Bioagro 7(2): 31-37. 1995 Gaeumannomyces graminis var. graminis, HONGO CAUSANTE DE LA PUDRICION NEGRA DE LA HOJA ENVAINADORA DEL ARROZ EN VENEZUELA Reinaldo Cardona’ , Humberto A. Rodriguez’ y Herman Nass" RESUMEN Durante la gpoca de lluvia de 1994 en el campo experimental del Centro de Investigaciones Agropecuarias Portuguesa (CIAEP- FONAIAP) se noté Ia preomcia severa de una enfermedad que caus® ol acame de las plantas de arroz. Los sintomas ‘consstieron en una decoloracion mamrén en la vain de las jas, comenzando a nivel dela linea del agua y que ccntinuaba en ascenso sobre Ia planta, Numerososperitecos news fueron encontrados en las eas decoloradas. Los peritacios midieron 200- [346 jum en diimetro, con ascos que midieron 116-130 x 13-15 jum contantivo de 8 ascosporashialnas, levement curvadss y con 3 a 7 septos que midieron 67-108 x 2,5-3 jm. En el miclio se observaron hifopodios lobados de color marrén. Por las caractaristicas morfolgicas y las dimensionssexhibidas por el hongo, éte se idntticd como Gacumannomces eramini vat sgaminis causante dels enfermedad pudricién negra de Ia hoja envainadora del tallo de aroz. Esta es la primera publicacin de Gacumarinonncce grams vat. graminis en arroz en Venezuela Palabras claves: Gaewmannomces gramnis, aro, pudricin negra de a hoja envainadora ABSTRACT Gacumannomyces graminis var gramints, fungus causing the black sheath rot on rice in Venezuela. During the rainy season in 1994, at the experimental station of Portuguesa Agricultural Research Institute (Centro de Investigaciones Agropecuarias Potuguese-FONAIAP,) the presence of severe disease that caused lodging in rice was observed ‘Symptoms consisted in brown discoloration ofthe shets beginning at the waterline and continuing upward the plat. Numerous black perithecia were found inthe discolored areas Perithecia were about 200-346 jum in diameter, with asci 116-130 x 13-15 jum containing eight hyaline, slightly curved ascospores, tee to seven sepa, measuring 67-108 x 2,53 jan. Mycelia were ‘observe with brown lobed hyphopodia. Due to the morphological characteristics and dimensions exhibited by the fungus, it ‘as identified as Gacumamonoes grominie var. gaminis causer of disease black sheats rot on rice This is the frst ‘lublcaton of Gacumannonpves grams var. graminis on rice in Venemucla, Keys words: Gacunannompes gramins, ice, black sheath rot INTRODUCCION Entre los patogenos capaces de causar el acame de las plantas de arroz se encuentra el hongo En el afio de 1994, en el Campo Experimental Gaewmannomyces graminis (Sacc,) Arx & Oliver, del Centro de Investigaciones Agropecuarias _habitante del suelo, parasito de las raices, la base Portuguesa (CIAEP), en pruebas de rendimiento de —_del talo y la hoja envainadora de las gramineas. Se lineas de arroz (Oryza sariva L.), conducidas por el reconocen tres variedades de G. graminis, Departamento de Mejoramiento Genéticu de dicho diferenciadas por la longitud de las ascosporas y ‘centro, se observé la presencia alarmante de una _€l tipo de hifopodio (Walker, 1980), éstas son: var. ‘enfermedad que ocasioné el acame de las plantas. tritici (Walker), asociado con la enfermedad “take * Investigador. FONATAP-Portuguesa. Apartado 102. Acarigua, Venezuela, 3Vol. 7 (1995) all? del trigo (Triticum aestivum) y ta cebada (Hordewm vulgare) ex 20nas templadas: Ia. var. avenge (Tumer) Dennis, que causa en plantas de avena (Avent sativa) y grama_ (Stanotraphus secuncenus) la enfermedad “take-all”, y la var sgraminis, patégino en grama que causa Ia enfermedad “pudricion negra dela hoja evainadora” en arroz (Elliot, 1991; Ou, 1985; Tallis y Adair, 1947; Walker, 1980) Tan et al (1994) mediante estudios de la estructura. genética del RNA ribosomal de G. _gveminis, encontraron dos niveles de variacién del RNA, que pemniten identficar los sislamiantas etre variedades y-discriminnr dentro de las varidades La enfermedad pudricion negra de la hoja eawvainadora del arroz se ha sefalado en Japan, India, Australia, Filipinas, Africa y Estados Unidos (Ou, 1985) la cual hasta 1991 estaba ‘confinada al estado de Texas, pero Datnoff (1993) reports esta enfermedad por primera vez en el estado de Florida . E] presente trabajo tuvo como objetivo cestablecer la identidad del patéaeno que ocasion® ef acame de las plantas de arroz, y deseribir los sintomias en sus diferentes estados de desarrollo. MATERIALES Y METODOS El trabajo se lew a cabo en al laboratorio de Fitopatologia del CIAEP a través de dos etapas: Ia ‘primera consistio en el aislamiento e idemtficacién del patoxeno, y la segunda en las pruebas de patoganicidad, Aislamiento e identificacion Er aislamiento del patdgeno se realizd en plantas nfermas, a partir de pequefios seamentos. de la hoa ewainadora del tall de arroz, y por siembra directa de estructuras fingjcas” obtenidas en muestras de campo, Ambos materiales fueron tratados por 5 minutos con una solucién de hipoclorto de sodio, al 0.2 % lavados tres veces con agua destlada estéril, secados en papd de filtro ester! e inmediatamente sembrados en agar ‘agua (AA) al 1,5 %. El hongo aislado se cutive en agar papa dextrosa (PDA), con el propésito de _BIOAGRO. Ne purificarl, preservarlo, identficarlo y producir et indculo requerido para las pruebas de patogenicidad. Para inducir el desarrollo de la fase reproductiva sexual, se realizaron cultivos 'monespéricos del hongo en AA y se incubaron en condiciones de laboratorio (+ 28 °C), revisindose periédicamente para observar la formacién de estructuras reproduetivas. A su vez, del material enfermo, se efectuaron cortes con hojillas para realizar montajes an lactofenol y hacer observaciones microscépicas Pruebas de patogenicidad La actividad patoginica del hongo se evidencié en plantas de arroz de la variedad Cimarrén de 30 dias de edad, sembradas en bolsas de polietileno contentivas de suelo previamente esterlizado con calor himedo, El inéculo consistié en colonias dlesarrolladas durante tres semanas en PDA a temperatura ambiente, las cuales se colocaron en discos de 5 mm de diametro en la base del tallo a nivel del culo; las plantas testigo se trataron s6lo ‘con discos de PDA estériles. Las plantas se colocaren en invemadero en envases de plistico previamente desinfectados con hipoclorito de sodio al 5 % y Menados con agua destilada estén Diariamente se evalu eb desarrollo de In enfermedad, de igual forma se realizaron aislamientos de os tgjidos__infectados aitificaimente RESULTADOS Y DISCUSION Enla Figura | puede observarse el acame de Jas plantas de arroz causado por In enfermedad En los tallos de las plantas caidas se observe una ‘mancha marrén oscura a negra (Figuira_ 2), ademas de estructuras fimgjcas (Figura 3), Aislamiento ¢ identificacién ‘Toxios Jos aislamientos realizados mostraron las miismas —_caracteristicas _culturales; inicia mente en PDA se evidencio un micelio blanco, e! cual al cabo de tres semanas cambio de olivaceo a casi nego,Cardona et al Pudricién negra en arroz eS AT Tass 8 OS ‘Figure 1. Plantas de arroz acamadas por efecto de la enfermedad Figura 2. Sintomas iniciales de I enfermedad a nivel de tallo34 Vol. 7 (1995) En los medios utiliados (PDA y AA), el hhongo desarrollé sélo el estado telemérfico, con cstructuras idénticas alas observadas naturalmente en el material vegetal, 10s cuales resultaron ser peritecios, En dl tejido foliar infectado los pertecios se manifestaron intemamente, embebidos —y slobosos. Presentaron un cuello variable en longitud, con didmetro de 200-346 jum (Figura 4), Parafisis presentes, —hialinas, septadas, constrictas en el septo, oénicas hacia ed épice y tan largas como los ascos AAsoos ‘unitunicades, elongados, en forma de lavas con un pequaio anillo apical, midieron 116-130 x 13-15 jum, y contenian 8 ascosporas (Figura 5), Las ascosporas débilmente amarilas en masas_hialinas, Jevemente curvadas, redondeadas en el pice Y cénicas hacia Ia base de 67-108 x 2,5-3 hm, septos frecuetemente indistintos pero en rvimero de 3 a7 al madturar (Figura 6), En los cortes longitudinales de los tejidos afectades, se evidencié que tas hifas forman redes sobre el rizoma, hoja envainadora y tallo, con frecuencia se desarrllan dentro de a vaina, son de color oscuro a negras, septadas yan algunos casos se observa un corredor de tas, Las hifas. son ramificadas.y forman un recodo en ef cul se desarrollan dos tipos de hifopodios: uno de terminal lobulado y de color marron en al sitio de Ia. ramificacion (Figura 7), y otro de 1ébulo simple terminal ¢ itercalado; cada uno con una pequetia ‘mancha blanca representando un punto de ppenetracion an el hospedero Prucbas de patogenicidad En las plantas inoculadas los sintomas iniciales se manifestaron a nivel de la linea del agua de riego, como una mancha rojiza oscura, la cual se toma martin oscura a negra (Figura 8), al avanzar Ia invasién la hoja envainadora. mere y la infeccién alcanza al tallo y cuello de la planta, lo que provoca la. inhibicién del ‘macollamiento y ol acame de las plantas de arroz Tambien es comin en plantas infectadas conseguir lenado incomplto de grano, femergencia parcial y maduracien prematura de ta ppanicula. Al final del ciclo del cuitiv se observan BIOAGRO N72 peritecios de color negro dentro del tejdo de la hoja eainadora seca y_ desprendida, al avanzar la enfermedad provoca ol secaminto y muerte de la planta. Los troctos de las plantas infectadas _artficalmente produjeron en PDA colonias fingicas con las mismas caracteisticas del aislamiento original En las muestras de materiales infoctados rnaturalmente procedentes de campo, sélo se encontraron estructuras sexuales. (peritecios), idéticas a. las desarolladas pore hongo in vitro Las caractersticas morfolégicas y las dimensiones exhibidas por ob hongo aisado, conjuntamente con os resultados de as pruchas de patogenicidad ¥ reaislamiento, permitieron comprobar que la ‘enfermedad observada ex las plantas de arroz es causada por l hongo G. graminis (Sac) Ars. & D. Oliver var graminis (Walker, 1980), Este hhongo ademas de infectar las plantas de arroz, es capaz de crecer sobre numerosas gramineas, encontrindose particularmente en zonas, tropicales y sub-tropicales (Domsch et al 1980), Los cultives monesporicos de G. graminis var. graminis, corroboran que el hongo es homotilico por producir inn vitro el estado sexual, lo cual fue demestrado por primera vez en 1933 por Tullis, quien estudié en detalle ta enfermedad demostré Ia patogenicidad de G. graminis var. graminis, (Talis y Adair, 1947) Las ascosporas de ‘graminis infestan ala. planta 9 nivel de las hojas basales © por las vainas de las. hojas exteriores, la penetracién puede ser dircets 0 por formacién de apresorios, después de pendtrar el micelio se disemina formando un enrollamiento de hifas entre fa vaina, finalmente se infecta el tallo y Ia camara de aire de la vaina de las hojas se llenan con ovillos de hifas las cuales maduran en _pertecios, Ademas a hongo es capaz de diseminarse a través de la semilla, infectando alrededor del 1 al 2% de las plantulas (Ov, 1985). La informacion acerca de las medidas de control de la enfermedades escasa, ya que fs considerada de menor importancia (Ou, 1985); sin embargo, Ia susceptibilidad de los G gramims var.35, Cardona et al. Pudricién negra en arroz Figura 4. Pentecio con asoos y ascosporas Figura 5. Ascos con ascosporas (x 400) (400) Figura 7. Hiphopodio desarrollado sobre tejido enfermo36 Vol. 7 (1995) BIOAGRO. Nez ‘Figura 8, Plantas de arroz inoculadas con el hongo Gaenarmnonyces graminis: var. gramiis, mostrando los sintomas de la enfermedad. caltivares, y las inspecciones efectuadas en diferentes zonas arroceras de los _estados Portuguesa y Gudrico, permitieron estimar que la enfermedad se encuentra ampliamente distribuida en el pais y dado a la actual ‘manifestacién severa, es recomendable tomarla en consideracin en los programas de mejoramiento genético, con et fin de eliminar los cultivares que muestren susceptibilidad a este patogaio. Ain cuando habitualmente se observa en los campos de arroz, es de hacer notar que esta investigacién constituye el primer trabajo publicado de G. grantinis var. gyraminis en arroz en Venezuela LITERATURA CITADA 1, Datnoff. LIE, 1993, Black sheath rot caused by G. graminis var. graminis on rice in Florida Plant Disease 77: 210, 2. Domsch, KH, W. Gams y H. Anderson. 1980. Compendium of soil fungi. Volume 1 ‘Academic Press. N. Y. 859 p. 3. Elliot, M.L, 1991, Determination of an etiological agent of bermudagrass decline. Phytopatoloay 81: 1380-1384.Cardona et al. 4. Ou, SH. 1985. Rice Disease. Commonwealth Agricultural Bureaux Mycological Institute. Second Edition. 380 p. 5. Tan, M.K., PT. Wong y M.P. Holley. 1994. Characterization of nuclear ribosomal DNA. (DNA) in G. graminis and correlation of rDNA variation with G. graminis varieties Mycol. Res. 98 (5): 553-561 37 Pudricién negra en arroz 6. Tullis, EC. y CR Adair. 1947. Black sheath rot of rice (Ophiobolus oryzinus) caused lodging of rice in Arkansas and Texas in 1947, Plant Disease. Reporter 31: 468. 7. Walker, J. 1980. Gaewmannomyces, Linocarpon, Ophiobolus and several other genera scolescospored Ascomycetes and Phialophora conidial states, with note on hyphopodia. Mycotaxon 11: 1-129.