UTENSILIOS:

o Tubo de ensayo
o 1 probeta (100ml)
o 2 vasos precipitados
o 1 pipeta
o 1 matraz Erlenmeyer
o 1 colador
o 1 cuchara
o 1 batidora
SUSTANCIA:
o Tomate
o Cloruro de Sodio (sal de mesa)
o Bicarbonato
o Detergente lava trastes
o Alcohol frio
PASO 1:
Para nuestro paso número 1 necesitamos hacer puré nuestro tomate con la ayuda
de una batidora, con la ayuda de esta hay una rotura de las células permitiendo
liberar los orgánulos que contiene nuestro tomate.
PASO 2:
Pasar el puré de tomate por un colador para así liberarlo de los grumos restantes,
el puré se agrega en el colador lentamente. Terminando de añadir colamos bien
para que baje todo el puré (liquido).
PASO 3:
Preparación de un tampón de lisis añadiendo 250 ml de agua a un matraz
Erlenmeyer, añadimos una cucharada de cloruro de sodio o sal de meza. Al añadir
sal los iones de sodio son atraídos por las cargas negativas del ADN neutralizando
su carga, haciendo esto permite a las moléculas de ADN unirse en vez de repelerse
la sal además disminuye la solubilidad de las proteínas haciendo que se precipiten y
que se separe más fácilmente nuestro ADN.
A continuación, se añade una cucharada de bicarbonato para mantener el PH y que
no se desintegre las moléculas de ADN. Luego de esto se añade detergente para
que destruya las membranas del tejido vivo, esto para neutralizar la grasa.
Seguidamente tapamos nuestro matraz y agitamos.
PASO 4:
Añadimos 10ml del puré de tomate (liquido) a un matraz, también añadimos 20ml
de nuestro tapón de lisis ayudándonos de una probeta para mayor exactitud. Todo
en nuestro matraz, tapamos nuestro matraz y mezclamos. Dentro del matraz el
tapón de lisis esta reaccionando disolviendo núcleos, cloroplastos y mitocondrias que
contiene el tomate para así liberar el ADN. Después de agitar lo pasamos a un vaso
de precipitado, colándolo.
PASO 5:
Con ayuda de una probeta pequeña medimos 5ml del triturado de tomate
previamente mezclado con el tapón de lisis, lo pasamos a un tubo de ensayo.
Después lavamos la probeta y medimos 10ml de alcohol (96%) añadimos el alcohol
al tubo de ensayo donde se encuentra la mezcla. Utilizamos alcohol frio porque
precipita el ADN, hace que se precipite algunas hebras blancas visibles que es el
ADN en la interfase, la solución que se encuentra en el tubo de ensayo. Con ayuda
de una pipeta más delgada separamos las hebras blancas y las guardamos en unas
placas Petri. La separación de esta fase intermedia se encuentra con carga nula y
con una polaridad intermedia entre el agua y el alcohol, el agua vendría siendo el
triturado de tomate.
Finalmente se puede ver el producto final que es el ADN precipitado.