METODOLOGIA

1. TIPO DE INVESTIGACION
Investigación Explicativa
2. DISEÑO DE INVESTIGACION

Analisis en el
Recolectar la laboratorio de
primera Bioquimica Ambiental
Escoger el muestra. de la Universidad
ambito de Nacional Santiago
estudio. (Río Antunez de Mayolo,
Santiago - Aija) los parametros pH,
conductividad electrica
y oxigeno disuelto
mediante el
Analisis en el laboratorio multiparametro.
de Bioquimica Ambiental
de la Universidad
Recolectar la Nacional Santiago
tercera Antunez de Mayolo, los
muestra. metales y aniones
presentes en la muestra Recolectar la
por el metodo analitico segunda
espectrofotometria UV - muestra.
visible.

Analisis en el
Analisis en el laboratorio laboratorio de
de Bioquimica Ambiental Bioquimica Ambiental
de la Universidad de la Universidad
Nacional Santiago Recolectar la Nacional Santiago
Antunez de Mayolo, los cuarta Antunez de Mayolo,
metales y aniones muestra. los metales y aniones
presentes en la muestra presentes en la
por el metodo analitico muestra por el metodo
espectrofotometria UV - analitico
visible. espectrofotometria UV
- visible.

Analisis en el laboratorio de
Bioquimica Ambiental de la
Recolectar la
Universidad Nacional Santiago quinta
Antunez de Mayolo, los metales y muestra.
aniones presentes en la muestra por
el metodo analitico
espectrofotometria UV - visible.

Analisis estadistico de
los datos y
elaboracion del
informe final.
3. MÉTODOS Y TÉCNICA
RECOLECCION DE MUESTRA
Se recolectaron muestras de agua en el Río Santiago - Aija, que se encuentra a 3
900 msnm de altura y con coordenadas UTM 218 398.23m E y 8 918 716.26m S.
Para la toma de muestra se realizó cuatro veces:
o PRIMERA MUESTRA: Día domingo 27 de octubre del 2019.
o SEGUNDA MUESTRA: Día domingo 05 de enero del 2020.
o TERCERA MUESTRA: Día domingo 12 de enero del 2020.
o CUARTA MUESTRA: Día domingo 03 de febrero del 2020.

Las muestras llegaron ser envasadas en recipientes de plástico, posteriormente

fueron trasladadas a la ciudad de Huaraz para ser analizadas en el Laboratorio de
Bioquímica Ambiental de la Universidad Nacional Santiago Antúnez de Mayolo,
según el método analítico que es el espectrofotómetro UV – visible.

ANALISIS EN LABORATORIO
1) DETERMINACION DE METALES
Mediante la probeta se midió 50ml de agua muestra (Río Santiago – Aija),
posteriormente vertimos a un vaso precipitado, se agregó 0.5ml de ácido nítrico
(HNO3) se agito luego añadimos 0.5ml de agua oxigenada (H2O2) de igual manera
se agito. Algo importante, no fue necesario echar el carbón activo y filtrar, ya que
nuestra muestra no presenta coloración.
Procedimos a colocar el vaso precipitado con la preparación sobre la cocinilla de
plancha, con el fin de evaporarse y queden los residuos, posteriormente evaporado
se saca con cuidado de la cocinilla para verter agua destilada en el vaso precipitado
y remover los residuos, luego llenarlos a una fiola de 50ml.
o DETERMINACION DEL METAL ALUMINIO (Al)
Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 1 micro cuchara rasa de color azul que
contiene el reactivo Al – 1, luego agitamos vigorosamente hasta que el
reactivo se disuelva, posteriormente agregamos 1.2ml del reactivo Al – 2,
adicionamos 0.25ml del reactivo Al – 3, dejamos reposar por 2 minutos
para posteriormente llevarlo al espectrofotómetro UV - Visible para
obtener la concentración.
o DETERMINACION DEL METAL NIQUEL (Ni)

Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado

correspondientemente, se añadió 1 gota del reactivo Ni – 1, dejamos
reposarlo por 1 minuto, posteriormente agregamos 2 gotas del reactivo Ni
– 2, adicionamos 2 gotas del reactivo Ni – 3 y lo mezclamos, dejamos
reposar por 2 minutos para posteriormente llevarlo al espectrofotómetro
UV - Visible para obtener la concentración.

o DETERMINACION DEL METAL COBRE (Cu)

Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado

correspondientemente, se añadió 1 cucharada dosificadora rasa de color
verde del reactivo Cu – 1, procedimos agitarlo vigorosamente hasta que se
disuelva completamente el reactivo, posteriormente agregamos 5 gotas del
reactivo Cu – 2 y lo mezclamos, dejamos reposar por 5 minutos para
posteriormente llevarlo espectrofotómetro UV - Visible para obtener la
concentración.

o DETERMINACION DEL METAL HIERRO (Fe)

Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 1 gota del reactivo Fe – 1, posteriormente
agregamos 0.5ml del reactivo Fe – 2 y lo mezclamos, dejamos reposar por
5 minutos, luego añadimos una dosis del reactivo Fe – 3 y agitamos
vigorosamente hasta que se haya disuelto todo el reactivo, se dejó reposar
por 10 minutos para posteriormente llevarlo al espectrofotómetro UV -
Visible para obtener la concentración.
o DETERMINACION DEL METAL MANGANESO (Mn)
Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 1 gota del reactivo Mn – 1,
posteriormente agregamos 2 gotas del reactivo Mn – 2, luego añadimos 2
gotas del reactivo Mn – 3 y lo mezclamos, se dejó reposar por 1 minuto
para posteriormente llevarlo al espectrofotómetro UV - Visible para
obtener la concentración.
2) DETERMINACION DE ANIONES
Mediante la probeta se midió 50ml de agua muestra (Río Santiago – Aija),
colocamos un papel filtro sobre el embudo, este último se colocó encima del
matraz Erlenmeyer, posteriormente vertimos la muestra de agua para que sea
filtrada.
o DETERMINACION DEL ANION SULFURO (S)
Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 1 gota del reactivo S – 1, posteriormente
agregamos 2 gotas del reactivo S – 2, luego añadimos 2 gotas del reactivo
S – 3 y lo mezclamos, se dejó reposar por 1 minuto para posteriormente
llevarlo al espectrofotómetro UV - Visible para obtener la concentración.
o DETERMINACION DEL ANION FOSFATO (PO4)
Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 1.2ml del reactivo PO4-1 – 1 y lo
mezclamos, se dejó reposar por 1 minuto para posteriormente llevarlo al
espectrofotómetro UV - Visible para obtener la concentración.
o DETERMINACION DEL ANION AMONIO (NH4)
Se pipeteo 5ml de la muestra a un tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 0.6ml del reactivo NH4-1, posteriormente
agregamos una micro cuchara del reactivo NH4-2, luego agitamos
vigorosamente hasta que el reactivo quede completamente disuelto,
posteriormente se dejó reposar 5 minutos, luego añadimos 4 gotas del
reactivo NH4-3 y lo mezclamos, se dejó reposar por 1 minuto para
posteriormente llevarlo al espectrofotómetro UV - Visible para obtener la
concentración.
o DETERMINACION DEL ANION FLUOR (F)
Se añadió 2ml del reactivo F - 1 al tubo de ensayo con rosca rotulado
correspondientemente, se añadió 5ml de la muestra, posteriormente
agregamos una micro cuchara rasa del reactivo F - 2, luego agitamos
vigorosamente hasta que el reactivo quede completamente disuelto,
después se dejó reposar 5 minutos posteriormente llevarlo al
espectrofotómetro UV - Visible para obtener la concentración.
4. INSTRUMENTOS VALIDADOS DE RECOLECCION DE DATOS
4.1.ESPECTROFOTOMETRO

El espectrofotómetro es un instrumento con el que se apoya la

espectrofotometría para medir la cantidad de intensidad de luz absorbida
después de pasar a través de una solución muestra. El equipo que cuenta la
Universidad Nacional Santiago Antúnez de Mayolo, es de la marca MERK
SQ 118.

4.1.1. ESPECTROFOTOMETRO UV – VISIBLE

Para determinar las concentraciones se mide mediante el equipo

espectrofotómetro UV - Visible, por el cual cada metal y anión
presentan códigos, mencionados en las tablas siguientes:

CÓDIGO DE LOS METALES

Ni
Fe Cu Mn Al mg/L
mg/L mg/L mg/L mg/L

32 41 45 1 49

CÓDIGO DE LOS ANIONES

NH4 F
PO4 S mg/L
mg/L
mg/L mg/L

83 99 5 116

4.1.2. MANEJO DEL ESPECTROFOTOMETRO UV – VISIBLE:

 o Se pulsa el teclado method (método) que se encuentra en la parte
superior del equipo.
o Se pulsa el número del parámetro a evaluar, enseguida se pulsa el
teclado Yes / enter, que se encuentra en la parte inferior del teclado,
3 veces hasta que el equipo indique la medida del parámetro en
blanco.
o Se introduce la muestra en blanco (tubo de ensayo contenido de
5ml de agua destilada), pulsamos enter y esperamos a que registre
00,00mg/L.
o Aplastamos el botón inferior derecho y se esperó la indicación para
introducir la muestra. Se introdujo la celda, es decir el tubo con
rosca correctamente rotulado con el contenido de la muestra
preparada con los TEST correspondientes y pulsamos enter,
esperamos el registro para luego anotar el valor.
4.1.3. LIMITES QUE PRESENTA CADA PARAMETRO A
ANALIZAR
PARAMETRO LIMITES DEL PARAMETRO mg/L
ALUMNIO 0.05 – 0.35
COBRE 0.05 – 2.00
NIQUEL 0.02 – 2.00
MANGANESO 0.01 – 2.50
HIERRO 0.01 – 1.00
SULFURO 0.20 – 0.50
FOSFATO 1.00 – 30.00
FLUOR 0.10 – 1.50
AMONIO 0.01 – 0.80

4.2.MULTIPARAMETRO
Este equipo mide tres parámetros a la vez como es el pH, Conductividad
Eléctrica y Oxígeno Disuelto.
El primero indica las concentraciones de iones de hidronio, el segundo mide
las cantidades de iones disueltos en el agua, se presenta en Micro Siemens
 (µS/cm) y Siemens (S/cm) y el tercero es la cantidad de oxígeno disuelto en
el agua.
5. INSTRUMENTOS DE PROCESAMIENTO Y ANALISIS ESTADISTICO
DE LA INFORMACION
5.1. Análisis con graficas de barras
Se realizó graficas de barras, en el eje de las abscisas se encuentra el tiempo
del muestreo y en el eje de las ordenadas las concentraciones, para observar el
comportamiento de las concentraciones y poder ser analizadas.
5.2. Determinación del T de Student
Determina la correlación que presenta las variables y valores atípicos, en este
caso nos indicara si el tiempo de muestreo presenta relación o no con la
concentración.
5.3. Z score
Es un método para determinar el valor atípico de la muestra, para
posteriormente descartarlo y analizar los valores en correlación.
5.4.Correlación
Es una técnica que indica la fuerza y dirección de las variables y si están
relacionadas o no.

RECOMENDACIONES

o Enjuagar adecuadamente los materiales de vidrio con agua destilada, más

que todo los tubos de ensayo con rosca, para evitar la contaminación de
algún residuo existente de experimentos anteriores.
o Cerrar inmediatamente y correctamente los frascos de los reactivos de cada
test y tener sumo cuidado al momento de manipularlos.
o Al momento de la manipulación de los instrumentos de vidrios tener
mucho cuidado y así evitar accidentes.
o Tener presente las condiciones climatológicas antes y durante la toma de
muestra, ya que este puede alterar en los resultados.
o Operar de manera correcta los instrumentos, espectrofotómetro Uv –
Visible y Multiparámetro.
o La ubicación del espectrofotómetro, evitar que la zona este sometida a
irradiación de luz o calor.
o Evitar tocar con la mano los tubos de ensayo con rosca, antes de ponerlo
en el espectrofotómetro, ya que pasa el rayo de luz y la medida de la
concentración puede salir errónea.