UNIVERSIDAD NACIONAL

“SANTIAGO ANTUNEZ DE MAYOLO”

FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE

ESCUELA PROFESIONAL INGENIERÍA SANITARIA
INFORME DE LABORATORIO N0 12
DETERMINACION DE DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXIGENO (DBO5),
DIRECTO Y POR DILUCIÓN
CURSO: ANÁLISIS DE AGUAS Y AGUAS RESIDUALES
DOCENTE: POMA VILLAFUERTE CARLOS
INTEGRANTES:
Depaz Barrionuevo Ana María
Guerrero Crispin Alex Timoteo
Aquino Chávez Yulisa

FECHA REALIZACION: 18-07-18

FECHA ENTREGA: 25-07-18

HUARAZ_2018_PERU

1
CONTENIDO Pag.
INTRODUCCION .......................................................................................................... 3
OBJETIVOS ................................................................................................................... 3
Objetivos generales: .................................................................................................... 3
Objetivos específicos: .................................................................................................. 3
MARCO TEÓRICO ....................................................................................................... 4
1. DBO5 ..................................................................................................................... 4
MATERIALES, EQUIPOS Y MUESTRA .................................................................. 7
PROCEDIMIENTO ....................................................................................................... 8
CALCULOS: ............................................................................................................. 10
RESULTADOS: ........................................................................................................ 10
ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS ....................................................... 11
CONCLUSIONES ........................................................................................................ 11
BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................... 12

2
 INTRODUCCION

La oxidación microbiana o mineralización de la materia orgánica es una de las principales

reacciones que ocurren en los cuerpos naturales de agua y constituye una de las demandas
de oxígeno, ejercida por los microorganismos heterotróficos, que hay que cuantificar.
Uno de los ensayos más importantes para determinar la concentración de la materia
orgánica de aguas residuales es el ensayo de DBO a cinco días. Esencialmente, la DBO
es una medida de la cantidad de oxigeno utilizado por los microorganismos en la
estabilización de la materia orgánica biodegradable, en condiciones aeróbicas, en un
periodo de cinco días a 20 °C. En aguas residuales domésticas, el valor de la DBO a cinco
días representa en promedio un 65 a 70% del total de la materia orgánica oxidable. La
DBO, como todo ensayo biológico, requiere cuidado especial en su realización, así como
conocimiento de las características esenciales que deben cumplirse, con el fin de obtener
valores representativos confiables. El ensayo supone la medida de la cantidad de oxigeno
consumido por organismos vivos en la utilización de la materia orgánica presente en un
residuo; por tanto, es necesario garantizar que durante todo el periodo de ensayo exista
suficiente oxígeno disuelto para ser utilizado por los organismos. Además, debe
garantizarse que se suministran las condiciones ambientales adecuadas para el desarrollo
y trabajo de los microorganismos, así que hay que proporcionar los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacterial, tales como N y P y eliminar cualquier sustancia toxica de la
muestra. Es también necesario que exista una población de organismos suficiente en
cantidad y en variedad de especies, llamada “Cepa” o “semilla”, durante la realización
del ensayo, para la degradación de la materia orgánica.
El método se aplica en este laboratorio para la matriz aguas naturales superficiales y
residuales industriales (HIDROLOGIA, 2007).
Esta práctica de Laboratorio se aplicó el método de incubación para una muestra del
agua de Rio Santa.

OBJETIVOS
Objetivos generales:
 Determinar de demanda bioquímica de oxigeno (DBO5), directo y por dilución
en la muestra de agua del Rio Santa.

Objetivos específicos:
 Determinar la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 3° dilución de la
muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días.
 Determinar la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 4° dilución de la
muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días.
 Determinar la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 5° dilución de la
muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días.

3
 MARCO TEÓRICO

1. DBO5

La demanda bioquímica de oxigeno se usa como medida de la cantidad de oxígeno

requerida para la oxidación de la materia orgánica biodegradable presente en la muestra de
agua y como resultado de la acción de oxidación bioquímica aerobia. La demanda de
oxígeno de las aguas residuales es resultado de 3 tipos de materiales.
Materiales orgánicos carbónicos, utilizables como fuente de alimentación por organismos
aeróbicos.
Nitrógeno oxidable, derivado de la presencia de nitritos, amoniaco, y en general
compuestos orgánicos nitrogenados que sirven como alimentación para bacterias
específicas.
Compuestos químicos reductores (iones ferroso, sulfitos sulfures) que se oxidan por
oxígeno disuelto.
Se utiliza el procedimiento de bioensayos que consiste en medir el oxígeno consumido por
los organismos vivos (Principalmente bacterias), al itilfear como alimento la materia
orgánica presente en el desecho, bajo condiciones aerobias y favorables en cuanto a

La reacción bioquímica:
Materia Orgánica + O2 + Nutrientes + Bacterias -> Nuevas células + CO2 + H20 +
Residuos no biodegradables es una representación general de todas las complejas
reacciones bioquímicas que se suceden en un cuerpo de agua.
Se requiere, estequiométricamente, que la cantidad de oxígeno iirilbarip en cualquier punto
del proceso sea proporcional a la cantidad total de materia orgánica que ha sufrido
transformación, o igualmente proporcional al grado de desarrollo al que ha llegado la
reacción en ese punto del proceso.
Se ha encontrado, por experiencia que un porcentaje razonablemente grande de la RBO5
total 9e logra en 5 días, aproximadamente 70 - 80% en aguas residuales domésticas y
muchas industriales, por consiguiente el periodo de 5 días se ha aceptado como patrón; el
porcentaje exacto depende del carácter del inoculo y de la naturaleza de la materia orgánica,
que puede ser determinada sólo experimentalmente (GOMEZ, 1995).

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 Curva característica de RBOS por oxidación de la materia orgánica

Los resultados dependen mucho de las condiciones:

La temperatura es uno de los factores más importantes en un sistema biológico. Los cambios
de temperatura producirán un aumento o reducción de velocidad de reacción. La temperatura
generalmente utilizada es de 20°C que es la temperatura media de los cuerpos de aguas
naturales.
PH: 1.os organismos responsables de la degradación de la materia orgánica generalmente
ejercen su acción dentro de un ámbito muy pequeño de pH, el cual está alrededor de 6,5 y
8,3.
La siguiente figura muestra la variación del porcentaje de RBO5 óptimo con respecto al pH.

Variación de la DBO5 con respecto al pH

Nutrientes: Las bacterias requieren de nutrientes orgánicos e inorgánico para su

metabolismo.
El Nitrógeno y el fosforo son los iras importantes (GOMEZ, 1995).

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Población Bacteriana: La alimentación de la siembra es probablemente el aspecto que
mayormente se olvida. La mayor parte de los desechos industriales no cuentan con
organismos perfectamente alimentados y mucho menos el agua de dilución que se utiliza.
Toxicidad: Son muchos los compuestos tóxicos a los microorganismos. Concentraciones
altas de estos compuestos pueden matar la población microbiana o reducirla
considerablemente.

El método consiste en la incubación de las muestras en botellas herméticamente cerradas, para

evitar la entrada de aire bajo condiciones específicas en un tiempo determinado. Se mide el
OD. Inicial y después de la incubación. La RBO5 se calcula como la diferencia entra el OD.
Inicial y final.
Muchas aguas residuales contienen más material demandante de oxígeno que el OD.
disponible es necesario diluir la muestra antes de la incubación para conducir la demanda y
suministrar un balance apropiado, además de incorporar los nutrientes y amortiguar el pH de
la muestra incubada para que permanezca en el rango apropiado para el crecimiento bacterial.
Las mediciones de RBO5 que incluyen las demandas de oxígeno carbonácea y nitrogenácea
generalmente no son usuales, por esto, donde sea necesario se usa un inhibidor químico para
prevenir la oxidación del amoniaco. Así se puede medir separadamente ambas demandas.
La extensión de la oxidación de los compuestos nitrogenados durante el periodo de
incubación de 5 días depende de la presencia de microorganismos capaces de efectuar dicha
oxidación.
Tales organismos generalmente no están presentes en los desechos crudos o efluentes
primarios; para oxidar cantidades significativas de las formas reducidas del nitrógeno en la
prueba de RBO5, corrientemente, muchos efluentes de plantas de tratamiento biológicas
contienen un número significativo de organismos nitrificantes, pudiendo ocurrir en tales
muestras la oxidación de compuestos nitrogenados; entonces se recomienda inhibir la
nitrificación para muestras de, o inoculadas con efluentes secundarios y para muestras de
agua contaminada.

Muestreo y almacenamiento
Se debe analizar la muestra inmediatamente o enfriándola hasta una temperatura próxima a
la congelación durante el almacenamiento. Sin embargo se debe reducir al mínimo el tiempo
de almacenamiento y llevar la muestra a 20°C antes del análisis.
Muestras Simples: Si va a almacenar la muestra consérvela a 4°C hasta 6 horas. En ningún
caso efectúe el análisis después de 24 horas.
Muestras Mixtas: Conserve la muestra a 4°C durante la mezcla, limite al periodo de mezcla
a 24 horas y una vez tenga la muestra compuesta, deben tener las mismas consideraciones
de almacenamiento que para la muestra simple.

Blanco de agua de dilución.

Utilice un blanco de agua de dilución como control aproximativo de la calidad del agua de
dilución no inoculada y de la limpieza de las botellas de incubación. Conjuntamente con cada
grupo de muestra, solamente incube una botella con agua de dilución no inoculada.

6
 Determine el OD. Inicial, incube a 20° por 5 días y al cabo de este tiempo, determine el OD.
final. El OD. consumido durante los 5 días no debe ser mayor de 0,2 mg. /l. y preferiblemente
no mayor de 0,1 mg. /l.

FORMULAS PARA LOS CALCULOS

Cuando el agua de dilución no es inoculada

(𝑂𝐷𝑖 − 𝑂𝐷𝑓) − (𝐵𝑖 − 𝐵𝑓) × (1 − 𝑓)

𝐷𝐵𝑂5 𝑚𝑔/𝐿 =
𝑓

2 Cuando el agua de dilución fue inoculada:

𝑉𝑂𝐿𝑈𝑀𝐸𝑁 𝐼𝑁𝐼𝐶𝑈𝐿𝐴𝐷𝑂
𝑓=
𝑉𝑂𝐿𝑈𝑀𝐸𝑁 𝐷𝐸 𝑊𝐼𝑁𝐾𝐿𝐸𝑅

DI: OD. inicial de la muestra diluida en mg/1

mg
D2: OD. Final de la muestra diluida enúig/1
B1 OD. inicial del control del inoculo mg/1
B2: OD. final del control del inoculo
F: Fracción decimal de muestra usada (GOMEZ, 1995).

MATERIALES, EQUIPOS Y MUESTRA

 Materiales:
 Matraz Erlenmeyer-250ml.
 Probeta 2000 ml.
 Pipetas
 Envases WINKLER
 Muestra y reactivos:
 Muestra Agua del Río  FeCl3
Santa.  KH2PO4
 MnSO4.7H2O  NH4Cl2
 CaCl2
 Equipos:
 Oxometro
 Estufa.

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 PROCEDIMIENTO

DETERINACION DE LA DEMANDA BIOQUÍMICA DEL OXÍGENO

a) Preparación del agua de dilución, por lo cual medimos 6 L de agua destilada y
agregamos 6 mililitros de las soluciones: Solución tampón fosfato, solución de
cloruro férrico (FeCl36H2O), solución de cloruro de calcio (CaCl2), solución de
sulfato de magnesio (MgSO47H2O).

MEDIMOS 6L DE AGU DESTILADA CON LA AYUDA E UNA

PROBETA.

AGREGAMOS 6 MILILITROS DE LAS SOLUCIONES: SOLUCIÓN TAMPÓN FOSFATO,

SOLUCIÓN DE CLORURO FÉRRICO (FECL36H2O), SOLUCIÓN DE CLORURO DE CALCIO
(CACL2), SOLUCIÓN DE SULFATO DE MAGNESIO (MGSO47H2O).

b) Se procedió a saturar la dilución, por lo cual se empezó airear con la ayuda de un

recipiente.

SATURAMOS LA DILUCIÓN CON LA AYUDA DE UN RECIPIENTE

c) Se tomó 5 frascos Winkler y se enumeró del 1 al 5: en los dos primeros frascos
Winkler se llenó con la dilución (blanco), en el frasco número 3 se llenó 8 ml de
la muestra de agua del río Santa, en el frasco número 4 se llenó 12ml de la muestra
de agua del río Santa, en el frasco número 5 se llenó 16ml de la muestra de agua
del río Santa, y se procedió a llenar estos tres últimos frascos con el agua de
dilución.

EN LOS DOS PRIMEROS FRASCOS WINKLER SE LLENÓ CON LA DILUCIÓN

PREPARADA Y EN OS TRES ULTIMOS FRASCOS PRIMERO SE LLENO CON LA
MUESTRA DEL RÍO SANTA Y SE COMPLETO CON LA DILUCIÓN PREPARADA.

d) Procedimos a medir el oxígeno disuelto inicial con la ayuda de un multiparametro.

MEDIMOS EL OXÍGENO DISUELTO INICIAL DE LOS 5 FRASCOS

CON EL MULTIPARAMETRO

e) Finalmente se procedió a incubar durante 5 días a 20°C, transcurrido esos días

medimos el oxígeno disuelto final.

DESPUES DE 5 DIAS MEDIMOS EL OXÍGENO DISUELTO FINAL

DE LOS 4 FRASCOS CON EL MULTIPARAMETRO

9
 CALCULOS:

 BLANCO
1°=5.27 mg/l INICIALES
2°=4.65 mg/l
2°=3.73 mg/l FINAL
 DILUCIÓN

 3°DILUCIÓN:

𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 8𝑚𝑙
𝑚𝑔 8𝑚𝑙
𝑂𝐷𝑖 = 4.86 𝑓 = 300𝑚𝑙 = 0.027
𝑙
𝑚𝑔
𝑂𝐷𝑓 = 3.50
𝑙
(4.86 − 3.50) − (4.65 − 3.73) × (1 − 0.027) 𝑚𝑔
𝐷𝐵𝑂5 = = 17.22
0.027 𝑙
 4°DILUCIÓN:

𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 12𝑚𝑙
𝑚𝑔 12𝑚𝑙
𝑂𝐷𝑖 = 5.38 𝑓 = 300𝑚𝑙 = 0.04
𝑙
𝑚𝑔
𝑂𝐷𝑓 = 3.84
𝑙
(5.38 − 3.84) − (4.65 − 3.73) × (1 − 0.04) 𝑚𝑔
𝐷𝐵𝑂5 = = 16.42
0.04 𝑙
 5°DILUCIÓN:

𝑉𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 = 16𝑚𝑙
𝑚𝑔 16𝑚𝑙
𝑂𝐷𝑖0 = 6.55 𝑓 = 300𝑚𝑙 = 0.053
𝑙
𝑚𝑔
𝑂𝐷𝑓 = 3.7
𝑙
(6.55 − 3.7) − (4.65 − 3.73) × (1 − 0.053) 𝑚𝑔
𝐷𝐵𝑂5 = = 37.34
0.053 𝑙

RESULTADOS:

Muestra DILUCIONES DBO5

3° 17.22 mg/L.
Agua del Rio Santa 4° 16.42 mg/L.
5° 37.34 mg/L.

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 ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS

 En el análisis para la determinación de DBO5 se obtuvo 17.22mg/L, lo cual indica

en la 3° dilución, los microrganismos durante el tiempo de cinco días han
consumido una cierta cantidad de oxígenos y como diferencia solo han dejado el
valor obtenido.
 En el análisis para la determinación de DBO5 se obtuvo 16.42mg/L, lo cual indica
en la 4° dilución, los microrganismos durante el tiempo de cinco días han
consumido una cierta cantidad de oxígenos y como diferencia solo han dejado el
valor obtenido.
 En el análisis para la determinación de DBO5 se obtuvo 37.34mg/L, lo cual indica
en la 4° dilución, los microrganismos durante el tiempo de cinco días han
consumido una cierta cantidad de oxígenos y como diferencia solo han dejado el
valor obtenido.

CONCLUSIONES

 En conclusión se determinó la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5), directo

y por dilución de la muestra de agua del Rio Santa.

 Se determinó la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 3° dilución de la

muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días obteniendo
17.22mg/L.

 Se calculó la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 4° dilución de la

muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días obteniendo
16.42 mg/L.

 Se determinó la demanda bioquímica de oxigeno (DBO5) en la 5° dilución de la

muestra de agua del Rio Santa después de incubación por cinco días obteniendo
37.34 mg/L

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 BIBLIOGRAFÍA
 APHA-AWWA-WPCF. (1992). METODOS NORMALIZDOS PARA
ANALISIS DE AGUAS Y AGUAS RESIDUALES. MADRID(ESPAÑA),
EDITORIAL: DIAZ DE SANTOS S.A. Pag: 5-2 hasta 5-4. hora:
10:30pm
 GOMEZ, G. I. (1995). MANUAL DE ANALISIS DE AGUA. Obtenido de
http://bdigital.unal.edu.co/50540/1/manualdeanalisisdeaguas.pdf.pag:
141-150. hora: 9:30pm.
 HIDROLOGIA, S. D. (4 de 6 de 2007). DEMANDA BIOQUIMICA DE
OXIGENO-5 DIAS. INCUBACION Y ELECTROMETRIA. Obtenido de
http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38155/Demanda+Bioqu%C
3%ADmica+de+Ox%C3%ADgeno..pdf/ca6e1594-4217-4aa3-9627-
d60e5c077dfa.

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