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Los ARNm que se forman a partir del genoma del VIH deben salir del núcleo para

posteriormente ser traducidos y formar las distintas proteínas necesarias para


ensamblar nuevas partículas virales. Este punto del ciclo replicativo del virus
podría ser relevante para futuros blancos terapéuticos **

Los P-Bodies son gránulos citoplasmáticos que cuentan con maquinaria de


degradación de ARN, dentro de ellos la Exorribonucleasa Xrn1, que degrada en
dirección 5ʼ->3ʼ las hebras de ARN.

Se ha demostrado que esta enzima posee un rol en la restricción de otras


infecciones vitales, como la del HCV; en la que la ausencia de Xrn1 produce un
aumento de los niveles de transcrito del virus.

Dado que el ARNm no procesado de VIH-1 es utilizado como templado para la


síntesis de proteínas y además se debe encapsidar en las partículas virales
nacientes, postulamos que éste debería evadir y/o desregular la función de la
maquinaria de degradación. Lo anterior se sustenta en resultados preliminares del
laboratorio de Virología Molecular y Celular, que sugieren que la expresión de
VIH-1 estaría reduciendo los niveles de transcrito de xrn1(Datos no publicados).
Estos antecedentes nos llevan a generar la siguiente hipótesis:

*Hipotesis y objetivos

Para esto, postulamos el siguiente diseño experimental, el cual consiste en dividir


un cultivo celular, en dos grupos. Cada grupo tiene células transfectadas con un
vector proviral que codifica para el genoma integral de VIH, y células sin
transfectar como control. 

Las células del primer grupo fueron lisadas para dos procesos distintos: Western
Blot, para observar los niveles de expresión de distintas proteínas de nuestro
interés y RT-qPCR para determinar niveles de transcrito

Las células del segundo grupo serán permeabilziadas y fijadas para


posteriormente observarlas mediante Inmunofluorescencia Indirecta y así
determinar la distribución de Xrn1 a nivel sub-celular.

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