UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

EAP DE MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGÍA
TECNOLOGÍA ENZIMÁTICA
PRIMER EXAMEN
2008-II

NOMBRE: MONTOYA CUTTI JUAN PABLO

1. Usted debe purificar una enzima presente en el retículo endoplasmático de riñon de ovino
y se conoce que es una proteína básica con un peso molecular de aproximadamente
70,000 Daltons. Diseñe el proceso de purificación, explicando porqué utiliza los métodos
que empleará en este proceso. (7 puntos)
2. Usted necesita una amilasa que debe trabajar en un medio ácido a temperaturas de 70°C.
¿Qué criterios usaría para elegir el organismo a partir del cual purificará una enzima?
Fundamente (2 puntos)
3. Explique la precipitación fraccionada por sulfato de amonio.(2 puntos)
4. Usted tiene una proteína ácida. Si va a utilizar cromatografía de intercambio iónico
durante la purificación, ¿cuál de las matrices dadas como ejemplo en clase utilizaría?
Fundamente. ( 2 puntos)
5. Explique los efectos difusionales que se presentan al inmovilizar una enzima. (2 puntos)
6. Presente usted los resultados de la purificación de una enzima, que a continuación se
indican, en un cuadro de purificación y discuta los resultados de esta experiencia.(5
puntos)
Proteína total (mg) Actividad total x 10-3 (U)
a) Extracto crudo 230.66 183.26
b) Precipitación con sulfato de
Amonio 115.33 180.90
c) Cromatog. Intercambio iónico 23.50 27.34
d) Cromatog. Filtración en gel 9.65 26.50