determinación con un blanco y hacer
control que contenga 1,0 g de muestra y 100 µg de las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido
ion bario (0,002 %).
perclórico 0,1 N equivale a 32,24 mg de mente a 88 °C. Densidad relativa: aproximadamen-
(C4H9)4NBr. Contiene no menos de 99 %. te 0,98.
Intervalo de fusión <260> - Entre 103 y 105 °C. Valoración -
Solución de clorhidrato de hidroxilamina - Di-
%URPXUR GH WHWUDKHSWLODPRQLR - (C7H15)4NBr
solver 20 g de clorhidrato de hidroxilamina en
- (PM: 490,7) - Polvo blanco, escamoso.
40 ml de agua, y diluir con alcohol a 400 ml. Agre-
Intervalo de fusión <260> - Entre 89 y 91 °C.
gar, con agitación, 300 ml de hidróxido de potasio
%URPXUR GH WHWUDPHWLODPRQLR - (CH3)4NBr - alcohólico 0,5 N y filtrar. Descartar después de
(PM: 154,1) - Cristales incoloros. Soluble en agua; 2 días.
moderadamente soluble en alcohol absoluto; inso- Procedimiento - Transferir aproximadamente
luble en cloroformo y éter. 1 g, exactamente pesado, a un erlenmeyer con tapón
Valoración - Transferir aproximadamente de vidrio de 250 ml, agregar 75,0 ml de Solución de
400mg, exactamente pesados, a un vaso de precipi- clorhidrato de hidroxilamina, e insertar el tapón en
tados, agregar 50 ml de agua y 10 ml de ácido nítri- el erlenmeyer. Calentar a reflujo la mezcla durante
co diluido, agitar por rotación hasta disolver la 1 hora luego enfriar a temperatura ambiente. Agre-
muestra, agregar 50,0 ml de nitrato de plata gar azul de bromofenol (SR) y titular con ácido
0,1 N (SV) y mezclar. Agregar 2 ml de sulfato clorhídrico 0,5 N (SV) hasta punto final amarillo
férrico amónico (SR) y titular el exceso de nitrato verdoso. [NOTA: alternativamente, la solución
de plata con tiocianato de amonio 0,1 N (SV). Cada puede titularse potenciométricamente hasta pH 3,4.]
mililitro de nitrato de plata 0,1 N consumido equi- Realizar una determinación con un blanco y hacer
vale a 15,41 mg de (CH3)4NBr. Contiene no menos las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido
de 98 %. clorhídrico 0,5 N equivale a 43,05 mg de
%URPXUR PHUF~ULFR - HgBr2 - (PM: 360,4) - CH3COCOCH3. Contiene no menos de 97 % de
Emplear un reactivo analítico apropiado. CH3COCOCH3.
Índice de refracción - Entre 1,3935 y 1,3965, a
%XWDQRGLRO - (1,3-Butilenglicol) - C4H10O2 - 20 °C.
(PM: 90,1) - Líquido viscoso, incoloro. Muy Intervalo de solidificación <180> - Entre 2,0
higroscópico. Soluble en agua, alcohol, acetona y y 5,5 °C.
metil etil cetona; prácticamente insoluble en hidro-
carburos alifáticos y tolueno. %XWDQRO - Ver Alcohol butílico.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en %XWDQRQD- Ver Metil etil cetona.
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
equipado con un detector de ionización a la llama y %XWDQR VXOIRQDWR GH VRGLR - (Sal sódica del
una columna de acero inoxidable de 1,8 m × 3 mm ácido 1-butano sulfónico) - C4H9NaO3S -
que contiene 20 % de una fase estacionaria consti- (PM: 160,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
tuida por polietilenglicol (p.m.p. aproximadamente piado.
15.000) diepóxido en un soporte constituido por %XWLODPLQDQRUPDO - Ver n-Butilamina.
tierra silícea para cromatografía de gases calcinada
mezclando diatomea con Na2CO3 y calcinada a n%XWLODPLQD - CH3CH2CH2CH2NH2 -
900 °C [NOTA: la tierra silícea se lava con ácido (PM: 73,1) - Líquido incoloro a amarillo pálido,
inflamable. Miscible con agua, alcohol y éter. Al-
luego se lava con agua hasta neutralidad, no se lava
macenarlo en envases de cierre perfecto. Densidad
con bases. La tierra silícea puede ser silanizada al
relativa: aproximadamente 0,740.
tratarla con un agente como dimetildiclorosilano
para bloquear los grupos silanoles superficiales]. Intervalo de destilación <240> - Método I. No
Mantener el inyector a aproximadamente 265 °C. menos de 95 % destila entre 76 y 78 °C.
La temperatura de la columna se mantiene a 150 °C Agua <120> - Titulación volumétrica directa.
No más de 1,0 %.
y se programa un ascenso de 8 °C por minuto hasta
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g (1,5 ml)
210 °C. Se emplea helio como gas transportador.
no presenta más que 0,01 mg de Cl (0,001 %).
El área del pico de butanodiol no es menor de 98 %
del área total. Impurezas ácidas - A 50 ml, agregar 5 gotas de
Índice de refracción - Entre 1,4390 y 1,4410, a una solución saturada de azul violeta en benceno y
titular rápidamente con metóxido sódico 0,1 N (SV)
20 °C.
hasta punto final azul profundo, tomando precau-
%XWDQRGLRQD - (Diacetilo) - CH3COCOCH3 ciones para impedir la absorción de dióxido de
- (PM: 86,1) - Líquido amarillo brillante a verde carbono atmosférico mediante el empleo de una
amarillento con fuerte olor, acre. Soluble en agua. atmósfera de nitrógeno. No más de 1,0 ml de
Miscible con alcohol y éter. Hierve aproximada-
metóxido sódico 0,1 N se requieren para la neutrali- equipado con un detector de ionización a la llama y
zación. una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
%XWLODPLQREHQ]RLFR iFLGR - Ver ácido con una capa de 1 µm de fase estacionaria consti-
tuida por goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
4-(Butilamino)benzoico.
inyector y el detector a aproximadamente 100 y
ter%XWLOIHQRO - C10H14O - (PM: 150,2) - Es- 300 °C, respectivamente. La temperatura de la co-
camas o agujas blancas, cristalinas. Prácticamente lumna se mantiene a temperatura ambiente y se
insoluble en agua; soluble en alcohol y éter. programa un ascenso de 10 °C por minuto hasta
Intervalo de fusión (260) - Entre 98 y 101 °C. 150 °C. Se emplea helio como gas transportador.
%XWLOKLGUR[LDQLVRO - Emplear Butilhidroxiani- El área del pico C5H12O no es menor de 99,8 % del
sol. área total.
*HO GH VtOLFH GLPHWLOVLODQL]DGR FRQ LQGLFDGRU *LWR[LQD - C41H64O14 - (PM: 780,9) - Polvo
GH IOXRUHVFHQFLD SDUD FURPDWRJUDItD - Emplear blanco, cristalino. Prácticamente insoluble en agua,
uno de grado apropiado. cloroformo y éter; poco soluble en piridina y
alcohol diluido. Funde aproximadamente a 250 °C,
*HOGHVtOLFHOLEUHGHDJOXWLQDQWH- Gel de sílice con descomposición.
para uso cromatográfico formulado sin aglutinante, Rotación específica <170> - Entre + 3,8° y
ya que las formas activadas del gel de sílice se + 4,8°, determinado en una solución de piridina que
emplean como único agente aglutinante. contenga 10 mg por ml, con el empleo de una luz de
*HO GH VtOLFH RFWDGHFLOVLODQL]DGR SDUD mercurio a 546,1 nm; entre + 21° y + 25°,
FURPDWRJUDItD - Emplear uno de grado apropiado. determinado en una solución de cloroformo y
metanol (50:50) que contiene 5 mg por ml, *XD\DFRO - (o-Metoxifenol) - C7H8O2 -
empleando luz de sodio. (PM: 124,1) - Líquido refractivo entre incoloro y
Aptitud - Disolver 10 mg de Digitoxina SR-FA, amarillento, con un olor característico.
previamente secada, 10 mg de Digoxina SR-FA Moderadamente soluble en agua; soluble en
previamente secada y 10 mg de gitoxina, en solución de hidróxido de sodio; miscible con
porciones separadas de 5 ml de una mezcla de alcohol, cloroformo, éter y ácido acético glacial.
cloroformo y metanol (2:1) y diluir cada uno con Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
mezcla solvente adicional a 10 ml. Luego proceder un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
según se indica en el Ensayo de identificación para equipado con un detector de ionización a la llama y
Digoxina. El cromatograma de gitoxina presenta una columna de acero inoxidable de 1,8 m × 3 mm
una mancha fluorescente, ubicada entre las manchas con fase líquida constituida por un compuesto de
de digoxina y digitoxina. polietilenglicol (p.m.p aproximadamente 15.000
[NOTA: un compuesto de polietilenglicol de alto
*ODFLDO iFLGR DFpWLFR - Ver Ácido acético
glacial. peso molecular con un ligando diepóxido.]), sobre
un soporte constituido por tierra silícea para
*OLFHULQD - (Glicerol) - Emplear un reactivo cromatografía de gases la cual ha sido calcinada
analítico apropiado. mezclando diatomea con Na2CO3 y calcinada a 900
*OLFRFRODWR GH VRGLR - C26H42NNaO6 - °C, de malla 60 a 80 [NOTA: la tierra silícea se
(PM: 487,6) - Polvo de color blanco o canela, lava con ácido luego se lava con agua hasta
inodoro o prácticamente inodoro. Es higroscópico. neutralidad, pero no se lava con bases. La tierra
Fácilmente soluble en agua y alcohol. silícea puede ser silanizada al tratarla con un agente
Rotación específica <170> - Entre +28° y +31°, como dimetildiclorosilano para bloquear los grupos
calculada sobre la sustancia seca (se torna anhidro silanoles superficiales]. Mantener el inyector, la
al secar a 100 °C durante 2 horas), determinada a columna y el detector a aproximadamente 180, 200
20 °C en una solución que contenga 10 mg por ml. y 280 °C, respectivamente. Se emplea helio como
Determinación de nitrógeno <200> - Método I. gas transportador. El tiempo de retención es
Entre 2,6 y 3,2 % de N, calculado sobre la sustancia aproximadamente 8 minutos. Presenta una pureza
seca. no menor a 98 %.
Índice de refracción - Entre 1,5430 y 1,5450, a
20 °C.
+
+HPDWHtQD - C16H12O6 - (PM: 300,3) - Prepara- Intervalo de fusión <260> - Entre 31 y 32 °C.
da a partir de extracto de leño o de hematoxilina por
n+HSWDQR - Ver n-Heptano para cromatografía.
tratamiento con amoníaco y exposición al aire.
Cristales pardos rojizos con un lustre metálico ver- n+HSWDQR SDUD FURPDWRJUDItD - Líquido
de amarillento. Poco soluble en agua (aproximada- transparente, incoloro, volátil e inflamable; consti-
mente 1 en 1700), alcohol y éter; insoluble en cloro- tuido esencialmente por C7H16. Presenta olor carac-
formo; fácilmente soluble en solución diluida de terístico. Prácticamente insoluble en agua; soluble
amoníaco para formar una solución de color rojo en alcohol absoluto. Miscible con éter, cloroformo
púrpura oscuro y en solución acuosa de hidróxido y con la mayoría de los aceites fijos y volátiles.
de sodio (1 en 50) para formar una solución de [NOTA: el n-Heptano puede requerir purifica-
color rojo brillante, observada en cada caso a través ción mediante el pasaje a través de una columna de
de una capa de 1 cm de profundidad. Funde a una gel de sílice, empleando una relación de aproxima-
temperatura por encima de 200 °C y tiende a des- damente 25 g de gel por cada 100 ml de n-heptano
componerse a 250 °C. y destilación fraccionada posterior.]
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
+HPDWR[LOLQD - (Hidroxibrasilina) - Entre 94,5 y 99,0 °C.
C16H14O6 . 3H2O - (PM: 356,3) - Sustancia cristali- Pureza espectral - Determinar la absorbancia en
na obtenida a partir del corazón del leño de Haema-
una celda de 1 cm, a 250 nm, con un espectrofotó-
toxylon campechianum Linneo (Fam. Legumino-
metro apropiado, empleando agua como blanco: no
sae). Prismas incoloros a amarillos. Muy poco solu-
es mayor de 0,10.
ble en agua fría y éter; rápidamente soluble en agua Residuo en evaporación - Cumple con los requi-
caliente y alcohol caliente. Cuando se expone a la sitos del ensayo para Residuo en evaporación en
luz, adquiere un color rojo y proporciona una solu-
Éter de petróleo.
ción amarilla. Se disuelve en amoníaco (SR) y en
soluciones de hidróxidos alcalinos y carbonatos. +HSWDQRVXOIRQDWR GH VRGLR - C7H15NaO3S -
Cuando se disuelve en solución de alumbre desarro- (PM: 202,3) - Emplear uno de grado apropiado.
lla un color rojo; en solución de cloruro estañoso un
KH[D-ter-EXWLO
>
color rosa y en soluciones de sales cúpricas un color WULPHWLOEHQFHQRWULLOWULVPHWLOHQR@ WULIHQRO
gris verdoso. Se torna gradualmente negro en solu- - C54H78O3 - (PM: 775)- Polvo cristalino, prácti-
ción de dicromato de potasio. Almacenar la hema- camente insoluble en agua; soluble en acetona;
toxilina y sus soluciones en envases inactínicos y poco soluble en alcohol. Punto de fusión: aproxi-
protegidas del aire. madamente a 244°C.
+HSDULQD- Emplear Heparina Sódica. +H[DGHFLO KH[DGHFDQRDWR - (Hexadecil palmi-
+(3(6 - (Ácido N-(2-hidroxietil)piperazina- tato; Palmitato de cetilo) - C32H64O2 - (PM: 480,9)
N'-2-etanosulofónico) - C6H18N2O4S - PM: 238,3 - - Emplear uno de grado apropiado.
Polvo blanco. +H[DPHWLOGLVLOD]DQR - C6H19NSi2 - (PM: 161,4)
Punto de fusión - Aprox. 236 °C, con descom- - Líquido transparente, incoloro, de olor caracterís-
posición. tico.
+HSWDGHFDQRDWR GH PHWLOR - C18H36O2 - Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
(PM: 284,5) - Escamas blancas, cristalinas. un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en equipado con un detector de ionización a la llama y
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) una columna de vidrio de 1,8 m × 2 mm con una
equipado con un detector de ionización a la llama y fase estacionaria constituida por 50 % de fenil sili-
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta cona y 50 % de metilpolisiloxano, sobre soporte
con una capa de 1 µm de fase estacionaria consti- constituido por tierra silícea para cromatografía de
tuida por 90 % de 3-cianopropil silicona y 10 % de gases la cual ha sido calcinada mezclando diatomea
fenilmetilsilicona. Mantener el inyector y el detec- con Na2CO3 y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra
tor a 220 °C. La temperatura de la columna se man- silícea se lava con ácido luego se lava con agua
tiene a 180 °C y se programa un ascenso de 4 °C hasta neutralidad pero no se lava con bases. La
por minuto hasta alcanzar 220 °C. Se emplea helio tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un
como gas transportador. El área del pico C18H36O2 agente como dimetildiclorosilano para bloquear los
no es menor de 99 % del área total. grupos silanoles superficiales]. Mantener el inyector
y el detector a 100 y 310 °C, respectivamente. La +H[DQRVXOIRQDWR GH VRGLR - C6H13NaO3S -
temperatura de la columna se mantiene a 35 °C (PM: 188,2) - Emplear uno de grado apropiado.
durante 5 minutos y se programa un ascenso de +H[LODPLQD (Hexanamina) - C6H15N -
8 °C por minuto hasta alcanzar 200 °C. Se emplea
(PM: 101,2) - Líquido incoloro. Soluble en alcohol
helio como gas transportador con un caudal de
y éter; poco soluble en agua.
aproximadamente 40 ml por minuto. Presenta una
Índice de refracción <230> - Aprox. 1,418.
pureza de no menos de 95 %.
Intervalo de ebullición - Entre 127 y 131 ºC.
Residuo después de la evaporación - Transferir Densidad relativa - Aprox. 0,766 a 20 ºC.
200 g a un cristalizador y evaporar en un baño de
vapor hasta sequedad. Secar el residuo a 105 °C +LGUDWRGHFORUDO Emplear Hidrato de cloral.
durante 1 hora, enfriar y pesar: no se encuentra más +LGUDWR GH KLGUDFLQD DO HQ DJXD -
de 0,0025 % de residuo. (NH2)2 . H2O - (PM: 50,1) - Líquido incoloro.
+H[DPHWLOHQLPLQD - (Homopiperidina) - Valoración - Transferir 600 mg, exactamente
C6H12NH - (PM: 99,2) - Líquido incoloro a casi pesados, a un matraz aforado de 100 ml. Completar
incoloro. a volumen con agua y mezclar. Transferir 10 ml a
Índice de refracción - Entre 1,4640 y 1,4660, a un vaso de precipitados, agregar 1,0 g de bicarbona-
20 °C. to de sodio y 50,0 ml de iodo 0,1 N (SV). Titular el
exceso de iodo con tiosulfato de sodio 1 N (SV)
+H[DPHWLOHQWHWUDPLQD - (Hexamina; Metena-
empleando almidón (SR) como indicador. Realizar
mina; Urotropina) - C6H12N4 - (PM: 140,2) - Polvo
una determinación con un blanco y hacer las co-
cristalino incoloro, muy soluble en agua.
rrecciones necesarias. Cada mililitro de iodo 0,1 N
+H[DQLWURGLIHQLODPLQD - (Dipicrilamina) - equivale a 12,52 mg de (NH2)2 . H2O. Contiene no
C12H5N7O12 - (PM: 439,2) - Polvo o prismas de menos de 83 %.
color amarillo oro. Precaución - Es explosivo. Por
+LGUD]LGD GHO iFLGR LVRQLFRWtQLFR - Emplear
lo general, contiene aproximadamente 15 % de agua
Isoniazida.
como medida de seguridad. Insoluble en agua, al-
cohol, acetona y éter; soluble en ácido acético gla- +LGUyJHQRIWDODWRGHSRWDVLR(Benceno-1,2-
cial y álcalis. dicarboxilato ácido de potasio) - C8H5KO4 -
Agua <120> - Titulación volumétrica directa. (PM: 204,2) - Cristales blancos. Solubles en agua;
No más de 16 %. poco solubles en alcohol.
n+H[DQR - C6H14 - (PM: 86,2) - Para espectro- +LGURSHUy[LGR GH WHUEXWLOR - C4H10O2 -
fotometría generalmente es una mezcla de varios (PM: 90,1)- Soluble en solventes orgánicos. Densi-
isómeros de hexano (C6H14), predominantemente n- dad relativa: aproximadamente 0,898. Indice de
hexano y metilciclopentano (C6H12). Emplear un refracción: aproximadamente 1,401.
reactivo analítico apropiado. +LGURTXLQRQD - C6H4(OH)2 - (PM: 110,1) -
+H[DQRIHQRQD - C12H16O - (PM: 176,3) - Cristales en forma de agujas finas, incoloras o blan-
Líquido amarillo. cas. Se oscurece por exposición al aire y a la luz.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en Soluble en agua, alcohol y éter.
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) Valoración - Pesar exactamente alrededor de
equipado con un detector de ionización a la llama y 250 mg y disolver en una mezcla de 100 ml de agua
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta y 10 ml de ácido sulfúrico 0,1 N en un erlenmeyer
con una capa de 1 µm de una fase estacionaria de 250 ml. Agregar 3 gotas de una solución (1 en
constituida por 50 % de fenil silicona y 50 % de 100) de difenilamina en ácido sulfúrico y titular con
metilpolisiloxano. Mantener el inyector y el detec- sulfato cérico 0,1 N (SV) hasta que la solución se
tor a 280 y 300 °C, respectivamente. La temperatu- torne color rojo violáceo. Cada mililitro de sulfato
ra de la columna se mantiene a 180 °C y se progra- cérico 0,1 N equivale a 5,506 mg de C6H4(OH)2.
ma un ascenso de 10 °C por minuto hasta alcanzar Contiene no menos de 99 %.
280 °C. Se emplea helio como gas transportador. El Intervalo de fusión <260> - Entre 172 y 174 °C.
área del pico C12H16O no es menor de 98 % del área +LGURVXOILWR GH VRGLR - (Ditionito de sodio) -
total. Na2S2O4 - (PM: 174,1) - Polvo cristalino blanco o
Índice de refracción <230> - 1,511 ± 0,002, a blanco grisáceo. Soluble en agua; poco soluble en
20°C. alcohol. Se oxida gradualmente a bisulfito al aire,
+H[DQRVROYHQWH - Ver Éter de petróleo. más fácilmente cuando está en solución, dando una
reacción ácida. Es afectado por la luz.
Valoración - Pesar exactamente alrededor de +LGUR[LDFHWRIHQRQD - C8H8O2 - (PM: 136,2)
1 g, disolver en una mezcla de 10 ml de formal- - Polvo, trozos pequeños o gruesos de color marrón
dehído (SR) y 10 ml de agua contenida en un er- claro. Funde aproximadamente a 96 °C. Modera-
lenmeyer apropiado con tapón de vidrio y dejar damente soluble en cloroformo, proporcionando
reposar durante 30 minutos con agitación frecuente. una solución transparente amarillo clara.
Transferir la solución a un matraz aforado de Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
250 ml, agregar 150 ml de agua y 3 gotas de naranja un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
de metilo (SR) y luego agregar ácido sulfúrico 1 N, equipado con un detector de ionización a la llama y
gota a gota, hasta reacción levemente ácida. Diluir una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
con agua a 250 ml y mezclar. A 50,0 ml de la solu- con aceite de dimetilpolisiloxano. Mantener el in-
ción, agregar 2 gotas de fenolftaleína (SR) y canti- yector y el detector a 300 °C. La temperatura de la
dad suficiente de hidróxido de sodio 0,1 N para columna se mantiene a 180 °C y se programa un
producir un color rosado suave. Titular con iodo 0,1 ascenso de 10 °C por minuto hasta alcanzar 280 °C,
N agregando 3 ml de almidón (SR) como indicador. manteniendo esa temperatura aproximadamente 10
Luego eliminar el color azul de la solución con 1 minutos. Se emplea helio como gas transportador.
gota de tiosulfato de sodio 0,1 N y titular con El área del pico principal no es menor de 97 % del
hidróxido de sodio 0,1 N (SV) hasta color rosado. área total.
Cada mililitro de hidróxido de sodio 0,1 N equivale
+LGUR[LDFHWRIHQRQD - HOC6H4COCH3 -
a 3,482 mg de Na2S2O4. Contiene no menos de 88 (PM: 136,2) - Polvo gris, funde aproximadamente a
%. 109°C.
Sulfuro - Agregar solución de hidróxido de so-
dio (1 en 10) a acetato de plomo (SR) hasta disolver +LGUR[LEHQ]RWULD]RO KLGUDWR - (PM: 135,1,
el precipitado. Agregar 5 gotas de esta solución a anhidro) - C6H5N3O . xH2O - Polvo cristalino blan-
una solución de 1 g de hidrosulfito de sodio en co. Moderadamente soluble en alcohol produciendo
10 ml de agua: no se observa oscurecimiento inme- una solución transparente de color amarillo claro.
diato. +LGUy[LGR GH DPRQLR - Emplear un reactivo
Metales pesados - Disolver 1 g en 10 ml de analítico apropiado.
agua, agregar 10 ml de ácido clorhídrico y evaporar
en un baño de vapor hasta sequedad. Disolver el +LGUy[LGR GH EDULR - Ba(OH)2 . 8H2O -
residuo en 20 ml de agua y 0,5 ml de ácido clorhí- (PM: 315,5) - Emplear un reactivo analítico apro-
drico diluido, filtrar y agregar al filtrado 10 ml de piado.
sulfuro de hidrógeno (SR): no se produce oscureci- +LGUy[LGR GH FDOFLR - Emplear un reactivo
miento. Alcalinizar la solución con amoníaco (SR): analítico apropiado.
puede producirse un ligero color verdoso pero nun-
ca un precipitado blanco u oscuro. +LGUy[LGR GH FXSULHWLOHQGLDPLQD VROXFLyQ
Aptitud para la valoración de riboflavina - 0- Emplear una solución 1 M en la cual la rela-
Agregar a cada uno de dos o más tubos 10 ml de ción molar entre etilendiamina y cobre sea de
agua y 1,0 ml de una solución de riboflavina que 2,00 ± 0,04.
contenga 20 µg de riboflavina por ml y mezclar. A +LGUy[LGRGHHVWURQFLR - (Hidróxido de estron-
cada tubo agregar 1,0 ml de ácido acético glacial, cio octahidratado) - Sr(OH)2 . 8H2O - (PM: 265,8)
mezclar, agregar 0,5 ml de solución de permanga- - Polvo blanco, cristalino. Moderadamente soluble
nato de potasio (1 en 25) continuando con el mez- en agua. Puede absorber dióxido de carbono del
clado y dejar reposar durante 2 minutos. A conti- aire. Mantener perfectamente cerrado.
nuación agregar a cada tubo, 0,5 ml de peróxido de Valoración y carbonato - Pesar exactamente al-
hidrógeno (SR) y mezclar: el color de permangana- rededor de 5 g, disolver en 200 ml de agua caliente
to desaparece dentro de los 10 segundos. Agitar los en un erlenmeyer 500 ml con tapón de vidrio, agre-
tubos vigorosamente hasta expulsar el exceso de gar fenolftaleína (SR) y titular con ácido clorhídrico
oxígeno. Si quedan burbujas en las paredes de los 1 N (SV) para determinar la alcalinidad del hidróxi-
tubos una vez finalizada la reacción, eliminarlas do. Luego agregar naranja de metilo (SR) y titular
volcando los tubos para que la solución fluya len- con ácido clorhídrico 1 N (SV). Cada mililitro de
tamente desde un extremo al otro del tubo. En un ácido clorhídrico 1 N requerido para llegar al punto
fluorómetro apropiado, medir la fluorescencia de la final de fenolftaleína equivale a 132,9 mg de
solución. Luego agregar, mezclando, 8,0 mg de Sr(OH)2 . 8H2O y cada mililitro adicional de ácido
hidrosulfito de sodio: la riboflavina se reduce com- clorhídrico 1 N (SV) requerido para llegar al punto
pletamente en no más de 5 segundos. final con naranja de metilo equivale a 73,8 mg de
SrCO3. Contiene no menos de 95,0 % de Sr(OH)2 . Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método I. Di-
8H2O y no más de 3,0 % de SrCO3. solver 400 mg en 10 ml de agua y neutralizar con
Cloruro (Ensayo para reactivos) - Disolver 1,0 g ácido clorhídrico 3 N. Agregar 0,1 ml de bro-
en 100 ml de agua y filtrar si fuera necesario: 1,0 ml mo (SR), calentar a ebullición para remover el bro-
de la solución no presenta más de 0,01 mg de Cl mo en exceso, agregar 2 ml de ácido clorhídrico 3
(0,1%). N, filtrar y diluir con agua a 40 ml: 20 ml de esta
Calcio (Ensayo para reactivos) - solución no presentan más de 0,10 mg de SO4 (0,05
Solución madre de la muestra - Disolver 5,0 g %).
en agua y diluir con agua a 100 ml. Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No
Solución muestra - Diluir 10,0 ml de la Solución más de 0,002 %.
madre de la muestra con agua a 100 ml. Hierro <580> - No más de 0,02 mg de Fe
Solución control - Agregar 0,50 mg de ion cal- (0,002%), determinado sobre1 g.
cio (Ca) a 10,0 ml de la Solución madre de la mues-
+LGUy[LGR GH SRWDVLR - KOH - (PM: 56,1) -
tra y diluir con agua a 100 ml. Emplear un reactivo analítico apropiado.
Procedimiento - Determinar la emisión de fondo
a 416,7 nm. No más de 0,1 %. +LGUy[LGRGHVRGLR - NaOH - (PM: 40,0) - Em-
Hierro - Disolver 1 g en agua caliente y diluir plear un reactivo analítico apropiado.
con agua a 100 ml. A 20 ml de esta solución agre- +LGUy[LGR GH WHWUDEXWLODPRQLR DO HQ
gar 2 ml de ácido clorhídrico y 0,1 ml de perman- DJXD - [CH3(CH2)3]4NOH - (PM: 259,5) - Emplear
ganato de potasio 0,1 N, dejar reposar durante uno de grado apropiado.
5 minutos y agregar 3 ml de solución de tiocianato
de amonio (3 en 10). Cualquier color rojo produci- +LGUy[LGRGHWHWUDEXWLODPRQLR0HQ PH
do no es más oscuro que el de un control que con- WDQRO - Emplear uno de grado apropiado.
tenga 0,03 mg de Fe (0,015%). +LGUy[LGR GH WHWUDPHWLODPRQLR - (CH3)4NOH
Metales pesados - Preparar la Solución muestra - (PM: 91,2) - Disponible como una solución acuo-
del siguiente modo: disolver 2,0 g en 14 ml de áci- sa de aproximadamente 10 ó 25 % o como pentahi-
do clorhídrico diluido (1 en 6) y evaporar en un drato cristalino. Es transparente e incolora y tiene
baño de vapor hasta sequedad; absorber el residuo un fuerte olor a amoníaco. El hidróxido de tetrame-
en 25 ml de agua, filtrar y diluir con agua a 100 ml. tilamonio es una base más fuerte que el amoníaco y
Agregar a 5,0ml de la Solución muestra 0,02 mg de absorbe rápidamente dióxido de carbono del aire.
plomo (Pb) y diluir con agua a 30 ml, para obtener Almacenar en envases de cierre perfecto.
el control. Para la muestra, emplear 30 ml de la Valoración - Pesar exactamente un erlenmeyer
Solución muestra. Ajustar cada solución con ácido con tapón de vidrio que contenga aproximadamente
acético o amoníaco (SR) hasta pH entre 3,0 y 4,0 15 ml de agua. Agregar una cantidad de una solu-
(empleando papel de pH de intervalo estrecho), ción de hidróxido de tetrametilamonio, equivalente
diluir con agua a 40 ml y agregar 10 ml de sulfuro a 200 mg de (CH3)4NOH y pesar nuevamente.
de hidrógeno recientemente preparado (SR): cual- Agregar rojo de metilo (SR) y titular con ácido
quier color pardo desarrollado en la Solución mues- clorhídrico 0,1 N (SV). Cada mililitro de ácido
tra no es más oscuro que el de la solución preparada clorhídrico 0,1 N equivale a 9,115 mg de
a partir del control (0,004%). (CH3)4NOH.
+LGUy[LGRGHOLWLR - LiOH . H2O - (PM: 42,0) - Residuo de evaporación - Evaporar 5 ml de so-
Cristales blancos. Soluble en agua; insoluble en lución en un baño de vapor y secar a 105 °C durante
alcohol. 1 hora: el peso del residuo equivale a no más de
Valoración - Disolver aproximadamente 0,02 % del peso de la muestra.
160 mg, exactamente pesados, en 50 ml de agua, Amoníaco y otras aminas - Pesar exactamente
agregar fenolftaleína (SR) y titular con ácido una cantidad de solución, equivalente a aproxima-
clorhídrico 0,1 N (SV) hasta punto final incoloro. damente 300 mg de (CH3)4NOH, en un recipiente
Cada mililitro de ácido clorhídrico 0,1 N equivale a de pesaje bajo, previamente pesado, con 5 ml de
4,196 mg de LiOH . H2O. Contiene no menos de agua. Agregar un leve exceso de ácido clorhídrico 1
98 %. N (aproximadamente de 4 ml), evaporar en un baño
Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No de vapor hasta sequedad y secar a 105 °C durante 2
más de 1,0 mg, determinado sobre 10 g (0,01 %). horas: el peso del cloruro de tetrametilamonio obte-
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 200 mg no nido, multiplicado por 0,8317, representa la canti-
presentan más de 0,02 mg de Cl (0,01 %). dad, en mg, de (CH3)4NOH en la porción de mues-
tra tomada y corresponde a aproximadamente 0,2 %
por encima o por debajo del valor encontrado en la E+LGUR[LQRUDQGURVWHQRGLRQD - (10E-
Valoración. Hidroxi-19-norandrost-4-en-3,17-diona) - C18H24O3
+LGUy[LGR GH WHWUDPHWLODPRQLR SHQWDKLGUDWR - (PM: 288,4) - Emplear uno de grado apropiado.
- (CH3)4NOH . 5H2O - (PM: 181,2) - Cristales blan- +LGUR[LTXLQROLQD - (Oxina) - C9H7NO -
cos a casi blancos. Es higroscópico. Base fuerte. (PM: 145,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
Almacenar en envases bien cerrados. Soluble en piado.
agua y metanol.
+LSHUyVLGR -
Valoración - Pesar exactamente alrededor de
800mg, disolver en 100 ml de agua y titular con (2-(3,4-Dihidroxifenil)-3-ED-galactopiranosiloxi-
5,7-dihidroxicromen-4-ona) - C21H20O12 -
ácido clorhídrico 0,1 N (SV) determinando el punto
(PM: 464,4) - Agujas amarillo pálido, solubles en
final potenciométricamente. Realizar una determi-
metanol.
nación con un blanco y hacer las correcciones nece-
Punto de fusión <260> - Aprox. 240 ºC, con
sarias. Cada mililitro de ácido clorhídrico 0,1 N
equivale a 18,22 mg de (CH3)4NOH . 5H2O. Con- descomposición.
tiene no menos de 98 %. Rotación específica <170> - 8,3 °, determina-
da a 20 °C en una solución que contenga 2 mg por
+LGUy[LGR GH WULEXWLOHWLODPRQLR - C14H33NO - ml en piridina.
(PM: 231,4) - Emplear uno de grado apropiado. Absorción ultravioleta <470> - Debe presentar
+LGUy[LGR GH mWULIOXRUPHWLOIHQLO WULPHWL dos máximos de absorción a 259 y 364 nm en una
ODPRQLRHQPHWDQRO - Emplear uno de grado apro- solución apropiada en metanol.
piado. +LSR[DQWLQD - (1H-Purin-6-ona) - C5H4N4O -
D-d+LGUR[LIHQLOJOLFLQD - C8H9NO3 - (PM: 136,1) - Polvo cristalino blanco, muy poco
(PM: 167,2) - Escamas brillosas. Moderadamente soluble en agua; bastante soluble en agua a ebulli-
soluble en agua, alcohol, acetona, éter, cloroformo, ción; soluble en soluciones diluidas de ácidos y en
acetato de etilo y ácido acético glacial; soluble en soluciones diluidas de hidróxidos alcalinos. Se
álcalis y ácidos minerales; fácilmente soluble en descompone sin fundir a aproximadamente 150 ºC.
ácido clorhídrico caliente al 20 % v/v. Cromatografía - Analizar según se indica en
Intervalo de fusión <260> - Entre 220 y 247 °C, Mercaptopurina, el cromatograma sólo presenta
con descomposición. una mancha principal.
,
,PLGD]RO - C3H4N2 - (PM: 68,1) - Cristales co- ,RGDWR GH SRWDVLR - KIO3 - (PM: 214,0) - Em-
lor blanco a amarillo claro. Fácilmente soluble en plear un reactivo analítico apropiado.
agua.
,RGR - I - (PA: 126,90) - Emplear un reactivo
Valoración - Transferir aproximadamente
analítico apropiado.
700 mg, exactamente pesados, a un vaso de precipi-
tados de 250 ml. Disolver en 100 ml de ácido acéti- ,RGRXUDFLOR - C4H3IN2O2 - (PM: 238,0).
co glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV), Punto de fusión <260> - Aprox. 276 °C, con
determinando el punto final potenciométricamente. descomposición.
Realizar una determinación con un blanco y hacer Cromatografía - Analizar según se indica en
las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido Sustancias relacionadas para Idoxiuridina emple-
perclórico 0,1 N equivale a 6,808 mg de C3H4N2. ando 5 µl de una solución de 5-iodouracilo de 0,25
Contiene no menos de 98 %. mg por ml. El cromatograma sólo presenta una
mancha principal.
,PLQRHVWLOEHQR - C14H11N - (PM: 193,2) - Polvo
amarillo anaranjado. Moderadamente soluble en ,RGXUR GH HWLOTXLQDOGLQLR - C12H14IN -
acetato de etilo. (PM: 299,2) - Sólido verde amarillo. Moderada-
Intervalo de fusión <260> - Entre 197 y 201 °C. mente soluble en agua.
Valoración - Disolver aproximadamente
,PLQRGLEHQFLOR - C14H13N - (PM: 195,3) -
290 mg, exactamente pesados, en 100 ml de agua y
10,11-Dihidrodibenz[b,f]azepina - Polvo cristalino,
agregar 10 ml de ácido acético glacial. Titular con
amarillo pálido. Fácilmente soluble en acetona; nitrato de plata 0,1 N (SV), determinando el punto
prácticamente insoluble en agua.
final potenciométricamente, empleando un electro-
Punto de fusión - Aproximadamente 106 °C.
do selectivo para iones plata y un electrodo de refe-
,QGHQR - C9H8 - (PM: 116,2) - Líquido incoloro. rencia de calomel que contiene nitrato de potasio
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en 1 M. Realizar una determinación con un blanco y
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro de
equipado con un detector de ionización a la llama y nitrato de plata 0,1 N equivale a 29,92 mg de
una columna capilar de 10 m u 0,25 mm recubierta C12H14IN. Contiene no menos de 97,0 %.
con una capa de 1 µm de metilsilicona. Mantener el ,RGXUR GH PHUFXULR ,, - (Diioduro de mercu-
inyector y el detector a aproximadamente 200 y rio) - HgI2 - (PM: 454,4) - Polvo cristalino, denso,
300°C, respectivamente. La temperatura de la co- rojo escarlata. Poco soluble en agua; soluble en
lumna se mantiene a 100 °C y se programa un as- acetona, alcohol, éter y solución de ioduro de pota-
censo de 10 °C por minuto hasta 250 °C. Se emplea sio en exceso. Almacenar en envase inactínico.
helio como gas transportador. El área del pico de
indeno no es menor de 99 % del área total. ,RGXURGHPHWLOR - CH3I - (PM: 141,9) - Líqui-
Índice de refracción - Entre 1,5749 y 1,5769, a do incoloro, pesado, transparente. Poco soluble en
20 °C. agua. Miscible con alcohol, éter y éter de petróleo.
Se torna pardo por exposición a la luz como resul-
ËQGLJRFDUPtQ - (Indigotindisulfonato sódico) - tado de la liberación de iodo.
Emplear un reactivo analítico apropiado. Valoración - Agregar 1 ml a un matraz aforado
,QRVLWRO - (Hexahidroxiciclohexano) - de 100 ml peviamente pesado con 10 ml de alcohol.
C6H6(OH)6 - (PM: 180,2) - Cristales blancos o Pesar nuevamente, completar a volumen con alco-
polvo blanco, cristalino, inodoro y estable al aire. hol y mezclar. Transferir 20 ml a un erlenmeyer con
Sus soluciones son neutras al papel de tornasol. tapón de vidrio y agregar 50,0 ml de nitrato de plata
Ópticamente inactivo. Fácilmente soluble en agua; 0,1 N (SV) y 2 ml de ácido nítrico. Tapar inmedia-
poco soluble en alcohol; insoluble en éter y cloro- tamente, agitar con frecuencia durante 2 horas y
formo. Almacenar en envases bien cerrados. dejar reposar en la oscuridad de la noche a la maña-
Intervalo de fusión <260> - Entre 223 y 226 °C. na. Agitar nuevamente durante 2 horas luego agre-
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- gar 50 ml de agua y 3 ml de sulfato férrico amónico
rante 4 horas: no pierde más de 0,5 % de su peso. y titular el nitrato de plata en exceso con tiocianato
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - de amonio 0,1 N (SV). Cada mililitro de nitrato de
No más de 0,1 %. plata 0,1 N equivale a 14,19 mg de CH3I. Contiene
no menos de 98,5 %.
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) - Intervalo de fusión <260> - Entre 146 y 147 °C.
Destilar 50 ml en un recipiente enfriado, parcial- ,RGXUR LVRSURStOLFR - (2-Iodopropano) - C3H7I
mente tapado: no destila menos de 48 ml entre 41,5 - (PM: 170,0) - Líquido incoloro, se descolora con
y 43 °C.
exposición al aire y a la luz. Moderadamente solu-
Densidad - Entre 2,270 y 2,285.
ble en agua; miscible con alcohol, cloroformo y
Residuo de evaporación - Evaporar 4 ml (10 g)
éter.
en un baño de vapor y secar el residuo a 105 °C
Densidad - Entre 1,696 y 1,704.
durante 1 hora: el residuo no pesa más de 1 mg Índice de refracción - Entre 1,4987 y 1,4997 a
(0,01 %). 20°C.
Acidez - Agitar 3 ml con 5 ml de agua durante
30 segundos y de inmediato extraer la fase inferior: ,VREXWLODFHWRIHQRQD - C12H16O - (PM: 176,0)
la fase acuosa es neutra frente al tornasol y cuando - Líquido amarillo pálido. Soluble en cloroformo,
se agrega 1 ml de nitrato de plata (SR), no presenta gliceroles, alcoholes, éter y aceites grasos; insoluble
más que una leve opalescencia. en agua. Emplear uno de grado apropiado.
,RGXURGHSRWDVLR - KI - (PM: 166,0) - Emplear N,VREXWLOSLSHULGRQD - C9H17NO - (PM: 155,2)
un reactivo analítico apropiado. - Emplear uno de grado apropiado.
,RGXUR GH WHWUDEXWLODPRQLR - (C4H9)4NI - ,VRRFWDQR - Ver 2,2,4-Trimetilpentano.
(PM: 369,4) - Escamas blancas, brillosas, cristali- ,VRSURSLODPLQD - (2-Aminopropano) -
nas. Soluble en alcohol y éter; poco soluble en C3H7NH2 - (PM: 59,1) - Líquido transparente, inco-
agua. loro, inflamable con un olor fuerte a amoníaco.
Valoración - Disolver 200 mg, exactamente pe- Miscible con agua, alcohol y éter.
sados, en 40 ml de agua hirviendo, con agitación Valoración - Transferir aproximadamente
vigorosa y enfriar a temperatura ambiente. Agitar la 200 mg, exactamente pesados, a un envase apropia-
solución mecánicamente, agregar 5 ml de ácido do, agregar 50 ml de agua y mezclar. Titular con
nítrico 2 N. Titular con nitrato de plata 0,1 N (SV), ácido clorhídrico 0,1 N (SV), empleando una mez-
determinando el punto final potenciométricamente, cla de verde de bromocresol (SR) y rojo de metilo
empleando un electrodo de plata y vidrio y agre- (SR) (5:1) como indicador. Cada mililitro de ácido
gando la solución titulante en porciones de 0,1 ml clorhídrico 0,1 N equivale a 59,11 mg de C3H9N.
cerca del punto final. Realizar una determinación Contiene no menos de 98 %.
con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Intervalo de ebullición (Ensayo para Reactivos)
Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale a - No menos de 95 % destila entre 31 y 33 °C.
36,94 mg de (C4H9)4NI. Contiene no menos de Índice de refracción - Entre 1,3743 y 1,3753, a
99,0 %. 20 ºC.
/
/DFWDWR GH FDOFLR - (PM: 308,3) - /DFWRVD - C12H22O11 - (PM: 342,3) - Emplear un
(CH3CHOHCOO)2Ca . 5H2O - Gránulos o polvo reactivo analítico apropiado.
blanco, casi inodoro. Es algo eflorescente y a
D/DFWRVD PRQRKLGUDWR - C12H22O11 . H2O -
120 °C se convierte en anhidro. Soluble en agua;
(PM: 360,3) - Polvo blanco. El contenido de
prácticamente insoluble en alcohol. Almacenarlo en
envases de cierre perfecto. E-lactosa no debe ser mayor a 3 %.
Valoración - Pesar exactamente 500 mg, pre- Valoración - Inyectar una alicuota derivatizada
viamente secados a 120 °C durante 4 horas, transfe- y apropiada en un cromatógrafo de gases (ver 100.
Cromatografía) equipado con un detector de ioni-
rir a un envase apropiado y disolver con 150 ml de
zación a la llama y una columna capilar de
agua que contiene 2 ml de ácido clorhídrico diluido.
Agregar 15 ml de hidróxido de sodio (SR) y 300 mg 30 m u 0,25 mm recubierta con una capa de 1 Pm
de azul de hidroxinaftol y titular con edetato disódi- de fase estacionaria constituida por goma de dime-
co 0,05 M (SV) hasta que la solución tenga color tilpolisiloxano. Mantener el inyector y el detector
azul profundo. Cada mililitro de edetato disódico aproximadamente a 250 y 280 °C, respectivamente.
0,05 M equivale a 10,91 mg de C6H10CaO6. Contie- La temperatura de la columna se debe mantener a
ne no menos de 98 %. 230 °C y se debe programar un ascenso de 4 °C por
Pérdida por secado <680> - Secar a 120 °C du- minuto hasta 280 °C. Se debe emplear helio como
rante 4 horas: pierde entre 25,0 y 30,0 % de su peso. gas transportador. La respuesta del pico
Acidez - Agregar fenolftaleína (SR) a 20 ml de C12H22O11 . H2O no debe ser menor de 97 % de la
una solución (1 en 20) y titular con hidróxido de respuesta total.
sodio 0,10 N: no se requiere más de 0,50 ml para a E/DFWRVD - C12H22O11 - (PM: 342,3) - Polvo
producir un color rosado. blanco a amarillo tenue. El contenido de D-lactosa
Metales Pesados (Ensayo para reactivos) - Di- no debe ser mayor a 35 %.
solver 1 g en 2,5 ml de ácido clorhídrico diluido, Valoración - Inyectar una alicuota derivatizada
diluir con agua a 40 ml y agregar 10 ml de sulfuro y apropiada en un cromatógrafo de gases (ver 100.
de hidrógeno (SR): cualquier color pardo producido Cromatografía) equipado con un detector de ioni-
no es más oscuro que el de un control que contiene zación a la llama y una columna capilar de
0,02 mg de Pb (0,002 %). 30 m u 0,25 mm recubierta con una capa de 1 Pm
Magnesio y sales alcalinas - Mezclar 1 g con de fase estacionaria constituida por 94 % de dime-
40 ml de agua, agregar cuidadosamente 5 ml de tilpolisiloxano y 6 % de cianopropilfenil polisiloxa-
ácido clorhídrico calentar a ebullición la solución no (los porcentajes se refieren a la sustitución mo-
durante 1 minuto y agregar rápidamente 40 ml de lar). Mantener el inyector y el detector aproxima-
ácido oxálico (SR). Agregar de inmediato a la mez- damente a 250 °C. La temperatura de la columna se
cla caliente 2 gotas de rojo de metilo (SR) luego debe mantener a 20 °C y se debe programar un
agregar amoníaco (SR) gota a gota, desde una bure- ascenso de 8 °C por minuto hasta 280 °C. Se debe
ta, hasta que la mezcla sea alcalina. Enfriar a tem- emplear helio como gas transportador. La respuesta
peratura ambiente, transferir a una probeta de 100 del pico C12H22O11 no debe ser menor de 99 % de
ml, diluir con agua a 100 ml, mezclar y dejar repo- la respuesta total.
sar durante 4 horas o durante toda la noche. Filtrar y
transferir a un crisol de platino 50 ml del filtrado /DQDGHYLGULR - Finos hilos de vidrio.
transparente, al cual se ha agregado 0,5 ml de ácido Sustancias solubles en ácidos - Calentar a ebu-
sulfúrico. Evaporar la mezcla en un baño de vapor a llición 1 g durante 30 minutos con 30 ml de ácido
un volumen pequeño. Cuidadosamente calentar clorhídrico diluido y filtrar. Evaporar el filtrado y
sobre una llama directa hasta sequedad y continuar secar el residuo a 105 °C hasta peso constante: el
calentando hasta descomposición completa y volati- residuo no pesa más de 5 mg (0,5 %).
lización de las sales de amonio. Finalmente incine- Metales pesados - Calentar a ebullición 2 g con
rar el residuo a 800 ± 25 °C durante 15 minutos: el una mezcla de 25 ml de ácido nítrico diluido y
residuo no pesa más de 5 mg (1 %). 25 ml de agua durante 5 minutos y filtrar. Evaporar
Ácidos grasos volátiles - Agitar aproximada- la mitad del filtrado hasta sequedad, disolver el
mente 500 mg con 1 ml de ácido sulfúrico y calen- residuo en 10 ml de agua a la cual se le han agrega-
tar: la mezcla no emite olor de ácidos grasos voláti- do 3 gotas de ácido clorhídrico, filtrar si fuera nece-
les. sario y agregar un volumen igual de sulfuro de
hidrógeno (SR) al filtrado: no se produce oscureci- goma de polietilenglicol 20.000. Mantener el in-
miento. yector y el detector a aproximadamente 220 °C. La
/DXULOVXOIDWRGHVRGLR - Ver Dodecil sulfato de temperatura de la columna se debe mantener a
sodio. 60 °C durante 10 minutos, se programa un ascenso
de 2 °C por minuto hasta 180 °C, y mantener a esta
/LPRQHQR - (D-Limoneno; temperatura durante 5 minutos. Se emplea helio
(R)-4-Isopropenil-1-metilciclohex-1-eno; como gas transportador, el caudal debe ser aproxi-
()-p-menta-1,8-dieno) - C10H16 - (PM: 136,2) - madamente 1,5 ml por minuto. La respuesta del
Líquido incoloro; soluble en alcohol, prácticamente pico principal no debe ser menor de 99,0 % de la
insoluble en agua. suma de las respuestas de todos los picos.
Densidad relativa <160> - Aprox. 0,84.
L/LVLQD - (Ácido 2,6-diaminohexanoico) -
Índice de refracción <230> - Entre 1,471 y
(PM: 146,2) - C6H14N2O2 - Agujas cristalinas o
1,474.
placas hexagonales. Soluble en agua; poco soluble
Rotación específica <170> - Entre 96° y en alcohol; insoluble en éter.
106°. Rotación específica <170> - Entre +25,5° y
Punto de ebullición <240> - Entre 175 y +26,0°, determinado en ácido clorhídrico diluido (1
177 °C. en 2).
Para uso en cromatografía de gases, debe cum- Determinación de nitrógeno <200> - Método I.
plir con el siguiente ensayo. Contiene entre 18,88 y 19,44 % de N que corres-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en ponde a no menos de 98,5 % de C6H14N2O2,
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) habiendo secado la muestra previamente a 105 °C
equipado con un detector de ionización a la llama y durante 2 horas.
una columna capilar de 60 m × 0,25 mm recubierta
con una capa de fase estacionaria constituida por
0
0DJQHVLR - Mg - (PA: 24,31) - Metal plateado Muy soluble en alcohol, cloroformo, éter y éter de
en forma de cinta. Reacciona lentamente con agua a petróleo; fácilmente soluble en ácido acético glacial
temperatura ambiente. Se disuelve fácilmente en y parafina líquida; moderadamente soluble en agua.
ácidos diluidos con liberación de hidrógeno. Intervalo de fusión <260> - Entre 41 y 43 °C.
Valoración - Transferir 1 g, exactamente pesa- Rotación óptica <170> - Aprox. 50º, determi-
do, a un matraz aforado de 250 ml y disolver en una nado sobre una solución de 100 mg por ml en alco-
mezcla de 15 ml de ácido clorhídrico y 85 ml de hol.
agua. Cuando se completa la disolución, diluir a
0HUFDSWRSXULQD - C5H4N4S . H2O -
volumen con agua y mezclar. Transferir 25 ml de la
(PM: 170,2) - 7H-purina-6-tiol - Emplear un reac-
dilución a un vaso de precipitados de 400 ml, diluir
tivo analítico apropiado de una pureza no menor de
con agua a 250 ml, agregar 20 ml de solución regu-
98 %.
ladora de amoníaco-cloruro de amonio (SR) y unos
mg de negro de eriocromo T triturado y titular con 0HUFXULR - Hg - (PA: 200,59) - Emplear un re-
edetato disódico 0,1 M (SV) hasta punto final azul. activo analítico apropiado.
Cada mililitro de edetato disódico 0,1 M (SV) equi- 0HWDELVXOILWRGHVRGLR - Na2S2O5 - (PM: 190,1)
vale a 2,430 mg de Mg. Contiene no menos de 99 - Emplear Metabisulfito de sodio.
%.
0HWDERUDWR GH OLWLR - LiBO2 - (PM: 49,8) -
0DJQHVLR y[LGR GH MgO - (PM: 40,3) - Emplear un reactivo analítico apropiado.
Emplear un reactivo analítico apropiado.
0HWDFUHVRO - Emplear un reactivo analítico
0DOHDWR GH ELVHWLOKH[LOR - C20H36O4 - apropiado.
(PM: 340,5) - Líquido transparente incoloro a ama-
rillo pálido. Miscible con acetona y alcohol. Densi- 0HWDFULODWRGH PHWLOR - Emplear uno de grado
dad relativa: aproximadamente 0,945. apropiado.
Valoración - Transferir aproximadamente 2,5 g, 0HWDQRO - (Alcohol metílico) - CH3OH -
exactamente pesados, a un erlenmeyer de 250 ml, (PM: 32,0) - Emplear un reactivo analítico apropia-
agregar 50,0 ml de hidróxido de potasio alcohólico do.
0,5 N (SV) y calentar a reflujo durante 45 minutos.
Enfriar, agregar 0,5 ml de fenolftaleína (SR) y titu- 0HWDQRODQKLGUR - Ver Metanol.
lar el álcali en exceso con ácido clorhídrico 0,5 N 0HWDQRO SDUD FURPDWRJUDItD GH OtTXLGRV -
(SV). Realizar una determinación con un blanco al Debe contener no menos de 99,8 por ciento de
mismo tiempo, empleando la misma cantidad de CH4O (PM: 32,0).
hidróxido de potasio alcohólico 0,5 N (ver Titula- Absorbancia - La absorbancia a 225 nm emple-
ciones residuales en 780. Volumetría). La diferen- ando agua como blanco, no debe ser mayor a 0,17.
cia, en ml, entre los volúmenes de ácido clorhídrico
0HWDQRO SDUD HVSHFWURIRWRPHWUtD - Emplear
0,5 N consumidos en la titulación de la muestra y la
Metanol apropiado para uso en espectrofotometría
titulación del blanco, multiplicada por 85,1, repre-
ultravioleta.
senta la cantidad, en mg, de maleato de bis(2-
etilhexilo) en la porción tomada. Contiene no me- 0HWDSHULRGDWR GH VRGLR - NaIO4 -
nos de 97 %. (PM: 213,9) - Emplear un reactivo analítico apro-
piado.
0DQJDQHVR - Mn - (PA: 54,94) - Emplear uno
de grado apropiado. 0HWLODPLQD DO HQ DJXD - CH5N -
(PM: 31,1) - Líquido incoloro.
0DQLWRO - Emplear Manitol.
Valoración - Empleando una jeringa, transferir
0HODPLQD - (1,3,5-Triazina-2,4,6-triamina) - aproximadamente 0,5 ml de una muestra bien agita-
C6H6N6 - (PM: 126,1) - Polvo blanco amorfo. da a 100 ml de agua en un punto debajo de la super-
Muy soluble en agua y alcohol. ficie del agua. Determinar el peso de la muestra
0HQDGLRQD - Emplear Menadiona. pesando la jeringa antes y después de la transferen-
cia. Mezclar y titular con ácido clorhídrico 0,5 N
0HQWRO - (SV), determinando el punto final potenciométri-
((1D,2E,5D)-5-Metil-2-(1-metiletil)-ciclohexanol) - camente, empleando un electrodo de plata-cloruro
C10H20O - (PM: 156,3) - Cristales o gránulos. de plata y un electrodo de referencia de calomel.
Realizar una determinación con un blanco y hacer 0HWLOHWLOFHWRQD - (2-Butanona) -CH3COC2H5
las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido - (PM: 72,1) - Líquido incoloro, de olor similar a la
clorhídrico 0,5 N equivale a 15,53 mg de CH5N. acetona. Soluble en agua. Miscible con alcohol y
Contiene entre 39,0 y 41,0 %. éter.
Índice de refracción - Entre 1,3680 y 1,3710, a Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
20 °C. Entre 79,0 y 81,0 °C.
Densidad relativa <160> - Entre 0,801 y 0,803.
0HWLOEHQ]RWLD]RORQDKLGUD]RQD FORUKLGUDWR
GH - (Clorhidrato de 3-metilbenzotiazol-2(3H)-ona Residuo de evaporación - Evaporar 50 ml en un
hidrazona, monohidrato) - C8H10ClN3S . H2O - baño de vapor y secar a 105 °C durante 1 hora: el
residuo no pesa más de 1,0 mg (0,0025 %).
(PM: 233,7) - Polvo blanco cristalino o amarillen-
Acidez - Agregar 25 ml a 10 ml de alcohol al
to.
80 %, previamente neutralizado a la fenolftaleí-
Punto de fusión - Aprox. 207 ºC.
na (SR) con hidróxido de sodio 0,02 N. Titular con
Ensayo de validez para la determinación de al-
dehídos - A 2 ml de metanol libre de aldehído hidróxido de sodio 0,020 N (SV) hasta la aparición
de un color rosado que persiste no menos de 15
agregar 60 Pl de una solución de 1 mg de propio-
segundos: no se requieren más de 0,50 ml (0,003 %
naldehído por ml de metanol libre de aldehído y
como CH3COOH).
5 ml de una solución de 4 mg de clorhidrato de
Solubilidad en agua - Agregar 5 ml a 40 ml de
metilbenzotiazolona-hidrazona por ml. Mezclar y
agua y dejar reposar durante 20 minutos: la solución
dejar en reposo durante 30 minutos. Preparar una
permanece transparente.
solución blanco sin propionaldehído. Agregar
25 ml de un solución de 2 mg de cloruro férrico por 0HWLO LVREXWLO FHWRQD - Ver 4-Metil-2-
ml a la solución muestra y a la solución blanco y pentanona.
diluir a 100 ml con acetona. La absorbancia a N0HWLONQLWURVRpWROXHQVXOIRQDPLGD - (p-
660 nm empleando la solución blanco no debe ser Tolilsulfonilmetilnitrosamina) - C8H10N2O3S - (PM:
menor a 0,62. 214,2) - Polvo o cristales amarillo claro. Insoluble
0HWLOFORURIRUPR - (1,1,1-Tricloroetano) - en agua; soluble en tetracloruro de carbono y cloro-
(PM: 133,4) - CH3CCl3 - Líquido incoloro, pesado. formo.
Insoluble en agua pero algo higroscópico. Miscible Intervalo de fusión <260> - Entre 59 y 63 °C,
con alcohol, éter y cloroformo. con un intervalo de fusión no mayor de 2 °C.
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) - 0HWLOQLWURLPLGD]RO - C4H5N3O2 -
Destilar 100 ml: la diferencia entre las temperaturas (PM: 127,1) - Polvo blanco a amarillo pálido.
observadas cuando se destilan 1 y 95 ml no excede Intervalo de fusión - Entre 252 y 254 ºC.
16 °C. Su temperatura de ebullición a una presión
de 760 mm Hg es aproximadamente 74 °C. 0HWLOSDUDEHQR - (Ester del ácido metil
Densidad relativa <160> - Entre 1,312 y 1,321. p-hidroxibenzoico) - C8H8O3 - (PM: 152,1) -
Acidez - Agregar 25 ml a 25 ml de alcohol neu- Emplear un reactivo analítico apropiado.
tralizado, frente al azul de bromotimol (SR), con 0HWLOSHQWDQRQD- C6H12O - (PM: 100,2) -
hidróxido de sodio 0,02 N. Mezclar suavemente y Emplear un reactivo analítico apropiado.
titular con hidróxido de sodio 0,020 N (SV): no se
requiere más de 0,50 ml para restaurar el color azul 0HWLOSHQWDQRQD - (Isobutil Metil Cetona) -
(0,001 % como HCl). (CH3)2CHCH2COCH3 - (PM: 100,2) - Emplear un
Residuo de evaporación - Evaporar 76 ml en un reactivo analítico apropiado.
baño de vapor y secar a 105 °C durante 1 hora: el 0HWLOSURSDQROVer Alcohol terbutílico.
residuo no pesa más de 1 mg (aproximadamente
0HWLOSURSLOSURSDQRGLRO - C7H16O2 -
0,001 %).
(PM: 132,2) - Cristales blancos, que funden
0HWLOHQELVDFULODPLGD - aproximadamente a 58 °C.
(N,N-metilendipropenamida) - C7H10N2O2 -
0HWLOVXOIy[LGR - (Dimetilsulfóxido) - (CH3)2SO
(PM:154,2) - Polvo fino y casi blanco. Poco solu-
- (PM: 78,1) - Emplear un reactivo analítico apro-
bleen agua; soluble en alcohol.
piado.
Punto de fusión - Funde con descomposición
por encima de los 300 °C. p0HWR[LEHQ]DOGHKtGR - Ver Anisaldehído.
20HWLOHVWURQD - C19H24O2 - (PM: 284,4) - 0HWy[LGR GH VRGLR - CH3ONa - (PM: 54,0) -
Emplear uno de grado apropiado. Polvo blanco fino. Reacciona violentamente con
agua con desprendimiento de calor. Soluble en narla hasta una altura de 15 cm. Pasar 500 ml del
alcohol y metanol. miristato de isopropilo a través de la columna, em-
Valoración - Transferir aproximadamente plear una leve presión positiva para mantener un
220 mg a un erlenmeyer previamente pesado, con caudal constante y emplear el eluato recolectado
tapón de vidrio y pesar exactamente. Disolver la directamente en el procedimiento de ensayo de
muestra en aproximadamente 10 ml de metanol, esterilidad.
luego agregar 100 ml de agua lentamente, con agi-
0LULVWLFLQD - (5-Alil-1-metoxi-2,3-
tación. Agregar fenolftaleína (SR) y titular con
metilendioxibenceno) - C11H12O3 - (PM: 192,2) -
ácido clorhídrico 0,1 N (SV) hasta punto final inco- Líquido oleoso, incoloro, prácticamente insoluble
loro. Cada mililitro de ácido clorhídrico 0,1 N (SV)
en agua; poco soluble en etanol; soluble en éter;
equivale a 5,402 mg de CH3ONa. Contiene no me-
miscible en tolueno y xileno.
nos de 98,0 %.
Densidad relativa <160> - Aproximadamente
0HWR[LHWDQRO - (Etilenglicol monometil éter; 2- 1,144, a 20 °C.
Metoxietanol) - CH3OCH2CH2OH - (PM: 76,1) - Índice de refracción <230> - Aproximadamente
Líquido transparente, incoloro a ligeramente amari- 1,540, a 20 °C.
llo. Miscible con agua, acetona, alcohol, éter, dime- Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
tilformamida y glicerina. Índice de refracción: Entre 276 y 277 °C.
aproximadamente 1,420. Precaución - Es venenoso; 0ROLEGDWR GH VRGLR - Na2MoO4 . 2H2O -
emplear con ventilación apropiada. (PM: 242,0) - Emplear un reactivo analítico apro-
Densidad relativa <160> - Entre 0,960 y 0,964.
piado.
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
Destilar 100 ml: 95 % destila entre 123 y 126 °C. 0ROLEGDWRGHDPRQLR - (NH4)6Mo7O24 . 4H2O -
Acidez - A 62 ml (60 g) agregar fenolftaleí- (PM: 1.235,9) - Emplear un reactivo analítico apro-
na (SR) y titular con hidróxido de potasio alcohóli- piado.
co 0,1 N: no se requiere más de 1 ml para producir 0RQRFORUXUR GH LRGR - ICl - (PM: 162,4) -
un punto final rosado que persiste no menos de Emplear un reactivo analítico apropiado.
15 segundos (0,01 % como CH3COOH).
Ensayo de dilución - Medir 10 ml en una probe- 0RQRHWDQRODPLQD - C2H7NO - (PM: 61,1) -
ta de 100 ml con tapón de vidrio. Diluir con agua a Líquido transparente, incoloro a débilmente amari-
100 ml, insertar el tapón y mezclar: no se observa llo, viscoso, con olor amoniacal. Miscible con agua,
opalescencia o turbidez después de que la mezcla se metanol y acetona. Funde aproximadamente a 9 °C.
ha dejado reposar a temperatura ambiente durante 2 Valoración - Pesar exactamente un pesafiltro
horas. con tapón de vidrio que contiene 25 ml de agua.
Agua <120> - Titulación volumétrica directa. Agregar aproximadamente 2 g de muestra, tapar, y
No más de 0,05 %. nuevamente pesar con exactitud. Agregar 3 gotas de
una mezcla indicadora preparada agregando
0HWR[LLWLURVLQD C10H13NO4H2O - (PM: 5 volúmenes de verde de bromocresol (SR) a
229,2) – Polvo amarillo o blanco. 6 volúmenes de rojo de metilo (SR) (preparada a
0LULVWDWR GH LVRSURSLOR - C17H34O2 - partir de clorhidrato de rojo de metilo) y titular con
(PM: 270,5) - Emplear Miristato de isopropilo. Para ácido clorhídrico 1 N (SV). Cada mililitro de ácido
emplear como solvente en los procedimientos de clorhídrico 1 N (SV) equivale a 61,08 mg de
ensayo para esterilidad, el miristato de isopropilo se C2H7NO. Contiene no menos de 99 %.
ajusta a la siguiente especificación adicional: Índice de refracción <230> - Entre 1,453 y
pH del extracto acuoso - Transferir 100 ml a un 1,455, a 20 °C.
tubo de centrífuga de 250 ml, agregar 10 ml de Residuo de ignición <270> - Evaporar 20 g en
agua, cerrar el tubo con un cierre apropiado y agitar un baño de vapor hasta sequedad y calcinar el resi-
vigorosamente durante 60 minutos. Centrifugar la duo a 800 ± 25 °C durante 15 minutos: el residuo
mezcla a 1.800 rpm durante 20 minutos, aspirar la no pesa más de 1 mg (0,005 %).
fase superior (miristato de isopropilo) y determinar 0RQy[LGR GH SORPR - (Litargirio) - PbO -
el pH de la fase acuosa: el pH no es menor de 6,5. (PM: 223,2) - Polvo amarillo pesado, amarillento o
Si el miristato de isopropilo no se ajusta al ensa- rojizo. Insoluble en agua y alcohol; soluble en ácido
yo de pH del extracto acuoso se puede adecuar para acético, ácido nítrico diluido y en soluciones calien-
emplearse en procedimientos de ensayo de esterili- tes de hidróxidos alcalinos fijos.
dad del siguiente modo: Valoración - Pesar exactamente 300 mg, some-
Empleando una columna de vidrio de ter a ignición rápidamente en una mufla a
20 cm × 20 mm, agregar alúmina activada y apiso-
600 ± 50 °C y disolver mediante calentamiento con filtrado obtenido en el ensayo de Insolubilidad en
10 ml de agua y 1 ml de ácido acético glacial. Diluir ácido acético pasando sulfuro de hidrógeno a través
con 75 ml de agua, calentar a ebullición, agregar del filtrado, filtrar y lavar el precipitado con 20 ml
50,0 ml de dicromato de potasio 0,1 N (SV) y ca- de agua. A la mitad del filtrado y lavados mezcla-
lentar a ebullición durante 2 a 3 minutos. Enfriar, dos agregar 5 gotas de ácido sulfúrico, evaporar
transferir a un matraz aforado de 200 ml con la hasta sequedad y someter a ignición a 800 ± 25 °C
ayuda de agua, completar a volumen con agua, durante 15 minutos: el residuo no pesa más de 5
mezclar y dejar sedimentar. Retirar 100,0 ml del mg (0,5 %).
líquido transparente, y transferir a un erlenmeyer Sustancias volátiles - Pesar exactamente 5 g y
con tapón de vidrio. Agregar 10 ml de ácido sulfú- calentar fuertemente en un crisol de porcelana cu-
rico diluido y 1 g de ioduro de potasio, insertar el bierto: no pierde más de 2,0 % de su peso.
tapón, mezclar suavemente y dejar reposar durante
0RUIROLQD - (Tetrahidro-1,4-oxazina) - C4H9NO
10 minutos. Titular el iodo liberado, que representa
- (PM: 87,1) - Emplear un reactivo analítico apro-
el exceso de dicromato, con tiosulfato de sodio 0,1 piado.
N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) cerca del
punto final. Cada mililitro de dicromato de potasio 0XFtODJR GH DOPLGyQ - Triturar 0,5 g de al-
0,1 N equivale a 7,440 mg de PbO. Contiene no midón o almidón soluble en 5 ml de agua y agregar
menos de 98 %. con agitación continua a suficiente agua para pro-
Insolubilidad en ácido acético - Disolver 2 g en ducir aproximadamente 100 ml. Someter a ebulli-
30 ml de ácido acético glacial diluido (1 en 2), ción durante algunos minutos, enfriar y filtrar.
calentar a ebullición suavemente durante 5 minutos, Preparar en el momento de su uso.
filtrar, lavar el residuo con ácido acético diluido y Produce coloración azul con iodo libre en pre-
secar a 105 °C durante 2 horas: el residuo no pesa sencia de ioduro soluble.
más de 10 mg (0,5 %).
Sustancias no precipitadas por sulfuro de
hidrógeno - Precipitar completamente el plomo del
1
1DIWDOHQR - C10H8 - (PM: 128,2) - Placas 1DIWRO - (Betanaftol) - C10H7OH - (PM: 144,2)
prismáticas monoclínicas o escamas blancas o pol- - Laminillas blancas o polvo cristalino con un olor
vo. Una solución en éter de petróleo presenta una débil característico. Se decolora por exposición a la
fluorescencia púrpura bajo la luz de una lámpara de luz. Poco soluble en agua; soluble en alcohol, éter,
arco de mercurio. Insoluble en agua; muy soluble cloroformo y en soluciones de hidróxidos alcalinos.
en éter y en aceites fijos y volátiles; fácilmente Intervalo de fusión <260> - Entre 121 y 123 °C.
soluble en benceno, disulfuro de carbono, tetraclo- Solubilidad en alcohol - Una solución de 1 g en
ruro de carbono, cloroformo, aceite de oliva y to- 10 ml de alcohol es completa e incolora o práctica-
lueno; soluble en alcohol y metanol. Sublima a mente incolora.
temperaturas por encima de la temperatura de fu- Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
sión. No más de 0,05 %.
Intervalo de fusión <260> - Entre 80 y 81 °C. Acidez - Agitar ocasionalmente 1 g con 50 ml de
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) - agua durante 15 minutos y filtrar: el filtrado es
Entre 217 y 219 °C. neutro al tornasol.
1-Naftol - Calentar a ebullición 100 mg con
1DIWDOHQRGLRO - (Naftoresorcinol) -
10 ml de agua hasta disolución, enfriar y filtrar.
(PM: 160,2) - C10H6(OH)2 - Cristales o polvo blan-
co grisáceo a tostado. Fácilmente soluble en meta- Agregar al filtrado 0,3 ml de hidróxido de sodio 1 N
nol; moderadamente soluble en agua, alcohol y éter. y 0,3 ml de iodo 0,1 N: no se produce color violeta.
Sustancias insolubles en amoníaco (naftaleno,
Intervalo de fusión <260> - Entre 122 y 127 °C.
etc.) - Agitar 500 mg con 30 ml de amoníaco (SR):
Solubilidad en metanol - Disolver 500 mg en
el 2-naftol se disuelve completamente y la solución
50 ml de metanol: la solución es transparente y
completa. presenta un color no más oscuro que un amarillo
pálido.
1DIWDOHQRGLRO - (2,7-Dihidroxinaftaleno) -
C10H8O2 - (PM: 160,2) - Sólido cristalino o polvo 1DIWROEHQFHtQD - (D-Naftolbenceína; Fenil
casi blanco a amarillo. Se disuelve en acetona. bis(4-hidroxinafti)metanol) - C27H20O3 -
Intervalo de fusión <260> - Entre 187 y 191 °C. (PM: 392,5) - Polvo rojo pardo o cristales pardo
negro, soluble en ácido acético glacial y alcohol,
1DIWLODPLQD - (1-Naftilamina) - C10H9N - prácticamente insoluble en agua.
(PM: 143,2) - Polvo cristalino blanco que toma
color rosa por exposición a la luz y al aire. Poco p-1DIWROEHQFHtQD - C27H18O2 - (PM: 374,4) -
soluble en agua; fácilmente soluble en alcohol y Polvo marrón rojizo. Emplear un reactivo de grado
éter. Conservar en envase inactínico. apropiado.
Punto de fusión - Aproximadamente a 51 °C. 1DIWROGLVXOIRQDWRGHSRWDVLR - (2-Naftol-6,8-
1DIWLOHWLOHQGLDPLQD FORUKLGUDWR GH - (Dihi- dipotasio disulfonato) - C10H6K2O7S2 - (PM: 380,4)
drocloruro de N-(1-naftil)etilendiamina) - - Emplear uno de grado apropiado.
C12H16Cl2N2 - (PM: 259,2) - Polvo blanco o blan- E1DIWRTXLQRQDVXOIRQDWR VyGLFR -
co amarillento; soluble en agua, poco soluble en C10H5NaO5S - (PM: 260,2) - Cristales o polvo cris-
alcohol. talino amarillo a amarillo anaranjado. Soluble en
1DIWRO - (Alfanaftol) - C10H7OH - (PM: 144,2) agua; insoluble en alcohol.
- Cristales o polvo cristalino algo rosado o incoloro, Pérdida por secado <680> - Secar al vacío
de olor característico. Insoluble en agua; soluble en aproximadamente a 50 °C: no pierde más de 2,0 %
alcohol y éter. de su peso.
Intervalo de fusión <260> - Entre 95 y 97 °C. Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
Solubilidad - 1 g se disuelve en alcohol dando Someter a ignición 1 g de muestra seca con 3 ml de
una solución transparente e incolora o casi incolora. ácido sulfúrico: el residuo pesa entre 265 y 280 mg
Acidez - Agitar ocasionalmente 1 g con 50 ml de (entre 26,5 y 28,0 %).
agua durante 15 minutos y filtrar: el filtrado es 1DIWRUHVRUFLQRO - (1, 3-Dihidroresorcinol) -
neutro al tornasol. C10H8O2 - (PM: 160,2) - Emplear uno de grado
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - apropiado.
No más de 0,05 %.
1DUDQMD * - (sal sódica del ácido betanaftol
azobenceno disulfónico) - (PM: 452,4) -
C6H5N:NC10H4(OH)(SO3Na)2-2,6,8 - Polvo de Intervalo de fusión <260> - Entre 240 y 245 °C,
color anaranjado a rojo ladrillo o cristales de color con descomposición, en un baño precalentado a
rojo oscuro. Fácilmente soluble en agua, proporcio- 220°C.
nando una solución amarillo anaranjada; poco solu- Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
ble en alcohol; insoluble en éter y cloroformo. El Inapreciable, determinado sobre 100 mg.
agregado de ácido tánico (SR) a una solución 1 en Sensibilidad - Preparar una solución de 10 mg
500 no produce precipitación (color ácido). El de ácido aminoacético en 25 ml de agua. A 1 ml de
agregado de ácido clorhídrico a una mezcla de esta solución agregar una solución de 50 mg de
500 mg de polvo de cinc y 10 ml de una solución 1 acetato de sodio en 2 ml de agua luego agregar
en 500 produce decoloración. Cuando se filtra, el 0,2 ml de una solución de 5 mg de ninhidrina en
filtrado incoloro, por exposición al aire, no recupera 1 ml de agua y calentar a ebullición la mezcla du-
su color original (presencia de grupo azo). Cuando rante 1 a 2 minutos: se produce un color violeta que
se calienta, el Naranja G no produce deflagración se vuelve intenso luego de unos pocos minutos en
(distinción con colorantes nitro). El agregado de reposo.
cloruro de calcio o bario (SR) a una solución con- 1tTXHO - Ni - (PA: 58,69) - Emplear uno de gra-
centrada de Naranja G produce un precipitado cris-
do apropiado.
talino coloreado. El agregado de ácido clorhídrico a
una solución 1 en 500 no produce cambio; el agre- 1LWUDWRFpULFRDPyQLFR - Ce(NO3)4 . 2NH4NO3
gado de hidróxido de sodio (SR) a una solución - (PM: 548,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
similar produce un color entre rojo amarillento y piado.
rojo profundo pero ningún precipitado. El Naran- 1LWUDWR GH DPRQLR - NH4NO3 - (PM: 80,0) -
ja G se disuelve en ácido sulfúrico con un color Emplear un reactivo analítico apropiado.
anaranjado a rojo amarillento. No se produce
ningún cambio en el color al diluir esta solución 1LWUDWR GH EDULR - Ba(NO3)2 - (PM: 261,3) -
con agua. Emplear un reactivo analítico apropiado.
1LFRWLQDPLGDDGHQLQDGLQXFOHyWLGR - Emplear 1LWUDWR GH FDGPLR - Cd(NO3)2 . 4H2O -
uno de grado apropiado. (PM: 308,5) - Cristales incoloros, higroscópicos.
Aptitud - Cuando se emplea para el ensayo de Muy soluble en agua; soluble en alcohol.
acetaldehído, determinar si la pendiente que se Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
obtiene del gráfico de absorbancia en función de la más de 1 mg, determinado sobre 20 g (0,005 %).
concentración es apropiada empleando acetaldehído Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no presen-
reactivo, la absorbancia del blanco del reactivo no ta más de 0,01 mg de Cl (0,001 %).
debe ser mayor de 0,01. Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método II. Di-
solver 12 g en 25 ml de ácido clorhídrico y evaporar
1LFRWLQDPLGD DGHQLQD GLQXFOHyWLGR IRVIDWR en un baño de vapor hasta sequedad. Agregar 15 ml
DGHQRVLQDccWULIRVIDWR PH]FOD GH - Emplear uno de ácido clorhídrico y nuevamente evaporar hasta
de grado apropiado. sequedad. Disolver el residuo en 100 ml de agua,
Aptitud - Cuando se emplea en la valoración de filtrar y agregar 1 ml de ácido clorhídrico: el resi-
lactulosa, determinar si la pendiente que se obtiene duo pesa no más de 1,0 mg más que el residuo
del gráfico de absorbancia en función de la concen- obtenido con un blanco (0,003 %).
tración es apropiada, empleando Lactulosa SR-FA, Cobre - Disolver 500 mg en 10 ml de agua,
la absorbancia del blanco del reactivo no debe ser agregar 10 ml de Solución de citrato de amonio (ver
mayor de 0,020. El reactivo generalmente disponi- 600. Límite de plomo) y ajustar la reacción a pH
ble contiene 64 mg de nicotinamida adenina dinu- aproximadamente 9 mediante el agregado de
cleótido fosfato y 160 mg de adenosina-5c-trifosfato hidróxido de amonio 1 N (aproximadamente 30 ml).
por vial. La mezcla está estabilizada y posee regu- Agregar 1 ml de solución de dietilditiocarbamato de
ladores de pH. Para uso en la valoración de lactulo- sodio (1 en 1000) y mezclar. Agregar 5 ml de alco-
sa se diluye con agua a 100 ml. hol amílico, agitar durante aproximadamente
1LQKLGULQD - (Tricetohidrindeno monohidrato) - 1 minuto y dejar que las fases se separen: cualquier
C9H4O3 . H2O - (PM: 178,2) - Cristales blancos a color amarillo en la fase de alcohol amílico no es
blanco pardusco o polvo cristalino. Soluble en agua más oscuro que el de un blanco al cual se ha agre-
y alcohol; poco soluble en éter y cloroformo. Cuan- gado 0,01 mg de Cu (0,002%).
do se calienta por encima de 100 °C, se torna rojo. Hierro - Disolver 1 g en 15 ml de agua, agregar
Almacenar en envase inactínico. 2 ml de ácido clorhídrico y calentar a ebullición
durante 2 minutos. Enfriar, agregar aproximada-
mente 30 mg de persulfato de amonio y 15 ml de
una solución de tiocianato de potasio en alcohol 1LWUDWR GH WRULR - Th(NO3)4 . 4H2O -
butílico (preparada disolviendo 10 g de tiocianato (PM: 552,1) - Emplear un reactivo analítico apro-
de potasio en 10 ml de agua, calentando la solución piado.
a aproximadamente 30 °C, diluyendo con alcohol
1LWUDWR IpUULFR - Fe(NO3)3 . 9H2O -
butílico a 100 ml y agitando hasta clarificar). Agitar
(PM: 404,0) - Emplear un reactivo analítico apro-
vigorosamente durante 30 segundos y dejar que las
piado.
fases se separen: cualquier color rojo en la fase
alcohólica clara no es más oscuro que el de un blan- 1LWUDWR PHUF~ULFR - Hg(NO3)2 . H2O -
co al cual se ha agregado 0,01 mg de Fe (0,001 %). (PM: 342,6) - Emplear un reactivo analítico apro-
Plomo - Disolver 1,0 g en 10 ml de agua, agre- piado.
gar 0,2 ml de ácido acético glacial y filtrar si fuera 1LWUDWR PHUFXULRVR - HgNO3 - (PM: 280,6 ) -
necesario. A 7 ml de agua, agregar 0,2 ml de ácido Emplear un reactivo analítico apropiado.
acético glacial y 3 ml de Solución de plomo están-
dar (ver 600. Límite de plomo) y mezclar para obte- 1LWUDWR GH WRULR - Th(NO3)4 . 4H2O -
ner un blanco. Luego agregar a cada solución (PM: 552,1) - Emplear un reactivo analítico apro-
1,0 ml de solución de cromato de potasio (1 en 10) piado.
y mezclar: luego de 5 minutos, la solución muestra 1LWULWR GH SRWDVLR - KNO2 - (PM: 85,1) - Em-
no es más turbia que el blanco (0,003 %). plear un reactivo analítico apropiado.
Sustancias no precipitadas por sulfuro de
hidrógeno - Disolver 2 g en 145 ml de agua, agre- 1LWULWRGHVRGLR - NaNO2 - (PM: 69,0) - Emple-
gar 5 ml de ácido sulfúrico (1 en 10), calentar a ar un reactivo analítico apropiado.
ebullición y pasar una corriente rápida de sulfuro de cc1LWURDFHWRIHQRQD - (p’-Nitroacetofenona) -
hidrógeno a través de la solución a medida que ésta C8H7NO3 - (PM: 165,2) - Cristales amarillos.
se enfría. Filtrar y, a 75 ml del filtrado transparente Valoración - Inyectar una alícuota apropiada de
agregar 0,25 ml de ácido sulfúrico. Evaporar hasta la muestra en éter (aproximadamente 0,5 µl) en un
sequedad y someter a ignición suavemente: el resi- cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
duo no pesa más de 1 mg (0,1 %). equipado con un detector de conductividad térmica
1LWUDWR GH FDOFLR - Ca(NO3)2 . 4H2O - y una columna de acero inoxidable 1,8 m × 4 mm
(PM: 236,2) - Emplear un reactivo analítico apro- con fase estacionaria constituida por aceite de dime-
piado. tilpolisiloxano al 10 % sobre un soporte constituido
por tierra silícea para cromatografía de gases la cual
1LWUDWRGHFLUFRQLOR - Ver Circonilo, nitrato de. ha sido calcinada mezclando diatomea con Na2CO3
1LWUDWR GH FREDOWR - Co(NO3)2 . 6H2O - y calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra silícea se
(PM: 291,0) - Emplear un reactivo analítico apro- lava con ácido luego se lava con agua hasta neutra-
piado. lidad pero no se lava con bases. La tierra silícea
puede ser silanizada al tratarla con un agente como
1LWUDWRGHOLWLR - LiNO3 - (PM: 69,0) - Cristales dimetildiclorosilano para bloquear los grupos sila-
incoloros. Emplear uno de grado apropiado cuyo noles superficiales.] Mantener el inyector y el de-
rótulo declare que no contiene menos de 97,0 %. tector aproximadamente a 200 y 300 °C, respecti-
1LWUDWR GH PDJQHVLR - Mg(NO3)2 . 6H2O - vamente. La temperatura de la columna se mantiene
(PM: 256,4) - Emplear un reactivo analítico apro- a 170 °C y se programa un ascenso de 3 °C por
piado. minuto hasta alcanzar 220 °C. Se emplea helio
como gas transportador. El área del pico de
1LWUDWRGHSODWD - AgNO3 - (PM: 169,9) - Em-
plear un reactivo analítico apropiado. 4c-nitroacetofenona no es menor de 97 % del área
total.
1LWUDWR GH SORPR - Pb(NO3)2 - (PM: 331,2) - Intervalo de fusión <260> - Entre 78 y 80 °C.
Emplear un reactivo analítico apropiado.
o1LWURDQLOLQD - NO2C6H4NH2 - (PM: 138,1) -
1LWUDWRGHSRWDVLR - KNO3 - (PM: 101,1) - Em- Cristales amarillo anaranjados. Poco soluble en
plear un reactivo analítico apropiado. agua fría; soluble en agua caliente; fácilmente solu-
1LWUDWR GH VRGLR - NaNO3 - (PM: 85,0) - Em- ble en alcohol y cloroformo. Forma sales solubles
plear un reactivo analítico apropiado. en agua con ácidos minerales.
Intervalo de fusión <260> - Entre 71 y 72 °C.
1LWUDWR GH WHWUDPHWLODPRQLR - (CH3)4NNO3 -
(PM: 136,2) - Cristales blancos. Fácilmente soluble p1LWURDQLOLQD - NO2C6H4NH2 - (PM: 138,1) -
en agua. Polvo amarillo brillante, cristalino. Insoluble en
agua; soluble en alcohol y éter.
Intervalo de fusión <260> - Entre 146 y 148 °C. agua; soluble en alcohol, éter, tetracloruro de car-
Solubilidad - Porciones separadas de 1 g se di- bono y ácido acético.
suelven en 30 ml de alcohol y en 40 ml de éter, Valoración - Transferir aproximadamente
respectivamente, dando soluciones transparentes o 250 mg, previamente secados sobre gel de sílice
prácticamente transparentes. hasta peso constante y exactamente pesados, a un
Residuo de ignición (ensayo para reactivos) - No erlenmeyer con tapón de vidrio y disolver en 10 ml
más de 0,2 %. de solución de hidróxido de sodio (1 en 10). Enfriar
1LWUREHQFHQR - C6H5NO2 - (PM: 123,1) - Em- la solución en un baño de hielo, agregar ácido sulfú-
plear un reactivo analítico apropiado. rico diluido (1 en 6) hasta que se forme un precipi-
tado leve, permanente y la solución sea algo ácida.
(p1LWUREHQFLO) SLULGLQD - C12H10N2O2 - Agregar 3 g de ioduro de potasio, agitar hasta disol-
(PM: 214,2) - Cristales amarillos. Soluble en aceto- ver, agregar 20 ml de ácido sulfúrico diluido (1 en
na. 6), de inmediato insertar el tapón en el erlenmeyer y
Materia insoluble - Disolver 1 g en 10 ml de dejar reposar en la oscuridad durante 2 horas. Titu-
acetona: la solución es transparente y completa. lar el iodo liberado con tiosulfato de sodio
Intervalo de fusión <260> - Entre 71 y 74 °C. 0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) cerca
1LWUREDQ]DOGHKtGR - (2-Nitrobenzaldehído) - del punto final. Realizar una determinación con un
C7H5NO3 - (PM: 151,1) - Agujas amarillas; fácil- blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
mente soluble en alcohol, soluble en éter, poco mililitro de tiosulfato de sodio 0,1 N equivale a
soluble en agua. 8,66 mg de C10H7NO2. Contiene no menos de
Punto de fusión <260> - Aprox. 42 °C. 95,0 %.
Intervalo de fusión <260> - Entre 109 y 111 °C.
1LWURIHQDQWUROLQD - C12H7N3O2 - Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
(PM: 225,2) - Polvo blanco, inodoro. Soluble en No más de 0,2 %.
agua.
Intervalo de fusión <260> - Entre 198 y 200 °C. 1RQDGHFDQR - C19H40 - (PM: 268,5) - Sólido
Aptitud como indicador redox - Disolver 25 mg blanco.
en un volumen mínimo de ácido sulfúrico diluido, Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
agregar 10 mg de sulfato ferroso y diluir con agua a un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
100 ml: la solución es color rojo profundo y presen- equipado con un detector de conductividad térmica
ta un máximo de absorción a 510 nm. A 1,0 ml de y una columna de acero inoxidable de
la solución agregar 1,0 ml de sulfato cérico 0,01 M: 1,8 m × 3 mm con una fase estacionaria constituida
desaparece el color rojo. por goma de dimetilpolisiloxano al 5 % sobre un
soporte constituido por tierra silícea para cromato-
1LWURIHUULFLDQXURGHVRGLR - (Nitroprusiato de grafía de gases la cual ha sido calcinada mezclando
sodio) - Na2Fe(NO)(CN)5 . 2H2O - (PM: 298,0) - diatomea con Na2CO3 y calcinada a 900 °C
Emplear un reactivo analítico apropiado. [NOTA: la tierra silícea se lava con ácido y alcali.
1LWURPHWDQR - CH3NO2 - (PM: 61,0) - Líquido La tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con
aceitoso. Soluble en agua, en alcohol, en éter y en un agente como dimetildiclorosilano para bloquear
dimetilformamida. Densidad relativa: aproximada- los grupos silanoles superficiales.] Mantener el
mente 1,132. Las soluciones en agua son ácidas al inyector y el detector aproximadamente a 330 y
tornasol. 300 °C, respectivamente. La temperatura del horno
Índice de refracción <230> - Aproximadamente se mantiene inicialmente en 190 °C y se programa
1,380, a 22 °C. un aumento gradual hasta alcanzar 250 °C. Se em-
Intervalo de ebullición - Entre 101 y 103 °C. plea helio como gas transportador. El área del pico
Residuo en evaporación - Inapreciable, determi- de nonadecano no es menor de 99 % del área total.
nado sobre 50 ml. Intervalo de fusión <260> - Entre 31,5 y
33,5 °C.
1LWURSUXVLDWR GH VRGLR (Pentosia-
no-nitrosilferrato (III) de disodio dihidratato) - DL1RUOHXFLQD (Ácido
Na[Fe(CN)5NO] . H2O - (PM: 298,0) - Polvo o DL-2-aminohexanoico) - C6H13NO2 - (PM: 131,2)
cristales paro rojizos. Fácilmente soluble en agua; - Cristales brillantes. Soluble en soluciones ácidas;
poco soluble en alcohol. moderadamente soluble en agua y alcohol.
1LWURVRQDIWRO - C10H7NO2 - (PM: 173,2) -
Polvo marrón a marrón amarillento. Insoluble en
2
2FWDGHFLOVLODQR - Este reactivo se forma in situ Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
mediante reacción del soporte de columnas con un un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
agente silanizante apropiado, como por ej., el octa- equipado con un detector de ionización a la llama y
decil triclorosilano. una columna capilar recubierta con una capa 1 µm
de fase estacionaria constituida por goma de dime-
2FWDQRIHQRQD - C14H20O - (PM: 204,3) - Líqui-
tilpolisiloxano. Mantener el inyector y el detector
do incoloro.
aproximadamente a 300 °C, respectivamente. La
Valoración -
Fase móvil - Acetonitrilo y agua (7:3), filtrado y temperatura de la columna se mantiene a 230 °C y
se programa un ascenso de 10 °C por minuto hasta
desgacificado.
280 °C. Se emplea helio como gas transportador. El
Procedimiento - Inyectar aproximadamente
área del pico de C19H36O2 no es menor de 99 % del
20 µl en un cromatógrafo de líquidos apropiado
área total.
(ver 100. Cromatografía) equipado con un detector
ultravioleta a 254 nm y una columna de Índice de refracción <230> - 1,452, a 20 °C.
15,0 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida 2UFLQRO - (5-Metilresorcinol) - C7H8O2 . H2O -
por octadecil silano, químicamente unido a partícu- (PM: 142,2) - Cristales de color blanco a canela
las de sílice porosa o micropartículas cerámicas, de brillante.
3 a 10 µm de diámetro. El caudal es de aproxima- Valoración - Transferir aproximadamente
damente 2 ml por minuto. El área del pico C14H20O 60 mg, exactamente pesados, a un matraz aforado
no es menor de 99 % del área total. de 100 ml, disolver en metanol, completar a volu-
Índice de refracción <260> - 1,5043, a 20 °C. men con metanol y mezclar. Transferir 5,0 ml de
esta solución a un matraz aforado de 50 ml, comple-
2FWDQRVXOIRQDWR GH VRGLR - C8H17NaO3S -
tar a volumen con metanol y mezclar. Determinar la
(PM: 216,3) - Emplear uno de grado apropiado.
absorbancia de la solución en celdas de 1 cm, a la
(p-ter2FWLOIHQR[L)QRQDHWR[LHWDQRO - (Polieti- longitud de onda de máxima absorción, aproxima-
lenglicol fenil nonil éter) - C34H62O11 - (PM: 646,9) damente 273 nm, con un espectrofotómetro apro-
- Emplear uno de grado apropiado. piado, empleando metanol como blanco. A partir de
(p-ter2FWLOIHQR[L)SROLHWR[LHWDQRO - Emplear la absorbancia observada, calcular la absortividad
uno de grado apropiado. (ver 470. Espectrofotometría ultravioleta y visible):
la absortividad no es menor de 13,2, correspondien-
2FWLO VXOIDWR VDO VyGLFD - C8H17O4SNa - te a no menos de 98 % de C7H8O2.H2O.
(PM: 232,3) - Polvo blanco. Intervalo de fusión <260> - Entre 58 y 61 °C.
Solubilidad - 2 g se disuelven en 100 ml de
agua. 2UWRIHQDQWUROLQD - Ver 1,10-Fenantrolina.
Intervalo de fusión <260> - Entre 195 y 197 °C, 2[DODWR GH DPRQLR - (NH4)2C2O4 . H2O -
con descomposición. (PM: 142,1) - Emplear un reactivo analítico apro-
2FWR[LQRO - Ver Agente humectante no ióni- piado.
co. 2[DODWR GH VRGLR - Na2C2O4 - (PM: 134,0) -
2FWR[LQRO - (D->4-(1,1,3,3- Emplear un reactivo analítico apropiado.
tetrametilbutil)fenil@-w-hidroxipropil(oxietileno)) -
2[LGLSURSLRQLWULOR - O(CH2CH2CN)2 -
C34H62O11 - (PM: 647,0) - Líquido transparente, (PM: 124,1) - Líquido transparente, incoloro a algo
amarillo pálido, viscoso, miscible con acetona, agua amarillo. Índice de refracción: aproximadamente
y alcohol. Soluble en tolueno. Conservar en enva- 1,446, a 20 °C.
se hermético. Intervalo de ebullición - Entre 174 y 176 °C, a
10 mm Hg.
2OHDPLGD - ((z)-Octadec-9-enamida) -
C18H35NO (PM: 281,5) - Polvo o granulado blanco Ï[LGRGHDOXPLQLRODYDGRFRQiFLGR- (Alúmi-
o amarillento. Prácticamente insoluble en agua; na especialmente preparada para emplear en análi-
muy soluble en cloruro de metileno; soluble en sis cromatográfico) - Polvo blanco o gránulos finos
etanol. prácticamente blancos. Muy higroscópico. Almace-
Punto de fusión - Aproximadamente a 80 °C. nar en envases de cierre perfecto.
2OHDWR GH PHWLOR - C19H36O2 - (PM: 296,5) - pH - El pH de una pasta espesa bien mezclada
de 5 g en 150 ml de agua libre de amoníaco, luego
Líquido incoloro.
de 10 minutos en reposo, se encuentra entre 3,5 y equipado con un detector de ionización a la llama y
4,5. una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
Pérdida por ignición - Pesar exactamente 1 g y con una capa de 1 µm de fase estacionaria consti-
calcinar, preferentemente en una mufla, entre 800 y tuida por goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
825 °C, hasta peso constante: no pierde más de inyector y el detector aproximadamente a 150 y 300
5,0 % de su peso. °C, respectivamente. La temperatura de la columna
Sílice - Fundir 500 mg con 10 g de bisulfato de se mantiene en 50 °C y se programa un ascenso de
potasio durante 1 hora en un crisol de platino, en- 10 °C por minuto hasta 200 °C. Se emplea helio
friar y disolver en agua caliente: no se obtiene más como gas transportador. El área del pico C6H10O no
que una cantidad pequeña de materia insoluble. es menor de 98 % del área total.
Aptitud para adsorción cromatográfica - Disol- Índice de refracción <230> - Entre 1,443 y
ver 50 mg de o-nitroanilina en benceno para obtener 1,447, a 20 °C.
50,0 ml. Diluir 10 ml de la solución resultante con
Ï[LGR GH SODWD - Ag2O - (PM: 231,7) - Polvo
benceno a 100,0 ml y mezclar (Solución A). pesado negro pardusco, inodoro. Se descompone
De inmediato, pesar rápido aproximadamente 2 lentamente por exposición a la luz. Absorbe dióxido
g (± 0,005) de muestra en un pesafiltro y transferir-
de carbono cuando se humedece. Prácticamente
lo a un tubo de ensayo seco, con tapón de vidrio.
insoluble en agua; fácilmente soluble en ácido nítri-
Agregar 20,0 ml de Solución A, tapar, agitar vigoro-
co diluido y amoníaco; insoluble en alcohol. Alma-
samente durante 3 minutos y dejar sedimentar.
cenar en envases bien cerrados; no exponer a vapo-
Transferir 10 ml de la solución sobrenadante trans- res de amoníaco ni a sustancias fácilmente oxida-
parente a un matraz aforado de 100 ml, completar a bles.
volumen con benceno y mezclar (Solución B). De-
Valoración - Disolver aproximadamente 500
terminar las absorbancias de las Soluciones A y B, a
mg, previamente secados a 120 °C durante 3 horas
395 nm, con un espectrofotómetro apropiado, em-
y exactamente pesados, en una mezcla de 20 ml de
pleando benceno como blanco. Calcular la cantidad agua y 5ml de ácido nítrico. Diluir con agua a
absorbida, en mg por g de muestra, por la fórmula 100 ml, agregar 2 ml de sulfato férrico amónico
siguiente:
(SR) y titular con tiocianato de amonio 0,1 N (SV)
[2(1 - AB/AA)]/P hasta un color pardo rojizo permanente. Cada milili-
en la cual, AA y AB son las absorbancias de las Solu- tro de tiocianato de amonio 0,1 N equivale a 11,59
ciones A y B, respectivamente y P es el peso, en g, mg de Ag2O. No contiene menos de 99,7 % de
Ag2O.
de óxido de aluminio. Cada gramo de óxido de
Pérdida por secado - Secar a 120 °C durante
aluminio absorbe no menos de 0,3 mg de
3 horas: no pierde más de 0,25 % de su peso.
o-nitroanilina.
Nitrato - A 500 mg, agregar 30 mg de carbonato
Ï[LGR GH FLQF - ZnO - (PM: 81,4) - Polvo de sodio y 2 ml de ácido fenoldisulfónico (SR),
amorfo, ligero y blanco o débilmente blanco- mezclar y calentar en un baño de vapor durante 15
amarillento, sin aglomerados. Prácticamente insolu- minutos. Enfriar, agregar con precaución 20 ml de
ble en agua y alcohol. Se disuelve en ácidos minera- agua, alcalinizar con amoníaco (SR) y diluir con
les diluidos. agua a 30 ml: ningún color que produzca la solu-
Ï[LGRGHGHXWHULR - (Agua deuterada) - D2O - ción muestra es más intenso que el producido por
(PM: 20,03) - Emplear uno de grado apropiado que un control que contenga 0,01 mg de NO3 (0,002 %).
tiene una pureza isotópica mínima de 99,8 % para el Sustancias insolubles en ácido nítrico - Disolver
átomo de deuterio. 5 g en una mezcla de 5 ml de ácido nítrico y 10 ml
de agua, diluir con agua a aproximadamente 65 ml
Ï[LGRGHKROPLR - Ho2O3 - (PM: 377,9) - Polvo y filtrar el residuo no disuelto en un crisol filtrante
amarillento. Prácticamente insoluble en agua. previamente pesado (retener el filtrado para el en-
Ï[LGRGHPDJQHVLR - MgO - (PM: 40,3) - Em- sayo de Sustancias no precipitadas por ácido
plear un reactivo analítico apropiado. clorhídrico). Lavar el crisol con agua hasta que el
último lavado no presente opalescencia con 1 gota
Ï[LGRGHPDJQHVLRSDUDFURPDWRJUDItD - Em- de ácido clorhídrico y secar a 105 °C hasta peso
plear uno de grado apropiado. constante: el residuo no pesa más de 1 mg (0,02 %).
Ï[LGR GH PHVLWLOR - C6H10O - (PM: 98,1) - Sustancias no precipitadas por ácido clorhídri-
Líquido incoloro. co - Diluir el filtrado obtenido en el ensayo de Sus-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en tancias insolubles en ácido nítrico con agua a
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) 250 ml, calentar a ebullición y agregar, ácido
clorhídrico gota a gota, suficiente para precipitar filtrado posterior, 2 gotas de fenolftaleína (SR) y
toda la plata (aproximadamente 5 ml), evitando titular con ácido clorhídrico 0,02 N (SV) hasta la
cualquier exceso. Enfriar, diluir con agua a 300 ml desaparición de cualquier color rosado: no se con-
y dejar reposar durante toda la noche. Filtrar, eva- sume más de 0,20 ml (0,016 % como NaOH).
porar 200 ml del filtrado en una cápsula de porcela-
Ï[LGR GH WULRFWLOIRVILQD - C24H51PO -
na, previamente pesada, hasta sequedad y someter a
(PM: 386,6) Polvo blanco, cristalino. Insoluble en
ignición: el residuo no pesa más de 1,7 mg (0,05
agua; soluble en solventes orgánicos.
%). Intervalo de fusión <260> - Entre 54 y 56 °C.
Alcalinidad - Calentar 2 g con 40 ml de agua en
un baño de vapor durante 15 minutos, enfriar y Ï[LGR PHUF~ULFR DPDULOOR - HgO - (PM:
diluir con agua a 50 ml. Filtrar, descartando los 216,6) - Emplear un reactivo analítico apropiado.
primeros 10 ml del filtrado. Agregar a 25 ml del
3
3DODGLR FDWDOL]DGRU - Emplear uno de grado 3HQWDFLDQRDPLQR IHUUDWR WULVyGLFR -
apropiado. (PM: 271,9) - Na3[Fe(CN)5NH3] - Polvo amarillo a
marrón. Soluble en agua.
3DOPLWDWRGHUHWLQLOR - C36H60O2 - (PM: 524,9)
Solubilidad - Disolver 500 mg en 50 ml de agua
- Líquido amarillo.
Valoración - y dejar reposar durante 1 hora: la solución es trans-
Fase móvil - Acetonitrilo y tetrahidrofurano parente y libre de materia extraña.
Sensibilidad -
(55:15).
Solución estándar de 1,1-dimetilhidracina -
Procedimiento - Inyectar aproximadamente
Transferir 500 ml de agua a un matraz aforado de
10 µl en un cromatógrafo de líquidos apropiado
1 litro y agregar desde una bureta 1,27 ml de
(ver 100. Cromatografía) equipado con un detector
ultravioleta a 320 nm y una columna de 1,1-dimetilhidracina anhidra. Completar a volumen
15 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida con agua y mezclar. Transferir 10 ml de esta solu-
ción en un matraz aforado de 100 ml y completar a
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
volumen con agua. Cada mililitro de esta solución
de sílice porosa o micropartículas cerámicas, de 3 a
equivale a 100 µg de 1,1-dimetilhidracina.
10 µm de diámetro. El caudal es de aproximada-
Solución reguladora - Transferir 4,8 g de ácido
mente 1 ml por minuto. El área del pico de
C36H60O2 no es menor de 93 % del área total. cítrico monohidratado a un matraz aforado de
1 litro, disolver en agua, agregar 14,6 g de fosfato
3DQWRWHQDWR GH FDOFLR GH[WUyJLUR - Emplear de sodio, agitar por rotación hasta disolver y com-
Pantotenato de calcio. pletar a volumen con agua.
3DSHO GH ILOWUR FXDQWLWDWLYR - Para el Papel de Preparación muestra - Disolver 100 mg de Pen-
bromuro mercúrico empleado para el ensayo de tacianoamino ferrato trisódico en 100 ml de agua.
arsénico, emplear papel de filtro lavado con ácido, Procedimiento - A cada uno de cinco matraces
de bajo contenido de cenizas y calidad apropiada. aforados de 25 ml transferir 0; 0,25; 0,50; 1,0 y
1,5 ml, respectivamente, de Solución estándar de
3DSHOLQRGRURDEVRUEHQWH - Ver Papel de filtro 1,1-dimetilhidracina. Agregar a cada matraz 15 ml
cuantitativo. de Solución reguladora y agitar por rotación para
3DUDIRUPDOGHKtGR - (CH2O)n - Polvo blanco, mezclar. Transferir a cada matraz, 2 ml de Prepara-
fino, de olor característico a formaldehído. ción muestra, mezclar, completar a volumen con
Valoración - Transferir aproximadamente 1 g, Solución reguladora y dejar en reposo durante
exactamente pesado, a un erlenmeyer de 250 ml que 1 hora. Determinar las absorbancias de las solucio-
contiene 50,0 ml de hidróxido de sodio 1 N (SV) y nes resultantes, en celdas de 1 cm, a 500 nm, con un
mezclar agitando por rotación. De inmediato y espectrofotómetro apropiado, empleando la solu-
lentamente, agregar 50 ml de peróxido de hidróge- ción que no contenga Solución estándar de
no (SR), previamente neutralizado con azul de 1,1-dimetilhidracina como blanco. Graficar absor-
bromotimol, a través de un embudo. Luego de que bancia en función de la concentración del estándar y
la reacción se modera, lavar el embudo y la pared trazar la curva que mejor ajuste. El gráfico es lineal
interna del erlenmeyer con agua, dejar la solución y la absorbancia de la solución de 150 µg no debe
en reposo durante 30 minutos, agregar azul de bro- ser menor de 0,65.
motimol (SR) y titular el exceso de álcali con ácido 3HQWDFORUXUR GH DQWLPRQLR - SbCl5 -
sulfúrico 1 N (SV). Cada mililitro de hidróxido de (PM: 299,0) Líquido transparente, amarillo rojizo,
sodio 1 N equivale a 30,03 mg de HCHO. Contiene aceitoso, higroscópico, cáustico. Emite gases al aire
no menos de 95 %. húmedo y solidifica mediante absorción de una
Residuo de ignición - No más de 0,1 %. molécula de agua. Se descompone con agua. Solu-
Solubilidad en amoníaco - Disolver 5 g en 50 ml ble en ácido clorhídrico diluido y cloroformo. Hier-
de amoníaco (SR): la solución es prácticamente ve aproximadamente a 92 °C, a una presión de
transparente e incolora. 30 mm Hg y tiene una densidad relativa de aproxi-
Reacción - Agitar 1 g con 20 ml de agua durante madamente 2,34, a 25°C.
aproximadamente 1 minuto y filtrar: el filtrado es Precaución - El Pentacloruro de antimonio cau-
neutro al tornasol. sa quemaduras severas y el vapor es peligroso.
3HQLFLOLQDVD - Ver Beta-lactamasa. Valoración - Pesar exactamente un erlenmeyer
con tapón de vidrio de 125 ml, transferir de inme-
diato aproximadamente 0,3 ml de muestra y pesar exceder el producido por 0,05 mg de plomo iónico
nuevamente. Disolver con 20 ml de ácido clorhídri- en un volumen igual de solución que contiene 1 ml
co diluido (1 en 5) y agregar 10 ml de solución de de ácido acético 1 N y 10 ml de sulfuro de hidróge-
ioduro de potasio (1 en 10) y 1 ml de disulfuro de no (SR) (0,005 %).
carbono. Titular el iodo liberado con tiosulfato de Sustancias no precipitadas por sulfuro de
sodio 0,1 N (SV). El color pardo gradualmente hidrógeno (como SO4) - Disolver 0,90 ml (2 g) en
desaparecerá de la solución y las últimas trazas de 5 ml de ácido clorhídrico y diluir con 95 ml de
iodo libre se recogerán en el disulfuro de carbono, agua. Precipitar el antimonio completamente con
dando un color rosado. Cuando desaparece este sulfuro de hidrógeno, dejar que el precipitado sedi-
color rosado se ha llegado el punto final. Cada mente y filtrar, con cuidado de no transferir gran
mililitro de tiosulfato de sodio 0,1 N equivale a parte del precipitado al papel de filtro. [NOTA:
14,95 mg de SbCl5. Contiene no menos de 99,0 % retener el precipitado]. A 50 ml del filtrado, agregar
de SbCl5. 0,5 ml de ácido sulfúrico, evaporar en un crisol de
Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método II. Di- porcelana, previamente pesado, hasta sequedad e
solver 4,3 ml (10 g) en un volumen mínimo de incinerar a 800 ± 25 °C durante 15 minutos.
ácido clorhídrico, diluir con agua a 150 ml, neutra- [NOTA: retener el residuo.] El peso del residuo de
lizar con hidróxido de amonio y filtrar. Agregar al ignición no debe ser más de 0,0010 g mayor que el
filtrado 2 ml de ácido clorhídrico: la solución con peso obtenido con un blanco (0,10 %).
10 ml de cloruro de bario (SR) produce no más de
3HQWDGHFDQR - C15H32 - (PM: 212,4) - Líquido
1,3 mg de residuo, corregido por un ensayo en incoloro.
blanco (0,005%). Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
Arsénico - Agregar 10 ml de una solución re-
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
cientemente preparada de 20 g de cloruro estañoso
equipado con un detector de ionización a la llama y
en 30 ml de ácido clorhídrico, a 100 mg de muestra
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
disuelta en 5 ml de ácido clorhídrico. Mezclar, con una capa de 1 µm de fase estacionaria consti-
transferir a un tubo de Nessler y dejar reposar du- tuida por goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el
rante 30 minutos. Cualquier color en la solución de
inyector y el detector a aproximadamente 280 y
la muestra no debe ser más oscuro que el de un
300 °C, respectivamente. La temperatura de la co-
control que contiene 0,02 mg de arsénico (As),
lumna se mantiene a 180 °C y se programa un as-
tratado de la misma manera que la muestra, cuando
censo de 10 °C por minuto hasta 280 °C. Se emplea
se observa desde arriba sobre una superficie blanca helio como gas transportador. El área del pico
(0,02 % de As). C15H32 no es menor de 99 % del área total.
Hierro <580> - Al residuo del ensayo de Sus- Índice de refracción <230> - Entre 1,430 y
tancias no precipitadas por sulfuro de hidrógeno 1,434, a 20 °C.
agregar 2 ml de ácido clorhídrico y 5 gotas de ácido
nítrico y evaporar en un baño de vapor hasta seque- 3HQWDQR - (n-Pentano) - C5H12 - (PM: 72,2) -
dad. Tomar el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico Líquido transparente, incoloro, inflamable. Poco
y diluir con agua a 47 ml: la solución no presenta soluble en agua. Miscible con alcohol, éter y con
más de 0,01 mg de Fe (0,001 %). varios solventes orgánicos. Densidad relativa:
Otros metales pesados (como Pb) - Disolver el aproximadamente 0,62.
precipitado en el papel de filtro, del ensayo Sustan- Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
cias no precipitadas por sulfuro de hidrógeno, con No menos de 95 % destila entre 34 y 36 °C.
75 ml de una solución que contiene 6 g de sulfuro 3HQWDQRVXOIRQDWR GH VRGLR - (PM: 192,2) -
de sodio y 4 g de hidróxido de sodio disueltos en C5H11NaO3S . H2O - Sólido blanco, cristalino. So-
agua y diluidos con agua a 100 ml. Recolectar el luble en agua.
filtrado en el erlenmeyer original que contiene el Solubilidad - 1 g disuelto en 25 ml de agua, pro-
resto del precipitado de sulfuro. Calentar la solución duce una solución transparente y completa.
para disolver los sulfuros solubles y dejar que sedi- Agua <120> - Titulación volumétrica directa.
menten los sulfuros insolubles. Filtrar, lavar con No más de 2,0 %.
sulfuro de hidrógeno (SR) y disolver el precipitado
que permanece en el papel de filtro con 10 ml de 3HQWy[LGR GH IyVIRUR - (Anhídrido fosfórico) -
ácido clorhídrico diluido caliente. Diluir el filtrado P2O5 - (PM: 141,9) - Emplear un reactivo analítico
con agua a 50 ml. Neutralizar una porción de 25 ml apropiado.
de esta solución con hidróxido de sodio 1 N y agre- 3HQWy[LGR GH YDQDGLR - V2O5 - (PM: 181,9) -
gar 1 ml de ácido acético 1 N y 10 ml de sulfuro de Polvo fino amarillo a amarillo anaranjado. Poco
hidrógeno (SR). Cualquier color pardo no debe
soluble en agua; soluble en ácidos concentrados y sulfato de cinc (preparada disolviendo 50 g de la sal
en álcalis; insoluble en alcohol. en 35 ml de agua): sólo se forma un precipitado
Valoración - Transferir aproximadamente leve en forma de flóculos.
400 mg, exactamente pesados, a un erlenmeyer de
3HUFORUDWR GH OLWLR - LiClO4 - (PM: 106,4) -
500 ml y agregar 150 ml de agua y 30 ml de ácido
Cristales pequeños, blancos. Fácilmente soluble en
sulfúrico diluido (1 en 2). Calentar a ebullición la
agua; moderadamente soluble en alcohol, acetona,
solución sobre una placa calefactora durante
éter y acetato de etilo.
5 minutos, agregar 50 ml de agua y continuar calen- Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
tando a ebullición hasta obtener una solución amari- más de 1 mg, determinado sobre 20 g disueltos en
lla. Transferir la placa calefactora y el erlenmeyer a
200 ml de agua (0,005 %).
una campana extractora bien ventilada y burbujear
pH - Entre 6,0 y 7,5, en una solución de 10 g en
dióxido de azufre a través de la solución durante
200 ml de amoníaco y agua.
10 minutos o hasta que la solución sea de color azul
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no presen-
claro brillante. Lavar el tubo de salida del gas con ta más de 0,03 mg de Cl (0,003 %).
unos ml de agua luego burbujear dióxido de carbo- Sulfato (Ensayo para reactivos) - Método II. Di-
no a través de la solución durante 30 minutos mien-
solver 40 g en 300 ml de agua, agregar 2 ml de
tras se continúa calentando a ebullición la solución
ácido clorhídrico y calentar la solución a ebullición.
suavemente. Enfriar la solución a aproximadamente
Agregar 5 ml de cloruro de bario (SR), digerir en un
80 °C y titular con permanganato de potasio
baño de vapor durante 2 horas y dejar reposar du-
0,1 N (SV) hasta punto final anaranjado amarillo. rante toda la noche. Si se forma precipitado, filtrar,
Realizar una determinación con un blanco y hacer lavar e incinerar: el residuo no pesa más de 1 mg
las correcciones necesarias. Cada mililitro de per-
(0,001 %).
manganato de potasio 0,1 N equivale a 9,095 mg de
Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No
V2O5. Contiene no menos de 99,5 %.
más de 5 ppm.
3(34 - Mezcla de siete compuestos, corres- Hierro - Disolver 1 g en agua y diluir con agua a
pondientes al producto de reacción del fosfito de di- 20 ml. Agregar 1 ml de solución de clorhidrato de
ter-butilo con tricloruro de difósforo, en su reacción hidroxilamina (1 en 10), 4 ml de una solución acidi-
con bifenilo y 2,4-bis(1,1-dimetiletil)fenol. ficada de ortofenantrolina y 1 ml de solución de
3HSVLQD - Emplear Pepsina (Preparaciones de acetato de sodio (1 en 10) y dejar reposar durante
enzima), con una actividad de 1,0 a 1,17 unidades 1 hora: cualquier color rojo producido no es más
de Pepsina por mg. La pepsina de actividad mayor oscuro que el de un control que contiene 0,005 mg
puede reducirse a esta actividad mezclándola con de Fe (5ppm).
pepsina de actividad inferior o con lactosa. 3HUFORUDWRGHPDJQHVLRDQKLGUR - Mg(ClO4)2 -
3HSWRQDVHFD - (Peptona de carne) - Polvo par- (PM: 223,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
piado.
do a amarillo rojizo, de olor característico pero no
pútrido. Soluble en agua, con formación de una 3HUFORUDWR GH SORPR - Pb(ClO4)2 . 3H2O -
solución pardo amarillenta que tiene una reacción (PM: 460,2) - Cristales blancos.
levemente ácida; insoluble en alcohol y éter. Valoración - Transferir aproximadamente 1,8 g,
Compuestos nitrogenados (Ensayo para reacti- exactamente pesados, a un envase apropiado y
vos) - Determinar por el método de Kjeldahl, em- disolver en 50 ml de agua. Pasar la solución a través
pleando una muestra previamente secada a 105 °C de una columna apropiada corta de intercambio
hasta peso constante: contiene entre 14,2 y 15,5 % catiónico, recolectando el eluato en un envase apro-
de N, que corresponde a no menos de 89 % de pro- piado. Lavar la columna con agua hasta que el elua-
teína. to sea neutro frente al papel de tornasol azul y com-
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - binar los lavados con el primer eluato. Agregar
Someter a ignición 500 mg con 1 ml de ácido sulfú- 5 gotas de fenolftaleína (SR) y titular con hidróxido
rico: el residuo no pesa más de 25 mg (5,0 %). de sodio 0,1N (SV). Realizar una determinación
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C has- con un blanco y hacer la correcciones necesarias.
ta peso constante: no pierde más de 7,0 % de su Cada mililitro de hidróxido de sodio 0,1 N equivale
peso. a 23,07 mg de Pb(ClO4)2 . 3H2O.
Proteína coagulable - Calentar una solución fil- 3HUFORUDWRGHSRWDVLR - KClO4 - (PM: 138,6) -
trada (1 en 20) a ebullición: no se forma precipita- Emplear un reactivo analítico apropiado.
do.
Proteasas - Mezclar 5 ml de una solución filtra- 3HUFORUDWR GH VRGLR - NaClO4 . H2O -
da (1 en 10) con 20 ml de una solución filtrada de (PM:140,5) Cristales incoloros, delicuescentes. Se
descompone aproximadamente a 150 °C. Soluble en Metales pesados (Ensayo para reactivos) - Di-
alcohol al 95%. solver 1 g en 25 ml de agua. No más de 0,002 %.
Valoración - Secar aproximadamente 1,5 g en 3HUFORUDWRGHWHWUDHWLODPRQLR - (C2H5)4NClO4
un desecador al vacío a 80 °C hasta peso constante.
- (PM: 229,7) - Cristales blancos. Soluble en agua.
Pesar exactamente alrededor de 750 mg de muestra,
Emplear uno de grado apropiado.
previamente secada y pulverizada, y mezclarlos con
5 g de nitrito de sodio pulverizado en un crisol de 3HULRGDWRGHSRWDVLR - (Metaperiodato de pota-
níquel, cubrir el crisol y calentar sobre llama libre sio) - KIO4 - (PM: 230,0) - Emplear un reactivo
hasta que la mezcla se funda totalmente. Mantener analítico apropiado.
en este estado, sin elevar la temperatura, durante 3HULRGDWRGHVRGLR - (Metaperiodato de sodio) -
30 minutos. Dejar enfriar, agregar 20 ml de agua NaIO4 - (PM: 213,9) - Emplear un reactivo analítico
caliente y digerir hasta que el material fundido se apropiado.
disuelva. Filtrar a un matraz aforado de 200 ml,
lavar minuciosamente cualquier material no disuel- 3HUPDQJDQDWR GH SRWDVLR - KMnO4 -
to con agua caliente, enfriar, completar a volumen (PM: 158,0) - Emplear un reactivo analítico apro-
con agua y mezclar. piado.
Transferir 50,0 ml de la solución a un erlenme- 3HUy[LGR GH KLGUyJHQR DO - H2O2 -
yer con tapón de vidrio de 250 ml, agregar 25,0 ml (PM: 34,0) - Emplear Agua oxigenada concentrada.
de nitrato de plata 0,1 N (SV), agregar lentamente
6 ml de ácido nítrico diluido (1 en 6) y calentar en 3HUy[LGRGHVRGLR - Na2O2 - (PM: 78,0) - Em-
un baño de vapor para expulsar los óxidos de nitró- plear un reactivo analítico apropiado.
geno. Enfriar, agregar 3 ml de nitrobenceno, agitar 3HUVXOIDWR GH DPRQLR - (NH4)2S2O8 -
vigorosamente durante 1 a 2 minutos, agregar 4 ml (PM: 228,2) Emplear un reactivo analítico apropia-
de sulfato férrico amónico (SR) y titular el exceso do.
de nitrato de plata con tiocianato de amonio
3HUVXOIDWRGHSRWDVLR - K2S2O8 - (PM: 270,3) -
0,1 N (SV). Realizar una determinación con un
Emplear peroxidisulfato de potasio grado reactivo.
blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale a 3LFROLQD - C6H7N - (PM: 93,1) - Líquido inco-
12,24 mg de NaClO4. Contiene no menos de 98,0 % loro a amarillento.
de NaClO4. Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
Materia insoluble - Disolver 10 g en 50 ml de un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
agua, calentar a ebullición y filtrar a través de un equipado con un detector de ionización a la llama y
crisol previamente pesado de vidrio sinterizado. una columna de vidrio de 2 m × 2 mm con fase
Lavar perfectamente con agua, lavando el vaso de estacionaria líquida constituida por un compuesto
precipitados minuciosamente. Secar a 105 °C du- de polietilenglicol al 20 % (p.m.p aproximadamente
rante 2 horas y pesar. El peso del residuo insoluble 15.000 [NOTA: un compuesto de polietilenglicol de
no es mayor de 1 mg (0,01 %). alto peso molecular con un ligando diepóxido]),
Clorato y cloruro (como Cl) - Disolver 1 g en sobre un soporte preparado con ladrillo refractario
10 ml de agua, agregar 1 ml de sulfato ferroso 0,1 N molido y calcinado o quemado, con una arcilla
y calentar en un baño de vapor durante 15 minutos. como aglutinante, por arriba de los 900 °C con
Enfriar, diluir con agua a 50 ml y agregar 1 ml de lavado ácido posterior, la cual puede ser silanizada,
ácido nítrico y 1 ml de nitrato de plata (SR). Cual- de malla 80 a 100. Mantener el inyector y el detec-
quier turbidez no excede la producida por 0,1 mg de tor a aproximadamente 140 y 300 °C, respectiva-
cloruro (Cl) contenido en un blanco tratado en for- mente. La temperatura de la columna se mantiene a
ma similar (0,01 % de Cl). 90 °C y se programa un ascenso de 3 °C por minuto
Sulfato - Disolver 1 g en 10 ml de agua y agre- hasta 140 °C. Se emplea helio como gas transporta-
gar 0,05 ml de ácido clorhídrico diluido y 1 ml de dor. El área del pico C6H7N no es menor de 98 %
cloruro de bario (SR). Cualquier turbidez producida del área total.
en 10 minutos no excede la producida por un blanco Índice de refracción - 1,500 ± 0,002, a 20 °C.
que contenga 0,05 mg de SO4 (0,005 %). 3tFULFRiFLGR Ver Ácido Pícrico.
Calcio - Disolver 500 mg en 10 ml de agua ca-
liente, agregar 0,25 ml de amoníaco (SR) y 3 ml de 3LHGUD SyPH] - Sustancia de origen volcánico
oxalato de amonio (SR) y mantener la solución en que consta principalmente de silicatos complejos de
caliente. No se produce turbidez en 5 minutos aluminio y metales alcalinos. Existe como masas
(aproximadamente 0,02 %). muy livianas, duras, ásperas, porosas, grises o como
un polvo color gris. Es insoluble en agua y no es 3LURDQWLPRQLDWR GH SRWDVLR - (Hexahidroxian-
atacado por ácidos diluidos. timoniato de potasio) - KSbO3 . 3H2O - (PM:
Sustancias solubles en agua y en ácidos - En un 262,9) - Cristales blancos o polvo cristalino blanco.
balón equipado con un refrigerante, calentar a ebu- Ligeramente soluble en agua. Emplear uno de grado
llición 2,0 g de piedra pómez pulverizada con 50 ml apropiado.
de ácido clorhídrico diluido durante 30 minutos.
3LURIRVIDWRGHSRWDVLR - K4P2O7 - (PM: 330,3) -
Enfriar y filtrar. A la mitad del filtrado, agregar
Gránulos incoloros delicuescentes. Fácilmente
5 gotas de ácido sulfúrico, evaporar hasta sequedad, soluble en agua; insoluble en alcohol.
someter a ignición y pesar: el residuo no pesa más
de 60 mg (6,0 %). 3LURIRVIDWRGHVRGLR - Na4P2O7 - (PM: 265,9) -
Emplear un reactivo analítico apropiado.
3LSHULGLQD - C5H11N - (PM: 85,2) - Líquido in-
coloro. Miscible con agua y alcohol. Densidad 3LURJDORO - C6H3(OH)3 - (PM: 126,1) - Emplear
relativa: aproximadamente 0,860. un reactivo analítico apropiado.
Temperatura de solidificación <180> - Entre 12 3LURVXOIDWRGHSRWDVLR - Generalmente disponi-
y 15 °C. ble como una mezcla de pirosulfato de potasio
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) - (K2S2O7) y bisulfato de potasio (KHSO4) - Emplear
No menos de 95 % destila entre 104 y 106 °C. un reactivo analítico apropiado.
Índice de refracción <230> - Aproximadamente
1,454. 3LUURO - C4H5N - (PM: 67,1) - Líquido transpa-
rente, incoloro cuando está recientemente destilado,
3LUHQR - C16H10 - (PM: 202,3) - Cristales de co- tornándose amarillo en unos pocos días. Tiene un
lor entre blanco y amarillo claro. olor característico. Densidad relativa: aproximada-
Valoración - Transferir aproximadamente 9 mg, mente 0,94. Insoluble en agua; soluble en alcohol y
exactamente pesados, a un matraz aforado de éter.
100 ml, disolver en metanol, completar a volumen Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
con metanol y mezclar. Transferir 2,0 ml de esta No menos de 90 % destila entre 128 y 132 °C.
solución a un matraz aforado de 100 ml, completar
a volumen con metanol y mezclar. Determinar la 3LUUROLGLQDWLRFDUEDPDWR GH DPRQLR
absorbancia de la solución en celdas de 1 cm, a la (1-pirrolidinilditioformiato de amonio) -
longitud de onda de máxima absorción, aproxima- C5H12N2S2 - (PM: 164,3) - Polvo cristalino blanco
damente a 238 nm, con un espectrofotómetro apro- o amarillo pálido. Moderadamente soluble en agua;
piado, empleando metanol como blanco. Calcular la muy poco soluble en alcohol. Conservar en un
absortividad (ver 470. Espectrofotometría ultravio- envase que contenga un trozo de carbonato de amo-
leta y visible): la absortividad no es menor de 432,9, nio envuelto en una gasa.
correspondiente a no menos de 98 % de C16H10. 3LUXYDWR GH VRGLR - CH3COCO2Na -
Intervalo de fusión <260> - Entre 149 y 153 °C, (PM: 110,0) - Polvo o sólido cristalino blanco o
con un intervalo de fusión de 2 °C. prácticamente blanco. Soluble en agua.
3LULGLOD]RQDIWRO - C15H11N3O - Valoración - Transferir aproximadamente
(PM: 249,3) - Cristales estables, rojo anaranjado. 300 mg, exactamente pesados, a un vaso de precipi-
Poco soluble en agua; soluble en alcohol y en solu- tados para titulación de paredes altas, agregar
ciones calientes de álcalis diluidos. 150 ml de ácido acético glacial y agitar hasta diso-
Intervalo de fusión <260> - Entre 140 y 142 °C. lución. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
Sensibilidad - Agregar 0,1 ml de una solución (1 determinando el punto final potenciométricamente,
en 1.000) en alcohol a una mezcla de 10 ml de agua empleando un electrodo de vidrio y un electrodo de
y 1 ml de una solución reguladora preparada mez- calomel modificado para emplear cloruro de tetra-
clando 80 ml de ácido acético 0,2 M y 20 ml de metilamonio 0,1 N en metanol como electrolito.
solución de acetato de sodio (8,2 en 100) y mezclar. Realizar una determinación con un blanco y hacer
A esta solución agregar 1 ml de una mezcla de 1 ml las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido
de sulfato cúprico (SR) y 2 ml de agua y mezclar: el perclórico 0,1 N equivale a 11,00 mg de
color cambia de amarillo a rojo. CH3COCO2Na. Contiene no menos de 98,0 %.
Solubilidad - Disolver 1,5 g en 25 ml de agua: la
3LULGLQD - C5H5N - (PM: 79,1) - Emplear un re- solución es transparente y completa.
activo analítico apropiado. Ácido libre - Disolver 10 g en 150 ml de agua y
3LULGLQD VHFD - Emplear un reactivo analítico titular con hidróxido de sodio 0,5 N (SV), determi-
apropiado. nando el punto final potenciométricamente: no se
requieren más de 2,8 ml de hidróxido de sodio pH <250> - Entre 6,5 y 8,0 en una solución (1
0,5 N (aproximadamente 1 % como C3H4O3). en 20). [NOTA: se puede emplear una dilución de
cinco veces la solución muestra preparada para el
3ROL>FLDQRSURSLOPHWLO@IHQLOPHWLOVLOR[DQR
Contiene 25 por ciento de grupos cianopropilo, ensayo de Viscosidad de la solución al 25 %.]
25 por ciento de grupos fenilo y 50 por ciento de Residuo de ignición <270> - No más de 0,7 %,
grupos metilo (masa molecular relativa media omitiendo el empleo de ácido sulfúrico.
8.000). Líquido muy viscoso, aprox. 9.000 mPa-s. 3ROLR[LHWLOHQODXULOpWHU - Emplear uno de
Densidad relativa - Aprox. 1,10 a 20 ºC. grado apropiado.
Índice de refracción <230> - Aprox. 1,502.
3ROYR GH FHUHEUR GH EXH\ GHVHFDGR FRQ DFH
3ROLHWLOHQJOLFRO - (p.m.p.: 400) - Mezcla de WRQD - Ver cerebro de buey desecado con acetona,
polímeros representado por H-(OCH2-CH2)n-OH - polvo de.
Líquido, límpido, viscoso, higroscópico, incoloro o
3UHSDUDFLyQ GH HQ]LPD VXOIDWDVD - Emplear
casi incoloro. Miscible en agua. Muy soluble en
uno de grado apropiado.
acetona, alcohol y cloruro de metileno, práctica-
mente insoluble en éter, aceites grasos y aceites 3URSDQRO - (Alcohol isopropílico, Isopropa-
minerales. nol) - C3H8O - (PM: 60,1) - Líquido transparente
e incoloro, inflamable, miscible con agua y alcohol.
3ROLHWLOHQJOLFRO - (p.m.p.: 600) - Polímero
Densidad relativa - Aprox. 0,785.
de condensación líquido transparente, prácticamen-
Intervalo de punto de ebullición - Entre 81 y
te incoloro, viscoso representado por
83 ºC.
H(OCH2CH2)nOH, donde n varía de 12 a 14.
Cumple con los requisitos de todos los ensayos 3URSLOHQJOLFRO Emplear Propilenglicol.
para Polietilenglicol 400, excepto Límite de etileno 3URWDPLQD VXOIDWR - Emplear Protamina, Sul-
y dietilenglicol. fato de.
3ROLHWLOHQJOLFROIntervalo de peso mole- 3XULQD - C5H4N4 - (PM: 120,1) - Polvo blanco a
cular: 4.345-5.272 - Polímero de condensación del casi blanco.
óxido de etileno en agua, que corresponde a la Cuando se analiza por cromatografía en capa
fórmula general, H-(OCH2-CH2)nOH, siendo n delgada empleando placas recubiertas con gel de
variable entre 70 y 85. Masa sólida amorfa o con sílice para cromatografía con indicador de fluores-
forma de escamas, de aspecto céreo de color blan- cencia de 0,25 mm de espesor y una fase móvil que
quecino o cremoso pálido, con una textura semejan- consiste en alcohol butílico, agua y ácido cético
te a la de la parafina; prácticamente inodora e insí- glacial (60:25:15), presenta una sola mancha.
pida. Soluble en 4 partes de agua destilada, en 2,5 Intervalo de fusión <260> - Entre 214 y 217 °C.
partes de alcohol y en 2 partes de cloroformo; inso- 3~USXUD GH mFUHVRO - C21H18O5S2 -
luble en éter. (PM: 382,4) - Emplear un reactivo de grado apro-
3ROLHWLOHQJOLFRO - Intervalo de peso mo- piado.
lecular: 15.000-20.000 - Sólido duro, blanco, céreo, 3~USXUD GH IWDOHtQD - C32H32N2O12 . xH2O -
generalmente provisto en forma escamas. Soluble (PM: 637 sobre la sustancia anhidra) - Polvo blan-
en agua con posterior formación de un gel. co amarillento a parduzco; soluble en alcohol,
Viscosidad de la solución al 25 % <190> - prácticamente insoluble en agua.
Agregar 50,0 g de muestra a un frasco de boca Sensibilidad - Disolver 10 mg de púrpura de
ancha de 250 ml, con tapa a rosca que contiene ftaleína en 1 ml de amoníaco concentrado y diluir a
150,0 g de agua. Tapar el frasco firmemente y agi- 100 ml con agua. A 5 ml de esta solución agregar
tar en un agitador mecánico durante 2 a 4 horas 95 ml de agua, 4 ml de amoníaco concentrado,
hasta que la muestra se disuelva completamente. 50 ml de alcohol y 0,1 ml de cloruro de bario
Dejar la solución en reposo hasta que hayan desapa- 0,1 M. La solución obtenida es azul violácea.
recido todas las burbujas de aire. Se pueden requerir Agregar 0,15 ml de edetato de sodio 0,1 M: la solu-
entre otras 2 a 4 horas. Ajustar la temperatura de la ción se decolora.
solución a 37,8 ± 0,1 °C y determinar la viscosidad
cinemática en un viscosímetro apropiado del tipo
Ubbelohde (ver 190. Determinación de la viscosi-
dad). La viscosidad no es menor de 100 centistokes.
4
4XHUFHWLQD – (2-3,4-dihidroxifenil)-3,5,7- Sulfato - Transferir 1 g a un crisol de platino,
trihidroxi-4H-1-benzopiran-4-ona) - C15H10O7 . agregar 10 ml de agua caliente y 0,5 g de carbonato
H2O - (PM: 338,2) – Cristales amarillos o polvo de sodio, evaporar hasta sequedad e incinerar, pro-
amarillento. Soluble en acetona y alcohol e insolu- tegido del azufre en la llama, hasta que el residuo
ble en agua. sea casi blanco. Enfriar, agregar 20 ml de agua y
Agua <120> - No màs de 12,0 %, determinada 1 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %, calentar a
en 0,100 g. ebullición suavemente durante unos pocos minutos,
Valoración - Proceder según se indica en Valo- agregar 2 ml de ácido clorhídrico y evaporar en un
ración en Hoja de Ginkgo. El contenido de querce- baño de vapor hasta sequedad. Enfriar, disolver el
tina no debe ser menor de 90,0 %, calculado sobre residuo en 20 ml de agua, filtrar y, al filtrado, agre-
la sustancia anhidra por el procedimiento de norma- gar 1 ml de ácido clorhídrico 1 N y 3 ml de cloruro
lización. de bario (SR): cualquier turbidez producida dentro
de los 10 minutos no es mayor a la de un control
4XHURVHQR - Corresponde a una mezcla de
que contenga 0,2 mg de SO4, 0,5 mg de carbonato
hidrocarburos, principalmente de la serie del meta-
de sodio, 1 ml de peróxido de hidrógeno al 30 % y
no. Líquido transparente, incoloro, de olor carac-
2 ml de ácido clorhídrico previamente evaporado en
terístico, pero no desagradable. Destila entre 180 y
300 °C. Densidad relativa: aproximadamente 0,80. un baño de vapor hasta sequedad (0,02 %).
Metales pesados - Al residuo retenido del ensa-
4XLQKLGURQD - C6H4(OH)2 . C6H4O2 - yo para Residuo de ignición, agregar 2 ml de ácido
(PM: 218,2) - Cristales verdes con un reflejo metá- clorhídrico y 0,5 ml de ácido nítrico y evaporar en
lico. Poco soluble en agua fría; soluble en agua un baño de vapor hasta sequedad. Disolver el resi-
caliente, alcohol y éter. duo en 30 ml de agua caliente con 1 ml de ácido
Valoración - Transferir aproximadamente clorhídrico 1 N, enfriar, diluir con agua a 40 ml y
450 mg, exactamente pesados, a un erlenmeyer con mezclar. Diluir 20 ml de esta solución (retener el
tapón de vidrio, agregar 50 ml de ácido sulfúrico resto de la solución) con agua a 25 ml, ajustar a pH
1 N y 3 g de ioduro de potasio, tapar y agitar hasta entre 3,0 y 4,0 agregando hidróxido de amonio 6 N
disolución. Titular el iodo liberado con tiosulfato de o ácido acético 1 N, según sea necesario, diluir con
sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) agua a 40 ml y agregar 10 ml de sulfuro de hidró-
cerca del punto final. Cada mililitro de tiosulfato de geno (SR) recientemente preparado: cualquier color
sodio 0,1 N equivale a 5,405 mg de quinona pardo producido no es mayor al de un control que
(C6H4O2). Contiene entre 49,0 y 51,0 %. contenga a 0,02 mg de Pb (0,002 %).
Materia insoluble en alcohol - Disolver 10 g en Hierro <580> - A 10 ml de la solución retenida
100 ml de alcohol caliente, filtrar a través de un del ensayo para Metales pesados, agregar 2 ml de
crisol previamente pesado de porosidad fina y lavar ácido clorhídrico y diluir con agua a 47 ml: la solu-
con alcohol caliente hasta que el último lavado sea ción presenta no más de 0,01 mg de Fe (0,002 %).
incoloro. Secar a 105 °C, enfriar en un desecador y
4XLQRQD - Ver p-Benzoquinona.
pesar: el residuo no pesa más de 1,0 mg (0,010 %).
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
No más de 0,050 %, empleando una muestra de
2,0 g. [NOTA: retener el residuo].
5
5HDFWLYRGH*LUDUG7 - Ver Cloruro de trimeti- de 50 mm Hg durante 16 horas. Transferir de la
lacetohidrazida amonio. estufa de vacío a un desecador y enfriar a tempera-
5HLQHFNDWR GH DPRQLR - (Sal de Reinecke) - tura ambiente. Pesar nuevamente. La pérdida de
NH4[Cr(NH3)2(SCN)4] . H2O - (PM: 354,4) - Crista- peso está entre 50 y 65 %.
les rojo oscuro o polvo rojo cristalino. Moderada- Capacidad total de nuevo volumen - Transferir
mente soluble en agua fría; más soluble en agua 2,5 a 3 ml de la resina acondicionada, sin secar (ver
caliente. Se descompone gradualmente en solución. Contenido de humedad de la resina hinchada y
Sensibilidad - Disolver 50 mg en 10 ml de agua. regenerada) a una probeta de 5 ml y completar a
Agregar 0,2 ml de la solución a 1 ml de una solu- volumen con agua. Eliminar las burbujas de aire del
ción preparada disolviendo 10 mg de cloruro de lecho de la resina con un alambre de acero inoxida-
colina en 20 ml de agua y agitar suavemente: se ble y sedimentar la resina a su volumen mínimo
forma un precipitado característico a los 5 ó golpeando suavemente la probeta contra una super-
10 segundos. ficie dura. Registrar el volumen de la resina. Trans-
ferir la resina con 100 ml de agua a un matraz de
5HVD]XULQD VyGLFD - C12H6NNaO4 - 250 ml. Agregar 2 ml de ácido sulfúrico, calentar
(PM: 251,2) - Polvo pardusco púrpura, cristalino. entre 70 y 80 °C y mantener esa temperatura duran-
1 g se disuelve en 100 ml de agua, formando una te 5 minutos agitando ocasionalmente (no calentar a
solución de color violeta profundo. ebullición). Enfriar a temperatura ambiente y agre-
El Sulfuro de hidrógeno y otros compuestos que gar 2,5 ml de ácido nítrico (1 en 2), 2 ml de sulfato
contienen el grupo tiol decoloran las soluciones de férrico amónico (SR) y 0,20 ml de tiocianato de
resazurina sódica, formando dihidroresorufina. amonio 0,1 N. Titular con nitrato de plata
Cuando la solución decolorada se agita en presencia 0,1 N (SV) hasta que la solución se torne incolora y
de aire, se desarrolla un color rosa, resultado de la agregar un exceso medido (1 a 5 ml). Calentar a
formación de resorufina. ebullición para coagular el precipitado de cloruro de
5HVLQDGHLQWHUFDPELRDQLyQLFRGHPDOODD plata. Enfriar a temperatura ambiente, agregar 10
HVWLUHQRGLYLQLOEHQFHQR - Resina altamente ml de nitrobenceno, agitar vigorosamente y titular
básica, entrecruzada, que contiene grupos amonio el nitrato de plata en exceso con tiocianato de amo-
cuaternario y aproximadamente 4 % de divenilben- nio 0,1 N (SV).
ceno. Consiste en cuentas de color canela que pue- Vol.neto AgNO3 × N / ml de resina = mEq/ml
den tener características de libre fluidez. Está dis-
ponible en la forma de cloruro que puede convertir- La capacidad total de intercambio de la resina
se a la forma de hidróxido por regeneración con una húmeda regenerada es mayor de 1,0 mEq por ml.
Análisis por tamizado húmedo - Se emplea para
solución de hidróxido de sodio (5 en 100). Para una
identificar apropiadamente el tamaño de la malla de
regeneración satisfactoria se requiere un tiempo de
la resina. Para obtener un resultado exacto se re-
contacto de por lo menos 30 minutos, luego del cual
quieren aparatos y técnicas especiales. Agregar
debe ser lavada para eliminar el exceso de álcali
libre. Insoluble en agua, metanol y acetonitrilo. 150 ml de resina a 200 ml de agua destilada en un
Apropiada para uso en cromatografía en columna. recipiente apropiado y dejar reposar durante no
menos de 4 horas para que la resina se hinche com-
Contenido de humedad de la resina hinchada y
pletamente. Transferir con la ayuda de una probeta
regenerada - Transferir 10 a 12 ml de la resina (tal
de 100 ml la resina sedimentada y completamente
como se la recibe) a un matraz y convertirla com-
pletamente a la forma de cloruro agitando con hinchada al tamiz más alto de una serie ( N° 20, 50,
150 ml de ácido clorhídrico (5 en 100) durante no 100) de bronce de 20,3 cm. Lavar a fondo la resina
en cada tamiz con una corriente de agua destilada
menos de 30 minutos. Decantar el ácido y lavar la
hasta que la resina se tamice completamente, reco-
resina de la misma manera con agua destilada hasta
giendo el agua del lavado en un envase apropiado.
que el agua de lavado sea neutra frente al papel de
Transferir las cuentas que permanecen en los tami-
tornasol. Transferir 5 a 7 ml de la resina regenerada
a un crisol de vidrio filtrante y remover sólo el agua ces respectivos a la probeta de 100 ml y registrar el
superficial excesiva filtrando cuidadosamente por volumen de resina sedimentada en cada tamiz: no
menos de 80 % de la resina está entre los tamices
succión. Transferir la resina acondicionada y seca a
N° 50 y 100.
un pesafiltro previamente pesado y pesar. Secar en
estufa de vacío entre 100 y 105 °C y a una presión
5HVLQD GH LQWHUFDPELR DQLyQLFR IXHUWH OHYH pesado, y pesar. Secar en una estufa de vacío a una
PHQWH HQWUHFUX]DGD HQ OD IRUPD GH FORUXUR - presión de 50 mm Hg entre 100 y 105 °C durante
Emplear uno de grado apropiado. 16 horas. Transferir a un desecador y enfriar a tem-
peratura ambiente. Pesar nuevamente. La pérdida de
5HVLQDGHLQWHUFDPELRDQLyQLFRSROLHVWLUHQR
GLYLQLOEHQFHQR FORURPHWLODGD - Resina altamente peso es entre 75 y 83 %.
básica, entrecruzada, que contiene grupos amonio Capacidad total de volumen húmedo - Transfe-
cuaternario. Consta de pequeñas cuentas, húmedas, rir 3 a 5 ml de la resina regenerada, sin secar (ver
amarillas que tienen un olor a amina característico. Contenido de humedad de la resina totalmente
Está disponible en la forma de cloruro que puede regenerada e hinchada) a una probeta de 5 ml y
convertirse en hidróxido por regeneración con solu- llenarla con agua. Retirar las burbujas de aire del
ción de hidróxido de sodio (1 en 4). Para una rege- lecho de la resina con un alambre de acero inoxida-
neración satisfactoria se requiere un tiempo de ble y dejar sedimentar la resina a su volumen míni-
contacto de aproximadamente 25 minutos, luego del mo golpeando suavemente la probeta sobre una
cual debe lavarse con agua hasta neutralidad. Es superficie. Registrar el volumen de la resina. Trans-
apropiada para emplearse en cromatografía en co- ferir la resina a un vaso de precipitados de 400 ml.
lumna. Agregar aproximadamente 5 g de cloruro de sodio y
titular, agitando, con hidróxido de sodio 0,1 N hasta
5HVLQD GH LQWHUFDPELR FDWLyQLFR - Emplear punto final azul con azul de bromotimol (pH 7,0).
uno de grado apropiado.
Vol.neto NaOH × N / ml de resina = mEq/ml
5HVLQDGHLQWHUFDPELRFDWLyQLFRiFLGRVXOIy
QLFR - Emplear uno de grado apropiado. La capacidad total de volumen húmedo de la re-
sina es más de 0,6 mEq por ml.
5HVLQD GH LQWHUFDPELR FDWLyQLFR FDUER[LODWR Análisis por tamizado húmedo - Se emplea para
IRUPD VyGLFD 1 D - Emplear uno de identificar apropiadamente el tamaño de la malla de
grado apropiado. la resina. Para obtener un resultado exacto se re-
5HVLQD GH LQWHUFDPELR FDWLyQLFR GH SROLHVWL quieren aparatos y técnicas especiales. Agregar
UHQR - Emplear uno de grado apropiado. 150 ml de resina a 200 ml de agua en un recipiente
apropiado y dejar reposar por lo menos 4 horas para
5HVLQD GH LQWHUFDPELR FDWLyQLFR HVWLUHQR hinchar completamente la resina. Transferir por
GLYLQLOEHQFHQR - Resina sulfonada altamente ácida, medio de una probeta, 100 ml del sedimento y resi-
entrecruzada, que contiene aproximadamente 2 % na completamente hinchada al tamiz superior de
de divinilbenceno. Consiste en cuentas de color una serie de tamices estandarizados. Lavar a fondo
blanco a tostado transparente que pueden tener, la resina en cada tamiz con una corriente de agua
relativamente, libre fluidez. Está disponible en la hasta que la resina se clarifique completamente,
forma de hidrógeno en los tamaños de malla de 25 a recogiendo el agua del lavado en un envase apro-
50, 45 a 100 y 80 a 270. Puede regenerarse a la piado. Transferir las cuentas que permanecen en los
forma de hidrógeno mediante el tratamiento con tamices respectivos a la probeta de 100 ml y regis-
una solución de ácido clorhídrico (5 en 100). Para trar el volumen de resina que sedimentó en cada
una regeneración satisfactoria se requiere un tiempo tamiz. Al menos 70 % de la resina está dentro del
de contacto de no menos de 30 minutos luego debe tamaño específico de la malla.
ser lavado el exceso libre de ácido. Es insoluble en
agua, metanol y acetonitrilo. Apropiada para em- 5HVLQD GH LQWHUFDPELR FDWLyQLFR HVWLUHQR
plearse en cromatografía en columna. GLYLQLOEHQFHQR IXHUWHPHQWH iFLGD - Emplear uno
Contenido de humedad de la resina totalmente de grado apropiado.
regenerada e hinchada - Transferir 10 a 12 ml de la 5HVLQD GH LQWHUFDPELR LyQLFR - Una mezcla
resina (como se recibe) a un matraz y convertirla íntima de 4 partes de un intercambiador catiónico
completamente a la forma de hidrógeno agitando altamente ácido en la forma de hidrógeno (produci-
con 150 ml de solución de ácido clorhídrico (5 en do por sulfonación de un copolímero de estireno-
100) durante no menos de 30 minutos. Decantar el divenilbenceno, representando 8 a 10 % de divinil-
ácido y lavar la resina de la misma manera con agua benceno) y 6 partes de un intercambiador aniónico
hasta que el agua del lavado sea neutra frente al altamente básico en la forma hidroxilo (producido
papel de tornasol (pH 3,5). Transferir 5 a 7 ml de la por aminación con trimetilamina de un copolímero
resina regenerada a un crisol filtrante de vidrio y clorometilado de estireno-divinilbenceno, represen-
remover solamente el exceso de agua superficial tando 3 a 5 % de divinilbenceno).
filtrando, cuidadosamente, por succión. Transferir
la resina acondicionada a un pesafiltro, previamente 5HVRUFLQRO - Emplear Resorcinol.
5RGDPLQD % - (Tetraetilrodamina) - de color rosa o polvo cristalino. Es prácticamente
(PM: 479,0) - C28H31ClN2O3 - Cristales verdes o inodoro. Soluble en agua.
polvo violeta rojizo. Muy soluble en alcohol; muy [NOTA: purificar el material comercial median-
soluble en agua produciendo una solución rojo te el siguiente tratamiento: disolver 8 g en 200 ml
azulada que es marcadamente fluorescente cuando de agua y ajustar hasta pH entre 10 y 11, empleando
se diluye; poco soluble en ácidos diluidos y en papel indicador de intervalo estrecho. Agregar
soluciones alcalinas; en solución de ácidos fuertes, 200 ml de acetona, agitando ligeramente, luego
forma un complejo rosado con antimonio que es agregar ácido clorhídrico diluido (1 en 10) mientras
soluble en éter isopropílico. se continúa agitando, hasta alcanzar pH 4,0. Agre-
Transparencia de la solución - Su disolución (1 gar 400 ml más de agua, con agitación, y continuar
en 200) es completa y transparente. agitando aproximadamente 5 minutos. Filtrar los
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - cristales en un embudo filtrante y colocarlos nue-
Someter a ignición 1 g con 1 ml de ácido sulfúrico: vamente en el vaso de precipitados empleado para
el residuo pesa menos de 2 mg (0,2 %). la cristalización. Recristalizar tres veces más del
5RMRFRQJR - C32H22N6Na2O6S2 - (PM: 696,7) - mismo modo y secar los cristales a 110 °C durante
12 horas. Almacenar en un recipiente ámbar en
Polvo pardo oscuro, rojo o rojizo. Es inodoro y se
refrigerador a una temperatura entre 2 y 8 °C. Pre-
descompone por exposición a los gases ácidos. Las
parar este reactivo mensualmente].
soluciones tienen un pH de aproximadamente 8 a
Pureza cromatográfica - Disolver 100 mg de
9,5. 1 g se disuelve en aproximadamente 30 ml de
agua; poco soluble en alcohol. Rosa de bengala sódico, preparado según se descri-
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- be anteriormente, en 100 ml de agua y aplicar 10 µl
de la solución sobre papel cromatográfico apropia-
rante 4 horas: no pierde más de 3,0 % de su peso.
do. Desarrollar el cromatograma por cromatografía
Residuo de ignición - Pesar con exactitud
ascendente, empleando una mezcla de 1 parte de
aproximadamente 1 g, previamente secado a 105 °C
durante 4 horas, y colocarlo en una cápsula de por- alcohol diluido (1 en 4) y 1 parte de amoníaco con-
celana o crisol. Someter a ignición cuidadosamente centrado diluido (1 en 12). Examinar el cromato-
grama con luz natural y bajo luz ultravioleta a
hasta carbonizar. Enfriar, agregar 2 ml de ácido
360 nm: no se observa ninguna mancha coloreada
sulfúrico e incinerar cuidadosamente hasta que el
ni fluorescente con excepción de la mancha del
residuo sea blanco o prácticamente blanco. Enfriar,
Rosa de bengala sódico.
agregar 0,5 ml de ácido sulfúrico y 1 ml de ácido
nítrico, evaporar y nuevamente incinerar hasta peso 5XWLQD - (3-(O-6-desoxi-D-
constante: el peso del sulfato de sodio obtenido es L-manopiranosil-(1o6)-E-D-glucopiranosil)-2-(3,4
entre 20,0 y 24,0 % de la muestra seca tomada. -dihidroxifenil)-5,7-dihidroxi-4H-cromen-4-ona) -
Sensibilidad - A 50 ml de agua agregar 0,1 ml C27H30O16 . 3H2O - (PM: 665,0) - Rutósido. Polvo
de solución de rojo congo (1 en 1.000). El color cristalino amarillo, que se torna pardo a la luz, so-
rojo de la solución cambia a violeta por el agregado luble en 400 partes de agua a ebullición y en disolu-
de 0,05 ml de ácido clorhídrico 0,10 N y se restaura ciones de hidróxidos alcalinos y amoníaco, poco
al agregar 0,05 ml de hidróxido de sodio 0,10 N. soluble en alcohol, muy poco soluble en agua y
5RMRGHUXWHQLR - (Oxicloruro de rutenio amo- prácticamente insoluble en éter.
niacal) - Ru2(OH)2Cl4 . 7NH3 . 3H2O - (PM: 551,2) Punto de fusión <260> - Aprox. 210 °C, con
- Polvo rojo pardusco a púrpura oscuro. Soluble en descomposición.
agua. Absorción ultravioleta <470> - Una solución de
rutina en alcohol debe presentar dos máximos de
5RVDGHEHQJDODVDOVyGLFD - (Sal disódica de absorción a 259 y 362 nm.
4,5,6,7-Tetracloro-2c,4c,5c,7c-tetraiodofluoresceína)
- C20H2Cl4I4Na2O5 - (PM: 1.017,6) - Cristales finos
6
6DFDURVD - Emplear Sacarosa. Cloruro - Transferir aproximadamente 80 mg,
6DIUDQLQD2 - Consiste en una mezcla de cloruro exactamente pesados, a un vaso de precipitados.
de 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenilfenazinio Agregar 25 ml de acetona, 25 ml de agua y 500 mg
de nitrato de sodio. Agitar hasta disolución completa.
(C20H19ClN4 - PM: 350,9) y cloruro de 3,7-diamino-
Titular con nitrato de plata 0,01 N (SR), determinan-
2,8-dimetil-5-o-tolilfenazinio (C21H21ClN4 -
do el punto final potenciométricamente. Realizar una
PM: 364,9) - Polvo rojo oscuro. Moderadamente
determinación con un blanco y hacer las correcciones
soluble en alcohol al 70 %, proporcionando una solu-
ción roja transparente con fluorescencia rojo amari- necesarias. Contiene no menos de 15,0 % de cloruro.
llenta. 6DO GLVyGLFD GHO iFLGR 3LULGLOGL
Identificación - IXULOWULD]LQD¶GLVXOIyQLFR - (PM: 494,4)
A - Agregar a 10 ml de una solución al 0,5 % p/v, C16H8N4Na2O8S2 - Polvo amarillo oscuro.
5 ml de ácido clorhídrico: se produce una solución 6DOHVELOLDUHV- Es un concentrado de bilis bovina,
violeta azulada.
siendo su componente principal el desoxicolato sódi-
B - Agregar a 10 ml de una solución al 0,5 % p/v,
co, determinado como ácido cólico. Soluble en agua
5 ml de solución de hidróxido de sodio (1 en 5): se
y alcohol; las soluciones forman espuma cuando se
produce un precipitado rojo pardusco.
agitan.
C - Agregar a 100 mg, 5 ml de ácido sulfúrico: se Sustancias insolubles - Disolver 5 g en 100 ml de
produce una solución verde. Por dilución cambia a alcohol diluido (84 en 100), calentando si fuera nece-
azul y finalmente a rojo.
sario para favorecer la disolución. Filtrar dentro de
Características de absorción - Disolver 50 mg en
los 15 minutos a través de un filtro previamente pe-
250 ml de alcohol al 50 %. Diluir 3 ml de esta solu-
sado y lavar con porciones pequeñas de alcohol dilui-
ción con alcohol al 50 % hasta obtener 200 ml. De-
do hasta que el último lavado sea incoloro o prácti-
terminar la absorbancia, en una celda de 1 cm, con un camente incoloro luego secar el residuo a 105 °C
espectrofotómetro apropiado. El máximo de absor- durante 1 hora y pesar: el peso del residuo no es ma-
ción está en el intervalo entre 530 y 533 nm, el co-
yor de 0,1 %.
ciente (A - 15)/(A + 15) está entre 1,10 y 1,32, en la
Valoración -
cual A es la longitud de onda de máxima absorción.
Solución estándar de ácido cólico - Disolver
6DO GH IDVW EOXH % - C14H12N4O2 . ZnCl4 - 50,0 mg de ácido cólico, exactamente pesados, en
(PM: 475,5) - Polvo verde. ácido acético diluido (6 en 10) para obtener 100 ml y
Pérdida por secado <680> - Secar al vacío a mezclar. Almacenar en un refrigerador.
110°C durante 1 hora: no pierde más de 5,0 % de su Procedimiento - Disolver 1,0 g, exactamente pe-
peso. sado, en 50 ml de ácido acético diluido (6 en 10).
Absorbancia - Disolver 50 mg en 100 ml de agua. Filtrar la solución, si fuera necesario, a un matraz
En un segundo envase disolver 100 mg de 2-naftol en aforado de 100 ml, lavar el envase original y el filtro
100 ml de 2-metoxietanol. Transferir 5 ml de la solu- con porciones de ácido acético diluido (6 en 10),
ción y 10 ml de la solución de 2-naftol a un matraz completar a volumen con ácido acético diluido (6 en
aforado de 100 ml y completar a volumen con aceto- 10) y mezclar. Diluir 10 ml de esta solución, exacta-
na. Para el blanco, transferir 5 ml de agua y 10 ml de mente medidos, con ácido acético diluido (6 en 10)
solución de 2-naftol a un segundo matraz aforado de hasta obtener 100 ml y mezclar. Transferir 1 ml de
100 ml y completar a volumen con acetona. Determi- Solución estándar de ácido cólico y de la solución de
nar la absorbancia de la solución muestra, en una Sales biliares a dos tubos de ensayo iguales. A cada
celda de 1 cm, a la longitud de onda de máxima ab- tubo agregar 1ml, exactamente medido, de solución
sorción, aproximadamente a 545 nm, con un espec- de furfural recientemente preparada (1 en 100); de
trofotómetro apropiado, empleando el blanco para inmediato colocar los tubos en un baño de hielo du-
llevar a cero la lectura del aparato: la absorbancia no rante 5 minutos, agregar a cada tubo 13 ml, exacta-
es menor de 0,80. mente medidos, de ácido sulfúrico diluido, obtenido
mezclando, cuidadosamente, 50 ml de ácido sulfúrico
6DOGHIDVWEOXH%% - (C17H18ClN3O3)2 . ZnCl2 -
(PM: 831,9) - Polvo amarillo que funde aproximada- con 65 ml de agua. Mezclar el contenido de los tubos
mente a 162 ºC, con descomposición. Moderadamen- y colocarlos en un baño de agua mantenido a 70 °C
te soluble en agua. durante 10 minutos. De inmediato transferir los tubos
a un baño de hielo durante 2 minutos y determinar la
absorbancia de cada solución a la longitud de onda de
máxima absorción, aproximadamente 670 nm, con un Índice de refracción - Entre 1,5216 y 1,5236, a
espectrofotómetro apropiado. Calcular la cantidad, en 20 °C.
mg, de ácido cólico (C24H40O5) en la cantidad tomada 6DOLFLODWR GH LVRSURSLOR - (PM: 180,2) -
de las Sales biliares por la fórmula siguiente:
C6H4OHCOOCH(CH3)2 - Líquido incoloro.
500(AD/AE) Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
en la cual AD y AE son las absorbancias de la solución un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
de Sales biliares y de la Solución estándar de ácido equipado con un detector de ionización a la llama y
una columna de vidrio de 1,8 m × 2 mm con una fase
cólico, respectivamente. Contiene no menos de 45 %
estacionaria constituida por goma de dimetilpolisi-
de ácido cólico.
loxano al 7 % sobre un soporte constituido por tierra
6DOLFLODOGD]LQD - C14H12N2O2 - (PM: 240,3) - silícea para cromatografía de gases la cual ha sido
Emplear uno de grado apropiado o preparar del si- calcinada mezclando diatomea con Na2CO3 y calci-
guiente modo. Disolver 300 mg de sulfato de hidraci- nada a 900 °C [NOTA: la tierra silícea se lava con
na en 5 ml de agua, agregar 1 ml de ácido acético ácido luego se lava con agua hasta neutralidad pero
glacial y 2 ml de una solución (1 en 5) de salicilal- no se lava con bases. La tierra silícea puede ser sila-
dehído en alcohol isopropílico preparada reciente- nizada al tratarla con un agente como dimetildicloro-
mente, mezclar y dejar reposar hasta que se forme un silano para bloquear los grupos silanoles superficia-
precipitado amarillo. Extraer la mezcla con dos por- les]. Mantener el inyector y el detector a aproxima-
ciones de 15 ml de cloruro de metileno. Combinar los damente 250 y 310 °C, respectivamente. La tempera-
extractos de cloruro de metileno y secar sobre sulfato tura de la columna se mantiene a 50 °C y se programa
de sodio anhidro. Decantar la solución de cloruro de un ascenso de 10 °C por minuto hasta 250 °C. Se
metileno y evaporar hasta sequedad. Recristalizar el emplea helio como gas transportador. El área del pico
residuo de salicilaldazina a partir de una mezcla de principal no es menor de 97 % del área total.
tolueno caliente y metanol (60:40) con enfriamiento.
6DOLFLODWR GH VRGLR - Cumple con las especifica-
Filtrar y secar los cristales al vacío.
ciones de Salicilato de sodio y con los requisitos del
Intervalo de fusión <260> - Entre 213 y 219 °C,
siguiente ensayo.
con un intervalo de fusión no mayor de 1 °C.
Cromatografía - Proceder según se indica en Nitrato - Disolver 100 mg en 5 ml de agua y ver-
Límite de Hidracina en Povidona: el cromatograma ter cuidadosamente y sin mezclar la solución sobre
5ml de ácido sulfúrico: no aparece color rojo pardus-
presenta sólo una mancha.
co en la interfase de los dos líquidos.
6DOLFLODOGHKtGR - 2-HOC6H4CHO - (PM: 122,1) -
Líquido transparente, de incoloro a verde amarillento. 6DO QLWURVR 5 - (1-Nitroso-2-naftol-3,6-
Densidad relativa: aproximadamente 1,17. Poco so- disulfonato disódico) - NOC10H4OH(SO3Na)2 -
(PM: 377,3) - Cristales o polvo cristalino amarillo.
luble en agua; soluble en alcohol y éter. Puede conte-
Moderadamente soluble en agua; insoluble en alco-
ner un estabilizante.
hol.
Temperatura de solificación <180> - Entre 1,0 y
Sensibilidad - Disolver 500 mg de acetato de so-
3,0 °C.
Índice de refracción <230> - Entre 1,573 y 1,574, dio en una solución de 0,4 mg de cloruro cobaltoso
a 20 °C. (0,1 mg de cobalto) en 5 ml de agua. Agregar 1 ml de
ácido acético diluido y luego 1 ml de una solución de
Valoración - Cuando se analiza por cromatografía
sal nitroso R (1 en 500): un color rojo, que se produce
de gases, empleando aparatos y condiciones apropia-
inmediatamente, persiste cuando la solución se ca-
das, presenta una pureza de no menos de 98 %.
lienta a ebullición con 1 ml de ácido clorhídrico du-
6DOLFLODWR GH HWLOR - C9H10O3 - (PM: 166,2) - rante 1 minuto.
Líquido incoloro.
6DOVyGLFDGHOiFLGRSHQWDQRVXOIyQLFR - Ver 1-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
Pentanosulfonato de sodio.
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
equipado con un detector de ionización a la llama y 6HEDFDWRGHELVHWLOKH[LOR - (Dioctil sebacato)
una columna capilar de 10 m × 0,25 mm recubierta C8H17OOC(CH2)8COOC8H17 - (PM: 426,7) - Líquido
con una capa de 1 µm de metilsilicona. Mantener el amarillo pálido. Insoluble en agua. Apropiado para
inyector y el detector a aproximadamente 240 y uso en cromatografía de gases. Índice de refracción:
300°C, respectivamente. La temperatura de la colum- aproximadamente 1,448.
na se mantiene a 150 °C y se programa un ascenso de Densidad relativa <160> - Entre 0,913 y 0,917.
10 °C por minuto hasta 250 °C. Se emplea helio co- Intervalo de ebullición - Entre 243 y 248 °C, a
mo gas transportador. El área del pico de salicilato de 5 mm Hg.
etilo no es menor de 99 % del área total.
6HOHQLR - Se - (PA: 78,96) - Polvo rojo oscuro dad fina, lavar el precipitado hasta que esté libre de
amorfo o polvo cristalino negro azulado. Insoluble en cloruro, someter a ignición y pesar. El peso del resi-
agua; soluble en soluciones de hidróxido de sodio o duo de sulfato de bario, multiplicado por 0,1374,
potasio o sulfuros. representa el azufre (S) presente. Contiene no más de
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - 1 g 0,5 mg de S (0,05 %).
no produce más de 2 mg (0,2 %).
6HOHQRPHWLRQLQD - C5H11NO2Se - (PM: 196,1) -
Metales pesados - Agregar al Residuo de ignición
Precaución - Manipular con cuidado, ya que este
3 ml de ácido clorhídrico y 2 ml de ácido nítrico, reactivo es altamente tóxico.
evaporar en un baño de vapor hasta sequedad, absor- Valoración - Pesar exactamente 750 mg, disolver
ber el residuo en una mezcla de 2 ml de ácido clorhí-
en 100 ml de metanol, agregar cristal violeta (SR) y
drico diluido y 50 ml de agua caliente, enfriar, filtrar
titular con ácido perclórico 0,1 N hasta punto final
y lavar el filtro con agua suficiente para obtener 100
verde azulado. Cada mililitro de ácido perclórico
ml de filtrado (Solución muestra). A una alícuota de
0,1 N equivale a 19,61 mg de C5H11NO2Se. Contiene
30 ml de la Solución muestra agregar 10 ml de agua y entre 97,0 y 103,0 %, calculado sobre la sustancia.
10 ml de sulfuro de hidrógeno (SR): el color produci- Intervalo de fusión <260> - Aprox. 260 °C, con
do no es más oscuro que el de una Solución control
descomposición.
preparada a partir de 3 ml de Solución de plomo
Determinación de nitrógeno <200> - Determinar
estándar (ver 590. Límite de Metales Pesados, 0,03
por el método Kjeldahl. Contiene entre 6,8 y 7,4 %,
mg de Pb), 0,2 ml de ácido clorhídrico 1 N, 37 ml de
calculado sobre la sustancia.
agua y 10 ml de sulfuro de hidrógeno (SR) (0,01 %).
Hierro - A 20 ml de la Solución muestra prepara- 6LOLFDWRGHPDJQHVLRDFWLYDGR - Emplear uno de
da en el ensayo para Metales pesados agregar 2 ml de grado apropiado.
ácido clorhídrico y diluir con agua a 47 ml: la solu- 6LOLFDWR GH PDJQHVLR SDUD FURPDWRJUDItD - Gel
ción no presenta más de 0,01 mg de Fe (0,005 %). de sílice y magnesia sumamente blanco, duro, pulve-
Nitrógeno - rizado (malla 60 a 100). Apropiado para uso como
Solución de nitrógeno estándar - Disolver 382 mg adsorbente para cromatografía en columna.
de cloruro de amonio en agua para obtener 1 litro.
Cada mililitro de esta solución equivale a 0,1 mg de 6tOLFHFURPDWRJUiILFDVLODQL]DGDFDOFLQDGDOD
nitrógeno (N). YDGDFRQiFLGR- Emplear uno de grado apropiado.
Procedimiento - Calentar 1,0 g con 10 ml de áci- 6tOLFH PLFURHVIHUDV - Emplear uno de grado
do sulfúrico en un matraz de Kjeldahl hasta que la apropiado.
muestra se disuelva y el volumen de ácido se reduzca
hasta aproximadamente 5 ml. Enfriar, diluir con pre- 6tOLFHRFWLOVLODQL]DGRSDUDFURPDWRJUDItDGHVF
caución con 100 ml de agua, alcalinizar con solución WLYDGRSDUDVHSDUDFLyQGHFRPSXHVWRVEiVLFRVJHO
de hidróxido de sodio (3 en 10) y destilar aproxima- GH - Gel de sílice de granulometría muy fina (3 a
damente 75 ml de la solución en 5 ml de agua que 10 Pm) tratado antes de la introducción de grupos
contenga 2 gotas de ácido clorhídrico 1 N. Diluir el octadecilsililo por lavado cuidadoso e hidrólisis de la
destilado con agua a 250 ml. A una alícuota de 50 ml mayor parte de los enlaces siloxano con el objeto de
de la solución agregar 1 ml de solución de hidróxido reducir al mínimo la interacción con los compuestos
de sodio (1 en 10) y 2 ml de iodo mercuriato de pota- básicos. Polvo blanco, fino, homogéneo. Practica-
sio (SR): el color producido no es más intenso que el mente insoluble en agua y en alcohol.
producido por 0,1 ml de Solución de nitrógeno están- 6LOLFRQD IHQLO PHWLO - Emplear uno de
dar (0,01 mg de N) tratado de la misma manera que grado apropiado.
la muestra (0,005 %).
6RGLR - Na - (PA: 22,99) - Emplear un reactivo
Azufre - Transferir 1,0 g, exactamente pesado, a
analítico apropiado.
un vaso de precipitados y agregar sucesivamente 5 ml
de ácido nítrico, 10 ml de ácido clorhídrico y evapo- 6RGLRFLWUDWRGH - Ver Citrato de sodio.
rar en un baño de vapor hasta sequedad. Agregar 6RGLR PHWDSHULRGDWR GH - Ver Metaperiodato
10 ml de ácido clorhídrico y evaporar de nuevo len- de sodio.
tamente hasta sequedad. Recolectar el residuo en
30 ml de ácido clorhídrico diluido (1 en 30), filtrar y 6ROXFLyQ GH EURPXUR GH GLPLGLRD]XO VXOIiQ -
lavar el filtro con agua para obtener aproximadamen- Disolver separadamente 0,5 g de bromuro de dimidio
te 100 ml de filtrado. Calentar el filtrado a ebullición y 0,5 g de azul sulfán en 30 ml de una mezcla calien-
y agregar lentamente, agitando, 5 ml de cloruro de te de etanol y agua (1:9). Transferir ambas solucio-
bario (SR). Digerir en un baño de vapor durante nes a un matraz aforado de 250 ml, mezclar y com-
4 horas. Filtrar a través de papel de filtro de porosi- pletar a volumen con el mismo solvente. Transferir
20 ml de esta solución a un matraz aforado de hasta sequedad, enfriar y agregar 2 ml de ácido
500 ml, agregar 20 ml de una solución de ácido sulfú- clorhídrico y 2 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %.
rico 14 % v/v diluida a 250 ml con agua y completar Lavar las paredes internas del vaso de precipitados
a volumen con agua. [NOTA: almacenar en envase con agua y evaporar hasta sequedad. Recolectar el
inactínico]. residuo en 20 ml de agua y filtrar si fuera necesario.
6ROXFLyQGHIRUPDOGHKtGR - HCHO - (PM: 30,0) Agregar al filtrado hidróxido de amonio hasta que la
y agua - Emplear un reactivo analítico apropiado. solución sea apenas alcalina luego agregar 4 gotas de
hidróxido de amonio y 5 ml de oxalato de amo-
6ROXFLyQ GH KLGUy[LGR GH WHWUDPHWLODPRQLR HQ nio (SR): la turbidez producida dentro de los 15 mi-
PHWDQRO (CH3)4NOH - (PM: 91,2) - Se consigue nutos no excede la de un blanco que contenga 0,1 mg
comercialmente en concentraciones de 10 y 25 %. de Ca llevando a cabo el procedimiento completo
Las siguientes especificaciones se aplican específi- (0,001%).
camente a la concentración de 25 %; para otras con- Fosfato (Ensayo para reactivos) - Transferir 2 g a
centraciones, pueden ser necesario ajustes apropiados un vaso de precipitados y agregar 5 ml de ácido
en los procedimientos. clorhídrico y 2 g de ioduro de potasio. Calentar la
Valoración - Pesar exactamente alrededor de 1 g solución durante 5 minutos y enfriar. Agregar 2 ml de
de la solución y diluir con agua hasta aproximada- peróxido de hidrógeno al 30 % y evaporar la solución
mente 50 ml. Agregar fenolftaleína (SR) y titular con hasta sequedad. Lavar las paredes del vaso de precipi-
ácido clorhídrico 0,1 N (SV) hasta la desaparición del tados con agua, agregar 2 ml de ácido clorhídrico y
color rosado. Cada mililitro de ácido clorhídrico 2 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %. Evaporar
0,1 N (SV) equivale a 91,15 mg de (CH3)4NOH. nuevamente hasta sequedad: el residuo no presenta
Contiene entre 23 y 25 %. más de 0,01 mg de PO4 (5 ppm).
Transparencia - Una porción de solución en un
tubo de ensayo es transparente o sólo algo turbia, 6ROXFLyQ GH SHUy[LGR GH KLGUyJHQR - Emplear
cuando se observa transversalmente. Agua oxigenada.
6ROXFLyQ HVWiQGDU GH SHUFORUDWR GH KROPLR -
6ROXFLyQ GH KLSRFORULWR GH VRGLR - Es una solu-
Emplear una solución con una concentración de 40 g
ción de hipoclorito de sodio (NaOCl) en agua. Gene-
ralmente de color amarillo a verde amarillento. Tiene por litro, preparada disolviendo óxido de holmio en
olor a cloro. Es afectada por la luz y se deteriora una solución de ácido perclórico que contiene 141 g
por litro.
gradualmente. Almacenar en envases inactínicos,
preferentemente debajo de 25 °C. 6ROXFLyQLVRWyQLFD GHFORUXURGHVRGLR - Emple-
Precaución - Esta solución es corrosiva y puede ar Solución fisiológica (SR).
producir gases que son corrosivos y tóxicos. Es un 6ROXFLRQHVUHJXODGRUDV - Ver Soluciones regula-
oxidante potente que puede reaccionar violentamente
doras en Soluciones.
con agentes reductores. Es irritante y corrosiva para
la piel y mucosas. 6RUELWRO Emplear Sorbitol.
Valoración - Transferir aproximadamente 3 ml a 6XGiQ,,, - C22H16N4O - (PM: 352,4) - Polvo de
un matraz para iodo, previamente pesado, con tapón color rojo a rojo pardo. Emplear uno de grado apro-
de vidrio y pesar exactamente. Agregar 50 ml de piado.
agua, 2 g de ioduro de potasio y 10 ml de ácido acéti- Valoración -
co, insertar el tapón en el matraz y dejar reposar en la Fase estacionaria - Emplear una placa para cro-
oscuridad durante 10 minutos. Retirar el tapón, lavar matografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía)
las paredes del matraz con agua y titular el iodo libe- recubierta con gel de sílice para cromatografía de
rado con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregando 0,25 mm de espesor.
3 ml de almidón (SR) cerca del punto final. Cada Fase móvil - Hexano y acetato de etilo (80:20).
mililitro de tiosulfato de sodio 0,1 N equivale a Procedimiento - Examinar bajo luz ultravioleta a
3,723 mg de NaOCl. Contiene no menos de 5,25 %. 254 nm. Presenta una sola mancha, con trazas de
Si se desea calcular el porcentaje de cloro disponible, impurezas.
observar que cada mililitro de tiosulfato de sodio
0,1 N consumido equivale a 3,545 mg de cloro dis- 6XGiQ ,9 - C24H20N4O - (PM: 380,4) - Polvo
ponible. marrón a marrón rojizo.
Calcio - Transferir 10,0 g a un vaso de precipita- Valoración - Transferir aproximadamente 25 mg,
dos de 150 ml, disolver en 10 ml de agua y agregar exactamente pesados, a un matraz aforado de 100 ml.
5 ml de ácido clorhídrico y 2 g de ioduro de potasio. Disolver en cloroformo, completar a volumen con
Calentar la mezcla durante 5 minutos, enfriar y agre- cloroformo y mezclar. Diluir 2,0 ml de la solución
gar 2 ml de peróxido de hidrógeno al 30 %. Evaporar clorofórmica resultante a 50,0 ml. Determinar la
absorbancia de esta solución en celdas de 1 cm a la Valoración - Transferir 800 mg, exactamente pe-
longitud de onda de máxima absorción, aproximada- sados, a un erlenmeyer, agregar 25 ml de agua y 3 ml
mente 520 nm, con un espectrofotómetro apropiado, de ácido sulfúrico y calentar hasta disolver. Enfriar y
empleando cloroformo como blanco. Calcular el agregar 60 ml de una mezcla de agua y ácido fosfóri-
porcentaje de Sudán IV en la muestra tomada por la co (20:1). Agregar 25 ml de solución de ioduro de
fórmula siguiente siguiente: potasio (1 en 10), insertar el tapón en el erlenmeyer y
(100A)/(85C) dejar reposar durante 15 minutos. Reemplazar el aire
sobre la solución por dióxido de carbono y, mientras
en la cual A es la absorbancia a 520 nm y C es la continúa el flujo de dióxido de carbono, titular el iodo
concentración de muestra, en g por litro. Contiene no liberado con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregan-
menos de 90 %. do 3 ml de almidón (SR) cerca del punto final. Cada
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- mililitro de tiosulfato de sodio 0,1 N equivale a
rante 2 horas: no pierde más de 10 % de su peso. 33,22 mg de Ce(SO4)2. Contiene no menos de
6XOIDPDWR GH $PRQLR - NH4OSO2NH2 - 80,0 %.
(PM: 114,1) - Emplear un reactivo analítico apropia- Cloruro (Ensayo para reactivos ) - Disolver 1 g en
do. una mezcla de 5 ml de ácido nítrico y 4 ml de agua.
Filtrar, si fuera necesario, y diluir con agua a 20 ml.
6XOIDQLODPLGD - C6H8N2O2S - (PM: 172,2) - Em- A 10 ml de la dilución, agregar 1 ml de nitrato de
plear un reactivo analítico apropiado. plata (SR), dejar reposar durante 10 minutos y filtrar
6XOIDWR iFLGR GH SRWDVLR - (Sulfato monopotási- hasta clarificar. A los restantes 10 ml de solución
co) - KHSO4 - (PM: 136,2) - Cristales incoloros, muestra, agregar 1 ml de nitrato de plata (SR): la
transparentes e higroscópicos. Facilmente soluble en turbidez producida no excede la de un control prepa-
agua proporcionando una solución fuertemente ácida. rado mediante el agregado de 0,05 mg de Cl al filtra-
do obtenido a partir de los primeros 10 ml de solu-
6XOIDWR iFLGR GH VRGLR - (Bisulfato de sodio) - ción muestra (0,01 %).
NaHSO4 - (PM: 120,1) - Muy soluble en agua hir- Metales pesados - Calentar 500 mg con una mez-
viendo, fácilmente soluble en agua. Se descompone cla de 10 ml de agua y 0,5 ml de ácido sulfúrico hasta
en alcohol dando sulfato de sodio y ácido sulfúrico que se complete la disolución. Enfriar, diluir con
libre. agua a 50 ml y burbujear sulfuro de hidrógeno gaseo-
Punto de fusión <260> - Aprox. 315 °C. so a través de la solución hasta que ésta se sature: el
6XOIDWRiFLGRGHWHWUDEXWLODPRQLR - C16H37NO4S precipitado que se forma es blanco o no más oscuro
(PM: 339,5) - Polvo cristalino blanco. Soluble en que amarillo pálido.
alcohol proporcionando una solución ligeramente Hierro - Disolver 100 mg en una mezcla de 5 ml
turbia, incolora. de agua y 2 ml de ácido clorhídrico, calentando, si
Valoración - Disolver aproximadamente 170 mg, fuera necesario, y enfriar. Transferir a una probeta
exactamente pesados, en 40 ml de agua. Titular con con tapón de vidrio, diluir con agua a 25 ml y agregar
hidróxido de sodio 0,1 N (SV) determinando el punto 5 ml de tiocianato de amonio (SR) y 25 ml de éter.
final potenciométricamente. Realizar una determina- Agitar suave y completamente y dejar que las fases se
ción con un blanco y hacer las correcciones necesa- separen: cualquier color rosado en la capa etérea no
rias. Cada mililitro de hidróxido de sodio 0,1 N equi- es más oscuro que el de un control, preparado en
vale a 33,95 mg de C16H37NO4S. Contiene no menos forma similar, conteniendo 0,02 mg de Fe (0,02 %).
de 97,0 %. 6XOIDWR FpULFR DPyQLFR - (PM: 632,6) -
Intervalo de fusión <260> - Entre 169 y 173 °C. Ce(SO4)2.2(NH4)2SO4.2H2O - Cristales amarillos a
6XOIDWR iFLGR GH WHWUDKH[LODPRQLR - anaranjado amarillento. Se disuelve lentamente en
C24H53NO4S - (PM: 451,8) - Cristales blancos. agua, pero más rápidamente en presencia de ácidos
Intervalo de fusión <260> - Entre 100 y 102 °C. minerales.
Valoración - Pesar exactamente 1 g, disolver en
6XOIDWRFpULFR - Ce(SO4)2 con una cantidad varia-
10 ml de ácido sulfúrico diluido (1 en 10) y agregar
ble de agua - (PM: 332,2 - anhidro) - También puede
40 ml de agua. Agregar ortofenantrolina (SR) y titu-
contener sulfatos de otros elementos asociados de
lar con sulfato ferroso amónico 0,1 N (SV) reciente-
tierras raras. Cristales o polvo cristalino amarillo a
mente estandarizado.
amarillo anaranjado. Prácticamente insoluble en agua
Cada mililitro de sulfato ferroso amónico 0,1 N
fría; lentamente soluble en ácidos minerales diluidos
equivale a 63,26 mg de Ce(SO4)2.2(NH4)2.SO4.2H2O.
fríos, pero más fácilmente soluble cuando se calienta
Contiene no menos de 94 %.
con estos solventes.
Hierro - Disolver 100 mg en 30 ml de ácido 6XOIDWRGHDGHQLQD - (C5H5N5)2 . H2SO4 . 2H2O -
sulfúrico diluido (1 en 10) y agregar peróxido de (PM: 404,4) - Cristales blancos o polvo cristalino.
hidrógeno (SR), gota a gota, hasta que la solución sea Luego de secar a 110 °C, funde aproximadamente a
incolora. Agregar agua de amoníaco fuerte hasta que 200 °C, con descomposición. Poco soluble en agua;
el pH esté entre 1 y 3, enfriar a temperatura ambiente, menos soluble en alcohol. Soluble en soluciones de
adicionalmente ajustar a pH 3,5 (empleando un elec- hidróxido de sodio. No precipita con solución de
trodo de vidrio) y diluir a 50 ml. A 5 ml de esta solu- iodo (SR) o iodomercuriato de potasio (SR) pero
ción, agregar 5 ml de agua, mezclar y agregar 6 ml de precipita con trinitrofenol (SR).
solución de clorhidrato de hidroxilamina (1 en 10) y Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - In-
4 ml de una solución acidificada de ortofenantrolina apreciable, determinado sobre 100 mg.
(1 en 1.000): cualquier color rojo producido no es Agua - Secar a 105 °C hasta peso constante: no
más oscuro que el de un control que contiene 0,1 mg pierde más de 10,0 % de su peso.
de Fe y los volúmenes de ácido y peróxido de hidró-
6XOIDWR GH DPRQLR - (NH4)2SO4 - (PM: 132,1) -
geno (SR) empleado con la muestra (0,1 %). Emplear un reactivo analítico apropiado.
Fosfato - Disolver 200 mg en 30 ml de ácido
sulfúrico diluido (1 en 10), agregar peróxido de 6XOIDWR GH EUXFLQD - (PM: 1.013,1) -
hidrógeno al 30 % hasta que la solución sea incolora (C23H26N2O4)2 . H2SO4 . 7H2O - Emplear un reactivo
y calentar a ebullición para eliminar el exceso de analítico apropiado.
peróxido. Enfriar y diluir a 100 ml. A 5 ml de la solu- 6XOIDWRGHFDOFLR - CaSO4 . 2H2O - (PM: 172,2)
ción resultante, agregar 55 ml de agua y ajustar a pH Emplear un reactivo analítico apropiado.
entre 2 y 3 con hidróxido de amonio. [NOTA: ajustar
el pH cuidadosamente, ya que la formación de un 6XOIDWR GH FLQF - ZnSO4 . 7H2O - (PM: 287,5) -
precipitado permanente dificultará las operaciones Polvo cristalino blanco o cristales transparentes,
subsiguientes. Si se formara un precipitado perma- fluorescentes. Muy soluble en agua; prácticamente
nente, descartar la solución y comenzar con una alí- insoluble en alcohol.
cuota nueva de la solución muestra.] Agregar 500 mg 6XOIDWR GH GLHWLOIHQLOHQGLDPLQD - (Sulfato de
de molibdato de amonio y ajustar a pH 1,8 (emplean- N,N’-dietil-p-fenilendiamina) - C10H18N2O4S -
do un electrodo de vidrio) con ácido clorhídrico di- (PM: 262,3) - Polvo blanco o ligeramente amarillen-
luido (1 en 10). Calentar la solución a ebullición, to, soluble en agua. Funde a 185 °C aproximadamen-
enfriar, agregar 10 ml de ácido clorhídrico y diluir a te, con descomposición. Almacenar en envases in-
100 ml. Transferir a una ampolla de decantación, actínicos.
agregar 35 ml de éter, agitar vigorosamente, dejar
separar y descartar la fase acuosa. Lavar la fase etérea 6XOIDWR GH GLKLGURTXLQLGLQD - (PM: 785,0) -
dos veces agitando con porciones separadas de 10 ml (C20H26N2O2)2 . H2SO4 . 2H2O - Polvo cristalino
de ácido clorhídrico diluido (1 en 10), descartando blanco.
siempre la fase acuosa. Agregar 0,20 ml de una solu- Valoración - Disolver aproximadamente 200 mg,
ción recientemente preparada de 2 g de cloruro esta- exactamente pesados, en 20 ml de anhídrido acético,
ñoso en 100 ml de ácido clorhídrico, agitar bien y agregar 4 gotas de p-naftolbenceína (SR) y titular con
dejar que las fases se separen: el color azul en la fase ácido perclórico 0,1 N (SV) desde una microbureta
etérea no es más oscuro que el de un control prepara- de 10 ml hasta punto final verde. Realizar una deter-
do al agregar el equivalente a 0,01 mg de PO4 a 5 ml minación con un blanco y hacer las correcciones
de ácido sulfúrico diluido (3 en 25) y tratados de la necesarias. Cada mililitro de ácido perclórico 0,1 N
misma manera (0,1 %). equivale a 24,96 mg de (C20H26N2O2)2 . H2SO4. Con-
tiene no menos de 99 %.
6XOIDWRF~SULFR - CuSO4 . 5H2O - (PM: 249,7) -
Emplear un reactivo analítico apropiado. 6XOIDWR GH GLKLGURTXLQLQD - (PM: 785,0) -
(C20H26N2O2)2 . H2SO4 . 2H2O - Polvo cristalino
6XOIDWRF~SULFRDQKLGUR - CuSO4 - (PM: 159,6) - blanco.
Polvo blanco o blanco grisáceo exento de un tinte Valoración - Disolver aproximadamente 200 mg,
azul. Con el agregado de una cantidad pequeña de exactamente pesados, en 20 ml de anhídrido acético,
agua, se torna azul. Soluble en agua. Almacenar en agregar 4 gotas de p-naftolbenceína (SR) y titular con
envases de cierre perfecto. ácido perclórico 0,1 N (SV) desde una microbureta
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no presenta de 10 ml hasta punto final verde. Realizar una deter-
más de 0,02 mg de Cl (0,002 %). minación con un blanco y hacer las correcciones
Sustancias no precipitadas por sulfuro de hidró- necesarias. Cada mililitro de ácido perclórico 0,1 N
geno - Determinar según se indica para Acetato equivale a 24,96 mg de (C20H26N2O2)2 . H2SO4. Con-
cúprico: el residuo no pesa más de 6 mg (0,15 %). tiene no menos de 99 %.
6XOIDWR GH HVWULFQLQD - (PM: 857,0) - fácilmente soluble en agua hirviendo; poco soluble en
(C21H22N2O2)2 . H2SO4 . 5H2O - Cristales incoloros o alcohol; insoluble en éter. Almacenar en envases
blancos, polvo cristalino blanco. Sus soluciones son inactínicos de cierre perfecto.
levorrotatorias. Moderadamente soluble en agua y Solubilidad en HCl - A 100 mg agregar 2 ml de
alcohol; poco soluble en cloroformo; insoluble en ácido clorhídrico: se disuelve rápidamente y comple-
éter. tamente.
Solubilidad - Una solución de 500 mg en 25 ml de o-Aminofenol - A la solución del ensayo anterior
agua es transparente, incolora y se disuelve comple- agregar 1 gota de cloruro férrico (SR): no se produce
tamente. color pardo rojizo.
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - No Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - El
más de 0,1 %. residuo no pesa más de 2 mg, determinado sobre 2 g
Brucina - A 100 mg agregar 1 ml de ácido nítrico (0,1 %).
diluido (1 en 2): se puede observar un color amarillo Cloruro - A una solución de 1 g en 20 ml de agua
pero no se observa un color pardo rojo o rojizo. agregar 1 ml de ácido nítrico y 1 ml de nitrato de
6XOIDWR GH KLGUDFLQD - (NH2)2 . H2SO4 - plata (SR): no se produce más que una ligera opales-
(PM: 130,1) - Emplear un reactivo analítico apropia- cencia.
do. Aptitud para el ensayo de fosfatos - Disolver 2 g
en 100 ml de agua. A 10 ml de esta solución agregar
6XOIDWR GH LREHQJXDQR - (Sal de hemisulfato de 90 ml de agua y 20 g de bisulfito de sodio. Confirmar
m-iodobencilguanidina) - C8H10IN3 . ½H2SO4 - la aptitud de la solución del reactivo por el siguiente
(PM: 324,1) - Polvo blanco. Fácilmente soluble en ensayo: agregar 1 ml de la solución del reactivo a
metanol. cada una de cuatro soluciones que contengan 25 ml
Valoración - de ácido sulfúrico 0,5 N y 1 ml de una solución de
Fase estacionaria - Emplear una placa para cro- 5 g de molibdato de amonio en 100 ml de ácido
matografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) sulfúrico 1N. Agregar 0,005 mg de fosfato (PO4) a
recubierta con gel de sílice para cromatografía con una de las soluciones, 0,01 mg a la segunda y 0,02
indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor. mg a la tercera. Dejar reposar a temperatura ambiente
Fase móvil - Alcohol butílico, agua y ácido acéti- durante 2 horas: las soluciones en los tres tubos pre-
co (60:25:15). sentan diferencias fácilmente perceptibles en color
Procedimiento - Examinar bajo luz ultravioleta a azul que corresponden a las cantidades relativas de
254 nm. No se observa más de una mancha de impu- fosfato agregado y el que contiene 0,005 mg de fosfa-
rezas de no más de 0,5 %. to posee un color azul sensiblemente más profundo
6XOIDWR GH OLWLR - Li2SO4 . H2O - (PM: 128,0) - que el blanco.
Emplear un reactivo analítico apropiado. 6XOIDWRGHQtTXHO - NiSO4 . 7H2O - (PM: 280,9)
6XOIDWR GH PDJQHVLR - MgSO4 . 7H2O - - Polvo cristalino o cristales verdes, fácilmente en
(PM: 246,5) - Emplear un reactivo analítico apropia- agua, poco soluble en alcohol.
do. 6XOIDWRGHSRWDVLR - K2SO4 - (PM: 174,3) - Em-
6XOIDWR GH PDJQHVLR DQKLGUR - MgSO4 - plear un reactivo analítico apropiado.
(PM: 120,4) - El sulfato de magnesio anhidro puede 6XOIDWR GH SRWDVLR \DO XPLQLR - (PM: 474,4) -
prepararse del siguiente modo: colocar una cantidad AlK(SO4)2 . 12H2O - Emplear un reactivo analítico
apropiada de sulfato de magnesio, preferentemente apropiado.
pulverizado, en un recipiente playo y exponer a una
6XOIDWRGHVRGLR - (Sal de Glauber) - (PM: 322,2)
temperatura de aproximadamente 80 °C durante va-
Na2SO4 . 10H2O - Cristales incoloros, inodoros o
rias horas agitando ocasionalmente. Calentar de 275 a
gránulos blancos. Es eflorescente. Funde a 32,5 °C.
300°C hasta que el peso sea prácticamente constante.
Fácilmente soluble en agua; soluble en glicerina;
Transferir el producto aún caliente a envases de cierre
perfecto, ya que la sal anhidra es muy higroscópica. insoluble en alcohol. Almacenar en envases bien
cerrados, protegidos del calor.
6XOIDWR GH PDQJDQHVR - (Sulfato de manganeso Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - No
monohidrato) - MnSO4 . H2O - (PM: 169,0) - Emple- más de 1 mg, determinado sobre 10 g (0,01 %).
ar un reactivo analítico apropiado. pH - El pH de una solución de 10 g en 200 ml de
6XOIDWR GH pPHWLODPLQRIHQRO - (PM: 344,4) - agua libre de amoníaco está entre 5,2 y 8,2.
(p-CH3NHC6H4OH)2 . H2SO4 - Cristales pequeños o Arsénico (Ensayo para reactivos) - La mancha
polvo cristalino blanco o blanco amarillento. Se deco- producida por 3 g no excede la producida por
lora por exposición al aire. Soluble en agua fría; 0,003 mg de As (1 ppm).
Calcio, magnesio y precipitado de R2O3 - Disol- en un cromatógrafo de gases apropiado y registrar la
ver 5 g en 75 ml de agua, filtrar y agregar 5 ml de altura del pico por duplicado. De manera similar,
oxalato de amonio (SR), 2 ml de fosfato de amo- determinar la altura del picos de Solución B por du-
nio (SR) y 10 ml de hidróxido de amonio. Agitar bien plicado. El valor promedio obtenido para la Solución
y dejar reposar durante toda la noche. Si se forma B está dentro de 5,0 % del valor obtenido para la
precipitado, filtrar, lavar con amoníaco (SR) (1 en 4) Solución A.
y someter a ignición: el residuo no pesa más de 1 mg El cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatograf-
(0,02 %). ía) está equipado con un detector y una columna de
Cloruro - Disolver 1 g en 50 ml de agua y filtrar vidrio de 1,2 m u 4 mm con 3 % de fase estacionaria
si fuera necesario. A 25 ml de la solución agregar constituida por 50 % fenil silicona y 50 % de metil-
1 ml de ácido nítrico y 1 ml de nitrato de plata (SR): polisiloxano sobre un soporte constituido por tierra
si se produce turbidez no debe exceder la de un con- silícea para cromatografía de gases la cual ha sido
trol que contenga 0,01 mg de Cl (0,002 %). calcinada mezclando diatomea con Na2CO3 y calci-
Metales pesados (Ensayo para reactivos) - No nada a 900 °C. [NOTA: la tierra silícea se lava con
más de 5 ppm. ácido luego se lava con agua hasta neutralidad pero
Hierro <580> - 1 g disuelto en 47 ml de agua que no se lava con bases. La tierra silícea puede ser sila-
contenga 2 ml de ácido clorhídrico, no presenta más nizada al tratarla con un agente como dimetildicloro-
de 0,01 mg de Fe (0,001 %). silano para bloquear los grupos silanoles superficia-
Compuestos nitrogenados (Ensayo para reactivos) les.] Después de curada y acondicionada, mantener la
2 g no presentan más de 0,01 mg de N (5 ppm). columna, el inyector y el detector a aproximadamente
6XOIDWRGHVRGLRDQKLGUR - Na2SO4 - (PM: 142,0) 210, 225 y 240 °C, respectivamente. Se emplea helio
- Emplear un reactivo analítico apropiado. como gas transportador con un caudal de aproxima-
Para emplear en análisis de alcaloides por croma- damente 60 ml por minuto.
tografía de gases y líquidos, ajustar también al si- 6XOIDWRGHVRGLRGHFDKLGUDWDGR - Emplear Sulfa-
guiente ensayo adicional. to de sodio.
Aptitud para la valoración de alcaloides - Trans-
6XOIDWR GH WHWUDEXWLO DPRQLR KLGURJHQDGR -
ferir aproximadamente 10 mg de atropina, exacta-
(Sulfato ácido de tetrabutil monio) - C16H37NO4S -
mente pesados, a un matraz aforado de 25 ml, disol-
(PM: 339,5) - Polvo blanco cristalino. Soluble n
ver en alcohol y completar a volumen con alcohol.
alcohol con la que produce una solución incolora
Transferir 3 ml de la solución a cada una de dos am-
levemente turbia.
pollas de decantación de 60 ml y agregar a cada una
Intervalo e fusión <260> - Entre 69 y 173 ºC.
10 ml de agua, 1 ml de hidróxido de sodio 1 N y
Valoración - Disolver aproximadamente 170 mg
10 ml de cloroformo. Agitar completamente y dejar
de sulfato de tetrabutil amonio hidrogenada en 40 ml
separar las fases. Filtrar la fase orgánica desde una
de agua. Titular con hidróxido e sodio 0,1 N (SV),
ampolla de decantación a través de un papel separa-
determinar el punto final potenciométricamente.
dor de fases, previamente lavado con 5 ml de cloro-
Realizar una titulación con un blanco y hacer las
formo y recolectar el filtrado en un envase apropiado.
correcciones necesarias (ver 780. Volumetría). Cada
Agregar 10 ml de cloroformo a la ampolla de decan-
ml de hidróxido de sodio 0,1 N equivale a 33,95 mg
tación, agitar vigorosamente y filtrar la fase orgánica
de C16H37NO4S. No debe contener menos de 97,0 %.
a través del mismo papel separador de fases, recolec-
tando y combinando los filtrados en el mismo envase. 6XOIDWR GH YDQDGLOR - VOSO4 . xH2O -
Designar los filtrados combinados como Solución A. (PM: 163,01 - anhidro) - Cristales azules, higroscópi-
Filtrar la fase orgánica de la segunda ampolla de cos. Lenta e incompleta solubilidad en agua.
decantación a través de 30 g del sulfato de sodio Valoración - Pesar exactamente 400 mg de mues-
anhidro, colocado sobre una torunda de lana de vidrio tra seca obtenida en el ensayo para Agua y transferir
en un embudo previamente lavado con cloroformo y con 15 a 20 ml de agua a un vaso de precipitados.
recolectar el filtrado en un envase apropiado. Agregar Agregar 3 ml de ácido sulfúrico, cubrir el vaso de
10 ml de cloroformo a la ampolla de decantación, precipitados con un vidrio de reloj y calentar en un
agitar a vigorosamente y filtrar la fase orgánica a baño de vapor hasta que se disuelva completamente.
través de la misma porción de sulfato de sodio an- Enfriar, diluir con 125 ml de agua y titular con per-
hidro, recolectando y combinando los dos filtrados en manganato de potasio 0,1 N (SV) hasta la producción
el mismo envase. Designar los filtrados combinados de un color rosado que persiste durante 1 minuto.
como Solución B. Evaporar las dos soluciones al Cada mililitro de permanganato de potasio 0,1 N
vacío a un volumen de aproximadamente 1 ml. Inyec- equivale a 16,30 mg de VOSO4. Contiene no menos
tar un volumen, exactamente medido, de Solución A de 97 %.
Agua - Secar aproximadamente 1 g, exactamente requiere más de 0,16 ml para producir un color rosa-
pesado, a 220 °C hasta peso constante: no pierde más do permanente (0,02 % como Fe+2).
de 50,0 % de su peso. [NOTA: ya que los reactivos empleados en los
Vanadio pentavalente - Calentar 1 g, exactamente ensayos para Cobre y Cinc pueden contener cantida-
pesado, con 50 ml de agua y 5 ml de ácido clorhídri- des excesivas de cobre y cinc, en primer lugar deben
co en un erlenmeyer hasta disolver. Enfriar, agregar purificarse por extracción con Solución de ditizona
2 g de ioduro de potasio, insertar el tapón y dejar para extracción (ver 600. Límite de plomo).]
reposar durante 30 minutos. Agregar 50 ml de agua y Cobre - Disolver 1,2 g en 100 ml de agua. A
titular el iodo liberado con tiosulfato de sodio 10 ml agregar 50 ml de una solución que contiene 5 g
0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) como de tartrato de amonio y 5 ml de hidróxido de amonio.
indicador. Realizar una determinación con un blanco Agregar 10 ml de Solución de ditizona estándar (ver
y hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro de 600. Límite de plomo), agitar durante 2 minutos,
tiosulfato 0,1 N equivale a 5,095 mg de vanadio (V). extraer la fase de ditizona y comparar el color rosado
Contiene no más de 0,5 %, calculado sobre la sustan- con el de un control que contiene 6 µg de ion cobre
cia seca. (Cu) tratado de la misma manera. Si el color en la
Sustancias no precipitadas por amoníaco - Disol- solución muestra es menos intenso que el de un con-
ver 1,0 g calentando con 20 ml de agua y 2 ml de trol, la muestra contiene menos del límite de Cobre y
ácido clorhídrico. Diluir con agua a aproximadamen- Cinc. Si el color en la solución muestra es más inten-
te 75 ml y neutralizar al papel de tornasol con amon- so que el de un control, agregar 15 ml de ácido
íaco (SR). Transferir la solución a una probeta de 100 clorhídrico diluido (1 en 250) y agitar durante 2 mi-
ml, agregar lentamente 5 ml de amoníaco (SR) y agua nutos. Extraer la solución de ditizona y agitar con una
suficiente hasta la marca de 100 ml y dejar reposar de segunda porción de 15 ml de ácido clorhídrico dilui-
la noche a la mañana. Decantar 50 ml de la solución do (1 en 250) durante 2 minutos. Extraer la ditizona,
sobrenadante a través de un filtro, agregar 5 gotas de combinar los dos extractos ácidos y reservar para el
ácido sulfúrico, evaporar hasta sequedad y someter a ensayo de Cinc. Si se produce un color rosado en la
ignición: el residuo no pesa más de 10 mg (2,0 %). solución de ditizona no es más oscuro que el de la
solución control tratada de la misma manera
6XOIDWRIpUULFR - Fe2(SO4)3 . xH2O - Polvo blanco
grisáceo higroscópico o gránulos de color marrón (0,005 %).
rojizo, lentamente soluble en agua. Cinc - A los extractos ácidos combinados reteni-
Valoración - Pesar exactamente alrededor de dos del ensayo de Cobre agregar acetato de sodio
700 mg y disolver en una mezcla de 50 ml de agua y 0,5 M para llevar a pH entre 5,0 y 5,5 y luego agregar
3 ml de ácido clorhídrico en un erlenmeyer con tapón 1 ml de tiosulfato de sodio 0,1 N. Agregar 10 ml de
de vidrio. Agregar 3 g de ioduro de potasio y dejar Solución de ditizona estándar (ver 600. Límite de
reposar en la oscuridad durante 30 minutos. Diluir plomo), agitar durante 2 minutos y dejar que las fases
con 100 ml de agua y titular con tiosulfato de sodio se separen. Drenar la ditizona y descartar la fase
0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) cerca acuosa. Si se produce color rosado no es mayor que
del punto final. Cada mililitro de tiosulfato de sodio el de un control preparado agregando 0,006 mg de
0,1 N equivale a 5,585 mg de Fe. Contiene no menos cinc (Zn) a los extractos ácidos combinados del con-
de 21,0 % y no más de 23,0 %. trol empleado en el ensayo para Cobre (0,005 %).
Materia insoluble (Ensayo para reactivos) - 10 g Nitrato - Disolver 10 g en 100 ml de ácido sulfú-
disueltos en una mezcla de 100 ml de agua y 5 ml de rico diluido (1 en 100), calentar a ebullición y verter,
ácido sulfúrico, no presentan más de 2 mg de materia lentamente, en una mezcla de 140 ml de agua y 50 ml
insoluble (0,02 %). de agua de amoníaco fuerte. Filtrar a través de un
Cloruro - Disolver 1 g calentando con una mezcla filtro plegado mientras todavía está caliente, lavar
de 10 ml de agua y 1 ml de ácido nítrico, agregar con agua caliente hasta que el volumen de filtrado sea
4 ml de ácido nítrico adicional y diluir con agua a 300 ml, mezclar y enfriar. A 15 ml de esta solución
50 ml. A 25 ml agregar 1 ml de ácido fosfórico y agregar 1 ml de solución de cloruro de sodio (1 en
1 ml de nitrato de plata (SR). Si se produce turbidez 200), 0,10 ml de índigo carmín (SR) y 15 ml de ácido
no excede la producida en un control que contiene sulfúrico. El color azul no desaparece completamente
0,01 mg de ion cloruro (Cl), 1 ml de ácido nítrico, después de 5 minutos (0,01 %).
1 ml de ácido fosfórico y 1 ml de nitrato de plata Sustancias no precipitadas por amoníaco - Eva-
(SR) (0,002 %). porar hasta sequedad 30 ml del filtrado obtenido en el
Hierro ferroso - Disolver 4 g calentando con ensayo para Nitrato e incinerar suavemente: el peso
50 ml de ácido sulfúrico diluido (1 en 10), enfriar y del residuo no excede 1 mg (0,10 %).
titular con permanganato de potasio 0,1 N: no se
6XOIDWRIpUULFRDPyQLFR - FeNH4(SO4)2 . 12H2O de iodo 0,1 N, haciendo la corrección para el iodo
(PM: 482,2) - Emplear un reactivo analítico apropia- consumido en un blanco (0,15 %).
do. Nitrato - Dispersar 1 g en 9 ml de agua, agregar
6XOIDWR IHUURVR - FeSO4 . 7H2O - (PM: 278,0) - 1 ml de solución de cloruro de sodio (1 en 200), mez-
Emplear un reactivo analítico apropiado. clar y agregar 0,1 ml de índigo carmín (SR) y 10 ml
de ácido sulfúrico: el color azul de la solución clara
6XOIDWR IHUURVR DPyQLFR - no desaparece totalmente dentro de los 5 minutos
Fe(NH4)2(SO4)2 . 6H2O - (PM: 392,1) - Emplear un (0,005 %).
reactivo analítico apropiado.
6XOILWR GH VRGLR - Emplear Sulfito de sodio, an-
6XOIDWRPHUF~ULFR - HgSO4 - (PM: 296,7) - Pol- hidro.
vo fino, blanco, pesado. Es inodoro. Soluble en solu-
ción de cloruro de sodio (1 en 5). 6XOILWRGHVRGLR DQKLGUR - (Sulfito de sodio dese-
Valoración - Pesar exactamente 500 mg y disol- cado) - Na2SO3 - (PM: 126,0) - Emplear un reactivo
analítico apropiado.
ver en 50 ml de ácido nítrico diluido (1 en 2). Agre-
gar 1ml de solución de nitrato férrico (1 en 10) y p6XOIRIHQLOD]RFURPRWURSDWR VyGLFR - (Sal
titular con tiocianato de amonio 0,1 N (SV). Cada trisódica del ácido 4,5-dihidroxi-3-(p-sulfofenilazo)-
mililitro de tiocianato de amonio 0,1 N equivale a 2,7-naftalendisulfónico) - C16H9N2Na3O11S3 . 3H2O -
10,03 mg de Hg. Contiene entre 67 y 67,5 % de Hg. (PM: 624,5) - Polvo rojo brillante. Muy soluble en
Residuo de ignición - Someter a ignición 10 g a agua; insoluble en alcohol. Se combina con oxicloru-
una velocidad tal que se requiere de 1 a 2 horas para ro de circonio para formar una laca de circonio rosada
volatilizar la muestra y calcinar a 800 ± 25 °C duran- soluble.
te 15 minutos: el residuo no pesa más de 1 mg 6XOIXUR GH KLGUyJHQR - H2S - (PM: 34,1) - Gas
(0,01 %).
incoloro, venenoso, más pesado que el aire. Soluble
Cloruro - Mezclar 1 g con 50 ml de agua, agregar
en agua. Se genera tratando sulfuro ferroso con ácido
1 ml de ácido fórmico y agregar solución de hidróxi-
clorhídrico diluido o sulfúrico diluido. Pueden em-
do de sodio (1 en 10) gota a gota hasta que se forme plearse otros sulfuros que producen sulfuro de hidró-
una pequeña cantidad de precipitado. Calentar a re- geno con ácidos diluidos. Está también disponible en
flujo la suspensión hasta que todo el mercurio se
forma de gas comprimido en cilindros.
reduzca a metal y la solución sea transparente. En-
friar, filtrar a través de un papel libre de cloruro, lavar 6XOIXUR GH VRGLR - Na2S . 9H2O - (PM: 240,2) -
con dos porciones de 15 ml de agua y diluir con agua Emplear un reactivo analítico apropiado.
a 90 ml. A 30 ml agregar 1 ml de ácido nítrico y 1 ml 6XVWUDWR FURPRJpQLFR SDUD HO HQVD\R GH DQWL
de nitrato de plata (SR), mezclar y dejar reposar du- IDFWRU ;D - Reactivo que consta de tripéptidos o te-
rante 5 minutos: si se produce turbidez no excede la trapéptidos sintéticos acoplados a un cromóforo.
de un control preparado agregando 0,01 mg de Cl a Tiene un grupo arginina en la porción aminoácido
30 ml de agua tratado de la misma manera (0,003 %). terminal, el cual le confiere su actividad específica, y
Hierro <580> - Al Residuo de ignición agregar tiene un extremo p-nitroanilina covalentemente unido
3 ml de ácido clorhídrico diluido (1 en 2), cubrir con al grupo carbonilo de la arginina. El péptido sintético
un vidrio de reloj y digerir en un baño de vapor du- imita la secuencia del péptido del sitio de acción del
rante 20 minutos. Retirar el vidrio de reloj y evaporar sustrato natural específico para el factor activado de
hasta sequedad. Absorber el residuo en una mezcla de coagulación a medir - (PM está entre: 600 y 750). El
1 ml de ácido clorhídrico diluido (1 en 2) y 30 ml de sustrato completo es incoloro y el factor de coagula-
agua, filtrar si fuera necesario y diluir con agua a ción a medir cataliza la división del cromóforo
100 ml. A 10 ml de la solución agregar 2 ml de ácido (p-nitroanilina) del péptido. La cantidad liberada se
clorhídrico y diluir con agua a 47 ml: la solución no mide directamente por el color del cromóforo. El
presenta más de 0,01 mg de Fe (0,001 %). sustrato, empleado para medir la actividad del Anti-
Sales mercuriosas - Transferir 5,0 g a un erlen- factor Xa, es soluble en grado necesario y es reactivo
meyer con tapón de vidrio, agregar 100 ml de solu- a una concentración, basada en el peso molecular
ción de ioduro de potasio (15 en 100), 5,0 ml de iodo declarado en el rótulo, de 2,5 a 3,0 mM. Diferentes
0,1 N (SV) y 3 ml de ácido clorhídrico 1 N y dejar preparaciones de sustrato cromogénico difieren en
reposar en la oscuridad, con agitación frecuente, sensibilidad y puede ser necesario determinar el pe-
durante 1 hora. Titular el iodo en exceso con tiosulfa- riodo de incubación óptimo.
to sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR)
cerca del punto final: no se requiere más de 0,38 ml
7
7DUWUDWR GH VRGLR - Na2C4H4O6 . 2H2O - 0,1 N (SV). Realizar una determinación con un
(PM: 230,1) - Emplear un reactivo analítico apro- blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
piado. mililitro de permanganato de potasio 0,1 N equivale
a 18,97 mg de TiCl4. Contiene no menos de 99,5 %.
7DUWUDWR GH VRGLR \S RWDVLR - KNaC4H4O6 .
4H2O - (PM: 282,2) - Emplear un reactivo analítico Intervalo de ebullición (Ensayo para Reactivos)
apropiado. - Entre 135 y 140 ºC.
7HWUDFRVDQR - C24H50 - (PM: 338,7) - Polvo
7HOXULWRGHSRWDVLR - (Telurato de potasio IV) -
blanco.
K2TeO3 - (PM: 253,8) - Polvo blanco, granular.
Soluble en agua. Su solución es alcalina. Intervalo de fusión <260> - Entre 51 y 53 ºC.
Valoración - Pesar exactamente 120 mg, trans- 7HWUDGHFDQR - C14H30 - (PM: 198,4) - Líquido
ferir a un vaso de precipitados y disolver en una transparente, incoloro.
mezcla de 10 ml de ácido nítrico, 10 ml de ácido Valoración - Analizar por cromatografía gas-
sulfúrico y 25 ml de agua. Calentar a ebullición, líquido empleando un cromatógrafo de gases (ver
hasta que se generen gases copiosos de trióxido de 100. Cromatografía) equipado con un detector de
azufre. Enfriar, agregar con cuidado 100 ml de ionización a la llama y una columna de acero inoxi-
agua, calentar a ebullición, agregar 6 g de fluoruro dable de 2,4 m × 3 mm con una fase estacionaria
de sodio. Titular la solución caliente con permanga- constituida por un compuesto de polietilenglicol
nato de potasio 0,1 N (SV). Cada mililitro de per- (p.m.p aproximadamente 15.000) [NOTA: un com-
manganato de potasio 0,1N equivale a 12,69 mg de puesto de polietilenglicol de alto peso molecular
K2TeO3. Contiene no menos de 98 % con un ligando diepóxido], sobre un soporte consti-
Cloruro (Ensayo para reactivos) - 1 g no presen- tuido por tierra silícea para cromatografía de gases
ta más de 0,1 mg de Cl (0,01 %). la cual ha sido calcinada mezclando diatomea con
Na2CO3 y calcinada a 900 °C. [NOTA: la tierra
7HREURPLQD - C7H8N4O2 - (PM: 180,2) - Sólido
cristalino blanco. Muy poco soluble en agua y alco- silícea se lava con ácido luego se lava con agua
hol; casi insoluble en éter y cloroformo. hasta neutralidad pero no se lava con bases. La
tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un
Valoración - Disolver aproximadamente 34 mg,
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los
exactamente pesados, en 50 ml de ácido acético
grupos silanoles superficiales.] Mantener la colum-
glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
na, el inyector y el detector a aproximadamente
determinando el punto final potenciométricamente.
Realizar una determinación con un blanco y hacer 250, 200 y 280 °C, respectivamente. Se emplea
las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido helio como gas transportador con un caudal de
aproximadamente 27,5 ml por minuto. Presenta una
perclórico 0,1 N equivale a 18,02 mg de C7H8N4O2.
pureza no menor de 98 %.
Contiene no menos de 95 %.
Intervalo de fusión <260> - Método II. Entre 4 y
7HWUDEURPRIHQROIWDOHLQDWR GH HWLOR - 8 °C, con un intervalo de fusión no mayor de 2 °C.
(PM:662,0) - C22H14Br4O4 - Emplear un reactivo Índice de refracción - Entre 1,4280 y 1,4300 a
analítico apropiado. 20 °C.
7HWUDFORUXURGHFDUERQR - CCl4 - (PM: 153,8) 7HWUDHWLOHQJOLFRO - C8H18O5 - (PM: 194,2) -
- Emplear un reactivo analítico apropiado. Líquido casi incoloro. Índice de refracción: aproxi-
7HWUDFORUXURGHWLWDQLR - TiCl4 - (PM: 189,7) - madamente 1,46.
Líquido transparente, incoloro. Desprende gases al Valoración - Cuando se analiza por cromato-
aire. Precaución - Reacciona violentamente con grafía de gas-líquido, empleando un cromatógrafo
agua. de gases y condiciones apropiadas, presenta una
Valoración - Pesar exactamente 750 mg en pureza no menor de 90 %.
100 ml de ácido sulfúrico 2 N contenidos en una Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
bureta gravimétrica Smith. Verter la solución a Entre 177 y 187 °C, a una presión de 9 mm Hg.
través de una columna de reducción de cinc- 7HWUDHWLOHQSHQWDPLQD - C8H23N5 - (PM: 189,3)
mercurio en 50 ml de sulfato férrico amónico - Líquido incoloro.
0,1 N (SV). Eluir con 100 ml de ácido sulfúrico Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
2 N y 100 ml de agua. Agregar 10 ml de ácido un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
fosfórico y titular con permanganato de potasio equipado con un detector de ionización a la llama y
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta Residuo de evaporación - Evaporar 10 ml (12 g)
con una capa de 1 µm de fase estacionaria consti- en un baño de vapor hasta sequedad y secar el resi-
tuida por goma de dimetilpolisiloxano. Mantener el duo a 105 °C durante 1 hora: si contiene un conser-
inyector y el detector a aproximadamente 250 y vante, el peso del residuo no es mayor de 2 mg. Si
300 °C, respectivamente. La temperatura de la co- no se declara ningún conservante en el rótulo, el
lumna se mantiene a 150 °C y se programa un as- peso del residuo no es mayor de 1 mg.
censo de 10 °C por minuto hasta 280 °C. Se emplea
7HWUDKLGURIXUDQR OLEUH GH HVWDELOL]DGRU -
helio como gas transportador. El área del pico de
Emplear uno de grado apropiado.
C8H23N5 no es menor de 30 % del área total.
Índice de refracción <230> - Entre 1,503 y 7HWUDKLGURQDIWDOHQR - C10H12 -
1,507, a 20 °C. (PM: 132,2) - Líquido incoloro.
Índice de refracción <230> - 1,5401, a 20 °C.
7HWUDIHQLOERUDWR GH VRGLR - NaB(C6H5)4 -
(PM: 342,2) - Polvo blanco a ligeramente amarillo, 7HWUDNLV >GL-ter-EXWLO
voluminoso; fácilmente soluble en acetona y agua. KLGUR[LIHQLOSURSLRQDWR@ GH SHQWDHULWULWLOR -
C73H108O12 - (PM: 1.178) -Polvo cristalino blanco a
7HWUDIOXRURERUDWRGHpQLWUREHQFHQRGLD]RQLR ligeramente amarillento. Prácticamente insoluble en
- NO2C6H4N2BF4 - (PM: 236,9) - Cristales color agua; muy soluble en acetona; soluble en metanol;
amarillo oro. Soluble en acetonitrilo. Precaución - poco soluble en hexano.
Sensible a los golpes; mantener refrigerado.
Intervalo de fusión - Entre 110 a 125 °C.
Valoración - Transferir aproximadamente
Forma D - 120 a 125 °C.
30 mg, exactamente pesados, a un matraz aforado
Forma E - 110 a 115 °C.
de 100 ml de vidrio inactínico. Disolver en ácido
clorhídrico 0,01 N, completar a volumen con ácido 7HWUDPHWLOEXWLODPLQD -
clorhídrico 0,01 N y mezclar. Empleando material (ter-Octilamina) - (PM: 129,3) -
de vidrio inactínico, diluir 2,0 ml de la solución (CH3)3CCH2C(CH3)2NH2 - Emplear un reactivo
resultante con metanol de grado espectrofotométri- analítico apropiado.
co a 50,0 ml. Determinar la absorbancia de esta
¶7HWUDPHWLOGLDPLQRGLIHQLOPHWDQR -
solución en una celda de 1 cm aproximadamente a [4,4’-Metilenbis(N,N-dimetilanilina)] - (PM: 254,4)
255 nm, empleando metanol como blanco. Calcular [(CH3)2NC6H4]2CH2 - Cristales casi blancos.
la absortividad de la solución dividiendo la absor-
Intervalo de fusión <260> - Entre 87 y 90 °C.
bancia medida por la concentración en g por ml.
Calcular el título por la fórmula siguiente: 7HWUDPHWLOHWLOHQGLDPLQD - (PM: 116,2) -
(CH3)2NCH2CH2N(CH3)2 - Emplear un reactivo
100a/59,4 analítico apropiado.
en la cual a es la absortividad de la solución. Con-
7HWUDPHWLOVLODQR - (CH3)4Si - (PM: 88,2) - Em-
tiene no menos de 95,0 %. plear un reactivo analítico apropiado.
7HWUDKLGURIXUDQR - C4H8O - (PM: 72,1) - 7HWUy[LGRGHRVPLR - (Ácido ósmico; Anhídrido
Líquido incoloro, de olor acre característico. Misci-
perósmico) - OsO4 - (PM: 254,2) - Gránulos crista-
ble con agua y solventes orgánicos comunes. Cuan-
linos o cristales incoloros o algo amarillos,
do se mezcla con agua, genera calor y se contrae el
higroscópicos. De olor pungente. Se descompone a
volumen; cuando se mezcla con cloroformo, genera la luz. Lentamente soluble en agua; soluble en alco-
considerable calor. Cualquier conservante apropia- hol y éter, con descomposición. Se ablanda aproxi-
do, que no exceda 0,1 %, agregado para impedir
madamente a 35 °C, funde entre 40 y 42 °C y el
formación de peróxidos, debe declararse en el rótu-
punto de ebullición es aproximadamente 130 °C.
lo. Conservar en envases inactínicos totalmente
Precaución - Los vapores de Tetróxido de osmio
llenos.
son venenosos y altamente irritantes para los ojos y
Densidad relativa <160> - Entre 0,884 y 0,886. las membranas respiratorias.
Intervalo de destilación <240> - Método II. En-
Solubilidad - Disolver 200 mg en 1 ml de tetra-
tre 65 y 66 °C.
cloruro de carbono: se obtiene una solución transpa-
Acidez - Mezclar 5,0 ml con 10 ml de agua y
rente y apenas amarilla y no se observa residuo
1 gota de rojo de metilo (SR): cualquier color rosa-
insoluble apreciable.
do producido cambia a amarillo por el agregado de Materia no volátil - Evaporar la solución rema-
no más de 0,25 ml de hidróxido de sodio 0,020 N. nente del ensayo para Solubilidad en un baño de
Agua <120> - Titulación volumétrica directa.
vapor en una campana extractora bien ventilada
No más de 0,1 %.
hasta sequedad y secar a 105 °C durante 1 hora: el cula apropiado que haya sido lavada con ácido y/o
residuo no pesa más de 0,4 mg (0,2 %). base. Puede ser silanizada o no.
Metales pesados - Al residuo del ensayo para Para cromatografía de partición en columna es
Materia no volátil agregar 2 ml de ácido clorhídrico esencial que el material esté exento de sustancias
y evaporar la solución hasta sequedad. Tomar el interferentes. Si se conoce o se piensa que existen
residuo con unos ml de agua, diluir con agua a interferencias, purificar el material del siguiente
25 ml y agregar 10 ml de sulfuro de hidróge- modo: colocar una torunda de lana de vidrio en la
no (SR): cualquier color pardo producido no es más base de una columna cromatográfica que posea un
oscuro que el de un control que contiene 0,01 mg de diámetro de 100 mm o mayor y agregar la Tierra
Pb (0,005 %). silícea purificada a una altura igual a 5 veces el
diámetro de la columna. Agregar un volumen de
7LHUUD FURPDWRJUiILFD VLODQL]DGD ODYDGD FRQ
iFLGR\EDVH - Emplear uno de grado apropiado. ácido clorhídrico equivalente a un tercio del volu-
men de la tierra silícea y dejar percolar el ácido a
7LHUUDGHGLDWRPHDVFDOFLQDGD - Forma de síli- través de la columna. Lavar la columna con meta-
ce (SiO2) que consiste en frústulas y fragmentos nol, emplear volúmenes pequeños al principio para
fundidos de diatomeas. Es un polvo amorfo, fino, lavar las paredes de la columna y continuar lavando
claro rosado o blanco. Insoluble en agua, ácidos y con metanol hasta que el último lavado sea neutro
en soluciones diluidas de hidróxidos alcalinos. al papel de tornasol humedecido. Extruir la columna
Pérdida por ignición - Pesar exactamente 4 g y lavada en un cristalizador, calentar en un baño de
someter a ignición hasta peso constante: no pierde vapor para remover el exceso de metanol y secar a
más de 10,0 % de su peso. 105 °C hasta que el material se reduzca a polvo y
Impurezas orgánicas - No se oscurece aprecia- esté exento de trazas de metanol. Almacenar el
blemente con la calcinación. material seco en envases bien cerrados.
Pérdida por secado <680> - Secar a 110 °C du-
rante 2 horas: no pierde más de 2,0 % de su peso. 7LHUUDVLOtFHDVLODQL]DGDSDUDFURPDWRJUDItD -
Transferir aproximadamente 450 g de tierra silícea
7LHUUD GH GLDWRPHDV FDOFLQDGD \ IXQGLGD - purificada a un cristalizador de vidrio abierto y
Emplear uno de grado apropiado. colocarlo en un desecador al vacío que contenga
7LHUUDGHGLDWRPHDVVLODQL]DGD - Emplear uno 30 ml de un silanizante apropiado, por ej., una mez-
de grado apropiado. cla de dimetildiclorosilano y trimetilclorosilano
(1:1) o una mezcla de dimetildiclorosilano y metil-
7LHUUD GH )XOOHU SDUD FURPDWRJUDItD - (Muy triclorosilano (2:1). Aplicar vacío intermitentemen-
fina y moderadamente gruesa) - Polvo o gránulos te durante varias horas, hasta que no quede silano
de color gris o blanco grisáceo constituido princi- líquido. Suspender la tierra silícea purificada tratada
palmente por silicato hidratado de aluminio- en agua y agitar suavemente para dejar decantar
magnesio. cualquier partícula no recubierta. Recolectar el
Determinación del tamaño de partícula - (ver material silanizado de la superficie, lavar en un
290. Distribución del tamaño de partícula en pol- embudo de vidrio sinterizado con metanol caliente
vos). hasta que el filtrado no sea ácido y secar a 110 °C.
Materia soluble - 20 g, tratados con 50 ml de
agua fría y filtrados, producen no más de 60 mg de 7LPRO - C6H3[CH3][OH][CH(CH3)2]1,3,4 -
residuo al evaporar el filtrado (0,3 %). Una segunda (PM: 150,2) - Cristales incoloros, a menudo gran-
porción de 20 g, tratada con 50 ml de alcohol frío y des o polvo blanco, cristalino, que posee un olor
filtrada, produce no más de 14 mg al evaporar el aromático. Es afectado por la luz. Tiene mayor
filtrado (0,07%). densidad que el agua, pero cuando se licúa por
Pérdida por secado <680> - Secarlo a 105 °C fusión es menos denso que el agua. Sus soluciones
durante 6 horas: pierde entre 7,0 y 10,0 % de su alcohólicas son neutras al tornasol. Muy poco solu-
peso. ble en agua; fácilmente soluble en alcohol, cloro-
[NOTA: ajustar el contenido de agua, si fuera formo, éter y aceite de oliva. Soluble en ácido acé-
necesario, secando al vacío a temperatura ambiente, tico glacial y en aceites fijos o volátiles. Almacenar
restaurando el agua requerida y equilibrando me- en envases inactínicos de cierre perfecto.
diante agitación durante 2 horas.] Intervalo de fusión <260> - Entre 48 y 51 °C,
pero cuando se funde permanece líquido a una
7LHUUD VLOtFHD SDUD FURPDWRJUDItD - Para cro- temperatura considerablemente inferior.
matografía de gases, emplear un grado especial- Materia no volátil - Volatilizar 2 g en un baño
mente preparado que reúna la siguiente descripción de vapor y secar a 105 °C hasta peso constante: el
general: tierra silícea purificada de tamaño de partí- residuo no pesa más de 1 mg (0,05 %).
7LRDFHWDPLGD - C2H5NS- (PM: 75,1) - Emplear no. Agregar 5 ml de ácido clorhídrico diluido, ca-
uno de grado apropiado. lentar a ebullición durante 2 minutos, enfriar y
7LRFLDQDWRGHDPRQLR - NH4SCN - (PM: 76,1) titular la solución con iodo 0,1 N (SV), agregando
3 ml de almidón (SR) cerca del punto final. Cada
- Emplear un reactivo analítico apropiado.
mililitro de iodo 0,1 N equivale a 11,41 mg de
7LRFLDQDWR GH SRWDVLR - KSCN - (PM: 97,2) - HSCH2COONa. Contiene no menos de 75 %.
Emplear un reactivo analítico apropiado. Materia insoluble - Una solución de 1 g en
7LRFLDQDWR PHUF~ULFR - Hg(SCN)2 - 10 ml de agua es transparente y la disolución es
(PM: 316,8) - Polvo cristalino blanco. Muy poco prácticamente completa.
soluble en agua; soluble en soluciones de cloruro de Sulfuro - Disolver 500 mg en 10 ml de agua en
sodio; poco soluble en alcohol y éter. un matraz apropiado, agregar 2 ml de ácido clorhí-
drico, luego colocar una tira de papel de filtro,
¶7LRGLHWDQRO - (HOCH2CH2)2S - humedecido en acetato de plomo (SR), sobre la
(PM: 122,2) - Líquido amarillo pálido a incoloro. boca del matraz y llevar a ebullición la solución: no
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en se oscurece el papel de acetato de plomo.
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
equipado con un detector de ionización a la llama y 7LRVXOIDWR GH VRGLR - Na2S2O3 . 5H2O -
una columna de vidrio de 1,83 m × 4 mm con 10 % (PM: 248,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
de fase estacionaria constituida por un compuesto piado.
de polietilenglicol TPA (polietilenglicol de alto 7LRXUHD - (NH2)2CS - (PM: 76,1) - Cristales
peso molecular y un diepóxido que se esterifica con blancos, inodoros o polvo blanco, cristalino. Solu-
ácido tereftálico); sobre un soporte constituido por ble en agua y alcohol.
tierra silícea para cromatografía de gases la cual ha Valoración - Transferir 1 g, exactamente pesa-
sido calcinada mezclando diatomea con Na2CO3 y do, a un matraz aforado de 250 ml, disolver en
calcinada a 900 °C [NOTA: la tierra silícea se lava 50 ml de agua y completar a volumen con agua.
con ácido luego se lava con agua hasta neutralidad Transferir 20 ml de la solución bien mezclada a un
pero no se lava con bases. La tierra silícea puede ser matraz apropiado y agregar 25,0 ml de nitrato de
silanizada al tratarla con un agente como dimetildi- plata 0,1 N (SV) y 10 ml de amoníaco (SR). Agitar
clorosilano para bloquear los grupos silanoles su- vigorosamente durante 2 minutos, calentar a ebulli-
perficiales.] Mantener la columna, el inyector y el ción y enfriar. Agregar 60 ml de ácido nítrico dilui-
detector a aproximadamente 200, 250 y 310 °C, do, agitar vigorosamente, filtrar y lavar el residuo
respectivamente. Contiene no menos de 98 % de con agua. Agregar 2 ml de sulfato férrico amóni-
C4H10O2S. co (SR) al filtrado y lavados combinados y titular
Índice de refracción - Entre 1,4250 y 1,4270, a con tiocianato de amonio 0,1 N (SV). Cada mililitro
20 °C. de nitrato de plata 0,1 N equivale a 3,806 mg de
WLRGLSURSLRQDWR GH GLGRGHFLOR - (NH2)2CS. Contiene no menos de 99 %.
C30H58O4S - (PM: 514,8) - Polvo cristalino blanco. Solubilidad - Una solución de 1 g en 20 ml de
Prácticamente insoluble en agua; fácilmente soluble agua es transparente e incolora y se disuelve com-
en acetona y éter de petróleo; poco soluble en alco- pletamente.
hol. Punto de fusión: aproximadamente a 39 °C. Intervalo de fusión <260> - Método I. Entre 176
y 182 °C.
WLRGLSURSLRQDWR GH GLRFWDGHFLOR - Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du-
C42H82O4S - (PM: 683) - Polvo cristalino blanco. rante 2 horas: no pierde más de 0,5 % de su peso.
Prácticamente insoluble en agua; fácilmente soluble Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
en cloruro de metileno; soluble en acetona, alcohol Someter a ignición 1 g con 0,5 ml de ácido sulfúri-
y éter de petróleo. Intervalo de fusión: entre 58 y co: el residuo no pesa más de 1,5 mg (0,15 %).
67 °C. Sensibilidad - Disolver 280 mg de subnitrato de
7LRJOLFRODWR GH VRGLR - HSCH2COONa - bismuto en 12 ml de ácido nítrico y diluir con agua
(PM: 114,1) - Polvo cristalino blanco, de olor leve a 200 ml. Diluir 1 ml de esta solución con agua a
característico. Muy soluble en agua; poco soluble 100 ml y agregar a 10 ml de la dilución 1 ml de
en alcohol. Es higroscópico, se oxida al aire. Alma- solución muestra (1 en 5): se produce inmediata-
cenar en envases inactínicos de cierre perfecto. No mente un color amarillo característico.
debe emplearse si presenta color amarillo pálido o L7LURVLQD – C9H11NO3 (PM: 181,2) – Polvo
más oscuro. cristalino blanco o casi blanco, cristales blancos o
Valoración - Pesar exactamente alrededor de incoloros. Prácticamente insoluble en acetona y
250 mg y disolver en 50 ml de agua libre de oxíge- etanol; ligeramente soluble en agua, fácilmente
soluble en ácido clorhídrico diluido y en soluciones Punto de fusión - Aprox.136 ºC.
de hidróxidos alcalinos.
o-7ROXHQVXOIRQDPLGD
L7LUR[LQDVyGLFD - Emplear Levotiroxina sódi- (2-metilbencenosulfamida) - C7H9NO2S -
ca. (PM: 171,2) - Polvo blanco cristalino. Soluble en
alcohol y soluciones de hidróxidos alcalinos; muy
7LWDQLR - Ti - (PA: 47,88) - Contiene no menos
de 99,0 % de Ti. Metal en polvo, hilo delgado poco soluble en agua y éter.
(diámetro no superior a 0,5 mm) o en esponja. Pun- Punto de fusión - Aprox.156 ºC.
to de fusión: aproximadamente a 1668 °C. Densi- p-7ROXHQVXOIRQDPLGD Ver Toluensulfonami-
dad: aproximadamente 4,507 g por cm3. da.
o7ROLGLQD - (4, 4’-Diamino-3, 3’-dimetilbifenil) o7ROXLGLQD - (2-Aminotolueno; 2-Metilanilina)
- (NH2)(CH3)C6H3 . C6H3(CH3)(NH2)-4,3,31,41 - - C6H4(CH3)(NH2)-1,2 - (PM: 107,2) - Líquido
(PM: 212,3) - Cristales o polvo cristalino blanco a amarillo claro que se transforma en rojizo pardo al
rojizo. Poco soluble en agua; soluble en alcohol, exponerlo al aire y la luz. Poco soluble en agua;
éter y en ácidos diluidos. Conservar en envases soluble en alcohol, éter y en ácidos diluidos. Alma-
inactínicos de cierre perfecto. cenar en envases inactínicos de cierre perfecto.
Precaución - Evitar el contacto con o-tolidina y Densidad relativa <160> - Aproximadamente
mezclas que contengan o-tolidina y realizar todos 1,008, a 20 °C.
los ensayos bajo campana extractora bien ventila- Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) -
da. Entre 200 y 202 °C.
Intervalo de fusión <260> - Entre 129 y 131 °C. p7ROXLGLQD - C7H9N - (PM: 107,2) - Cristales o
7ROXDOGHKtGR - (o-Tolualdehído) - C8H8O - escamas blancas a tostadas. Fácilmente soluble en
(PM: 120,2) - Emplear uno de grado apropiado. alcohol, acetona, metanol y en ácidos diluidos; poco
soluble en agua.
p7ROXDOGHKtGR - C8H8O - (PM: 120,2) - Líqui-
Valoración - Disolver 400 mg, exactamente pe-
do incoloro a amarillo claro.
sados, en 100 ml de ácido acético glacial y titular
Valoración - Analizar por cromatografía de gas-
con ácido perclórico 0,1 N (SV), determinando el
líquido empleando un cromatógrafo de gases (ver
punto final potenciométricamente. Realizar una
100. Cromatografía) equipado con un detector de
determinación con un blanco y hacer las correccio-
ionización a la llama y una columna de acero inoxi-
nes necesarias. Cada mililitro de ácido perclórico
dable de 1,8 m × 3 mm con 5 % de fase estacionaria
0,1 N equivale a 10,72 mg de CH3C6H4NH2. Con-
constituida por poliéster de succinato de dietilengli-
tiene no menos de 98 %, calculado sobre la sustan-
col, sobre un soporte constituido por tierra silícea
cia seca.
para cromatografía de gases la cual ha sido calcina-
Pérdida por secado - Pesar exactamente alrede-
da mezclando diatomea con Na2CO3 y calcinada a
dor de 1 g y secar a 30 °C hasta peso constante: no
900 °C. [NOTA: la tierra silícea se lava con ácido
pierde más de 2 % de su peso.
luego se lava con agua hasta neutralidad pero no se
lava con bases. La tierra silícea puede ser silanizada 7RUQDVRO - Un pigmento azul obtenido a partir
al tratarla con un agente como dimetildiclorosilano de diversas especies de Rocella decandolle, Leca-
para bloquear los grupos silanoles superficiales.] nora acharius u otros líquenes (Fam. Parmeliace-
Mantener el detector, la columna y el inyector a ae).
aproximadamente 125, 125 y 205 °C, respectiva- Descripción - Cubos, masas, fragmentos o
mente. Se emplea nitrógeno como gas transportador gránulos, de color azul índigo o violeta profundo.
con un caudal de aproximadamente 12 ml por minu- Tiene un olor combinado de índigo y violetas y
to. La muestra es una solución al 5 % en disulfuro colorea la saliva de color azul profundo. Las sus-
de carbono. Presenta una pureza no menor a 98 %. tancias indicadoras que contiene son solubles en
Índice de refracción <230> - Entre 1,544 y agua y menos solubles o insolubles en alcohol.
1,546, a 20 °C. Ceniza - Produce no más de 60,0 % de ceniza.
7ROXHQR - C6H5CH3 - (PM: 92,1) - Emplear un n7ULDFRQWDQR - C30H62 - (PM: 422,8) - Emple-
reactivo analítico apropiado. ar uno de grado apropiado.
7ROXHQVXOIRQDPLGD 7ULDPLQRQLWURVRSLULPLGLQD -
(4-metilbencenosulfonamida; p-toluensulfonamida) C4H6N6O - (PM: 154,1) - Polvo rosado.
- C7H9NO2S - (PM: 171,2) - Polvo blanco crista- Valoración - Disolver aproximadamente 34 mg,
lino. Soluble en alcohol y soluciones de hidróxidos exactamente pesados, en 50 ml de ácido acético
alcalinos; muy poco soluble en agua y éter. glacial. Titular con ácido perclórico 0,1 N (SV),
determinando el punto final potenciométricamente. lidad pero no se lava con bases. La tierra silícea
Realizar una determinación con un blanco y hacer puede ser silanizada al tratarla con un agente como
las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido dimetildiclorosilano para bloquear los grupos sila-
perclórico 0,1 N equivale a 15,41 mg de C4H6N6O. noles superficiales.] Mantener el inyector y el de-
Contiene no menos de 97 %. tector a aproximadamente 50 y 300 °C, respectiva-
mente. La temperatura de la columna se mantiene a
7ULEXWLULQD - (Tributirato de glicerilo) -
0 °C y se programa un ascenso de 3 °C por minuto
C15H26O6 - (PM: 302,4) - Líquido incoloro, aceito-
so. Insoluble en agua; muy soluble en alcohol y hasta 50 °C. Se emplea helio como gas transporta-
éter. dor. El área del pico de CCl3F no es menor de 99 %
del área total.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
Índice de refracción <230> - Entre 1,380 y
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
1,384, a 20 °C.
equipado con un detector de ionización a la llama y
una columna de acero inoxidable de 1,8 m × 3 mm 7ULFORURWULIOXRURHWDQR - Emplear uno de grado
con una fase estacionaria constituida por poliester apropiado.
de succinato de dietilenglicol, sobre un soporte
7ULFORUXURGHDQWLPRQLR - (Cloruro antimonio-
constituido por tierra silícea para cromatografía de
so) - SbCl3 - (PM:228,1) - Emplear un reactivo
gases la cual ha sido calcinada mezclando diatomea
analítico apropiado.
con Na2CO3 y calcinada a 900 °C. [NOTA: la tierra
silícea se lava con ácido luego se lava con agua 7ULFORUXUR GH WLWDQLR - (Cloruro titanoso) -
hasta neutralidad pero no se lava con bases. La TiCl3 - (PM: 154,2) - Polvo negro, higroscópico,
tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un inestable al aire. Soluble en agua, la solución depo-
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los sita ácido titánico en contacto con el aire. Está dis-
grupos silanoles superficiales.] Mantener el inyector ponible generalmente como soluciones acuosas del
y el detector a aproximadamente 270 y 300 °C, 15 al 20 %, violeta-azul oscuras. Almacenar la
respectivamente. Se emplea nitrógeno como gas solución en botellas bien cerradas, de vidrio inactí-
transportador. El área del pico de tributirina no es nico con tapón.
menor de 98 % del área total. n7ULFRVDQR - C23H48 - (PM: 324,6) - Masa in-
Índice de refracción - Entre 1,4345 y 1,4365, a colora o blanca, más o menos translúcida, mostran-
20 °C. do una estructura cristalina. Inodoro o prácticamen-
Contenido de ácido - Transferir 1,0 g, exacta- te inodoro. Tiene un aspecto algo grasoso. Insoluble
mente pesado, a un vaso de precipitados, agregar en agua y alcohol; soluble en cloroformo, éter,
75 ml de metanol y disolver por agitación. Cuando aceites volátiles y la mayoría de los aceites fijos
la disolución es completa, agregar 25 ml de agua y calientes; poco soluble en alcohol absoluto. Hierve
titular con hidróxido de potasio 0,05 N (SV), em- a aproximadamente 380 °C.
pleando fenolftaleína (SR) como indicador. Realizar Intervalo de fusión <260> - Entre 47 y 49 °C.
una determinación con un blanco y hacer las co- Aptitud - Determinar su aptitud en el ensayo pa-
rrecciones necesarias. Cada mililitro de hidróxido ra Sustancias relacionadas en Clorhidrato de dex-
de potasio 0,05 N equivale a 88,1 mg de ácido butí- tropropoxifeno del siguiente modo. Disolver una
rico. Contiene no más de 0,5 %. cantidad apropiada en cloroformo para obtener una
7ULFHWRKLGULQGHQR PRQRKLGUDWR - Ver Nin- solución que contiene 20 µg por ml. Procediendo
hidrina. según se indica en el ensayo para Sustancias rela-
cionadas en Clorhidrato de dextropropoxifeno,
7ULFORURHWDQR - Ver Metilcloroformo. inyectar un volumen apropiado de la solución en el
7ULFORURIOXRURPHWDQR - CCl3F - (PM: 137,4) - cromatógrafo y registrar el cromatograma de la
Líquido incoloro. Solución estándar preparada según se indica en el
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en ensayo para Sustancias relacionadas: sólo un pico
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) principal se obtiene a partir de la solución de
equipado con un detector de conductividad térmica n-tricosano y no se observan picos menores a, o
y una columna de vidrio de 1,8 m × 2,0 mm con cerca de, los picos obtenidos para dextropropoxife-
10 % de fase estacionaria constituida por aceite de no, acetoxi, o carbinol en el cromatograma de la
dimetilpolisiloxano, sobre un soporte constituido Solución estándar.
por tierra silícea para cromatografía de gases la cual
7ULHWDQRODPLQD - Emplear Trolamina.
ha sido calcinada mezclando diatomea con Na2CO3
y calcinada a 900 °C. [NOTA: la tierra silícea se 7ULHWLODPLQD - (C2H5)3N - (PM: 101,2) - Líqui-
lava con ácido luego se lava con agua hasta neutra- do incoloro, de fuerte olor amoniacal. Poco soluble
en agua. Miscible con alcohol, éter y agua fría. equipado con un detector de ionización a la llama y
Almacenar en envases bien cerrados. una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
Intervalo de ebullición (Ensayo para reactivos) - con una capa de 1 µm de una fase estacionaria
Entre 89 y 90 °C. constituida por goma de dimetilpolisiloxano. Man-
Absorbancia - Transferir 1 ml a un matraz afo- tener el inyector y el detector a aproximadamente
rado de 50 ml, agregar 10 ml de metanol y 1 ml de 100 y 150 °C, respectivamente. La temperatura de
ácido clorhídrico y completar a volumen con cloro- la columna se mantiene a 0 °C y se programa un
formo. La absorbancia de esta solución, determina- ascenso de 10°C por minuto hasta alcanzar 150 °C.
da a la longitud de onda de máxima absorción, Se emplea helio como gas transportador. El área del
aproximadamente 285 nm, con un espectrofotóme- pico de CF3CH2OH no es menor de 99 % del área
tro apropiado, no excede 0,01. [NOTA: si la absor- total.
bancia excede 0,01, purificar la trietilamina del Intervalo de fusión - Entre 77 y 80 °C.
siguiente modo: calentar a reflujo 100 ml con 20 ml
7ULIOXRURHWLOGLIOXRURPHWLOpWHU - (Difluo-
de agua y 2 g de hidrosulfito de sodio durante no ro-metil-2,2,2-trifluoroetil éter) - C3H3F5O -
menos de 8 horas, lavar con agua, secar por reflujo, (PM: 150,1) - Líquido transparente. Emplear uno
empleando una trampa de Dean-Stark y destilar,
de grado apropiado.
recolectar sólo los primeros 75 ml de filtrado. Al-
Intervalo de fusión <260> - Entre 28 y 30 °C.
macenar sobre carbonato de sodio anhidro o carbo-
nato de potasio anhidro.] 7ULIOXRURPHWLOXUDFLOR - C5H3F3N2O2 -
(PM: 180,1) - Polvo blanco a casi blanco.
7ULHWLOHQJOLFRO - C6H14O4 - (PM: 150,2) - Líqui- Identificación -
do incoloro a amarillo pálido. Es higroscópico.
Fase estacionaria - Emplear una placa para
Miscible con agua, alcohol y tolueno.
cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en grafía) recubierta con gel de sílice para cromato-
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) grafía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm
equipado con un detector de ionización a la llama y
de espesor.
una columna de acero inoxidable de 1,85 m × 3 mm
Fase móvil - Cloroformo, metanol y ácido acé-
con un soporte constituido por un copolímero de
tico (17:2:1).
estireno-divinilbenceno con un área superficial
Procedimiento - Examinar los cromatogramas
nominal de menos de 50 m2 por g y un diámetro de bajo luz ultravioleta a 366 nm. Se debe observar
poro promedio de 0,3 a 0,4 µm. Mantener el inyec- una única mancha.
tor, la columna y el detector a aproximadamente
250, 230 y 310 °C, respectivamente. Se emplea 7ULIOXRUXURGHERUR- BF3 - (PM: 67,8) - Em-
helio como gas transportador. El área del pico plear uno de grado apropiado.
C6H14O4 no es menor de 97 % del área total. 7ULPHWLOFORURVLODQR - Ver Clorotrimetilsilano.
Índice de refracción - Entre 1,4550 y 1,4570, a
20 °C. 7ULPHWLOSHQWDQR - (Isooctano) - C8H18 -
(PM: 114,2) - Emplear un reactivo analítico apro-
7ULIHQLOPHWDQR - C19H16 - (PM: 244,3) - Polvo piado.
marrón claro.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en 7ULPHWLOSLULGLQD - (5-Colidina) - C8H11N
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) - (PM: 121,2) - Líquido claro, incoloro, de olor
equipado con un detector de ionización a la llama y aromático. Soluble en agua fría y menos soluble en
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta agua caliente; soluble en alcohol, cloroformo y
con una capa de fase estacionaria constituida por metanol. Miscible con éter.
goma de dimetilpolisiloxano de 1 µm. Mantener el Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
inyector y el detector a aproximadamente 300 °C. un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
La temperatura de la columna se mantiene a 200 °C equipado con un detector de ionización a la llama y
y se programa un ascenso de 10 °C por minuto una columna de acero inoxidable de 1,85 m × 3 mm
hasta alcanzar 300 °C. Se emplea helio como gas con una fase estacionaria constituida por un com-
transportador. El área del pico de C19H16 no es me- puesto de polietilenglicol (p.m.p aproximadamente
nor de 99 % del área total. 15.000 [NOTA: un compuesto de polietilenglicol de
Intervalo de fusión <260> - Entre 92 y 94 °C. alto peso molecular con un ligando diepóxido]),
sobre un soporte constituido por tierra silícea para
7ULIOXRURHWDQRO - CF3CH2OH - cromatografía de gases la cual ha sido calcinada
(PM: 100,0) - Líquido incoloro. mezclando diatomea con Na2CO3 y calcinada a
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en 900 °C. [NOTA: la tierra silícea se lava con ácido
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
luego se lava con agua hasta neutralidad pero no se 7ULSWRQD - Emplear Digerido pancreático de ca-
lava con bases. La tierra silícea puede ser silanizada seína.
al tratarla con un agente como dimetildiclorosilano 7ULVDPLQRHWLODPLQD - C6H18N4 -
para bloquear los grupos silanoles superficiales.]
(PM: 146,2) - Líquido amarillo. Soluble en metanol.
Mantener el inyector, la columna y el detector a
Valoración - Disolver aproximadamente 80 mg
aproximadamente 180, 165 y 270 °C, respectiva-
en 30 ml de metanol. Agregar 40 ml de agua y
mente. Se emplea helio como gas transportador. El
titular con ácido clorhídrico 1 N, determinando el
área del pico C8H11N no es menos de 98 % del área punto final potenciométricamente. Realizar una
total. determinación con un blanco y hacer las correccio-
Índice de refracción - Entre 1,4970 y 1,4990, a
nes necesarias. Cada mililitro de ácido clorhídrico
20 °C.
1 N equivale a 48,75 mg de C6H18N4. Contiene no
N7ULPHWLOVLOLOLPLGD]RO - C6H12N2Si - menos de 98,0%.
(PM: 140,3) - Líquido transparente, incoloro a ama- Índice de refracción - Entre 1,4956 y 1,4986, a
rillo claro. 20 °C.
Índice de refracción - Entre 1,4744 y 1,4764, a
WULVGL-ter-EXWLOKLGUR[LEHQFLOs
20 °C.
WULD]LQDOHHH WULRQD - C48H69N3O6 -
7ULPHWLOVLOLOSURSDQRVXOIRQDWRGHVRGLR (PM: 784,1) - Polvo blanco cristalino.
- (2,2-Dimetil-2-silapentano-5-sulfonato sódico) - Intervalo de fusión - Entre 218 y 222 °C.
C6H15SiNaO3S - (PM: 218,3) - Emplear uno de
7ULV(KLGUR[LPHWLO)DPLQRPHWDQR - Emplear un
grado apropiado.
reactivo analítico apropiado. Ver Trometamina.
7ULQLWURIHQRO - Ver Ácido pícrico. 7URPELQDERYLQD - Preparación de una enzi-
7ULy[LGR GH DUVpQLFR - As2O3 - (PM: 197.8) - ma obtenida a partir de plasma bovino y capaz de
Emplear un reactivo analítico apropiado. transformar el fibrinógeno en fibrina. Polvo blanco
7ULy[LGRGHFURPR - CrO3 - (PM: 100,0) - Em- amarillento. Conservar a una temperatura menor de
0 °C.
plear un reactivo analítico apropiado.
7URPELQD KXPDQD - Trombina humana dese-
L7ULSWRIDQR - C11H12N2O2 - (PM: 204,2) -
Laminillas o polvo blanco o ligeramente amarillo. cada. Es una preparación de una enzima que trans-
Poco soluble en alcohol y agua; soluble en ácidos forma el fibrinógeno humano en fibrina. Se obtiene
a partir de plasma humano líquido y puede prepa-
diluidos y en soluciones de hidróxidos alcalinos.
rarse por precipitación con sale apropiadas y sol-
Valoración - Pesar exactamente alrededor de
ventes orgánicos en condiciones controladas de pH,
300 mg, disolverlos en una mezcla de 3 ml de ácido
fuerza iónica y temperatura. Polvo blanco amari-
fórmico y 50 ml de ácido acético glacial, agregar
2 gotas de cristal violeta (SR). Titular con ácido llento. Fácilmente soluble en una solución de 9 mg
perclórico 0,1 N (SV) hasta punto final verde. Cada de cloruro de sodio por ml, dando una solución
turbia, amarillo pálida.
mililitro de ácido perclórico 0,1 N equivale a
20,42 mg de C11H12N2O2. Contiene entre 98,0 y 7URPERSODVWLQD - Polvo color amarillo ligero o
102,0 %, calculado sobre la sustancia seca. suspensión opalescente o turbia. Presenta actividad
Rotación específica <170> - Entre 30,0° y tromboquinasa obtenida a partir del cerebro y/o
33,0°, determinado en una solución que contiene tejido del pulmón, extraído con acetona, de conejos
1,0 g de muestra, previamente secada a 105 °C recientemente sacrificados. Puede contener cloruro
durante 3 horas, en 100 ml. de sodio y cloruro de calcio en proporciones apro-
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- piadas y puede contener un conservante apropiado.
rante 3 horas: no pierde más de 0,3 % de su peso. Puede tener el olor característico de tejido animal
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - seco. Se emplea en forma de suspensión para la
No más de 0,1 %. determinación del tiempo y actividad de protrombi-
Tirosina - Disolver 100 mg en 3 ml de ácido na en sangre. Su actividad tromboquinasa es tal que
sulfúrico diluido, agregar 10 ml de sulfato mercúri- da un tiempo de coagulación entre 11 a 16 segundos
co (SR) y calentar en un baño de vapor durante con plasma humano normal y concentración apro-
10 minutos. Filtrar, lavar con 5 ml de sulfato piada de iones de calcio. Almacenar en envases de
mercúrico (SR) y agregar al filtrado combinado 0,5 cierre perfecto, preferentemente a una temperatura
ml de solución de nitrito de sodio (1 en 20): no se debajo de 5 °C.
produce color rojo dentro de los 15 minutos. Pérdida por secado <680> - [NOTA: este ensa-
yo es aplicable sólo a la forma seca.] Secar al vacío
a 60°C durante 6 horas: no pierde más de 5,0 % de 7URSHROLQD 22 - (Naranja ácido 5) -
su peso. (PM: 375,4) - C18H14N3NaO3S - Escamas amarillo
7URPHWDPLQD - anaranjadas o polvo amarillo. Soluble en agua.
Intervalo de pH - Entre 1,4 (rojo) y 2,6 (amari-
[Tris(hidroximetil)aminometano; THAM; 2-Amino-
llo).
2-(hidroximetil)-1,3-propanodiol] - C4H11NO3 -
(PM: 121,1) - Emplear Tris(hidroximetil)amino 7XQJVWDWR VyGLFR - Na2WO4 . 2H2O -
metano grado analítico. (PM: 329,9) - Emplear un reactivo analítico apro-
piado.
8
8UDFLOR - C4H4N2O2 - (PM: 112,1) - Polvo cris- 8ULGLQD - C9H12N2O6 - (PM: 244,2) - Polvo
talino color blanco o crema. Funde encima de 300 blanco.
°C. Poco soluble en agua; menos soluble en alco- Valoración -
hol; soluble en amoníaco (SR) y en hidróxido de Fase móvil - Metanol y acetato de amonio 0,2 M
sodio (SR). Sus soluciones no producen precipitado (90:10), ajustar con ácido fosfórico a pH 7,0.
con los precipitantes usuales de alcaloides. Procedimiento - Inyectar aproximadamente
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - 20 µl en un equipo para cromatografía de líquidos
Inapreciable, determinado sobre 100 mg. (ver 100. Cromatografía) equipado con un detector
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de 15
rante 2 horas: no pierde más de 2 % de su peso. cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida por
octadecilsilano químicamente unido a partículas de
8UHD - NH2CONH2 - (PM: 60,1) - Emplear un
sílice porosa de 3 a 10 µm de diámetro. El caudal es
reactivo analítico apropiado.
de aproximadamente 2,0 ml por minuto. El área del
8UHWDQR - (Carbamato de etilo) - C3H7NO2 - pico C9H12N2O6 no es menor de 99 % del área total.
(PM: 89,1) - Polvo blanco con pequeños trozos. Intervalo de fusión <260> - Entre 166 y 171 °C.
Fácilmente soluble en agua.
Intervalo de fusión <260> - Entre 48 y 50 °C.
9
9DLQLOOLQ– [4-hidroxi – 3-metoxibenzaldehído] exceder la de un blanco conteniendo 0,5 mg de Cl
C8H8O3 - (PM: 152,2) (0,2 %).
9DOHURIHQRQD - C11H14O - (PM: 162,2) - Líqui- Sulfato - Disolver 500 mg en 50 ml de agua ca-
do incoloro. liente y agregar 2 ml de ácido clorhídrico diluido y
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en 1,5 g de clorhidrato de hidroxilamina. Calentar a
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) 60 °C durante 3 minutos, filtrar, enfriar y agregar al
equipado con un detector de ionización a la llama y filtrado 2 ml de cloruro de bario (SR): no se produ-
una columna capilar recubierta con una capa de ce turbidez o precipitado alguno dentro de 30 minu-
1 µm de fase estacionaria constituida por goma de tos.
dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el de-
9HUGH EULOODQWH - (Verde de malaquita G) -
tector a aproximadamente 250 y 300 °C, respecti- C27H34N2O4S - (PM: 482,6) - Cristales brillantes
vamente. La temperatura de la columna se mantiene color amarillo oro. Soluble en agua y alcohol.
a 150 °C y se programa un ascenso de 10 °C por
Máximo de absorción a 623 nm.
minuto hasta 300°C. Se emplea helio como gas
transportador. La respuesta del pico C11H14O no 9HUGHGHPDODTXLWD* - Ver Verde brillante.
debe ser menor de 98 % de la respuesta total. 9LQLOSLUUROLGRQD - (1-Vinil-pirrolidin-2-
Índice de refracción <230> - Aproximadamente ona) - C6H9NO - (PM: 111,1) - Líquido incoloro.
1,5149, a 20 °C. Valoración - Inyectar una alícuota apropiada
Intervalo de ebullición - Entre 105 y 107 °C, a en un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromato-
una presión de 5 mm Hg. grafía) equipado con un detector de ionización a la
9DQDGDWRGHDPRQLR - (Metavanadato de amo- llama y una columna capilar de 30 m u 0,25 mm
nio) - NH4VO3 - (PM: 117,0) - Polvo blanco, crista- recubierta con una capa de 1 µm de fase estaciona-
lino. Poco soluble en agua fría; soluble en agua ria constituida por goma de dimetilpolisiloxano.
caliente y amoníaco (SR). Mantener el inyector y el detector a aproximada-
Valoración - Pesar exactamente alrededor de mente 250 y 300 °C, respectivamente. La tempera-
500 mg, transferirlos a un envase apropiado, agre- tura de la columna se mantiene a 100 °C y se pro-
gar 30 ml de agua y 2 ml de ácido sulfúrico diluido grama un ascenso de 10 °C por minuto hasta
(1 en 4), agitar por rotación hasta disolver y hacer 250 °C. Se emplea helio como gas transportador.
pasar dióxido de azufre gaseoso a través de la solu- La respuesta del pico de C6H9NO no debe ser me-
ción hasta que la solución se torne color azul bri- nor de 99,0 % de la respuesta total.
llante. Calentar a ebullición suavemente mientras se 9LROHWD GH pLRGRQLWURWHWUD]ROLR - [Cloruro de
hace pasar una corriente de dióxido de carbono a 2-(4-iodofenil)-3-(4-nitrofenil)-5-feniltetrazolio] -
través de la solución para eliminar el dióxido de C19H13ClIN5O2 - (PM: 505,7) - Polvo de color ama-
azufre en exceso y luego enfriar. Titular con per- rillo claro.
manganato de potasio 0,1 N (SV). Cada mililitro de Valoración -
permanganato de potasio 0,1 N consumido equivale Fase estacionaria - Emplear una placa para
a 11,7 mg de NH4VO3. Contiene no menos de cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromato-
98,0 %. grafía) recubierta con gel de sílice para cromato-
Solubilidad en hidróxido de amonio - Disolver grafía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm
1 g en una mezcla de 3 ml de hidróxido de amonio de espesor.
y 50 ml de agua caliente: la solución es transparente Fase móvil - Alcohol amílico, ácido fórmico y
e incolora. agua (8:1:1).
Carbonato - A 500 mg agregar 1 ml de agua y Revelador - Solución de tiosulfato de sodio al
2 ml de ácido clorhídrico diluido: no se produce 0,1%.
efervescencia. Procedimiento - Pulverizar con Revelador sobre
Cloruro - Disolver 250 mg en 40 ml de agua ca- la placa y examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm.
liente, agregar 2 ml de ácido nítrico y dejar reposar Presenta una sola mancha, con trazas de impurezas.
durante 1 hora. Filtrar y agregar al filtrado 0,5 ml de Punto de fusión <260> - Aprox. 240 °C, con
nitrato de plata (SR): si se produce turbidez no debe descomposición.
;
;DQWLGURO - C13H10O2 - (PM: 198,2) - Polvo grupos silanoles superficiales]. Mantener el detec-
cristalino amarillo pálido. Insoluble en agua; solu- tor, el inyector y la columna a aproximadamente
ble en alcohol, cloroformo y éter. Soluble en ácido 280, 180 y 80 °C, respectivamente. Se emplea helio
acético glacial, dando una solución prácticamente como gas transportador con un caudal de aproxima-
incolora; cuando el polvo se trata con ácido clorhí- damente 27,5 ml por minuto. Presenta una pureza
drico diluido, se produce un color amarillo limón. no menor de 95 %.
Intervalo de fusión <260> - Entre 121 y 123 °C. Índice de refracción - Entre 1,5040 y 1,5060, a
Residuo de ignición <270> - Someter a ignición 20 °C.
500 mg con 0,5 ml de ácido sulfúrico: el residuo no
p;LOHQR - C8H10 - (PM: 106,2) - Líquido inco-
pesa más de 10 mg (2,0 %).
loro.
;DQWLQD - C5H4N4O2 - (PM: 152,1) - Polvo Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
blanco, cristalino. Se descompone con el calenta- un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
miento. Poco soluble en agua y alcohol; soluble en equipado con un detector de ionización a la llama y
hidróxido de sodio (SR); moderadamente soluble en una columna capilar de 30 m x 0,25 mm recubierta
ácido clorhídrico diluido. Cuando se somete a la con una capa de 1 µm de una fase estacionaria
reacción de murexida se produce un color púrpura constituida por polietilenglicol (p.m.p de 950 a
con el amoníaco; con el agregado posterior de 1.050). Mantener el inyector y el detector a aproxi-
hidróxidos alcalinos, el color no desaparece pero madamente 130 y 300 °C, respectivamente. La
cambia a violeta. temperatura de la columna se mantiene a 50 °C y se
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) - programa un ascenso de 10 °C por minuto hasta
Inapreciable, determinado sobre 100 mg. 100 °C. Se emplea helio como gas transportador. El
Pérdida por secado <680> - Secar a 105 °C du- área del pico de C8H10 no es menor de 99 % del
rante 2 horas: no pierde más de 1 % de su peso. área total.
Índice de refracción <230> - Entre 1,493 y
;LOHQR - C8H10 - (PM: 106,2) - Emplear un re-
1,497, a 20 °C.
activo analítico apropiado.
;LOHQR FLDQRO )) - C25H27N2NaO6S2 -
m-;LOHQR C8H10 - (PM: 106,2) - (1,3-
(PM: 538,6) - Polvo de color gris azulado a azul
dimetilbenceno) - Líquido inflamable, límpido e
oscuro. Soluble en agua.
incoloro. Miscible con alcohol y éter. Práctica-
Valoración - Transferir aproximadamente
mente insoluble en agua.
Densidad relativa - Aprox. 0,884 a 20 ºC. 50 mg, exactamente pesados, a un matraz aforado
Índice de refracción <230> - Aprox. 1,497 a de 100 ml, disolver en agua, completar a volumen
con agua y mezclar. Transferir 2,0 ml de la solución
20 ºC.
a un matraz aforado de 50 ml, completar a volumen
Punto de ebullición - Aprox. 139 ºC.
con solución reguladora de fosfato pH 7,0 (ver
Punto de fusión - Aprox – 47 ºC.
Soluciones reguladoras) y mezclar. Determinar la
o;LOHQR - C8H10 - (PM: 106,2) - Líquido absorbancia de la solución en celdas de 1 cm, a la
transparente, incoloro, móvil e inflamable. Insolu- longitud de onda de máxima absorción, aproxima-
ble en agua; miscible con alcohol y éter. damente a 614 nm, con un espectrofotómetro apro-
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en piado, empleando agua como blanco. Calcular la
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía) absortividad (ver 470. Espectrofotometría ultravio-
equipado con un detector de ionización a la llama y leta y visible): la absortividad no es menor de 55,9,
una columna de acero inoxidable de 1,8 m x 3 mm correspondiendo aproximadamente a 83 % de
empacada con 1,75 % de silicato de aluminio hidra- C25H27N2NaO6S2.
tado más 5,0 % de diisodecil ftalato sobre un sopor- Pérdida por secado <680> - Secar a 110 °C has-
te constituido por tierra silícea para cromatografía ta peso constante: no pierde más de 6,0 % de su
de gases la cual ha sido calcinada mezclando dia- peso.
tomea con Na2CO3 y calcinada a 900 °C. [NOTA:
;LORVD - C5H10O5 - (PM: 150,1) - Emplear uno
la tierra silícea se lava con ácido luego se lava con
de grado apropiado.
agua hasta neutralidad pero no se lava con bases. La
tierra silícea puede ser silanizada al tratarla con un
agente como dimetildiclorosilano para bloquear los
,1',&$'25(6PA PE L E S Y PA PE L E S I NDI C A DOR E S
,1',&$'25(6
Los indicadores se emplean en los ensayos y va- $]XOGHEURPRFUHVRO - Ver Verde de bromocre-
loraciones de este compendio para indicar la finali- sol.
zación de una reacción química en el análisis vo- $]XO GH EURPRIHQRO - C19H10Br4O5S -
lumétrico o para indicar la concentración de ion (3’,3’’,5’,5’’-Tetrabromofenolsulfoftaleína) -
hidrógeno (pH) de las soluciones. Las soluciones
(PM: 670,0) - Cristales rosados. Insoluble en agua;
indicadoras necesarias se enumeran entre las Solu-
soluble en alcohol y en soluciones de hidróxidos
ciones de reactivos, abreviadas como (SR).
alcalinos. Intervalo de transición: de pH 3,0 a 4,6.
Las soluciones de indicadores básicos y del gru- Cambio de color: de amarillo a azul.
po de las ftaleínas se preparan mediante disolución
en alcohol. En el caso de indicadores que contienen $]XO GH EURPRIHQRO VyGLFR - (Sal sódica de
un grupo ácido, este grupo debe, en primer lugar, 3’,3’’,5’,5’’-Tetrabromofenolsulfoftaleína) -
neutralizarse con hidróxido de sodio del siguiente (PM: 646,4) - C19H9Br4O5SNa - Cristales rosados.
modo: Soluble en agua y en alcohol. Intervalo de transi-
Triturar 100 mg del indicador en un mortero de ción: de pH 3,0 a 4,6. Cambio de color: de amarillo
superficie lisa con el volumen de hidróxido de sodio a azul.
0,05 N especificado en las indicaciones para prepa- $]XO GH EURPRWLPRO - C27H28Br2O5S - (3’,3’’-
rar la Solución de reactivo, o con el equivalente de Dibromotimolsulfoftaleína) - (PM: 624,4) - Polvo
hidróxido de sodio 0,02 N. Cuando se ha disuelto el color crema. Insoluble en agua; soluble en alcohol y
indicador, diluir la solución con agua a 200 ml en soluciones de hidróxidos alcalinos. Intervalo de
(0,05%). Almacenar las soluciones en envases in- transición: de pH 6,0 a 7,6. Cambio de color: de
actínicos apropiados. amarillo a azul.
Enumerados en orden ascendente según el límite
inferior del intervalo, los indicadores de pH útiles $]XO GH KLGUR[LQDIWRO - C20H14N2O11S3 -
son: azul de timol, pH 1,2 - 2,8; amarillo de metilo, (PM: 554,5) - Sal disódica del ácido 1-(2-naftolazo-
pH 2,9 - 4,0; azul de bromofenol, pH 3,0 - 4,6; 3,6- disulfónico)-2-naftol-4-sulfónico depositado
verde de bromocresol, pH 4,0 - 5,4; rojo de metilo, sobre cristales de cloruro de sodio - Cristales azules
pH 4,2 - 6,2; púrpura de bromocresol, pH 5,2 - 6,8; pequeños. Fácilmente soluble en agua. En el inter-
azul de bromotimol, pH 6,0 - 7,6; rojo de fenol, pH valo de pH entre 12 y 13, su solución es de color
6,8 - 8,2; azul de timol, pH 8,0 - 9,2 y timolftaleína, rojo rosado en presencia de ion calcio y azul pro-
pH 8,6-10,0. fundo en presencia de edetato disódico en exceso.
Aptitud para la determinación de calcio - Disol-
$OID]XULQD * - Emplear uno de grado apro- ver 300 mg en 100 ml de agua, agregar 10 ml de
piado. hidróxido de sodio (SR) y 1,0 ml de solución de
$PDULOOREULOODQWH (C.I. 24.890) - (PM: 592,5) - cloruro de calcio (1 en 200) y diluir con agua a
C26H18N4Na2O8S - Polvo anaranjado o color óxido. 165 ml: la solución es rojizo rosada. Agregar 1,0 ml
Soluble en agua. de edetato disódico 0,05 M: la solución vira a azul
Pérdida por secado <680> - Secar al vacío a profundo.
60°C durante 1 hora: no pierde más de 5 % de su $]XO GH RUDFHW % - (Solvente azul 19) - Una
peso. mezcla de (C21H16N2O2) 1-metilamino-4-
$PDULOOR GH PHWLOR - C14H15N3 - (p- anilinoantraquinona y de (C20H14N2O2) 1-amino-4-
Dimetilaminoazobenceno) - (PM: 225,3) - Cristales anilinoantraquinina - Cuando se emplea para titula-
amarillos que funden entre 114 y 117 °C. Insoluble ción en medios no acuosos, su color cambia de azul
en agua; soluble en alcohol, cloroformo, éter, ácidos (básico), púrpura (neutro) a rosado (ácido).
minerales diluidos y aceites. Intervalo de transición: $]XO GH WLPRO - (Timolsulfoftaleína) -
de pH 2,9 a 4,0. Cambio de color: de rojo a amari- C27H30O5S (PM: 466,6) - Polvo cristalino de color
llo. oscuro. Poco soluble en agua; soluble en alcohol y
$]R YLROHWD - [4-(p-Nitrofenilazo)resorcinol] - en soluciones de álcalis diluidos. Ácido - Intervalo
C12H9N3O4 - (PM: 259,2) - Polvo rojo. Funde de transición: de pH 1,2 a 2,8. Cambio de color: de
aproximadamente a 193 °C, con descomposición. rojo a amarillo. Alcalino - Intervalo de transición:
de pH 8,0 a 9,2. Cambio de color: de amarillo a mercurio, escandio, torio o cinc se titula con edetato
azul. disódico.
$]XO QLOR FORUKLGUDWR - C20H20ClN3O - 1HJUR GH HULRFURPR 7 - [1-(1-Hidroxi-2-
(PM: 353,9) - (Azul nilo A, como clorhidrato; Clo- naftilazo)-5-nitro-2-naftol-4-sulfonato de sodio] -
ruro de 5-amino-9-(dietilamino)benzo [a] fenoxa- (PM: 461,4) - C20H12N3NaO7S - Polvo negro par-
zin-7-io) - Poco soluble en alcohol y en ácido acéti- dusco que tiene un débil brillo metálico. Soluble en
co glacial. Intervalo de transición: de pH 9,0 a 13,0. alcohol, metanol y agua caliente.
Cambio de color: de azul a rosado. Sensibilidad - A 10 ml de una solución (1 en
200.000) en una mezcla de partes iguales de meta-
&ULVWDO YLROHWD - (Cloruro de hexametil p-
nol y agua agregar solución de hidróxido de sodio
rosanilina) - C25H30ClN3 - (PM: 408,0) - Cristales
(1 en 100) hasta pH 10: la solución es color azul y
verde oscuro. Poco soluble en agua; moderadamen-
te soluble en alcohol y en ácido acético glacial. Sus exenta de turbidez. Agregar 0,01 mg de ion magne-
soluciones son color violeta profundo. sio (Mg): el color de la solución se torna de color
rojo violeta y con el agregado continuado de ion
Sensibilidad - Disolver 100 mg en 100 ml de
magnesio adquiere una coloración rojo vino.
ácido acético glacial y mezclar. Transferir 1 ml de
solución a un matraz aforado de 100 ml y completar 1HJUR GH HULRFURPR 7 WULWXUDGR - Reducir a
a volumen con ácido acético glacial: la solución es polvo 200 mg de negro de eriocromo T a polvo fino
color azul-violeta y no presenta un tinte rojizo. con 20 g de cloruro de potasio.
Transferir 20 ml de la solución diluida a un vaso de
3~USXUD GH EURPRFUHVRO - (Dibromo-o-
precipitados y titular con ácido perclórico
cresolsulfoftaleína) - C21H16Br2O5S - (PM: 540,2) -
0,1 N (SV), agregando el ácido perclórico lenta-
Polvo cristalino blanco a rosado. Insoluble en agua;
mente desde una microbureta: no se consumen más soluble en alcohol y en soluciones de hidróxidos
de 0,10 ml de ácido perclórico 0,1 N para producir
alcalinos. Intervalo de transición: de pH 5,2 a 6,8.
un color verde-esmeralda.
Cambio de color: de amarillo a púrpura.
)HQROIWDOHtQD - [3,3-Bis(p-hidroxifenil)ftalida] - 3~USXUDGHIWDOHtQD - Ver Púrpura de ftaleína
C20H14O4 - (PM: 318,3) - Polvo blanco o débilmen- en Especificaciones de reactivos.
te amarillento blanco, cristalino. Insoluble en agua;
soluble en alcohol. Intervalo de transición: de pH 5RMRFRQJR - Ver Rojo congo en Especificacio-
8,0 a 10,0. Cambio de color: de incoloro a rojo. nes de reactivos.
S1DIWROEHQFHtQD - (PM: 374,4) - (4-[D-(4- 5RMR FUHVRO - (o-Cresolsulfoftaleína) -
Hidroxi-1-naftil)bencilideno]-1(4H)-naftalenona) - C21H18O5S - (PM: 382,4) - Polvo rojo-pardo. Poco
(4-HOC10H6)C(:C10H6-4:O)(C6H5) - Polvo pardo soluble en agua; soluble en alcohol y en soluciones
rojizo. Insoluble en agua; soluble en alcohol, éter y diluidas de hidróxidos alcalinos. Intervalo de transi-
ácido acético glacial. Intervalo de transición: de pH ción: de pH 7,2 a 8,8. Cambio de color: de amarillo
8,8 a 10,0. Cambio de color: de anaranjado a verde. a rojo.
1DUDQMD GH PHWLOR - (Heliantina o tropeolina 5RMR GH IHQRO - [4,4’-(3H-2,1-Benzoxatiol-3-
D) - C14H14N3NaO3S - (PM: 327,3) - Sal sódica del iliden)difenol, S,S-dióxido] - C19H14O5S -
ácido dimetilaminoazobenceno sulfónico o dimeti- (PM: 354,4) - Polvo cristalino, varía el color de
laminoazobenceno sulfonato sódico. Polvo o esca- rojo brillante a rojo oscuro. Muy poco soluble en
mas cristalinas de color amarillo anaranjado. Poco agua; fácilmente soluble en soluciones de carbona-
soluble en agua fría; fácilmente soluble en agua tos e hidróxidos alcalinos; poco soluble en alcohol.
caliente; insoluble en alcohol. Intervalo de transi- Intervalo de transición: de pH 6,8 a 8,2. Cambio de
ción: de pH 3,2 a 4,4. Cambio de color: de rosado a color: de amarillo a rojo.
amarillo. 5RMR GH PHWLOR - (PM: 305,8) - (Ácido 2-[[4-
1DUDQMD GH [LOHQRO - C31H28N2Na4O13 - (N,N’- (dimetilamino)fenil]azo]benzoico, clorhidrato) - 2-
[3H-2,1-Benzoxatiol-3-ilidenbis-[(6-hidroxi-5- [4-(CH3)2NC6H4N:N]C6H4COOH] . HCl - Polvo
metil-3,1-fenilen)metilen]]bis[N- rojo oscuro o cristales de color violeta. Moderada-
(carboximetil)glicina] S,S-dióxido) - (PM: 760,6) - mente soluble en agua; soluble en alcohol. Intervalo
Polvo anaranjado. Soluble en alcohol y agua. En de transición: de pH 4,2 a 6,2. Cambio de color: de
solución ácida, es color amarillo limón y sus com- rojo a amarillo.
plejos metálicos son intensamente rojos. Proporcio- 5RMRGHPHWLORVyGLFR - (Sal sódica del ácido 2-
na un punto final diferenciado cuando un metal, [[4-(dimetilamino)fenil]azo] benzoico) -
como por ej., bismuto, cadmio, lantano, plomo, (PM: 291,3) - 2-[4-(CH3)2NC6H4N:N]C6H4COONa
- Polvo naranja pardusco. Fácilmente soluble en Solución mezcla de azul sulfán y bromuro de
agua fría y alcohol. Intervalo de transición: de pH dimidium –
4,2 a 6,2. Cambio de color: de rojo a amarillo. 7LPROIWDOHtQD - C28H30O4 - (PM: 430,5) - Polvo
5RMR GH TXLQDOGLQD - (Ioduro de 5- cristalino blanco a algo amarillo. Insoluble en agua;
dimetilamino-2-estiriletil quinolinio) - C21H23IN2 - soluble en alcohol y en soluciones de hidróxidos
(PM: 430,3) - Polvo de color azul oscuro a negro. alcalinos. Intervalo de transición: de pH 9,3 a 10,5.
Moderadamente soluble en agua; fácilmente soluble Cambio de color: de incoloro a azul.
en alcohol. Funde aproximadamente a 260 °C, con
7RUQDVRO - Polvo azul. Parcialmente soluble en
descomposición. Intervalo de transición: de pH 1,4
agua y alcohol. Intervalo de transición: de pH
a 3,2. Cambio de color: de incoloro a rojo.
aproximadamente 4,5 a 8. Cambio de color: de rojo
5RMR QHXWUR - (3-Amino-7-dimetilamino-2- a azul. El papel de tornasol no es apropiado para
metilfenazina monoclorhidrato) - C15H16N4.HCl - determinar el pH de alcaloides, carbonatos y bicar-
(PM: 288,8) - Polvo grueso color rojizo a verde bonatos.
aceituna. Moderadamente soluble en agua y alco-
9HUGHEULOODQWH - Ver Verde brillante en la Es-
hol. Intervalo de transición: de pH 6,8 a 8,0. Cam-
pecificaciones de reactivos.
bio de color: de rojo a anaranjado.
9HUGHGHEURPRFUHVRO - (Azul de bromocresol;
6DO VyGLFD GH S~USXUD GH EURPRFUHVRO -
Tetrabromo m-cresolsulfoftaleína) - C21H14Br4O5S
(PM: 562,2) - C21H15Br2O5SNa - Polvo negro. So-
- (PM: 698,0) - Polvo blanco o amarillo pálido.
luble en agua. Intervalo de transición: de pH 5,0 a
Poco soluble en agua; soluble en alcohol y en solu-
6,8. Cambio de color: de amarillo verdoso a púrpu- ciones de hidróxidos alcalinos. Intervalo de transi-
ra-violeta. ción: de pH 4,0 a 5,4. Cambio de color: de amarillo
Intervalo de fusión <260> - Entre 261 y 264 °C.
a azul.
6DOWULVyGLFDGHOiFLGRVXOIRIHQLOD]R 9HUGH GH PDODTXLWD R[DODWR - (PM: 927,0) -
GLKLGUR[L QDIWDOHQR GLVXOIyQLFR - (Sal trisódi- [4-NH(CH3)2C6H4C(C6H5):C6H4-4-:N(CH3)2(OCO
ca del ácido 4,5-dihidroxi-3-(p-sulfofenilazo)-2,7-
COOH)]2(COO)2 - Es el oxalato, cristalizado con
naftalenodisulfónico) - C16H9N2O11S3Na3 -
ácido oxálico, de un colorante derivado del trife-
(PM: 570,4) - Polvo rojo. Soluble en agua.
nilmetano. Polvo verde oscuro, de brillo metálico.
6DOVyGLFDGHYHUGHGHEURPRFUHVRO - Emplear Moderadamente soluble en agua; soluble en ácido
uno de grado apropiado. acético glacial. Intervalo de transición: de pH 0,0 a
2,0. Cambio de color: de amarillo a verde.
6XOILWR GH ELVPXWR - Emplear uno de grado
apropiado.
3$3(/(6<3$3(/(6,1',&$'25(6
Los papeles y papeles indicadores son tiras de que se especifique de otro modo, suspendiéndolos
papel de dimensión y grado apropiado (ver Papel de en varillas de vidrio u otro material inerte en un
filtro cuantitativo, en Especificaciones de reactivos) espacio exento de ácido, álcali y otros gases.
impregnadas con un indicador o un reactivo. Algu- Cortar el papel en tiras de tamaño conveniente y
nos papeles pueden obtenerse comercialmente. almacenar los papeles en envases inactínicos, bien
Aquellos requeridos en los ensayos y valoraciones cerrados, protegidos de la humedad.
de este compendio pueden ser preparados según se 3DSHOGHDPDULOORGHPHWLOR - Emplear una so-
indica a continuación.
lución (1 en 2000) de amarillo de metilo en alcohol.
Tratar el papel de filtro con ácido clorhídrico y
lavarlo con agua hasta que el último lavado ya no 3DSHOGHF~UFXPD - Emplear una solución pre-
de reacción ácida con rojo de metilo. Luego tratar parada del siguiente modo: macerar 20 g de polvo
con amoníaco (SR) y lavar nuevamente con agua de cúrcuma, la raíz seca de Curcuma longa Linne
hasta que el último lavado no sea alcalino a la fe- (Fam. Zingiberaceae), con cuatro porciones de
nolftaleína. 100 ml de agua fría, decantando la porción líquida
Luego de un secado minucioso, saturar el papel transparente cada vez y descartándola. Secar el
con la concentración apropiada de soluciones indi- residuo a una temperatura no mayor de 100 °C.
cadoras y cuidadosamente secar al aire, a menos
Macerar con 100 ml de alcohol durante varios días de magnesio en un crisol de porcelana y someter a
y filtrar. ignición. Agregar al residuo 5 ml de ácido nítrico y
Sensibilidad - Sumergir una tira del papel, de evaporar hasta sequedad: el residuo no presenta más
longitud de aproximadamente 1,5 cm, en una solu- de 0,02 mg de PO4.
ción de 1,0 mg de ácido bórico en 5 ml de agua, Residuo de ignición - Someter a ignición cuida-
previamente mezclada con 1 ml de ácido clorhídri- dosamente 10 tiras del papel hasta peso constante:
co. Luego de 1 minuto remover el papel del líquido el peso del residuo corresponde a no más de 0,4 mg
y dejarlo secar: el color amarillo cambia a pardo. por tira de aproximadamente 3 cm2.
Luego humedecer el papel con amoníaco (SR): el Ácidos de colofonia - Sumergir una tira del pa-
color del papel cambia a negro verdoso. pel azul en una solución de 100 mg de nitrato de
plata en 50 ml de agua: el color del papel no cambia
3DSHO GH IHQROIWDOHtQD - Emplear una solución
en 30 segundos.
(1 en 1.000) de fenolftaleína en alcohol diluido.
Sensibilidad - Dejar caer una tira de 10 a 12 mm
3DSHOGHLRGDWRDOPLGyQ - Emplear una mez- en un vaso de precipitados que contenga 100 ml de
cla de volúmenes iguales de almidón (SR) y solu- ácido 0,0005 N y agitar continuamente: el color del
ción de iodato de potasio (1 en 20). papel cambia dentro de los 45 segundos. El ácido
3DSHOGHLRGXURDOPLGyQ - Emplear una solu- 0,0005 N se prepara diluyendo 1 ml de ácido
ción de 500 mg de ioduro de potasio en 100 ml de clorhídrico 0,1 N con agua purificada hervida re-
almidón recientemente preparado (SR). cientemente y enfriada a 200 ml.
3DSHO GH DFHWDWR GH SORPR - Generalmente de 3DSHO GH WRUQDVRO URMR - Generalmente de un
un tamaño aproximado de 6 mm × 80 mm. Usar tamaño aproximado de 6 mm × 50 mm. El papel de
acetato de plomo (SR) y secar el papel a 100 °C, tornasol rojo cumple con los requisitos de los ensa-
evitando el contacto con metales. yos para Fosfato, Residuo de ignición y Ácidos de
colofonia en Papel de tornasol azul.
3DSHO GH EURPXUR PHUF~ULFR - Emplear bro- Sensibilidad - Dejar caer una tira de 10 a 12 mm
muro mercúrico alcohólico (SR). Almacenar prote- en un vaso de precipitados que contenga 100 ml de
gido de la luz. hidróxido de sodio 0,0005 N y agitar continuamen-
3DSHO GH VXOIDWR F~SULFR - Emplear sulfato te: el color del papel cambia dentro de los 30 se-
cúprico (SR). gundos. El hidróxido de sodio 0,0005 N es prepara-
do diluyendo 1 ml de hidróxido de sodio 0,1 N con
3DSHO GH WRUQDVRO D]XO - Generalmente de un agua purificada recientemente hervida y enfriada a
tamaño aproximado de 6 mm × 50 mm. Cumple 200 ml.
con los requisitos de los siguientes ensayos.
Fosfato (Ensayo para reactivos) - Cortar 5 tiras 3DSHO LQGLFDGRU GH S+ GH LQWHUYDOR FRUWR -
en piezas pequeñas, mezclar con 500 mg de nitrato Emplear uno grado apropiado.
SOL UC I ONE S
Bromuro mercúrico alcohólico (SR) - Disol- Cloruro cobaltoso (SR) - Disolver 2 g de clo-
ver 5 g de bromuro mercúrico en 100 ml de alcohol, ruro cobaltoso en 1 ml de ácido clorhídrico y agua
calentando suavemente para facilitar la disolución. suficiente para obtener 100 ml.
Almacenar en envases de vidrio inactínico. Cloruro de amonio (SR) - Disolver 10,5 g de
Carbonato de amonio (SR) - Disolver 20 g de cloruro de amonio en agua para obtener 100 ml.
carbonato de amonio y 20 ml de amoníaco (SR) en
agua para obtener 100 ml.
Cloruro de amonio-hidróxido de amonio (SR) agregar 1 ml de cloruro férrico (SR), mezclar y
- Mezclar volúmenes iguales de agua e hidróxido de enfriar.
amonio y saturar con cloruro de amonio.
Cloruro férrico-ácido sulfámico (SR) - Prepa-
Cloruro de bario (SR) - Disolver 12 g de clo- rar una solución que contenga 10 g por litro de
ruro de bario en agua para obtener 100 ml. cloruro férrico y 16 g por litro de ácido sulfámico.
Cloruro de calcio (SR) - Disolver 7,5 g de clo- Cloruro mercúrico (SR) - Disolver 6,5 g de
ruro de calcio en agua para obtener 100 ml. cloruro mercúrico en agua para obtener 100 ml.
Cloruro de cinc iodado (SR) - Disolver 20 g Cloruro platínico (SR) - Disolver 2,6 g de clo-
de cloruro de cinc y 6,5 g de ioduro de potasio en ruro platínico en agua para obtener 20 ml.
10,5 ml de agua. Agregar 0,5 g de iodo y agitar
Cobaltonitrito de sodio (SR) - Disolver 10 g
durante 15 minutos.
de cobaltonitrito de sodio en agua para obtener
Cloruro de iodo (SR) - Disolver 16,5 g de mo- 50 ml y filtrar si fuera necesario.
nocloruro de iodo en 1 litro de ácido acético glacial.
Colorante de Mallory - Disolver 500 mg de
Cloruro de metileno acidificado (SR) - A 100 azul de anilina soluble en agua, 2 g de naranja G y
ml de cloruro de metileno, agregar 10 ml de ácido 2 g de ácido oxálico en 100 ml de agua.
clorhídrico. Agitar, dejar reposar la solución y
Cristal violeta (SR) - Disolver 100 mg de cris-
separar las dos fases. Emplear la fase inferior.
tal violeta en 10 ml de ácido acético glacial.
Cloruro de oro (SR) - Disolver 1 g de cloruro
Cromato de potasio (SR) - Disolver 10 g de
de oro en 35 ml de agua.
cromato de potasio en agua para obtener 100 ml.
Cloruro de paladio regulado (SR) - Pesar
Diclorhidrato de N-(1-naftil)etilendiamina
500 mg de cloruro de paladio en un vaso de preci
(SR) Disolver 100 mg de diclorhidrato de N-(1-
pitados de 250 ml, agregar 5 ml de ácido clorhídrico
naftil)etilendiamina en 100 ml de una mezcla de
concentrado y calentar la mezcla en un baño de
acetona y agua (7:3).
vapor. Agregar 200 ml de agua caliente en porcio-
nes pequeñas con calentamiento continuo hasta que Diclorofluoresceína (SR) - Disolver 100 mg de
la disolución se complete. Transferir la solución a diclorofluoresceína en 60 ml de alcohol, agregar
un matraz aforado de 250 ml y completar a volu- 2,5 ml de hidróxido de sodio 0,1 N, mezclar y diluir
men con agua. Transferir 50 ml a un matraz afora- con agua a 100 ml.
do de 100 ml. Agregar 10 ml de acetato de sodio 1 Dicromato de potasio (SR) - Disolver 7,5 g de
M y 9,6 ml de ácido clorhídrico 1 N. Completar a dicromato de potasio en agua para obtener 100 ml.
volumen con agua.
Dietilditiocarbamato de plata (SR) - Disolver
Cloruro de sodio alcalino (SR) - Disolver 2 g 1 g de dietilditiocarbamato de plata en 200 ml de
de hidróxido de sodio en 100 ml de agua, saturar la piridina recientemente destilada. Almacenar en
solución con cloruro de sodio y filtrar. envases resistentes a la luz y emplear dentro de los
Cloruro de trifeniltetrazolio (SR) - Disolver 30 días.
500 mg de cloruro de trifeniltetrazolio en alcohol Difenilamina (SR) - Disolver 1,0 g de difeni-
absoluto para obtener 100 ml. lamina en 100 ml de ácido sulfúrico. La solución
Cloruro estañoso (SR) - Disolver 8 g de cloru- debe ser incolora.
ro estañoso en 500 ml de ácido clorhídrico. Alma- Difenilcarbazona (SR) - Disolver 1 g de dife-
cenar en envases de vidrio y emplear dentro de los 3 nilcarbazona en cristales en 75 ml de alcohol, luego
meses de preparado. agregar alcohol para obtener 100 ml. Almacenar en
Cloruro estañoso concentrado (SR) - Disol- una botella oscura.
ver 40 g de cloruro estañoso en 100 ml de ácido 2,7-Dihidroxinaftaleno (SR) - Disolver
clorhídrico. Almacenar en envases de vidrio y 100 mg de 2,7-dihidroxinaftaleno en 1 litro de ácido
emplear dentro de los 3 meses de preparado. sulfúrico y dejar reposar la solución hasta que el
Cloruro férrico (SR) - Disolver 9 g de cloruro color amarillo desaparezca. Si la solución es muy
férrico en agua para obtener 100 ml. oscura, descartarla y preparar una solución nueva
con ácido sulfúrico de distinta procedencia. Esta
Cloruro férrico ácido (SR) - Mezclar 60 ml de
solución es estable durante aproximadamente 1 mes
ácido acético glacial con 5 ml de ácido sulfúrico,
si se almacena en una botella de material inactínico.
Diiodofluoresceína (SR) - Disolver 500 mg de Fenilhidracina - ácido sulfúrico (SR) - Disol-
diiodofluoresceína en una mezcla de 75 ml de alco- ver 65 mg de clorhidrato de fenilhidracina en
hol y 30 ml de agua. 100 ml de una mezcla enfriada de volúmenes igua-
p-Dimetilaminobenzaldehído (SR) - Disolver les de ácido sulfúrico y agua.
125 mg de p-dimetilaminobenzaldehído en una Fenolftaleína (SR) - Disolver 1 g de fenolftale-
mezcla enfriada de 65 ml de ácido sulfúrico y 35 ml ína en 100 ml de alcohol.
de agua y agregar 0,05 ml de cloruro férrico (SR). Fenolftaleína (SR 1) - Disolver 100 mg de fe-
Emplear dentro de los 7 días de preparada.
nolftaleína en 80 ml de alcohol diluir a 100 ml con
Dinitrofenilhidracina (SR) - Mezclar cuidado- agua.
samente 10 ml de agua y 10 ml de ácido sulfúrico y Ensayo de sensibilidad - A 0,1 ml de solución
enfriar. A la mezcla, contenida en un erlenmeyer de fenolftaleína, agregar 100 ml de agua. La solu-
con tapón de vidrio, agregar 2 g de 2,4- dinitrofe-
ción debe ser incolora. No se requieren más de
nilhidracina y agitar hasta disolución. Agregarle a
0,2 ml de hidróxido de sodio 0,02 N para cambiar el
la solución 35 ml de agua, mezclar, enfriar y filtrar.
color del indicador a rosa.
Ditizona (SR) - Disolver 25,6 mg de ditizona Ferricianuro de potasio (SR) - Disolver 1 g de
en 100 ml de alcohol. Almacenar en un sitio frío y
ferricianuro de potasio en 10 ml de agua. Preparar
emplear dentro de los 2 meses de preparada.
esta solución antes de usar.
Ditizona (SR1) - Disolver 40,0 mg de ditizona Ferricianuro de potasio diluido (SR) - Disol-
en cloroformo y diluir a 1.000 ml con el mismo ver 1 g de ferricianuro de potasio en 100 ml de
solvente. Transferir 30 ml de esta solución a un
agua. Preparar esta solución antes de usar.
matraz aforado de 100 ml y completar a volumen
con cloroformo. Ferricianuro de potasio amoniacal (SR) - Di-
Estandarización - Transferir 1 ml de solución solver 2 g de ferricianuro de potasio en 75 ml de
de mercurio (20 ppm) (SL) a un ampolla de decan- agua, agregar 25 ml de hidróxido de amonio y mez-
tación y agregar 50 ml de ácido sulfúrico diluido, clar.
140 ml de agua y 10 ml de una solución de 200 mg Ferrocianuro de potasio (SR) - Disolver 1 g
de clorhidrato de hidroxilamina por ml. Titular con de ferrocianuro de potasio en 10 ml de agua. Prepa-
ditizona (SR1) y agitar luego de cada agregado rar esta solución antes de usar.
durante 20 minutos. Hacia el final de la valoración,
dejar separar las fases y descartar la fase clorofór- Ferroína (SR) - Disolver 0,7 g de sulfato ferro-
mica. Titular con ditizona (SR1) hasta obtener una so y 1,76 g de monoclorhidrato de o-fenantrolina
coloración azul-verdosa. Calcular el equivalente en monohidrato en agua y diluir a 100 ml con el mis-
Pg de mercurio por ml de ditizona (SR) por la mo solvente.
fórmula siguiente, Floroglucinol (SR) - Disolver 500 mg de flo-
20/V roglucinol en 25 ml de alcohol. Almacenar en
envases inactínicos, de cierre perfecto.
donde V es el volumen en ml de ditizona (SR) em-
pleada en la valoración. Fluido gástrico simulado (SR) - Disolver
2,0 g de cloruro de sodio y 3,2 g de pepsina purifi-
Ditizona (SR2) - Preparar una solución de diti- cada, derivada de la mucosa estomacal porcina, con
zina en cloroformo de 0,5 g por litro. una actividad de 800 a 2.500 unidades por mg de
Edetato disódico (SR) - Disolver 1 g de edeta- proteína, en 7,0 ml de ácido clorhídrico y agua
to disódico en 950 ml de agua, agregar 50 ml de suficiente para obtener 1 litro. Esta solución tiene
alcohol y mezclar. un pH de aproximadamente 1,2.
Enzima fosfática (SR) - Disolver 5 g de enzi- Fluido intestinal simulado (SR) - Disolver
ma fosfática en agua para obtener 50 ml. Preparar 6,8 g de fosfato monobásico de potasio en 250 ml
esta solución el día de uso. de agua, mezclar y agregar 77 ml de hidróxido de
sodio 0,2 N y 500 ml de agua. Agregar 10,0 g de
Eosina (SR) - (Indicador de adsorción) - Di- pancreatina purificada, mezclar y ajustar la solución
solver 50 mg de eosina en 10 ml de agua. resultante con hidróxido de sodio 0,2 N o ácido
Eriocromo cianina (SR) - Disolver 750 mg de clorhídrico 0,2N hasta pH 6,8 ± 0,1. Diluir con
eriocromo cianina R en 200 ml de agua, agregar agua a 1 litro.
25 g de cloruro de sodio, 25 g de nitrato de amonio Fluoruro de sodio (SR) - Secar aproximada-
y 2 ml de ácido nítrico y diluir con agua a 1 litro. mente 500 mg de fluoruro de sodio a 200 °C duran-
te 4 horas. Pesar exactamente 222 mg del material Fucsina decolorada (SR)- Disolver 100 mg de
seco y disolver en agua para obtener 100,0 ml. fucsina básica en 6 ml de agua y agregar 10 ml de
Transferir 10 ml de esta solución en un matraz una solución preparada disolviendo 1 g de sulfito de
aforado de 1 litro y completar a volumen con agua. sodio anhidro en 10 ml de agua. Lentamente y en
Cada ml de esta solución corresponde a 0,01 mg de agitación constante agregar 2 ml de ácido clorhídri-
flúor (F). co y diluir a 100 ml con agua. Proteger de la luz y
Folin - Ciocalteu para fenoles (SR) - En un dejar reposar por lo menos durante 12 horas. Deco-
erlenmeyer de 1500 ml, introducir 100 g de tungsta- lorar la solución agregando carbón vegetal activado
to de sodio, 25 g de molibdato de sodio, 700 ml de y filtrar. Si la solución se enturbia, filtrarla antes de
agua, 50 ml de ácido fosfórico y 100 ml de ácido su empleo. Si con el tiempo se torna violeta, agre-
clorhídrico. Calentar a reflujo la mezcla suavemen- gar nuevamente carbón vegetal activado para deco-
te durante aproximadamente 10 horas y agregar 150 lorarla. Conservar en envases inactínicos.
g de sulfato de litio, 50 ml de agua y unas pocas Ensayo de sensibilidad - A 1,0 ml de fucsina
gotas de bromo. Calentar a ebullición la mezcla, decolorada agregar 1,0 ml de agua, 0,1 ml de alco-
sin refrigerante, durante aproximadamente 15 minu- hol libre de aldehído y 0,2 ml de una solución de
tos o hasta expulsar el exceso de bromo. Enfriar, formaldehído de 0,1 mg por ml. Luego de
diluir con agua a 1 litro y filtrar: el filtrado no tiene 5 minutos debe desarrollar color rosa pálido.
tinte verdoso. Antes de usar, diluir 1 parte del fil- Fucsina-pirogalol (SR) - Disolver 100 mg de
trado con 1 parte de agua. fucsina básica en 50 ml de agua que previamente se
Formaldehído (SR) - Emplear Solución de ha calentado a ebullición durante 15 minutos y
formaldehído (ver en Especificaciones de reacti- dejado enfriar levemente. Enfriar, agregar 2 ml de
vos). una solución saturada de bisulfito de sodio, mezclar
y dejar reposar durante no menos de 3 horas. Agre-
Fosfato dibásico de amonio (SR) - (Fosfato de gar 0,9 ml de ácido clorhídrico, mezclar y dejar
Amonio (SR)) - Disolver 13 g de fosfato dibásico reposar de la noche a la mañana. Agregar 100 mg
de amonio en agua para obtener 100 ml. de pirogalol, agitar hasta disolución y diluir con
Fosfato dibásico de sodio (SR) - Disolver 12 g agua a 100 ml. Almacenar en una botella de vidrio
de cristales transparentes de fosfato dibásico de ámbar, en un refrigerador.
sodio en agua para obtener 100 ml. Gelatina (SR) - (para la valoración de Cortico-
Fosfotungstato de molibdeno (SR) - (Reactivo trofina solución inyectable) - Disolver 340 g de
de Folin-Denis) - A aproximadamente 350 ml de precursor de gelatina tratada con ácido (Tipo A) en
agua dentro de un balón, agregar 50 g de tungstato agua para obtener 1.000 ml. Calentar la solución en
sódico, 12 g de ácido fosfomolíbdico y 25 ml de autoclave a 115 ºC durante 30 minutos contados a
ácido fosfórico. Adosar un refrigerante al balón y partir de que la temperatura de la línea de salida ha
calentar a ebullición la mezcla durante 2 horas, alcanzado 115 ºC. Enfriar la solución y agregar
enfriar, diluir con agua a 500 ml y mezclar. Alma- 10 g de fenol y 1.000 ml de agua. Almacenar en
cenar en envases inactínicos,de cierre perfecto y en envases de cierre perfecto, en un refrigerador.
un sitio frío. Glicerina básica (SR) - Agregar agua a 200 g
Fosfotungstato sódico (SR) - Agregar a una de glicerina para obtener un peso total de 235 g. A
solución de 20 g de tungstato sódico en 100 ml de continuación agregar 142,5 ml de hidróxido de
agua, ácido fosfórico suficiente para dar una reac- sodio 1 N y 47,5 ml de agua.
ción fuertemente ácida frente al tornasol y filtrar. Glucosa oxidasa - cromogénica (SR) - Una
Cuando se requiera esta solución, decantar la solu- solución que contiene, en cada ml, 0,5 µmol de
ción transparente de cualquier sedimento que pueda 4-aminoantipirina, 22,0 µmol de p-hidroxibenzoato
estar presente. Almacenar en envases inactínicos, de de sodio, no menos de 7,0 unidades de glucosa
cierre perfecto. oxidasa y no menos de 0,5 unidades de peroxidasa y
Fucsina-ácido sulfuroso (SR) - Disolver regulada a pH 7,0 ± 0,1.
200 mg de fucsina básica en 120 ml de agua calien- Aptitud - Cuando se emplea para determinar
te y dejar enfriar la solución. Agregar una solución glucosa en Inulina, evaluar que no se produzca
de 2 g de sulfito de sodio anhidro en 20 ml de agua; color significativo después de la reacción con fruc-
luego agregar 2 ml de ácido clorhídrico. Diluir la tosa y que se obtenga una pendiente apropiada de
solución con agua a 200 ml y dejar reposar durante absorbancia en función de la concentración de glu-
no menos de 1 hora. Preparar esta solución antes de cosa.
usar.
Hematoxilina de Delafield (SR) - Preparar tar hasta que cese la efervescencia y diluir con agua
400 ml de una solución saturada de alumbre de a 50 ml. A 3 volúmenes de esta solución contenido
amonio (Solución A). Disolver 4 g de hematoxilina en un matraz aforado agregar ácido sulfúrico, en-
en 25 ml de alcohol, mezclarlo con Solución A y friando, para obtener 100 volúmenes. Purificar el
dejar reposar durante 4 días en un erlenmeyer tapa- fenol mediante destilación, descartando el primer
do con una torunda de algodón purificado y expues- 10 % y el último 5 %, recolectar el destilado, exclu-
to a la luz y al aire (Solución B). Luego filtrar la yendo la humedad, en un erlenmeyer seco y pre-
Solución B y agregarla a la Solución C, que consta viamente pesado, con tapón de vidrio, de aproxima-
de una mezcla de 100 ml de glicerina y 100 ml de damente dos veces el volumen de fenol. Solidificar
metanol. Mezclar y dejar reposar la mezcla en un el fenol en un baño de hielo, rompiendo la capa
sitio caliente, expuesto a la luz, durante 6 semanas superficial con una varilla de vidrio para asegurar
hasta que se coloree de oscuro. Almacenar en bote- una cristalización completa. Pesar el erlenmeyer y
llas perfectamente tapadas. Para teñir tejido endo- su contenido, agregar al fenol 1,13 veces su peso de
crino, diluir esta solución de reactivo con un volu- solución de hierro-ácido sulfúrico preparada según
men igual de agua. se indica, insertar el tapón en el erlenmeyer y dejar
Hidrato de cloral (SR) - Disolver 50 g de reposar, sin enfriamiento pero mezclando ocasio-
hidrato de cloral en una mezcla de 15 ml de agua y nalmente, hasta que el fenol licue. Agitar la mezcla
10 ml de glicerina. vigorosamente, dejar reposar en la oscuridad duran-
te 16 a 24 horas, y nuevamente pesar el erlenmeyer
Hidrosulfito de sodio alcalino (SR) - Disolver y su contenido. A la mezcla agregar 23,5 % de su
25 g de hidróxido de potasio en 35 ml de agua y peso de una solución de 100 volúmenes de ácido
50 g de hidrosulfito de sodio en 250 ml de agua. sulfúrico en 110 volúmenes de agua, mezclar, trans-
Cuando se requiere la solución de reactivo, mezclar ferir a una botella con tapón de vidrio seca y alma-
40 ml de la solución de hidróxido con los 250 ml de cenar en la oscuridad, protegida de humedad at-
la solución de hidrosulfito. Preparar esta solución mosférica. Emplear dentro de los 6 meses de prepa-
antes de usar. rada. Agregar el reactivo desde una bureta de diá-
Hidróxido de bario (SR) - Una solución satu- metro interno pequeño, protegida de la humedad,
rada de hidróxido de bario en agua recientemente capaz de entregar 1 ml en 30 segundos o menos, sin
hervida. Preparar la solución el día de uso. lubricante en su robinete con excepción del reacti-
vo. Limpiar la punta de la bureta antes de cada
Hidróxido de calcio (SR) - Emplear Solución agregado.
tópica de hidróxido de calcio.
Hipobromito de sodio (SR) - A una solución
Hidróxido de cuprietilendiamina (SR) - So- de 20 g de hidróxido de sodio en 75 ml de agua,
lución de hidróxido de cuprietilendiamina 1 M, con agregar 5 ml de bromo. Luego que se disuelva,
relación molar entre la etilendiamina y el cobre es diluir con agua a 100 ml. Preparar esta solución
de 2,00 r 0,04. antes de usar.
Hidróxido de potasio (SR) - Disolver 6,5 g de Hipoclorito de sodio (SR) - Emplear Solución
hidróxido de potasio en agua para obtener 100 ml. de hipoclorito de sodio (ver en Especificaciones de
Hidróxido de potasio alcohólico (SR) - Em- reactivos).
plear Hidróxido de potasio alcohólico 0,5 N (ver en Hipoclorito de sodio diluida (SR)- Diluir
Soluciones volumétricas). 35 ml de solución de hipoclorito de sodio (SR) a
Hidróxido de sodio (SR) - Disolver 4,0 g de 100 ml con agua inmediatamente antes de su uso.
hidróxido de sodio en agua para obtener 100 ml. La solución contiene aproximadamente 3,5 % p/v
de la cloro libre.
Hidróxido de tetrametilamonio (SR) - Em-
plear una solución acuosa que contenga, cada 100 Índigo carmín (SR) - (Indigotindisulfonato de
ml, el equivalente de 10 g de hidróxido de tetrame- sodio (SR)) - Disolver una cantidad de indigotindi-
tilamonio anhidro. sulfonato de sodio, equivalente a 180 mg de
C16H8N2O2(SO3Na)2, en agua para obtener 100 ml.
8-Hidroxiquinolina (SR) - Disolver 5 g de 8- Emplear dentro de los 60 días de preparado.
hidroxiquinolina en alcohol para obtener 100 ml.
Indofenol - acetato (SR) - (para la valoración
Hierro - fenol (SR) - (Reactivo Hierro-Kober) de Corticotrofina solución inyectable) - A 60 ml de
- Disolver 1,054 g de sulfato ferroso amónico en 20 Solución estándar de 2,6-diclorofenol-indofenol
ml de agua y agregar 1 ml de ácido sulfúrico y 1 ml (ver en Soluciones volumétricas) agregar agua hasta
de peróxido de hidrógeno al 30 %. Mezclar, calen- obtener 250 ml. Agregar a la solución resultante un
volumen igual de solución de acetato de sodio pre- Iodomercuriato de potasio alcalino (SR) -
parado recientemente al disolver 13,66 g de acetato (Reactivo de Nessler) - Disolver 10 g de ioduro de
de sodio anhidro en agua hasta obtener 500 ml y potasio en 10 ml de agua y agregar lentamente
ajustando con ácido acético 0,5 N a pH 7. Almace- agitando, una solución saturada de cloruro mercúri-
nar en un refrigerador y emplear dentro de las co hasta que un leve precipitado rojo permanezca
2 semanas de preparada. sin disolverse. A esta mezcla, agregar una solución
Iodo (SR) - Emplear Iodo 0,1 N (ver en Solu- de 30 g de hidróxido de potasio en 60 ml de agua
ciones volumétricas). previamente enfriada en baño de hielo luego agre-
gar 1 ml adicional de la solución saturada de cloru-
Iodobismutato de potasio (SR) - Disolver ro mercúrico. Diluir con agua a 200 ml. Dejar que
12,5 g de ácido tartárico en 25 ml de agua y luego el precipitado sedimente y extraer el líquido trans-
disolver 1,06 g de subnitrato de bismuto en esta parente. Una porción de 2 ml de este reactivo,
mezcla (Solución A). Disolver 20 g de ioduro de cuando se agrega a 100 ml de una solución (1 en
potasio en 25 ml de agua (Solución B). Disolver 300.000) de cloruro de amonio en agua libre de
100 g de ácido tartárico en 450 ml de agua (Solu- amoníaco, produce inmediatamente un color pardo
ción C). Agregar las Soluciones A y B a la Solución amarillento.
C y mezclar.
Iodoplatinato (SR) - Disolver 300 mg de clo-
Iodobismutato de potasio (SR1) - Disolver ruro platínico en 97 ml de agua. De inmediato
100 g de ácido tartárico en 400 ml de agua y agre- antes de usar, agregar 3,5 ml de ioduro de potasio
gar 8,5 g de subnitrato de bismuto. Agitar durante (SR) y mezclar.
1 hora, agregar 200 ml de una solución de ioduro de
potasio de 400 g por litro y agitar. Dejar en reposo Iodoplatinato de potasio (SR) - Disolver
durante 24 horas y filtrar. Conservar protegido de 200 mg de cloruro platínico en 2 ml de agua, mez-
la luz. clar con 25 ml de solución de ioduro de potasio (1
en 25) y agregar agua para obtener 50 ml.
Iodobismutato de potasio (SR2) - Suspender
1,7 g de subnitrato de bismuto y 20 g de ácido tartá- Ioduro cúprico alcalino (SR) - Disolver 7,5 g
rico en 40 ml de agua. Agregar 40 ml de una solu- de sulfato cúprico (CuSO4 . 5H2O) en aproximada-
mente 100 ml de agua. En un envase separado
ción de ioduro de potasio al 40 % u agitar durante
disolver 25g de carbonato de sodio anhidro, 20 g de
1 hora y filtrar. Conservar protegido de la luz.
bicarbonato de sodio y 25 g de tartrato de sodio y
Inmediatamente antes de su uso, mezclar 5 ml de
potasio en aproximadamente 600 ml de agua. Con
esta solución con 15 ml de agua.
agitación constante, agregar la solución de sulfato
Iodohidroxiquinoleinsulfonato sódico (SR) - cúprico al fondo de la solución de tartrato alcalino a
Disolver 8,8 g de ácido iodohidroxiquinoleín sulfó- través de un embudo que toca el fondo del envase.
nico en 200 ml de agua y agregar 6,5 ml de hidróxi- Agregar 1,5 g de ioduro de potasio, 200 g de sulfato
do de sodio 4 N. Diluir con agua a 250 ml, mezclar de sodio anhidro, 50 a 150 ml de iodato de potasio
y filtrar. 0,02 M y agua en cantidad suficiente para obtener
Iodo-ioduro de potasio (SR) - Disolver 1 litro.
500 mg de iodo y 1,5 g de ioduro de potasio en Ioduro de potasio (SR) - Disolver 16,5 g de
25 ml de agua. ioduro de potasio en agua para obtener 100 ml.
Iodo-ioduro de potasio (SR1) - A 10 ml de io- Almacenar en envases inactínicos.
do 0,05 N, agregar 0,6 g de ioduro de potasio y Ioduro de potasio y almidón (SR) - Disolver
diluir con agua a 1000 ml. [NOTA: Preparar en 0,75 g de ioduro de potasio en 100 ml de agua.
forma extemporánea]. Calentar a ebullición y agregar bajo agitación, una
Iodo-ioduro de potasio (SR2) - Disolver 2 g solución de 0,5 g de almidón soluble en 35 ml de
de iodo y 4 g de ioduro de potasio en 10 ml de agua. agua. Calentar a ebullición durante 2 minutosy
Cuando la solución este completamente diluida dejar enfriar.
completar a 100 ml con agua. Ioduro mercúrico (SR) - (Reactivo de Valser)
- Agregar lentamente solución de ioduro de potasio
(1 en 10) a ioduro mercúrico rojo hasta que este
Iodomercuriato de potasio (SR) - (Reactivo último se disuelva casi totalmente y filtrar el exce-
de Mayer) - Disolver 1,358 g de cloruro mercúrico so. Una solución que contiene 10 g de ioduro de
en 60 ml de agua. Disolver 5 g de ioduro de potasio potasio en 100 ml disuelve aproximadamente a 14 g
en 10 ml de agua. Mezclar las dos soluciones y de HgI2 a 20 °C.
diluir con agua a 100 ml.
Locke-Ringer (SR) - (Solución de Locke- 75 ml de agua en un envase con tapón de vidrio.
Ringer). Agregar 75 ml de ácido clorhídrico y 5 ml de cloro-
Cloruro de sodio 9,0 g formo y ajustar a un color de iodo débil (en el clo-
roformo) agregando ioduro de potasio diluido o
Cloruro de potasio 0,42 g solución de iodato de potasio. Si se libera demasia-
Cloruro de calcio 0,24 g do iodo, emplear al principio una solución más
fuerte de iodato de potasio que 0,01 M, haciendo el
Cloruro de magnesio 0,2 g ajuste final con iodato de potasio 0,01 M. Almace-
Bicarbonato de sodio 0,5 g nar en un sitio oscuro, y reajustar a un color de iodo
débil según sea necesario.
Dextrosa 0,5 g
1-Naftol (SR) - Disolver 1 g de 1-naftol en
Agua, recientemente destilada en un matraz de 25 ml de metanol. Preparar esta solución el día de
vidrio grueso, c.s.p. 1000 ml uso.
Preparar en el día de uso. Los componentes 2-Naftol (SR) - (Betanaftol (SR)) - Disolver
(excepto la dextrosa y el bicarbonato de sodio) 1 g de 2-naftol en 100 ml de solución de hidróxido
pueden prepararse como soluciones madre y diluir- de sodio (1 en 100).
se según sea necesario.
p-Naftolbenceína (SR) - Disolver 250 mg de
Mezcla de magnesia (SR) - Disolver 5,5 g de p-naftolbenceína en 100 ml de ácido acético glacial.
cloruro de magnesio y 7 g de cloruro de amonio en
65 ml de agua, agregar 35 ml de amoníaco (SR), Naranja de metilo (SR) - Disolver 100 mg de
dejar la mezcla aparte durante unos pocos días en naranja de metilo en 100 ml de agua y filtrar si
una botella de cierre perfecto y filtrar. Si la solu- fuera necesario.
ción no es transparente, filtrar antes de usar. Naranja de xilenol (SR) - Disolver 100 mg de
Molibdato de amonio (SR) - Disolver 6,5 g de naranja de xilenol en 100 ml de alcohol.
ácido molíbdico finamente pulverizado en una Negro de eriocromo (SR) - Disolver 200 mg
mezcla de 14 ml de agua y 14,5 ml de hidróxido de de negro de eriocromo T y 2 g de clorhidrato de
amonio. Enfriar la solución y agregarla lentamente, hidroxilamina en metanol para obtener 50 ml.
agitando, a una mezcla enfriada de 32 ml de ácido
nítrico y 40ml de agua. Dejar reposar durante Ninhidrina (SR) - (Tricetohidrindeno mono-
48 horas y filtrar a través de un crisol de vidrio hidrato (SR)) - Disolver 200 mg de ninhidrina en
sinterizado de porosidad fina. Esta solución se agua para obtener 10 ml. Preparar esta solución
deteriora con el tiempo y no es apropiada para su antes de usar.
empleo si luego del agregado de 2 ml de fosfato Ninhidrina (SR1) - Disolver 1 g de ninhidrina
dibásico de sodio (SR) a 5 ml de la solución, no se en 50 ml de alcohol y agregar 10 ml de ácido acéti-
forma un precipitado amarillo abundante inmedia- co glacial.
tamente o luego de un calentamiento suave. Alma-
Nitrato cérico amónico (SR) - Disolver 6,25 g
cenarlo en la oscuridad. Si se forma un precipitado
de nitrato cérico amónico en 10 ml de ácido nítrico
durante el almacenamiento, emplear solo la solu-
0,25 N. Emplear dentro de los 3 días de preparada.
ción sobrenadante transparente.
Nitrato de bario (SR) - Disolver 6,5 g de nitra-
Molibato de amonio (SR1) - Disolver en ca-
to de bario en agua para obtener 100 ml.
liente 5,0 g de molibdato de amonio en 30 ml de
agua y dejar enfriar. Ajustar el pH a 7,0 con amon- Nitrato de plata (SR) - Emplear Nitrato de pla-
íaco diluido y diluir con agua a 50 ml. ta 0,1 N (ver Soluciones volumétricas).
Molibdovanádico (SR) - En un vaso de Nitrato de plata amoniacal (SR) - Disolver
150 ml, mezclar 4,0 g de molibdato de amonio 1 g de nitrato de plata en 20 ml de agua. Agregar
finamente pulverizado y 100 mg de vanadato de amoníaco (SR), gota a gota, agitando constantemen-
amonio finamente pulverizado. Agregar 70 ml de te, hasta que el precipitado casi se disuelva pero no
agua y triturar las partículas con una varilla de vi- completamente. Filtrar y almacenar en envases de
drio. Luego de unos minutos, se obtiene una solu- material inactínico, de cierre perfecto.
ción transparente. Agregar 20 ml de ácido nítrico y
Nitrato de torio (SR) - Disolver 1 g de nitrato
diluir a 100 ml con agua.
de torio en agua para obtener 100 ml. Filtrar, si
Monocloruro de iodo (SR) - Disolver 10 g de fuera necesario.
ioduro de potasio y 6,44 g de iodato de potasio en
Nitrato mercúrico (SR) - Disolver 40 g de 750 mg de ioduro de potasio en 5 ml de agua. Lue-
óxido mercúrico (rojo o amarillo) en una mezcla de go agregar 2 g de cloruro de cinc disuelto en 10 ml
32 ml de ácido nítrico y 15 ml de agua. Almacenar de agua y mientras continúa la ebullición agregar,
en envases de vidrio inactínico. con agitación, una suspensión homogénea de 5 g de
Nitrato mercurioso (SR) - Disolver 15 g de ni- almidón soluble en 30 ml de agua fría. Continuar
trato mercurioso en una mezcla de 90 ml de agua y calentando a ebullición durante 2 minutos luego
10 ml de ácido nítrico diluido. Almacenar en bote- enfriar. Almacenar en envases bien cerrados en un
llas de material inactínico en las cuales se ha colo- sitio frío.
cado un glóbulo pequeño de mercurio. La pasta de ioduro-almidón (SR) debe mostrar
una línea azul definida cuando una varilla de vidrio,
p-Nitroanilina (SR) - A 350 mg de p- sumergida en una mezcla de 1 ml de nitrito de sodio
nitroanilina, agregar 1,5 ml de ácido clorhídrico y 0,1 M, 500 ml de agua y 10 ml de ácido clorhídrico,
mezclar. Diluir con agua a 50 ml, mezclar y dejar se pasa sobre un extendido de la pasta.
sedimentar. Colocar 5 ml del líquido claro sobre-
nadante en un matraz aforado de 100 ml y sumer- Perclorato de metiltionina (SR) - A 500 ml de
girlo en un baño de hielo. Mientras está en el baño una solución de perclorato de potasio (1 en 1.000),
de hielo, agregar 1 ml de ácido clorhídrico luego agregar, gota a gota, agitando constantemente, solu-
agregar, en pequeñas porciones, 2 ml de solución de ción de azul de metileno (1 en 100) hasta observar
nitrito de sodio (1 en 100), completar a volumen una leve turbidez permanente. Dejar que el precipi-
con agua y mezclar. tado sedimente, decantar el líquido sobrenadante a
través de papel y emplear solo la solución transpa-
Nitrobenzaldehído (SR) - A 10 ml de solución rente.
diluida de hidróxido de sodio, agregar 0,12 g de
nitrobenzaldehído triturado. Dejar en reposo, con Penicilasa (SR) - Transferir 10 g de caseína
agitación frecuente durante 10 minutos y filtrar. hidrolizada, 2,72 g de fosfato dihidrogenado de
Preparar en el momento de su uso. potasio y 5,88 g de citrato de sodio a un matraz de
1 litro, agregar 200 ml de agua, ajustar a pH 7,2 con
Nitrofenantrolina (SR) - Disolver 150 mg de hidróxido de sodio al 20 % y completar a volumen
5-nitro-1,10-fenantrolina en 15 ml de solución de con agua. Disolver 0,41 g de sulfato de magnesio
sulfato ferroso recientemente preparada (1 en 140). en 5 ml de agua y agregar 1 ml de una solución de
Nitroferricianuro sódico (SR) - Disolver 1 g 1,6 mg de sulfato ferroso amónico por ml y diluir a
de nitroferricianuro sódico en agua para obtener 10 ml con agua. Esterilizar ambas soluciones en
20 ml. Preparar esta solución antes de usar. autoclave, enfriar, mezclar, distribuir en sendos
erlenmeyer formando capas poco profundas y sem-
Ortofenantrolina (SR) - Disolver 150 mg de brar Bacillus cereus (ATCC 9946). Dejar en reposo
ortofenantrolina en 10 ml de una solución de sulfato a una temperatura comprendida entre 18 y 37 ºC
ferroso, preparada mediante disolución de 700 mg hasta obtener crecimiento y luego mantener a una
de cristales claros de sulfato ferroso en 100 ml de temperatura comprendida entre 35 y 37 ºC durante
agua. La solución de sulfato ferroso debe estar 16 horas, en constante agitación para asegurar la
preparada inmediatamente antes de disolver la orto- aireación. Centrifugar y esterilizar el líquido sobre-
fenantrolina. Almacenar en envases bien cerrados. nadante por filtración por membrana. Cada ml debe
Oxalato de amonio (SR) - Disolver 3,5 g de contener no más de 0,4 microkatal (correspondien-
oxalato de amonio en agua para obtener 100 ml. tes a una hidrólisis de por lo menos 500 mg de
bencilpenicilina en ácido bencilpeniciloico por
Óxido cúprico amoniacal (SR) - (Reactivo de hora) a 30 ºC y a pH 7, siempre que la concentra-
Schweitzer) - Disolver 10 g de sulfato cúprico en ción de bencilpenicilina no descienda por debajo
100 ml de agua, agregar suficiente solución de del nivel necesario para alcanzar la saturación en-
hidróxido de sodio (1 en 5) hasta precipitar el zimática. La constante de Michaelis para la bencil-
hidróxido de cobre, recolectar este último en un penicilina, de la penicilinasa presente en la solución
filtro y lavarlo con agua fría exenta de sulfato.
debe ser aproximadamente 12 Pg por ml. Conser-
Disolver el precipitado, que debe mantenerse
var a una temperatura comprendida entre 0 y 2 ºC y
húmedo durante todo el procedimiento, en la canti-
emplear en un período menor a 3 días. En forma
dad mínima de amoníaco (SR) necesaria para diso-
liofilizada y en ampollas selladas, puede conservar-
lución completa.
se durante varios meses.
Pasta de ioduro-almidón (SR) - Calentar Ensayo de esterilidad <370> - Debe cumplir
100 ml de agua en un vaso de precipitados de con este requisito.
250 ml hasta ebullición, agregar una solución de
Periodato de sodio (SR) - Disolver 1,07 g de nes deben prepararse en el momento y mezclar
periodato de sodio en agua, agregar 5 ml de ácido inmediatamente antes de usar.
sulfúrico diluido y diluir a 100 ml con agua.
Platino-cobalto (SR) - Disolver 1,246 g de clo-
[NOTA: preparar esta solución antes de su empleo].
roplatinato de potasio (K2PtCl6) y 1,000 g de cloru-
Permanganato de potasio (SR) - Emplear ro de cobalto (CoCl2 . 6H2O) en agua, agregar
Permanganato de potasio 0,1 N (ver Soluciones 100 ml de ácido clorhídrico y diluir con agua a
volumétricas). 1 litro.
Peróxido de hidrógeno (SR) - Emplear Agua Polisulfuro de amonio (SR) - Líquido amari-
oxigenada. llo, preparado saturando el sulfuro de amonio (SR)
Peróxido de hidrógeno al 3 % (SR) - H2O2 - con azufre.
(PM: 34,0) - Contiene no menos de 2,5 %p/p y no Púrpura de bromocresol (SR) - Disolver
más de 3,5 % p/p de H2O2. Un volumen de esta 250 mg de púrpura de bromocresol en 20 ml de
solución corresponde a unas 10 veces su volumen hidróxido de sodio 0,05 N y diluir con agua a
de oxígeno. Se puede agregar un estabilizante 250 ml.
apropiado. Púrpura de bromocresol (SR1) - Disolver
Peróxido de hidrógeno al 30 % (SR) - H2O2 - 50 mg de púrpura de bromocresol en 0,92 ml de
(PM: 34,0) - Contiene no menos de 29 %p/p y no hidróxido de sodio 0,1 N y 20 ml de alcohol. Diluir
más de 31 % p/p de H2O2. Un volumen de esta con agua a 100 ml.
solución corresponde a unas 11 veces su volumen Sensibilidad - A 0,2 ml de púrpura e bromocre-
de oxígeno. Se puede agregar un estabilizante sol, agregar 100 ml de agua libre de dióxido de
apropiado. carbono y 0,05 ml de hidróxido e sodio 0,02 N. La
solución es azul violeta. El viraje del indicador al
Picrato alcalino (SR) - Mezclar 20 ml de solu-
ción de trinitrofenol (1 en 100) con 10 ml de solu- amarillo o debe consumir más de 0,2 ml de ácido
ción de hidróxido de sodio (1 en 20), diluir con clorhídrico 0,2 M.
Zona de viraje - De pH 5,2 (amarillo) a pH 6,8
agua a 100 ml y mezclar. Emplear dentro de los
(azul violeta).
2 días de preparado.
Piridilazonaftol (SR) - Preparar una solución Púrpura de m-cresol (SR) - Disolver 100 mg
de 1 g de piridilazonaftol en 1 litro de alcohol. de púrpura de metacresol en 13 ml de hidróxido de
sodio 0,01 N, diluir con agua a 100 ml y mezclar.
Sensibilidad - A 50 ml de agua, agregar 10 ml
de solución reguladora de acetato (SR1), 0,10 ml de Púrpura de metilo (SR) - Ver Rojo de metilo-
edetato disódico 0,02 M y 0,25 ml de piridilazonaf- azul de metileno (SR).
tol (SR). Agregar 0,15 ml de una solución de sulfa- Quinona (SR) - Disolver 500 mg de p-
to de cobre de 5 g por litro: el color debe virar de
benzoquinona en 2,5 ml de ácido acético glacial y
amarillo pálido a violeta.
diluir con alcohol a 50 ml. Preparar esta solución
Piridina-pirazolona (SR) - A 100 ml de una antes de usar.
solución saturada de 1-fenil-3-metil-2-pirazolin-5- Reactivo de Biuret - Disolver 1,5 g de sulfato
ona, agregar 20 ml de una solución (1 en 1000) de cúprico y 6,0 g de tartrato de sodio y potasio en
3,31-dimetil-1,11-difenil-[4,41-bi-2-pirazolina]- 500 ml de agua en un matraz aforado de 1 litro.
5,51-diona en piridina. Almacenar en una botella Agregar 300 ml de solución de hidróxido de sodio
de material inactínico y emplear dentro de los 3 días libre de carbonato (1 en 10), diluir con solución de
de preparada. hidróxido de sodio libre de carbonato (1 en 10) a 1
Piroantimoniato de potasio (SR) - Disolver litro y mezclar.
2 g de piroantimoniato de potasio en 95 ml de agua Reactivo de Denigès -Ver Sulfato mercúri-
caliente. Enfriar rápidamente, agregar una solución co(SR).
que contenga 2,5 g de hidróxido de potasio en 50
ml de agua y 1 ml de solución de hidróxido de so- Reactivo de Mayer - Ver Iodomercuriato de
dio (8,5 en 100). Dejar reposar durante 24 horas, potasio (SR).
filtrar y diluir con agua a 150 ml. Reactivo de Millon - Transferir 2 ml de mercu-
Pirogalol alcalino (SR) - Disolver 500 mg de rio a un erlenmeyer, agregar 20 ml de ácido nítrico.
pirogalol en 2 ml de agua. Disolver 12 g de Agitar el erlenmeyer bajo una campana extractora
hidróxido de potasio en 8 ml de agua. Las solucio- para deshacer el mercurio en glóbulos pequeños.
Luego de aproximadamente 10 minutos, agregar
35 ml de agua y, si aparece un precipitado o crista- de ácido clorhídrico 0,02 M. La solución es roja.
les, agregar ácido nítrico diluido suficiente (1 en 5, El viraje del indicador al amarillo no requiere más
preparado a partir de ácido nítrico al que se le hayan de 0,1ml de hidróxido de sodio 0,02 M.
retirado los óxidos haciendo pasar aire a través de él
Rojo de metilo-azul de metileno (SR) -
hasta que se torne incoloro) para disolver el sólido
(Púrpura de metilo (SR)) - Agregar 10 ml de rojo
separado. Agregar solución de hidróxido de sodio
de metilo (SR) a 10 ml de azul de metileno (SR) y
(1 en 10) gota a gota, mezclando minuciosamente,
mezclar.
hasta que el precipitado grumoso que se forma
luego del agregado de cada gota ya no se redisuelve Rojo de metilo metanólico (SR) - Disolver 1 g
pero se dispersa para formar una suspensión. Agre- de rojo de metilo en 100 ml de metanol y filtrar, si
gar 5 ml adicionales de ácido nítrico diluido y mez- fuera necesario. Almacenar en envases inactínicos
clar. Preparar esta solución al momento de usar. y emplear dentro de los 21 días de preparado.
Reactivo de Nessler - Ver Iodomercuriato de Rojo de quinaldina (SR) - Disolver 100 mg de
potasio alcalino (SR). rojo de quinaldina en 100 ml de alcohol.
Reactivo de Schweitzer - Ver Óxido cúprico Rojo de rutenio (SR) - Disolver 10 g de aceta-
amoniacal (SR). to de plomo en agua, diluir con agua a 100 ml y
agregar 80 mg de rojo de rutenio. La solución es de
Reineckato de amonio (SR) - Agitar aproxi-
color rojo-vino. [NOTA: si fuera necesario, agregar
madamente 500 mg de reineckato de amonio con
rojo de rutenio adicional para obtener un color rojo-
20 ml de agua con frecuencia durante 1 hora y fil-
vino.]
trar. Emplear dentro de los 2 días de preparado.
Rojo neutro (SR) - Disolver 100 mg de rojo
Resorcinol (SR) - Disolver 1 g de resorcinol en
neutro en 100 ml de alcohol al 50 %.
ácido clorhídrico para obtener 100 ml.
Salicilato de hierro (SR) - Disolver 500 mg de
Rojo congo (SR) - Disolver 500 mg de rojo
sulfato férrico amónico en 250 ml de agua que
congo en una mezcla de 10 ml de alcohol y 90 ml
contiene 10 ml de ácido sulfúrico diluido y agregar
de agua.
agua para obtener 500 ml. A 100 ml de la solución
Rojo cresol (SR) - Triturar 100 mg de rojo cre- resultante agregar 50 ml de una solución de salicila-
sol en un mortero con 26,2 ml de hidróxido de so- to de sodio al 1,15%, 20 ml de ácido acético diluido
dio 0,01N hasta disolución completa luego diluir la y 80 ml de una solución de acetato de sodio al
solución con agua a 250 ml. 13,6 %, luego agregar agua hasta obtener 500 ml.
Almacenar en un envase inactínico de cierre perfec-
Rojo cresol - azul de timol (SR) - Agregar
15 ml de azul de timol (SR) a 5 ml de rojo cresol to. Emplear dentro de las dos semanas de prepara-
(SR) y mezclar. da.
Solución cupri-tartárica (SR) - Ver Tartrato
Rojo de fenol (SR) - (Fenolsulfoftaleína (SR))
cúprico alcalino (SR).
- Disolver 100 mg de fenolsulfoftaleína en 100 ml
de alcohol y filtrar si fuera necesario. Solución de Fehling - Ver Tartrato cúprico al-
calino (SR).
Rojo de fenol (SR1) – Disolver 25 mg de sulfa-
to de amonio en 235 ml de agua y agregar 105 ml Solución de Locke - Ringer - Ver Locke -
de hidróxido de sodio diluido y 135 ml de ácido Ringer (SR).
acético diluido. Agregar 25 ml de una solución
Solución estándar de plomo - Ver <590>.
preparada disolviendo 30 mg de rojo de fenol en
Límite de metales pesados.
1,5 ml de hidróxido de sodio diluido y completando
a volumen de 100 ml con agua. Solución fisiológica (SR) - Disolver 9,0 g de
cloruro de sodio en agua para obtener 1 litro.
Rojo de metilo (SR) - Disolver 100 mg de rojo
[NOTA: cuando en este compendio se especifica
de metilo en 100 ml de alcohol y filtrar si fuera
Solución fisiológica libre de piretógenos (SR), se
necesario.
empleará solución fisiológica (SR) que cumpla con
Rojo de metilo (SR 1) - Disolver 50 mg de rojo los requisitos de <340>. Ensayo de piretógenos.]
de metilo en una mezcla de 1,86 ml de hidróxido de
Solución fisiológica libre de piretógenos (SR)
sodio 0,1 M y de 50 ml de alcohol. Diluir a 100 ml
- Ver Solución fisiológica (SR).
con agua.
Ensayo de sensibilidad - A 0,1 ml de solución Solución fuerte de 1-naftol (SR) - Disolver
de rojo de metilo, agregar 100 ml de agua y 0,05 ml 1 g de 1-naftol en una solución de 6 g de hidróxido
de sodio y 16 g de carbonato de sodio anhidro en Subacetato de plomo diluido (SR) - Diluir
100 ml de agua. 3,25 ml de subacetato de plomo (SR) con agua,
Solución de Lugol (SR) - Disolver 5 g de iodo recientemente hervida y enfriada, para obtener
100 ml. Almacenar en envases pequeños, comple-
y 10 g de ioduro de potasio en 100 ml de agua.
tamente llenos, de cierre perfecto.
Solución reguladora de acetato (SR) - Disol-
ver 320 g de acetato de amonio en 500 ml de agua, Sudán III (SR) - Disolver 50 mg de sudán III
agregar 5 ml de ácido acético glacial, diluir con en 25 ml de alcohol, calentando si fuera necesario.
Enfriar, agregar 25 ml de glicerina, y mezclar.
agua a 1 litro y mezclar. Esta solución tiene un pH
Filtrar si queda material sin disolver.
entre 5,9 y 6,0.
Solución reguladora de acetato (SR1) - Di- Sudán IV (SR) - Disolver 500 mg de sudán IV
solver 136 g de acetato de sodio y 77 g de acetato en cloroformo para obtener 100 ml.
de amonio en 100 ml de agua, agregar 250 ml de Sulfanílico - 1-naftilamina (SR) - Disolver
ácido acético glacial y mezclar. Esta solución tiene 500 mg de ácido sulfanílico en 150 ml de ácido
un pH de aproximadamente 4,4. acético. Disolver 100 mg de clorhidrato de
Solución reguladora de acetato (SR2) - Di- 1-naftilamina en 150 ml de ácido acético y mezclar
las dos soluciones. El color rosado, que se puede
solver 77,1 g de acetato de amonio en agua, agregar
desarrollar al dejar reposar la solución, puede ser
70 ml de ácido acético glacial y diluir con agua a 1
eliminado por tratamiento con cinc.
litro. Esta solución tiene un pH de aproximadamen-
te 4,5. Sulfato cúprico (SR) - Disolver 12,5 g de sul-
fato cúprico en agua para obtener 100 ml.
Solución reguladora de ácido acético-acetato
de amonio (SR) - Disolver 77,1 g de acetato de Sulfato de amonio cúprico (SR) - A sulfato
amonio en agua, agregar 57 ml de ácido acético cúprico (SR) agregar amoníaco (SR), gota a gota,
glacial y diluir con agua a 1 litro. hasta que el precipitado formado al principio se
disuelva casi totalmente pero no completamente.
Solución reguladora de amoníaco cloruro de
Dejar sedimentar y decantar la solución transparen-
amonio (SR) - Disolver 67,5 g de cloruro de amo-
te. Preparar esta solución el día de uso.
nio en agua, agregar 570 ml de hidróxido de amonio
y diluir con agua a 1 litro. Sulfato de calcio (SR) - Una solución saturada
de sulfato de calcio en agua.
Solución reguladora de barbital pH 8,4 (SR) -
Disolver 8,25 g de barbital sódico en agua y diluir a Sulfato de magnesio (SR) - Disolver 12 g de
1 litro con el mismo solvente. cristales de sulfato de magnesio, seleccionados por
la ausencia de fluorescencia, en agua para obtener
Solución reguladora de barbital pH 8,6 (SR) -
100 ml.
Disolver 1,38 g de barbital, 8,76 g de barbital sódi-
co y 0,38 g de lactato de calcio en agua y diluir a Sulfato de potasio (SR) - Disolver 1 g de sul-
1 litro con el mismo solvente. fato de potasio en agua para obtener 100 ml.
Solución reguladora fosfato salina Sulfato férrico amónico (SR) - Disolver 8 g de
pH 7,4 (SR) - Disolver 2,38 g de Na2HPO4, 0,19 g sulfato férrico amónico en agua para obtener
de KH2PO4 y 8,0 g de ClNa en H2O. Diluir a 100 ml.
1 litro con el mismo solvente y ajustar a pH 7,4 si Sulfato ferroso (SR) - Disolver 8 g de cristales
es necesario. transparentes de sulfato ferroso en aproximadamen-
Subacetato de plomo (SR) - Triturar 14 g de te 100 ml de agua recientemente hervida y comple-
monóxido de plomo con 10 ml de agua hasta obte- tamente enfriada. Preparar esta solución antes de
ner una pasta suave y transferir la mezcla a una usar.
botella, empleando 10 ml de agua adicionales para Sulfato ferroso ácido (SR) - Disolver 7 g de
lavar. Disolver 22 g de acetato de plomo en 70 ml cristales de sulfato ferroso en 90 ml de agua recien-
de agua y agregar la solución a la mezcla de óxido temente hervida y completamente enfriada y agre-
de plomo. Agitar vigorosamente durante 5 minutos gar ácido sulfúrico para obtener 100 ml. Preparar
y luego agitar con frecuencia durante 7 días. Fi- esta solución antes de usar.
nalmente filtrar, y agregar suficiente agua reciente-
mente hervida a través del filtro hasta obtener Sulfato mercúrico (SR) - (Reactivo de De-
100 ml. nigès) Mezclar 5 g de óxido mercúrico amarillo con
40 ml de agua, y agregar lentamente, con agitación,
20 ml de ácido sulfúrico agitando luego agregar
otros 40 ml de agua y agitar hasta disolución com- tener 200 ml. Si fuera necesario, agitar durante
pleta. 5 minutos con 1 g de óxido de aluminio hidratado
Sulfuro de amonio (SR) - Saturar amoníaco recientemente preparado y filtrar para clarificar.
(SR) con sulfuro de hidrógeno y agregar dos tercios Tetraiodomercurato de potasio alcalino (SR)
de su volumen de amoníaco (SR). Residuo de igni- - Disolver 11 g de ioduro de potasio y 15 g de
ción: no más de 0,05 %. La solución no se enturbia ioduro mercúrico en agua y diluir a 100 ml con el
o por sulfato de magnesio (SR) o por cloruro de mismo solvente. Mezclar esta solución con una
calcio (SR) (carbonato). Esta solución no es apro- solución de 250 mg de hidróxido de sodio por ml
piada para usar si se forma un precipitado abundan- (1:1). [NOTA: Preparar esta solución en el momen-
te de azufre. Almacenarlo en pequeñas botellas de to de su empleo.]
vidrio inactínico, completamente llenas, en un sitio
Timolftaleína (SR) - Disolver 100 mg de ti-
frío y oscuro.
molftaleína en 100 ml de alcohol y filtrar, si fuera
Sulfuro de hidrógeno (SR) - Una solución sa- necesario.
turada de sulfuro de hidrógeno, preparada haciendo
Tioacetamida (SR) - Disolver 4 g de tioaceta-
pasar H2S a través de agua fría. Almacenarlo en
mida en 100 ml de agua.
botellas pequeñas de material inactínico, completa-
mente llenas. No es apropiado a menos que posea Tioacetamida-glicerina básica (SR) - Mezclar
un olor fuerte a H2S y que produzca inmediatamen- 0,2 ml de tioacetamida (SR) y 1 ml de glicerina
te un precipitado copioso de sulfuro cuando se básica (SR) y calentar en un baño de agua a ebulli-
agrega a un volumen igual de cloruro férrico (SR). ción durante 20 segundos. Emplear la mezcla in-
Almacenar en un sitio frío y oscuro. mediatamente.
Sulfuro de sodio (SR) - Disolver 1 g de sulfuro Tiocianato de amonio (SR) - Disolver 8 g de
de sodio en agua para obtener 10 ml. Preparar esta tiocianato de amonio en agua para obtener 100 ml.
solución antes de usar. Tiocianato mercúrico amónico (SR) - Disol-
Sulfuro de sodio (SR1) - Disolver en caliente ver 30 g de tiocianato de amonio y 27 g de cloruro
12 g de sulfuro de sodio en 45 ml de una mezcla de mercúrico en agua para obtener 1 litro.
glicerina al 85 % p/p y agua (29:10). Dejar enfriar Tioglicolato de sodio (SR) - Disolver 1,5 g de
y diluir a 100 ml con la misma mezcla de solventes. tioglicolato de sodio en 450 ml de agua y agregar
La solución debe ser incolora. 50 ml de alcohol. Emplear dentro de los 3 días de
Tartrato cúprico alcalino (SR) - (Solución de preparado.
Fehling) - Solución de cobre (A) - Disolver Tiosulfato de sodio (SR) - Emplear Tiosulfato
34,66 g de cristales pequeños, cuidadosamente de sodio 0,1 N (ver Soluciones volumétricas).
seleccionados de sulfato cúprico, que no presenten
trazas de fluorescencia por humedad adherida, en Tornasol (SR) - Digerir 25 g de tornasol en
agua para obtener 500 ml. Almacenar esta solución polvo con tres porciones sucesivas de 100 ml de
en envases pequeños, de cierre perfecto. Solución alcohol hirviendo, continuando cada extracción
de tartrato alcalino (B) - Disolver 173 g de tartrato durante aproximadamente 1 hora. Filtrar, lavar con
de sodio y potasio cristalizado y 50 g de hidróxido alcohol y descartar el filtrado alcohólico. Macerar
de sodio en agua para obtener 500 ml. Almacenar el residuo con aproximadamente 25 ml de agua fría
esta solución en envases pequeños resistentes a los durante 4 horas, filtrar y descartar el filtrado. Fi-
álcalis. Para usar, mezclar volúmenes exactamente nalmente digerir el residuo con 125 ml de agua
iguales de Soluciones A y B en el momento requeri- hirviendo durante 1 hora, enfriar y filtrar.
do. Tricetohidrindeno monohidrato (SR) - Ver
Tartrato de sodio (SR) - Disolver 11,5 g de Ninhidrina (SR).
tartrato de sodio en agua para obtener 100 ml. Tricloruro de antimonio (SR) - Disolver 20 g
Tetrabromofenolftaleinato de etilo (SR) - Di- de tricloruro de antimonio en cloroformo hasta
solver 100 mg de tetrabromofenolftaleinato de etilo obtener 100 ml. Filtrar si fuera necesario.
en 90 ml de ácido acético glacial y diluir con ácido Tricloruro de titanio (SR) - Disolver 15 g de
acético glacial a 100 ml. Preparar esta solución tricloruro de titanio en 100 ml de solución de ácido
antes de usar. clorhídrico al 10 %.
Tetrafenilborato de sodio (SR) - Disolver Tricloruro de titanio-ácido sulfúrico (SR) -
1,2 g de tetrafenilborato de sodio en agua para ob- Mezclar con cuidado 20 ml de tricloruro de titanio
(SR) en 13 ml de ácido sulfúrico. Agregar peróxido todos los cálculos cuando se empleen dichas solu-
de hidrógeno al 30 % en cantidad suficiente para ciones empíricas. Si se desea, una solución prepa-
producir una coloración amarilla. Calentar hasta rada empíricamente puede diluirse hasta una norma-
que se desprendan gases, dejar enfriar y diluir con lidad determinada siempre que sea lo suficiente-
agua. Repetir la evaporación y la adición de agua mente concentrada para ser diluida.
hasta que se obtenga una solución incolora. Diluir Todas las soluciones volumétricas, obtenidas ya
con agua a 100 ml. sea por disolución directa o por dilución de una
Trinitrofenol (SR) - (Ácido pícrico (SR)) - Di- solución más concentrada, deben mezclarse perfec-
solver el equivalente a 1 g de trinitrofenol anhidro tamente por agitación antes de la normalización.
Debido a que la concentración de una solución
en 100 ml de agua caliente. Enfriar la solución y
estándar puede cambiar con el tiempo, el factor
filtrar, si fuera necesario.
debe determinarse nuevamente con frecuencia.
Vanadato de amonio (SR) - Disolver 2,5 g de Cuando se emplean soluciones de un reactivo en
vanadato de amonio en 500 ml de agua hirviendo, diversas normalidades, los detalles de la prepara-
enfriar y agregar 20 ml de ácido nítrico. Mezclar, ción y estandarización se dan generalmente para la
enfriar y agregar agua para obtener 1 litro. Alma- normalidad que se emplea más frecuentemente. Las
cenar en envases de polietileno. soluciones más concentradas o más diluidas se
Verde de bromocresol (SR) - Disolver 50 mg preparan y estandarizan de la misma manera gene-
de verde de bromocresol en 100 ml de alcohol y ral según se describe, empleando cantidades pro-
filtrar si fuera necesario. porcionales del reactivo. Es posible en muchos
casos, preparar las soluciones de menor normalidad
Verde de bromocresol (SR1) - Disolver 50 mg exactamente por dilución de una solución más con-
de verde de bromocresol en 0,72 ml de hidróxido de centrada. Las soluciones volumétricas preparadas
sodio 0,1 N y 20 ml de alcohol. Completar a por dilución se deben estandarizar nuevamente
100 ml con agua. según se indica para la solución más concentrada o
Ensayo de sensibilidad - A 0,2 ml de solución comparando con otra solución volumétrica que
de verde de bromocresol, agregar 100 ml de agua posea una relación conocida con la solución de
libre de dióxido de carbono: la solución debe ser mayor concentración.
azul. El cambio de color del indicar al amarillo no Las soluciones diluidas que no son estables,
debe requerir más de 0,2 ml de ácido clorhídrico como por ej., permanganato de potasio 0,01 N o
0,02 M. tiosulfato de sodio diluido, son preferentemente
Verde de malaquita (SR) - Disolver 1 g de preparadas al diluir exactamente la normalidad
verde de malaquita oxalato en 100 ml de ácido mayor con agua previamente hervida y enfriada.
acético glacial. Determinaciones con blancos - Cuando se in-
Violeta de metilo (SR) - Ver Cristal violeta dica que se debe hacer las correcciones necesarias
(SR). por medio de una determinación con un blanco, la
determinación se hará con las mismas cantidades de
SOLUCIONES VOLUMÉTRICAS (SV) los mismos reactivos tratados de la misma manera
Soluciones normales - Las soluciones norma- de la solución o mezcla que contenga la porción de
les son soluciones que contienen el peso equivalen- la sustancia en análisis, pero omitiendo dicha sus-
te a 1 gramo de la sustancia activa en cada 1 litro de tancia. En todas las valoraciones volumétricas de la
solución; esto es, una cantidad equivalente a Farmacopea deberán hacerse correcciones apropia-
1,0079 gramos de hidrógeno o 7,9997 gramos de das debidas a la determinación del blanco (ver 780.
oxígeno. Volumetría).
En todas las valoraciones de la Farmacopea de
Soluciones molares - Las soluciones molares
naturaleza volumétrica se indica el peso de la sus-
son soluciones que contienen, en 1 litro, 1 molécula
tancia en análisis equivalente a cada ml de la solu-
gramo de reactivo. Por ej., cada litro de una solu-
ción volumétrica primaria. En general, estos equi-
ción molar de ácido sulfúrico contiene 98,07 gra-
valentes pueden obtenerse por cálculos sencillos a
mos de H2SO4.
partir de los datos proporcionados en fórmulas y
Soluciones empíricas - Con frecuencia es difí- pesos moleculares.
cil preparar soluciones estándar de una normalidad
teórica deseada. Una solución de aproximadamente
la normalidad deseada, se prepara y estandariza por
titulación contra una solución de estándar primario.
El factor de normalidad obtenido se emplea en
PREPARACIÓN Y MÉTODOS DE HCl - (PM: 36,5)
ESTANDARIZACIÓN DE SOLUCIONES 18,23 g en 1 litro.
VOLUMÉTRICAS Agregar lentamente a un matraz aforado de 1 li-
A continuación se indica sólo un método para tro que contenga 40 ml de agua,. Enfriar y comple-
estandarizar pero pueden emplearse otros métodos tar a volumen con metanol. Estandarizar la solu-
de normalización, capaces de proporcionar al me- ción del siguiente modo.
nos el mismo grado de exactitud. Los valores obte- Pesar exactamente alrededor de 2,5 g de trome-
nidos en la estandarización de soluciones volumé- tamina, previamente secada a 105 ºC durante
tricas son válidos para todos los usos farmacopeicos 3 horas. Proceder según se indica en Ácido Clorhí-
de estas soluciones, independientemente del instru- drico 1 N, comenzando donde dice: “Disolver en
mental o indicadores químicos empleados en las 50 ml de agua...”.
monografías correspondientes. Cuando la normali- Ácido oxálico 0,1 N
dad o molaridad aparente de una solución titulante
H2C2O4 . 2H2O - (PM: 126,1)
depende de las condiciones especiales del uso, la
6,303 g en 1 litro.
monografía correspondiente establece las indicacio-
Disolver 6,45 g de ácido oxálico en agua hasta
nes para estandarizar el reactivo en el contexto
obtener 1 litro. Estandarizar mediante titulación
especificado. Para aquellas sales que pueden obte-
contra permanganato de potasio 0,1 N (SV) recien-
nerse como estándar primarios certificados o alta- temente estandarizado según se indica en Perman-
mente purificadas, se acepta preparar las soluciones ganato de potasio 0,1 N.
pesando exactamente una cantidad apropiada de sal
Almacenar en botellas de material inactínico
y disolviendo para producir un volumen específico
con tapón de vidrio.
de solución de concentración conocida. Los ácidos
acético, clorhídrico y sulfúrico pueden estandarizar- Ácido perclórico 0,1 N en ácido acético gla-
se contra una solución de hidróxido de sodio recien- cial
temente estandarizada contra un estándar primario HClO4 - (PM: 100,5)
certificado. 10,05 g en 1 litro.
Cuando es posible, todas las soluciones volumé- [NOTA: cuando en los ensayos y valoraciones
tricas son preparadas, estandarizadas y empleadas a se requiere esta solución volumétrica, se especifica
la temperatura estándar de 25 (C. Si la titulación como ácido perclórico 0,1 N. Por lo tanto, cuando
se lleva a cabo con una solución volumétrica a una se especifica 0,1 N u otra concentración de esta
temperatura marcadamente diferente, estandarizar solución volumétrica, se empleará la solución en
la solución volumétrica empleada como solución ácido acético glacial, a menos que se declaren las
titulante a esa temperatura diferente o hacer una palabras en dioxano (Ver también Ácido perclórico
corrección apropiada de temperatura. 0,1 N en dioxano).]
Ácido acético 2 N Mezclar 8,5 ml de ácido perclórico con 500 ml
de ácido acético glacial y 21 ml de anhídrido acéti-
C2H4O2 - (PM: 60,1) co, enfriar y agregar ácido acético glacial hasta
120,10 g en 1 litro. obtener 1 litro. Alternativamente, la solución puede
Agregar 116 ml de ácido acético glacial a un vo- prepararse del siguiente modo. Mezclar 11 ml de
lumen suficiente de agua, enfriar a temperatura ácido perclórico al 60 % con 500 ml de ácido acéti-
ambiente y diluir con agua a 1 litro. co glacial y 30 ml de anhídrido acético, enfriar y
Ácido clorhídrico 1 N agregar ácido acético glacial hasta obtener 1 litro.
Dejar reposar la solución preparada durante
HCl - (PM: 36,5)
1 día para que el anhídrido acético en exceso se
36,46 g en 1 litro.
combine y determinar el contenido de agua por
Diluir 85 ml de ácido clorhídrico con agua a
Titulación volumétrica directa (ver 120. Determi-
1 litro. Estandarizar la solución del siguiente modo.
nación de agua). Si el contenido de agua excede
Pesar exactamente alrededor de 5,0 g de trome-
0,05 %, agregar más anhídrido acético. Si la solu-
tamina, previamente secada a 105 ºC durante
ción no contiene agua titulable, agregar suficiente
3 horas. Disolver en 50 ml de agua y agregar
agua para obtener un contenido de entre 0,02 y
2 gotas de verde de bromocresol (SR). Titular con
0,05 % de agua. Dejar reposar la solución durante
ácido clorhídrico 1 N hasta punto final amarillo
1 día y titular nuevamente el contenido de agua. La
pálido. Calcular la normalidad. Cada 121,14 mg de
solución obtenida contiene entre 0,02 y 0,05 % de
trometamina equivale a 1 ml de ácido clorhídrico
agua, indicando la ausencia de anhídrido acético.
1 N.
Estandarizar la solución del siguiente modo.
Ácido clorhídrico 0,5 N en metanol
Pesar exactamente alrededor de 700 mg de bifta- Bromato de potasio 0,1 N
lato de potasio, previamente triturado y secado a KBrO3 - (PM: 167,0)
120 °C durante 2 horas y disolver en 50 ml de ácido 2,784 g en 1 litro.
acético glacial en un erlenmeyer de 250 ml. Agre-
Disolver 2,784 g de bromato de potasio en agua,
gar 2 gotas de cristal violeta (SR) y titular con solu-
diluir a 1 litro y estandarizar la solución del siguien-
ción de ácido perclórico hasta que el color cambie
te modo.
de violeta a verde-azulado. Descontar el volumen
Transferir aproximadamente 40 ml de la solu-
de ácido perclórico consumido por 50 ml del ácido ción, exactamente medidos, a un erlenmeyer con
acético glacial y calcular la normalidad. Cada tapón de vidrio, agregar 3 g de ioduro de potasio y
20,42 mg de biftalato de potasio equivale a 1 ml de
continuar con 3 ml de ácido clorhídrico. Dejar
ácido perclórico 0,1 N.
reposar, durante 5 minutos luego titular el iodo
Ácido perclórico 0,1 N en dioxano liberado con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregar
Mezclar 8,5 ml de ácido perclórico con suficien- 3 ml de almidón (SR) cerca del punto final. Reali-
zar una determinación con un blanco y hacer las
te dioxano, que ha sido especialmente purificado
correciones necesarias. Calcular la normalidad.
mediante adsorción, para obtener 1 litro. Estandari-
zar la solución del siguiente modo. Bromo 0,1 N
Pesar exactamente alrededor de 700 mg de bifta- Br - (PM: 79,9)
lato de potasio, previamente reducido a polvo y
7,990 g en 1 litro.
secado a 120 °C durante 2 horas y disolver en 50 ml
Disolver 3 g de bromato de potasio y 15 g de
de ácido acético glacial en un erlenmeyer de
bromuro de potasio en agua para obtener 1 litro y
250 ml. Agregar 2 gotas de cristal violeta (SR) y
estandarizar la solución del siguiente modo.
titular con solución de ácido perclórico hasta que el Transferir aproximadamente 25 ml de la solu-
color cambie de violeta a verde azulado. Descontar
ción, exactamente medidos, a un matraz de iodo de
el volumen de ácido perclórico consumido por
500 ml y diluir con 120 ml de agua. Agregar 5 ml
50 ml del ácido acético glacial y calcular la norma-
de ácido clorhídrico, tapar el matraz y agitar sua-
lidad. Cada 20,42 g de biftalato de potasio equivale
vemente. Luego agregar 5 ml de ioduro de potasio
a 1 ml de ácido perclórico 0,1 N. (SR), tapar nuevamente, agitar la mezcla, dejar
Ácido sulfúrico 1 N reposar durante 5 minutos y titular el iodo liberado
con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml
H2SO4 - (PM: 98,1)
49,04 g en 1 litro. de almidón (SR) cerca del punto final. Calcular la
Agregar lentamente, agitando, 30 ml de ácido normalidad.
sulfúrico a aproximadamente 1020 ml de agua, Almacenar en botella de material inactínico os-
dejar enfriar a 25 °C y determinar la normalidad curo con tapón de vidrio.
titulando contra trometamina según se describe en Bromuro-Bromato de potasio 0,1 N
Ácido clorhídrico 1 N.
Disolver 2,78 g de bromato de potasio (KBrO3)
Ácido sulfúrico 0,5 N en alcohol y 12,0 g de bromuro de potasio (KBr) en agua y
diluir con agua a 1 litro. Estandarizar según el
H2SO4 - (PM: 98,1)
procedimiento dado para Bromato de potasio 0,1 N.
24,52 g en 1 litro.
Agregar lentamente, agitando, 13,9 ml de ácido Bromuro de tetrametilamonio 0,1 M
sulfúrico a una cantidad suficiente de alcohol abso-
(CH3)4NBr - (PM: 154,1)
luto para obtener 1 litro. Enfriar y estandarizar
15,41 g en 1 litro.
contra trometamina según se describe en Ácido Disolver 15,41 g de bromuro de tetrametilamo-
clorhídrico 0,5 N en metanol. nio en agua hasta obtener 1 litro y estandarizar la
Arsenito de potasio 0,1 N solución del siguiente modo.
KAsO2 - (PM: 146,0) Transferir aproximadamente 40 ml de la solu-
7,301 g en 1 litro. ción, exactamente medidos, a un vaso de precipita-
Disolver 4,9455 g de trióxido de arsénico están- dos, agregar 10 ml de ácido nítrico diluido y
dar primario, secado previamente a 105 °C durante 50,0 ml de nitrato de plata 0,1 N (SV) y mezclar.
1 hora, en 75 ml de hidróxido de potasio 1 N. Agregar 2 ml de sulfato férrico amónico (SR) y
Agregar 40g de bicarbonato de potasio, disuelto en titular el exceso de nitrato de plata con tiocianato de
aproximadamente 200 ml de agua y diluir con agua amonio 0,1 N (SV). Calcular la molaridad.
a 1 litro. Cloruro de bario 0,1 M
BaCl2 - (PM: 208,3) Transferir 25,0 ml de esta solución a un erlen-
24,4 g en 1 litro. meyer de 500 ml con tapón de vidrio, agregar 2 g de
Disolver 24,4 g de cloruro de bario en agua y di- ioduro de potasio (libre de iodato), diluir con
luir a 1 litro con el mismo solvente y estandarizar la 200 ml de agua, agregar 5 ml de ácido clorhídrico,
solución del siguiente modo. dejar reposar durante 10 minutos en un sitio oscuro
Transferir aproximadamente 10 ml de la solu- y titular el iodo liberado con tiosulfato de sodio
ción obtenida, agregar 60 ml de agua, 3 ml de 0,1 N (SV), agregando 3 ml de almidón (SR) cerca
amoníaco concentrado, aproximadamente 1 mg de del punto final. Realizar una determinación con un
púrpura de ftaleína y titular con edetato disódi- blanco y hacer las correciones necesarias. Calcular
co 0,1 M (SV). Cuando la solución comienza a la normalidad.
decolorarse, agregar 50 ml de alcohol y continuar la
titulación hasta la desaparición de la coloración azul
violeta. Edetato disódico 0,05 M
Cloruro de tetrametilamonio 0,1 M C10H14N2Na2O8 . 2H2O - (PM: 372,2)
18,61 g en 1 litro.
(CH3)4NCl - (PM: 109,6)
Disolver 18,6 g de edetato sódico en agua para
10,96 g en 1litro. obtener 1 litro y estandarizar la solución del si-
Disolver 10,96 g de cloruro de tetrametilamonio guiente modo.
en agua para obtener 1 litro y estandarizar la solu-
Pesar exactamente alrededor de 200 mg de car-
ción del siguiente modo.
bonato de calcio estándar para quelatometría, pre-
Transferir aproximadamente 40 ml de la solu-
viamente secado a 110qC durante 2 horas, y enfriar
ción, exactamente medidos, a un erlenmeyer, agre-
en un desecador. Transferir a un vaso de precipita-
gar 10 ml de ácido nítrico diluido y 50,0 ml de
dos de 400 ml, agregar 10 ml de agua y agitar por
nitrato de plata 0,1 N (SV) y mezclar. Agregar 5 ml
rotación para formar una suspensión. Cubrir el
de nitrobenceno y 2 ml de sulfato férrico amónico
vaso de precipitados con un vidrio de reloj y trans-
(SR), agitar y titular el exceso de nitrato de plata
ferir 2 ml de ácido clorhídrico diluido con una pipe-
con tiocianato de amonio 0,1 N (SV). Calcular la
ta insertada entre el borde del vaso de precipitados
molaridad.
y el borde del vidrio de reloj. Agitar por rotación el
Cloruro de Bencetonio 0,004 M contenido del vaso de precipitados para disolver el
C27H42ClNO2 - (PM: 448,1) carbonato de calcio. Lavar las paredes del vaso de
1,792 g en 1 litro. precipitados, la superficie exterior de la pipeta y el
Disolver 1,792 g de Cloruro de Bencetonio, pre- vidrio de reloj con agua y diluir con agua hasta
viamente secado a 100 - 105 °C hasta peso constan- aproximadamente 100 ml. Agregar mientras se
te, en agua para obtener 1 litro y estandarizar la agita la solución, preferentemente con un agitador
solución del siguiente modo. magnético, aproximadamente 30 ml de la solución
Calcular la molaridad de la solución teniendo en de edetato sódico desde una bureta de 50 ml. Agre-
cuenta la cantidad de C27H42ClNO2 en el cloruro de gar 15 ml de hidróxido de sodio (SR) y 300 mg de
bencetonio desecado. La determinación se realiza indicador de azul de hidroxi naftol y continuar la
como sigue: transferir 350 mg de cloruro de bence- titulación con la solución de edetato sódico hasta
tonio, previamente secado, a un erlenmeyer de punto final azul. Calcular la molaridad, por la
250 ml y disolver en 30 ml de ácido acético gla- fórmula siguiente:
cial (SR). Agregar 6 ml de acetato mercúrico (SR), P/(100,09V)
0,05 ml de cristal violeta (SR) como indicador y
en la cual P es el peso, en mg, de CaCO3 en la por-
titular con ácido perclórico 0,1 M. Realizar una
ción de carbonato de calcio tomada y V es el volu-
titulación del blanco. Cada 44,81 mg de Cloruro de
men, en ml, de la solución de edetato disódico con-
Bencetonio equivale a 1 ml de ácido perclórico
sumida.
0,1 M.
Edetato disódico 0,1 M
Dicromato de potasio 0,1 N
C10H14N2Na2O8 . 2H2O - (PM: 372,2)
K2Cr2O7 - (PM: 294,2)
37,5 g en 1 litro.
4,903 g en 1 litro.
Disolver 37,5 g de edetato disódico en 500 ml
Disolver aproximadamente 5 g de dicromato de
de agua, agregar 100 ml de hidróxido de sodio al
potasio en 1 litro de agua. Estandarizar la solución
4 % y diluir a 1 litro con agua. Estandarizar la
del siguiente modo.
solución del siguiente modo.
Pesar exactamente alrededor de 120 mg de gra- cerrado perfectamente, y estandarizar la solución
nallas de Cinc, transferir a un recipiente adecuado, del siguiente modo.
disolver en 4 ml de ácido clorhídrico y agregar Medir exactamente alrededor de 25 ml de ácido
0,1 ml de agua de bromo (SR). Calentar a ebulli- clorhídrico 0,5 N (SV). Diluir con 50 ml de agua,
ción para eliminar el exceso de bromo y luego agregar 2 gotas de fenolftaleína (SR) y titular con
agregar hidróxido de sodio al 8,5 % hasta reacción solución de hidróxido de potasio alcohólico hasta
ligeramente ácida o neutra. Transferir la solución que se produzca un color rosado pálido permanente.
anterior a un erlenmeyer de 500 ml y diluir a Calcular la normalidad.
200 ml con agua. Agregar 50 mg de naranja de [NOTA: almacenar en botellas de cierre perfec-
xilenol y hexametilentetramina hasta coloración to, protegidas de la luz].
violeta-rosado. Agregar 2 g más de hexametilente-
Hidróxido de potasio metanólico 0,1 N
tramina y titular con edetato disódico 0,1 M (SV)
hasta punto final amarillo. Calcular la molaridad de 5,612 g en 1 litro.
la solución. Cada 6,54 mg de Cinc equivale a 1 ml Disolver aproximadamente 6,8 g de hidróxido
de edetato disódico 0,1 M (SV). de potasio en 4 ml de agua y agregar metanol para
obtener 1 litro. Dejar reposar la solución en una
Ferricianuro de potasio 0,05 M botella de cierre perfecto durante 24 horas. Luego
K3Fe(CN)6 - (PM: 329,3) decantar rápidamente el líquido sobrenadante trans-
16,46 g en 1 litro. parente en un envase apropiado, cerrado perfecta-
Disolver aproximadamente 17 g de ferricianuro mente, y estandarizar la solución del siguiente mo-
de potasio en agua para obtener 1 litro. Estandari- do.
zar la solución del siguiente modo. Medir exactamente alrededor de 25 ml de ácido
Transferir 50,0 ml de esta solución a un erlen- clorhídrico 0,1 N (SV). Diluir con 50 ml de agua,
meyer con tapón de vidrio, de 500 ml, diluir con agregar 2 gotas de fenolftaleína (SR) y titular con la
50 ml de agua, agregar 10 ml de ioduro de potasio solución de hidróxido de potasio metanólico hasta
(SR) y 10ml de ácido clorhídrico diluido y dejar que se produzca un color rosado pálido permanente.
reposar durante 1 minuto. Luego agregar 15 ml de Calcular la normalidad.
solución de sulfato de cinc (1 en 10) y titular el iodo [NOTA: almacenar en botellas de cierre perfec-
liberado con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agre- to, protegidas de la luz].
gando 3 ml de almidón (SR) cerca del punto final.
Hidróxido de sodio 1 N
Calcular la molaridad.
Proteger de la luz y volver a estandarizar antes NaOH - (PM: 40,0)
de emplear. 40,00 g en 1 litro.
Disolver 162 g de hidróxido de sodio en 150 ml
Hidróxido de potasio 1 N
de agua, enfriar la solución a temperatura ambiente
KOH - (PM: 56,1) y filtrar a través de papel de filtro endurecido.
56,11 g en 1 litro. Transferir 54,5 ml del filtrado transparente a un
Disolver 68 g de hidróxido de potasio en envase de poliolefina de cierre perfecto y diluir con
aproximadamente 950 ml de agua. Agregar una agua hasta obtener 1 litro.
solución saturada recientemente preparada de Pesar exactamente alrededor de 5 g de biftalato
hidróxido de bario hasta que no se forme más pre- de potasio, previamente triturado y secado a 120 °C
cipitado. Agitar la mezcla a fondo y dejar reposar durante 2 horas, y disolver en 75 ml de agua.
durante toda la noche en una botella tapada. Decan- Agregar 2 gotas de fenolftaleína (SR) y titular con
tar el líquido transparente o filtrar la solución en la solución de hidróxido de sodio hasta la produc-
una botella de poliolefina de cierre perfecto y es- ción de color rosado permanente. Cada 204,2 mg
tandarizar según el procedimiento dado para de biftalato de potasio equivale a 1 ml de hidróxido
Hidróxido de sodio 1 N. de sodio 1 N.
Hidróxido de potasio alcohólico 0,5 N [NOTAS: (1) las soluciones de hidróxidos alca-
linos absorben dióxido de carbono cuando se expo-
28,06 g en 1 litro. nen al aire. Deben conservarse en botellas perfec-
Disolver aproximadamente 34 g de hidróxido de tamente cerradas con tapones apropiados conecta-
potasio en 20 ml de agua y agregar alcohol libre de dos con un tubo lleno con una mezcla de hidróxido
aldehído para obtener 1 litro. Dejar reposar la solu- de sodio y cal (tubo de soda cáustica) para que el
ción en una botella de cierre perfecto durante aire que penetre en el envase deba pasar a través de
24 horas. Luego decantar rápidamente el líquido este tubo, que absorberá el dióxido de carbono. (2)
sobrenadante transparente en un envase apropiado, Preparar soluciones de concentración inferior (por
ej., 0,1 N, 0,01 N) mediante la dilución cuantitativa, de ácido benzoico estándar primario, exactamente
de volúmenes exactamente medidos de la solución pesados, en 80 ml de dimetilformamida, agregar
1 N, con suficiente agua para obtener la concentra- 3 gotas de una solución 1 en 100 de azul de timol en
ción deseada]. dimetilformamida y titular hasta punto final azul
[NOTA: volver a estandarizar la solución con con la solución de hidróxido de tetrabutilamonio,
frecuencia]. descargando la solución titulante desde una bureta
equipada con una trampa de absorción de dióxido
Hidróxido de sodio alcohólico 0,1 N
de carbono. Realizar una determinación con un
13,2 g en 1 litro. blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada
A 200 ml de alcohol, agregar 3,3 g de una solu- ml de hidróxido tetrabutilamonio 0,1 N equivale a
ción de hidróxido de sodio al 42 %. Estandarizar la 12,21 mg de ácido benzoico.
solución del siguiente modo:
Disolver 200 mg de ácido benzoico estándar Iodato de potasio 0,05 M
primario en una mezcla de 10 ml de alcohol y 2 ml KIO3 - (PM: 214,0)
de agua. Titular con hidróxido de sodio alcohólico 10,70 g en 1 litro.
0,1 N en presencia de 0,2 ml de timolftaleína (SR). Disolver 10,700 g de iodato de potasio, previa-
Cada ml de esta solución equivale a 12,21 mg de mente secado a 110 °C hasta peso constante, en
C7H6O2. agua para obtener 1 litro.
Hidróxido de tetrabutilamonio 0,1 N Iodo 0,1 N
(C4H9)4NOH - (PM: 259,5) I - (PM: 126,9)
25,95 g en 1 litro. 12,69 g en 1 litro.
Disolver 40 g de ioduro de tetran-butilamonio Disolver aproximadamente 14 g de iodo en una
en 90 ml de metanol anhidro en un erlenmeyer con solución de 36 g de ioduro de potasio en 100 ml de
tapón de vidrio. Colocar en un baño de hielo, agre- agua, agregar 3 gotas de ácido clorhídrico, diluir
gar 20 g de óxido de plata reducido a polvo, tapar el con agua a 1 litro y estandarizar la solución del
erlenmeyer y agitar vigorosamente durante 60 mi- siguiente modo.
nutos. Centrifugar unos pocos ml y someter el Transferir 25,0 ml de la solución de iodo a un
líquido sobrenadante a el ensayo de ioduro (ver matraz aforado de 250 ml, diluir hasta 100 ml y
Ioduro en 410. Ensayos generales de identifica- titular con tiosulfato de sodio 0,1 N (SV) hasta que
ción). Si el ensayo fuera positivo, agregar 2 g de la solución adquiera un color amarillo pálido. Aña-
óxido de plata adicionales y dejar reposar durante dir 2 ml de almidón (SR) y continuar titulando hasta
30 minutos agitando intermitentemente. Cuando que la solución sea incolora. Calcular la normali-
todo el ioduro haya reaccionado, filtrar a través de dad.
un embudo de vidrio sinterizado. Enjuagar el er- Conservar en botellas de material inactínico con
lenmeyer y el embudo con tres porciones de 50 ml tapón de vidrio.
de tolueno anhidro, agregando los enjuagues al
Iodo 0,05 M
filtrado. Diluir con una mezcla de 3 volúmenes de
tolueno anhidro y 1 volumen de metal anhidro hasta I - (PM: 126,9)
1 litro y lavar la solución durante 10 minutos con 12,7 g en 1 litro.
nitrógeno libre de dióxido de carbono. [NOTA: si KI - (PM: 166,0)
fuera necesario obtener una solución transparente, 20 g en 1 litro-
se pueden agregar cantidades aún más pequeñas de Disolver 12,7 g de iodo y 20 g de ioduro de po-
metanol anhidro]. Conservar en un recipiente pro- tasio en agua y diluir con el mismo solvente a
tegido del dióxido de carbono y la humedad y des- 1000 ml. Estandarizar la solución por titulación
cartar después de 60 días de preparado. Alternati- contra una solución preparada disolviendo 80 mg de
vamente, la solución puede prepararse al diluir un anhídrido arsenioso en una mezcla de 10 ml de
volumen apropiado de solución de hidróxido de hidróxido de sodio diluido y 10ml de agua, a la cual
tetrabutilamonio en metanol comercialmente dispo- se le agregan 10 ml de ácido clorhídrico diluido y
nible con una mezcla de 4 volúmenes de tolueno 3 g de bicarbonato de sodio. Valorar en presencia
anhidro y 1 volumen de metanol anhidro. [NOTA: de 1 ml de almidón. Calcular la molaridad.
si fuera necesario obtener una solución transparen- Conservar en envases inactínicos.
te, se pueden agregar cantidades aún más pequeñas Metóxido de litio 0,1 N en benceno
de metanol].
Estandarizar la solución el día de uso del si- CH3OLi - (PM: 38,0)
guiente modo. Disolver aproximadamente 400 mg 3,798 g en 1 litro.
Disolver 0,6 g de litio metálico recientemente te 2,5 g de sodio metálico recientemente cortado.
cortado en 150 ml de metanol, enfriando el erlen- Cuando el metal se ha disuelto, completar a volu-
meyer durante el agregado del metal. Cuando se men con tolueno y mezclar. Almacenar preferen-
completa la reacción, agregar 850 ml de benceno. temente en el recipiente de una bureta automática
Si aparece opalescencia o precipitación, agregar apropiadamente protegida del dióxido de carbono y
metanol suficiente para volver la solución transpa- la humedad. Estandarizar la solución del siguiente
rente. Almacenar preferentemente en el reservorio modo.
de una bureta automática apropiadamente protegida Pesar exactamente alrededor de 400 mg de ácido
del dióxido de carbono y la humedad. Estandarizar benzoico estándar primario y disolver en 80 ml de
la solución por titulación contra ácido benzoico dimetilformamida en un erlenmeyer. Agregar
según se indica en Metóxido de sodio 0,1 N en 3 gotas de una solución 1 en 100 de azul de timol en
tolueno. dimetilformamida y titular con metóxido de sodio
[NOTA: volver a estandarizar la solución con hasta punto final azul. Corregir por el volumen de
frecuencia]. solución de metóxido de sodio consumido por
80 ml de la dimetilformamida y calcular la normali-
Metóxido de litio 0,1 N en clorobenceno
dad. Cada 12,21 mg de ácido benzoico equivale a
CH3OLi - (PM: 38,0) 1 ml de metóxido de sodio 0,1 N.
3,798 g en 1 litro. [NOTAS: (1) para eliminar la turbidez que pue-
Disolver 0,7 g de litio metálico recientemente de formarse después de la dilución con tolueno,
cortado en 150 ml de metanol, enfriando el erlen- agregar metanol (25 a 30 ml son generalmente
meyer durante el agregado del metal. Cuando se suficientes) hasta que la solución se vuelva transpa-
completa la reacción, agregar 850 ml de cloroben- rente. (2) Volver a estandarizar la solución con
ceno. Si aparece opalescencia o precipitación, frecuencia].
agregar metanol suficiente para aclarar la solución.
Almacenar preferentemente en el reservorio de una Metóxido de sodio 0,5 N en metanol
bureta automática apropiadamente protegida del CH3ONa - (PM: 54,0)
dióxido de carbono y la humedad. Estandarizar la 27,01 g en 1 litro.
solución por titulación contra ácido benzoico según Pesar 11,5 g de sodio metálico recientemente
se indica en Metóxido de sodio 0,1 N en tolueno. cortado en cubos pequeños. Transferir aproxima-
[NOTA: volver a estandarizar la solución con damente 0,5 ml de metanol anhidro en un balón de
frecuencia]. 250 ml equipado con una junta de vidrio esmerila-
do, agregar 1 cubo de sodio metálico y cuando la
Metóxido de litio 0,02 N en metanol
reacción haya cesado, agregar al balón el resto del
CH3LiO - (PM: 38,0) sodio metálico. Conectar al balón un refrigerante y
759,6 mg en 1 litro. agregar lentamente 250 ml de metanol anhidro, en
Disolver 0,12 g de litio metálico recientemente porciones pequeñas, a través de la parte superior del
cortado en 150 ml de metanol, enfriando el erlen- refrigerante. Regular el agregado del metanol de
meyer durante el agregado del metal. Cuando se manera que los vapores se condensen y no se esca-
completa la reacción, agregar 850 ml de metanol y pen por la parte superior del refrigerante. Luego
mezclar. Almacenar la solución preferentemente en que se ha completado el agregado del metanol,
el reservorio de una bureta automática apropiada- conectar un tubo de secado a la parte superior del
mente protegida del dióxido de carbono y la hume- refrigerante y dejar enfriar la solución. Transferir la
dad. Estandarizar la solución por titulación contra solución a un matraz aforado de 1 litro, completar a
ácido benzoico según se indica en Metóxido de volumen con metanol anhidro y mezclar. Estanda-
sodio 0,1 N en tolueno, pero emplear sólo 100 mg rizar la solución del siguiente modo.
de ácido benzoico. Cada 2,442 mg de ácido ben- Transferir aproximadamente 20 ml de ácido
zoico equivale a 1 ml de metóxido de litio 0,02 N. clorhídrico 1 N (SV), recientemente estandarizado y
[NOTA: volver a estandarizar la solución con exactamente medidos, a un erlenmeyer de 250 ml,
frecuencia]. agregar 0,25 ml de fenolftaleína (SR) y titular con
Metóxido de sodio 0,1 N en tolueno la solución de metóxido de sodio hasta la primera
aparición de un color rosado permanente. Calcular
CH3ONa - (PM: 54,0) la normalidad.
5,402 g en 1 litro.
Enfriar en un baño de agua helada 150 ml de Morfolina 0,5 N en metanol
metanol contenidos en un matraz aforado de 1 litro C4H9NO - (PM: 87,1)
y agregar, en porciones pequeñas, aproximadamen- 43,56 g en 1 litro.
Transferir 44 ml de morfolina recientemente previamente secado a 110 °C durante 2 horas, a un
destilada a una botella para reactivos de 1 litro y vaso de precipitados de 150 ml, disolver en 5 ml de
agregar metanol hasta completar aproximadamente agua y agregar 5 ml de ácido acético, 50 ml de
1 litro. Proteger de la absorción de dióxido de car- metanol y 0,5ml gotas de eosina (SR). Agitar,
bono durante la remoción de alícuotas. No es nece- preferentemente con un agitador magnético y titular
sario estandarizar esta solución. con solución de nitrato de plata. Calcular la norma-
lidad.
Nitrato cérico amónico 0,05 N
Ce(NO3)4 . 2NH4NO3 - (PM: 548,2) Nitrato mercúrico 0,1 M
2,741 g en 100 ml Hg(NO3)2 - (PM: 324,6)
Disolver 2,75 g de nitrato cérico amónico en 32,46 g en 1 litro.
ácido nítrico 1 N para obtener 100 ml de solución y Disolver aproximadamente 35 g de nitrato
filtrar. Estandarizar la solución del siguiente modo. mercúrico en una mezcla de 5 ml de ácido nítrico y
Transferir exactamente 10 ml de sulfato ferroso 500ml de agua y diluir con agua a 1 litro. Estanda-
amónico 0,1 N (SV) recientemente estandarizado a rizar la solución del siguiente modo.
un erlenmeyer y diluir con agua hasta aproximada- Transferir aproximadamente 20 ml de la solu-
mente 100 ml. Agregar 1 gota de nitrofenantrolina ción, exactamente medidos, a un erlenmeyer y
(SR) y titular con la solución de nitrato cérico amó- agregar 2 ml de ácido nítrico y 2 ml de sulfato férri-
nico hasta punto final incoloro. Calcular la norma- co amónico (SR). Enfriar por debajo de 20 °C y
lidad a partir del volumen tomado de sulfato ferroso titular con tiocianato de amonio 0,1 N (SV) hasta la
amónico 0,1N (SV) y el volumen de solución de primera aparición de un color pardusco permanente.
nitrato cérico amónico consumido. Calcular la molaridad.
Nitrato cúprico 0,1 N Nitrito de sodio 0,1 M
NaNO2 - (PM: 69,0)
Cu(NO3)2 . 2,5H2O - (PM: 232,6)
6,900 g en 1 litro.
23,26 g en 1 litro.
Cu(NO3)2 . 3H2O - (PM: 241,6) Disolver 7,5 g de nitrito de sodio en agua para
24,16 g en 1 litro. obtener 1 litro y estandarizar la solución del si-
guiente modo.
Disolver 23,3 g de nitrato cúprico 2,5 hidratado,
Pesar exactamente alrededor de 500 mg de Sul-
ó 24,2 g del trihidratado, en agua para obtener
fanilamida SR-FA, secar previamente a 105 °C
1 litro. Estandarizar la solución del siguiente modo.
durante 3 horas y transferir a un vaso de precipita-
Transferir 20,0 ml de la solución a un vaso de
precipitados de 250 ml. Agregar 2 ml de nitrato de dos apropiado. Agregar 20 ml de ácido clorhídrico
sodio 5 M, 20 ml de acetato de amonio (SR) y sufi- y 50 ml de agua, agitar hasta disolución y enfriar a
15 °C. Mantener la temperatura aproximadamente
ciente agua para obtener 100 ml. Titular con edeta-
a 15 °C, titular lentamente con solución de nitrito
to disódico 0,05 M (SV). Determinar el punto final
de sodio, colocando la punta de la bureta debajo de
potenciométricamente empleando un electrodo de
la superficie de la solución para evitar la oxidación
referencia de doble junta para ion cúprico. Realizar
una determinación con un blanco y hacer las co- del nitrito de sodio por el aire y agitar la solución
rrecciones necesarias. Calcular la normalidad por la suavemente con un agitador magnético, pero evitar
la formación de un vórtice de aire debajo de la
fórmula siguiente:
superficie. Emplear el indicador especificado en la
VM/20,0 monografía individual o, si se especifica un proce-
en la cual V es el volumen, en ml, de edetato disódi- dimiento potenciométrico, determinar el punto final
co consumido, M es la molaridad del edetato di- electrométricamente, empleando electrodos de
sódico y 20,0 es el número de ml tomados de la platino-calomel o platino-platino. Cuando la titula-
solución de nitrato cúprico. ción está cerca de 1 ml del punto final, agregar la
solución titulante en porciones de 0,1 ml y esperar
Nitrato de plata 0,1 N 1 minuto entre cada agregado. Calcular la molari-
AgNO3 - (PM: 169,9) dad. Cada 17,22 mg de sulfanilamida equivale a
16,99 g en 1 litro. 1 ml de nitrito de sodio 0,1000 M.
Disolver aproximadamente 17,5 g de nitrato de Permanganato de potasio 0,1 N
plata en 1 litro de agua y estandarizar la solución
del siguiente modo. KMnO4 - (PM: 158,0)
Transferir aproximadamente 100 mg, exacta- 3,161 g en 1 litro.
mente pesados, de cloruro de sodio grado reactivo, Disolver aproximadamente 3,3 g de permanga-
nato de potasio en 1 litro de agua en un erlenmeyer
y calentar a ebullición la solución durante aproxi- Ce(SO4)2 - (PM: 332,2)
madamente 15 minutos. Insertar el tapón en el 33,22 g en 1 litro.
erlenmeyer, dejar reposar durante al menos 2 días y Transferir 59 g de nitrato cérico amónico a un
filtrar a través de un crisol de vidrio sinterizado de matraz aforado de 1 litro, agregar una solución de
porosidad fina. Si fuera necesario, el fondo del ácido sulfúrico preparada disolviendo 30 ml de
crisol de vidrio sinterizado puede revestirse con una ácido sulfúrico en 500 ml de agua y mezclar. Com-
torunda de lana de vidrio. Estandarizar la solución pletar a volumen con agua. Dejar reposar durante
del siguiente modo: toda la noche y filtrar a través de un crisol de poro-
Pesar exactamente alrededor de 200 mg de oxa- sidad fina de vidrio sinterizado, si es necesario.
lato de sodio, previamente secado a 110 °C hasta Estandarizar la solución del siguiente modo.
peso constante, y disolver en 250 ml de agua. Pesar exactamente 200 mg de trióxido de arsé-
Agregar 7 ml de ácido sulfúrico, calentar a aproxi- nico, previamente secado a 105 °C durante 1 hora, y
madamente 70 °C y luego agregar lentamente la transferir a un erlenmeyer de 500 ml. Lavar las
solución de permanganato desde una bureta, con paredes internas del erlenmeyer con 25 ml de solu-
agitación constante, hasta que se produzca un color ción de hidróxido de sodio (2 en 25), agitar por
rosado pálido, que persista durante 15 segundos. La rotación hasta disolver la sustancia y cuando la
temperatura, al finalizar la titulación no debe ser disolución se completa, agregar 100 ml de agua y
menor de 60 °C. Calcular la normalidad. Cada mezclar. Agregar 10 ml de ácido sulfúrico diluido
6,700 mg de oxalato de sodio equivale a 1 ml de (1 en 3), luego agregar 2 gotas de ortofenantrolina
permanganato de potasio 0,1N. (SR) y un pequeño cristal de iodo como catalizador.
Dado que el permanganato de potasio se reduce Agitar y titular lentamente con solución de sulfato
en contacto con sustancias orgánicas, como por ej., cérico hasta que el color rosado cambie a azul páli-
goma, la solución debe manipularse en aparatos do. Calcular la normalidad. Cada 4,946 mg de
enteramente construidos de vidrio u otro material trióxido de arsénico equivale a 1 ml de sulfato céri-
apropiadamente inerte. Debe volver a estandarizar- co 0,1 N.
se con frecuencia. Almacenar en botellas de vidrio
Sulfato de cinc 0,05 M
color ámbar con tapón.
ZnSO4 . 7H2O - (PM: 287,5)
Solución estándar de diclorofenol-indofenol 14,4 g en 1 litro.
A 50 mg de 2,6-diclorofenol-indofenol sódico Disolver 14,4 g de sulfato de cinc en agua para
que haya sido almacenado en un desecador sobre obtener 1 litro. Estandarizar la solución del si-
cal sodada, agregar 50 ml de agua que contengan guiente modo.
42 mg de bicarbonato de sodio, agitar vigorosamen- Transferir aproximadamente 10 ml de edetato
te y cuando se disuelve el colorante, agregar agua disódico 0,05 M (SV), exactamente medidos, a un
hasta obtener 200 ml. Filtrar en una botella ámbar erlenmeyer de 125 ml y agregar, en el orden dado,
con tapón de vidrio. Estandarizar la solución del 10 ml de solución reguladora de ácido acético -
siguiente modo. acetato de amonio (SR), 50 ml de alcohol y 2 ml de
Transferir 50 mg de Ácido ascórbico SR-FA, ditizona (SR). Titular con solución de sulfato de
exactamente pesados, a un matraz aforado de 50 ml cinc hasta obtener una solución transparente de
con tapón de vidrio con la ayuda de un volumen color rosado. Calcular la molaridad.
suficiente de ácido metafosfórico - ácido acético
Sulfato de cobre 0,02 M
(SR) para obtener 50 ml. Transferir inmediatamen-
te 2 ml de la solución de ácido ascórbico a un er- CuSO4 - (PM: 159,5)
lenmeyer de 50 ml que contenga 5 ml de ácido 5,0 g en 1 litro.
metafosfórico - ácido acético (SR) y titular rápida- Disolver 5,0 g de sulfato de cobre en agua y di-
mente con solución de diclorofenol-indofenol hasta luir a 1 litro con el mismo solvente. Estandarizar la
que un color rosado característico persista durante solución del siguiente modo.
al menos 5 segundos. Realizar una determinación A 20,0 ml de la solución de sulfato de cobre,
con un blanco titulando 7 ml de ácido metafosfórico agregar 2 g de acetato de sodio y 0,1 ml de piridila-
- ácido acético (SR) más un volumen de agua igual zonaftol (SR). Titular con edetato disódico 0,02 M
al volumen de la solución de diclorofenol empleada (SV) hasta viraje de azul violeta a verde esmeralda.
para titular la solución de ácido ascórbico. Expre- Realizar una determinación con un blanco y hacer
sar la concentración de esta solución estándar en las correcciones necesarias. Calcular la normalidad.
función de su equivalente en mg de ácido ascórbico. Sulfato férrico amónico 0,1 N
Sulfato cérico 0,1 N FeNH4(SO4)2 . 12H2O - (PM: 482,2)
48,22 g en 1 litro. el precipitado a 105 °C durante 1 hora. Cada g de
Disolver 50 g de sulfato férrico amónico en una tetrafenilborato de potasio equivale a 955,1 mg de
mezcla de 300 ml de agua y 6 ml de ácido sulfúrico, tetrafenilborato de sodio. A partir del peso de tetra-
diluir con agua a 1 litro y mezclar. Estandarizar la fenilborato de sodio obtenido, calcular la molaridad
solución del siguiente modo. de la solución de tetrafenilborato de sodio.
Transferir aproximadamente 40 ml de la solu- [NOTA: preparar esta solución el día de uso.]
ción, exactamente medidos, a un erlenmeyer con
Tiocianato de amonio 0,1 N
tapón de vidrio, agregar 5 ml de ácido clorhídrico,
mezclar y agregar una solución de 3 g de ioduro de NH4SCN - (PM: 76,1)
potasio en 10 ml de agua. Tapar, dejar reposar 7,612 g en 1 litro.
durante 10 minutos y titular el iodo liberado con Disolver aproximadamente 8 g de tiocianato de
tiosulfato de sodio 0,1 N (SV), agregando 3 ml de amonio en 1 litro de agua y estandarizar la solución
almidón (SR) cerca del punto final. Realizar una del siguiente modo.
determinación con un blanco y hacer las correccio- Transferir aproximadamente 30 ml de nitrato de
nes necesarias. Calcular la normalidad. plata 0,1 N (SV), exactamente medidos, a un er-
Almacenar en envases inactínicos de cierre per- lenmeyer con tapón de vidrio. Diluir con 50 ml de
fecto. agua, luego agregar 2 ml de ácido nítrico y 2 ml de
sulfato férrico amónico (SR) y titular con solución
Sulfato ferroso amónico 0,1 N de tiocianato de amonio hasta la aparición de un
Fe(NH4)2(SO4)2 . 6H2O - (PM: 392,1) color rojo pardo incipiente. Calcular la normalidad.
39,21 g en 1 litro. Si se desea, puede reemplazarse el tiocianato de
Disolver 40 g de sulfato ferroso amónico en una amonio 0,1 N por tiocianato de potasio 0,1 N cuan-
mezcla previamente enfriada de 40 ml de ácido do el primero se indica en un ensayo o valoración.
sulfúrico y 200 ml de agua, diluir con agua a 1 litro
Tiosulfato de sodio 0,1 N
y mezclar. Un momento antes de usar, estandarizar
la solución del siguiente modo: Na2S2O3 . 5H2O - (PM: 248,2)
Transferir entre 25 y 30 ml de la solución, exac- 24,82 g en 1 litro.
tamente medidos, a un erlenmeyer, agregar 2 gotas Disolver aproximadamente 26 g de tiosulfato de
de ortofenantrolina (SR) y titular con sulfato cérico sodio y 200 mg de carbonato de sodio en 1 litro de
0,1 N (SV) hasta que el color cambie de rojo a azul agua recientemente sometida a ebullición y enfria-
pálido. Calcular la normalidad a partir del volumen da. Estandarizar la solución del siguiente modo.
de sulfato cérico 0,1 N consumido. Pesar exactamente alrededor de 210 mg de di-
cromato de potasio estándar primario, previamente
Tetrafenilborato de sodio 0,02 M reducido a polvo y secado a 120 °C durante 4 horas,
NaB(C6H5)4 - (PM: 342,2) y disolver en 100 ml de agua en un erlenmeyer de
6,845 g en 1 litro. 500 ml con tapón de vidrio. Agitar por rotación
Disolver una cantidad de tetrafenilborato de so- hasta disolver el sólido, retirar el tapón y agregar
dio, equivalente a 6,845 g de NaB(C6H5)4, en agua rápidamente 3 g de ioduro de potasio, 2 g de bicar-
para obtener 1 litro y estandarizar la solución del bonato de sodio y 5 ml de ácido clorhídrico. Tapar
siguiente modo. suavemente en el erlenmeyer, agitar por rotación
Transferir dos porciones de 75 ml de la solución para mezclar y dejar reposar en la oscuridad durante
a sendos vasos de precipitados y agregar a cada uno 10 minutos. Enjuagar el tapón y las paredes inter-
1 ml de ácido acético y 25 ml de agua. Agregar nas del erlenmeyer con agua y titular el iodo libera-
lentamente a cada vaso de precipitados y con agita- do con solución de tiosulfato de sodio hasta que la
ción constante, 25 ml de solución de biftalato de solución tome color verde amarillento. Agregar
potasio (1 en 20) y dejar reposar durante 2 horas. 3 ml de almidón (SR) y continuar la titulación hasta
Filtrar una de las mezclas a través de un crisol fil- que desaparezca el color azul. Calcular la normali-
trante y lavar el precipitado con agua fría. Transfe- dad.
rir el precipitado a un envase, agregar 50 ml de Estandarizar la solución frecuentemente sema-
agua, agitar intermitentemente durante 30 minutos, nalmente.
filtrar y emplear el filtrado como solución saturada
Tricloruro de titanio 0,1 N
de tetrafenilborato de potasio en el siguiente proce-
dimiento de estandarización. Filtrar la segunda TiCl3 - (PM: 154,2)
mezcla a través de un crisol filtrante tarado y lavar 15,42 g en 1 litro.
el precipitado con tres porciones de 5 ml de solu- Agregar 75 ml de solución de tricloruro de tita-
ción saturada de tetrafenilborato de potasio. Secar nio (1 en 5) a 75 ml de ácido clorhídrico, diluir
hasta 1 litro y mezclar. Estandarizar la solución del rado de 100 ml, completar a volumen con agua y
siguiente modo, empleando el aparato especial de mezclar.
titulación descripto. Solución de amonio (2,5 ppm) (SL) - Disolver
Aparato - Almacenar la solución de tricloruro
una cantidad de cloruro de amonio equivalente a
de titanio en el recipiente de un aparato de titula-
741 mg de NH4Cl en agua y diluir a 1 litro con el
ción de sistema cerrado en una atmósfera de hidró-
mismo solvente. Diluir 1 ml de la solución obteni-
geno.
da a 100 ml con agua, inmediatamente antes de su
Emplear un erlenmeyer de 500 ml de boca an- uso.
cha como recipiente de titulación y conectar a la
bureta de titulación un tubo de entrada para dióxido Solución de amonio (1 ppm) (SL) - Inmedia-
de carbono y un tubo de salida a través de un tapón tamente antes de su uso, transferir 2 ml de solución
de goma. Adaptar un agitador mecánico. Todas las de amonio (2,5 ppm) (SL) y completar a 5 ml con
juntas deben ser herméticas. Preparar el aparato de agua.
manera que, tanto el hidrógeno como el dióxido de Solución de calcio (100 ppm) (SL) - Disolver
carbono pasen a través de botellas de lavado que una cantidad de carbonato de calcio equivalente a
contengan solución de tricloruro de titanio (aproxi- 624 mg de CaCO3 en 3 ml de ácido acético y diluir
madamente 1 en 50) para eliminar el oxígeno. a 250,0 ml con agua. Inmediatamente antes de su
Si la solución a titular se calienta antes o durante empleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
la titulación, conectar el matraz de titulación con un aforado de 10 ml y completar a volumen con agua.
refrigerante en posición vertical a través del tapón
de goma. Solución de calcio (100 ppm) (SL1) - Disolver
Estandarización - Transferir aproximadamente una cantidad de carbonato de calcio equivalente a
40 ml de sulfato férrico amónico 0,1 N (SV), exac- 2,5 g de CaCO3 en 12 ml de ácido acético y diluir a
tamente medidos, a un matraz de titulación y pasar 1.000,0 ml con agua. Inmediatamente antes de su
una corriente rápida de dióxido de carbono hasta empleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
eliminar todo el aire. Agregar la solución de triclo- aforado de 10 ml y completar a volumen con alco-
ruro de titanio desde la bureta hasta cerca del punto hol.
final calculado (aproximadamente 35 ml), luego Solución de calcio (10 ppm) (SL) - Inmedia-
agregar a través del tubo de salida, 5 ml de tiociana- tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
to de amonio (SR) y continuar la titulación hasta ción de calcio (100 ppm) (SL) a un matraz aforado
que la solución sea incolora. Calcular la normali- de 10 ml, completar a volumen con agua y mezclar.
dad.
Solución de cloruro (50 ppm) (SL) - Disolver
SOLUCIONES LIMITES (SL) una cantidad de cloruro de sodio equivalente a
Solución de aluminio (200 ppm) (SL) - Disol- 824 mg de NaCl en agua y diluir a 1000,0 ml con el
ver una cantidad de sulfato de aluminio y potasio mismo solvente. Inmediatamente antes de su em-
que corresponda a 352 mg de AlK(SO4)2 . 12H2O pleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
en agua. Agregar 10 ml de ácido sulfúrico diluido, aforado de 10 ml y completar a volumen con agua.
diluir a 100 ml con agua y mezclar. Solución de cloruro (8 ppm) (SL) - Disolver
Solución de aluminio (100 ppm) (SL) - Disol- una cantidad de cloruro de sodio equivalente a
ver 8,947 g de cloruro de aluminio en agua y diluir 1,32 g de NaCl en agua y diluir a 1.000,0 ml con el
a 1.000 ml con el mismo solvente. Inmediatamente mismo solvente. Inmediatamente antes de su em-
antes de su empleo, transferir 1 ml de esta solución pleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
a un matraz aforado de 10 ml y completar a volu- aforado de 100 ml y completar a volumen con agua.
men con agua. Solución de cloruro (5 ppm) (SL) - Inmedia-
Solución de aluminio (10 ppm) (SL) - Disol- tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
ver una cantidad de nitrato de aluminio, correspon- ción de cloruro (50 pm) (SL) a un matraz aforado
diente a 1,39 g de Al(NO3)3 . 9H2O en agua. Diluir de 10 ml y completar a volumen con agua.
a 100 ml con agua, transferir 1 ml de la solución Solución de fosfato (5 ppm) (SL) - Disolver
obtenida a un matraz aforado de 100 ml y completar una cantidad de fosfato dihidrogenado equivalente a
a volumen con agua. Preparar esta solución inme- 716 mg de KH2PO4 y diluir a 1.000 ml con el mis-
diatamente antes de su empleo. mo solvente. Inmediatamente antes de su empleo,
Solución de aluminio (2 ppm) (SL) - Inmedia- transferir 1 ml de esta solución a un matraz aforado
tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu- de 100 ml y completar a volumen con agua.
ción de aluminio (200 ppm) (SL) a un matraz afo-
Solución de hierro (250 ppm) (SL) - Disolver Solución de plomo (100 ppm) (SL) - Disolver
4,840 g de cloruro férrico en 100 ml de ácido una cantidad de nitrato de plomo que corresponda a
clorhídrico diluido. Inmediatamente antes de su 400 mg de Pb(NO3)2 en agua y diluir a 250,0 ml
empleo, realizar una dilución 1 en 40con agua. con el mismo solvente. Inmediatamente antes de su
empleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
Solución de hierro (20 ppm) (SL) - Disolver
aforado de 10 ml y completar a volumen con agua.
863,4 mg de sulfato férrico de amonio en agua,
agregar 25 ml de ácido sulfúrico 2 N, diluir con Solución de plomo (10 ppm) (SL) - Inmedia-
agua a 500,0 ml y mezclar. Inmediatamente antes tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
de su empleo, transferir 10 ml de esta solución a un ción de plomo (100 pm) (SL) a un matraz aforado
matraz aforado de 100 ml, completar a volumen con de 10 ml y completar a volumen con agua.
agua y mezclar.
Solución de plomo (1 ppm) (SL) - Inmediata-
Solución de hierro (1 ppm) (SL) - Transferir mente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
1 ml de la solución de hierro (20 ppm) (SL) a un ción de plomo (10 pm) (SL) a un matraz aforado de
matraz aforado de 20 ml, completar a volumen con 10 ml y completar a volumen con agua.
agua y mezclar.
Solución de plomo (0,1 ppm) (SL) - Inmedia-
Solución de magnesio (100 ppm) (SL) - Di- tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
solver una cantidad de sulfato de magnesio equiva- ción de plomo (1 pm) (SL) a un matraz aforado de
lente a 1,010 g de MgSO4 . 7H2O en agua y diluir a 10 ml y completar a volumen con agua.
100 ml con el mismo solvnte. Inmediatamente
Solución de sulfato (100 ppm) (SL) - Disolver
antes de su empleo, transferir 1 ml de esta solución una cantidad de sulfato de potasio que corresponda
a un matraz aforado de 10 ml y completar a volu- a 181 mg de K2SO4 en agua y diluir a 100,0 ml con
men con agua.
el mismo solvente. Inmediatamente antes de su
Solución de magnesio (10 ppm) (SL) - Inme- empleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
diatamente antes de su empleo, transferir 1 ml de aforado de 10 ml y completar a volumen con agua.
solución de magnesio (100 pm) (SL) a un matraz
Solución de sulfato (10 ppm) (SL) - Inmedia-
aforado de 10 ml y completar a volumen con agua.
tamente antes de su empleo, transferir 1 ml de solu-
Solución de magnesio (10 ppm) (SL1) - Di- ción de sulfato (100 pm) (SL) a un matraz aforado
solver 8,365 g de cloruro de magnesio en 1000 ml de 10 ml y completar a volumen con agua.
de ácido clorhídrico diluido. Inmediatamente antes
Solución de sulfato (10 ppm) (SL1) - Disolver
de su empleo, transferir 1 ml de esta solución a un
una cantidad de sulfato de potasio que corresponda
matraz aforado de 100 ml y completar a volumen
a 0,181 g de K2SO4 en alcohol al 30 % v/v y diluir a
con agua.
100,0 ml con el mismo solvente. Inmediatamente
Solución de mercurio (20 ppm) (SL) - Disol- antes de su empleo, transferir 1 ml de esta solución
ver una cantidad de cloruro de mercurio equivalente a un matraz aforado de 100 ml y completar a volu-
a 135,4 mg de HgCL2 en una mezcla de ácido sulfú- men con alcohol al 30 % v/v.
rico diluido y agua (1:1) y diluir con la misma mez-
Solución de talio (10 ppm) (SL) - Disolver en
cla a 100 ml. Transferir 2 ml de esta solución a un una solución de cloruro de sodio de 9 g por litro una
matraz aforado de 100 ml y completar a volumen cantidad de sulfato de talio equivalente a 123,5 mg
con la misma mezcla de solventes.
de Tl2SO4 y completar a 1 litro con el mismo sol-
Solución de níquel (10 ppm) (SL) - Disolver vente. Transferir 10 ml de la solución anterior a un
una cantidad de sulfato de níquel que corresponda a matraz aforado de 100 ml y completar a volumen
4,78 g de NiSO4 . 7H2O en agua y diluir a 1.000 ml con el mismo solvente.
con el mismo solvente. Inmediatamente antes de su
empleo, transferir 1 ml de esta solución a un matraz
aforado de 100 ml y completar a volumen con agua.
TABLAS
$OFRKRO
Disminución de grados por diluciones en volúmenes (volumen de agua agregado a un alcohol de título dado para
reducirlo a otro de título inferior)
(MHPSORPara reducir un alcohol de 80° por 100 (en volumen) al título de 40° por 100 se busca en la columna vertical correspondiente a
80° por 100 el número correspondiente a la línea horizontal 40, lo que da 104,01. Luego a 100 volúmenes de alcohol de 80° por 100 hay que
agregar 104,01 volúmenes de agua para obtener alcohol de 40° por 100.
7DEODGHYLVFRVLGDGLQWUtQVHFD
Viscosidad intrínseca >K@c a diferentes valores de viscosidad relativa >K@rel
>K@rel 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09
1,1 0,098 0,106 0,115 0,125 0,134 0,143 0,153 0,161 0,170 0,180
1,2 0,189 0,198 0,207 0,216 0,225 0,233 0,242 0,250 0,259 0,268
1,3 0,276 0,285 0,293 0,302 0,310 0,318 0,326 0,334 0,342 0,350
1,4 0,358 0,367 0,375 0,383 0,391 0,399 0,407 0,414 0,422 0,430
1,5 0,437 0,445 0,453 0,460 0,468 0,476 0,484 0,491 0,499 0,507
1,6 0,515 0,522 0,529 0,536 0,544 0,551 0,558 0,566 0,573 0,580
1,7 0,587 0,595 0,602 0,608 0,615 0,622 0,629 0,636 0,642 0,649
1,8 0,656 0,663 0,670 0,677 0,683 0,690 0,697 0,704 0,710 0,717
1,9 0,723 0,730 0,736 0,743 0,749 0,756 0,762 0,769 0,775 0,782
2,0 0,788 0,795 0,802 0,809 0,815 0,821 0,827 0,833 0,840 0,846
2,1 0,852 0,858 0,864 0,870 0,876 0,882 0,888 0,894 0,900 0,906
2,2 0,912 0,918 0,924 0,929 0,935 0,941 0,948 0,953 0,959 0,965
2,3 0,971 0,976 0,983 0,988 0,994 1,000 1,006 10,11 1,017 1,022
2,4 1,028 1,033 1,039 1,044 1,050 1,056 1,061 1,067 1,072 1,078
2,5 1,083 1,089 1,094 1,100 1,105 1,111 1,116 1,121 1,126 1,131
2,6 1,137 1,142 1,147 1,153 1,158 1,163 1,169 1,174 1,179 1,184
2,7 1,190 1,195 1,200 1,205 1,210 1,215 1,220 1,225 1,230 1,235
2,8 1,240 1,245 1,250 1,255 1,260 1,265 1,270 1,275 1,280 1,285
2,9 1,290 1,295 1,300 1,305 1,310 1,314 1,319 1,324 1,329 1,333
3,0 1,338 1,343 1,348 1,352 1,357 1,362 1,367 1,371 1,376 1,381
3,1 1,386 1,390 1,395 1,400 1,405 1,409 1,414 1,418 1,423 1,427
3,2 1,432 1,436 1,441 1,446 1,550 1,455 1,459 1,464 1,468 1,473
3,3 1,477 1,482 1,486 1,491 1,496 1,500 1,504 1,508 1,513 1,517
3,4 1,521 1,525 1,529 1,533 1,537 1,542 1,546 1,550 1,554 1,558
3,5 1,562 1,566 1,570 1,575 1,579 1,583 1,587 1,591 1,595 1,600
3,6 1,604 1,608 1,612 1,617 1,621 1,625 1,629 1,633 1,637 1,642
3,7 1,646 1,650 1,654 1,658 1,662 1,666 1,671 1,675 1,679 1,683
3,8 1,687 1,691 1,695 1,700 1,704 1,708 1,712 1,715 1,719 1,723
3,9 1,727 1,731 1,735 1,739 1,742 1,746 1,750 1,754 1,758 1,762
4,0 1,765 1,769 1,773 1,777 1,781 1,785 1,789 1,792 1,796 1,800
4,1 1,804 1,808 1,811 1,815 1,819 1,822 1,826 1,830 1,833 1,837
4,2 1,841 1,845 1,848 1,852 1,856 1,859 1,863 1,867 1,870 1,874
4,3 1,878 1,882 1,885 1,889 1,893 1,896 1,900 1,904 1,907 1,911
4,4 1,914 1,918 1,921 1,925 1,929 1,932 1,936 1,939 1,943 1,946
4,5 1,950 1,954 1,957 1,961 1,964 1,968 1,971 1,975 1,979 1,982
4,6 1,986 1,989 1,993 1,996 2,000 2,003 2,007 2,010 2,013 2,017
4,7 2,020 2,023 2,027 2,030 2,033 2,037 2,040 2,043 2,047 2,050
4,8 2,053 2,057 2,060 2,063 2,067 2,070 2,073 2,077 2,080 2,083
4,9 2,087 2,090 2,093 2,097 2,100 2,103 2,107 2,110 2,113 2,116
5,0 2,119 2,122 2,125 2,129 2,132 2,135 2,139 2,142 2,145 2,148
5,1 2,151 2,154 2,158 2,160 2,164 2,167 2,170 2,173 2,176 2,180
5,2 2,183 2,186 2,190 2,192 2,195 2,197 2,200 2,203 2,206 2,209
5,3 2,212 2,215 2,218 2,221 2,224 2,227 2,230 2,233 2,236 2,240
5,4 2,243 2,246 2,249 2,252 2,255 2,258 2,261 2,264 2,267 2,270
5,5 2,273 2,276 2,279 2,282 2,285 2,288 2,291 2,294 2,297 2,300
5,6 2,303 2,306 2,309 2,312 2,315 2,318 2,320 2,324 2,326 2,329
5,7 2,332 2,335 2,338 2,341 2,344 2,347 2,350 2,353 2,355 2,358
5,8 2,361 2,364 2,367 2,370 2,373 2,376 2,379 2,382 2,384 2,387
5,9 2,390 2,393 2,396 2,400 2,403 2,405 2,408 2,411 2,414 2,417
6,0 2,419 2,422 2,425 2,428 2,431 2,433 2,436 2,439 2,442 2,444
6,1 2,447 2,450 2,453 2,456 2,458 2,461 2,464 2,467 2,470 2,472
6,2 2,475 2,478 2,481 2,483 2,486 2,489 2,492 2,494 2,497 2,500
6,3 2,503 2,505 2,508 2,511 2,513 2,516 2,518 2,521 2,524 2,526
6,4 2,529 2,532 2,534 2,537 2,540 2,542 2,545 2,547 2,550 2,553
6,5 2,555 2,558 2,561 2,563 2,566 2,568 2,571 2,574 2,576 2,579
6,6 2,581 2,584 2,587 2,590 2,592 2,595 2,597 2,600 2,603 2,605
6,7 2,608 2,610 2,613 2,615 2,618 2,620 2,623 2,625 2,627 2,630
6,8 2,633 2,635 2,637 2,640 2,643 2,645 2,648 2,650 2,653 2,655
6,9 2,658 2,660 2,663 2,665 2,668 2,670 2,673 2,675 2,678 2,680
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7,1 2,707 2,710 2,712 2,714 2,717 2,719 2,721 2,724 2,726 2,729
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11 3,50 3,52 3,53 3,55 3,56 3,58 3,60 3,61 3,63 3,64
12 3,66 3,68 3,69 3,71 3,72 3,74 3,76 3,77 3,79 3,80
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