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Espectrofotometría UV-Visible.
Muestra Ambiental.
Resultados
Preparación de disolución estándar de sacarosa (100 mg/mL de C)
Se realiza la presente disolución con el fin de poder formar una curva de calibrado, la
cual, represente el comportamiento de las muestras problema correspondiente al suelo de
la comuna de Collipulli, IX región de Chile.
100 mgde C
× 1mol de C=8.33 ×10−3 mol de C
12 g de C
Ahora bien, como el matraz de aforo es de 50 mL, se debe multiplicar la masa de glucosa
por 50, para así conservar la concentración solicitada, en el enunciado de 100 mg/mL.
0.2377 g de Sacarosa
∗50 mL de agua=11.8778 g de Sacarosa
1mL de agua
10 mgde C
× 1mL de sacarosa=0.1 mLde disolucion stock sacarosa.
100 mgde C
Tabla 1: Diferentes alícuotas de solución stock de sacarosa que se debe añadir sobre
cada Erlenmeyer.
Disolución N° Concentración (mg/mL) Volumen (mL)
1 0 0
2 10 0.1
3 20 0.2
4 30 0.3
5 40 0.4
6 50 0.5
Curva de calibrado.
Todas las absorbancias, fueron medidas en un λmax de 600 nm.
Tabla 2: Valores obtenidos al realizar la curva de calibrado a solución de sacarosa.
Concentración (mg/mL) Absorbancia
Blanco 0
0 -0.006
10 0.2193
20 0.4834
30 0.6926
40 0.8942
50 1.1186
Curva de calibrado
1.2
1 f(x) = 0.02 x + 0.01
R² = 1
0.8
Absorbancia
0.6
0.4
0.2
0
0 10 20 30 40 50 60
-0.2
Concentracion (mg/mL)
y=0.0224 x+ 0.0058
De la recta, empleando la ley de Lambert-Beer, se puede obtener las concentraciones de
las 3 muestras problemas de suelo.
El valor de la absorbancia se debe reemplazar por “y”, mientras que el valor de “x”
entregará la cantidad de carbono presente en dicha MP. Se ejemplificará con la muestra
N°2 para determinar la cantidad de carbono.
0.572=0.0224 x+ 0.0058
0.572−0.0058 mg
=x ; x=25.277
0.0224 mL
Ahora bien, con la cantidad de carbono obtenido por cada muestra, se puede determinar
el porcentaje de carbono en la misma, empleando una relación simple:
25.277 mgde C
× 100 %=2.1815 % de carbono en MP N ° 2.
1158.7 mg de C
Tabla 4: Corresponde a la concentración de cada muestra de suelo.
Muestra Numero (N°) Concentración (mg/mL) Porcentaje
1 33.96875 2.9646%
2 25.27678 2.1815%
3 25.83482 2.2524%
Promedio 28.36011 2.4662%
Discusión
En el presente practico, se emplea la técnica de espectrofotometría UV-visible, con el fin
de determinar y cuantificar diferentes concentraciones de un compuesto en solución, en
este caso, muestras de carbono orgánico en suelo de la comuna de Collipulli. Para esto
se realiza un tratamiento previo de la muestra que consiste en una combustión húmeda
de ésta con dicromato de sodio ¿ ¿) y ácido sulfúrico ( H ¿ ¿ 2 SO 4 ) ¿ con el fin de reducir el
Cromo, determinando su concentración por UV-Visible y así el porcentaje de Carbono en
la muestra ambiental.
Primeramente, se realiza una curva de calibrado utilizando sacarosa como disolución
estándar, para posteriormente realizar la combustión húmeda y medir la absorbancia de
las disoluciones. Para determinar la linealidad de un método, se realiza una curva de
calibrado que se puede traducir como la capacidad de un método analítico para obtener
resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en
una muestra dentro de un determinado intervalo de trabajo, en este caso se obtiene una
ecuación de la recta ( y=0.0224 x+ 0.0058) con un coeficiente de correlación lineal (r2)
igual a 0,9984, traducido analíticamente como aceptable para realizar las mediciones.
Relacionando la absorbancia y la curva de calibrado es posible determinar la
concentración de carbono en la muestra de suelo, teniendo como resultado un 2,466% de
Carbono promedio en la muestra.
C 12 H 22 O 11 +11 H 2 SO 4 → 12C +11 H 2 SO 4 x H 2 O
3+ ¿+3 CO 2 +8 H 2 O ¿
La oxidación del carbono orgánico se produce por una mezcla oxidante de dicromato de
potasio y ácido sulfúrico concentrado. El carbono orgánico reduce los iones Cr 6+¿ ¿amarillo-
naranja del dicromato inicial a iones Cr 3+¿ ¿de color verde, lo cual se puede seguir
espectrofotometría UV-Vis.
La cantidad de luz absorbida por una solución está directamente relacionada con la
concentración del analito en la solución, esta relación se expresa de manera lineal en la
ley de Beer, la cual tiene la forma: A = ε x L x C donde A es la absorbancia de un analito
en solución, ε corresponde al coeficiente de absortividad molar y C es la concentración
que tiene dicho analito en la solución.[2]
Preguntas
1.- Defina detalladamente cada uno de los componentes principales de un
espectrofotómetro [3]
Conclusiones
Se obtiene un 2,4662% de carbono orgánico promedio en la muestra de suelo con
una desviación estándar de 4.8652 y un coeficiente de varianza de 17,1909%