Universidad Católica Boliviana “San Pablo”

QMC – 121. Laboratorio de Química Orgánica I

Practica No. 6. Extracción de colorantes de la zanahoria
1. INTRODUCCION
La extracción sólido líquido es una operación básica o unitaria mediante la cual se
separan uno o varios constituyentes solubles contenidos en un sólido inerte mediante
la utilización de un disolvente adecuado.
Las mezclas de reacción en disolución o suspensión acuosa porque la reacción se haya
llevado a cabo en medio acuoso o bien porque durante el final de reacción se haya
añadido una disolución acuosa sobre la mezcla de reacción inicial. La extracción del
producto de reacción deseado a partir de esta mezcla acuosa se puede conseguir
añadiendo un disolvente orgánico adecuado, más o menos denso que el agua, que sea
inmiscible con el agua y capaz de solubilizar la máxima cantidad de producto a extraer,
pero no las impurezas que lo acompañan en la mezcla de reacción. Después de agitar
la mezcla de las dos fases para aumentar la superficie de contacto entre ellas y permitir
un equilibrio más rápido del producto a extraer entre las dos fases, se producirá una
transferencia del producto deseado desde la fase acuosa inicial hacia la fase orgánica,
en una cantidad tanto mayor cuanto mayor sea su coeficiente de reparto entre el
disolvente orgánico de extracción elegido y el agua. Unos minutos después de la
agitación, las dos fases se separan de nuevo, espontáneamente por decantación, debido
a la diferencia de densidades entre ellas, con lo que la fase orgánica que contiene el
producto deseado se podrá separar mediante una simple decantación de la fase acuosa
conteniendo impurezas. La posición relativa de ambas fases depende de la relación de
densidades. Dado que después de esta extracción, la fase acuosa frecuentemente aún
contiene cierta cantidad del producto deseado, se suele repetir el proceso de extracción
un par de veces más con disolvente orgánico puro.
Una vez finalizada la operación de extracción, se tiene que recuperar el producto
extraído a partir de las fases orgánicas reunidas. Para ello, se tiene que secar la fase
orgánica resultante con un agente desecante, filtrar la suspensión resultante y
finalmente eliminar el disolvente orgánico de la disolución seca conteniendo el
producto extraído por destilación o evaporación.
La zanahoria será el producto principal para la extracción del colorante natural, por
ser un alimento rico en carotenoides el β-caroteno por contener un alto poder de
coloración.

1
2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo general
 Extraer los colorantes de la zanahoria (carotenos y xantofilas) a partir del
disolvente orgánico éter de petróleo
2.2. Objetivos específicos
 Por medio de la técnica de cromatografía determinar el número de
componentes del extracto en éter de petróleo de carotenos.
 Calcular el Rf de cada componente del extracto en éter de petróleo de
carotenos.
3. PARTE EXPERIMENTAL
Semana 1

 Se cortó una zanahoria en trozos pequeños para después hervirlos en agua durante
media hora y colarlos a través de una tela de trama muy abierta.
 Se exprimió la zanahoria cocida para separar toda el agua posible.
 Se pulverizo la masa sólida en una licuadora y se la coloco en un matraz
Erlenmeyer de 250 mL con un contenido de 45 mL de éter de petróleo.
 Se dejó en reposo durante aproximadamente 10 minutos. Se filtró con ayuda de un
embudo de vidrio y un papel filtro.
 Posteriormente se separó 5 mL del filtrado y se lo guardo en un frasco con tapa
para separar sus componentes (carotenos) por cromatografía en capa fina en la
siguiente sesión de laboratorio.
 El resto de la solución de éter de petróleo se la extrajo se con dos porciones de 10
mL de etanol al 90% (para ello se mezcló 18 mL de etanol comercial con 2 mL de
agua destilada), en un embudo de separación. Con la capa alcohólica, se realizó
la prueba para xantofila en la siguiente sesión de laboratorio. Se guardó el extracto
en un frasco cerrado.
 Por último, se recubrió ambos frascos en papel aluminio.

Semana 2
Prueba para xantofila

 Se introdujo 1 mL de la solución alcohólica procedente de la extracción en un tubo

de ensayo.
 Posteriormente se añadió 0,5 mL de ácido clorhídrico concentrado al 37% y por
último se observaron los cambios que se presentaron.

2
 Prueba para carotenos

 Se introdujo 1 mL del extracto final en éter de petróleo a un tubo de ensayo en el

que se preparó una solución fresca de 0,02 g de nitrito de sodio en 1 mL de ácido
sulfúrico concentrado.
 Por último, se registró todas las observaciones.

Separación de carotenos por cromatografía en capa fina

 Con ayuda de una regla y de un lápiz se marcó suavemente una línea tenue a 1 cm
por encima del borde inferior de la placa de gel de sílice para cromatografía en
capa fina. (Este paso fue realizado por el docente)
 Con ayuda de un tubo capilar, se sembró una gota de la muestra del extracto de
carotenos en éter de petróleo al centro de la línea trazada.
 Se introdujo la placa en un vaso de precipitados de 100 mL que contenía una
mezcla de éter de petróleo – etanol en proporciones 9,5:0,5, esto se realizó de
manera que esta no llegue a la línea trazada con lápiz en la placa cromatografía.
 Se tapó el vaso de precipitados con un vidrio de reloj y se dejó que el eluyente
ascienda por capilaridad hasta llegar cerca al borde superior de la placa.
 Se retiró la placa del vaso de precipitados para dejarla a la atmósfera durante unos
minutos.
 Una vez secada la placa se la ilumino con una lámpara de luz ultravioleta para la
detectar manchas adicionales y marcarlas con lápiz.

3
 4. RESULTADOS Y DISCUSION
4.1. Prueba para xantofila

IMAGEN OBSERVACIONES

Se pudo observar que al añadir HCl

concentrado al 37% en la solución
alcohólica procedente de la extracción no
se presenciaron los cambios de color
esperados, sin embargo, se pudo observar
un color blanquecino el cual nos indicó
que la prueba para la xantofila resulto
negativa, es decir no se pudo detectar
estas debido a que las xantofilas en las
zanahorias representan el 10% de los
carotenoides

La xantofila es un pigmento fotosintético secundario que pertenece al grupo de

los carotenoides. Este funciona como una antena que captura energía de los fotones de la
luz solar. Es un pigmento carotenoide presente en los cromoplastos de las células vegetales
y son fuente de las vitaminas A y E, las cuales tienen propiedades antioxidantes.
Las xantofilas, son compuestos químicos parecidos a los carotenos, y a diferencia de estos
últimos además de contener carbono e hidrógeno contienen uno o más átomos de oxígeno
dentro de la molécula, pero al igual que los carotenos, presentan colores llamativos (rojo,
naranja y amarillo).
Existen distintos tipos de xantofila como la luteína, la zeaxantina y la capsantina. En
función de sus componentes moleculares, si tienen un grupo hidroxilo en su molécula se
conocen como xantofilas monohidroxiladas. Si tienen dos o más grupos hidroxilos se
conocen como dihidroxiladas y polihidroxiladas.

4
 4.2. Prueba para carotenos

IMAGEN 𝑶𝑩𝑺𝑬𝑹𝑽𝑨𝑪𝑰𝑶𝑵𝑬𝑺

Al añadir el extracto final de éter de petróleo en la solución

de nitrito de sodio más ácido sulfúrico, se pudo observar un
cambio de color que representa la oxidación de los
carotenos, así también se observó que estos formaban 2
fases debido a que el éter de petróleo no es miscible con el
ácido sulfúrico.

Los llamados carotenos son una familia de compuestos químicos que se caracteriza por su
coloración que oscila entre rojo, naranja y amarillo. Dichas moléculas están constituidas
de una cadena corta hidrocarbonada (moléculas que contienen átomos de carbono e
hidrogeno). El compuesto más conocido dentro de esta familia es el betacaroteno (β-
caroteno), el cual puede ser encontrado en numerosas frutas y vegetales como la
zanahoria, pimiento rojo y camote.
Son considerados compuestos indispensables para la vida, fundamentalmente debido a las
funciones que llevan a cabo en relación con la fotosíntesis (captación de luz, foto
protección), además representan una fuente de provitamina A, con actividad antioxidante
en la célula al actuar en la neutralización de especies reactivas de oxígeno y nitrógeno
producidas como parte del metabolismo celular.

5
 4.3. Separación de carotenos por cromatografía en capa fina

IMAGEN 𝑶𝑩𝑺𝑬𝑹𝑽𝑨𝑪𝑰𝑶𝑵𝑬𝑺

Se pudo observar que a medida que el eluyente

ascendía por capilaridad, este arrastraba a los
componentes produciendo manchas de los
mismos.
Se produjeron 3 manchas a partir de las cuales se
calcularon sus respectivos Rf.

El factor que más influye en la separación de los componentes es la polaridad. La placa

está formada por una capa de gel de sílice, una sustancia muy polar y, por lo tanto, atrae
en mayor medida a componentes más polares.
Al realizar el cromatograma, las sustancias más polares interaccionan más con el soporte
y su velocidad de desplazamiento es menor, esto significa que, al revelar la placa
cromatográfica, el componente más polar se encontrara en un lugar más cercano a la línea
base que se dibujó, y por el contrario, el componente menos polar se moverá más
rápidamente y se encontrara más alejado de la línea base
 Cálculo de Rf
El símbolo Rf significa “Relación de frentes”, es una relación de distancias, y se expresa
como el cociente entre la distancia recorrida por la sustancia y la distancia recorrida por
el disolvente hasta el frente del eluyente.
(𝑎)𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑑𝑒 𝑒𝑙 𝑝𝑢𝑛𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑝𝑙𝑖𝑐𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛
𝑅𝑓 =
(𝑏)𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑒𝑙 𝑑𝑖𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒 ℎ𝑎𝑠𝑡𝑎 𝑒𝑙 𝑓𝑟𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑙𝑢𝑦𝑒𝑛𝑡𝑒
1,5
𝑅𝑓1 = = 0,417
3,6
2,4
𝑅𝑓2 = = 0,667
3,6
2,5
𝑅𝑓3 = = 0,694
3,6

6
El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra: Tipo de
adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de
saturación, etc.

5. CUESTIONARIO Y CONCLUSIONES
5.1. Cuestionario
 Describir los resultados obtenidos en las pruebas especificas para
xantofila y carotenos
Prueba Observaciones de Resultado
cambio de color
Xantofila No se observo Negativo
Caroteno Café oscuro -

Prueba para Xantofila

En el presente laboratorio la prueba para xantofilas, no fue efectuada con éxito,
ya que se esperaba un cambio de color a verde brillante, luego lentamente azul
pavo – real, luego púrpura y finalmente incoloro. Sin embargo, se pudo
observar un color blanquecino el cual nos indicó que la prueba para la xantofila
resulto negativa, es decir no se pudo detectar estas debido a que las xantofilas
en las zanahorias representan el 10% de los carotenoides.
Prueba para carotenos
En esta prueba se pudo observar un cambio de color que representa la
oxidación de los carotenos, así también se observó que estos formaban 2 fases
debido a que el éter de petróleo no es miscible con el ácido sulfúrico.

 Determinar el número de componentes del extracto en éter de petróleo de

carotenos separados por cromatografía en capa fina y calcular el Rf

1,5
𝑅𝑓1 = = 0,417
3,6
2,4
𝑅𝑓2 = = 0,667
3,6
2,5
𝑅𝑓3 = = 0,694
3,6

7
 Investigar cuales son los usos de los carotenos

En la farmacopea de numerosos países se utiliza como protector de la radiación

ultravioleta consumiéndose vía oral. Esto se debe a que, por medio de diversos
estudios se ha demostrado que puede reducir la probabilidad de contraer
algunos tipos de cáncer de piel. Sin embargo, para algunos autores, el caroteno
sintético puede aumentar la probabilidad de cáncer de pulmón en personas
fumadoras. Se encuentra incluido dentro del grupo D02 del código
internacional ATC, concretamente con el código D02BB01.2 La dosis diaria
recomendada es de 0,1 g.

El beta-caroteno es el que le proporciona el característico color amarillo a

algunos derivados lácteos tales como la mantequilla y algunos quesos. En
efecto, la leche de vaca es de color blanco con un ligero tinte amarillento
producto del mismo, al igual que su crema o porción lipídica (motivo por el
cual se le conoce como color crema al color amarillo muy pálido).

Uno de los usos más importantes de emulsiones de beta caroteno y la

dispersión se encuentra en las bebidas carbonatadas, incluidas el agua, el
aumento y vitaminas, a base de jugo y deportivas. Cada una de estas bebidas
tiene retos específicos para el formulador de bebidas. Factores tales como las
interacciones de los ingredientes y las condiciones del proceso puede afectar
negativamente la estabilidad del color. Selección de un establo β-caroteno en
emulsión o dispersión es clave para crear una bebida de color atractivo para el
mercado.

Además de las aplicaciones de bebidas, colores β-caroteno se utilizan en una

amplia variedad de productos alimenticios, incluyendo:

o Productos lácteos
o Panadería
o Alimentos Procesados

5.2. Conclusiones
Se lograron extraer los colorantes de la zanahoria a partir del éter de petróleo,
en el cual se pudo presenciar que la solución que se obtuvo fue de color
amarillo-naranja debido a la presencia de los carotenos que son hidrocarburos,
y las xantofilas que son sus derivados oxigenados.
Así también se determinaron los valores de Rf de cada uno de los 3
componentes del extracto en éter de petróleo de carotenos a partir de la
cromatografía, la cual es una buena técnica para la separación de especies
químicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas, siendo por ello
una de los principales métodos de separación, ya que tiene numerosas ventajas,

8
 a parte de ser rápida, sencilla y barata tiene también la ventaja de utilizar poca
cantidad de muestra.

6. BIBLIOGRAFIA
Báez, J 2007 Generadores de colores naturales: carotenos y xantofilas
http://quimica.ugto.mx/revista (9/04/19)
Mancilla, C. 2009 Extracción y separación de lípidos terpenicos carotenos
https://es.scribd.com/doc/16675104/7-EXTRACCION-Y-SEPARACION-DE-
CAROTENOS-DE-LA-ZANAHORIA (9/04/19)
Martin, D. 2010 Cromatografía de capa fina
https://es.slideshare.net/yerga/cromatografia-de-capa-fina (9/04/19)
Rodríguez Delia 2014 Análisis de carotenoides
http://www.fao.org/3/AH833S20.htm (9/04/19)
Vargas, J. 2017 Separación de B-carotenos por cromatografía de capa fina
https://es.scribd.com/document/365326394/SEPARACION-DE-%CE%B2-
CAROTENOS-POR-CROMATOGRAFIA-DE-CAPA-FINA (9/04/19)