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ISSN 2145-549X, Vol. 4. No. 1, Julio – Diciembre, 2012 I. Artículos Resultados de investigación
153
Aplicación de microorganismos
asociados a biopelículas*
Applications of microorganisms associated with biofilms
Aplicação de microorganismos associados com biofilmes
uso em processos de biorremediação, é neste caso, nas de superficie suelen jugar un papel importante
na procura de alternativas para a consolidação de en la defensa contra el huésped y la interadherencia
tratamento secundário da águas residuais. entre microorganismos que conforman la biopelícu-
la como lo son Ag 43, adhesinas y proteínas auto-
Palavras chave: Biofilmes, Quorum sensing, biorreme- transportadoras (Beloin, 2008; Diemond y Miranda,
diação e tratamento secundário das águas residuais. 2007; Harrison, et al., 2006 y López, et al., 2010).
de canales y estructuras que permiten el transpor- na, dos proteasas de cisteína y siete serinproteasas
te y garantizan la entrega eficiente de nutrientes a en el caso de S. aureus que permiten la liberación y 155
los microorganismos, facilitando la disponibilidad dispersión de la biopelícula con el objetivo de colo-
de carbono que es esencial para promover la sínte- nizar nuevas superficies.
sis de exopolisacáridos y completar la matriz. Estos
canales funcionan como un sistema de circulación Como se señaló anterior- Cuáles funcionan
permitiendo el acceso de nutrientes, la excreción o mente, la formación de como un sistema
eliminación de sustancias y también facilita la comu- la biopelícula es un pro- de circulación
nicación con otras microcolonias. Después de que la ceso polimicrobiano, es
permitiendo el
biopelícula ha terminado la etapa de maduración, es decir, no es exclusivo de
acceso de nutrientes,
decir, cuando la etapa de adherencia es irreversible bacterias. Recientemente
y se ha consolidado la matriz de exopolisacáridos, (Kruppa, 2008) describe
la excreción o
empieza un proceso de dispersión de la comunidad este proceso en Candida eliminación de
por la expresión y liberación de moléculas señaliza- albicans un hongo pató- sustancias y
doras del QS que origina el desprendimiento de la geno asociado con infec- también facilita la
biopelícula, para establecer nuevas microcolonias y ciones nosocomiales y un comunicación con
el desarrollo de nuevas comunidades que garanti- gran número de micosis. otras microcolonias.
cen la colonización de toda la superficie. Además, En C. albicans el proceso Después de que
se promueven consorcios entre distintas especies, de formación de la bio- la biopelícula ha
ya que en circunstancias normales, las biopelículas película inicia por medio
terminado la etapa de
son comunidades polimicrobianas (Beloin, 2008; de fibrillas que desen-
Diemond y Miranda, 2007; Federle y Bassler, 2003; cadenan la adherencia
maduración
Harrison, et al., 2006 y Singh, et al., 2006). de la levadura, se fijan
y empiezan la colonización de una superficie, des-
Se ha descrito en López, et al., 2010 y Nazar, 2007 pués de esto ocurre un mecanismo no común entre
que la constitución de la matriz es diferente en las bacterias, pues comienza la formación de tubos
cada especie bacteriana, por ejemplo, alginatos y germinales en las levaduras, estas son extensiones
ácido desoxirribonucleico en Pseudomona aerugi- filamentosas que realizan las blastoconidias para
nosa, celulosa en Salmonella typhimurium; exopo- originar hifas verdaderas y pasar de un estado uni-
lisacáridos ricos en glucosa y galactosa en Vibrio celular a uno pluricelular; en este caso la comunidad
cholerae; poli-N-acetil- glucosamina en Staphylo- en estado de maduración consiste en una densa red
coccus aureus o Escherichia coli y poli-D-glutama- de levaduras, seudohifas e hifas donde se intercalan
to en Bacillus subtilis. las blastoconidias y el micelio, así se favorecen los
procesos de dimorfismo ejecutado por hongos para
A su vez, (Honigberg, 2011), describe que la matriz desarrollarse en forma filamentosa y de levadura,
extracelular que recubre la biopelícula los protege lo que facilita su adaptación dentro del huésped y
de la tensión ambiental y es necesaria para la se- aumenta su patogenicidad, ya que con frecuencia
ñalización celular, dejando claro que las señales de están asociadas a bacterias. Finalmente, todo el con-
QS son esenciales para la asociación en estas co- junto es rodeado por una matriz extracelular dando
munidades, por ejemplo, para la constitución de la paso a la dispersión o difusión de la biopelícula con
biopelícula de la levadura Saccharomyces cerevisiae. el fin de seguir expandiendo la comunidad, como ya
se había mencionado para el caso de las bacterias.
Para el proceso final de dispersión de la biopelícula (Chen, H., et al., 2004; y Douglas, L. J., et al., 2006).
hay enzimas que degradan la matriz de exopolisa-
cáridos como las desoxirribonucleasas (DNasas) y Por otro lado (Federle y Bassler, 2003 y López, et al.,
dispersin B. (Boles y Horswill, 2008) menciona que 2009), manifiestan que la función de cada microor-
para esta función se conocen diez proteasas extra- ganismo dentro de la biopelícula es diferente y que
celulares que incluyen la metaloproteasa aureolisi- su patrón de expresión génica es distinto, mientras
que unos sintetizan los componentes de la matriz, El segundo tipo de comunicación es interespecífica
otros lo hacen para factores de virulencia, adheren- y es un lenguaje universal que le permite a distin-
cia o motilidad, entre mu- tas especies bacterianas trabajar en comunidad para
Estas comunidades chas otras actividades. La realizar una función establecida, en este caso es por
microbianas pueden formación de biopelícula medio de la molécula AI-2 y sus homólogos. Este
formarse albergando a menudo permite unas sistema QS se encuentra tanto en bacterias Gram
solo una especie interacciones entre los negativas como en Gram positivas, evidenciando los
o un conjunto de microorganismos de tipo múltiples lenguajes que utilizan las bacterias para
microorganismos de simbiótica mutualista, es llevar a cabo fenómenos tan increíbles como la bio-
distintos géneros, decir, que uno de los mi- luminiscencia, la producción de metabolitos secun-
croorganismos presente darios con actividad antimicrobiana, regular los pro-
esto depende del
en la biopelícula genera cesos de competencia - esporulación y la formación
sistema que utilicen
un cambio en el entor- de biopelículas, entre otros. (Federle y Bassler, 2003;
las bacterias, debido no que le es favorable a Miller y Bassler, 2001 y Otero, et al., 2005).
a que existen dos toda la comunidad, pues-
tipos de comunicación to que en las biopelículas Aplicaciones en problemáticas ambientales
reguladas por el QS. se producen metabolitos (Harrison, et al., 2006), plantea que la formación de
secundarios que pueden estas comunidades proporciona a la vida microscó-
ser utilizados por otras pica que la habita notables beneficios, resaltando
bacterias o tener función antimicrobiana sobre mi- que los microorganismos en la naturaleza se hallan
croorganismos competidores. Debido a que pueden con mayor frecuencia en biopelículas y por eso se
haber cambios en los potenciales de óxido –reduc- hace interesante reconocer la aplicabilidad de estos
ción– y coexistir diferentes metabolismos bacteria- microorganismos asociados a estas comunidades
nos, se pueden encontrar bacterias aerobias, anae- en actividades biotecnológicas como la biorreme-
robias facultativas y anaerobias generando todo una diación, una técnica que ha permitido la interacción
pequeña ecología microbiana que podrían ser utili- de sistemas biológicos con sustancias contaminan-
zadas en interesantes aplicaciones biotecnológicas tes para el ambiente, logrando transformar la carga
(López, et al., 2010). contaminante en sustancias benéficas o menos tó-
xicas y contaminantes, para así recuperar escenarios
Estas comunidades microbianas pueden formarse deteriorados, estas técnicas han sido implementa-
albergando solo una especie o un conjunto de mi- das tanto en suelos como aguas y no sería posible
croorganismos de distintos géneros, esto depende generarlas sin los microorganismos, que son capa-
del sistema que utilicen las bacterias, debido a que ces de soportar la polución del medio (Demnerova,
existen dos tipos de comunicación reguladas por el et al., 2005).
QS. El primer tipo de comunicación es distinto para
bacterias Gram negativas de Gram positivas, pero A sí mismo Singh, et al., 2006). plantea las diferentes
es específico para cada especie bacteriana, en el QS aplicaciones de las biopelículas en biorremediación
existen unos autoinductores que permiten censar la donde menciona su uso en biorreactores para el tra-
población bacteriana y establecer fenómenos de- tamiento de grandes volúmenes de soluciones acuo-
pendientes de la densidad celular, en Gram nega- sas diluidas tales como aguas residuales industriales
tivos se utilizan unas moléculas señal denominadas y municipales. Así mismo, menciona que la mejora
acil homoserina lactona, mientras que las bacterias de cepas, sus vías metabólicas y el aumento en el
Gram positivas utilizan oligopéptidos, estas molécu- número de copias de genes que codifican para enzi-
las al alcanzar una alta concentración se unen a su mas implicadas en la degradación o transformación
receptor activando la expresión de genes regulados de sustancias, podrían mejorar aún más las estra-
por el sistema QS que modulan la formación de la tegias, biorremediación mediada por microorganis-
156 biopelícula. mos presentes en las biopelículas. A su vez, plantea
benéficos asociadas al ambiente, por ejemplo, en fijo disminuyendo así la contaminación del medio
la formación de biopelículas por parte de microor- por parte de los lixiviados.
ganismos fijadores de nitrógeno que aumentan la
concentración de este elemento, como en el caso La aplicabilidad y beneficio que muestran las bio-
de Rhizobium leguminosarum que el QS le facilita películas en diferentes campos por su resistencia y
la interacción con la raíz al ser dependiente de la versatilidad aumentan la necesidad de indagarlas,
densidad celular para formar nódulos que ayudan conocerlas en sus campos de acción para así propor-
a captar y fijar el nitrógeno o para la bacteria Gram cionar soluciones favorables ante las problemáticas
negativa Sinorhizobium meliloti y plantas legumi- ambientales actuales. (Mshandete, et al., 2008b).
nosas alfalfa (Medicago sativa) que establecen una
relación simbiótica, siendo favorable para el creci- Biopelículas y agua de centros nucleares
miento y asimilación de nutrientes por parte de la Recuperar el agua empleada en gran cantidad en
planta. (Harrison, et al., 2006; Marquina y Santos, las centrales nucleares se hace cada vez más nece-
2010; y Raina S., et al., 2009). sario, allí usan material radioactivo como el uranio
enriquecido (235U), el cual es utilizado como com-
Biopelículas y residuos de hojas de sisal bustible para generar energía eléctrica (Sarro, et al.,
Las biopelículas también se han estudiado en la pro- 2005), estos materiales radioactivos necesitan estar
ducción de biogás a partir de residuos de hoja de inmersos en unas piscinas que están elaboradas con
sisal, una planta que es implementada para obte- láminas de acero inoxidable o titanio y poseen agua
ner fibra y material textil, no obstante, tras su uso que es calificada como químicamente pura cuya
se generan residuos lixiviados de la hoja de sisal función es mantener refrigerado y estable el mate-
que generan contaminación en el ambiente y pue- rial radioactivo, se creería que por las características
den afectar la salud, se ha evaluado la capacidad de del medio y la alta carga radioactiva la vida micro-
formación de biopelículas biana sería inusual; sin embargo, se ha hallado que
La efectividad de las en biorreactores donde en estas piscinas, alrededor de la placa de acero o
biopelículas ha sido se han colocado los resi- titanio se ha generado biopelículas, los microorga-
duos de la hoja de sisal nismos que crecen sobre estas superficies resisten
analizada mediante
y se ha visto que crecen altas cargas de radionúclidos y se han visto como
biorreactores que
biopelículas de bacterias una alternativa para descontaminar las aguas radio-
poseen ovillos, anaerobias que degradan activas, disminuyendo su peligrosidad y los efectos
estructuras de estos lixiviados y a la vez adversos que tendría para con la vida misma. El tra-
acero inoxidable generan la producción de tamiento del agua radioactiva se hace por medio de
que favorecen el biogás. (Mshandete, et al, un intercambio iónico pero el auge que ha tomado
crecimiento de la 2008a). implementar la biorremediación en este campo es
biopelícula, y una muy alto ya que es más económica, efectiva y elimi-
vez pasa por estos La digestión anaerobia na una cantidad elevada de contaminantes. (Chico-
para la producción de te, 2005, y Demnerova, 2005).
el agua contaminada
biogás y la biodegrada-
las comunidades
ción de los lixiviados se La efectividad de las biopelículas ha sido analizada
interactúan con divide en dos etapas; en mediante biorreactores que poseen ovillos, estructu-
los radionúclidos la primera intervienen ras de acero inoxidable que favorecen el crecimiento
presentes en el agua, bacterias anaerobias que de la biopelícula, y una vez pasa por estos el agua
acumulándolos. generan metano y dió- contaminada las comunidades interactúan con los
xido de carbono, donde radionúclidos presentes en el agua, acumulándolos;
juntos forman el biogás, y la segunda etapa se basa así se hace más fácil recuperar material radioactivo
en la biodegradación de los lixiviados de la hoja de y disminuye la tasa de toxicidad de la radiación, se
158 sisal mediante una biopelícula anaerobia de lecho ha hecho interesante identificar los microorganis-
mos que hacen parte de estas biopelículas y se ha A partir de esta problemática frente a las aguas resi-
encontrado que debido a las condiciones que los duales se ha diseñado el tratamiento de las mismas, 159
microorganismos tienen hay una serie de cambios que consta de un tratamiento primario en el que se
en sus características morfofisiológicas, siendo di- aplican procesos de filtración, sedimentación y pre-
fícil su cultivo por lo que se ha extraído DNA de los cipitación que buscan eliminar los desechos sólidos
microorganismos para técnicas moleculares y se contenidos en el agua residual, un tratamiento se-
amplifica la región 16S DNA, que es una región del cundario en el cual se utilizan microorganismos para
material genético conservado en los microorganis- eliminar la materia orgánica disuelta en el agua, y
mos que al ser secuenciado permite identificar el finalmente un tratamiento terciario que consiste en
microorganismo presente tras comparar con datos el uso de químicos que llevan a la desinfección (Gó-
de las secuencias reportadas en el National Center mez Saravia, 2003 y Gonzales, et al., 2002). Hacien-
for Biotechnology Information (NCBI), identificando do énfasis en el tratamiento secundario de aguas
géneros como Proteobacteria, Actinobacteridae y residuales en este se implementan biorreactores
Firmicutes, encontrando bacterias Gram negativas que evalúan la capacidad de los microorganismos
y Gram positivas especialmente Bacillus cereus, los para degradar los compuestos tóxicos en el agua.
cuales resisten la radioactividad y tras analizar los Sin embargo, se han desarrollado diferentes cla-
radionúclidos acumulados se encontró concentra- ses de biorreactores que se basan en la formación
ciones de cobalto, cesio, manganeso, zinc y cromo. de la biopelícula sobre un material, que puede ser
También por microscopia electrónica de barrido se plástico como el polietileno de alta densidad, plás-
evalúa la capacidad de adherencia de estos microor- ticos porosos, que permiten el crecimiento dentro
ganismos a las superficies de acero inoxidable y tita- del material y en su superficie estando siempre en
nio. (Sarro, et al., 2007). contacto los microorganismos con los nutrientes.
(Gonzales, et al., 2002).
Biopelículas y aguas residuales
Las aguas residuales se forman tras el uso de agua Las biopelículas se muestran como una alternativa
a nivel doméstico, industrial y comercial; estas con- amigable, de gran aplicabilidad en el tratamiento
tienen desechos sólidos, materia orgánica biotrans- de aguas residuales antes de su disposición final,
formable, como son los carbohidratos, las proteínas que se basa en sus propios sistemas biológicos para
y los lípidos; contienen además, nitrógeno, fósforo, degradar contaminantes, por medio de las interac-
carbono, calcio, sodio, sulfato; gases como el oxí- ciones que existen entre los microorganismos que
geno, puede contener también dióxido de carbono, la conforman, previniendo así la contaminación de
sulfuro de hidrógeno, gas amoniaco, materiales tó- ríos, mares y océanos para que no haya perjuicio al-
xicos como metales pesados, entre los que desta- guno sobre vida y el ambiente. (Betancourth, 2000,
can el cromo, níquel, cobre, zinc, cadmio, mercurio y Singh, 2006).
y plomo; además de radionúclidos e hidrocarburos,
también puede llevar grasas, aceites y otros com- Alternativa para la consolidación de un trata-
puestos como detergentes y jabones, también con- miento secundario de aguas residuales
tienen microorganismos patógenos, siendo uno o Mediante el estudio de microorganismos asociados
varios de estos componentes, lo que hace que las a biopelícula aislados del medio a biorremediar se
aguas residuales sean un problema de contamina- posibilitan nuevas alternativas en biotecnología am-
ción ambiental. La aplicabilidad de las aguas resi- biental en las que es realmente importante conocer
duales se ha visto en las prácticas agrícolas, con ma- el mecanismo químico, bioquímico y molecular de
yor frecuencia en lugares donde los abastecimientos las interacciones realizadas por los microorganis-
de agua potable son escasos y generan problemas mos presentes en la biopelícula; entender aún más
de salud pública y asociada a enfermedades trans- su proceso de formación, analizar los sistemas que
mitidas por los alimentos. (Rivas, et al., 2003; y Silva, le permite establecer interacciones de sinergis-
et al., 2008). mo tales como la relación microorganismo-medio,
microorganismo-contaminantes y microorganismo- Por último, hay que tener en cuenta que el inadecua-
microorganismo, al interior de la biopelícula para do uso de la biorremediación puede ocasionar una
mejorar la eficacia de estos procesos y en este caso serie de impactos negativos, por lo tanto se debe
ser aprovechado para la formulación de estrategias buscar un vínculo entre la gestión ambiental y la
en el tratamiento secundario de aguas residuales. biorremediación por medio de herramientas como
(Barrionuevo M. D., et al., 2009). la ética, la educación ambiental y planes de mane-
jo que permiten alcanzar procesos amigables con el
Por lo anterior, el estudio de estas comunidades ambiente enfocados hacia el desarrollo sustentable.
microbianas es muy interesante y plantea la posi-
bilidad de generar investi- De esta forma se busca establecer relaciones que
Se busca establecer gación; en torno a esto se puedan llegar a posibilitar procesos para el trata-
relaciones que propone la identificación miento secundario de aguas residuales, con el fin
puedan llegar a de microorganismos aso- de contribuir y generar un impacto positivo sobre
posibilitar procesos ciados a biopelículas en el ambiente, aportando herramientas de estudio
para el tratamiento trampas de aguas residua- y fomentando el interés por la gestión ambiental;
secundario de les urbanas. Esto contem- de esta forma se evidencia el importante papel que
aguas residuales, plaría identificar biopelí- juega el profesional de bacteriología dentro del en-
culas en trampas de aguas foque ambiental y cómo la investigación formativa
con el fin de
residuales urbanas, a las es fuente de solución de problemáticas ambientales
contribuir y generar
cuales se les realizaría un (Olarte, 2010).
un impacto positivo análisis microbiológico y la
sobre el ambiente, caracterización química de RESULTADOS
aportando las especies asociadas a la
herramientas biopelícula, como dos fac- Los microorganismos asociados a biopelículas son
de estudio y tores que constituyen las más resistentes ante el medio; esta es una interesante
fomentando el variables del estudio, plan- ventaja. El aislar estos microorganismos de sus am-
interés por la teándose como tema de in- bientes naturales, identificarlos y conocer las interac-
vestigación el interrogante ciones que realizan con el entorno, es necesaria para
gestión ambiental.
¿cuáles microorganismos la búsqueda de aplicaciones en procesos biotecnoló-
presentes en aguas residua- gicos como la biorremediación. Optimizar esta me-
les están asociados a la formación de biopelículas? todología y el uso de estos microorganismos en el
Atendiendo a esta temática se haría necesario divi- tratamiento secundario de aguas residuales se hace
dir el proyecto en varias fases: la primera, centrada importante para mejorar los procesos que actual-
en aislar los microorganismos asociados a biopelí- mente se realizan sobre esta, buscando su recupera-
culas en trampas de aguas residuales; la segunda, ción, una menor contaminación y aprovechamiento.
enfocada en determinar los compuestos que actúan La consolidación de estrategias y aplicaciones con
al interior de la biopelícula; y la tercera, se centra en microorganismos asociados a biopelículas debe ser
entender la relación que existe entre los microorga- manejado primero desde la gestión y la educación
nismos de la biopelícula y los compuestos con el fin ambiental para generar un conjunto armónico.
de proponer su posible aplicación en el tratamiento
secundario de aguas residuales como una alternati-
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