Bioremediación de Metales

Pesados

Dr. Jim Field

Universidad de Arizona
Departamento de Ingeniaría
Química y Ambiental
 Bioremediación de Metales Pesados

•  Definición de Metales Pesados: El termino metal pesado

se refiere a todo elemento químico metálico que tenga una
densidad relativamente alta y que sea toxico o venenoso en
concentraciones pequeñas

–  Peso atómico entre 63.546 y 200.590.

–  Ejemplos de metales no esenciales: mercurio (Hg), cadmio

(Cd), arsénico (As), cromo (Cr), talio (Tl), y plomo (Pb).

–  Ejemplos de metales traza: cobalto (Co), cobre (Cu), hierro

(Fe), manganeso (Mn), molibdeno (Mo), vanadio (V), selenio
(Se), y zinc (Zn)
 Bioremediación de Metales Pesados

•  Los metales pesados son componentes naturales de la

corteza terrestre. No pueden ser degradados o destruidos
–  Concentraciones bajas algunas veces son esenciales, metales traza
–  Concentraciones altas = envenenamiento.

•  Bioacumulación: aumento de la
concentración de un químico en la
cadena biológica alimenticia a
través del tiempo en comparación
con la concentración del químico
en el medio ambiente.
 Bioremediación de Metales Pesados

•  Importancia de la Contaminación de Metales Pesados

–  A mediados de los años 90, 389 de los 703 Sitios de la Lista de
Prioridades Nacionales (de EEUU) contenían metales pesados
–  Se estima que en Europa Oriental hay 100,000 sitios con
contaminación de metales pesados

•  Casos Famosos de Contaminación de Metales Pesados

–  Minimata – Descargas de mercurio en la bahía de Minimata de la
compañía Chisso Chemical (1952 = 500 muertes debido a el
consumo de pescado contaminados)
–  Basel – 30 toneladas de pesticidas con contenido de mercurio
fueron descargadas en el río Rhine en 1986 por la compañía
Sandoz Chemical
–  Coto de Donana – un millón de m3 de lodos que contenían sulfuro,
plomo, cobre, zinc y cadmio fueron a dar al río Guadimar en 1998
causando un gran impacto en los sensibles lugares en donde se
reproducen las aves
Bioremediación de Metales Pesados
Producción (millones de Emisiones (millones
toneladas métricas) de toneladas
métricas)

PRODUCCION DE PLOMO
PRODUCCION DE COBRE
PRODUCCION DE ZINC
EMISIONES DE PLOMO
EMISIONES DE COBRE
EMISIONES DE ZINC

Producción y Consumo Global de Algunos Metales Tóxicos

1850-1990 (World Resource Institute)
 Bioremediación de Metales Pesados

Contribución Antropogénica de
Metales Pesados a la Biosfera Fuentes Principales:

Metal tons por año –  Baños procesadores de

arsénico 120,000 metales
cadmio 30,000 –  Drenaje acido de las minas
cobre 2,150,000 –  Aguas de limpieza y
mercurio 11,000 enfriamiento
–  Fundición de metales &
molibdeno 110,000
refinación de escoria/ lodos
níkel 470,000 –  Catalizadores usados y
plomo 1,160,000 baterías usadas
zinc 2,340,000 –  Lodos del proceso de
tratamiento
 Bioremediación de Metales Pesados
Geocronología de metales pesados en el lugar de establecimiento del la cuenca
del Río Rhine, Ketelmeer [Beurskens 1995] (nota: los símbolos rellenados
corresponden a muestras de archivo, estas muestras fueren tomados y
guardados en 1970-1972)
Concentración (mg/kg) Concentración (mg/kg) Concentración (mg/kg)

Año de deposición
Año de deposición Año de deposición
Exposición a Plomo en Niños de la Comunidad de
una Fundidora en la Región Lagunera, México

REMOTO INTERMEDIO CERCANO

Niveles de Plomo en niños que viven en lugares cercanos, intermedios y

remotos a el complejo de una fundidora en México, (Región Lagunera)
[García Vargas et al 2001 J. Toxicol. Environ. Health Pt A, 62:417]
 Niveles Base Típicos de Metales en Suelos y
Sistemas Acuáticos
Agua frescaa Agua de mar b Sueloc

(µM) (µM) (µmol/kg)

Oro (Au)
Aluminio (Al)
Arsénico (As)
Bario (Ba)
Cadmio (Cd)
Cobalto (Co)
Cromo (Cr)
Cesio (Cs)
Cobre (Cu)
Mercurio (Hg)

(µM) Manganeso (Mn)

Níquel (Ni)
Plomo (Pb)
Estaño (Sn)
Zinc (Zn)

a de Goldmand y Horne (1983), Leppard (1981), y Sigg (1985). b de Bidwell y Spotte (1985); c de
Lindsay (1979); d ND, no información reportada; e Traza, niveles por debajo del nivel de detección.
Papel de los Microorganismos en la
Movilización de Metales
•  Lixiviación
–  Autotrófica: Bacterias que oxidan sulfuro (Thiobacillus)
S0 + O2 H2S04
•  Sedimentos acuáticos
•  Escoria o cenizas en movimiento (Mercier et al. 1999. Environ.
Management 24:517)
–  Heterotrófica: Hongos → Ácidos Orgánicos
•  Solubilización de óxidos metálicos (MnO2 Fe2O3 & fosfato)
•  Cu-Cd-As decomisionados como preservador de maderas

•  Volatilización
–  Metilacion: Selenio [Stork et al 1999 Biol. Trace Element. Res.
69:217]
SeO42- + orgánicos (CH3)2Se volátil
 Papel de los Microorganismos en la
Movilización de Metales (Continuación)
•  Solubilización Reductiva
–  Reducción Disimilatoria: Óxidos de Hierro y Manganeso
•  MnO2 [s] + orgánicos Mn2+ [aq]

•  Movilización Indirecta vía Reducción del Sorbente

–  Reducción Disimilatoria: Óxidos de Hierro con arseniato adsorbido
•  FeOOH-As(V) [s] + orgánicos Fe2+ [aq] + As(V) [aq]
 Papel de los Microorganismos en la
Inmovilización de Metales
•  Biosorción (Independiente al Metabolismo)
–  Adsorción de metales a la Biomasa Microbiana (viva o muerta):
sorción química de metales con ligándos celulares

célula
bacteriana

•  Quimosorción Mejorada Biológicamente

–  Adsorción de metales a minerales biogénicos: sorción química
de cationes metálicos a un precipitado en la superficie celular

célula
bacteriana
 Papel de los Microorganismos en la
Inmovilización de Metales (Continuación)

•  Degradación Biológica de Quelatos:

–  Biodegradación de Metales-Quelatos Complejos: metal-citrato y
metal-EDTA [Thomas 2000 JCTB 75:187; Satroutclinov 2000 EST
34:1715]
–  Cd-Citrato[aq] + HPO42- Cd3(PO4)2 [s]

•  Precipitación Reductiva
–  Reducción directa de metales a valencia mas pequeña de
menor solubilidad: Por ejemplo Cr(VI) toxico soluble a Cr(III)
menos toxico y menos soluble
–  Cr(VI) [aq] + orgánicos Cr(III) [s]
Papel de los Microorganismos en la
Inmovilización de Metales (Continuación)
•  Precipitación Reductiva Indirecta: Reducción Indirecta vía
agentes reductivos biogénicos: Fe(II) o S2- producido por bacterias
reductoras de sulfuro o hierro, pueden reducir Cr(VI)

Fe(III) [s] + acido orgánicos Fe(II) [aq]

Cr(VI) [aq] + Fe(II) [aq] Cr(III) [s] + Fe(III) [s]

•  Metales Precipitadores de Ligándoos Biogénicos

Inorgánicos:
–  Biogénesis de Sulfuro: Formando bacterias reductoras de
sulfuro o S2- que precipiten metales

SO42- + orgánicos biotic S2-

abiotic
Cd2+[aq] + S2- CdS [s]
 Mecanismos de Tolerancia
a los Metales Pesados
•  Bombas de Eflujo
–  Bombas de iones dependientes
de energía
•  Tipio-P ATPases (ATP)
•  Bombas antiporter
(usando la energía de
gradiente de H+)
•  Proteínas ligadoras de
Metales
–  Metalotineína
•  Reductasas
–  Reducción de metales para
mejorar el eflujo (As)
–  Reducción metal a formas
menos toxicas (Hg)
Mecanismos de Tolerancia a los
Metales Pesados
 Grupos Ligadores
Biosorción
Definición:
sorción de metales a la
biomasa independiente del
metabolismo

Biosorbentes microbianos:
biomasa de bacterias, fungi y
algas

Buena Capacidad de
Biosorción : > 100 mg/g o 1
mmol/g

Mecanismos Principales:
intercambio de iones y
complexación
(Tabla de Schiewer y Volesky 2000)
Estructura de biomoléculas importantes involucradas en el
ligamiento de metales (Figura de Schiewer y Volesky 2000)
 Biosorción

El Consumo Sigue una Isoterma de Adsorción Típica

proteína -1

Concentración

Adsorción y consumo de Cu por Chlorella vulgaris en función de la concentración de

Cu en el medio durante una incubación de 40 minutos. [Mallick et al 2003 WJMB 19:695].
 Tecnología de la Biosorción
Curva de paso típicas en reactores de lecho empacado
Adsorción Desorción

Curvas de paso para la adsorción de Cobre (II) con

flujo continuo. Sistema de lecho fijo empacado con
(Figura de Schiewer y Staphylococcus inmovilizado en pelotillas de Gel
Volesky 2000) Alginate a dos velocidades de flujo diferentes.
[Stanley & Ogden 2003 J. Environ. Mangm.69:289]
 Precipitación Reductiva
•  Biomembranas Reductoras de Sulfatos Reducen Cr(VI)
a Cr(III) [Smith & Gadd 2000 J. Appl. Microbiol. 88:983]
–  88% de 500 µM Cr(VI) eliminadas con lactasa como donador de
electrones en 48 horas
–  Gran parte del Cr(III) se precipito
como se puede ver en la figura
–  Reducción de sulfato fue inhibida
en presencia de Cr(VI)
Balance de masa del cromo en un sistema de biocelda reductora de sulfato
después de un periodo de incubación de 48 horas con 500 µmol l -1 Cr(VI)

Cromo Total

Sedimento
Liquido recirculado
pelotillas
supernata
Biomembrana
Cromo total
 Precipitación Reductiva
•  Reducción Directa contra Indirecta de Cr(VI) a Cr(III) por
Bacterias Reductoras de Sulfato [Battaglia et al 2002 JIMB.
28:154]

–  50 mg/l Cr(VI) fue reducido en 15 minutos por una consorcia

microbiana reductor de sulfato en presencia de 500 ppm de H2S

–  16 mg/l Cr(VI) fue reducido en 1 hora por una consorcia

microbiana reductor de sulfato en ausencia de H2S.

–  Biopeliculas reductoras de sulfato en reactores alimentados

con H2 como donador de electrones
•  Columnas alimentadas continuamente con 16 ppm de Cr(VI)
•  90 mg Cr(VI) h-1 g-1 proteínas (no H2S)
Bioremediación de Hg2+ en Chloroalkali Wastewater
[Von Canstein et al 1999 AEM 65:5279]

•  Pseudomonas putida Spi3 es Resistente al Mercurio

–  Reduce Hg2+ a Hg0 metálico
–  En laboratorio los reactores de
biopelicula pueden reducir
7 ppm de Hg2+ en el influente con
un 90-98% de eficiencia
Hg (µg/l) en el eflujo del reactor

Tiempo (h)
 Bioremediación de Hg2+ en Agua Residual de
Cloruroalcalino
[Von Canstein et al 1999 AEM 65:5279]

Composición del agua residual de Cloruroalcalino

en Europa
Bioremediación de Hg2+ en la Planta Piloto de Agua
Residual Cloruroalcalino (Wagner et al 2000 EST 34:4628)
ENTRADA/SALIDA
AGUA RESIDUALES
S= Válvulas de seguridad
W= Ajuste del pH del agua residual
N1+N2= Contenedor neutralizador
M= Contenedor del medio con nutrientes
B= Bioreactor
E= Controles electrónicos
P= Amortiguador de Protección
A= Filtro de carbón activado
R= Deposito Regenerador

Esquema de una planta piloto para la remoción continua automática

de mercurio de aguas residuales mediante bacterias, desarrollado en
cooperación entre GBF y Preussag Wassertechnik

Bioreactor: Volumen de 1m3: Construido para tratamiento continuo; Carga de hasta 4 m3/h
de aguas residuales; Llenado con gránulos de piedra pómez como soporte sólido para el
crecimiento de bacterias; El modo de operación fue de flujo vertical ascendente; La inoculación
fue hecha con siete cultivos de cepas de Pseudomonas resistentes al mercurio
Además, la planta piloto completa contenía lo siguiente:
- Ajuste automático de pH a 7.0 ± 0.5
- Dosificación automática de nutrientes para las bacterias
- Filtro pulidor (carbón activado) después del bioreactor
- Medición continua de mercurio
Bioremediación de Hg2+ en Agua Residual de
Cloruroalcalino
[Von Canstein et al 1999 AEM 65:5279]

Hg en Flujo de Salida (mg/l)

Hg en Flujo de Entrada (mg/l)

Tiempo (h)
 Precipitación de Metales Pesados con
Sulfuro Biogénico
Sulfuro como Ligando de SO42- + orgánicos bitico HS-
Precipitación de Metales disociación
HS- H+ + S2-
Pesados:
M2+[aq] + S2- abiótico
- Constantes de Solubilidad MS[s]

Li2CO3 = 2 Li+ + CO32- Sustancia T (°C) Ksp

Ksp = [Li+]2×[CO32-] CdS 18 4.0 × 10-30
MnS 18 3.0 × 10-14
- Minerales Formados: FeS 6.0 × 10-19
galena (PbS) HgS 18 1.5 × 10-53
esfalerita (ZnS)
CuS 18 2.0 × 10-37
pirita (FeS2)
calcopirita (CuFeS2) PbS 3.2 × 10-28
calcocita (Cu2S) ZnS 3.0 × 10-25
cinabrio (HgS)
realgar (AsS) NiS 1.0 × 10-24
Constantes de solubilidad de ciertos
metales del sulfuro
 Biotratamiento y Recuperación de Metales del
Drenaje Acido de Minas
[Tabak et al. 2003 Biodegradación 14:423]

Método General

GAS DE SULFURO DE HIDROGENO

AGUA DE BIOREACTOR
PROCESO DE AGUA
MINAS PRECIPITACION DE PARA LA
TRATADA
ACIDA REDUCCION
METALES
DEL SULFATO

METALES COMO
PRECIPITADOS
DE SULFURO
Biotratamiento y Recuperación de Metales del
Drenaje Acido de Minas
[Tabak et al. 2003 Biodegradación 14:423]

Método General
Biotratamiento y Recuperación de Metales del
Drenaje Acido de Minas
[Tabak et al. 2003 Biodegradación 14:423]

Eficiencia de Remoción del Proceso de Precipitación

Compuesto Concentración (mg/L)
Metal Entrada Salida
Al3+ 293 0.5
Cu2+ 223 BDL
Mn2+ 223 0.4
Fe2+ 514 0.1
Zn2+ 630 BDL
Cd2+ 1.38 BDL
Ni2+ 2.14 BDL
As3+ 0.512 No medida
Co2+ 1.23 BDL
SO42- 2,400 24
Biotratamiento y Recuperación de Metales del
Drenaje Acido de Minas
[Tabak et al. 2003 Biodegradación 14:423]

Recuperación de metales
Metal recoveries obtenidos
obtained durante el proceso
during continuous continuo de operación
process operation

Semana 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4 Semana 5

99.1 98.1 98.6 99.4 99.8

98.6 99.4 100 - 1.8 99.7
- 3.7 99.8 98.4 103.6 99.1
100 99.1 99.4 99.3 99.8
98.8 97.4 95.1a 96.8 97.1
89.4 88.6 81.4 75.4b 87.4
49.1 50.4 45.6 42.4 47.8
102 98.4 99.8 99.9 100
 Conversión Biológica de Anglesita (PbSO4) y
Desechos de Plomo de Baterías de Carros a
Galena (PbS) [Weijma et al. 2002 Biotechnol. Progr. 18:770]

•  Baterías Usadas de Carros: Fracción Principal

Desechada = Pasta de Plomo
–  Composición de la Pasta
de Plomo:
•  50-60% PbSO4
•  15-35% PbO2
•  5-10% PbO/Pb(OH)2
•  2-5% Pb elemental

•  Procesos Biotécnicos
–  Conversión de la pasta de plomo a sulfuro de plomo con bacterias
reductoras de sulfato usando gas hidrogeno como donador de
electrones
Conversión Biológica de Anglesita (PbSO4) y
Desechos de Plomo de Baterías de Carros a
Galena (PbS) [Weijma et al. 2002 Biotechnol. Progr. 18:770]
•  Reducción de Sulfato con H2
–  SO42- + 4 H2 + H+ → HS- + 4 H2O
–  Cargas posibles de hasta 30 kg SO42- m-3 reactor d-1
•  Precipitación de especies de Pb2+ con sulfuro
–  PbSO4 + HS- → PbS + H+ + SO42-
–  PbO+ HS- + H+ → PbS + H2O
–  Pb(OH)2 + HS- + H+ → PbS + 2H2O
•  Precipitación de especies de Pb4+ con sulfuro
–  PbO2 + 2e- + HS- + 3H+ → PbS + 2H2O
–  Dos electrones para reducir Pb4+ a Pb2+ pueden venir
abioticamente del sulfuro o bioticamnete de H2
•  Suministro exógeno de SO42- requerido
–  No hay suficiente sulfato en la pasta de plomo para proveer
sulfuro suficiente; por lo que se necesita añadir sulfuro a el
sistema
Conversión Biológica de Anglesita (PbSO4) y
Desechos de Plomo de Baterías de Carros a
Galena (PbS) [Weijma et al. 2002 Biotechnol. Progr. 18:770]
•  Montaje Experimental

Representación esquemática del montaje experimental

Conversión Biológica de Anglesita (PbSO4) y
Desechos de Plomo de Baterías de Carros a
Galena (PbS) [Weijma et al. 2002 Biotechnol. Progr. 18:770]
Carga (kg S/m3/día

Tiempo (días)

Cargas de sulfato de sodio y sulfato de plomo al reactor de gas

 Tratamiento y Recuperación de Zinc con
Bacterias Reductoras de Sulfato en la
Refinería Budelco
•  Bacterias reductoras de sulfato aplicadas a un reactor
de lodos anaeróbico de flujo vertical ascendente

•  Tratamiento de agua subterránea contaminada con zinc

en la fundidora de Budelco
–  Inicialmente etanol se uso como donador de electrones
–  Después síntesis de gas (H2)

Compuesto Unidad Influjo Eflujo

SO42- mg/l 1000 <200
Zn2+ mg/l 30 <0.15
Cd2+ mg/l 0.8 <0.01

Análisis típico del flujo de entrada

y salida (influente y efluente)
 Tratamiento y Recuperación de Zinc con
Bacterias Reductoras de Sulfato en la
Refinería Budelco
Efluente dirigida a
segunda bioreactor
reducción de sulfato

Agua de
enfriamiento
Bioreactor
reducción de
sulfato
Eliminación
de fluoruro

sedimentador
agua residual
Gas natural
Reformación
de gas

Recirculación
H2 y CO como de lodo
fluoruro de
e-donador
calcio
 Tratamiento y Recuperación de Zinc con
Bacterias Reductoras de Sulfato en la
Refinería Budelco
influente proviente de
primera bioreactor
reducción de sulfato

Aire de ventilación

Filtro de compost
efluente con
sedimentador de platos
sulfuro de hidrogeno
floculante
y
FeCl3

aire
reactor de biopelicula
lecho fijo Filtro de arena
Etanol como
e-donador
Recirculación
de lodo
Agua limpia
Combinación de las Tecnología de
Movilización e Inmovilización
Suelo
Contaminado

Nutrientes
Sulfuro Suelo
Limpio
Inoculo

Lixiviado del Suelo

Nutrientes Efluente Libre

Sustrato de Metales

Inoculo

Metales de Sulfuro
Sólidos