UNIVERSIDAD PONTIFICIA BOLIVARIANA

ESCUELA DE CIENCIAS SOCIALES

PROGRAMA DE PSICOLOGÍA

ASIGNATURA
BIOEVOLUCIÓN I

Guía Laboratorio No. 4  Objetivo:

 Determinar la importancia de las enzimas y sus
Actividad Enzimática.
funciones respecto del funcionamiento celular.

Introducción
Las enzimas son biocompuestos orgánicos de naturaleza proteica, considerados los
instrumentos primarios para expresar la acción de los genes, porque se encargan de
catalizar los millares de reacciones químicas, que conjuntamente constituyen el
metabolismo celular, entendido éste, como aquella característica que le permite al ser vivo
sintetizar las sustancias requeridas y liberar la energía necesaria para su funcionamiento.

Las enzimas por ser proteínas se encuentran

formadas por cadenas de aminoácidos dispuestos
en secuencia denominada estructura primaria, los
cuales suelen plegarse debido a los puentes de
hidrógeno que se establecen y constituyen la
estructura secundaria; los pliegues formados se
atraen y dan origen a la estructura terciaria;
cuando dos o mas cadenas de aminoácidos
forman la proteína, éstas se atraen originando la
estructura cuaternaria. (Ver figura 1).
Figura 1: Estructura de las proteínas (Fuente:
http://www.um.es/molecula/sbqpr14.htm)
Las enzimas no se consumen en la reacción, actúan de manera semejante a otros
catalizadores, su acción se relaciona con la disminución de la energía de activación, es
decir la cantidad de energía necesaria para iniciar la reacción.

Las enzimas funcionan de acuerdo con la teoría de encaje inducido, desde la cual se
considera que cada enzima posee un sitio activo (entendido como aquel saco o surco
formado en la(s) cadena(s) polipeptídica(s) que constituye(n) la enzima) que le permite
combinarse con el sustrato o molécula reaccionante (sustancia sobre la cual va a actuar)
para formar el complejo enzima-sustrato (Ver Figura 2).

Figura 2: Formación del complejo Enzima- Sustrato (Modelo Llave- Cerradura)

Fuente:http://es.wikipedia.org/wiki/Complejo_enzima-
sustrato#mediaviewer/Archivo:Complejo_enzima-sustrato_(llave-cerradura).jpg

El complejo enzima-sustrato al catalizar la reacción genera productos, los cuales se

separan de la enzima. Ésta queda en condiciones de seguir siendo utilizada numerosas
veces en el mismo tipo de reacción, debido a su especificidad; el proceso total de unión,
reacción y desunión, tiene lugar muy rápidamente y la mayoría de las enzimas interactúan
con cientos de moléculas por minuto.
La Catalasa:
Entre las enzimas que el ser humano comparte con otros animales y los vegetales se
encuentra la catalasa, conocida como oxidorreductasa del peróxido de hidrógeno. La
catalasa es una enzima específica para la reacción que permite transformar el peróxido de
hidrógeno (H2O2) conocido comúnmente como agua oxigenada o dioxogen, en agua y
oxígeno.
H2O2 H2O + ½ O2
Peróxido de hidrógeno Catalasa Agua Oxígeno

El peróxido de hidrógeno es producto de varias oxidaciones celulares y la catalasa que se

encuentra muy concentrada en células sanguíneas y hepáticas previene su acumulación.

Efectos de la temperatura sobre la actividad enzimática

La actividad máxima de muchas enzimas se presenta a un pH y temperatura característica,

entendida como óptima. Cuando se inicia el aumento térmico se aceleran las reacciones,
pero sólo hasta un determinado punto, porque después disminuye rápidamente; esto se
debe a la pérdida de la estructura tridimensional característica de la enzima, es decir a su
desnaturalización (ver figura 3).

Figura 3: Desnaturalización de las proteínas.

Fuente: http://tiempodeexito.com/bioquimica/images/proteina7.jpg
Alguna enzimas desnaturalizadas recuperan su actividad al enfriarse, lo cual indica que sus
cadenas de polipéptidos vuelven a adquirir su forma adecuada y necesaria para actuar,
pero otras se enredan e inactivan permanentemente.

MATERIALES

 Tubos de ensayo Gradilla

 Vaso de precipitados Mortero
 Baño de agua para incubación Caja de petri
 Peróxido de hidrógeno Agua destilada
 Papa Buffer fosfato 0,1 M pH3, pH7, pH10
 Hígado
 Champiñones
 Espinacas
 Guantes de nitrilo
 Bata de laboratorio

METODOLOGÍA

 Antes del Laboratorio:

Lea detenidamente la guía, elabore la v heurística con la metodología y plantee un
experimento para identificar el efecto del pH sobre la acción de las enzimas.
Preguntas adicionales:
1. ¿Qué ventajas representa la actividad enzimática para el interior celular?
2. Nombre las propiedades básicas que presentan en común, las enzimas presentes en los
diferentes seres vivos.
3. ¿Por qué razón muchas vitaminas y ciertas hormonas aumentan la eficiencia de una
enzima?
4. ¿Qué son los cofactores enzimáticos?
5. ¿Qué incidencia tiene la desnaturalización enzimática en el desarrollo del ser vivo?
6. ¿Qué relación existe entre la actividad enzimática y las enfermedades conocidas como
Fenilcetonuria y Tay-Sachs?
7. ¿Qué importancia tienen las enzimas en el proceso de glucólisis?
8. ¿Qué funciones metabólicas cumple el hígado?
 Durante el Laboratorio:
En esta experiencia se trabaja con catalasa de origen vegetal que se obtiene a partir del
tubérculo de papa, Champiñón y Espinacas y catalasa de origen animal a partir del hígado
de res.

1. Catalasa vegetal (Espinacas, Papa, Fungica (Champiñón))

1.1 Obtención de catalasa vegetal
Para su obtención proceda de la siguiente manera:

 Corte en pequeñas rebanadas, media papa pequeña pelada.

 Macere en el mortero en 5 ml de agua destilada.
 Adicione 15 ml de agua destilada y homogenice el macerado.
 Filtre el macerado empleando gasa

1.2 Acción de la catalasa vegetal

 Marque dos tubos de ensayo con los números 1 y 2

 En el tubo número 1 deposite un mililitro de peróxido de hidrógeno (H 2O2) al 3% y
un mililitro de solución de catalasa vegetal.
 En el tubo número 2 deposite un mililitro de agua destilada(H2O) y un mililitro de
 solución de catalasa vegetal.
 La presencia de burbujas indica que la reacción es positiva.
 ¿A qué corresponden las burbujas que se desprenden?

 ¿Cómo podría comprobar la presencia de la sustancia que se desprende?

 ¿Cuál de los dos tubos corresponde al control?
 Escriba sus observaciones e interprete los resultados

1.3 Efecto del calor sobre la acción de la catalasa vegetal

 Tome un tubo de ensayo, deposite un mililitro de solución de catalasa vegetal,
caliente hasta punto de ebullición (agite el tubo mientras calienta).
 Agregue al tubo un mililitro de peróxido de hidrógeno(H2O2) al 3%.
 Observe y compare con los resultados obtenidos en la experiencia anterior.

2. Catalasa animal

2.1 Obtención de la catalasa animal

Para su obtención tener en cuenta las indicaciones dadas para la catalasa vegetal:

 Corte pequeños pedazos de hígado.

 Macere en el mortero en 5 ml de agua destilada.
 Adicione 15 ml de agua destilada y homogenice el macerado.
 Filtre el macerado empleando gasa

2.2 Acción de la catalasa animal

 Marque dos tubos de ensayo con los números 1 y 2
 En el tubo número 1 deposite un mililitro de peróxido de hidrógeno (H 2O2) al 3% y un
mililitro de solución de catalasa animal.
 En el tubo número 2 deposite un mililitro de agua destilada (H 2O) y un mililitro de
 solución de catalasa animal.
 Describa lo observado.
 Compare estos resultados con los obtenidos en la experiencia con catalasa vegetal

2.3 Efecto del calor sobre la acción de la catalasa animal

 Tome un tubo de ensayo, deposite un mililitro de solución de catalasa animal,
caliente hasta punto de ebullición (agite el tubo mientras calienta).
 Agregue al tubo un mililitro de peróxido de hidrógeno (H2O2) al 3%.
 Observe y compare con los resultados obtenidos en la experiencia anterior.
¿Cómo influye la temperatura en la actividad enzimática de la catalasa?

2.4. Ejecute el experimento diseñado del efecto del pH sobre la catalasa

 Después del laboratorio:

Elaborar un informe con los resultados obtenidos en esta práctica, incluir las preguntas
adicionales dentro del marco teórico.

Bibliografía

MURRAY, R.K. Bioquímica de Harper 16ª Edición, 2004

BERNSTEIN, Ruth y BERNSTEIN, Stephen. Biología. Décima Edición. Editorial Mc Graw

Hill. 1998.