Marin Ramirez Karen Lizette

4FV3
TAREA 16

8_D ESTANDARIZACIÓN Y CALIBRACIÓN

La calibración determina la relación entre la respuesta analítica y la
concentración del analito. Esta relación se determina comúnmente mediante
el uso de estándares químicos.
En algunos casos se intenta reducir la interferencia originada por otros
componentes de la matriz de la muestra, llamados concomitantes, al utilizar
estándares que se añaden a la disolución del analito (métodos estándares
internos o métodos estándar de adición) o mediante la igualación o
modificación de la matriz

8D.1_Comparación con estándares

A continuación, describimos dos tipos de métodos de comparación: técnicas
de comparación directa y procedimientos de valoración.
Comparación directa
involucran la comparación de una propiedad del analito (o del producto de
una reacción con el analito) con estándares tales que la propiedad evaluada
iguala o prácticamente reproduce aquella del estándar. Ejemplos: La
concentración del analito era igual a la concentración de los estándares
diluidos. Este tipo de procedimientos se conocen como comparación nula o
métodos de isomación.

Valoraciones
Las valoraciones son uno de los procedimientos analíticos más exactos. En
una valoración, el analito reacciona con un agente estándar (el titulante) en
una forma estequiométrica conocida.

8D.2_Calibración estándar externa

En la calibración estándar externa se preparan una serie de disoluciones
estándar independientes de la muestra. Los estándares son utilizados para
establecer la función de calibración del instrumento, la cual es obtenida a
partir del análisis de la respuesta del instrumento como una función de la
concentración del analito. Por lo general, se utiliza una grafica de la
respuesta de un instrumento con respecto a las concentraciones conocidas
del analito para producir una curva de calibración La relación lineal se utiliza
entonces para predecir la concentración de una disolución desconocida de
analito. Los métodos estadísticos, como el método de mínimos cuadrados,
son utilizados en forma rutinaria para encontrar la ecuación matemática que
describe una función de calibración. La concentración de las muestras o
incógnitas se encuentra entonces por la función de calibración
El análisis de regresión proporciona los medios para obtener, de manera
objetiva, este tipo de líneas y también para especificar las incertidumbres
asociadas con su uso posterior. En esta sección discutimos el método básico
de mínimos cuadrados para datos bidimensionales.
Marin Ramirez Karen Lizette
4FV3
TAREA 16

Supuestos del método de mínimos cuadrados.

Dos supuestos se dan por sentado al utilizar el método de mínimos
cuadrados. El primero es que hay una relación linealentre la respuesta
medida y (absorbancia en la figura 8.9) y la concentración x del estándar del
analito. La relación matemática que describe este supuesto es llamada
modelo de regresión, el cual se representa como y = mx +b , donde b es la
ordenada al origen (el valor de y cuando x es cero) y m es la pendiente de la
línea
Interpretación de los resultados de mínimos cuadrados..
Cuanto más cercanos Se encuentren los puntos a la línea predicha por el
análisis de mínimos cuadrados, menores serán los residuales. La suma de
cuadrados de los residuales, SSresid, mide la variación en los valores
observados de la variable dependiente (valores y) que no son explicados por
la presunta relación lineal entre x y y.

Una cantidad importante llamada coeficiente de determinación (R2) mide la

fracciónde la variación observada en y que es explicada por la relación lineal
los métodos de regresión no lineal20 pueden dar mejores estimaciones.
Algunas veces, la relación entre la respuesta analítica y la concentración es
inherentemente no lineal. En otros casos, las desviaciones de la linealidad
surgen porque las disoluciones no se comportan de manera ideal

Errores en la calibración estándar externa

Cuando se utilizan estándares externos, se supone que, cuando la misma
concentración del analito está presente en la muestra y en el estándar, se
obtendrá la misma respuesta. Por lo tanto, la relación de la calibración
funcional entre la respuesta y la concentración del analito debe aplicar
también para la muestra. Normalmente, en una determinación no se utiliza la
respuesta sin tratar del instrumento. En cambio, la respuesta analítica bruta
es corregida al medir una determinación del blanco. Una determinación ideal
del blanco es idéntica a la muestra, pero sin el analito. En la práctica, con
muestras complejas, la preparación de una determinación del blanco
demanda mucho tiempo o es imposible de hacer una ideal y entonces se debe
Marin Ramirez Karen Lizette
4FV3
TAREA 16

buscar un equilibrio. Más a menudo, una determinación real del blanco es un

disolvente del blanco, que contiene el mismo disolvente en el cual se disolvió
la mezcla, o un reactivo del blanco, que contiene el disolvente más todos los
reactivos utilizados en la preparación de la muestra.

Para evitar errores sistemáticos en la calibración, los estándares deben

prepararse adecuadamente y su estado químico debe ser idéntico al del
analito en la muestra. Los estándares deben ser estables en concentración,
por lo menos durante el proceso de calibración.

_E
PARÁMETROS DE CALIDAD PARA LOS MÉTODOS ANALÍTICOS

Los procedimientos analíticos se caracterizan por un número de

parámetros de calidad como exactitud, precisión, sensibilidad, límite de
detección e intervalo dinámico

8E.1_Sensibilidad y límite de detección

sensibilidad de la calibración, o el cambio en la señal de respuesta por
unidad de cambio en la concentración del analito
El límite de detección, es la menor concentración que
puede ser reportada a un cierto nivel de confianza

8E.2_Intervalo dinámico lineal

El intervalo dinámico lineal de un método analítico se refiere al intervalo de
concentraciones sobre las cuales un analito puede ser determinado
utilizando una curva de calibración lineal. El límite inferior del intervalo
dinámico es la concentración en la cual la señal analítica o la pendiente de la
curva de calibración se desvían por una cantidad especificada.

8E.3_Aseguramiento de la calidad de los resultados analíticos

Gráficas de control
Una gráfica de control es una representación gráfica de alguna
característica cualitativa que es importante para el aseguramiento de la
calidad. Estos límites son llamados límite superior de control (LSC) y límite
inferior de control (LIC). Son definidos como
Marin Ramirez Karen Lizette
4FV3
TAREA 16

Siempre que la masa media permanezca

entre el LSC) y el LIC se dice que la balanza
está en control estadístico.

Validación
La validación determina la conveniencia de un análisis para proporcionar la
información buscada y se puede aplicar a las muestras, metodologías y
datos. La validación es frecuentemente realizada por el analista, pero puede
ser efectuada por personal de supervisión. para admitir muestras para una
medición, para establecer la autenticidad de las muestras y para permitir un
nuevo muestreo si es necesaria

Reporte de resultados analíticos

Generalmente, los resultados analíticos deben ser reportados como el valor
medio y la desviación estándar. La validación y el reporte de los resultados
analíticos no son las partes más glamorosas del análisis, pero son de las más
importantes porque nos dan certeza sobre las conclusiones extraídas. El
reporte es frecuentemente la parte “pública” del procedimiento y debe
hacerse público durante audiencias, pruebas, solicitudes de patente y otros
acontecimientos.