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REVISIÓN DE LITERATURA
Néstor Tovío L,* M.Sc, Arturo Duica A, M.Sc, Henry Grajales L, Ph.D.
RESUMEN
1240
Tovío - Desarrollo embrionario y estrategias antiluteolíticas 1241
ABSTRACT
During embryonic development multiple interactions are stablished between hormones, growth
factors (GF) and different type of molecules, generating a series of signals that unchain the
maternal recognition of pregnancy (MRP) between days 15 and 17. During this “critical
period”, the endometrium liberates the hormone prostaglandin F2α (PGF2α) to cause luteolysis
of the corpus luteum (CL), which synthesizes progesterone (P4), which, in turn, favors the
production of endometrial secretions necessary for the successful establishment and
development of the embryo and maintenance of pregnancy. The developing embryo generates
antiluteolitic signals that block the production of PGF2α, suggesting that the maintenance of
pregnancy is dependent upon (among other factors) the effectiveness of this blocking. The
blocking is generated by the action of Interferon tau (IFN-τ), produced in mononuclear cells
of the embryonic trophoblast. This blocking guarantees the integrity of the CL and thereby
the normal production of P4. The forgoing suggests that hormonally supported strategic
manipulation improves the effective blocking of luteolytic agents that have their greatest
activity during the “critical period”. This improves the survival rate in embryonic transplant
programs by creating a uterine environment adequate for the establishment and normal
development of the embryo. Mechanisms of hormonal support have been proposed that
would results in blocking of the production of uterine PGF2α during the critical period between
days 15 and 17 of the estrus cycle.
INTRODUCCIÓN
A los 5 ó 6 días de vida embrionaria (fase de el primer contacto del embrión y el epitelio
16 a 32 células), se lleva a cabo el proceso uterino materno, lo cual desencadena un
de compactación celular, formándose intercambio de nutrientes y prepara el
contactos que desarrollan uniones firmes ambiente para un estado de preimplantación
entre las células (8). En esta etapa el embrionaria (9). Tras la liberación el embrión
embrión comienza a funcionar como un comienza a cubrir físicamente parte del
organismo llamado mórula, el cual es endometrio para poder comenzar a regular
relativamente independiente del ambiente la producción de PGF2α uterina la cual cumple
uterino y su supervivencia parece depender funciones de luteólisis (14).
de su programación genética (10). Durante
este estadio se expresan las anormalidades El estado de preimplantación embrionaria in
cromosómicas procedentes del padre, lo que vivo, estaría regulado por factores de
podría desencadenar en ME (13). crecimiento de origen materno y embrionario,
como el TGF-α, TGF-β1, PDGF-α, IGF-I, IGF-
El desarrollo de uniones intracelulares II, TGF-β2, TGF-β3, CSF-1, Interleucina 3
estrechas en el estadio de mórula durante (IL-3) e IL-6; además citoquinas como el
la compactación, es seguido de la factor inhibidor de la leucemia (LIF) (15, 16).
acumulación de líquido formando una cavidad
central que recibe el nombre de blastocele, La regulación de la receptividad del útero a
la cual también acumula líquido proveniente la implantación del blastocisto, podría estar
del metabolismo mitocondrial (10). ejercida por una glucoproteína
transmembranosa denominada Muc–1. Esta
La localización de la bomba sodio–potasio es abundante en la fase no receptiva y se
(Na+/K+) activa en la membrana basal del reduce notablemente o puede estar ausente
trofoblactodermo para transporte iónico para el momento de la implantación (11).
activo, esto establece un gradiente que Como la síntesis epiteliar de Muc–1 esta
induce movimiento de líquido hacia adentro regulada por la P4, la perdida de receptores
del blastocele, provocando expansión que nucleares para esta hormona del epitelio
hace que las células de la mórula compactada uterino (día 8 – 10) reduciría la producción
se ubiquen hacia la zona externa o interna de Muc–1 y se abriría un estado receptivo
de las vesículas llenas de líquido, con lo cual para la adhesión del embrión. Para el día 10
se forma una capa celular externa que recibe se reduce la producción de la P4, lo que
el nombre de trofoblasto y una masa celular conlleva igualmente a la reducción de la
interna llamada embrioblasto, originándose concentración de Muc-1(13). Esta reducción
de esta manera el estadio de blastocisto permite la interacción y contacto entre
(11); el cual alrededor de los 8 días de vida factores adhesivos como las integrinas y sus
posee aproximadamente 120 células receptores, acercando el embrión a la
asociadas con la masa celular interna superficie uterina y formando un tipo de
(embrioblasto) (25%) y el trofoblasto (75%) placentación epiteliocorial (17).
(1,3).
Jonson et al (18) reportan la expresión de
Aproximadamente al 9º o 10º día de vida integrinas en rumiantes, las cuales son
(fase de 160 células) el blastocisto eclosiona secretadas por las glándulas endometriales
de la zona pelúcida por combinación de y detectadas a lo largo de la superficie del
acciones físicas y enzimáticas de la vesícula lumen uterino hacia los días 19 a 21 de
en expansión (13). Esta liberación podría preñez (periodo temprano de adhesión con
estar involucrando síntesis de puntos visibles entre carúnculas y
prostaglandinas por parte del embrión ya que cotiledones) (13).
la P4 estaría evitando la expansión y liberación
del blastocisto (9). Las enzimas plasmina y Se sugiere que la αvβ3 es una de las más
tripsina activan al blastocisto lo cual causa versátiles integrinas capaz de vincular
reblandecimiento de su zona matriz proteínas como la fibronectina, fibronectina
permitiendo la expansión y ruptura a lo largo oncofetal, vitronectina, tenascina y
del plano ecuatorial para la salida de la masa osteopontin de la cual se reporta que el
celular (1). Inmediatamente, se establece epitelio glandular de ovejas preñadas expresa
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su mRNA (18). También se ha observado que producción regida entre otros por el estado
la expresión endometrial de esta proteína es de desarrollo embrionario (6). Este interferón
regulada por la P4 y no por el IFN-τ (19). En es producido en las células mononucleares
vacas se reporta específicamente la del trofoblasto embrionario entre los días 10
expresión de sub unidades de integrinas β1, y 21, con producción máxima alrededor de
α3, α6 y αvβ3 (20). los días 14 y 19 de gestación, tiempo en el
cual el embrión se encuentra en estado de
Otra molécula vinculada a la adhesión precontacto (7).
embrionaria, es la 1- like (GlyCAM - 1 like),
la cual ha sido detectada en vacas preñadas, La síntesis y secreción de IFN-τ se relaciona
encontrado sus máximas concentraciones con la presencia en el fluido luminal uterino
hacia el día 15 y 17 de gestación (21). del FC IGF- I y IGF-II. La presencia de un
solo FC no afectaría la presencia de
Se ha observado durante el fenómeno de interferón, sin embargo ambos factores
adhesión del embrión bovino y ovino el podrían aumentar significativamente su
desarrollo de microvellosidades, las cuales secreción, lo que podría indicar un papel
son proyectadas hacia el interior de la luz importante para los FC similares a la insulina
de las glándulas uterinas (18). Estas en el RMP (3). Su localización en donde
vellosidades proporcionan un anclaje comienza a establecer efecto antiluteolítico
transitorio y una estructura absorbente para es a nivel de la región intercaruncular, en
el embrión mientras sigue completándose la donde las células responden mas a
implantación. Posteriormente estas concentraciones de oxitocina (OT) (17).
microvellosidades se reducen en longitud lo
que conlleva a un contacto mas cercano De acuerdo con la clasificación de la sociedad
entre estas y el epitelio uterino, el cual internacional de interferones, estos son
termina comprimiéndose hacia la superficie glucoproteínas sintetizadas durante la
trofoblástica interbloqueandose con las respuesta inmunitaria, así como bajo
proyecciones citoplásmicas en la superficie influencia de múltiples estímulos antigénicos
del trofoblasto hasta que sus o mitógenos; igualmente poseen propiedades
microvellosidades vuelven a desarrollarse, de antivíricas y antiproliferativas. El IFN-τ se
esta forma generando una adhesión compleja clasifica como una proteína ácida con peso
(17). molecular de 19 kDa, y es el primer interferón
clasificado en la familia tipo I cuyas
Para el día 42 de vida termina el período propiedades no solamente son antivíricas y
embrionario al completarse el periodo de es expresado por una familia de genes que
diferenciación, evidenciándose el feto en el está restringida a especies de rumiantes
cual mayoría de los tejidos, sistemas y como vacas, ovejas y cabras (22).
órganos se encuentran ya formados (13).
Durante la fase lútea la P4 tiene una doble
función en la regulación de la expresión de
ASPECTOS RELACIONADOS receptores para la OT en el útero, induciendo
la presencia de altos niveles de receptores
CON EL RECONOCIMIENTO para P4 en el endometrio (modulación en
MATERNO DE LA PREÑEZ alta), con lo cual se inhibe la expresión de
los receptores para estrógenos (RE) y para
oxitocina (ROT), fenómeno que se conoce
El RMP se define como el periodo crítico en
como el “bloqueo de la P4” (17). No obstante,
el cual el conceptus da señales de su
la misma P4 comienza a ejercer gradualmente
presencia a la madre (2). Este
una regulación para la disminución de la
reconocimiento requiere que el conceptus
expresión de sus propios receptores
se transforme de esférico hacia una forma
(modulación baja) en el epitelio luminal,
elongada para generar una mayor superficie
perdiendo así su habilidad para suprimir la
de contacto (precontacto) con el epitelio
expresión endometrial de los RE y ROT, por
uterino, con la finalidad de desencadenar la
lo cual en el caso de existir preñez el embrión
producción del factor antiluteolítico IFN-τ;
debe extender el “bloqueo de la P 4 ”,
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Hacia los días 10 y 15 del ciclo estral, cuando Se sugiere que para que se produzca
comienza a disminuir el número de receptores luteólisis, el cuerpo lúteo debe ser expuesto
de P 4 en el útero (modulación baja), aproximadamente de 5 a 8 pulsos de PGF2α
comienzan a aumentar los RE endometriales con intervalos de 6 a 8 horas. Esta
los cuales inducen la expresión de ROT (19). pulsatilidad ocurre en respuesta a la unión
Los E 2 provienen de los folículos en de la OT con su receptor en las células del
crecimiento y estimulan el aumento de sus endometrio uterino (3).
receptores alfa. La OT proviene de las células
luteales grandes; igualmente es producida
en el hipotálamo y almacenada en la Señal luteotrópica. La formación
neurohipófisis (25). del CL activa la síntesis y secreción de
P 4 por parte de esta glándula endocrina
En la célula endometrial la unión de la OT
transitoria, con ello se incrementan sus
con su receptor estimula el clivaje de ácido
receptores en el útero hacia los primeros
araquidónico a partir de la fosfolipasa C
días del diestro (regulación en alta), lo
(PLC), la cual activa la fosfolipasa A2 (PLA2)
que desencadena el bloqueo de la
(17). Intervienen para este fin mensajeros
expresión del gen para RE, asimismo se
como el inositol trifosfato (IP 3 ) y el
previene que los estrógenos incrementen
diacylglicerol (DAG) (sistema de segundo
la expresión de genes para ROT (3,28).
mensajero fosfatidil – inositol – diacilglicerol
– proteína kinasa C) (3). El IP3 estimula la
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Hacia el final de la mitad de la fase luteal del de IFN-τ (30). Teniendo en cuenta lo anterior
CE los receptores de P4 en el útero comienzan se ha evidenciado que el conceptus bovino
a disminuir (regulación en baja), varía de tamaño que va de 15 a 250 mm.
desencadenando un incremento en la para el día 17, con lo cual se resalta la
expresión de RE y ROT, con lo cual se importancia del desarrollo embrionario que
desencadenan los factores necesarios para es regulado en gran parte por interacciones
causar luteolisis, evidenciándose un nuevo guiadas por la P4 (6).
ciclo estral en el caso de no existir preñez
(28).
Contrariamente autores como Spell et al (36), La eCG es una hormona con promedio de
no han encontrado correlación entre las vida de 3 días, producida por los cálices
variables tamaño del CL, concentración de endometriales en la yegua preñada entre los
P4 plasmática y porcentaje de preñez en días 40 a 130 (41). Esta hormona se vincula
hembras receptoras con embrión a los receptores foliculares de FSH y de LH,
transplantado. y a los receptores de LH del CL, creando de
esta forma condiciones de crecimiento
En varios estudios realizados el aumento en folicular, ovulación y luteinización (41, 42).
concentraciones plasmáticas de P4 durante
el diestro ha sido correlacionado con la La aplicación de eCG en el momento esperado
capacidad del embrión en secretar IFN-τ, de una nueva onda de crecimiento folicular,
provocando así aumento en las tasas de ha demostrado eficiencia en cuanto a
preñez (27, 37), pero en otros reportes no superovulación y/o desarrollo de un folículo
se ha observado esta relación y efecto (38). dominante de mayor diámetro,
determinando de esta forma un mayor
Kerbler et al (39), encontraron una número de cuerpos lúteos o un CL de buen
correlación positiva entre la concentración tamaño (32). Esto va acompañado de
de P 4 plasmática y la síntesis de IFN-τ mayores concentraciones plasmáticas de P4
producido por embriones de 18 días de edad, y mejores tasas de aprovechamiento,
en donde se halló la concentración de concepción y de preñez frente a tratamientos
interferón utilizando la prueba antiviral con sin aplicación de esta hormona (32, 43, 44).
virus de estomatítis vesicular. Según estos
resultados se podría sugerir que a mayor Investigaciones realizadas por Melanie et al
concentración de P4 plasmática en hembras (45), no reportaron diferencia entre la
preñadas mejor será el ambiente uterino para concentración plasmática de P4 y la cantidad
el conceptus en vías de desarrollo (40). Esto de cuerpos lúteos presentes en hembras
se entiende si se tiene en cuenta que la P4 preñadas, por el contrario encontraron mayor
es la precursora de los diferentes perdida de preñeces en las hembras con doble
componentes que conforman este ambiente. ovulación, lo que sugiere que demasiada P4
Cualquier variación en la concentración de plasmática podría estar alterando el balance
P4 es determinante en la modulación de la hormonal uterino perjudicando el ambiente
expresión y secreción de factores de para el embrión en desarrollo.
crecimiento, citoquinas y proteínas, que
condicionan el medio uterino para los Nasser et al (46), han verificado que con la
procesos de receptividad endometrial y de aplicación de eCG el día 8 de sincronización,
viabilidad embrionaria (39). determina apenas un 2% de doble ovulación
en receptoras de embriones, pero
De acuerdo con lo anterior se podría sugerir evidenciaron que con la aplicación de esta
que al brindar fuentes directas o indirectas hormona se consiguen cuerpos lúteos únicos
de P4 a hembras durante los primeros días de mayor tamaño, incrementando así la tasa
de preñez el porcentaje de pérdidas de preñez. Igualmente Quezada y Ortiz (47),
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REFERENCIAS
8 Thatcher W, Guzeloglu A, Binelli M, Hansed 18 Johnson GA, Burghardt RC, Spencer TE,
TR, Pru JK. Uterine conceptus interactions Newton GR, Ott TL, Bazer FW. Ovine
and reproductive failure in cattle. osteopontin II. Osteopontin and ávâ3
Theriogenology 2001; (56): 1435–1450. integrin expression in the ovine uterus and
conceptus during the peri-implantation
9 Thatcher W, Bartol F, Knickerbocker J, Curl period. Biol Reprod 1999; 61: 892–899.
J, Wolfenson D, Bazer F. Maternal
recognition of pregnancy in cattle. Dairy 19 Johnson GA, Spencer TE, Burghardt RL,
Sci 1984; 67: 2797– 2811. Taylor KM, Gray CM, BazerFW.
Proyesterone modulation of osteopontin
10 Araújo M, Vale V, Ferreira A, Sá W, Barreto give expression in ovine uterus. Biol
J, Filho L. Secreção de interferon-tau em Reprod 2000; 42: 104.
embriões bovinos produzidos in vitro
frescos e congelados. Interferon tau 20 Kimmins S, MacLaren LA. Cyclic modulation
secretion in cattle embryos in vitro of integrin expression in bovine
fertilized before and after endometrium. Biol Reprod 1999; 61: 1267–
cryopreservation. Arq Bras Med Vet 1274.
Zootec 2005; (57): 751-756.
21 Lasky LA, Singer M, Dowbenko D, Imal Y,
11 Watson AJ, Hogan A, Hahnel A, Wiemer Henzel W, Grimley C. An endothelial ligand
KE, Schultz GS. Expression of growth for L-selectin is a novel mucin-like
factor ligand and receptor genes in the molecule Cell 1992; 69: 927–938.
preimplantation bovine embryo. Mol Reprod
Dev 1992; (31): 87-95. 22 Roberts M. Interferon-tau, a Type 1
interferon involved in maternal recognition
12 Matsui M, Takahashi Y, Hishinuma M, of pregnancy. Cytokine & Growth Factor
Kanagawa H. Stimulation of the Reviews 2007; 18: 403–408.
development of bovine embryos by insulin
and IGF-I is mediated through the IGF-I 23 Burgdardt R, Bowen J, Newton G, Bazer
receptor. Theriogenology 1997; 48: 605- F. Extracellular matrix and the implantation
616. cascade in pigs. Reprod Fertil 1997; 52:
151–164.
13 Johnson, M. Intrinsec and extrinsec
factors in preimplantation development 24 Burgess k, Kalph M, Jenkin G, Thorburn,
Reprod Fert 1979; 55: 255. G. Effect of oxytocin and estradiol on
uterine prostaglandin release in
14 Kaplan JH. Biochemistry of K.ATPase. Annu nonpregnant and early pregnant ewes.
Rev Biochem 2002; 71: 511–535. Biol Reprod 1990; 42: 822-833.
15 Peña M, Góngora A, Estrada J. Factores 25 Lessey BA, Yeh IT, Castelbaum AJ, Fritz
de crecimiento en el desarrollo folicular, MA, Llesanmi AO, Korzeniowski P, et al.
embrionario temprano e implantación. Endometrial progesterone receptors and
Implicaciones en la producción de markers of uterine receptivity in the
embriones bovinos. Rev MVZ Córdoba windows of implantation. Fertil Sterili
2007; 12(1): 942–954. 1996; 659: 477- 483.