UNIVERSIDAD CATÓLICA DE LA PLATA

CÁTEDRA DE BIOFÍSICA Y BIOQUÍMICA

AÑO 2019

TRABAJO PRÁCTICO
UNIDAD X: METABOLISMO DE LÍPIDOS
OBJETIVO GENERAL

• Conocer el metabolismo de las grasas en el organismo

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Conocer los mecanismos de digestión de la grasas

• Relacionar el metabolismo de los lípidos con los hidratos de carbono
• Evaluar el balance energético del metabolismo de lípidos

CONCEPTOS PREVIOS NECESARIOS

• Clasificación de las grasas: triacilglicéridos, ácidos grasos, esteroides.

• Alimentos ricos en grasas
• Reconocimiento de grupos funcionales presentes en los distintos lípidos.
• Isomería geométrica: configuraciones cis y trans
• Lipoproteínas
• Ciclo de Krebs y cadena de transporte de electrones.

CONTENIDO

La oxidación de los ácidos grasos de cadena larga hasta acetil-CoA, es una ruta central
del metabolismo energético en animales. Este proceso se denomina β-oxidación.
Durante esta oxidación, los electrones cedidos llegan a la cadena de transportes de
electrones en la membrana mitocondrial y finalmente producen ATP. El acetil-CoA
puede ingresar al ciclo de Krebs y de esta manera terminar generando ATP de manera
más eficiente. El acetil-CoA también puede ingresar a otras rutas metabólicas y producir
cuerpos cetónicos que actúan como combustible para el cerebro y otros tejidos en
ausencia de glucosa.

Las grasas que se oxidarán en la β-oxidación pueden provenir de diferentes fuentes

a. Dieta
b. Grasas almacenadas en tejidos especializados (tejido adiposo)
c. Grasas sintetizadas en hígado a partir del exceso de glúcidos: biosíntesis de
lípidos

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 a- Luego de la ingesta de
alimentos ricos en grasa, se
liberan al intestino delgado
sales biliares que se
encontraban almacenadas en
la vesícula biliar. Dada su alta
hidrofobicidad e insolubilidad
en agua, las grasas deben ser
emulsionadas previamente y
transportadas mediante
diferentes tipos de proteínas.
Las sales biliares son
compuestos anfipáticos y
actúan como detergentes
biológicos degradando a los
lípidos y formando micelas
compuestas de ácidos biliares
y triacilgliceroles. Estas
micelas permitirán la
exposición de los lípidos a la
acción de las lipasas hidrosolubles en el intestino.
Las lipasas convierten a los triacilglicéridos en monoglicéridos, diacilglicéridos, ácidos
grasos y glicerol. De esta manera, estos productos difunden hacia el interior de las
células epiteliales de la mucosa intestinal para nuevamente son convertidos en
triacilglicérido

b- Cuando en el organismo existe una

necesidad energética, la adrenalina y
glucagón (hormonas sensibles a la baja
concentración de glucosa en sangre)
activan a la adenilatoclicasa que es una
hormona presente en la membrana
celular de los adipocitos y cuya función
es aumentar la concentración
intracelular de AMPc. Al aumentar
éste, una proteína quinasa
dependiente de él, fosforila a la
triacilglicerollipasa activándola. De
esta manera la triacilglicerollipasa
hidroliza los enlaces ésteres liberando

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glicerol y ácidos grasos al torrente sanguíneo. En la sangre los AG se unen a la albúmina
sérica y son distribuídos al músculo esquelético, corazón y corteza renal. El glicerol
terminará transformado en gliceraldehído -3-fosfato e ingresará a la glucólisis.

c- biosíntesis de ácidos grasos (ver más adelante – BIOSÍNTESIS)

Β-OXIDACIÓN

Es el proceso por el cual los ácidos grasos son degradados.

Etapa previa: Las enzimas de la oxidación de ácidos grasos se localizan en la matriz

mitocondrial por lo tanto los ácidos grasos deberán ingresar a la mitocondria para ser
oxidados. El ingreso de los ácidos grasos a la matriz mitocondrial no es libre sino que
deben sufrir una serie de modificaciones.

Primero, la acil-CoA- sintetasa, que es una enzima ubicada en la membrana externa de

la mitocondria, cataliza la siguiente reacción:

Ácido graso + CoA + ATP acilgraso-CoA + AMP + PPi

Segundo, el grupo éster de acilgraso-CoA formado se une luego, transitoriamente, al

grupo hidroxilo de la carnitina y la acil-carnitina es transportada a través de la membrana
mitocondrial por la carnitina aciltransferasa I. El éster acil-carnitina cruza la membrana
interna mitocondrial penetrando a la matriz mitocondrial mediante difusión facilitada
por el transportador acil-carnitina/carnitina.

Tercero, la carnitina aciltransferasa II transfiere el grupo acil graso desde la carnitina a

la coenzima A intramitrocondrial.

Este transporte de ácidos grasos hacia el interior de la matriz mitocondrial separa los
depósitos citosólicos y mitocondriales de coenzima A que tienen funciones diferentes a
ambos lados. El depósito mitocondrial de CoA es utilizado para la oxidación de piruvato,

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ácidos grasos y algunos aminoácidos y el depósito citosólico es utilizado para la biosíntes
de ácidos grasos.

La β-oxidación propiamente dicha se efectúa en tres pasos.

1- Eliminación oxidativa de unidades sucesivas de dos átomos de carbono desde el

extremo de la cadena hidrocarbonada del ácido graso. Esos dos carbonos se
pierden en forma de acetil-CoA. Los ciclos se repiten hasta eliminar todos los
carbonos. Ocurre en cuatro reacciones enzimáticas.

a- En la primera reacción se produce una deshidrogenación generando un

enlace doble entre los carbonos α y β catalizado por la acil-CoA
deshidrogenasa. Esta enzima tiene un grupo prostético FAD que acepta los
electrones eliminados.

b- En la segunda reacción se incorpora una molécula de agua en el doble enlace

generado

c- En el tercer paso se produce la deshidrogenación del L-β-hidroxiacil-CoA para

formar β-cetoacil-CoA por acción de la β-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa. En
esta reacción el NAD+ acepta los electrones. El NADH formado entrará en la
cadenera respiratoria para formar ATP

d- En la cuarta y última reacción, la acil-CoA acetiltransferasa promueve la

reacción entre el β-cetoacil-CoA y una molécula de coenzima A para
favorecer la fragmentación del carboxilo terminal, ahora con dos carbonos

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 menos con la coenzima A. Esta reacción se conoce como tiólisis de ahí que a
la enzima se la llame también tiolasa.

2- Los residuos acetilo del acetil-CoA se oxidan a CO2 en el ciclo del ácido cítrico en
la matriz mitocondrial. De este modo se llega a una ruta oxidativa final común
con el acetil-CoA procedente de la glucólisis y oxidación del piruvato.

3- Los NADH y FADH2 que se produjeron en las etapas de oxidación anteriores

cederán los electrones recibidos en la cadena respiratoria mitocondrial. De este
modo la energía liberada en la oxidación de los ácidos grasos se conserva en
forma de ATP.

Balance energético de la β-oxidación del ácido palmítico.

palmitoil-CoA + 7CoA + 7FAD + 7NAD+ + 7H2O → 8 acetil-CoA +7FADH2 + 7NADH

+ 7H+

El acetil-CoA ingresa al ciclo del ácido cítrico y continúa oxidándose

8 acetil-CoA + 16 O2 + 96 Pi + 96 ADP → 96 CoA +96 ATP + 104 H2O +16 CO2

Enzima NADH Y FADH2 formados ATP generado

Acil-CoA deshidrogenasa 7 FADH2 14
Β-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa 7 NADH 21
Isocitrato deshidrogenasa 8 NADH 24
α-cetoglutarato deshidrogenasa 8 NADH 24
Succinil-CoA sintetasa 8
Succinato deshidrogenasa 8 FADH2 16
Malato deshidrogenasa 8 NADH 24
total 131 ATP
Palmitato a palmitoil- CoA -2ATP
BALANCE FINAL 129 ATP

Los ácidos grasos insaturados naturales presentan normalmente configuración cis. Por
lo tanto no sirven de sustrato para la enzima enoil-CoA que reconoce enlaces trans como
se describió anteriormente. La célula resuelve este conflicto utilizando una isomerasa

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que cataliza la transformación del enlace cis a trans y una reductasa que interviene en
la β-oxidación de ácidos grasos poliinsaturados.

Si bien la mayoría de los lípidos naturales contienen ácidos grasos de cadena par de
átomos de carbono, se encuentran cantidades mínimas, pero significativas, de ácidos
grasos de cadena impar en algunas plantas y animales marinos. Estos ácidos grasos se
oxidan por las mismas vías que los de número par de átomos de carbono. Sin embargo
hay una modificación en el último paso ya que se genera propionil-CoA (CH3-CH2-CO-
SCoA) con 3 carbonos. En este caso se incorpora CO2 mediante la unión con biotina. Esta
etapa requiere energía. Luego existen dos etapas de reestructuración molecular,
catalizadas por dos enzimas (una epimerasa y una mutasa) utilizando una coenzima
derivada de la vitamina B12.

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CUERPOS CETÓNICOS

El acetil-CoA formado en el hígado durante la oxidación de los ácidos grasos puede

ingresar en dos rutas metabólicas: el ciclo de Krebs o generación de cuerpos cetónicos.

Los cuerpos cetónicos son el acetoacetato, D-β-hidroxibutirato y acetona. Esta última

puede ser exhalada para eliminarse. Los otros dos son transportados desde la matriz
mitocondrial hasta tejidos extrahepáticos ya que el hígado no puede utilizar estas
moléculas con fines energéticos. En estos otros tejidos son oxidados a través del ciclo
del ácido cítrico liberando gran parte de la energía contenida en sus enlaces. El cerebro,
que prefiere la utilización de glucosa como fuente de carbono, puede utilizar estos
cuerpos cetónicos en situaciones de inanición cuando la glucosa no está disponible.

El destino del acetil-CoA hacia una ruta u otra está determinado por la cantidad de
oxalacetato disponible para permitir su ingreso al ciclo de Krebs. En situaciones de
ayuno prolongado, el oxalacetato es derivado a la producción de glucosa
(gluconeogénesis) y por lo tanto el acetil-CoA tiene limitado su ingreso al ciclo del ácido
cítrico derivándose a la producción de cuerpos cetónicos.

Metabolismo del glicerol

La hidrólisis de los triacilglicéridos libera una molécula de glicerol. Ésta para poder
activarse para posteriores rutas metabólicas necesita ser fosforilado. Esta reacción es
catalizada por la glicerolquinasa que lo convierte en glicerol-3-fosfato y se oxidará a
dihidroxiacetona-fosfato. Luego la enzima glucolítico triosa fosfato isómerasa lo
transforma en gliceraldehído-3-fosfato que se oxidará en la glucólisis.

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BIOSÍNTESIS DE ÁCIDOS GRASOS

Los ácidos grasos se producen en la célula en situaciones donde la ingesta calórica

supera la demanda. Este exceso se almacena en forma de lípidos tales como los
triacilglicéridos.

La biosíntesis y degradación de los ácidos grasos ocurren por vías metabólicas diferentes
catalizadas por enzimas distintas y en lugares distintos de la célula.

La síntesis comienza con la incorporación de HCO3- a una molécula de biotina con gasto
de ATP para luego ser transferido a un acetil-CoA formando malonil- CoA. Éste es el
precursor de la síntesis. A partir de él ocurre una secuencia de reacciones mediante las
que se construyen las largas cadenas hidrocarbonadas de los ácidos grasos. Esta
secuencia consta de cuatro etapas y es catalizada por el complejo multienzimático ácido
graso sintasa

1- Condensación: se condensan loS grupos acetilo y malonilo activados.

2- Reducción del grupo carbonilo
3- Deshidratación
4- Reducción del doble enlace

Al acetil-CoA utilizado en la síntesis proviene principalmente de la matriz mitocondrial

ya que el producido en la β-oxidación en el citosol no representa una fuente significativa.
Al ser la membrana mitocondrial impermeable al acetil-CoA, es necesaria una lanzadera
indirecta que transfiera equivalentes de grupo acetilo a través de dicha membrana. El
acetil-CoA entonces es transformado en citrato que atraviesa la membrana por un
transportador tricarboxilato. Luego el citrato en el citosol incorpora CoA con gasto de
ATP transformándose en oxalacetato. El oxalacetato mediante la malato
deshidrogenasa produce malato que ingresa nuevamente a la matriz mitocondrial por
el transportador malato-α-cetoglutarato o se transforma mediante la enzima málico en
piruvato que también ingresa a la matriz mitocondrial por el transportador piruvato.

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Las reacciones de la ácido graso sintasa se repiten hasta formar palmitato (16C) que es
liberado al citosol. Luego esta cadena es alargada en el retículo endoplasmático.

En los mamíferos, el complejo multienzimático se encuentra exclusivamente en el

citosol. Esta localización segrega los procesos biosintéticos de los degradativos muchos
de los cuales ocurren en la matriz mitocondrial.

BIOSÍNTESIS DE TRIGLICÉRIDOS

Los ácidos grasos sintetizados (o los ingeridos por el organismo) pueden terminar
almacenándose como triglicéridos o incorporarse a las membranas plasmáticas como
fosfolípidos. El destino dependerá de las necesidades del organismo.

El primer paso para la biosíntesis de triacilgliceroles es la acilación de los grupos hidroxilo

libres del gliceraldehído-3-fosfato para dar diacilgliceraldehído-3-fosfato más
comúnmente llamado fosfatidato. Este fosfatidato es un intermediario crucial ya que
puede transformarse en triacilgliceroles o bien en glicerofosfolípidos. Los diacilglicéridos
incorporan un tercer acilgraso-CoA generando un triacilglicérido.

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 BIOSÍNTESIS DE FOFOLÍPIDOS DE MEMBRANA

En general la formación de fosfolípidos requiere:

1- síntesis del esqueleto de la molécula: glicerol o esfingosina

2- unión de ácidos grasos mediante uniones éster o amida
3- Adición de la cabeza hidrofílica
4- Alteración o intercambio de la cabeza hidrofílica para dar el fosfolípido final.

BIOSÍNTESIS DE COLESTEROL

El colesterol se sintetiza a partir de una molécula simple: el acetato. El proceso tiene

lugar en cuatro etapas.

1- Síntesis de mavelonato a partir del acetato.

2- Conversión del mavelonato en dos isoprenos activados
3- Condensación de seis unidades de isopreno activadas para formar escualeno
4- Conversión de escualeno en el núcleo esteroide de cuatro anillos.
Acetil-CoA → Mevalonato → Escualeno → Colesterol

La mayor parte de la síntesis del colesterol ocurre en el hígado. Una fracción se incorpora
a la membrana de los hepatocitos pero la gran mayoría se exporta al resto de los tejidos
como colesterol biliar, ácidos biliares o ésteres de colesterol.

El colesterol además de formar parte de las membranas, es precursor de todas las

hormonas esteroides

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Además los intermediarios de su biosíntesis son precursores de muchas moléculas con
diversas funciones bioquímicas como por ejemplo carotenoides, vitaminas A, K, E, D

CUESTIONARIO.

1. Describir cómo es la digestión de las grasas en el organismo

2. Siendo los triacilglicéridos hidrofóbiocos ¿cómo ingresan al torrente sanguíneo
para distribuirse en los distintos tejidos?
3. ¿Qué es la β-oxidación? ¿dónde ocurre?
4. ¿cómo ingresan los ácidos grasos a la matriz mitocondrial?
5. ¿Cuáles son los productos de la β-oxidación?
6. Indicar el destino del acetil-CoA obtenido en la β-oxidación en las siguientes
situaciones. Explique
(a) Ayuno prolongado
(b) Luego de una comida
7. En el caso de un exceso de ingesta de grasas en la dieta, explicar cómo se
establece el transporte de las mismas en sangre y las consecuencias en el
organismo.
8. ¿Existe alguna vinculación entre el metabolismo de lípidos y glúcidos? Explique.
9. Indicar el destino del glicerol obtenido en la β-oxidación
10. ¿Dónde ocurre la biosíntesis de los ácidos grasos?
11. Explicar la ventaja celular de tener el complejo multienzimático de biosíntes de
AG en la matriz mitocondrial

BIBLIOGRAFIA

-Lehninger, M y otros autores. Principios de Bioquímica. 4ta. edición. Ed. Omega. (2005)

-Blanco, Antonio. Química Biológica. 8va. Edición. Ed. El Ateneo (2005)

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