CLOSTRIDIUM PERFRINGES

Clostridium perfringens es una bacteria que causa varios trastornos, entre ellos gastroenteritis.
Algunas cepas causan gastroenteritis entre leve y moderada que se cura sin tratamiento, mientras
que otras cepas producen una enfermedad grave que puede dañar el intestino delgado y, a veces,
conduce a la muerte. Generalmente, la carne de vacuno o de ave, el jugo de carne y los alimentos
deshidratados o precocinados contaminados son los responsables de los brotes de intoxicación
alimentaria por Clostridium perfringens. Algunas cepas no se destruyen, aunque se cocine bien la
carne, y en cambio otras, sí.

La virulencia y efectividad de esta bacteria en la destrucción de los tejidos viene dado por las
diferentes toxinas que genera y que son las responsables de las terribles lesiones que se ocasionan.
La patología asociada con mayor frecuencia a la Clostridium perfringens es la gangrena gaseosa,
terrible enfermedad en la que la bacteria mata todo tejido subcutáneo y muscular sano, haciendo
que el afectado experimente terribles dolores.

Esta bacteria pertenece a la familia clostridiaceae y al género Clostridium. La Clostridium

perfringens tiene forma de barra rectangular (bacilo corto), cuyos extremos pueden ser de forma
redondeada o rectos. Tienen unas medidas aproximadas de 3-8 micras de largo por 0,4-1.2 micras
de ancho. Al observarse al microscopio, se aprecia que las células adoptan tres disposiciones:
individuales, en cadenas o en paquetes pequeños. No presentan flagelos ni cilios. Sus células están
rodeadas por una pared celular que está conformada por una gruesa capa de peptidoglicano, entre
otros componentes como el ácido teicoico, lipoteicoico y polisacáridos. Así mismo, presenta una
cápsula protectora. El genoma de esta bacteria está conformado por un único cromosoma circular,
en el que están contenidas un poco más de 3,5 millones de pares de bases nitrogenadas.

En los cultivos se observa a esta bacteria como colonias de bordes irregulares con apariencia
filamentosa, con relieve y traslúcida. En medio de cultivo agar sangre se puede observar un doble
halo de hemólisis.

Características generales

La cápsula, la carencia de flagelos y la esporulación poco frecuente lo diferencian de otras especies

del género, además también de pequeñas diferencias entre rangos de actividad de agua, pH y
temperaturas optimas. Clostridium perfringens como C. Botulinum son microrganismos
quimilitótrofos, puesto que producen su energía a partir de compuestos inorgánicos,
específicamente en este caso se trata de bacteria nitrificantes que son capaces de a partir del
amoniaco fijar nitrógeno en el suelo en medio anaerobio.
Es Gram positiva

Esta bacteria adquiere la característica tonalidad morada cuando es sometida al proceso de tinción
de Gram. Debido a esto se considera gram positiva.

Esto se debe a la gruesa capa de peptidiglicano que hay en su pared celular. Éste atrapa las
partículas del colorante de Gram y lo retiene. Son inmóviles.

Produce esporas

Las células bacterianas de Clostridium perfringens producen una única espora que se ubica en uno
de sus extremos terminales. Durante el proceso de formación de la espora se sintetizan las toxinas
que son letales para el ser humano y una gran gama de animales.

Hábitat

Es una bacteria que se puede encontrar en una gran cantidad de ambientes. Forma parte de la flora
normal del tracto gastrointestinal de muchas especies de animales incluido el hombre, así como
también en la piel. Así mismo se encuentra distribuida en el suelo, las aguas contaminadas y el
polvo. puede causar infecciones de origen exógeno y de origen endógeno.

Es anaerobio terminal

Esta bacteria es un organismo anaerobio estricto, esto quiere decir que no necesita del oxígeno
para poder llevar a cabo sus procesos metabólicos. No utiliza oxígeno (O2) en su metabolismo, En
otra palabras el aceptor final de electrones es otra sustancia diferente del dioxígeno. Si el aceptor
de electrones es una molécula orgánica (piruvato, acetaldehído, etc.) se trata de metabolismo
fermentativo; si el aceptor final es una molécula inorgánica distinta del dioxígeno
(sulfato, carbonato, etc.) se trata de respiración anaeróbica.

Condiciones de crecimiento

La Clostridium perfringens necesita de ciertas condiciones de pH y temperatura para poder

desarrollarse de manera óptima. La temperatura en la que puede crecer se ubica en el rango de 20
a 50 °C, siendo la temperatura óptima 45°C. Se destruyen a temperaturas mayores a 121 °C. estos
rangos de soportados de temperatura se deben a que poseen en su membrana una combinación de
lípidos ricos en ácidos grasos poliinsaturados y lípidos muy ricos en ácidos grasos saturados,
permitiendo que a las membranas permanecer funcionalmente estables a temperaturas moderadas
y en estado semifluido. Los ácidos grasos saturados forman un microambiente más hidrofóbico
que los no saturados, favoreciendo la estabilidad de la membrana. En lo referente al pH, esta
bacteria prefiere ambientes con cierta acidez y neutralidad, ubicándose su pH ideal entre 5,5 y 8,
esto quiere decir que necesita un pH ligeramente acido, o alcalino. A estos microorganismos que
crecen entre 6 y 8 de pH se los conoce como neutrófilos. Esta característica se debe a la estabilidad
de la membrana en medios con pH neutro. Cuando enfrenta condiciones ambientales estresantes
produce las esporas. Éstas son altamente resistentes a condiciones adversas, tales como elevadas
temperaturas, valores de pH extremos y ausencia de nutrientes. Esta bacteria también sirve como
indicador de la contaminación fecal de las aguas.

La actividad de agua necesaria para el crecimiento de Clostridium perfringens está entre 0.93 y
0.95, es decir un nivel elevado de actividad de agua. El citoplasma de una célula tiene una
concentración de solutos mayor que el medio, por lo que el agua tiende a ir dentro de la célula. En
esas condiciones se dice que existe un balance de agua positivo. Sin embargo, cuando una célula
está en un medio de baja actividad hídrica, existe una tendencia del agua a salir de ella. Esto puede
representar un grave problema si la célula no tiene medios para evitarlo, pues una célula
deshidratada no puede crecer. Cuando esta bacteria se encuentra en un ambiente de actividad de
agua (aw) muy baja, pueden ocurrir dos situaciones, que la célula muera o que se deshidrate y se
mantenga en estado de latencia, en este caso en especifico por medio de la esporulación.

Produce una enterotoxina

La Clostridium perfringens produce varias toxinas. Entre éstas, las más conocidas son:

 Enterotoxina: principal causante de intoxicación por alimentos.

 Toxina Alfa: generalmente involucrado en la gangrena gaseosa en los seres humanos, así
como también en la enteritis necrótica de pollos, bovinos y equinos.
 Toxina Beta: de acuerdo a diversos estudios, esta toxina puede actuar como una neurotoxina
y generar constricción arterial. Así mismo está relacionada con ciertas patologías del tracto
gastrintestinal en algunos mamíferos.
 Toxina Épsilon: Es una de las toxinas más letales producidas por alguna bacteria del género
Su actividad biológica se traduce en un edema. Además, es dermonecrótica. Así mismo,
según diversos estudios, se ha demostrado que es capaz de atravesar la barrera
hematoencefálica, con lo que logra tener acceso al cerebro y acumularse en él.
 Toxina iota: es una toxina dermonecrótica que induce daño a nivel gastrointestinal. Así
mismo es enterotóxica y citotóxica.

La principal toxina de Clostridium perfringens es la α-Toxina (lecitinasa) que juega un papel

primordial en la enteritis necrosante; degrada la lecitina en fosforilcolina y un diglicérido; es
activada por calcio y magnesio. Las enterotoxinas (citotoxinas A y B) son elaboradas por las cepas
tipo A. En los enterocitos, la enterotoxina se fija a una proteína, esta unión es muy importante para
que la toxina empiece su actividad biológica, interfiriendo en el transporte de agua, sodio, cloro y
en la disminución de la absorción de la glucosa a nivel intestinal, además estimulan la secreción
de proteínas hacia la luz intestinal. La alfa-toxina (fosfolipasa C, lecitinasa) juega un papel
primordial en la patogenia de la gangrena gaseosa, la beta-toxina de C. perfringens tipo C está
implicada en la enteritis necrótica y la enterotoxina de C. perfringens tipo A en las intoxicaciones
alimentarias. Estos cuadros tóxicos, en general bien caracterizados, son principalmente infecciones
exógenas. Actualmente y en nuestro medio, son mucho más frecuentes las infecciones por especies
del género Clostridium de origen endógeno.

Factores que afectan el crecimiento de Clostridium perfringens

CLOSTRIDIUM BOTOLINUM
Clostridium botulinum es un bacilo anaeróbico estricto, grampositivo, del género Clostridium,
familia Clostridiacear, bacteria móvil de 3-8nm por -5-1.3. formador de espora con ubicación
subterminal, esta bacteria produce una toxina neurotóxica bajo condiciones anaerobias y
especialmente en alimentos con pH alcalinos. Esta bacteria suele encontrarse en la tierra y en aguas
y sus sedimentos no tratados en una distribución mundial. El botulismo es una de las formas grave
de envenenamiento. El botulismo es una forma de envenenamiento por alimentos, resulta de la
infección de alimentos conteniendo la toxina. A pesar de que esta enfermedad por alimentos no es
muy común, su tasa de mortalidad es elevada.
Características

 G (+), familia Bacillaceae, esporulados, anaerobios, sin cápsula.

 Bacilos rectos o ligeramente curvados de 2-10 x 0,5-2 micras.
 Esporas ovales, subterminales y deformán la célula cuando se producen.
 El comportamiento metabólico no es uniforme referentes a la proteolisis y a la producción de
exotoxinas.
 Producen 7 toxinas serólicamente diferentes y aunque con acción farmacologica igual se les
designa con letras de la A a la G y las cepas productoras también llevan la misma
nomenclatura.
 Moviles mediante flagelos perítricos y con 4 antígenos distintos: somático, flagelar, esporas.
endotoxinas.
 Es el productor del botulismo
 Es una toxiinfección alimentaria producida por ingerir alimentos con la toxina.
 La forma vegetativa es sensible, la cepa E se puede destruir a 45º, debido a que son psicótrofas.
 La mayor parte de cepas fermentan carbohidratos
 No reducen los nitritos a nitratos
 Producen sulfidrico y acetil metil carbinol (VP+).
 Las esporas son más resistentes al calor, resisten 105° durante 10 minutos, a excepción de las
esporas de las cepas E que se inactivan a 80º durante 6-10 minutos.
 Las esporas en condiciones normales de sequedad en el ambiente viven años.
 pH óptimo de 4,6 - 8 para la célula vegetativa
 Temperatura óptima de 25-35°
 Sensible a las sales, necesitan una concentración de sal inferior al 10% y Aw > 0,935 y
condiciones de anaerobiosis.

C. botulinum no se desarrolla en condiciones de acidez (pH inferior a 4,6), y por lo tanto la toxina
no se generará en alimentos ácidos (aunque un pH bajo no degradará ninguna toxina ya existente).
Las combinaciones de baja temperatura de almacenamiento y contenidos de sal, y/o el pH, se
utilizan también para prevenir el crecimiento de la bacteria o la formación de la toxina. de crecer
y producir toxinas bajo condiciones anaerobias. Existe una amplia variedad de materiales de
plantas y animales que favorecen su crecimiento, pero las condiciones que necesita son estrictas.
Además de que el alimento o el tejido deben ser anaerobios, debe tener un contenido de agua
relativamente alto, el pH debe ser mayor a 4.6 y los ingredientes como la sal o los preservativos
no deben estar presentes en niveles lo suficientemente altos para inhibir la germinación y/o el
crecimiento. Las diferentes cepas o grupos de C. botulinum pueden tener requerimientos algo
diferentes. Por ejemplo, está registrado que la acidez necesaria para inhibir las cepas de tipo C de
C. botulinum debe ser de un pH de 5.1 y 5.6, pero otros organismos pueden sobrevivir en un pH
menor. Además, cada grupo tiene una temperatura óptima (mínima y máxima para el desarrollo).
Por ejemplo, algunos organismos del grupo II pueden crecer en alimentos a temperaturas de
refrigeración (3-4 º C), pero los organismos del grupo I y las cepas productoras de toxina de tipo
C son inhibidos. Debido a que C. botulinum no compite bien con otros microorganismos, es más
probable que ocurra el crecimiento si se han muerto o inhibido otras bacterias o mohos. Las esporas
de C. botulinum pueden sobrevivir a la cocción y a algunas condiciones de procesamiento de
alimentos que matan a las células vegetativas, luego germinan y crecen en los alimentos cocidos.

Determinadas bacterias pueden formar una estructura de resistencia denominada esporo, formada
cuando las condiciones son adversas para la célula normal (célula vegetativa). Los esporos
presentan gran resistencia al calor, a las radiaciones y a los agentes desinfectantes, debido a los
elevados contenidos de calcio y de ácido adípico, asociados a la baja humedad. Cuando el ambiente
es propicio, los esporos germinan y dan origen a células normales (vegetativas). Las bacterias del
género Clostridium producen un esporo por célula vegetativa, por ese motivo la esporulación no
es un proceso de multiplicación.

Hábitat

 El reservorio es el aire, tierra y polvo, también pueden estar en el agua; existe botulismo animal
con clínica similar, la intoxicación con conservas caseras es más frecuente que con las
conservas industriales.
 La incidencia está asociada a los distintos tipos de suelo: Cepa A, suelos neutros o alcalinos;
Cepa B, suelos ricos en materia orgánica; cepa C,D suelos variados; cepa E, suelos húmedos.
 La presencia de otras cepas competitivas junto al clostridium pueden influir en el crecimiento
de este. De esta forma los lactobacilos y enterobacterias originan ácidos que impiden el
crecimiento del Clostridium, otros microorganismos producen pH neutro o alcalino como
muchas bacterias o mohos en las conservas de tomate y de esta forma favorecen al clostridium.
 Los alimentos que podrían estar implicados: las conservas (vegetal y animal) sobre todo las
caseras ya que estas no suelen reunir las condiciones térmicas adecuadas y no se inactivan
todas las esporas, tienen que darse condiciones de anaerobiosis, por regla general los alimentos
ácidos y salados son inhibidores. La miel es peligrosa debido a un potencial uso en niños,
puede aparecer el botulismo infantil.

Factores que afectan el crecimiento de Clostridium botulinum

Patogenia
Es debida a la producción de toxinas que aparecen al crecer el microorganismo en los alimentos.
Las toxinas son proteicas y termolábiles, se destruyen a 100° durante 5 minutos, a 80° durante
30 minutos o a 70° durante 60 minutos. Se producen como prototoxinas que necesitan ser activadas
por enzimas proteoliticos que pueden ser de origen endogeno o exógeno. Las toxinas purificadas
obtenidas en el laboratorio aparecen como complejos de toxinas y otras sustancias
(hemaglutininas). Los diferentes tipos de toxinas se diferencian en el grado de polimerización, en
la composición de aa y en el requerimiento de activación del enzima. Las toxinas botulínicas A
son muy tóxicas (neurotóxicas), tienen gran afinidad por las células nerviosas.