UNIVERSIDAD MAYOR para espiritus emprendedores CUADERNO DE LABORATORIOCOMO USAR EL CUADERNO DE LABORATORIO? Fuente: Laboratorio PIPRA UCDavis ML, Titulo det Proyecto/ Intencién del experimento/ Protocolos/ Reactivos 1. Continuidad en Il, El cuaderno debe ter comentarios/experimentos paginas numeradas sin para hacer seguimiento evidencia de paginas arrancadas: RSIDAD, MAYOR Viene de la pagina 120 7 TITULO: Reemplazo de AG1 en pP1PRA1014 OBJETIVO: Clonar el fragmento AG2 en el vector pP1PRA1014 RQ. en sustitucion del fragmento AGt \S! PROPOSITO DEL EXPERIMENTO: Evaluar la eficiencia de AG2 en plantas transgenicas. La eficiencia sera evaluada con el reemplazo de AG1 por AG2 ESTRATEGIA: El fragmento AG2 ha sido previamente amplificado (Cuaderno de Laboratorio 3, pag 120), el cual esta flankeado por el sitio de restricci6n Agel. Debido a que el vector pP1 PRAT O14 contiene AG1 el cual esta también flankeado por Agel, el reemplazo sera directo. Age act Fragento G2 AG! rarest petprators — ¢ligae ge | PROTOCOLO: URilizando el protocolo de ligacién con agarosa de bajo punto de fusion descrito en el Cuaderno de Laboratorio 3, pag 10, se ligara AG2 a pP1PRA1014 previamente cortado y GU) defosforiiado. Ny MATERIAL Y REACTIVOS: pP1 PRAT O14 (DNA plasmidico 520ng/ml) pP1 PRAT 010 (DNA plasmidico 350ng/ml conteniendo AG2) ‘Agel (NEB enzima de restriccién #cat. RO5425) Fosfatosa Alcalina (NEB ticat. M02895) T4 DNA ligasa (NEB #cat. M02025) Agarosa de bajo punto de fusion (Invitrogen feat. 1551 7-014) RESPONSABLE TESTO: IV, Testigo/Firma: Esto es importante para validar lo anotado Pi unversinan, Mayor{COMO USAR EL CUADERNO DE LABORATORIO? Fuente:"Guia de buenas practicas para resguarder el conocimiento y Ia innovacion’ PIPRA UC Davis (2010) V. Fecha: Esto es jportante para validar loanotado J cu SP Buwespo.mavoe 1 Cortar con Agel pP'1PRA1014 y fragmento AG2 pPt PRAIO14 pPI PRAT O10 (AG2) 420 21,5 ml 4420 14,5 ml Buffer 10x #1 3 mL Buffer 10x #13 mi BSA 10x 3 ml BSA 1 Ox 3 ml Na 1 ml DNA Bmi Agel 1,5 ml Agel 1,5 ml 30 mi inl 2.- Siguiendo el protocolo descrito en el Cuaderno de Laboratorio 3, pag 10, correr gel de agarosa de bajo punto de fusion. Cortar VI. Prohibido las bardas correspondientes al vector y al inserto y ligar. eliminar/ Recreacion de ligacion: borrarlos pPIPRALOT4 (Vv) 24,5 ml resultados G2 (inserto) 3 ml experimentales, Ta onaigers ta ipinetandone: H20 4,5 mi hayan 30a funcionado deenpetatra | @D noche y transformar utilizan de células compet Invitrogen #cat 4.- Purificar DNA plasmidico as oo de 12 colonias obtenidas en ooo la transformacion utilizando p> el protocolo descrito en el EREESE Eee Cuaderno de Laboratorio 1, _ 'p* analizar la presencia de AG2 SE cur ravo:tigacion funcions aie y se obtuvieron 2 clasas, WD Sreeniende ace, @D Continia en pag 124. Resultados RESPONSIBLE: FRA: elaborados/ TESTGO: RMA: resumen de resultados VII Se debe firmar y fechar los datos y fotografias que se pegan en el cuaderno de laboratorio Revisa al final del cademo una guia de buenas prticas parasu buen uso. UNIVERSIDAD, MAYORFHA ff UNIVERSIDAD. MAYOR Ne RESPONSABLE: FIRMA: TESTIGO: FIRMA:BUENAS PRACTICAS PARA EL USO DEL CUADERNO DE LABORATORIO En la investigacién experimental, el cuaderno de laboratorio es fundamental para llevar un re todas las pruebas y resultados, positivos 0 esas, que tenga una neice Con esta herramienta, se pretende obtener el registro de la actividad cientifica como fuente original de datos, materia prima para la elaboracidn de una publicacién, tesis 0 memoria, e incluso material probatorio para definir la autoria 0 propiedad intelectual de un cierto hallazgo o invencién. E! cuaderno debe contar con hojas foliadas corelativas que no deben removerse, espacio para registrar fecha y firma del responsable y testigo, Su caracterstca principal es que debe decir claramente qué se hizo, cémo se hizo, quién lo hizo y cuando lo hizo. Algunas recomendaciones: é debo registrar? Antecedentes del tema a investigar, hipstesis cientifica, objetivos, materiales a utilizar, disoluciones, instrumentos, controles, diagramas de flujo, observaciones, datos, resultados, Condlusiones e interpretaciones. Basicamente todo lo que voy a hacer y utilizar para hacerlo; y lo que obtenga como resultados, ya sean positivos o negativos. * Utilizar una letra clara, sin abreviaciones o frases que sdlo entienda el responsable. Se debe utilizar lapiz de pasta o tinta, y en el caso de cometer un error de escritura se debe tarjar con una rayay continuar con la escritura correcta inmediatamente a continuacién, en ningun caso se debe usar corrector; y en ning aso se puede sacar una hoja. El cuaderno debe poder ser entendido y sus experimentos replicados por cualquier entendido en a materia. © Presentacién de los datos experimentales. Si se crea una tabla para presentar datos, no olvidar identificarla con un titulo claro, incorporar unidades de medida e indicar si se incorporan miiltiplos 0 submiltiplos, ademas de nombrar cada fila y columna para evitar errores de lectura. Pueden pegarse fotografias 0 imagenes de los resultados obtenidos, firmandolos y fechdndolos en uno de sus extremos. * Debe usarsecronolagicamente y siempre llevarla fecha, Una vez completa cada pagina el responsable debe firmarla; y cada semana o fecha designada, un testigo distinto al responsable debe firmar también, dando fe dela creacén de dicho contenido. © Los cuademos de laboratoro en los que se registra lainvestigacidn realizada en la Universidad son de propiedad de la Universidad Mayor, por lo que deben mantenerse en el laboratorio o centro de investigacin, no deben fotocopiase i levarsea otro lugar ina debida autorizacion del director o jefe de aboratorio, Una vez completos, deben quardarse en un lugar designado por el jefe de laboratory mantenerse por un periodo de al menos 5 afios. Sila investigacién noha fnalizado, se debe comenzar umn nuevo cuadernoy referencir el nero del cuaderno previo, para dar continuidad al registro, ‘YRECUERDA: LO QUE NO SE REGISTRA, SEOLVIDA. UNIVERSIDAD MAYOR part esprius enpencedares4 UNIVERSIDAD MAYOR Pn any DIRECCION DE INNOVACION Y TRANSFERENCIA TECNOLOGICA tumayorc| © 600328 1000 MDC AM eas. OM ect