See discussions, stats, and author profiles for this publication at: https://www.researchgate.

net/publication/265510089

Áreas Limpias, control e higienización después de un cambio

Article · December 2009

DOI: 10.13140/2.1.3087.8083

CITATIONS READS

2 5,003

1 author:

Biunayki Reyes
Center for Genetic Engineering and Biotechnology
30 PUBLICATIONS   267 CITATIONS   

SEE PROFILE

Some of the authors of this publication are also working on these related projects:

Cleaning Validation automatic filling machine View project

Environmental monitoring of clean rooms View project

All content following this page was uploaded by Biunayki Reyes on 10 September 2014.

The user has requested enhancement of the downloaded file.

salas blancas
Lic. Biunayki Reyes Díaz1*, Ing Caridad A Gasmuri
González1, MSc Gudelia Pérez2, MSc Ania Díaz Ferrer2,
Lic Yadira Mora López2, Téc. Noelia Baltrell Mena1, Tec
Suanai Brown Valdés1, Tec Amaury Hierrezuelo Malber-
ty1, Tec Mirelys Cespedes Pérez1, Tec Dayanna Ramos
Pérez1, Ing. Lazaro Sánchez González1, Tec Caridad E
Isla1, Téc Dorelis Ortiz1, Téc Olga L Gonzalez1, y Lic.
Tener un plan de validación de limpieza para los procedimientos
Luciano Francisco Hernández3.
1Departamento Control de Procesos. Grupo Control Mi-
de limpieza de la planta es una de las actividades que nos agre-
crobiológico, 2Dirección Aseguramiento de la Calidad. ga valor, pues nos da seguridad sobre los productos que estamos
3Dirección de Producción. Centro de Ingeniería Genéti-
ca y Biotecnología P.O. Box 6162, Habana 10600, Cuba elaborando,

Áreas Limpias, control e higienización

después de un cambio

U
no de los problemas principales a los
cuales la industria farmacéutica se
enfrenta en la actualidad, involucra
demostrar el cumplimiento con los están-
dares ambientales en sus áreas de trabajo,
principalmente en áreas consideradas como
Áreas Limpias. Por los controles requeridos
para este nivel y su compromiso con la ela-
boración de medicamentos con la calidad
microbiológica requerida, por este motivo
es crítico e indiscutible que cualquier em-
presa, en este rubro, siga las normas de las
Buenas Prácticas de Fabricación [BPF] (en
nuestra industria la cual se dedica a la ob-
tención de productos Biotecnológicos esta-
mos regidos fundamentalmente por las nor-
mas ISO, y por diferentes guías regulatorias
como son: Centro Estatal de Calidad de los
Medicamentos (CECMED), Food and Drug
Administration (FDA), Organización Mundial
de la Salud (OMS), International Conference
on Harmonization (ICH) y la European Medi-
cines Agency (EMEA).
La validación es una parte esencial de
las Buenas Prácticas de Fabricación. Hay
dos principales fuentes de referencia en la
documentación de la OMS en relación con
la validación. En primer lugar, el texto de
BPF de la OMS que cubre la validación en
la Parte Uno, Sección 5 recalca que la va-
lidación debe conducirse de conformidad
con protocolos predefinidos. Deben prepa-
rarse y almacenarse informes escritos que
resuman los resultados y las conclusiones
registradas. Los procesos y procedimientos
deben establecerse sobre la base de un es-
tudio de validación. Debe realizarse una re-
validación periódica para asegurar que los
procesos y los procedimientos sigan siendo
capaces de lograr los resultados concebi-
dos. Especial atención debe prestarse a la
validación del proceso, los ensayos y los
procedimientos de limpieza.
Siempre que se habla de un proceso de
validación, referido por las Guías de BPF o
los diferentes artículos publicados, se indica
la planificación de la revalidación, en todos
los casos solo es mencionado, y como se
conoce no existe una receta, cada labora-
torio y/o institución rige sus bases, o me-
canismos; ejemplo de estas guías donde
se indica que se debe realizar revalidación
pudiéramos mencionar, algunas como:
• Guide to Cleaning Validation in API
plant. Cleaning Validation in Active
pharmaceutical Ingredient manufactu-
ring plants. September 1999 APIC, don-
de en su acápite 6. Política de Validacion
de limpieza, menciona que debe existir
la política de revalidación, así como
también en el acápite, referido al infor-
me final de la validación plantea “Any
recommendations based on the results
or relevant information obtained during
the study including revalidation practi-
ces if aplicable”.
• Anexo 15 to the EU Guide to Good Ma-
nufacturing Practice
• Cualificación y validación Revalidación
45. Las instalaciones, sistemas, equipos
y procesos, incluida la limpieza, se eva-
luarán periódicamente para confirmar
que siguen siendo válidos. Cuando no
se hayan producido cambios significa-
tivos respecto al estado validado, esta
necesidad de revalidación se cubrirá con
una revisión que demuestre que las ins-
talaciones, sistemas, equipos y procesos

Tabla 1. Concentración de partículas en el aire permitidas para cada grado de

clasificación de las áreas.

Tabla 2. Clasificación de aire de áreas limpias y niveles de acción recomendados para

la calidad microbiológica. “Guía de Normas de Correcta Fabricación de Medicamentos
de Uso Humano y Veterinario Anexo I Fabricación de medicamentos estériles. Agencia
española de medicamentos y productos sanitarios, 2009”.

2 NOVIEMBRE/DICIEMBRE09 Farmespaña INDUSTRIAL

 cumplen las exigencias obligatorias.
• Health Products and Food Branch Ins-
pectorate Guidance Document Cle-
aning Validation Guidelines Date issued:
2000-05-01 Date of implementation:
2000-05-01
• 7.0 Documentation A cleaning valida-
tion protocol should describe the pro-
cedure used to validate the cleaning
process. It should include in addition to
other information…. acceptance criteria
with rationales and conditions for reva-
lidation.
La revalidación está fraccionada en dos
categorías:
1. La revalidación después de algún cam-
bio.
2. La revalidación periódica.
En la categoría anterior, los cambios ca-
racterísticos que requieren revalidación
incluyen cambios en una materia prima o
el material de envase, los cambios en los
parámetros del proceso, los cambios en el
equipo, incluidas reparaciones mayores y
los cambios en los locales
Los cambios en un proceso de limpieza
validado, y los cambios en un proceso de
fabricación o equipos que pueden afectar
a un proceso de limpieza validado, deben
hacerse de conformidad con los procedi-
mientos aprobados para el control de cam-
bio. Este cambio puede dar lugar a pruebas
adicionales para demostrar que los proce-
sos de limpieza permanecen en un estado
de control.
Aunque es un requerimiento regulatorio
designado formalmente y bien reconocido,
la validación de la limpieza continúa siendo
un problema para muchos fabricantes e ins-
pectores. Puede ser una exigencia compleja,
ya que requiere de una comprensión profun-
da del proceso, materiales, y los productos
químicos involucrados en la limpieza.
Para un mejor entendimiento de estos
procesos damos a conocer algunas consi-
deraciones importantes para llevar a cabo
una tarea como la de reevaluar el proceso
de limpieza e higienización de una área lim-
pia, después de producido algún cambio.
Primero refrescaremos algunos términos
importantes:
Validación de limpieza: prueba documenta-
da de que un procedimiento de limpieza
consistentemente reducirá los residuos
de ingredientes farmacéuticos activos
(IFA), los agentes de limpieza (AdL) y sa-
nitización, las endotoxinas bacterianas y la
carga microbiana en las superficies de los
equipos, que tienen contacto directo con

Farmespaña INDUSTRIAL
salas blancas
Tabla 3. Tabla de Ejemplo de operaciones para preparación aséptica
el producto, a niveles aceptables para el
procesamiento de medicamentos.
Revalidación: Repetición de la validación
de limpieza para garantizar que los cam-
bios introducidos de conformidad con los
procedimientos de control de cambios no
afectan negativamente el procedimiento
de limpieza.
Control de Cambios: Procedimiento escrito
que describe la(s) acción(es) a tomar si se
propone un cambio de instalaciones, ma-
teriales, sistemas, equipos y/o procesos
usados en la fabricación, envasado o en-
sayo de un producto farmacéutico o que
puede afectar la operación del sistema de
gestión de la calidad o de apoyo. Su obje-
tivo es determinar las acciones necesarias
para garantizar y documentar que el siste-
ma se mantiene en un estado validado.
Limpieza: Se define como el grado de acep-
tación de sustancias, partículas y microor-
ganismos no deseables cuyo efecto sea
adverso al producto o proceso.
Higienización: Proceso que se realiza en las
áreas limpias clasificadas con vistas a re-
ducir la contaminación microbiológica a un
nivel permisible según los resultados histó-
ricos del control o a un nivel de referencia
según los establecidos.
Área limpia: Área que cuenta con un control
definido del ambiente respecto a la con-
taminación microbiana o por partículas,
con instalaciones construidas y usadas de
tal manera que se reduzca la introducción,
generación y retención de contaminantes
dentro del área.
Plan de monitoreo: Este debe establecerse
por medio de una Evaluación del Riesgo y
con base en el tipo de instalación, las posi-
bles causas de contaminación y el impacto
de la contaminación en el producto o pro-
ceso, que se lleva a cabo en el cuarto.
Clasificación de salas limpias y
dispositivos de aire limpio
Las salas limpias y los dispositivos de aire
limpio deben clasificarse según la norma
4 NOVIEMBRE/DICIEMBRE09 Farmespaña INDUSTRIAL
Tabla 4.
La validación es una parte
esencial de las Buenas
Prácticas de Fabricación
EN ISO 14644-1. La clasificación debe
diferenciarse claramente de la monitori-
zación ambiental del proceso en funciona-
miento. En la tabla 1 se muestra la máxima
concentración de partículas en el aire per-
mitidas para cada grado.
Para clasificar las zonas en grado A debe
tomarse en cada punto de muestreo un
volumen mínimo de muestra de 1 m3. Para
el grado A, la clasificación de partículas del
aire es la ISO 4.8 que indica un límite de
tamaño de partícula ≥ 5,0 μm. Para el grado
B (en reposo), la clasificación de partículas
del aire es la ISO 5 para los dos tamaños
de partículas considerados; Para el grado C
(en reposo y en funcionamiento), la clasifi-
cación de partículas del aire es la ISO 7 y
la ISO 8, respectivamente. Para el grado D
(en reposo), la clasificación de partículas del
aire es la ISO 8. La norma EN/ISO 14644-1
describe la metodología a seguir a la hora
de clasificar, la cual define el número míni-
mo de puntos de muestreo y el tamaño de
la muestra, basados en el límite de clase
para el mayor tamaño de partícula tomada
en consideración y en el método de evalua-
ción de los datos recogidos.
Es impráctico y caro establecer un míni-
mo de puntos a monitorear basado exclu-
sivamente en el área del cuarto en m2. Este
método trabaja para la certificación, sin
embargo deben establecerse lineamien-
tos independientemente del proceso y con
base en la Evaluación del Riesgo siendo ex-
tremadamente importante para determinar
qué y donde monitorear.
El enfoque del programa de pruebas
es monitorear el desempeño de una ins-
talación, con el propósito de identificar
cambios significativos en la eficiencia. Este
proceso asegurará que los cambios pueden
evaluarse, antes de que se conviertan en
una fuente de contaminación importante,
que afecte la calidad, productividad y ren-
dimiento.
Las designaciones ISO 14644-1 propor-
cionan los valores uniformes de concen-
tración de partículas para áreas limpias en
múltiples industrias. Una concentración de
partículas ISO 5 es igual a una Clase 100 y
aproximadamente igual a un Grado A de la
Unión Europea.
Límites recomendados para la monitori-
zación microbiológica de las zonas limpias
“en Operación” y en descanso”. Según
“European Medicines Agency”
Cuando se realicen operaciones asépti-
cas, la monitorización debe ser frecuente
utilizando métodos como placas de sedi-
mentación, muestreo volumétrico del aire
y de superficies (por ejemplo, hisopos y
placas de contacto). Los métodos de mues-
treo utilizados “en funcionamiento” no de-
ben interferir en la protección de la zona.
Los resultados de la monitorización deben
estudiarse al revisar la documentación del
lote para la liberación del producto termi-
nado. Las superficies y el personal deben
supervisarse tras las operaciones críticas.
También es necesario realizar una monito-
rización microbiológica adicional distinta a
la de producción como, por ejemplo, tras
la validación de sistemas, limpieza y desin-
fección.
Revalidaciones / Control de Cambios
• Los protocolos deben establecer cuan-
do se necesitará realizar la revalidación
del sistema o de un proceso.
• La revalidación está vinculada al control
de procesos y el control de cambios
“El Desafío es Mantener el Proceso Validado”
Los cambios son inevitables y siempre aca-
barán por aparecer. Se deben identificar las
fuentes y mantener procedimientos ade-
cuados para su control. La complejidad de
los procesos y la exigencia de mantenerse
al día para ser competitivo se traducen en
una mayor necesidad de cambios.
Existe un procedimiento escrito para des-
cribir las acciones que se deben realizar si se
propone un cambio en el entorno (o la insta-
lación) de fabricación, el método de limpieza
e higienización, o cualquier otro que pueda
afectar a la calidad del producto.
Si los cambios puede que influyan en
la calidad del producto se solicitarán, do-
cumentarán y aceptarán formalmente. Se
evaluará y se hará un análisis de riesgos de
los posibles efectos que sobre el producto
originaría un cambio de instalaciones, sis-
temas o equipos. Deberá determinarse la
necesidad de una nueva revalidación, y el
alcance de la misma.
Los procedimientos de limpieza e higie-
nización, se evaluarán periódicamente para
confirmar que siguen siendo válidos cada
2 años. Cuando no se hayan producido
cambios significativos respecto al estado
validado, esta necesidad de revalidación
La validación de la
limpieza continúa siendo
un problema para muchos
fabricantes e inspectores
se cubrirá con una revisión estadística his-
tórica que demuestre que los procesos de
limpieza cumplieron en el período analiza-
do las exigencias y criterios de aceptación
pre-establecidos.
Calificación en Proceso
En este punto el procedimiento puede
ser realizado teniendo en cuenta el Pro-
tocolo de la Validación de limpieza e hi-
gienización, que anterior al cambio ya fue
aprobado por Aseguramiento de Calidad,
solamente se reajustaron los puntos a
muestrear pues al ampliar el área y aumen-
tar por ejemplo la cantidad de paredes,
puertas, mesas de trabajo y otros materia-
les que anteriormente no existían, la selec-
ción de los puntos a ser muestreados debe
ser reajustada, con la inclusión de nuevos
puntos.
El Diseño experimental para realizar el
procedimiento pudiera ser de la siguiente
forma:
Inicialmente, antes de la limpieza, se rea-
liza un muestreo por placa de contacto de
cada uno de los puntos definidos en la Hoja
de Datos diseñada para la recogida de es-
tos (ver Tabla 4).
Para la realización de la validación y reva-
lidación de higienización y limpieza de las
áreas el diseño sería:
1. La limpieza será supervisada por el Jefe
de la planta a ser validada.
2. La frecuencia de limpieza será la habi-
tual acorde al Programa de Higieniza-
ción y Limpieza y los Procedimientos y el
muestreo de las superficies de las áreas
y del equipamiento será de 3 veces, te-
niendo en cuenta que hasta el momento
es lo generalmente se utiliza para definir
el proceso validado, al menos en cuanto
limpieza se refiere:
salas blancas
• Muestrear antes de la limpieza e hi-
gienización
• Muestrear 1 hora después de la lim-
pieza e higienización
• Muestrear 8 y 10 horas después de la
limpieza e higienización para demos-
trar la conservación de la limpieza en
el tiempo. Se considerará adecuada
la conservación de la limpieza si para
todos los puntos se cumple el crite-
rio de aceptación una vez transcurrida
las 24 horas, coincidiendo con la hora
cero del día siguiente de realizada la
limpieza e higienización
3. Se tomará la correspondiente muestra
de la solución desinfectante a preparar
según lo establecido en el procedimien-
to de preparación de soluciones
4. Se realizará este monitoreo por 3 días
consecutivos quedando de la siguiente
forma
El criterio de aceptación es el cumpli-
miento, en todos los puntos, del criterio
establecido para superficies en correspon-
dencia con la clasificación del área (Clase A,
< 3 UFC/25cm2, Clase B, < 5 UFC/25cm2 y
Clase C, < 25 UFC/25 cm2). Para la superfi-
cie exterior de las cortinas de flujos lamina-
res de techo; así como de las cabinas, los
límites estarán en correspondencia con el
área que rodee a las mismas.
¿Qué método es el utilizado para el mo-
nitoreo de las superficies?
Control Microbiológico de Superficies
El control microbiológico de superficie nos
proporciona información sobre la cantidad
de microorganismos presentes sobre una
superficie, la cual puede ser un equipo,
mesa, ropa, manos del personal, etc.
Esta evaluación generalmente se hace
utilizando: Placas de contacto (RODAC)
Las placas de contacto o RODAC (Re-
plicate Organism Direct Agar Contact) son
placas de 55-60 mm de diámetro llenas con
medio de cultivo hasta obtener una superfi-
cie convexa. Estas placas pueden prepara-
se en el laboratorio o adquirirse comercial-
mente, en nuestra industria contamos con
un grupo de trabajo que están altamente
especializados en la preparación de las
placas, recientemente publicamos nuestro
trabajo en LifeScienceLab correspondiente
al #006 Sept-Oct “Evaluación de la produc-
tividad de dos medios de cultivo para el
muestreo ambiental microbiológico”
¿Cómo Procesar los Datos Obtenidos?
El resultado de los Controles Microbioló-
6 NOVIEMBRE/DICIEMBRE09 Farmespaña INDUSTRIAL
Tabla 5. Ejemplo de un área Clase C muestreado por
placa de contacto, para evaluar higienización del área,
trabajo publicado en FarmaEspaña Industrial mayo-junio,
2009.
Tabla 6.
Los procedimientos de
limpieza e higienización, se
evaluarán periódicamente
para confirmar que siguen
siendo válidos cada 2 años
gicos se expresa en Unidades formadoras
de Colonias (UFC), esta medida no es apta
para Gráficos de Controles convenciona-
les, ya que en general la presencia de mi-
croorganismos no es un fenómeno lineal,
si no que es muy dependiente de la natu-
raleza del Microorganismo, de la presencia
de ellos y de su capacidad de crecimien-
to. Cuando observamos los resultados de
control ambiental gran cantidad de estos
resultados son igual a “0” ufc, con algunos
valores intercalados de 1 y de vez en cuan-
do algún valor anormalmente alto (150)
(en la siguiente tabla ponemos un ejemplo
de esto valores), por lo tanto calcular me-
dia y desviación estándar típica con tales
conjuntos de valores carece de significado
físico real.
Todo esto nos hace que su estadística
sea un poco difícil, pero no imposible. Uno
de los métodos que usamos más frecuente
son los No paramétricos con comparación
de múltiples variables, mediante el paquete
estadístico STATGRAPHICS Centurión ver-
sión XV.
Empleando Pruebas de Wruskal-Wallis
y Friedman las cuales son una alternativa
para el análisis estándar de varianzas que
compara medianas de grupo en lugar de
medias; esta prueba es mucho menos sen-
sible a la presencia de puntos lejanos que
lo que es una ANOVA de una vía y debe
usarse cada vez que la suposición de nor-
malidad dentro de las muestras no sea ra-
zonable.
Según escribió Flickinger en “Pharma-
ceutical Formulation and Quality” (1996);
“La Validación de Limpieza suena lo sufi-
cientemente simple, pero lo es engañosa-
mente. Porque si la cantidad de enorme
trabajo que es requerida para validar los
procedimientos de limpieza, no es realiza-
da correctamente y con adecuada planifica-
ción y justificación científica, los resultados
finales pudieran ser menos de lo que es
pretendido. Y esto se convierte en tiempo
y dinero perdido”. El resultado final es que
lo van a tener que repetir todo de nuevo.
Conclusión
Tener un plan de validación de limpieza
para los procedimientos de limpieza de la
planta es una de las actividades que nos
agrega valor, pues nos da seguridad sobre
los productos que estamos elaborando,
debemos seguir la secuencia correcta de
las actividades, que cada paso que damos
nos agregue valor.
La validación de limpieza provee el signi-
ficado de probar que los niveles de conta-
minación han sido reducidos por debajo de
los límites de aceptación establecidos.
El programa de validación de limpieza
debería contener un programa de monito-
reo racional para mantener el estado vali-
dado.
La buena preparación y una apropiada
implementación de las herramientas de la
validación de limpieza (matrices y tablas)
es un factor determinante para el éxito del
programa de validación de limpieza.
Bibliografía
1. FDA Guidance for Industry. Sterile Drug Products
Produced by Aseptic Processing -Current Good
Manufacturing Practice. September 2004.
2. Annexes to EU GMP Guide to Good Manufacturing
Practice for Medicinal Products. Pharmaceutical
Inspection Convention. Pharmaceutical Inspection Co-
operation Scheme. PE 009-6 (Annexes), 5 April 2007.
3. WHO Expert Committee on Specifications for
Pharmaceutical Preparations. Fortieth Report. Geneva,
World Health Organization, 2006, Annex 2 (WHO
Technical Report Series, No. 937).
4. International Clean room Standards, ISO 14644. Geneva,
International Organization for Standardization.
5. PROYECTO de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-
059-SSA1-2004 (modifica a la NOM-059-SSA1-1993,
publicada el 31 de julio de 1998).
6. ISPE Pharmaceutical Engineering Guides for New
and Renovated Facilities. Vol. 3 Sterile Manufacturing
Facilities, 1st Ed. January 1999.
7. Flickinger B. “Charting a Course for Cleaning Validation”.
The Best of Pharmaceutical Formulation and Quality
(1996): www.pharmaquality.com/ validatn.html.
8. QassureNews. Boletín No33- marzo-abril 2007
 Una solución global para el equipamiento en Animalarios,
Centros I+D, Salas Estériles / Blancas

Vestuario Técnico
Lavandería Clase 100
Alfombras Control Acceso
Teléfono Sala Blanca
Aspiradores filtro ULPA
Productos Ultralimpieza
Desinfectantes
Desinfectador de manos
Detergentes para Jaulas
Sillas

Mobiliario: Mesas, Fregaderos,

Estanterías, Carros, Armarios...
Autoclaves de Vapor
Lavadoras material de vidrio

Fábrica y oficinas centrales Delegación Centro

Ctra. Rubi-Terrassa BP-1503, Km. 19,4 C/ Fuente del Berro, 1
08228 SANT QUIRZE DEL VALLÈS (BARCELONA) 28009 MADRID www.vestilab.com
Tel. (+34) 937 363 510* - Fax (+34) 937 363 511 Tel. (+34) 913 095 883* - Fax (+34) 913 091 822
e.mail: info@vestilab.com e.mail: vestimadrid@vestilab.com

View publication stats