Materiales empleados en ruptura celular

 Edta: Es una sustancia utilizada como agente quelante que puede crear complejos con un
metal que tenga una estructura de coordinación octaédrica. Coordina a metales pesados de
forma reversible por cuatro posiciones acetato y dos amino, lo que lo convierte en un ligando
hexadentado, y el más importante de los ligandos quelatos.Por otro lado, parece ser que
puede inhibir ciertas enzimas, como la PPO (Polifenoloxidasa), sobre todo en sinergia con
ácido ascórbico o ácido cítrico, evitando la oxidación de ciertos compuestos que dan color a
los alimentos
 Albumina de suero bovino: Es una proteína extraída del suero bovino que es ampliamente
usada en muchos procedimientos de bioquímica: Western blot, ELISA... También es usado
como nutriente en cultivos celulares. estabilizar algunas de las enzimas durante la digestión
del ADN.
 Colagenasa o pronasa: es una enzima, más específicamente una metaloproteinasa de matriz
que rompe los enlaces peptídicos de los colágenos que pueden ser tipo (I, II, III, IV, V) y que
contiene zinc. Son una familia de enzimas de diversos orígenes celulares y especificidades para
distintos sustratos. Estas enzimas también ayudan a destruir estructuras extracelulares en la
fagogénesis de las bacterias como por ejemplo la clostridium. Estas enzimas aparte de
degradar al colágeno, como son MMP (metaloproteinasa de matriz), inactivan la AAT y activan
la TNF-alpha. La colagenasa actúa principalmente sobre tejido conectivo en células musculares
y en algunas otras partes del cuerpo.
 Centrifugación diferencial : El tubo se llena con muestra y se centrifuga. El comportamiento
de cada componente de la muestra depende de su forma, tamaño, densidad y, lógicamente,
de las condiciones de centrifugación. Se obtienen sólo 2 fracciones: sedimento y
sobrenadante.
[Nota: la palabra precipitado es más adecuada para algo insoluble, que precipita por
centrifugación o por otros mecanismos (por ej., una reacción química); sedimento es más
correcto para lo que se ha forzado a ir al fondo pero seguiría siendo soluble; pellet es una
palabra inglesa para lo que queda compactado en el fondo como consecuencia de la
centrifugación].Una aplicación típica es el fraccionamiento subcelular (separación de los
distintos componentes de una célula, principalmente de los orgánulos) (véase Luque o Alberts)
empleando sucesivas centrifugaciones a velocidad creciente.
 Sacarosa o inhibidores de proteasa: La sacarosa, azúcar de mesa o azúcar de caña, es un
disacárido de glucosa y fructosa. Se sintetiza en plantas, pero no en animales superiores. No
contiene ningún átomo de carbono anomérico libre,3 puesto que los carbonos anoméricos de
sus dos unidades monosacáridos constituyentes se hallan unidos entre sí, covalentemente
mediante un enlace O-glucosídico. Por esta razón, la sacarosa no es un azúcar reductor y
tampoco posee un extremo reductor.
Su nombre abreviado puede escribirse como Glc(a -1à 2)Fru o como Fru(b 2à 1)Glc. La
sacarosa es un producto intermedio principal de la fotosíntesis, en variados vegetales
constituye la forma principal de transporte de azúcar desde las hojas a otras partes de la
 planta. En las semillas germinadas de plantas, las grasas y proteínas almacenadas se
convierten en sacarosa para su transporte a partir de la planta en desarrollo.
 Buffer a concentración media : Las soluciones Buffer o Amortiguadoras tienen por finalidad
mantener constante el pH de una solución, frente a cambios bruscos por adición de ácidos o
bases fuertes. Estas soluciones están formadas por una solución de ácido débil y la sal del
ácido. La adición de pequeñas cantidades de ácido o base a una solución amortiguadora o
buffer, produce solo un cambio pequeño de pH, porque el amortiguador reacciona con el
ácido o base agregado. Las soluciones amortiguadoras se preparan con un ácido débil y una sal
de ese ácido, o con una base débil y una sal de esa base
 Mercaptoetanol o ditiotreitol: Se emplea profusamente en el laboratorio para reducir los
puentes disulfuro y puede actuar como antioxidante biológico, reciclando radicales hidroxilo
(entre otros) Se emplea ampliamente debido a que el grupo hidroxilo le confiere buena
solubilidad en agua, a la vez que disminuye la volatilidad. Debido a su reducida presión de
vapor, su olor, aunque desagradable, es menos molesto que el de otros tioles relacionados.
Algunas proteínas pueden ser desnaturalizadas por el 2-mercaptoetanol por medio de su
habilidad para separar puentes disulfuro
 Acidificación: Afecta la síntesis de proteínas y el transporte de moléculas en contra del
gradiente. Se considera que el pH bajo favorece la protonación proteica y que altera las
interacciones con otras proteínas y el plegamiento de las recién sintetizadas, induce
acumulación en el retículo endoplásmico y activa vías dependientes de la caspasa.
 Sulfato de amonio: Se utiliza como floculante y, además, como un reactivo en purificación
de ácidos (siempre que las proteínas sean solubles en medio básico y con presencia de NaCl o
cloruro potásico) para precipitar proteínas solubles. En bioquímica, se usa para precipitar
fraccionadamente las globulinas que no son solubles en agua y para diferenciarlas de las
glóbulos rojos. Las globulinas se pueden redisolver para hacer subsecuentes análisis, como
puede ser la extracción de una proteína en particular por cromatografía de afinidad con NaCl.
 Lisozima. La lisozima es una enzima que rompe las paredes celulares de las bacterias, lo hace
hidrolizando enlaces glucosídicos de ácido N-acetilmuránico (NAM) a N-acetilglucosamina
(NAG) en un polisacárido alternante de NAM-NAG.
 Acetona fría : provoca la homogeneización por deshidratación: se basa en la precipitación de
proteínas por solventes orgánicos. En la preparación del "polvo acetónico" se utiliza acetona
en frío.
 Celita: La celita es un sólido que suele ser utilizado como un soporte de filtrado. Se encuentra
constituida principalmente por sílice. Generalmente se usa para filtrar al vacío suspensiones
de tipo coloidal, de texturas gelatinosas o sólidos constituidos de partículas muy finas, por lo
general de naturaleza inorgánica, que pudiesen traspasar otros tipos de filtros, en cambio en
la celita, quedan retenidos. La celita se usa solamente para filtrar sólidos con impurezas que se
quieran eliminar.
También, entre los diferentes tipos de filtraciones se encuentra la filtración bajo atmósfera
inerte. Cuando trabajamos con compuestos que son sensibles a la humedad o incluso al aire,
se necesita llevar a cabo la filtración bajo atmósfera inerte.
Con mayor frecuencia se presenta el caso de las reacciones que contienen productos que son
sensibles a la humedad y necesitan ser filtradas bajo una atmósfera que no los altere para
poder eliminar el sólido. Para esto, pueden usarse placas de filtración provistas de dos bocas
esmeriladas, las cuales permiten la conexión a matraces diferentes formando un sistema
cerrado.