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El reactivo de Biuret contiene sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente
alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta cuya
intensidad de color depende de la concentración de proteínas. En otras palabras, la reacción se
basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo
de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno
que forma parte de los enlaces peptídicos. Da positiva esta reacción en todos los compuestos
que tengan dos o más enlaces peptídicos consecutivos en sus moléculas.
La caseína es una proteína conjugada de la leche del tipo fosfoproteína que se separa de la
leche por acidificación y forma una masa blanca. Las fosfoproteínas son un grupo de proteínas
que están químicamente unidas a una sustancia que contiene ácido fosfórico. En la caseína la
mayoría de los grupos fosfato están unidos por los grupos hidroxilo de los aminoácidos serina y
treonina. La caseína en la leche se encuentra en forma de sal cálcica (caseináto cálcico). La
caseína representa cerca del 77% al 82% de las proteínas presentes en la leche y el 2,7% en
composición de la leche líquida.