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201504– MICROBIOLOGIA
La primera versión de las guías que se proponen para el componente práctico del curso de
Microbiología, fueron diseñadas en el año 2004 por la Doctora Carmen Eugenia Piña López,
docente de la UNAD.
El contenido didáctico de este componente práctico ha sido apoyado por las Doctoras Angélica
Yara y Rocío Gómez y ha tenido varias actualizaciones a partir de su creación, esas
actulaizaciones fueron desarrolladas por la Ingeniera Marta Cecilia Vinasco Guzmán, tutora del
CEAD Pitalito, y por la Doctora Yurby Salazar docente de la UNAD, quienes han apoyado el
proceso de revisión de estilo e hicieron aportes disciplinares, didácticos y pedagógicos.
La última versión de este componente práctico ha sido revisado y actualizado por Mery Liliana
López Martínez, Docente Asistente de la UNAD en el CCAV de Pasto, quien actualmente se
desempeña como directora nacional del curso de Microbiología.
La versión que se presenta, responde a las necesidades creadas por la situación actual del país
frente a la pandemia generada por COVID-19.
Se plantea como alternativa el desarrollo del componente práctico de manera virtual apoyado en
vídeos de distribución libre y fotografías resultado de laboratorios adelantados por la red de tutores
de Microbiología en periodos anteriores.
INDICE DE CONTENIDO
Pág.
CARACTERISTICAS GENERALES 4
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 36
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Propósitos:
Metas:
Competencias:
Hora laboratorio 16
Propósito:
Fundamentación Teórica
Descripción de la práctica
Computador
Metodología
Sistema de Evaluación
Se entregará un ÚNICO INFORME que consolida las 7 prácticas virtuales. Por favor revisar el anexo con el
formato de entrega.
1. ¿Qué es un medio de cultivo; de qué están compuestos principalmente; cómo se clasifican según su
proporción de Agar y según su suministro de nutrientes?
Propósito:
En esta práctica se va a demostrar la presencia de microorganismos en el ambiente que nos rodea. Con
este fin se toman muestras de diferentes sitios y se las siembra en un medio de cultivo que contiene las
sustancias nutritivas que las bacterias necesitan para desarrollarse, se las lleva a incubar a la temperatura
apropiada y se las deja el tiempo necesario para que crezcan y se puedan observar las colonias a simple
vista y así determinar las características macroscópicas de esas colonias.
Fuente: http://projectomartin.blogspot.com/2012/12/practica-8_9.html
Descripción de la practica
Se van a observar diferentes cajas de Petri con crecimiento de colonias bacterias, para entender que los
microorganismos se encuentran en todos los ambientes.
Computador
Metodología
A continuación encuentra una serie de fotografías de cajas de petri con cultivos de microorganismos.
Observe detenidamente cada fotografía y complete los datos de la tabla describiendo la cantidad de
crecimiento (mucho, abundante, regular, poco) y las características de las colonias según:
Sistema de Evaluación
La evaluación se llevará a cabo por medio de las siguientes actividades:
Se entregará un ÚNICO INFORME que consolida las 7 prácticas virtuales. Por favor revisar el anexo con el
formato de entrega.
Cabello
Dedos
Mesón
Mesón
Propósito:
Objetivo:
Intencionalidades formativas
Determinar las condiciones necesarias para realizar la siembra de
microorganismos
Fundamentación Teórica
Sembrar es colocar una muestra de inóculo, en un medio de cultivo para obtener el crecimiento de los
microorganismos. Para ello se extiende la muestra sobre caja de Petri, que contiene un medio compuesto por
las sustancias que necesitan los microorganismos para crecer. A veces se añaden otras clases de sustancias;
por ejemplo, para impedir el crecimiento de otras bacterias que podrían contaminar el cultivo. La siembra se
puede hacer en otros tipos de medios de cultivo, como tubos de vidrio con gel, frascos con líquidos nutritivos
para los microorganismos.
Si el cultivo bacteriano tiene éxito, crecerán "colonias" de bacterias en el medio de cultivo. Estas colonias
tienen características de color, forma, tamaño etc. propias de cada bacteria y esto nos ayuda a identificarlas.
También se puede someter a las bacterias de las colonias a pruebas bioquímicas o de otro tipo para lograr su
identificación. Algunas bacterias son muy difíciles de cultivar, otras tardan mucho tiempo en crecer y algunas,
finalmente, no se han conseguido cultivar.
Descripción de la practica
Computador
Metodología
Para observar la forma en que se realizan las diferentes técnicas de siembre observe los siguientes vídeos y
recursos:
Fuente: American Society For Microbiology. . (D. Sue Katz, Rogers State University, Claremore,
OK). Disponible en: https://www.asmscience.org/content/education/imagegallery/image.3150
Siembra en medio sólido – Estrías
Micrococcus luteus en agar Agar Triptona Soja (TSA)
Fuente: American Society For Microbiology. . (Donald Lehman, University of Delaware, Newark,
DE) Disponible en: https://www.asmscience.org/content/education/imagegallery/image.2841
Sistema de Evaluación
Se entregará un ÚNICO INFORME que consolida las 7 prácticas virtuales. Por favor revisar el anexo con el
formato de entrega.
3. ¿Qué técnicas existen para hacer una cuantificación del crecimiento de los microorganismos?
Propósito:
Objetivo:
Intencionalidades formativas
Diferenciar las diferentes técnicas de tinción que habitualmente se
utilizan en un laboratorio de Microbiología.
Fundamentación Teórica
La observación microscópica de las bacterias se facilita cuando han sido coloreadas. Se acostumbra fijar las
bacterias en la lámina portaobjetos para poder teñirlas con facilidad.
La fijación puede hacerse con solventes o con calor. En cualquier caso se trata e deshidratar la célula y
coagularla con proteínas.
Las coloraciones pueden ser simples cuando se utiliza un solo colorante o compuestas cuando se utilizan 2 ó
más colorantes. También se puede hacer una coloración negativa en la cual se tiñe el fondo, además de la
bacteria, para poder observar la cápsula.
Descripción de la practica
Computador
Metodología
Para entender las técnicas de tinción observe los siguientes vídeos y recursos:
Resultados
Sistema de Evaluación
Se entregará un ÚNICO INFORME que consolida las 7 prácticas virtuales. Por favor revisar el anexo con el
formato de entrega.
Propósito
Fundamentación Teórica
Los aspectos físicos que influyen de manera determinante en el crecimiento microbiano son: la
temperatura, el pH y la presión osmótica.
Los químicos son: el agua, las fuentes de carbono y de nitrógeno, los minerales, el oxígeno y los
factores orgánicos del propio microorganismo.
Descripción de la práctica
Metodología
A continuación encuentra una serie de fotografías con los procedimientos y los resultados.
1. Influencia de la temperatura
c. Incubación
Tubo 2: A 20ºC
2. Influencia del pH
b. Recoja con el asa estéril la bacteria indicada y siembre en los tubos marcados.
c. Incube los tres tubos a temperatura de 37 ºC por 24 a 48 horas.
d. Cumplido el tiempo de incubación observe la presencia de turbidez en los tubos, lo cual indica que
hay crecimiento.
b. Recoja con el asa estéril la bacteria indicada y siembre en los tubos marcados.
c. Adicione 2 ml de aceite mineral estéril a los tubos 1 y 3. Con el aceite mineral se crea un ambiente
anaerobio. Los tubos se observarían como se detalla a continuación:
d. Incube los tubos a 37ºC por 24 a 48 horas.
Sistema de Evaluación
Propósito:
Fundamentación Teórica
Los desinfectantes de bajo nivel (Fenoles, amonio cuaternario) pueden destruir la mayor parte de las
formas vegetativas bacterianas, tanto grampositivas como gramnegativas, algunos virus (virus con
envoltura lípidica) y hongos (levaduras), pero no Mycobacterium spp, ni las esporas bacterianas.
Los desinfectantes de nivel intermedio consiguen inactivar todas las formas bacterianas vegetativas,
incluyendo Mycobacterium tuberculosis, la mayoría de los virus (virus con y sin envoltura) y hongos
filamentosos, pero no destruyen necesariamente las esporas bacterianas.
En cambio, los desinfectantes de alto nivel (formaldehídos, peróxidos, hipocloritos) consiguen destruir
todos los microorganismos, excepto algunas esporas bacterianas.
Descripción de la práctica
Computador
Metodología
1. Efecto de la esterilización
c. Coloque 1 ml del cultivo de E. coli en cada uno de los tubos de ensayo vacíos y llévelos al
tratamiento indicado anteriormente.
d. Una vez terminado el tratamiento térmico, siembre una asada de cada uno de los tubos sometidos
a la acción del calor y el control en los tubos correspondientes con caldo nutritivo.
f. Observe el crecimiento en los tubos, en cada uno de los tratamientos. El signo + indica crecimiento
y el – que no hubo crecimiento. Diligenciar la tabla 1 en el informe.
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
b. Marque 4 cajas de petri con agar nutritivo así: 15, 30, 45 y 60 segundos
c. Añada 1 ml. de cultivo de Staphylococcus aureus al tubo que contiene el alcohol.
d. De acuerda los tiempo marcados en la caja de agar nutritivo vaya tomando una muestra del tubo
con alcohol+ Staphylococcus y siémbrela en la caja de agar nutritivo correspondiente.
30 segundos
45 segundos
Fuente: Red Tutores Microbiología – Ciencias Básicas
60 Segundos
Sistema de Evaluación
Se entregará un ÚNICO INFORME que consolida las 7 prácticas virtuales. Por favor revisar el anexo
con el formato de entrega.
TRATAMIENTO CRECIMIENTO
Control
Autoclave
Agua hirviendo durante 30´
Agua a 60 grados por una hora
TABLA 2
2. ¿Con que criterios se selecciona un agente químico para desinfectar: superficies, ambientes,
objetos contaminados, la piel?
REFERENCIAS
APHA, AWWA. WPCF. 1989. Standar Methods for the examination of water and wasterwater.
GARCES, Emira. 2003. Morfología y Clasificación de los hongos. Notas de clase Universidad
Nacional de Colombia. Editorial UNIBIBLIOS.
GRANT Y LONG. 1999. Microbiología Ambiental. Editorial Acriba. España.