DNA: polímero de alto PM, formado por dos monómeros de nucleótidos. Nucleótidos ----- bases nitrogenadas, grupo fosfato y un hidrato de carbono (desoxirribosa)
Célula eucariota Célula procariota
- Núcleo rodeado por una - DNA localizado en una región: membrana. Material genético Nucleoide fragmentado en cromosomas - Células pequeñas 1-10um formados por ADN y proteínas. - División celular directa. No tiene - Grandes, división celular por centriolos, huso mitótico ni mitosis microtúbulos. - Información discontinua - No—intrones ni exones - Orgánulos - Operones
2. Replicación del material genético
El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse. Es un proceso semiconservativo ---- las dos cadenas complementarias del ADN original, al separarse, sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena molde. La replicación siempre se produce en sentido 5' → 3', siendo el extremo 3'-OH libre el punto a partir del cual se produce la elongación del ADN. La cadena que se sintetiza en el mismo sentido que avanza la horquilla de replicación se denomina hebra mientras que la que se sintetiza en sentido contrario al avance se denomina hebra rezagada. La replicación en las procariotas tiene un único origen, mientras que en las eucariotas tienen diversos orígenes. En las procariotas hay tres ADN polimerasas, mientras que en las eucariotas hay cinco.
3. TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN
Transcripción Traducción
Eucariotas: Núcleo Eucariotas: Hialoplasma
Procariotas: Citoplasma Procariotas: Citoplasma
La transcripción es el primer paso para la expresión genética, consiste en copiar la
secuencia de ADN de un gen para sintetizar un fragmento de ARNm, esta síntesis se da a través de una enzima llamada ARN-POLIMERASA su función es unir nucleótidos para formar la cadena de ARN usando la cadena de ADN como molde; La transcripción está constituida por 3 etapas la iniciación, alargamiento, finalización, y maduración. Traducción: Consiste en la síntesis de una proteína a partir de la información contenida en el ARNm. Se trata de un proceso que se produce en el hialoplasma. Activación de los AA, iniciación, elongación y terminación. LA TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIOTAS-DIFERENCIAS CON EUCARIOTAS 1) En los procariotas el ARNm no tiene ni caperuza ni cola. 2) Tampoco tiene intrones y por lo tanto no requiere de un mecanismo de maduración. 3) Al mismo tiempo que el ARNm se transcribe se está ya traduciendo. 4) Los genes son policistrónicos, esto es, un ARNm contiene información para varias proteínas. 4. REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA Es el proceso que controla qué genes en el ADN de una célula se expresan (se utilizan para hacer un producto funcional como una proteína). Regulación mediante: Accesibilidad de la cromatina. Transcripción (Grupos de proteínas del factor de transcripción se fijan a secuencias específicas del ADN en o cerca de un gen y promueven o reprimen su transcripción en un ARN) Procesamiento del ARN. El proceso de corte y empalme. 4. OPRERÓN: Se define como una unidad genética funcional formada por un grupo o complejo de genes capaces de ejercer una regulación de su propia expresión por medio de los sustratos con los que interaccionan las proteínas codificadas por sus genes. Está formado por genes estructurales que codifican para la síntesis de proteínas (generalmente enzimas), participan en rutas metabólicas. Expresión regulada por --- factores de control (promotor y operador) TIPOS: Control positivo: La transcripción no se produce hasta que la molécula reguladora estimule la producción de ARN. Control negativo: La expresión genética se produce hasta que es desconectada por algún tipo de regulador. 5. RNA ARNm: función-- llevar la información sobre la secuencia de aminoácidos para la síntesis de una proteína desde el ADN, hasta el ribosoma, lugar en el que se sintetizan las proteínas de la célula. Es por tanto una molécula intermediaria entre el ADN y la proteína. ARNt: función --- transferir un aminoácido específico al polipéptido en crecimiento; se une primero en la región aminoacil como lectura del codón para unir el anticodón, después se forma el enlace peptídico y pasa a la región péptido haciendo la elongación del péptido, por último, cuando se lee el codón de parada pasa a la región final y se separan los ribosomas y se finaliza la traducción. MicroRNA: son ARN pequeños de aproximadamente 22 nucleótidos de longitud, no codificantes para proteínas--- conforman una gran familia de genes reguladores postranscripcionales que controlan muchos procesos celulares y del desarrollo en eucariotas. La mayoría de los genes de microRNA se ubican en regiones intergénicas y tienen su propio promotor y elementos regulatorio. RNAi: Es una molécula de ARN que suprime la expresión de genes específicos mediante mecanismos conocidos globalmente como ribo interferencia. (es un sistema que utilizan las células de los organismos vivos para controlar los genes que están activos en un momento o un tipo celular, y su grado de activación) 6. MUTACIONES EN EL DNA Molecular (génicas o puntuales): Son mutaciones a nivel molecular y afectan la constitución química de los genes, es decir a la base o “letras” del DNA. Mutaciones silenciosas Polimorfismo: cambio de una de las bases de ADN, de tal manera que el triplete de nucleótidos que es una parte se cambia--- pueden incluso conducir a una reducción de la función de la proteína en cuestión. Inserción: se añade una o más bases al DNA original. De esta forma se puede alterar el marco de lectura para formar la proteína o insertar aminoácidos extra que son inadecuados. Cambio de marco de lectura: por inserción o por deleción. --- cambia la forma de agrupar esas tres bases y se colocaran aminoácidos erróneos habiendo la posibilidad de un triplete STOP prematuro. Deleción: se pierden una o más bases, es decir, se pierde un trozo de DNA alterando la cadena proteica que debería formarse y su función. 7. CONCEPTOS: ADN recombinante: Hace referencia a la creación de nuevas combinaciones de segmentos o de moléculas de DNA que no se encuentran juntas de manera natural. La tecnología del DNA recombinante utiliza técnicas que provienen de la bioquímica de los ácidos nucleicos unidas a metodologías genéricas desarrolladas originalmente para la investigación de bacterias y de virus. La utilización del DNA recombinante es una herramienta poderosa para el aislamiento de poblaciones puras de secuencias específicas de DNA a partir de una población de secuencias mezcladas. INGENIERÍA GENÉTICA: La ingeniería genética es la manipulación directa de los genes de un organismo usando la biotecnología para modificar los genes, eliminarlos o duplicarlos. La Ingeniería Genética es una rama de la genética que se concentra en el estudio del ADN, pero con el fin su manipulación. En otras palabras, es la manipulación genética de organismos con un propósito predeterminado CLONACIÓN: El término clonación describe una variedad de procesos que pueden usarse para producir copias genéticamente idénticas de un ente biológico. El material copiado, que tiene la misma composición genética que el original, se conoce como clon. PLÁSMIDOS: Los plásmidos son moléculas de DNA de doble cadena extra cromosómicas de origen natural que tienen un origen de replicación (ori+) y que se replican autónomamente en las células bacterianas. Para poder utilizarlos en ingeniería genética. VECTORES: Es un agente que transfiere información genética, por algún medio, de un organismo a otro. Los vectores de clonación o vector molecular son moléculas transportadoras que transfieren y replican fragmentos de ADN que llevan insertados mediante técnicas de ADN recombinante. Para que sirva de vector, una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento de ADN que transporta. También tiene que tener secuencias de reconocimiento que permitan la inserción del fragmento de ADN a clonar. ENZIMAS DE RESTRICCIÓN: es un tipo de enzimas denominadas endonucleasas de restricción que reconocen una secuencia específica de nucleótidos (denominada sitio de restricción) de una molécula de DNA de doble cadena, y cortan el DNA por esa secuencia Tipo I cortan las dos cadenas del DNA en una posición aleatoria a cierta distancia del sitio de restricción. No se utilizan normalmente en la investigación de DNA recombinante ya que el sitio de corte no es preciso. TIPO II reconocen una secuencia específica y cortan las dos cadenas de la molécula de DNA con absoluta precisión dentro de la secuencia reconocida. Se usan ampliamente en investigación de DNA recombinante puesto que cortan en sitios específicos. Las secuencias reconocidas por las enzimas de Tipo II son simétricas (“palindrómicas”), es decir, la secuencia de una de las cadenas leída en dirección 5' 3' es la misma que la secuencia de la cadena complementaria leída también en dirección 5' 3'.