MICROBIOLOGÍA CLÍNICA

MEDIOS DE CULTIVO
(CURSO 2012-2013)
(GRUPOS 1 y 2)
Agar BCYE (agar tamponado con extracto de levadura y carbón, “buffered, charcoal, yeast
extract”)
Medio rico suplementado con L-cistina y pirofosfato férrico que permite el crecimiento y
enriquecimiento de especies de Legionella. Cuando se le añade polimixina B, vancomicina y
anisomicina es selectivo para Legionella y Nocardia, ya que inhibe bacterias Gram negativas, Gram
positivas y levaduras, respectivamente.
Agar BHI (infusión cerebro-corazón, “brain-heart”)
La infusión cerebro-corazón es una fórmula muy rica que puede emplearse, ya sea como
caldo o medio sólido, con sangre adicional o sin ésta, para el crecimiento de una gran variedad de
microorganismos. Los componentes clave incluyen infusión de distintos tejidos animales con el
agregado de peptona, tampón fosfato y una pequeña concentración de glucosa que proporciona una
fuente de energía fácilmente accesible a los microorganismos.
Los caldos infusión cerebro-corazón se emplean con frecuencia como medio para
hemocultivo y como medio base para muchas pruebas metabólicas, en especial para la
identificación de estreptococos.
Agar BHI con antibióticos
El agar BHI adicionado de cloranfenicol y cicloheximida se utiliza para el aislamiento selectivo de
hongos patógenos. La cicloheximida inhibe el crecimiento de hongos saprófitos mientras que el
cloranfenicol actúa como agente antibacteriano tanto de bacterias Gram positivas como Gram
negativas. La incorporación de ambos antimicrobianos proporciona una mayor selectividad frente a
hongos saprófitos y bacterias.
Agar BHI con 5% sangre de oveja
El agar infusión cerebro-corazón con 5-10% de sangre de oveja adicionado de cloranfenicol
y gentamicina inhibe el crecimiento de bacterias, pero permite el crecimiento de hongos, incluso de
los más exigentes. Este agar se emplea como medio de aislamiento primario para el crecimiento de
hongos, ya que permite una mejor recuperación de patógenos que el agar glucosa de Sabouraud.
Agar Campy con sangre
Medio selectivo para el aislamiento de especies de Campylobacter. El medio está suplementado con
sangre y con cefoperazona, vancomicina y anfotericina B para inhibir el desarrollo de la mayoría de
las bacterias Gram negativas, Gram positivas y levaduras, respectivamente.
Agar CCF (fructosa, cicloserina, cefoxitina)
Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Clostridium difficile en muestras de heces u otros
materiales intestinales. Contiene rojo neutro como indicador. Cicloserina y cefoxitina inhiben la
microbiota intestinal. C. difficile a las 48 horas de incubación forma colonias rizoides amarillentas
que tienen estructuras internas cristalinas birrefringentes.
Agar chocolate
Este medio usa la misma base que el agar sangre. En un principio, los eritrocitos se
adicionaban a la base fundida y luego se elevaba la temperatura (alrededor de 85°C) para lisar
parcialmente las células, lo que otorgaba al medio el color pardo-chocolate. Actualmente, la
hemoglobina y otros nutrientes presentes en los lisados de los glóbulos rojos, como hemina (factor
X) y coenzima NAD (factor V), se añaden como suplementos a un agar base muy rico. También se
puede agregar IsoVitaleX, un suplemento definido que proporciona el factor V, vitaminas,
aminoácidos, coenzimas, glucosa, iones férricos y otros factores que favorecen el crecimiento de
especies exigentes.
Agar chocolate con IsoVitaleX y vancomicina
Medio selectivo modificado para el aislamiento de Neisseria gonorrhoeae y N. meningitidis a partir
de muestras clínicas que contienen microbiota mixta de bacterias y hongos. La vancomicina es
activa frente a bacterias Gram positivas.
Agar CIN (cefsulodina, irgasán, novobiocina)
Medio selectivo para Yersinia. Contiene manitol y rojo neutro como indicador. Las colonias de
Yersinia presentan un borde transparente con un amplio centro rojo muy intenso. No es totalmente
específico para Yersinia, ya que pueden crecer otros bacilos Gram negativos, en particular
Citrobacter freundii, que presenta colonias semejantes a las de Yersinia.
Agar cistina-telurito
Medio utilizado para el aislamiento de Corynebacterium diphtheriae. Sobre la base de agar infusión
se agrega 5% de sangre de oveja. La reducción del telurito de potasio por C. diphtheriae produce
colonias negras.
Agar CLED (cistina, lactosa, deficiente en electrolitos)
Es un medio diferencial recomendado para el análisis bacteriológico de orina ya que en él crecen
profusamente la gran mayoría de las bacterias, tanto Gram negativas como Gram positivas, que
provocan infecciones urinarias, pudiéndose diferenciar o identificar sus respectivas colonias.
Debido a su deficiencia en electrolitos (no lleva cloruro sódico), no permite que las colonias
de Proteus invadan la placa de cultivo, lo que facilita el recuento. La lactosa es el único
carbohidrato presente. La cistina facilita el crecimiento de los coliformes dependientes de ella. El
azul de bromotimol permite distinguir las colonias de bacterias fermentadoras de las que no lo son.
Los microorganismos fermentadores de lactosa dan lugar a colonias de color amarillo. Los no
fermentadores dan lugar a colonias traslúcidas o de color claro. La alcalinización del medio provoca
la aparición de un color azul intenso.
Agar CNA (colistina, ácido nalidíxico)
Agar base de Columbia adicionado de colistina y ácido nalidíxico que suprimen por
completo el crecimiento de enterobacterias y de Pseudomonas, pero permiten el desarrollo de
estafilococos, estreptococos, enterococos y levaduras. Ciertos microorganismos Gram negativos
como Gardnerella vaginalis y algunas especies de Bacteroides pueden crecer muy bien en este
medio. Se puede añadir 5% de sangre desfibrinada que proporciona más nutrientes y la capacidad
de detectar reacciones hemolíticas.
Agar Columbia
Es una excelente base para el crecimiento de microorganismos exigentes y para la buena
visualización de hemólisis con el agregado de sangre. Incluye peptona, tripteína, extracto de
levadura y extracto de corazón que favorecen el desarrollo de microorganismos exigentes. El
almidón incrementa el desarrollo de neiserias y las reacciones de hemólisis de algunos
estreptococos. Tiene la ventaja de permitir la adición de sangre o de antibióticos entre otras cosas,
obteniéndose así un medio más enriquecido o selectivo de acuerdo al aditivo.
Agar desoxicolato-citrato (ADC)
Medio altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella y Shigella. El desoxicolato sódico
inhibe o suprime considerablemente el crecimiento de coliformes y bacterias Gram positivas. Sin
embargo, en ocasiones crecen coliformes, y cuando se encuentran en grandes cantidades producen
ácido a partir de la lactosa, precipitan la sal biliar y dan un medio rojo que hace difícil la detección
de patógenos. Incluye rojo neutro como indicador. Las colonias de Salmonella y Shigella son
incoloras.
Agar EMB (eosina, azul de metileno, “eosin-methylen blue”, Agar de Levine)
Es un medio diferencial y selectivo para aislar y detectar enterobacterias en muestras mixtas. Los
colorantes de anilina (eosina y azul de metileno) inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y
a las Gram negativas exigentes. También se combinan precipitando a pH ácido, actuando como
indicadores de producción de ácidos. El medio incluye lactosa, lo que permite la diferenciación de
los fermentadores de lactosa de los no fermentadores. Los fermentadores fuertes de lactosa, sobre
todo Escherichia coli, producen colonias de color negro verdoso con brillo metálico. Los
productores más débiles de ácidos, forman colonias de color violeta. Los no fermentadores de
lactosa forman colonias transparentes.