Espectrofotometría

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la

concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de
forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un
espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa
por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma. (Barcera , et, al,
2013)
La espectrometría ultravioleta-visible o espectrofotometría UV-Vis implica la
espectroscopia de fotones en la región de radiación ultravioleta-visible. Utiliza la luz en
los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano.
En esta región del espectro electromagnético, las moléculas se someten a transiciones
electrónicas. (Barcera , et, al, 2013)
Determinación de azucares reductores (Glucosa y Sacarosa).
El método DNS (técnica de Miller es una técnica colorimétrica emplea acido 3,5
dinitrosalicílico para hidrolisis de polisacáridos presentes en una muestra, determina las
absorbancias por medio de un espectrofotómetro de 54nm. Esta técnica sirve para
cuantificar los azucares reductores producidos durante una fermentación o para
cuantificar los productos de una reacción enzimática. (Muñoz, et, al, 2014)
La curva de calibración es la representación grafica en un eje de coordenadas, de la
Absorbancia (eje de ordenadas: Y) frente a la Concentración (eje de abscisas: X). Se
ensayan varias soluciones de concentración conocidas y se determinan sus absorbancias,
construyéndose la curva de calibrado, que es una recta. La concentración de una solución
desconocida, se averigua por interpolación de la Abs de la solución en la curva de
calibración, o a través de la ecuación de la recta (y= mx + b) donde: Absorbancia (y) =
constante (m) x concentración + absorbancia del blanco. (Muñoz, et, al, 2014)
GENESIS LOPEZ
KELVIN OJEDA

Bibliografía
1. Barcera , A., Reyes, E., Galvan , A., Novo, J., Peinado , J., Melendez , F., & Tunes
, I. (12 de Septiembre de 2013). Espectrofotometria espectros de absorcion y
cuantificacion colorimetrica y biomoleculas . Scielo, 6(2), 6 - 8 .
2. Muñoz, A., & Vega , J. (2014). Facultad de Ingenieria. Obtenido de
Determinacion de azucares reductores por espectrofotrometria (metodo DNS).