LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I

PRÁCTICA 1 A LA 4

Andrés David Marín Ortiz

15201826335

JOSE JOAQUÍN OSORIO RIOS

UNIVERSIDAD DE MANIZALES

MANIZALES, 11 de marzo de 2019

 Práctica bioseguridad

APLICACIÓN SUSTENTADA: Desde el principio de los tiempos la

bioseguridad en medicina ha dado pasos gigantes, en un principio, no se
usaban barreras protectoras contra los gérmenes como hoy en día lo son los
tapabocas, guantes o algo tan sencillo como el lavado de manos, lo que en
cierta parte influía en la contaminación del procedimiento a realizar,
BIOSEGURIDAD: Conjunto de medidas preventivas destinadas a mantener el
control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biológicos,
físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos, asegurando
que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atente contra la
salud y seguridad de los trabajadores de la salud, pacientes, visitantes y el
medio ambiente.
LA BIOSEGURIDAD SE BASA EN UNOS PRINCIPIOS FUNDAMENTALES:

● Universalidad: las medidas deben involucrar a todos los pacientes y

trabajadores independientemente de conocer o no su serología. Todo el
personal debe seguir todas las medidas estándares rutinariamente para
evitar la exposición de la piel y las mucosas que pueden dar origen a
accidentes.
● Uso de barreras: comprende el concepto de evitar la exposición directa
a sangre y otros fluidos orgánicos potencialmente contaminantes,
mediante la utilizacion de materiales adecuados que se interpongan al
contacto de los mismos.
● Medios de eliminación de material contaminado: comprende un
conjunto de dispositivos y procedimientos adecuados a través de los
cuales los materiales utilizados en la atención de pacientes, son
depositados y eliminados sin riesgo.
 FACTORES DE RIESGO:

Factor de riesgo biológico: en todos los laboratorios de medicina se abre la

posibilidad de adquirir enfermedades por el contacto con microorganismos
patógenos o residuos contaminados

- Desconocimiento de las características de peligrosidad de las sustancias.

- Empleo de métodos y procedimientos de trabajo intrínsecamente
peligrosos.
- Malos hábitos de trabajo.
- Empleo de material de laboratorio inadecuado o de mala calidad.
- Instalaciones defectuosas.
- Diseño no ergonómico y falta de espacio.
- Contaminación ambiental.

Acciones preventivas para la minimización de riesgos causados por estos

factores son:
- Disponer de información sobre las características de peligrosidad de las
sustancias.
- Disponer de la adecuada información para realizar el trabajo de manera
segura.
- Adquirir y mantener buenas prácticas de trabajo.
- Trabajar con material suficiente y adecuado a las necesidades y en buen
estado.
- Llevar una buena política de mantenimiento preventivo, con revisiones
periódicas, y reparar con rapidez las averías.
- Considerar los aspectos de seguridad (estructural, de diseño y de
distribución) en la fase de diseño. No acumular materiales en las
superficies de trabajo. Disponer del espacio de una manera racional.
- Equipar el laboratorio con un sistema de ventilación general, localizada
(vitrinas y cabinas) y de emergencia eficaz.

En un laboratorio se suelen utilizar productos tales como:

- Reactivos químicos corrosivos.
- Gases.
- Sustancias químicas toxicas.
- Reactivos químicos.
- Sustancias inflamables.
- Sustancias biológicas.
- Sustancias carcinogénicas.
 TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABÓLICA, BIOQUÍMICA I:
PRÁCTICA # 2
SISTEMAS DE MEDIDAS
MASA Y PESO

Preparado:

José Joaquín Osorio Ríos, profesor asistente, facultad ciencias de la salud, universidad de
Manizales
 NaCl

Sacarosa
Tenga en cuenta:
Aplicación del trabajo de laboratorio a la práctica y como el trabajo de
experiencias contribuye a los procesos diagnósticos: posibles patologías, que
se pueden detectar con la interpretación correcta de resultados en la prueba y
las manifestaciones clínicas.
Desde su nivel académico, observe: los valores alterados en resultados y
causales (preparaciones, instrumentos, calibración, tiempos, entre otros).
NOTA: por BIOSEGURIDAD el alumno antes de entrar al laboratorio debe
tener el manual de prácticas y el uniforme aunado a: delantal abrochado
anti fluido (mangas largas con puño), guantes (mínimo 3 por práctica),
gorro anti fluido, tapabocas, gafas (opcional). Requerimientos sin los
cuales, NO puede acceder al laboratorio.

MATERIALES:
Balanza analítica
Pre pipetas
Pipetas
Probetas
Vasos de precipitados
Tubos de ensayo
NaCl
Sacarosa
Agua
REFERENTES CONCEPTUALES DE LA PRÁCTICA:

Masa y peso, átomo, molécula, compuesto, exactitud y precisión; instrumentos

de medición de longitud y volumen,

CONCEPTOS

ATOMO: Es una de las unidades más pequeña de la materia sus propiedades

no se pueden dividir mediante procesos químicos.

MOLECULA: Estructura química con estabilidad electrónica.

COMPUESTO: Es una sustancia formada por la combinación de dos o

más elementos distintos de la tabla periódica.

EXACTITUD: Se refiere a cuán cerca del valor real se encuentra el valor

medido. está relacionada con el sesgo de una estimación. Cuanto menor es el
sesgo más exacto es una estimación.

PRECISION: Grado de concordancia entre los resultados independientes de la

medición.

INSTRUMENTOS DE MEDICION

VOLUMEN: Para medir volúmenes utilizamos probetas, erlenmeyer, vasos de

precipitados, pipetas y buretas.

LONGITUD: Para medir la longitud utilizamos cinta métrica, regla graduada,

calibre, micrómetro, reloj comparador, interferómetro y odómetro.
¿Qué diferencia hay entre masa y peso?
La masa es la cantidad de materia que contiene un cuerpo y el peso es
la acción que ejerce la fuerza de gravedad sobre el cuerpo.

Masa (m) Peso (p)

Es una magnitud escalar. Es una magnitud vectorial.

Es la cantidad de materia que tiene un Es la acción que ejerce la fuerza de

cuerpo. gravedad.

Su valor es constante. Su valor varía según la posición.

Se mide con la balanza. Se mide con el dinamómetro.

Unidad de medida: kilogramo (Kg) y gramo Unidad de medida: Newton (N).

(g).

¿Cuántos grados centígrados son 98° F?

Formulas: °C= °F – 32/1.8; °F= °C + 32 X 1.8
°C= °K – 273; °K= °C + 273

Noventa y ocho grados Fahrenheit son treinta y seis punto seis seis…, grados
centígrados.
°C= 98° F – 32/1.8= 36.66 °C.
PROCEDIMIENTO:
Pesar bolsas de NaCl y sacarosa, luego excluya el peso de la bolsa, utilice el
peso neto y tabule datos.
Coloque este contenido para tarar en la balanza electrónica.
Deposite en c/u de las probetas 10 ml de agua, luego deposite los reactivos en
las respectivas probetas, observe cual es el desplazamiento en cuanto al
volumen de c/u de las muestras y anote los niveles obtenidos, reste al volumen
inicial el final.
Hallar su densidad referenciado en los datos cuantitativos.
Aplique la fórmula: D= P/V

REFERENTES CONTEXTUALES EN LA PRÁCTICA:

Masa y peso: al comparar muestras y el espacio que ocupan observamos que
el volumen después de dilución es diferente en la sacarosa en referencia al
NaCL.
En referencia deducimos que en el NaCL sus moléculas esta unidas por
enlaces iónicos (más electronegativos/mayor atracción molecular) y en la
sacarosa sus enlaces son covalentes (su fuerza de cohesión es menor).
Ósea: la densidad con relación a su peso y volumen es diferente
Con respecto a la precisión en medición de volúmenes diferenciamos:
Pipetas certificadas, micro pipetas, balones aforados entre otros, sus
mediciones son exactas en medición de volúmenes.
Probetas, beakers, buretas, son para almacenamiento temporal y sus medidas
no son de precisión.

VALORES DE REFERENCIA:

1 mililitro = 1 cm3
Peso NaCl: 5 gramos
Volumen inicial agua: 10 mililitros
Volumen final agua: 2 mililitros
D= 5 g / 2 cm3= 2.5 g / cm3

Peso C6H1206: 5 gramos

Volumen inicial agua: 10 mililitros
Volumen final agua: 3 mililitros
D= 5 g / 3 cm3 = 1.66 g / cm3

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:

● Analizar la solubilidad en el agua de compuestos como el azúcar y la sal.

● Manejar de manera adecuada todos los instrumentos de medición de

longitud y volumen.

● Realizar correctamente ejercicios referentes a la densidad.

CONCLUSIONES GRUPALES DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

● El azúcar es más soluble en el agua que la sal, ya que la sal tiene

enlaces iónicos, mientras que el azúcar tiene grupos hidroxilos los
cuales forman puentes de hidrogeno con el agua.

● El azúcar tuvo un mayor volumen y por ende su densidad es menor, ya

que la densidad es inversamente proporcional al volumen.
APLICACIONES DESDE SU NIVEL ACADÉMICO:

● El adquirir conceptos referentes a la masa y el peso nos permite

entender como estos factores afectan e influye en las medidas de
cualquier procedimiento.
● Es importante conocer conceptos básicos de la biología y la bioquímica
para entender procedimientos.

TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABÓLICA, BIOQUÍMICA I:

PRÁCTICA # 3

DISOLUCIONES Y COLOIDES
Preparado:

José Joaquín Osorio Ríos, profesor asistente, facultad ciencias de la salud, universidad de manizales
Tenga en cuenta:
Aplicación del trabajo de laboratorio a la práctica y como el trabajo de
experiencias contribuye a los procesos diagnósticos: posibles patologías, que
se pueden detectar con la interpretación correcta de resultados en la prueba y
las manifestaciones clínicas.

Desde su nivel académico, observe: los valores alterados en resultados y

causales (preparaciones, instrumentos, calibración, tiempos, entre otros).

NOTA: por BIOSEGURIDAD el alumno antes de entrar al laboratorio debe

tener el manual de prácticas y el uniforme aunado a: delantal abrochado
anti fluido (mangas largas con puño), guantes (mínimo 3 por práctica),
gorro anti fluido, tapabocas, gafas (opcional). Requerimientos sin los
cuales, NO puede acceder al laboratorio.

MATERIALES:

Balanza analítica

Pre pipetas

Pipetas

Probetas

Vasos de precipitados

Tubos de ensayo

Espátulas

NaCl

Sacarosa

Agua

HCL concentrado

Ovoalbúmina

Etanol

Enfoque: diseñe una práctica en la cual puedan aplicar lo

aprendido durante la bioquímica práctica. Ejemplo: tendencia del
PH en líquidos orgánicos, compuestos químicos en la sangre, orina,
saliva entre otros.

REFERENTES CONCEPTUALES DE LA PRÁCTICA:

Propiedad física y química del agua; solución, soluto, solvente,

coloide, molaridad, molalidad, normalidad

REFERENTES DE LAS DISOLUCIONES:

El tamaño de las partículas de soluto, para moléculas o iones, es de

1 nanómetro (nm) máximo = 0.001 micrometro= 1X 10-6 mm

Los componentes en la disolución no se separan al dejarla en

reposo.

Los componentes en la disolución no se separan por simple filtrado.

La disolución es homogénea.

Las proporciones de los componentes en la disolución son iguales

en cualquier muestra de ella.

REFERENTES DE LOS COLOIDES:

El diámetro de las partículas coloidales es de 1 a 500 nm.

Los componentes de la disolución coloidal no se separan al dejarla

en reposo.

La disolución coloidal no necesariamente es homogénea.

La apariencia de la disolución coloidal puede verse opaca

DISOLUCIONES.

La molaridad (M) de una disolución se define como el número de

moles de soluto disueltos en 1 litro de solvente.

M= moles de soluto /litro de solvente

Las concentraciones de disoluciones para sólidos y líquidos,

expresadas en porcentajes se preparan en forma similar. Si es un
componente sólido el que se quiere disolver la relación es
porcentaje peso – volumen (%p/v)

%(p/v) = peso de soluto / 100 ml de solvente X 100%

Para líquidos se utilizan el volumen deseado y se coloca en 100 ml

de solvente (%v/v)

%(v/v) = volumen de soluto / 100 ml de solvente X 100%

PROCEDIMIENTO:

Conceptual y contextual:

Prepare las disoluciones en 50 ml (utilice como referente el balón

aforado):

1-Azúcar (sacarosa) 10% (250 ml)

2-Sal (NaCl) 0.2 M (100 ml)

3-Ácido Clorhídrico (HCL) 3% (50 ml)

PREPARACIÓN:

1-Azúcar (sacarosa)= 10%(250 ml)

Peso soluto = 10% / 250 ml X 100%

Peso soluto: 5gr.

Volumen solvente: 45ml

2-Sal (NaCL) 0.2 M) 100 ml)

Peso molecular: Na=23gr; CL=35

1.0 M 58gr. NaCL

0.2M 11,6
X=11,6gr. NaCL en 1000ml (un litro)

Prepare para 100 ml= 1,16gr. NaCl

Prepare para 50ml= 0.58gr. NaCl

3-Ácido Clorhídrico (HCL) 3% 50 ml

Volumen soluto= 3% X 50 ml / 100%

Volumen soluto =1,5ml HCL

Volumen solvente=48.5ml

Movimiento browniano:

Utilice una gota de tinta china, y con ayuda del microscopio en 40X,
observe los movimientos en medio acuosos, continúo y rápido, ya
que poseen cargas similares, se repelen entre sí
Solubilidad y precipitación:

Utilice 4 tubos de ensayo y vierta 1 ml en c/u ovoalbúmina diluida.

En cada tubo agregue 2 ml y observe:

1- Blanco o patrón = agua, observe el color transparente. La

proteína no se desnaturaliza ya que no hay presencia de
enzima pepsina.
2- Etanol al 90%, observe la desnaturalización parcial de la
proteína.
3- HCL al 3%su desnaturalización es parcial y en referencia a
su ph este sube, debido a su dilución.
4- HCL concentrado su desnaturalización es total y en
referencia a su ph este es bajo.
Analice la relación desnaturalización Vs pH.

Dependiendo de los cambios de ph la desnaturalización es total

o parcial.
VALORES DE REFERENCIA: al usar el agua no ocurre nada ya que la
proteína no se desnaturaliza, con el etanol la proteína se disuelve
parcialmente ya que este posee una alta polaridad y deshace su
estructura terciaria, y al usar el HCL se observa que este en una baja
concentración desnaturaliza parcialmente la proteína y al usarlo de una
manera concentrada lo desnaturaliza por completo debido a su bajo ph.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: Observar como se da el proceso de

desnaturalización de las proteínas dependiendo del soluto utilizado en
cada tubo de ensayo.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES DE LA PRÁCTICA: Como resultado al

usar el agua no ocurre nada ya que no es capaz de desnaturalizar la
proteína al tener un ph estable, al usar los otros solutos se observa el
grado de desnaturalización de la proteína dependiendo de la cantidad de
soluto usada y del ph del mismo.

CONCLUSIONES GRUPALES DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

obtuvimos que las proteínas pueden despolarizarse y desnaturalizarse ya
que se desorganiza su estructura terciaria debido a la alta polaridad de
algunos solutos y que una proteína también puede llegar a
desnaturalizarse si el ph afecta la carga electrica de los aminoácidos de
las proteínas.

APLICACIONES DESDE SU NIVEL ACADÉMICO: Podemos usar la practica

para comprender como diversas sustancias o cambios del ph pueden
afectar al metabolismo de las proteínas en el organismo lo que nos ayuda
a comprender como funcionan unas enfermedades.

REFERENTES CONTEXTUALES EN LA PRÁCTICA:

HCL diluido: a menor concentración del reactivo menor su capacidad para

procesos de desnaturalización (ejemplo: la proteína de la
ovoalbúmina/desnaturalización parcial).

HCL concentrado: a mayor concentración del reactivo, mayor su capacidad

para procesos de desnaturalización (ejemplo: la proteína de la
ovoalbúmina/desnaturalización total)

PH: la desnaturalización de la ovoalbúmina esta correlacionada con los

cambios de PH. Al entrar en contacto con el reactivo el pH baja o sube
dependiendo de la concentración del reactivo (PH: inversamente proporcional a
la concentración/a menor concentración mayor su PH).
 TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABÓLICA, BIOQUÍMICA I:

PRÁCTICA # 4

PH

ÁCIDOS Y BASES, INDICADORES

Preparado:

José Joaquín Osorio Ríos, profesor asistente, facultad ciencias de la salud, universidad de Manizales
Preparado:

José Joaquín Osorio Ríos, profesor asistente, facultad ciencias de la salud, universidad de Manizales

Tenga en cuenta:
Aplicación del trabajo de laboratorio a la práctica y como el trabajo de
experiencias contribuye a los procesos diagnósticos: posibles patologías, que
se pueden detectar con la interpretación correcta de resultados en la prueba y
las manifestaciones clínicas.

Desde su nivel académico, observe: los valores alterados en resultados y

causales (preparaciones, instrumentos, calibración, tiempos, entre otros).

NOTA: por BIOSEGURIDAD el alumno antes de entrar al laboratorio debe

tener el manual de prácticas y el uniforme aunado a: delantal abrochado
anti fluido (mangas largas con puño), guantes (mínimo 3 por práctica),
gorro anti fluido, tapabocas, gafas (opcional). Requerimientos sin los
cuales, NO puede acceder al laboratorio.

MATERIALES:

PH metro

Tiras reactivas para PH

Pre pipetas y pipetas

Probetas

Vasos de precipitados

Tubos de ensayo

HCL-ácido clorhídrico. Diferentes concentraciones

H2SO4-ácido sulfúrico. Diferentes concentraciones

NAOH-hidroxido de sodio. Diferentes concentraciones

Ca (OH) 2-hidroxido de calcio, diferentes concentraciones

Soluciones indicadoras de PH

C12H22O11-sacarosa

Leche (lactosa)

Orina

REFERENTES CONCEPTUALES DE LA PRÁCTICA:

Propiedades de los ácidos: los ácidos liberan H+, desnaturalizan proteínas

Propiedades de las bases: las bases liberan OH, desnaturalizan proteínas.

Indicadores: son componentes químicos que en presencia de grupos cargados

iónicamente reaccionan cambiando su color inicial, sus valores no son exactos
ni precisos, pero indican los ácidos y bases.

Fuerza de ácidos y bases, reacción de neutralización, ionización del agua,

concepto de PH, titulación, cambio de los indicadores químicos en valores

Líquidos corporales y tendencias del PH:

Sangre arterial = 7.40; sangre venosa = 7.35; liquido intersticial = 7.35;

L.E.C. =7.40; L.I.C. = 6.0 a 7.40; jugo gástrico = 1.0 a 3.50;

Jugo pancreático = 8.00 a 8.30; bilis = 7.80; jugo intestinal = 7.50 a 8.00

Orina = 4.50 a 8.00; sudor = 3.80 a 5.60; leche materna = 7.40;

Saliva = 6.00 a 7.00; semen = 7.50; PH compactible con la vida = 6.80 a 8.00

Ácidemia menor 7.00; alcalemia mayor a 7.00

PROCEDIMIENTO.

Referente: modo de instrumentación de PH metro, antes de iniciar.

Con diferentes disoluciones preparadas, haga lectura de PH, utilizando PH

metro y tiras reactivas. Prepare una tabla comparativa (adjunta) y sus
resultados en orden ascendente ubíquelos en la tabla.

Analice los compuestos ácidos y básicos en referencia a la tabla

Indicadores para PH:

Utilice los indicadores disponibles. Haga uso de tubos de ensayo y compare su

coloración en referencia a los ácidos (H+) y las bases (OH).

En cada tubo de ensayo coloque diferentes disoluciones de ácidos y bases (2

ml) y a cada tubo adicione de 2 a 4 gotas del titulador y correlacione sus
características físicas en referencia a su coloración.

Analice y tare sus resultados correlacionados en la tabla..

VALORES DE REFERENCIA:

PH:

Ácido clorhídrico: 2

Hidróxido de sodio concentrado: 12

Hidróxido de sodio 0,1 N: 8

Acido sulfúrico concentrado: 1

Acido sulfúrico 3 N: 1

Acido sulfúrico 10%: 1

Ácido clorhídrico 1M: 1

Ácido acético: 5

Leche: 7
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:

-Determinar las diferentes concentraciones de hidrogeniones en las diferentes

sustancias usadas en la practica
-Conocer como las diferentes concentraciones de una sustancia alteran los
niveles de PH

-Comprender los usos industriales de algunas de estas sustancias y/o donde se

encuentran

-Diferenciar entre sustancias alcalinas y sustancias ácidas

RESULTADOS Y OBSERVACIONES DE LA PRÁCTICA:

Algunos de los ácidos estudiados, tales como el ácido sulfúrico se encontraban

con un PH muy bajo a lo cual estos se ionizan totalmente en soluciones
acuosas, este ácido por lo tanto pertenece a un grupo de ácidos fuertes

También se observaron sustancias con un PH elevado siendo sustancias

totalmente alcalinas tales como el hidróxido de sodio que cambio la tonalidad
del papel tornasol

Y por ultimo se observo que la sustancia leche tiene un PH neutro de 7 tal y

como lo es el del agua

CONCLUSIONES GRUPALES DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

Ácidos con PH bajos son totalmente corrosivos

Algunas de estas sustancias poseen olores fuertes y son irritantes al ser

humano, irritando ojos y dermis

La mayoría de estas sustancias tienen uso industrial

Determinar el PH es totalmente importante para conocer las propiedades tanto

físicas como químicas de las sustancias, conocer su toxicidad en el cuerpo
humano o donde se pueden encontrar

APLICACIONES DESDE SU NIVEL ACADÉMICO:

- Ácidos con PH bajo, como el clorhídrico son utilizados por nuestro
cuerpo en el lumen estomacal para la degradación de las sustancias
ingerida, siendo corrosivos rompiendo enlaces para hacer que estas
sustancias sean de mucha mas facilidad para la absorción por parte
del organismo y su transporte por todos los tejidos del cuerpo
humano y su debida utilización
- Bases como el hidróxido de sodio son utilizados a nivel industrial
para la elaboración de diferentes productos ya que son fácilmente
disueltos en agua, en especifico este es utilizado para la elaboración
de papel o jabones, y nivel domestico es utilizado para destapar
cañerías debido a que también es corrosivo
- Sustancias extrañas ácidas ingeridas por vía oral son toxicas e
irritativas en el cuerpo humano, pudiendo provocar graves
alteraciones e incluso la muerte
- El PH del liquido extracelular es casi neutro estando entre rangos
normales de 7.4 a 7.8 en la sangre
- Algunas de estas sustancias como el ácido acético son utilizados en
la histología para la preservación de tejidos, también funciona como
tinte en las colposcopias para detectar infecciones por virus del
papiloma humano
REFERENTES CONTEXTUALES EN LA PRÁCTICA:

Con los datos obtenidos en la práctica, referenciado en PH de menor a mayor

realice la curva en la tabla siguiente: