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3.

RESULTADOS

DETERMINACION CUANTITATIVA Y DE PUREZA DEL ADN POR ELECTROFORESIS

FIGURA N o 1: Gel de agarosa para visualizar el ADN.

TABLA No 1

CARRIL OBSERVACIONES CAUSA


1 Poca fragmentación Concentración del gel
2 Poca fragmentación Concentración del gel
3 Poca fragmentación Baja pureza de ADN
4 Muestra integra Baja pureza de ADN
5 Muestra integra Concentración del gel

TABLA No 2

CARRIL Marcador 1 2 3 4 5
Pares de Fago lambda 23130 23130 23130 23130 23130
bases 23130
Pares de Fago lambda - - - - -
bases 9416

CONCENTRACION

1 ng/10 ul = 0,1 ng /ul

0,1 x 64 =3,2 ng/ul


TECNICA POR ESPECTROFOTOMETRIA PARA DETERMINACION CUANTITATIVA Y DE LA
PUREZA DE DNA

Datos

DO 260: 0.378
DO 280: 0.366
DO 320: 0.355

Si el extracto fuera puro:

DNA (ug/ml)= (DO260)*factor de dilución *50 donde factor de dilución 50 ul de DNA

DNA (ug/ml)= 0.378*3*5 100 ul TNE 50/150=1/3

DNA (ug/ml)= 53.4

Corrigiendo:

DNA (ug/ml)= (DO260-DO320)*factor de dilución *50

DNA (ug/ml)= (0.378- 0.355)*3*50

DNA (ug/ml)= 3.45

Relación pureza del DNA = DO260/DO280 RANGO ESPERADO 1.65 - 1.85

Pureza del DNA = 0.378/0.366

Pureza del DNA= 1.0327 = alta contaminación proteica

RENE CARLOS CHAMBI NICOLAS

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