EFECTO DE LA TEMPERATURA Y CONCENTRACIÓN DE NUTRIENTES PARA

LA CONSERVACIÓN DE MICROALGAS AISLADAS DE LA LAGUNA LA

BARROSA DEL VOLCÁN AZUFRAL.

Se aplicará un diseño factorial 23 con tres factores, tipo de microorganismo, temperatura, y

concentración de Nutrientes, con dos niveles por cada factor, en total se realizaran 8 combinaciones
diferentes. (Tabla 1). Luego de 30 días de conservación se reactivaran las colonias en medio Líquido
BG11, se analizarán al microscopio para verificar turbidez y morfología característica.

Numero de Tipo de Temperatura Concentración

combinación microorganismo de nutrientes

1 + + +

2 + + -

3 + - +

4 + - -

5 - + +

6 - + -

7 - - +

8 - - -

Los niveles por cada facto se observan en la tabla N 2.

Tabla 2

NIVELES FACTORES
Tipo organismo Temperatura Concentración nutrientes
Superior + Microalga Ambiente BG11
Inferior - Cianobacteria 4 grado centígrados mitad de BG11

El diseño factorial se aplicando tanto para la conservación por el método de atrapamiento en

perlas de alginato como también conservación en medio líquidos en bolsas de polietileno.

PREPARQCION DE ESFERAS DE ALGINATO

Inicialmente se pesará un tubo falcon vacío, por otra parte, se centrifugará cultivos de los
microrganismos en BG 11 a 5000 rpm y se eliminara el sobrenadante. Se pesará el pellet y
conservar bajo refrigeración hasta su uso.

Por otra parte, se prepara una solución de alginato de sodio al 2% en buffer fosfato pH 6,8,
luego se adiciona a la mezcla de alginato los pelet de microorganismos refrigerados
manteniendo la proporción de 1g de células en 35 ml de mezcla de inmovilización.

Con el apoyo de una jeringa con aguja con punta roma se adicionará gotas de la mezcla a un
vaso con solución de CaCl2, 1%; a temperatura ambiente; con agitación constante y suave,
por medio de una barra magnética para obtener esferas homogéneas, se lavará las esferas con
Buffer y se conservaran en bolsas tanto a temperatura ambiente como a 4 grados centígrados.