CUARTA UNIDAD

PRÁCTICA N° 13: CULTIVO DE BACTERIAS Y EL EFECTO DE ANTIBIÓTICOS

INSTRUCCIONES: Lee con cuidado la guía, sigue sus instrucciones así como las del docente,
realiza tu práctica seguro y atento.

1. TEMA: ​Biotecnología.

2. OBJETIVO:
Observar la clonación in vitro de microorganismos.

3. INTRODUCCIÓN:
CLONACION IN VITRO:
La reproducción asexual, también llamada reproducción clonal o ​CLONACIÓN​, es una forma
natural de reproducción utilizada por numerosas formas de vida, empezando por las ​bacterianas​.
Aunque la forma fundamental de reproducción en los ​eucariontes​ es la sexual, en la que los
descendientes son genéticamente distintos de su progenitor o progenitores, en todos los grupos
se recurre frecuentemente a la multiplicación asexual (clonal) in vitro para multiplicar de una
manera controlada el número de la población.

BACTERIAS:

Las bacterias no pueden verse a simple vista. Sin embargo, es posible observar sus colonias, que
son agrupaciones de bacterias de la misma especie, que se origina a partir de la clonación de una
bacteria original. Esta experiencia permitirá comprobar la presencia de bacterias a nuestro
alrededor y los factores que favorecen la clonación.

ANTIBIOTICOS:

Etimológicamente viene del griego anti “contra” y bios “vida”. Según la ​RAE​ un antibiótico es la
“sustancia química producida por un ser vivo o fabricada por síntesis, capaz de paralizar el
desarrollo de ciertos microorganismos patógenos, por su acción bacteriostática, o de causar la
muerte de ellos, por su acción bactericida”. Dicho de otra manera más vulgar son ​sustancias que
matan a las bacterias o hacen que éstas dejen de crecer​. Es muy importante entender que son
sustancia que únicamente afectan a las ​BACTERIAS​, no a los virus. Es decir, si tenemos una
gripe, que es provocada por un virus, un antibiótico no vale para nada. Sobre esto volveré más
adelante.
Una de las propiedades más importantes de los antibióticos es la ​toxicidad selectiva​: la toxicidad
hacia los organismos invasores es superior a la toxicidad frente a los huéspedes (los animales o
las personas)

¿Cómo actúan?

Los antibióticos presentan distintos mecanismos de acción por una serie de mecanismos, con
dianas terapéuticas (zona o proceso sobre el que actúan) en diferentes regiones de la célula
atacada. A continuación se detallan los distintos mecanismos de acción.

4. EQUIPOS/MATERIALES y REACTIVOS A UTILIZAR EN LA PRÁCTICA:

MATERIALES DE LABORATORIO MATERIALES DEL ALUMNO

● 3 Luna de reloj
● 1 Pinza ● Leche o yogur.
● 3 placas Petri ● Una pastilla de penicilina
● 1 varilla de vidrio ● Una pastilla de ampicilina
● Una pastilla de miconazol
● 3 Vaso de precipitado ● Una hoja de papel bond
● 1 Asa de siembra o de Kohle ● Plumón indeleble.
● Pizeta con Agua destilada ● Un perforador
● Mechero de alcohol
● Un trozo de papa u otro vegetal cocido que
se debe dejar pudrir varios días en un
recipiente con agua.

5. PROCEDIMIENTO y RESULTADOS:

1. Elaboración de discos antibióticos:

I. Colocar 10 ml de agua destilada en cada vaso de precipitado

II. Echar en cada vaso de precipitado una pastilla de:
Vaso 1: penicilina
Vaso 2: ampicilina
Vaso 3: miconazol
III. Con ayuda de la varilla de vidrio disolver totalmente.
IV. Una vez disuelta echar la solución en la luna de reloj
 V. Perforar 30 círculos de papel y con ayuda de la pinza remojar 10 círculos en cada una
de las soluciones.
VI. Dejar secar durante 15 min.

2.- Cada grupo debe de contar con 3 placas Petri:

Dividir las placas con un plumón indeleble como
se muestra en la figura.

PLACA 1: Control

A: ​dejarlo abierto durante toda la experiencia.

B​: dejarlo abierto durante toda la experiencia.

NO OLVIDAR ESTE
PROCEDIMIENTO

PLACA 2:

A:​ distribuir suavemente sobre el agar una

pequeña gota de leche o yogur con el asa de
siembra (esterilizada en alcohol o fuego). Cerrar
inmediatamente.

B: ​tomar una pequeña gota de agua en la que se

dejó pudrir la papa y pasarla suavemente sobre el
agar (como en la placa A). Cerrar
inmediatamente.

PLACA 3:
A:​ distribuir suavemente sobre el agar una
pequeña gota de agua estancada
B: ​toser dentro y cerrar inmediatamente.

3.- Colocar 3 discos antibióticos al lado derecho de cada placa tanto en la zona A como en
la zona B.
4.- Dejar las placas en la incubadora a 25 ° C durante 48 horas.
5.- RESULTADOS:
Dibujar los resultados obtenidos en cada placa, en el siguiente cuadro:
PLAC ZONA A ZONA B
A
1

6. CONCLUSION:
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7. CUESTIONARIO:
1. ¿Cómo se ve en la placa la presencia de bacterias?
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2. ¿Para qué nos sirve la placa 1?

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3. ¿De dónde provienen los microbios que crecen sobre la placa 2?

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4. ¿Se notan diferencias entre las colonias provenientes de diferentes orígenes? ¿Cuáles
son esas diferencias?
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5. ¿Podrían ser patógenas las bacterias que crecen en la placa 3? ¿Por qué?
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6. ¿Cómo se puede determinar cuál de los antibióticos probados es el más efectivo?

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Referencias bibliográficas consultadas y/o enlaces recomendados

CAMPBELL-REECE. Biología. Bogotá. Editorial Panamericana. 2007. Ubicación: Biblioteca

UC: 570/C24 – 2007.

https://www.google.com.pe/search?q=colonia+de+bacterias&espv=2&biw=1280&bih=662&sou
rce=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0ahUKEwiI99qTw_7PAhVM8GMKHf8jBGYQ_AUIBigB#tbm=i
sch&q=cultivo+de+bacterias+en+agar&imgrc=CBnrO26OlScZiM%3