FUNDAMENTO:La tinción de Gram, también conocida como coloración de
Gram, es una técnica de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiológicos de las bacterias. El objetivo de Gram es conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de bacterias para así poder estudiarlas y clasificarlas. Materiales y reactivos:
*Papel de filtro. *Portaobjetos. *Asa de siembra.*Gradilla.
*Mechero *Microscopio óptico. *Aceite de inmersión. *Rotulador permanente. *Puente de tinción. *Cristalizador. *Secador. *Mechero. *Muestra boca de tubo con caldo nutritivo. *Suero salino. *Cristal violeta*Lubol. *Alcohol-Acetona. *Safranina. *Agua destilada. Procedimiento:
1. Se Pone una gota de suero salino en el centro del portaobjetos. Agarrar
el asa de siembra y esterilizarla por flameado. Esterilizar la boca del tubo de ensayo. Con el asa de siembra cogeremos un inoculo de la muestra Esterilizar la boca del tubo de ensayo y ponerlo en la gradilla. Depositar el inóculo en el portaobjeto donde está la gota de suero salino. Homogeneizar ambas gotas con la ayuda del asa de siembra. 2.se esteriliza el asa de siembra con el mechero Bunsen por flameado y poner en la gradilla. se pone el portaobjetos con la muestra en el puente de tinción y comenzaremos a hacer la tinción. Sé va a Aplicar el colorante principal, cristal violeta, sobre la muestra cubriéndola por completo durante 1 minuto. Se pone a escurrir la muestra y aclarar con abundante agua destilada hasta eliminar el colorante. 3. Aplica el mordiente, Lubol, sobre la muestra cubriéndola por completo durante 1 minuto. Escurrir la muestra y aclarar con abundante agua destilada hasta eliminar el colorante. Aplicar el decolorante, Alcohol- Acetona, sobre la muestra cubriéndola por completo durante 30 segundos. Sé aplica el colorante secundario, Safranina, sobre la muestra cubriéndola por completo durante 2 minutos. Se vuelve a eliminar el colorante. Se Deja secar la muestra al aire o con la ayuda de un seca TINCION GRAM