Pesar las sustancias indicadas (Agar Sabouraud Dextrosa) en las
formulas respectivas, calculando las cantidades con los volúmenes requeridos
Disolverlas en la cantidad de agua destilada necesaria llevándolo a
ebullición. Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 120 ºC
Servir en las placas Petri, tubos de ensayo completamente estériles y
siempre a una llama(mechero)
MÉTODOS PARA SIEMBRA DE HONGOS EXTRAÍDOS DE LA
ALPACA Siembra de muestra de micosis en alpacas por superficie en placas de Petri con agar Sabouraud dextrosa. Incubar las placas a 25 ºC por 8 a 10 días. Observar las colonias de hongos y diferenciarlas. Observar al microscopio las hifas.
TÉCNICA DE MICROCULTIVO
Usando el asa de siembra realizar pequeños cortes al medio de
cultivo previamente preparado en placas y para obtener cuadrados de aproximadamente 2 x 2 cm en el medio de la placa Petri. Usando el asa de siembra tomar una pequeña porción de la muestra e inocular por los 4 bordes del bloque. Colocar la muestra preparada mantenerlos a temperatura ambiente en un aplaca de Petri, agregarle agua destilada estéril, evitando inundar la lámina porta objeto, es decir no debe tocar la lámina. Dejarlo medio ambiente durante 8 días.
COLORACIÓN DEL MICROCULTIVO
Para la coloración extraemos una muestra del micro cultivo de hongos
Poner la muestra en un portaobjeto Colorear con safranina (1:10 por 10 minutos ) o azul de lacto fenol Colocar la lámina con la muestra y 1 gota de safranina, cubrirlo con el cubre objeto. Esperar 3 a 5 minutos para que el fijador se evapore. Llevarlo al microscopio para observar las esporulaciones de los hongos y así diferenciar los tipos de hongos Finalmente saber que hongos existe en la micosis en alpacas.