 ATAUCURI HUAMAN RUTH EUFEMIA

 POMA NINA YESENIA MARICRUZ

 FERNANDES LLAMOCCA YSAMAR MARISOL
FUNCION ANTIMICROBIANA Y ANTIFUNGICA DEL ALLIUM SATIVUM EN
CULTIVOS DE CANDIDA ALBICANS Y ESCHERICHIA COLI

ANTIMICROBIAL AND ANTIFUNGAL FUNCTION OF THE allium sativum IN CULTURE

OF CANDIDA ALBICANS AND ESCHERICHIA COLI

ATAUCURI HUAMAN R.FERNANDEZ LLAMOCCA Y.POMA NINA Y.

LABORATORIO DE FARMACOGNOSIA II, FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

DE LA UNIVERSIDAD PRIVADA AUTONOMA DEL SUR

RESUMEN

El siguiente trabajo fue elaborado para determinar el efecto antimicrobiano del ajo
en cultivos de cepas como candida albicans y escherichia coli. El ajo posee varias
virtudes tanto culinarias como farmacéuticas, que despierta gran interés en la
medicina natural sobre todo por su actividad antimicrobiana. Por otro lado, se obtuvo
la alicina del ajo de variedad napuri mediante un proceso de liofilización para
seguidamente realizar la cuantificación de quinonas, flavonoides, taninos y
alcaloides presentes en el allium sativum ajo el cual dio positivo para flavonoides,
con el “MÉTODO DE SHINODA CON GRANALLAS DE MAGNESIO Y HCL
CONCENTRADO” dicho resultado fue porque el ajo contiene compuestos
azufrados. Así mismo se realizó estudios de tipo experimental para la identificación
de la acción antimicrobiana y anti fúngica del allium sativum liofilizado en cepas
bacterianas como: cándida albicans y escherichia coli. Por el método de Kirby
Bauer en agar SPS. (1,2) Y se realizó el sembrado en placas de dichas bacterias y
se realizó diluciones con la finalidad de encontrar la concentración mínima inhibitoria
por medo de la escala Mc Farland. Seguidamente se procedió a realizar el
sembrado en las placas en agar sabouraud con la finalidad de encontrar los
diámetros para cada una de las concentraciones y para luego hallar la concentración
optima mediante la prueba de Bauer Kirby. (2,3) En dicho procedimiento se encontró
que la concentración mínima inhibitoria produjo inhibición en un promedio de 7.3mm
siendo l concentración del ajo pura de está concluyendo que el ajo liofilizado tiene
actividad antifúngica fentre al sembrado de cándida albicans, (4,5,6) debido a los
resultados analizados y comparando los resultados con otros trabajos de
investigación el ajo napuri liofilizado tiene actividad antifúngica

Palabras clave: Allium sativum, Ajo napuri Antibacterianos, Cándida Albicans,

Escherichia coli.
ABSTRACT

The following work was done to determine the antimicrobial effect of garlic in cultures
of strains such as candida albicans and escherichia coli. Garlic has several virtues
both culinary and pharmaceutical, which arouses great interest in natural medicine
especially for its antimicrobial activity. On the other hand, the allicin of the napuri
variety garlic was obtained by means of a lyophilization process to then quantify
quinones, flavonoids, tannins and alkaloids present in allium sativum garlic which
was positive for flavonoids, with the "SHINODA METHOD" WITH MAGNESIUM
GRANULES AND HCL CONCENTRATE "this result was because garlic contains
sulfur compounds. Likewise, experimental studies were carried out to identify the
antimicrobial and anti fungal action of lyophilized allium sativum in bacterial strains
such as: candida albicans and escherichia coli. by the Kirby Bauer method on SPS
agar. (1,2) And plating of said bacteria was carried out and dilutions were made in
order to find the minimum inhibitory concentration per mede of the Mc Farland scale.
Then we proceeded to carry out the sowing in the plates on sabouraud agar in order
to find the diameters for each of the concentrations and then find the optimal
concentration by the Kirby Bauer test. (2,3) In this procedure it was found that the
minimum inhibitory concentration produced an average inhibition of 7.3mm, the
concentration of pure garlic being the same, concluding that the lyophilized garlic
has antifungal activity fentre when planted with candida albicans, (4,5 , 6) due to the
results analyzed and comparing the results with other research works the naphurized
garlic napuri has antifungal activity

Key words: Allium sativum, Garlic napuri Antibacterial, Candida Albicans,

Escherichia coli.
INTRODUCCIÓN

El ajo (Alliun sativun L.) Es una planta herbácea perenne, cultivada generalmente
en regiones tropicales y de gran aplicación culinaria y terapéutica. Estas se
siembran en las regiones del Perú, principalmente en Arequipa, Cajamarca y Lima

El alliun savitun por sus tantas virtudes es el más estudiado sobre todo en el ámbito
farmacéutico. Sus características van desde la ampliación culinaria hasta sus más
estudiados efectos en la medicina natural como: su acción antioxidante,
hipolipemiante, antimicrobiana, antotrombotica, hipotensora, antifungica. La
actividad antimicrobiana que posee el ajo el ajo es ampliamente atribuida a la alicina
que se debe a una reacción química con los grupos tiol de las diferentes enzimas
(7)

El ajo ejerce distintos componentes como agua y los carbohidratos como la fructosa,
compuestos azufrados, fibra y aminoácidos libres así mismo contiene altos niveles
de vitamina c y a y bajos niveles del complejo b también posee un alto contenido de
compuestos fenólicos, polifenoles y fitoesteroles(8)

Por lo que este estudio pretende evaluar la capacidad antimicrobiana del ajo en
cepas bacterianas como: candida albicans y escherichia coli, pAra la siguiente
evaluación se obtuvo la alicina del ajo mediante un proceso de liofilización.

Alicina en sí es muy inestable y se descompone rápidamente. Block utilizó un

análogo de la metil-metano thiosulfinate alicina, para dilucidar las vías de
descomposición. Otros compuestos se logran a partir del ajo mediante diferentes
vías, las que varían dependiendo del entorno en el que existe el extracto. Este
componente es uno de los principios activos del ajo fresco picado y tiene una
variedad de actividades antimicrobianas.(9)

Además, se ha demostrado que el ajo ejerce una inhibición diferencial entre la micro
flora intestinal y las entero bacteriasWE esto se debe a la manera de almacenar a
temperatura ambiente, la eficacia antibacteriana del extracto de ajo es muy
reducida. (7)
MATERIALES Y MÉTODOS

El presente estudio es d tipo experimental prospectivo e in vitro, cepas de cándida

albicans .

obtención de la muestra se obtuvo por el método de liofilización para el cual se

emplearon 675 g de bulbo de alliun savitun se cortó en láminas delgadas luego en
una bandeja se colocó a liofilizadora a una temperatura de 10° hasta obtener
nuestro objetivo de eliminar todo el agua

Una vez obtenido el ajo lo pulverizamos lo ponemos en un frasco cerrado para no

perder las propiedades del ajo ya que es volátil

Cuantificación de flavonoides taninos quinonas alcaloides

Primero se preparó la muestra en 4 tubos, cada tubo obtiene 2g de ajo diluido en

2ml de alcohol de 70°

Identificación de flavonoides se determinó por la reacción de shinoda en un tubo de

ensayo se colocó 2ml del extracto y se adiciono granallas de magnesio metálico
0,3ml de ácido clorhídrico concentrado. Se dejó reposar por 10 min. Se anotó la
coloración observada (10).

Identificación de taninos, en un tubo de ensayo se colocó 2ml del extracto y se

adiciono fecl3 1ml. Se anotó la coloración observada

Identificación de quinonas s, en un tubo de ensayo se colocó 2ml del extracto y se

adiciono 2ml de hidróxido de sodio al 5%. Se observó y se anotó la coloración

Identificación de alcaloides, en un tubo de ensayo se colocó 2ml del extracto y se

adiciono 3 gotas del reactivo de Mayer se observó y se anotó la coloración y en otro
tubo se colocó 2ml del extracto y se colocó 3 gotas del reactivo de Dragendorff. Se
observó y se anotó la reacción

Preparación de placas y sembrado

Para este procedimiento se utilizó placas Petri esterilizadas en lo cual haremos el

preparado del agar lo cual utilizamos el agar de sabouraud que pesamos 1.43g y en
un matraz colocamos 25 ml de agua destilada y ponemos en el mechero para diluir
luego hacemos un tampón para la boca del matraz y encima de este ponemos papel
crack y lo aseguramos con un hilo luego de este procedimiento lo llevamos a
autoclave x 15 min a 121c° este mismo procedimiento hacemos para el agar
macconkey para una placa

Para el agar de pentosa pesamos 4g en 75ml de agua destilada para tres placas
luego se hace el mismo procedimiento anteriormente dicho

Una vez sacado los matraz del autoclave lo dejamos enfriar un poco, en nuestra
área debe por lo menos dos mecheros y las placas deben estar por lo menos a
10cm del mechero y no mayor a 20cm, la persona debe estar con guantes barbijo
todo sus instrumentos estériles luego comenzamos a echar el agar preparado a las
placas sin crear burbujas dejamos q enfrié hasta volverse en forma gelatinosa luego
con una haza de Henle esterilizada comenzamos el sembrado de cándida albicans
y escherichia coli en forma sic sac sin levantar la aza de Henle una vez terminada
en dos placas comenzamos a sellar con cinta alrededor y envolvemos con papel
crack cinta y rotulamos, llevamos a la incubadora por 24hrs a 37c° y las otras tres
hacemos el mismo envolvimiento y llevamos a la refregidora

Pasado este tiempo sacamos nuestras placas de los lugares indicados y en nuestra
área de trabajo ponemos el mechero prendido abrimos las placas sacamos una
cepa y sembramos en las placas restantes luego hacemos discos de papel filtro
estériles y con una pinza se moja en agua estéril luego ponemos en nuestra muestra
de ajo liofilizado hacemos que pegue al papel filtro luego colocamos en las placas
recién sembradas en el medio volvemos a sellarlas y a la incubadora y las otras
dos ya con las cepas crecidas a la refregidora luego observamos y anotamos los
resultados.
RESULTADOS

La rutina es un flavonoide que tiene una mejor solubilidad en medio alcohólico, que
se caracteriza por dar positiva la prueba de Shinoda con una variación de color que
de pende del tipo de estructura.

metabolitos reactivos coloración

taninos Acetato de plomo negativo
flavonoides Acetato de plomo positivo
alcaloides Mayer Positivo
draguendorff positivo

Las bacterias fueron sometidas a tres diferentes tiempos de concentraciones, la

concentración de 3 mililitros logro inhibir totalmente Pseudomonas aeruginosa.
Escherichia coli no mostro inhibición ante ninguna concentración (11)

Concentración de alicina Echerichia coli Candida albicans

Concentración No inhibición No inhibicion

0,5 + +

1,5 +
+

3 + +
Propiedades anti fúngica

Muchos hongos, incluidos Cándida, Torulopsis, Trichophyton, Cryptococcus,

Aspergillus, Trichosporon y Rhodotorula, se han mostrado ser sensibles a los
compuestos del ajo. El extracto de esta planta demostró disminuir el consumo de
oxígeno, reduciendo el crecimiento del organismo e inhibiendo la síntesis de lípidos,
proteínas y ácidos nucleicos, que ocasionan daños a las membranas. Una muestra
de alicina pura ha indicado ser anti fúngica. (12) La eliminación de la alicina en la
reacción de extracción por solventes, disminuyó la actividad anti fúngica. Esta
también se ha observado con los componentes de ajo: dialil trisulfuro contra la
meningitis criptocócica y ajo en contra Aspergillus. La adición de ajo en algunas
mezclas inhibe el crecimiento de hongos, como Aspergillus niger, C. albicans y
Paracoccidiodes. Esto da lugar a la inhibición a concentraciones menores que la
experimentada con la alicina. Los estudios realizados con extracto de ajo envejecido
(sin alicina o componentes derivados alicina) no mostraron actividad in vitro.(13)

DISCUSIÓN

El uso que se le ha dado indiscriminadamente de los antibióticos ha generado un

gran desarrollo de resistencia bacteriana y con la finalidad de hallar nuevas
alternativas se presta más atención al estudio del ajo (14)

Bueno desde épocas antiguas el estudio de los beneficios del ajo es inmenso,
investigaciones aseveran que sus componentes químicos presentan actividad
biológica asociada con la prevención del cáncer, padecimientos cardiovasculares,
efectos hipoglucemiantes, antioxidantes y antimicrobianos.(15)

El contenido de alicina, metabolito secundario mejor conocido del Allium sativum

resultó ser 1,31 mg/mL de extracto, expresado en ajo fresco pelado corresponde a
2,8 mg alicina/g. Este resultado se encuentra dentro de lo reportado por la literatura:
2,5 a 4,5 mg/g de peso fresco. Resultados reportados por Eagling y Sterling 13,
sobre ajo australiano, muestran valores de alicina entre 7 y 9 mg/g de ajo fresco,
determinados por HPLC, mencionan que son los de mayor contenido a nivel mundial
pues otros estudios dan resultados desde 1,7 mg/g de peso fresco. Estos autores
hacen notar que los mayores niveles de alicina se producen en regiones con climas
cálidos, secos y con suelos de alto pH, debido a que en estas condiciones se
favorece la captación de sulfato, además de las condiciones de
almacenamiento. (16)
BILBLIOGRAFIA

1.- Dr. Aherne SA y Dr. O'Brien NM. Dietary flavonols: chemistry, food content, and
metabolism. Nutrition. 09 - 30 – 2002 (1)

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propiedades farmacológicas y terapéuticas. Medicentro 2004(2).

Disponible en:

http://www.medicentro.sld.cu/index.php/medicentro/article/viewFile/1084/1093

3.- Dr. FLORES A. “Anales Farmacia y Bioquímica de la universidad Mayor De

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4.- Dr. Paredes R. Actividad Antifúngica del Allium Sativum L. en cobayos. (Tesis)
Arequipa: Universidad de San Agustín; 2004

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Antimicrob Agentsand Chemoter. 2004 pág. 743-617

6.- Dr. Mercado S., Efecto Antibacteriano del Ajo (Allium Sativum L.) en la
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salival aerobia, estudio in vitro. (Tesis) Arequipa: Univ. Católica de Santa María;
2005

7.-Revista Científica Ciencia Médica-versión impresa ISSN 2077-3323, Rev Cient

Cienc Méd v.17. Cochabamba, Función Antimicrobiana de la Alicina de Ajo en
cultivos de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y Escherichia
coli, 2014

8.-Salud y Administración Volumen 3 Número 8 Artículos de revisión. 39 – 47

Efectos Terapéuticos del Ajo (Allium Sativum). Mayo-Agosto 2016

9.- Dr. Ibraín Enrique Corrales Reyes, Dr. Juan José Reyes Pérez “Dr. Efraín
Benítez Popa”. 2 Doctor en Ciencias. Tutor de la investigación. “Dr. Efraín
Benítez Popa”. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y ANTIFÚNGICA DE ALLIUM
SATIVUM EN ESTOMATOLOGÍA, 2010
10.- Lock O, Cabello I, Doroteo V. Análisis de flavonoides en plantas. 2006.
Disponible en:

http://old. iupac.org/publications/cd/medicinal_chem istry/Practica-VI-6.pdf

11.- Dr. Sánchez Aguilar M. A. Efecto inhibitorio de allium cepa y alliumsativum

sobre cepas de escherichiacoli y salmonella enteritidis. Universidad de Vera
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Disponible en:

http://cdigital.uv.mx/bitstream/123456789/32118/1/sanchezaguilarmariaantonia
.pdf.

12. Dr. Trujillo H. A, Rodríguez Viera R, Hernández López A. Ajo: consideraciones

sobre sus propiedades farmacológicas y terapéuticas. 7 de Mayo del 2013. ()

Disponible en:

http://www.medicentro.sld.cu/index.php/medicentro/article/viewFile/1084/1093.

13.- Dr. Ibraín Enrique Corrales Reyes, Dr. C. Juan José Reyes Pérez.
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y ANTIFÚNGICA DE ALLIUM SATIVUM EN
ESTOMATOLOGÍA, Antioquia, 8 abril 2007

14.- Dr. Efraín Benítez Popa. Multimed. Revista Médica. Pag 6. 19 enero-marzo
2015

Disponible en:

https://www.medigraphic.com/pdfs/multimed/mul-2015/mul151o.pdf
15.- Dr. Silvia Suárez Cunza1; Américo Castro Luna2; Neptalí Ale Borja3 Soc.
Quím Actividad antioxidante in vitro de un extracto acuoso de Allium Sativum
variedad Huaralino; vol.80. Oct – dic 2014

Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1810634X201400
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16.- Dr. José bravo. Borie Martin. Evaluación de la resistencia antimicrobiana en el

ganado bobino en chile utilizando E.coli como bacteria indicadora. Chile 2005

17.- Dr. Gonzales flores observaciones al microscopio electrónico de barrido de la

acción del extracto acuoso del alium sativa sobre staphilococcus aureus. 2014

18.- Dr. Gundidza m. antimicrobial actividad de esencia de schinus molle; centro

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19.- Dr. Hernández canales Ávila, etnobotánica actividad antibacterial en plantas

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20.- Dr. Álvarez m. Izaza Chavarri. Efecto antibacteriano invitro austocupatorium

inulaefolium (salvia amarga) y ludbuigia (clavo de la guana) biosalud. 2008

21.- Ávila Vaquerom, E. murillo. Actividad antibacteriana de diplostep hium

tolimense cuatrec (asteráceae) frente a staphilococcus aureus vitae. 2015

22.- Dr. Juan Carlos Moya Mamani. Función Antimicrobiana de la Alicina de Ajo en
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Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1817-
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23.- José Pedro López Pérez. Observación de la actividad antimicrobiana del ajo
(Allium sativum) en el laboratorio de Educación Secundaria. febrero de 2010

Dispobible en:

file:///C:/Users/LENOVO/Downloads/2743-Texto%20del%20art%C3%ADculo-
10193-1-10-20161205.pdf

24.- TATIANA PAVA ÁNGEL. ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE EXTRACTOS

DE Allium sativum Y Zingiber officinale SOBRE MICROORGANISMOS DE
IMPORTANCIA EN PATOLOGÍAS INFECCIOSAS DE CAVIDAD ORAL.
Bogota 2016

Disponible en
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/20405/PavaAngelT
atiana2016.pdf?sequence=1

25.- García Rico RO. 2007 Evaluación de la inhibición del crecimiento de cinco
cepas bacterianas patógenas por extractos de cinco cepas bacterianas
patógenas por extractos acuosas de Allium sativum, Allium fistulosum, Allium
cepa: estudio preliminar in vitro

26.- Dr. Adeshina GO. Antibacterial activity of fresh juices of Allium cepa and
Zingiber officinale against multidrug resistant bacteria. International Journal of
Pharma and Bio Sciences. 2011
ANEXO
La liofilización es un proceso que tiene como objetivo separar el agua (u otro solvente) de
una disolución mediante congelación y posterior sublimación del hielo a presión reducida.

Liofilizadora preparado de agar sabouraud

Diluir el agar en el mechero poner en el autoclave

Flamear la boca del matraz para el sembrado poner en las placas petri

No alejarse mucho del mechero sembrado de las cepas

Rotulado Agares preparados debidamente

Con su tampón