Método biológico

Para el aislamiento de la bacteria anaeróbica Clostridium sp. en placa Petri, utilizamos nuestra
muestra de dilución 10−4 , depositamos el inóculo en la base con agar anaerobio de Brewer y
realizamos estriado de la bacteria Bacillus subtillis en la tapa con TSA.

Resultados

Método biológico
Mesa 4 B

Fig. 1. Siembra de Clostridium sp. y Bacillus subtilis en placa Petri.

Fig.2. Clostridium sp. Bacilo,

Gram +. 100x

Se observa en el microscopio bacterias teñidas de color morado, con los bordes

redondeados. También se observa la presencia de esporas.
Discusión de resultados

Si bien existe poca presencia de colonias de Clostridium sp. fue probablemente porque durante
en el procedimiento de siembra en el agar de Brewer, se cargó poco inóculo de la muestra. Esto
provocó que no haya mucho crecimiento de bacterias anaeróbicas.
En método biológico se utilizó el medio agar anaeróbico de Brewer para crecimiento de
Clostridium sp. ya que contiene una serie de agentes reductores (tioglicolato, formaldehído,
sulfoxilato, cistina) que aseguran una anaerobiosis adecuada (Quastel y Stephenson 1926,
Aaubertin et al. 1928). Azul de metileno que sirve como indicador redox donde su decoloración
indica anaerobiosis. Agar anaeróbico acc. to Brewer que es adecuado para los procedimientos
de recubrimiento estándar utilizados en el cultivo de bacterias anaerobias.
Bacillus subtilis es catalasa positivo, una bacteria aerobia facultativo ya que crece mejor en
aerobiosis, toma el O2 ambiental y elimina CO2, disminuyendo la tensión de O2, genera un
ambiente de anaerobiosis adecuado que favorece el desarrollo de bacterias del género
Clostridium, que son catalasa y oxidasa negativo.
En los resultados observados en el microscopio después de la tinción Gram se distingue
bacterias teñidas de morado que se identifican con el género Clostridium. Este grupo de
bacterias responden positivamente a la tinción de Gram, aunque algunos son Gram variables.

Conclusiones

 Se aislaron bacterias anaerobias esporuladas pertenecientes al género Clostridium

presentando buenos resultados.
 El método biológico es un método de aislamiento muy útil para observar microorganismos
anaeróbicos.
 El género Clostridium representa un grupo de bacterias con gran importancia clínica pues
son patógenas según la acción de sus toxinas, las enfermedades causadas por estas
bacterias son de muy variadas formas y pueden conducir a la muerte.

Murray PR, Rosenthal KS, Kobayashi GS, Pfaller MA Microbiología Médica. 4ª ed 2002
Mosby, Elsevier España.

Prescott, Harley, Klein. Microbiología. Mc Graw-Hill Interamericana de España. 4ª ed.1999

Quastel, J. H., & Stephenson, M. (1926). Experiments on “Strict” Anaerobes. Biochemical

Journal, 20(5), 1125–1137.
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