Tesis Doctorado - Segundo Saavedra Suarez PDF

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
INFORME DE TESIS PARA OPTAR EL GRADO DE DOCTOR EN

FARMACIA Y BIOQUIMICA
“SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS DE

POTENCIAL ACTIVIDAD CITOSTÁTICA EN LAS CÉLULAS
MERISTEMÁTICAS DE Allium cepa L A PARTIR DE
DERIVADOS DE AMINOPIRAZOLES”
AUTOR: M.Sc. SEGUNDO FRANCISCO SAAVEDRA SUAREZ
ASESOR: Dr. JESUS GUILLERMO GALLARDO MELENDEZ
TRUJILLO-PERÚ
2014
i
DEDICATORIA
A MIS PADRES
A MI PADRE QUE SE ENCUENTRAN CON NUESTRO SEÑOR JESUCRISTO, A MI

MADRE, POR SER LA PERSONA A QUIEN ADMIRO, POR SU INMENSO SACRIFICIO EN
TODOS ESTOS AÑOS, POR SER EL MOTIVO QUE ME IMPULSO A SEGUIR ADELANTE Y
NO AMILANARME FRENTE A CUALQUIER ADVERSIDAD.
A MI ESPOSA ELOISA:
POR TU SONRISA QUE CALMA MI CANSANCIO, POR TUS ABRAZOS QUE ME
CONSUELAN CUANDO SIENTO QUE TODO VA MAL, ERES LA MEJOR ESPOSA QUE
HAY.
A MIS HIJOS: ALESSANDRO, PIERO, FABIANO Y GERALDINE

GRACIAS DIOS POR DARME UNA FAMILIA, LA RAZÓN DE MI VIDA, DE SEGUIR
ADELANTE Y LUCHAR POR CONSEGUIR MÁS.
A MIS HERMANOS
UN AGRADECIMIENTO ACADA UNO DE USTEDES POR EL APOYO INCONDICIONAL.
i
AGRADECIMIENTO
UN AGRADECIMIENTOA TODOS LOS DOCENTES Y AMIGOS

ADMINISTRATIVOS DE MI ALMA MATER FARMACIA Y
BIOQUIMICA.
A USTEDES DOCENTES QUE FUERON MIS MAESTROS POR SU

EXIGENCIA Y ELEVADO NIVEL ACADEMICO QUE BRINDARON
DURANTE MI FORMACIÓN PROFESIONAL.
ii
INDICE
Pág.
DEDICATORIA i
AGRADECIMIENTO ii
ÍNDICE GENERAL iii
RESUMEN iv
ABSTRAC v
1. INTRODUCCIÓN 1
2. MATERIAL Y METODO 8
2.1. MATERIALES 8
2.1.1. Material Químico 8
2.1.2. Material Biológico 8
2.1.3 Material de Laboratorio 8
2.2. MÉTODOS 9
2.2.1. Síntesis del 5-amino-1-fenil-3-metil-pirazol 9
2.2.2. Síntesis de 1-fenil-3,6-dimetil-pirazol [3,4-b] piridin-4-ona 10
2.2.3. Síntesis de 1-fenil-3-metil-5-(p-dimetilaminobenciliden-amino)-pirazol 11
2.2.4. Síntesis de 1-fenil-3,4,6-trimetil-pirazolo[3,4-b]-piridina 11
2.2.5. Ensayo citostático en raicillas de Allium cepa l. 12
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 17
4. CONCLUCIONES 37
5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 38
ANEXOS 43
iii
RESUMEN
El objetivo del presente trabajo fue investigar la síntesis de nuevos

compuestos heterocíclicos a partir del 5-amino-1-fenil-3-metil-pirazol con
acetoacetato de etilo, p-dimetilaminobenzaldehido y acetilacetona, en
proporciones de 1:1 y 2:1 para determinar el efecto citostático de los nuevos
compuestos heterocíclicos en las raicillas de células meristemáticas de
Allium cepa L. Producto de la síntesis se obtuvieron los siguientes
compuestos 1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo [3,4-b]-piridin-4- ona, 1-fenil-3-metil-
5-(p-dimetilamino-bencilidenamino)- pirazol, 1-fenil-3, 4,6-trimetil- pirazolo
[3,4-b]-piridina. Para determinar el efecto citostático se realizaron ensayos
en raicillas de Allium cepa L (cebolla). A cada unidad experimental se le
asignaron un volumen de 200 ml al 0,1%del heterocíclico obtenidos
respectivamente. Se comparó con un grupo testigo. Los compuestos 1-fenil-
3,6-dimetil-pirazolo [3,4-b]-piridin-4- ona y el 1-fenil-3, 4,6-trimetil- pirazolo
[3,4-b]-piridina no presentaron acción citostática frente a las células
meristemáticas de Allium cepa L. (Cebolla). El compuesto 1-fenil-3-metil-5-
(p-dimetilamino-bencilidenamino)- pirazol, si presentó acción citostática.
PALABRAS CLAVES: Citostático, Heterocíclico y Aminopirazol.
iv
ABSTRACT
The aim of this study was to investigate the synthesis of new heterocyclic
compounds from 5-amino-1-phenyl-3-methyl-pyrazole with ethyl
acetoacetate, acetylacetone and p-dimethylaminobenzaldehyde in ratios of 1:
1 and 2: 1 to determine the cytostatic effect of new heterocyclic compounds
rootlets meristem cells of Allium cepa L. Product of the synthesis the
following compounds obtained 1-phenyl-3,6-dimethyl-pyrazolo [3,4-b]
pyridin-4-one, 1-phenyl-3-methyl-5- (p-dimethylamino-benzylideneamino ) -
pyrazole, 1-phenyl-3, 4,6-trimethyl-pyrazolo [3,4-b] pyridine. To determine the
cytostatic effect tests were carried out in rootlets of Allium cepa L (onion). A
each experimental unit was assigned a volume of 200 ml to 0.1% of
heterocyclic obtained respectively. It was compared to a control group. The
1-phenyl-3,6-dimethyl-pyrazolo compounds [3,4-b] pyridin-4-one and 1-
phenyl-3, 4,6-trimethyl-pyrazolo [3,4-b] pyridine showed no action cytostatic
against the meristematic cells of Allium cepa L. (onion). The compound 1-
phenyl-3-methyl-5- (p-dimethylamino-benzylideneamino) - pyrazole, if
presented action cytostatic.
KEYWORDS: Cytostatic, Heterocyclic and Aminopyrazole.
v
1. INTRODUCCION
El cáncer, es un crecimiento tisular producido por la proliferación continua de

células anormales con capacidad de invasión y destrucción de otros tejidos.
Puede originarse a partir de cualquier tipo de célula en cualquier tejido

corporal, no es una enfermedad única sino un conjunto de enfermedades
que se clasifican en función del tejido y célula de origen. Existen varios
cientos de formas distintas, siendo tres los principales subtipos: los
sarcomas proceden del tejido conectivo como huesos, cartílagos, nervios,
vasos sanguíneos, músculos y tejido adiposo. (Goodman & Gilman, 1998)
(Alba, 2009)
Los carcinomas proceden de tejidos epiteliales como la piel o los epitelios

que tapizan las cavidades y órganos corporales, y de los tejidos glandulares
de la mama y próstata. Los carcinomas incluyen algunos de los cánceres
más frecuentes. (Thomas, 2009)
Los carcinomas de estructura similar a la piel se denominan carcinomas de

células escamosas. Los que tienen una estructura glandular se denominan
adenocarcinomas.
En el tercer subtipo se encuentran las leucemias y los linfomas, que incluyen

los cánceres de los tejidos formadores de las células sanguíneas. Producen
inflamación de los ganglios linfáticos, invasión del bazo y médula ósea, y
sobreproducción de células blancas inmaduras. El cáncer no es una
enfermedad contagiosa. (Goodman & Gilman, 1998)
Todos los tumores, benignos y malignos, tienen dos componentes básicos

en su estructura: Las células neoplásicas proliferantes que constituyen el
parénquima, Su estroma de sostén, constituido por tejido conectivo y vasos
sanguíneos. (Victor, Alok, y Deodutta, 2011)
El cáncer es la segunda causa principal de muerte detrás de las

enfermedades cardíacas. Sin embargo, las muertes por enfermedades
cardiovasculares están disminuyendo, mientras que las muertes por cáncer
1
están aumentando. Se estima que a lo largo del siglo XXI, el cáncer sea la
primera causa de muerte en los países desarrollados. A pesar de esto, se ha
producido un aumento en la supervivencia de los pacientes con cáncer.
(Goodman & Gilman ,1998) (Yiqun, Shuang, y Xiang , 2013)
Los citostáticos son fármacos capaces de inhibir el crecimiento desordenado

de células, alteran la división celular y destruyen las células que se
multiplican rápidamente. El efecto citotóxico no se limita solo a las células
malignas sino que ejercen también su acción sobre los tejidos de
proliferación rápida, como piel, mucosas, médula ósea, intestino, y otros.
(Avendaño, 2004) (Romina, Liborio, y Saverio, 2013).
Según sus efectos farmacológicos, pueden ser: agentes alquilantes,

antimetabolitos, antibióticos antitumorales, alcaloides de la vinca (vincristina,
vinblastina, etopósido, y vindesina). Agentes varios (platino: cisplatino,
carbo- platino, asparagina). (Chung, Guangxun, Zhihong, Fei, Amber, y
Jihyeung, 2013).
Los citostáticos tienen un gran peligro toxicológico, que puede afectar al

manipulador, al paciente y al medio, ya que están diseñados para originar la
muerte celular, sin diferenciar entre células sanas y cancerosas. (Falk,
Sorsa, y Vainio, 1981) (Hemminki, Kyyronen, y Lindohm, 1985) (Nguyen,
Theiss, y Matney, 1982) (Davis, Jackson, y Kirsa, 1997) (Connor,
Anderson, Sessink, Broad- field, y Power, 1999)
La mayoría de citostáticos han demostrado propiedades mutagénicas,

carcinogénicas, teratogénicas, y embriotóxicas en modelos animales. Su
toxicidad afecta sobre todo a tejidos y órganos con alta capacidad de
proliferación, como son piel, mucosas, tejido hematopoyético, gónadas.( Bu
Ba , 1998)( Wilson ,y Solimando ,1981) (Valanis , Vollmer , Labuhn,y
Glass, 1997)( Valanis , Vollmer ,y Steele ,1999)
Los compuestos heterocíclicos constituyen una importante familia dentro de

la Química Orgánica, debido fundamentalmente a su carácter bioactivo (en
muchos casos) y a la posibilidad de que sean utilizados en reemplazo de
algunos grupos funcionales por ser isostéricos de los mismos. Estas
características los hacen aplicables en numerosas industrias (farmacéutica,
2
agroquímica, plásticos, entre otras. (Síntesis de fármacos con estructura
heterocíclica, Consulta: 23 de marzo 2014) (Rivera, Maldonado, Núñez, y
Joseph-Nathan, 2004)
Un compuesto heterocíclico es una sustancia que contiene un anillo formado

por más de un tipo de átomo diferente al carbono. Existen compuestos
monocíclicos, bicíclicos y mayores, todos ellos con gran interés para los
químicos y bioquímicos. (Rivera, Navarro, y Ríos-Motta, 2008) (Chiroque,
2002)
Dentro de la amplia variedad de compuestos heterocíclicos se

encuentran los pirazolos, sustancias que en los últimos años han
despertado el interés de investigadores en síntesis y farmacología debido
al descubrimiento de propiedades que las podrían hacer útiles en el
tratamiento de afecciones del sistema nervioso central, dando origen a una
gran cantidad de publicaciones y patentes. Entre las aplicaciones
reportadas por los investigadores figuran como las más interesantes, el
tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson,
la depresión, la esquizofrenia y la bulimia, entre otras.( Insuasty , Estrada
, Cortés , Quiroga , Insuasty , Abonía , Nogueras ,y Cobo , 2006) (He ,
Gilligan , Zaczek , Fitzgerald , McElroy , Shen , Saye , Kalin , Shelton ,
Christ , Trainor ,y Hartig, 2000 )
También es importante mencionar otro tipo de enfermedades relacionadas

con el sistema nervioso central tales como la depresión o la ansiedad,
enfermedades que en sus casos pueden incapacitar a una persona,
perjudicando su vida personal y laboral. La búsqueda de nuevos fármacos
ansiolíticos o antidepresivos es importante ya que se espera que los casos
de depresión y ansiedad aumenten a medida que las poblaciones
humanas vayan asumiendo cada vez más un estilo de vida urbano.
(Gilligan, He, y Clark, 2009) (MacArthur, y Borsini, 2006) (Yaryura-Tobias,

Neziroglu, Pérez, y Bord, 2002) (Blandini ,2005)
El método más común de síntesis de esta ceto-amina consiste en la reacción

de la fenilhidrazina con monoimido malonato de dietilo en presencia de
3
metóxido de sodio. El monoimido malonato de dietilo se obtiene a partir del
cianoacetato de etilo por alcoholes con HCl anhidro. (Alva, 2002)(Ruíz, 2002)
(Insuasty et al, 2006)
Otro método ha sido reportado por Hyatt, quien en 1983 informó la obtención
de la 3-amino-1-fenil-2-pirazolin-5-ona y otras aminopirazolonas, haciendo
reaccionar el 3-nitro-propanoato de etilo( EtO2CCH2CH2NO2 )con diferentes
cloruros de fenildiazonio en medio básico .En la primera etapa se forman las
correspondientes β-nitro-hidrazonas, que son convertidas en 2- pirazolinas
mediante hidrogenación catalítica, probablemente vía ciclación de las
amidrazonas intermedias, producidas in situ. (Chiroque, 2002) (Ruíz, 2002)
El 5-amino -1- fenil -3-metil pirazol es una amina heterocíclico que cristaliza
en formas de agujas blancas y presenta un punto de fusión de 116ºC .Puede
ser destilado a 333ºC a presión atmosférica y a 197ºC a 16 mm Hg de
presión .Es soluble en alcohol, cloroformo y benceno caliente. Se disuelve
ligeramente en agua hirviendo. Es además muy soluble en soluciones ácidas
e insolubles en soluciones alcalinas. (Estudio de la reactividad de ligados
pirazólicos, Consulta: 23 de marzo 2014) (Insuasty et al, 2006)
Esta amina heterocíclica fue obtenida por primera vez por Walter en 1897
mediante tratamiento de la fenilhidrazona con la cianoacetona en ácido
clorhídrico alcohólico a 120ºC .También fue sintetizado por Mohr en 1909 a
partir de la misma hidrazona por calentamiento acuoso diluido, según el
esquema. (Heterociclos, Consulta: 23 de marzo 2014)
4
H2O
3 CH3 - CN + 2 Na CH 3 - C = CH - CN + CH 4 + NaCN
NH 2
- NH 3
CH 3 - C = CH - CN + H2N - NH - Ph CH 3 - C - CH 2 - CN
NH 2 N - NH - Ph
CH 3
CH 3
C=N N NH 2
N
N
NH
Ph
Ph
Posteriormente el mismo Michaelis, y luego Stolz, reportaron la obtención de

esta aminopirazol al calentar un mol de cloruro de 1-fenil-5-cloro-2,3-dimetil-
pirazol con dos moles de carbonato de amonio a 290-300ºC. (Síntesis y
caracterización de nuevos 5-aminopirazoles, Consulta: 23 de marzo 2014).
(Insuasty et al, 2006)

CH 3
CH 3
- H 2O
+ 2(NH )2CO N NH 2
Cl CH 3 N Cl + H2N - 4NH 3
- Ph
N
N
Ph
Ph
Claisen sintetizó este aminopirazol a partir del 5-metil-isoxazol, por ebullición

con fenilhidracina. (Streitwieser, 1992)
CH 3
-H 2O
CH 3 N + H2N - NH - Ph N
NH 2
O N
Ph
5
Sin embargo, a pesar que los 5-aminopirazoles pueden ser considerados
como análogos nitrogenados de las 2-pirazolin-5-ona, su comportamiento
químico es diferente. (Chiroque, 2002) (Ruíz, 2002). (Insuasty et al, 2006)
Un interesante aporte para demostrar la validez del mecanismo propuesto

consiste en realizar una reacción cruzada, utilizando un aminopirazol
sustituido en el anillo aromático por tres átomos de cloro en las posiciones
2,4y 6, lo cual condujo a la formación de productos de substitución, que
fueron identificados mediante cromatografía de capa fina espectrometría de
masas. (Chiroque, 2002) (Alva, 2002). (Insuasty et al, 2006)
La reactividad de la 3-metil-1- fenil -2-pirazolin - 5- ona, guarda relación

estructural tanto con las pirazolonas como con los amino-pirazoles, ya que
en el mismo anillo de pirazol presenta a los grupos carbonilo y amino. Por tal
6
motivo, es de esperarse que su comportamiento químico sea bastante
similar al de estos compuestos. (Alva, 2002) (Ruíz, 2002). (Insuasty et al,
2006)
La alta tasa de mortalidad causada por los diferentes tipos de cáncer y el

elevado costo del tratamiento y de los medicamentos, El propósito del
presente trabajo es realizar la investigación de nuevos fármacos
citostáticos, teniendo como base los compuestos Heterocíclicos derivados
de los Aminopirazoles y contribuir a solucionar éste problema Nacional y
mundial. (Agreda, y Alarcón, 2004) (Lenhard, Lawrence, y Mackenna, 1996)
(Marina, Bowman, Pui, y Crist, 1996)
Todos los antecedentes condujeron a investigar Cuáles son los compuestos

heterocíclicos de potencial actividad citostática en las células meristemáticas
de Allium cepa L a partir de 5-amino-3-metil-1-fenil-pirazol.
Se planteó como hipótesis, que los compuestos heterocíclicos sintetizados

a partir de 5-amino-3-metil-1-fenil-pirazol presentan actividad citostática en
las células meristemáticas de Allium cepa L.
7
2.MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. MATERIALES
2.1.1. MATERIAL QUIMICO
5-amino-3-metil-1-fenil-pirazol - Merck KGa A,Darmstadt,Alemania
2.1.2. MATERIAL BIOLÓGICO

Se utilizaron 15 Kg de bulbos frescos de Allium cepa L. fueron
adquiridos en el Mercado La Hermelinda – Trujillo. La Libertad, en
febrero – marzo del 2010.
2.1.3. MATERIAL DE LABORATORIO.-
2.1.3.1. EQUIPOS:
 Espectrofotómetro -IR Perkin-Elmer,Spectrum one
 Espectrofotómetro -IR SCMITAR SERIES modelo varian 2000 FT-IR.
 Balanza Analítica Digital: Sartorius ± 0,0001g
 Motor para oxigenación
 Equipo para filtración al vacío
 Microscopio HUNO Metzlar
 Cámara fotográfica canon
 Aparato de FISHER JONES para punto de fusión.
2.1.3.2. MATERIAL DE VIDRIO Y OTROS:

Material de uso común de laboratorio
2.1.3.3. REACTIVOS : Grado ACS ( American Chemical Society)

 P-Dimetilaminobenzaldehido
 Hexano, Merck R
 Fenilhidrazina,Sigma
 Éter, Merck R
 Benzaldehído
 Acetonitrilo
8
 Ácido Acético Glacial Merck R
 Acetoacetato de etilo, Merck R
 Etanol Absoluto Merck R
 Orceina BIOMEDICAL ICN
 Ácido clorhídrico Merck R
2.2. MÉTODOS
2.2.1. SÍNTESIS DEL 5-AMINO -1- FENIL-3-METIL-PIRAZOL,

(Chiroque, 2002) (Ruíz, 2002)
H2O
3 CH3 - CN + 2 Na CH 3 - C = CH - CN + CH
CH
4 4
+ NaCN
NH 2
- NH 3
NH 2 N - NH - Ph
CH 3
CH 3
C=N N NH 2
N
N
NH
Ph
Ph
5-amino -1- fenil-3-metil-pirazol
Se disolvieron 6,9g de β-amino-crotonitrilo en 14 ml de alcohol absoluto y

con un embudo cuenta gotas se le adiciona 8,4 ml de fenilhidrazina
después de agregar todo el fenilhidrazina se calentó a reflujo en una
cocina eléctrica durante doce horas, hasta que no haya desprendimiento
de amoniaco, luego en el mismos balón se le añadió 2 ml de ácido
clorhídrico concentrado., después de media hora se apagó la cocina y se
dejó enfriar, de inmediato el balón se colocó en la refrigeradora por un día
9
a una temperatura de 4-5 ºC, en la cual en ese tiempo se observó
presencia de cristales de color amarillo claro.
Se determinó el punto de fusión de los cristales mediante el aparato de
Fisher-Johns y su espectroscopia infrarrojo.
2.2.2. SÍNTESIS DE 1-FENIL-3,6-DIMETIL- PIRAZOLO [3,4-b]-

PIRIDIN-4-ONA
O
CH 3 O OEt CH 3
C
N NH 2 + CH 2
AcOH
+ EtOH + H 2O
calor N
N O C N N CH 3
ph CH 3 ph
1-fenil-3,6-dimetil- pirazolo [3,4-b]-piridin-4-ona
En un balón de 100 ml. con refrigerante a reflujo y tubo desecante de

cloruro de calcio, se coloca una mezcla de 20 ml. De ácido acético glacial;
10 milimoles del 5-amino-1-fenil-3-metil-pirazol y 15 milimoles de
acetoacetato de etilo. Seguidamente se calentó 3 horas a reflujo, se
concentró mediante calentamiento a una temperatura menor de
150ºC.Evaporando el ácido acético glacial. La solución restante se le
agrego una mezcla de agua-acetato de etilo-hexano (1:1:1), cristalizando
a los pocos minutos (agitación constante), y al medio ambiente. Se separó
el precipitado por filtración al vacío y se lavó con agua destilada y alcohol
en la proporción de 2:1.Se filtró al vacío, se secó mediante la estufa a
50ºC.y se obtuvo un producto sólido de color blanco perlado.
Se determinó el punto de fusión mediante el aparato de Fisher-Johns y
su espectroscopia infrarrojo.
10
2.2.3. SÍNTESIS DE 1-FENIL-3-METIL-5-(P-DIMETILAMINOBENCILIDEN-
AMINO)-PIRAZOL
CH 3
CH 3
calor
NH 2 + OHC N(CH 3)2 N N=CH N(CH 3)2 + H2O
N
Piperidina N
N
ph
ph
1-fenil-3-metil-5-(p-dimetilaminobenciliden-amino)-pirazol
En un balón equipado con refrigerante a reflujo provisto de un tubo

desecante de cloruro de calcio, se colocó una mezcla de 0,015 moles del p-
dimetilamino-benzaldehído y 0,015 moles del 5-amino-1-fenil -3-metil pirazol
en 40 ml de etanol absoluto y III gotas de piperidina como catalizador luego
se calientó por tres horas a reflujo, y se dejó enfriar. Se guardó en la
refrigeradora por 1 día, obteniéndose cristales amarillos, se filtra al vacío, se
lavó con una mezcla de agua-etanol (2:1) luego se secó a la estufa a 50ºC
por 20 minutos. Se determinó el punto de fusión de los cristales mediante el
aparato de Fisher-Johns y su espectroscopia infrarrojo.
2.2.4 SíNTESIS DE 1-FENIL-3,4,6-TRIMETIL- PIRAZOLO [3,4-b]-

PIRIDINA (Chiroque, 2002) (Ruíz, 2002)
CH 3
CH 3 CH 3 CH 3
C=O C2H5OH
N NH 2 + CH 2 N + 2 H2O
N N CH 3
N C=O
CH 3
1-fenil-3,4,6-trimetil- pirazolo [3,4-b]-piridina
11
En un balón equipado con refrigerante a reflujo, se colocó una mezcla de
0,010 moles de 5-amino-1-fenil-3-metil pirazol y 0,011moles de acetil
acetona en 10 ml de etanol absoluto. Luego se calientó por 24 horas a
reflujo, se dejó enfriar, y se recristalizó con etanol, obteniéndose cristales
blancos, se filtró al vacío, se lavó con una mezcla de agua-etanol (2:1) luego
se secó a la estufa a 40ºC por 30 minutos. Se determinó el punto de fusión
de los cristales en el aparato de Fisher- Johns y se determinó su
espectroscopia infrarrojo.
2.2.5. ENSAYO CITOSTÁTICO EN RAICILLAS DE AlIium cepa L.
(DÍAZ, 2011).
Para identificar que los compuestos heterocíclicos tienen efecto citostático

se realizaron ensayos en los extractos preparados en raicillas de Allium cepa
L. (cebolla) siguiendo el método reportado por Roldán, G. (ROLDÁN, 1993).
Cuando un bulbo de cebolla (Allium sp.) se rehidrata se produce una
estimulación del crecimiento de las células, lo cual permite la elongación de
las raíces de la planta. Sin embargo, cuando la hidratación se lleva a cabo
en presencia de sustancias tóxicas, la división celular de los meristemos
radiculares puede inhibirse, ya sea retardando el proceso de mitosis o
destruyendo las células. Este tipo de alteraciones generalmente impide el
crecimiento normal de la raíz, y por tanto su elongación. El efecto puede
determinarse en forma indirecta, mediante la comparación de la elongación
de las raíces de cebollas expuestas al compuesto tóxico contra la de
cebollas no expuestas, luego de un período de 48 horas de prueba. La
cuantificación del efecto se realiza estableciendo el porcentaje de inhibición
del crecimiento de las raíces respecto a la longitud promedio de las raíces
del control.
12
Para la elaboración de las pruebas se seleccionaron bulbos de Allium cepa
L. (cebolla) de 1,5 cm de diámetro, secos y sin formación de hojas o raíz.
Éstos fueron obtenidos del mercado. Previo al montaje de la prueba, los
bulbos deben limpiarse eliminando la epidermis seca y removiendo, con un
bisturí o instrumento punzante, los restos de tejido y raíces del área radicular
.No se deben dañar las raíces primordiales. Con el fin de eliminar los restos
de tejido, es conveniente colocar los bulbos en agua destilada por 2 horas y
dejó secar.
Se adquirió los bulbos en vísperas de la realización de pruebas o, en su

defecto, almacenarlos en un lugar donde se puedan garantizar condiciones
secas y una temperatura entre 10 y 20 °C. En algunas regiones, los bulbos
pueden mantenerse almacenados hasta por un año; sin embargo, en zonas
geográficas donde la temperatura y la humedad son altas, el
almacenamiento está limitado a unos pocos días.
2.2.5.1. Control de calidad del material biológico
Dado que la prueba con cebollas no requiere mantenimiento de un

cultivo, el control de calidad debe enfatizarse en la calidad de los lotes
de material a utilizar. Por esa razón, debe darse especial importancia al
almacenamiento del material, así como al control de hongos que
pueden afectar la viabilidad de las cebollas y su normal desarrollo. Es
por ello que se recomienda disponer de un número de cebollas por lo
menos 3 o 4 veces mayor al requerido para las pruebas. Su
almacenamiento debe hacerse en ambiente exento de humedad, a una
temperatura entre 10 y 20 °C.
2.2.5.2. Formación de las raicillas

Los bulbos de Allium cepa L. se seleccionaron y se cortaron sus raíces
secas a nivel del disco para descubrir los primordios radiculares, luego
se colocaron por su base sobre un recipiente de capacidad y diámetro
adecuados, llenos de agua fresca, la que se cambió diariamente.
Después de un período de 3-4 días, los bulbos con gran número de
13
raicillas sobre 10 y cuya longitud oscilan entre 2-3 cm fueron
seleccionados y destinadas al tratamiento.
2.2.5.3. Tratamiento de las Raicillas con los extractos preparados

Para el tratamiento de las raicillas, con los extractos preparados se
tomaron en cuenta dos factores: tiempo de exposición al heterocíclico
y la actividad de las células meristemáticas al tiempo de tratamiento.
Tres o más bulbos diferentes fueron empleados en cada ensayo,
incluyendo un grupo testigo.
Se utilizaron un total de 70 unidades experimentales seleccionadas y
que fueron distribuidas al azar según las características del material
antes mencionado.
Cada unidad experimental lo constituye 1 bulbo de Allium cepa L.

(cebolla), con raíces de 2-3 cm (sobre 10) contenidas en un vaso de
precipitación cuya capacidad es 250 mL.
Grupo Testigo 10 unidades experimentales (UE), de las cuales 5 UE

fueron expuestos por un tiempo de 24h y 5 UE expuestos por un
tiempo de 48h. a cada unidad experimental se le asignaron un volumen
de 200 ml de agua.
Grupo Problema Cada grupo estuvo formado por 10 unidades

experimentales, que fueron divididos en dos subgrupos: 5UE expuestos
por un tiempo de 24h y 5UE expuestos por un tiempo de 48h. A cada
unidad experimental se le asignó un volumen de 200 mL al 25% del
heterocíclico sintetizado respectivamente: 1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo
[3,4-b]-piridin-4-ona,1-fenil-3-metil-5-[p-dimetilamino-bencilidenamino]-
pirazol y 1-fenil-3,4,6-trimetil-pirazol -[3,4-b]- piridina.
14
Tratamiento de raicillas
ENSAYO CITOSTATICO
Concentración Grupo Compuestos heterocíclicos sintetizados

Testigo
Tiempo Grupo I Grupo II Grupo III
DERIVADO DERIVADO DERIVADO
24h 5UE 5UE 5UE 5UE
48h 5UE 5UE 5UE 5UE
2.2.5.4. Toma de muestra de las células vegetales

Después de cada tratamiento cuidadosamente se cortaron 1-2 cm a
partir de los ápices de las raicillas, tomándose 5 a 6 de cada bulbo a
las 24 y 48 horas, luego se procedió a fijar en la mezcla de Carnoy ( 3
ml de etanol y 1 ml de ácido acético glacial). (Zavaleta, 2005)
2.2.5.5. Técnica de Coloración

Las raicillas fueron colocados en una luna de reloj para su coloración,
la cual consistió en agregar a las raicillas Orceína acética al 2% y ácido
clorhídrico 1,0 N; en una proporción de 9:1 (por un tiempo de 45
minutos), luego de transcurrido el tiempo de coloración se separó una
raicilla y se colocó en una lámina porta objetos para posteriormente
identificar y cortar el ápice, al cual se le agrego 1 gota de gelatina
fenicada y finalmente se cubrió la muestra con una lámina cubreobjetos
15
sobre la cual se ejerció presión utilizando la punta de un lápiz, con el
objetivo que las células se disgreguen y permitan un adecuado
recuento celular. Se observaron al microscopio óptico a 1000
aumentos.
2.2.5.6. Recuento celular, determinación de los índices

Interfasico, mitótico e índice de fases de Mitosis (Zavaleta , 2005)
De acuerdo a las características citológicas propias de cada etapa y

fase del ciclo celular se observaron y anotaron el total de células en
cada período mitótico: (profase, metafase, anafase y telofase); e
interfase por cada campo; se evaluó un adecuado número de campos,
de tal manera que permita un conteo mínimo de 1000 células por
muestra observada. El recuento de fases de cada muestra se realizó al
azar.
El índice mitótico se calcula a partir de la fórmula:
IM= (Número de células en mitosis / Total de células) x 100
El índice promedio de cada fase de la mitosis se hizo a partir de la

fórmula:
IP= (Número de células en la fase de la mitosis / Número de células

en mitosis) x 100
2.2.6 -ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Se realizaron ensayo de: Análisis de varianza ANOVA (Walpole, 1999),

prueba de LSD y Dunnett; para determinar si existe o no diferencia
significativa entre los índices de las fases mitóticas de las raicillas de Allium
cepa L, mediante el software SPSS v 10 (Pérez, 2010).
16
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1. SíNTESIS DE 5-AMINO -1- FENIL-3-METIL-PIRAZOL

Se sintetizó según el método de Mohr, el acetonitrilo reaccionó con el
sodio metálico con un solvente inerte, hay formación de metano,
cianuro de sodio y el β-amino-crotonitrilo, al reaccionar con la
fenilhidracina se produce el cierre anular, como se ilustra en la figura 1
donde el carbocatión es atacado nucleofilicamente por el par de
electrones del nitrógeno de la hidrazona que está unido directamente al
fenilo. El rendimiento de la reacción, después de la recristalización del
producto fue del 67%, punto de fusión fue 105ºC. (CHIROQUE,2002)
H2O
3 CH3 - CN + 2 Na CH 3 - C = CH - CN +CHCH
4 4 + NaCN
NH 2
- NH 3
NH 2 N - NH - Ph
CH 3
CH 3
C=N N NH 2
N
N
NH
Ph
Ph
Figura 1. obtención de 5-amino -1- fenil-3-metil-pirazol
17
3.1.1. MECANISMO DE REACCIÓN
Su mecanismo de reacción química se inició con el protón del ácido

clorhídrico que reacciona con el nitrógeno del grupo ciano de la
hidrazona quedando positivamente el nitrógeno del ciano. se produce
el cierre anular; el carbocatión es atacado nucleofilicamente por el par
de electrones del nitrógeno de la hidrazona que está unido
directamente al fenilo, el nitrógeno tetravalente positivo recuperó su
par de electrones donde se elimina el protón y, por tautomería en la
posición cuatro del anillo se forma el grupo amino y de esta manera se
aromatizó el sistema cíclico formándose el compuesto 5-Amino-1-fenil-
3-metil-pirazol.
CH 3 CH 3
CH 3
+ +
+ N C NH N C NH
N C N + H
NH NH
NH
Ph Ph
Ph
CH 3 CH 3 H
+
-H
+ NH N NH
C NH CH 3
N + N
N
NH
Ph
Ph H
Ph
CH 3
N NH 2
N
Ph
Figura 2. Mecanismo de reacción de la obtención de la 5-amino -1- fenil-

3-metil-pirazol
18
3.1.2. ESPECTRO INFRAROJO
En el espectro del 5-amino-1-fenil-3-metilpirazol que se muestra en la
Figura 3, se observó señales de estiramiento de los enlaces C-H,que
aparecierón a 3136 cm-1 y en torno a 2918 cm-1 ,y que correspondieron a
los hidrógenos aromáticos o vinílicos y alifáticos,respectivamente,también
se apreció dos señales de absorción a 3448 y 3136 cm-1 , de diferente
intensidad que correspondieron a vibraciones de estiramiento asimétrico
,respectivamente de los enlaces N-H, indicando la presencia de un grupo
amino primario.
Así mismo, la banda de estiramiento del enlace C=N conjugado del anillo
aparecieron a 1623 cm-1. Aparecieron las señales a 1595 ,1554 y 1511
respectivamente que correspondieron a las elongaciones de los enlaces
C=C deslocalizados de los anillos pirazólicos y fenilo, respectivamente.
Se observaron también las señales de flexión fuera del, plano de los
enlaces C-H aromáticos, que se presentaron a 761 y 698 cm-1, que
indican la monosubstitución del anillo aromático, lo cual quedó
corroborado por la presencia de las bandas de sobretono entre 2000 y
1667 cm-1, que también correspondieron a anillos fenílicos
monosubstituídos. Estas señales de absorción del 5-amino-1-fenil-3-
metilpirazol son coherentes con la estructura propuesta para dicho
compuesto.
Figura 3 Espectro I.R. de la 5-amino-1-fenil-3-metilpirazol
19
3.2. SINTESIS DEL 1-FENIL-3,6-DIMETIL-PIRAZOLO [3,4-b]-PIRIDIN-4-
ONA
La preparación de este compuesto se obtuvo al hacer reaccionar el 5-

amino- 1-fenil-3-metil-pirazol con acetoacetato de etilo en presencia de
ácido acético glacial, que se sucede mediante un ataque nucleofilico
del grupo carbonilo sobre el grupo amino, seguido de un ataque
nucleofílico intramolecular por parte de la posición cuatro del anillo
pirazólico del éster para formar la 1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo[3,4-b]-
piridin-4-ona.Con un rendimiento de 47% en forma de esponjas de
color blanco con un punto de fusión de 182 ºC (Chiroque,2002)
O
CH 3 O OEt CH 3
C
N NH 2 + CH 2
AcOH
+ EtOH + H 2O
calor N
N O C N N CH 3
ph CH 3 ph
Figura 4 Obtención de 1-fenil-3,6-dimetil-

pirazolo [3,4-b]- piridin-4- ona
Su mecanismo de reacción se inició con el ataque nucleofilico del

nitrógeno de la posición 5 del grupo amino del pirazol sobre el
carbono cetonico del acetoacetato de etilo. eliminandose una
molécula de agua y se forma un grupo imino, se produce un segundo
ataque nucleofilico intramolecular del carbono C-4 del carbono
carbonilo del éster del acetato de etilo, con eliminación de etanol,
formándose el producto. Figura 5
20
OEt O OEt
CH 3 CH 3
C
C=O
- H 2O
N NH 2 + CH 2
N
C=O N N CH 3
N
CH 3 Ph
Ph
O
O CH 3 H
CH 3 OEt
-
C2H5O
N
N N + N CH 3
N + N CH 3
Ph
Ph
O
CH 3
N
N N CH 3
Ph
Figura 5 Mecanismo de reacción de la obtención de la

1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo [3,4-b]-piridin-4- ona
En el espectro IR del 1-fenil-3,6-dimetil-pirazol [3,4-b] piridin -4-ona

que se muestra en la figura 6, se observaron las señales de
estiramiento de los enlaces C-H, que apareció a 3066 cm-1. Dichas
señales correspondieron a los hidrógenos aromáticos y vinílico. Así
mismo, a 2925 cm-1 aparecieron las señales de estiramiento
correspondientes a los enlaces C-H alifáticos. Se apreció además una
banda de estiramiento a 1666 cm-1 que pertenece al grupo carbonilo
C=O. El desplazamiento hacia menor frecuencia se debió a la intensa
conjugación del grupo carbonilo con los dobles enlaces de ambos
anillos heterocíclicos y del anillo aromático.
21
Las señales a 1502 y 1458 cm-1, correspondieron a las elongaciones
de los enlaces C=C deslocalizados de los anillos pirazolicos y fenilo,
respectivamente .También se apreciaron señales de flexión fuera del
plano, de los enlaces C-H aromáticos, que se presentan a 752 y 686,
que indican la monosustitución del anillo aromático.
Del análisis de las señales del espectro de IR se concluyó que el
compuesto realmente tiene la estructura propuesta y que la reacción
ha conducido a una ciclación con formación del sistema pirazolo [3,4-
b]piridina
Figura 6 Espectro I.R. 1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo[3,4-b]piridina-4-ona
3.3. SINTESIS DEL1-FENIL-3-METIL-5-(P-DIMETILAMINO-

BENCILIDENAMINO)- PIRAZOL
Se sintetizó al reaccionar el 5- amino-1-fenil-3-metil-pirazol con p-

dimetilaminobenzaldehido en presencia de ácido acético glacial el
producto es una imina heterocíclica. Rendimiento fue de 57,5% en forma
de cristales color amarillas su punto de fusión de 105ºC. (Chiroque, 2002)
22
CH 3
CH 3
calor
NH 2 + OHC N(CH 3)2 N N=CH N(CH 3)2 + H2O
N
Piperidina N
N
ph
ph
Figura 7 Obtención de 1-fenil-3-metil-5-(p-dimetilamino-

bencilidenamino)-pirazol
Su mecanismo de reacción se inicia con la piperidina, la cual es una

amina secundaria, es más básica que el aminopirazol. Es una reacción
ácido-base de Bronsted, la piperidina recibe un protón por parte del
aminopirazol, lo cual aumenta la nucleofilicidad de dicho compuesto al
formar su base conjugada. Está estabilizada por resonancia debido a la
conjugación de los dobles enlaces del anillo pirazolico. La reacción se
inicia mediante el ataque nucleofilico del anión sobre el carbono
carbonilico del aldehído, formado el aducto tetraédrico, que por
deshidratación permite la formación del producto. Según mecanismo de
reacción que se ilustra en la Figura 8
23
CH 3
CH 3
N NH 2 + N NH + +
N N N
N
ph H H
ph H
CH3 CH 3
CH3
N NH N NH
N NH
N N
N
ph ph
ph
H
CH 3
CH 3 C O
OH CH 3
NH CH N
N NH + N
CH 3
N
N
N(CH 3)2 ph
ph
CH 3
CH 3
CH 3
OH
- H 2O N
N(CH 3)2 N N=CH
N N CH
CH 3
N
N H
ph
ph
+
+ H2O H3O +
+
N N
H H H
Figura 8 Mecanismo de reacción de la obtención de la 1-fenil -3-metil-5-(p-

dimetilamino- bencilidenamino)-pirazol
24
El espectro IR del 1-fenil-3-metil-5-(p-dimetilamino-bencilidenamino)-

pirazol, se muestra en la figura 9, presenta una banda de estiramiento
C=N a 1580 cm-1, que corresponde al grupo imino conjugado del anillo y a
la imina condesada. Así mismo, las señales a1546, 1530 y 1500 cm-1
pertenecen a las bandas de estiramiento de los enlaces C=C anulares de
los anillos pirazolicos y fenilico.Las bandas a 760,687 y 817 cm -1
corresponden a las flexiones fuera del plano de los enlaces C-H
aromáticos e indican la monosustitución y la sustitución 1,4 de ambos
anillos fenilicos, respectivamente .Por otro, lado las bandas de sobretonos
entre 2000 y 1800 cm-1 corroboran las sustituciones anulares asignadas.
Así mismo, como era de esperarse, los estiramientos de los enlaces C-H
Aparecen a 3100,2913 y 2853 cm-1 como un conjunto de bandas de
diferentes intensidad, que corresponden a los hidrógenos aromáticos,
vinílicos y alifáticos, respectivamente además, las absorciones a 1430 y
1363 cm-1 corresponden a las deformaciones de los metilenos y metilos
respectivamente.
Figura 9. Espectro I.R. de la 1-fenil-3-metil-5-

[p- dimetilaminobencilidenamino]-pirazol
25
3.4. SINTESIS DEL 1-FENIL-3, 4,6-TRIMETIL- PIRAZOLO [3,4-b]-
PIRIDINA (Chiroque, 2002)
La preparación de este compuesto se obtiene al reaccionar el 5-

amino-1-fenil-3-metil-pirazol con la acetil acetona en presencia de
etanol absoluto. El rendimiento fue de 52,5% en forma de cristales
color crema con un punto de fusión de 125ºC.
CH 3
CH 3 CH 3 CH 3
C=O C2H5OH
N NH 2 + CH 2 N + 2 H2O
N N CH 3
N C=O
CH 3
Figura 10 Síntesis de 1-fenil-3, 4,6-trimetil- pirazolo [3,4-b]-

Piridina
Su mecanismo de reacción se inició con el ataque nucleofilico del

nitrógeno de la posición 5 del grupo amino del pirazol sobre el carbono
cetónico del acetilacetona.Se elimina una molécula de agua y se
produjo un segundo ataque nucleofilico intramolecular el anillo
pirazolico al segundo carbono cetonico donde se eliminó una segunda
molécula de agua, formándose el producto. ( Carey,1999)( Wade,2006)
26
CH 3 CH 3
CH 3
CH 3
C=O
C=O
+ - H 2O
N NH 2 + CH 2
N
OH2
N C=O N N CH 3
CH 3 H
CH 3 +
CH 3 OH2
+ CH 3 H
CH 3
C=O H
N
N N + N
N N CH 3
CH 3
CH 3
+ CH 3
CH 3 OH2
CH 3
H
- H 2O
N
N N N CH 3
N N CH 3
Figura 11 Mecanismo de reacción de la obtención de la1-fenil-3, 4,6-

trimetil-pirazolo-[3,4-b]-Piridina
El espectro IR del 1-fenil-3,4,6-trimetil-pirazol-[3,4-b]-piridina, que se muestra

en la figura 12, las señales a 1546,1530 y 1500 cm-1 que pertenecen a las
bandas de estiramiento de los enlaces C=C anulares de los anillos
pirazolicos y fenilico. Además se observan señales de estiramiento de los
enlaces C-H, que apareció a 3066 cm-1 dichas señales correspondieron a los
hidrógenos aromáticos y vinílicos .Así mismo, a 2925 cm-1 aparecieron las
señales de estiramiento correspondientes a los enlaces C-H alifáticos. Las
señales a 1502 y 1458 cm-1 correspondieron a las elongaciones de los
enlaces C=C deslocalizados de los anillos pirazolicos y fenilicos
respectivamente.
27
También se apreciaron señales de flexión fuera del plano, de los enlaces C-
H aromáticos, que se presentaron a 770-730 cm-1 que indican la
monosustitución del anillo aromático.
Así mismo, como era de esperarse, los estiramiento de los enlaces C-H que
aparecieron a 3100,2913 y 2853 cm-1 como un conjunto de bandas de
diferentes intensidades, que correspondieron a los hidrógenos aromáticos,
vinílicos y alifáticos, respetivamente además, la señal cerca a 1640 cm-1 que
corresponde a C=N del aromático, las absorciones a 1430 y 1363 cm-1
corresponden a las deformaciones de los metilenos y metilos
respectivamente.
Del análisis de las señales del espectro de IR se concluyó que el compuesto
realmente tiene la estructura propuesta y que la reacción ha conducido a una
ciclación.
Figura 12 Espectro I.R. de la1-fenil-3, 4,6-trimetil-pirazolo-[3,4-b]-Piridina
28
3.5. RECUENTO CELULAR EN EL TRATAMIENTO DE LAS RAICILLAS
DE Allium cepa L. (cebolla) frente a una solución del 0,1% de 1-
fenil-3,6-dimetil-pirazolo [3,4-b]-piridin-4-ona
En el tratamiento de las raicillas de Allium cepa L. (cebolla) frente a la

solución de 0,1% del 1-fenil-3,6-dimetil-pirazolo [3,4-b]-piridin-4-ona, los
resultados obtenidos en el recuento celular se analizarón fase por fase.
En el índice interfásico según la tabla 2 no presenta diferencia entre
ningún par de medias a un nivel de confianza de 95%.
El p-valor del test F es superior a 0,05,no hay diferencia significativa
estadísticamente entre las medias del índice interfásico entre los
tratamientos.
TABLA 2 Índice promedio interfásico
control 24 horas 48 horas

93,22 93,17 91,31
ANOVA entre grupos P-valor = 0,1708
En la tabla 3 para el índice profásico no se observan diferencias

entre ningún par de medias a un nivel de confianza de 95%.
Se muestra el p-valor del test F superior a 0,05, lo cual indica que no
existen diferencias estadísticamente significativas entre las medias del
índice profásico entre los tratamientos.
TABLA 3 Índice promedio Profásico

52,43 47,25 53,28
En la tabla 4 para el índice metafásico no se observan diferencias

29
índice metafasico entre los tratamientos.
TABLA 4 Índice promedio Metafásico

22,25 21,90 23,58
La tabla 5 para el índice anafásico no se observan diferencias entre ningún

par de medias a un nivel de confianza de 95%.
Se muestra el p-valor del test F superior a 0,05, lo cual indica que no existen
diferencias estadísticamente significativas entre las medias del índice
anafásico entre los tratamientos.
TABLA 5 Índice promedio Anafásico

12,89 18,21 11,43
La tabla 6 para el índice Telofásico, no se observan diferencias entre

índice telofásico entre los tratamientos.
TABLA 6 Índice promedio Telofásico

12,4 12,6 11,7
La tabla 7 para el índice Mitótico no se observan diferencias entre

30
índice mitótico entre los tratamientos.
TABLA 7 Índice Mitótico

6,78 6,82 8,69

DE Allium cepa L. (cebolla) frente a una solución del 0,1% de 1-
fenil-3-metil-5-[p-dimetilamino-bencilidenamino]-pirazol
El resultado del tratamiento de las raicillas de Allium cepa L. (cebolla)

frente a una solución de 0,1%de la 1-fenil-3-metil-5-[p-dimetilamino-
bencilidenamino]-pirazol, nos lleva al siguiente análisis:
En el índice interfásico, según tabla 8 existen diferencias

estadísticamente significativas de los grupos 24 y 48 horas con
relación al control, sin embargo se puede observar que no hay
diferencias estadísticamente significativas entre estos dos grupos.
Se muestra el p-valor del test F inferior a 0,05, lo cual indica que
índice interfásico entre los tratamientos.
TABLA 8 Índice Promedio Interfásico

83,72 91,94 93,36
31
En el Índice Profásico, tabla 9 no se observan diferencias entre ningún par
de medias a un nivel de confianza de 95%.
profásico entre los tratamientos.
TABLA 9 Índice Promedio Profásico

50,74 50,86 46,61
El índice Metafásico, según tabla 10, no se observan diferencias entre

metafasico entre los tratamientos.
TABLA 10 Índice Promedio Metafásico

22,55 19,97 23,38
El índice anafásico, según tabla 11, no se observan diferencias entre ningún

par de medias a un nivel de confianza de 95%.
32
TABLA 11 Índice Promedio Anafásico

9,00 6,38 10,27
El índice Telofásico, según tabla 12, no se observan diferencias entre

TABLA 12 Índice Promedio Telofásico

17,70 22,77 19,74
El índice Mitótico, según tabla 13 existen diferencias estadísticamente

significativas de los grupos 24 y 48 horas con relación al control, sin
embargo se puede observar que no hay diferencias estadísticamente
significativas entre estos dos grupos.
Se muestra el p-valor del test F inferior a 0,05, lo cual indica que

16,27 8,06 6,64
33
DE Allium cepa L. (cebolla) FRENTE A UNA SOLUCIÓN AL 0,1% DE 1-
FENIL-3, 4,6- TRIMETIL-PIRAZOLO-[3,4-b]-PIRIDINA
En este análisis se utilizó una solución al 0,1% de la 1-fenil-3, 4,6- trimetil-

pirazolo-[3,4-b]-piridina sobre las raicillas de Allium cepa L.(cebolla)
Según la tabla 14 del Indice Interfásico, no se observan diferencias entre

índice Interfásico entre los tratamientos.
TABLA 14 Índice promedio Interfásico

92,28 93,88 94,32
El índice Profásico, según tabla 15, no se observan diferencias entre

profásico entre los tratamientos.
TABLA 15 Índice promedio Profásico

36,80 32,80 35,97
34
Según el Índice Metafásico, no se observan diferencias entre ningún par de
medias a un nivel de confianza de 95%.
metafasico entre los tratamientos.
TABLA 16 Índice promedio Metafásico

32,25 32,08 27,68
Según la tabla 17 del Indicé Anafásico, no se observan diferencias entre

TABLA 17 Índice promedio Anafásico

13,62 16,60 16.01
Según el Índice Telofásico mostrados en la tabla 18, no se observan

diferencias entre ningún par de medias a un nivel de confianza de
95%.
35
TABLA 18 Índice promedio Telofásico

16,64 19,37 20,16
Según la tabla 19 del indicé mitótico, no se observan diferencias


7,71 6,11 5,68
36
4. CONCLUCIONES
Se obtuvieron nuevos compuestos heterocíclicos mediante la reacción del

5-amino-1-fenil-3metil-pirazol con acetoacetato de etilo,p-
dimetilaminobenzaldehido y acetilacetona,en proporciones 1:1 y 2:1,con un
comportamiento nucleofílico a través de la posición 5 del aminopirazol.
Los compuestos heterocíclicos sintetizados mediante la reacción de la

5-amino-1-fenil-3metil-pirazol con acetoacetato de etilo,p-
dimetilaminobenzaldehido y acetilacetona fueron: 1-Fenil-3,6-Dimetil-
Pirazolo [3,4-b]-Piridin-4-ona, y la1-fenil-3,4,6-trimetil-pirazolo [3,4-b]-piridina
los cuales no presentaron acción citostática frente en las raicillas de las
células meristematicas de Allium cepa L.(cebolla). El 1-fenil-3-metil-5-[p-
dimetilaminobencilidenamino]-pirazol a una concentración de 0,1% presentó
acción citostática frente a las raicillas de las células meristematicas de Allium
cepa L. (cebolla), lo cual se constató en los resultados obtenidos en el índice
mitótico e interfásico.
37
5. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Goodman, A & Gilman A.(1998) Las Bases Farmacológicas de la

Terapéutica. 10ma ed. Editorial Mc. Graw-Hill Interamericana
S.A.México.pp.1405-1410
Alba Minelli,LLaria Bellezza,Conte Carmela,Zoran Culig (2009) Oxidative

stress-related aging: A role for prostate cáncer, Biochimica et
Biophysica Acta 1795(2009) 83-91 Contents lists available at Science
Direct Biochimica et Biophysica Acta journal homepage:
www.elsevier.com/locate/bbacan.
Thomas R.Geiger, Daniel S. Peeper (2009) Metastasis mechanisms

Biochimica et Biophysica Acta 1796 (2009) 293-308 Contents lists
available at Science Direct Biochimica et Biophysica Acta journal
homepage: www.elsevier.com/locate/bbacan.
Victor Okoh,Alok Deraj,Deodutta Roy,( 2011) Estrogen – induced reactive

oxygen species-mediated signaling contribute to breast cancer
Biochimica et Biophysica Acta 1815 (2011) 115-133 Contents lists
available at Science Direct Biochimica et Biophysica Acta journal
homepage: www.elsevier.com/locate/bbacan.
Yiqun Jiang,Shuang Liu, Xiang Chen,Ya Cao,Yongguang Tao(

2013):Genome –Wide distribution of DNA methylation and DNA
demethylation and related chromatin regulators in cancer Biochimica et
Biophysica Acta 1835 (2013) 155-163 Contents lists available at
Science Direct Biochimica et Biophysica Acta journal homepage:
www.elsevier.com/locate/bbacan.
Avendaño López C.(2004) Introducción a la química farmacéutica. 2da ed.

ed. mc. graw-hill interamericana s.a. México. pp.657-660,835
Romina Tripaldi A,Liborio StuppiaB,Saverio Alberti A, (2013) Human height

genes and cáncer Biochimica et Biophysica Acta 1836 (2013) 27-41
38
Contents lists available at Science Direct Biochimica et Biophysica Acta
journal homepage: www.elsevier.com/locate/bbacan.
Chung S.Yang,Guangxun li, Zhihong Yang,Fei Guan,Amber

Chen,Jihyeung,Ju (2013) Cancer prevention by tocopherols and tea
polyphenols Cancer Letters 334 (2013) 79-85 Contents lists available
at SciVerse Science Diret Cancer Letters Journal Homepage
:www.elsevier.com/locate/canlet.
Falck K, Sorsa M, Vainio H. Use of the bacterial fluctation test to detect

mutagenicity in urine of nurses handling cytostatic drugs. Mutat
Res 1981;85:236-7 abstract.
Hemminki K, Kyyronen P, Lindohm ML. Spontaneous abortions and

malformations in the offspring of nurses exposed to anesthetic
gases, cytotoxic drugs and other potential hazards in hospitals,
2based on registered information of outcome J Epidem. Comm
Health 1985;39:141-147
Nguyen TV, Theiss JC, Matney TS. Exposure of pharmacy personnel

to mutagenic antineoplastic drugs. Cancer Res 1982;42(11):4792-6.
Davis J, Jackson J, Kirsa, S et al. SHPA standards of practice for safe

handling of cytotoxic drugs in pharmacy departments. Melbourne,
Australia: Society of Hospital Pharmacists of Australia; 1997:8-1-8-10.
Connor TH, Anderson RW, Sessink PJ, Broad- field L, Power LA.
Surface contamination with antineoplastic agents in six cancer
treatment centers in Canada and the United States. Am J Health
Syst Pharm. 1999;56(14):1427-32.
Bu Ba V. Directive, procedure recognized offi- cially and by the

professional association: "Stan- dards for the operation of safety
workbenches with recirculated air for work with carcinogenic or
mutagenic cytostatic". Federal Heath Paper 7-8/4998, Dtsh. Apoth.
Ztg.1998, 138: 76-7.
39
Wilson JP, Solimando DA. Aseptictechnique as a safety precution in
the preparation of antineoplastic agents. Hosp Pharm
1981;16:575-81.
Valanis B, Vollmer W, Labuhn K, Glass A. Effects of exposure to

antineoplastic agents on self-reported infertility among nurses and
pharmacists. J Occup Environ Med 1997;39:574-80.
Valanis B, Vollmer W, Steele P. Occupational exposure to

antineoplastic agents: self-reported miscarriages among nurses
and pharmacists. J Occup Environ Med 1999;41:632-8.
síntesis de fármacos con estructura heterocíclica condensada con ...
Disponible en: http://ocw.ceu.es/ciencias-de-la-salud/introduccion-a-la-

quimica-farmaceutica/temas/tema-5.pdf [Acceso: 23 de julio 2012]
Rivera A. Maldonado, M., Nuñez, M. Joseph-Nathan, Heterocycl. Commun,

(2004), 10, 77
Rivera A., M. Navarro, J. Rios-Motta, Heterocycles, (2008), 75, 1651
Chiroque Sánchez, A..; Torres Salitrosas C.(2002).Síntesis de pirazolo-

piridinas de potencial aplicación farmacológica e industrial a partir de
compuestos carbonilicos. universidad nacional de Trujillo (Perú).
Insuasty H, Estrada M, Cortés E, Quiroga J, Insuasty B, Abonía R,

Nogueras M, Cobo J; Regioselective Synthesis of novel 4-aryl-2-
ethylthio-7-methyl pyrazolo[1,5-a]-[1,3,5]-triazines. Tetrahedron
Letters; 2006, 47, 5441–5443
He L, Gilligan P, Zaczek R, Fitzgerald L, McElroy J, Shen H, Saye J, Kalin

N, Shelton S, Christ D, Trainor G, Hartig P; 4-(1,3-Dimethoxyprop-
2- ylamino)-2,7-dimethyl-8-(2,4-dichlorophenyl)- pyrazolo[1,5-a]-1,3,5-
triazine: A Potent Orally Bioavailable CRF1 ReceptorAntagonist; J.
Med. Chem. 2000, 43, 449-456
40
Gilligan Paul J., He Liqui; Clark Todd; Tivitmahaisoon Parcharee y otros; 8-
(4-Methoxyphenyl)pyrazolo[1,5-a]-1,3,5-triazines: Selective and
Centrally Active Corticotropin-Releasing Factor Receptor-1 (CRF1)
Antagonists; J. Med. Chem. 2009, 52, 3073–3083
Yaryura-Tobias J.A., Neziroglu F., Pérez Rivera R.L., Bord |T.; Revista de
Psiquiatría del Uruguay; Volumen 66 Nº 1; Junio 2002; 47-52
Blandini Fabio; Neuroprotection by Rasagiline: A New Therapeutic
Approach to Parkinson’s Disease?; CNS Drug Reviews; Vol. 11, No.

2, 2005; 183–194
Alva Rojas, H., Gutiérrez Cueva, J.(2002). síntesis de la 3-amino-1-fenil-2-

pirazolin- 5-ona y derivados de potencial aplicación farmacológica o
industrial a partir de compuestos carbonílicos. universidad nacional de
Trujillo (Perú).
Ruíz Cruz, W.(2002). obtención del 5-amino -1- fenil-3- metilpirazol y su

respectivo azometino a partir de acetonitrilo, fenilhidrazina y 4-
dimetilamino benzaldehído. universidad nacional de Trujillo (Perú)
Díaz. ;( 2011). Ensayo de toxicidad aguda con bulbos de cebolla Allium

cepa L.mediante la evaluación de la inhibición del crecimiento promedio
deraíces.Dispuestosen:Htpp:www2.ine.gob.mx/publicaciones/libros/573
/cap2.df.2013
Zavaleta,ETécnicas aplicadas al estudio de la anatomía vegetal 1 a

ed.México, D.F.Ed.D:R universidad Nacional de México 2005.
Roldán,G. Acción del extracto acuoso de las hojas de Nerium Oleander

“laurel rosa” sobre el uso Mitótico de células Meristenaticas de Alium
cepa. Trabajo de Habilitación para ascenso de categoría facultad de
Ciencias Biológicas-UNT-Trujillo-Perú 1993
41
Agreda, F. y Alarcón, E. (2004). Epidemiología descriptiva de neoplasias
malignas en el INEN – Periodo 1997-2001. Boletín del Instituto
Especializado de Enfermedades Neoplásicas “Dr. Eduardo Cáceres
Graziani”, 26, 1, 11-32.
Lenhard, R., Lawrence, W., McKenna, R. (1996). Enfoque General del

Paciente. En Murphy, G., Lawrence, W., Lenhard, R. (1996). Oncología
Clínica: manual de la American cáncer Society. 2ª Edición. Pp. 74-85.
Organización panamericana de la salud.
Marina, N.M., Bowman, L.C., Pui, C., Crist, W. (1996). Tumores Sólidos
Infantiles. En Murphy, G., Lawrence, W., Lenhard, R. (1996). Oncología
Clínica: manual de la American cáncer Society. 2ª Edición. Pp. 587-
615. Organización panamericana de la salud.
Estudio de la reactividad de ligados pirazólicos.
Disponible en:http://www.tdr.cesca.es/tesis_uab/available/tdx-1010105-
202102/japm1de1.pdf [Acceso: 23 de julio 2014]
Síntesis y caracterización de nuevos 5-aminopirazoles.
Disponible en: http://quimica.univalle.edu.co/documentos/tjaimeportilla.pdf
[Acceso: 23 de julio 2012]
síntesis y caracterización estructural
Disponible en: http://ddd.uab.cat/pub/tesis/1998/tdx-0626102-

115647/ac02de14.pdf [Acceso: 23 de julio 2014]
Streitwieser A heathcockc. h. (1992). Química Orgánica. 3ra ed. Ed. Mc.

Graw-Hill Interamericana España.pp.1104-1105
Carey, Francis A.(1999). Química Orgánica. 1ra ed. Ed. Mc. Graw-Hill
Interamericana España. pp.602,662
Wade L. G. (2006) Química Orgánica. 5ta ed. Ed. Pearson España

pp.854-85
42
ANEXOS
43
1. RECUENTO CELULAR EN EL TRATAMIENTO DE LAS RAICILLAS DE
Allium cepa L. (cebolla) FRENTE A 1-FENIL-3,6-DIMETIL-PIRAZOLO [
PIRIDIN-4-ONA
1.1 ANOVA SIMPLE – ÍNDICE MITÓTICO SEGÚN TRATAMIENTO
Resumen del Procedimiento
Variable dependiente: Índice Mitótico
Factor: Tratamiento
Número de observaciones: 9
Número de niveles: 3
Este procedimiento realiza un análisis de la varianza simple para índice

mitótico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios de
Índice mitótico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test en la
tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las
medias.
Medias y 95.0 Porcentajes Intervalos LSD

10.5
Indice Mitotico
9.5
8.5
7.5
6.5
5.5
24 horas 48 horas Control
Tratamiento
44
Tabla ANOVA para índice mitótico según Tratamiento
Análisis de la Varianza
Fuente Sumas de cuad. Gl Cuadrado Medio Cociente-F P-Valor
Entre grupos 7.13442 2 3.56721 2.41 0.1708
Intra grupos 8.89167 6 1.48194
Total (Corr.) 16.0261 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice mitótico en dos

componentes: un componente entre grupos y un componente dentro de los
grupos. El F-ratio, que en este caso es igual a 2,40712, es el cociente de la
estimación entre grupos y la estimación dentro de los grupos. Puesto que el
p-valor del test F es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadísticamente significativa entre las índice Mitótico medias de un nivel de
Tratamiento a otro para un 95%.
Tabla de Medias para índice mitótico según Tratamiento

con 95.0 intervalos LSD
Error Estándar
Tratamiento Frec. Media (s agrupada) Límite inf. Límite sup.
24 horas 3 6.82333 0.702838 5.60726 8.03941
48 horas 3 8.69 0.702838 7.47393 9.90607
Control 3 6.78 0.702838 5.56393 7.99607
Total 9 7.43111
Esta tabla muestra la índice mitótico media para cada nivel de Tratamiento.
También muestra el error estándar de cada media, que es la medida de su
variabilidad en la muestra. El error estándar es el resultado de dividir la
desviación típica agrupada por la raíz cuadrada del número de
observaciones en cada nivel. La tabla también muestra un intervalo que
incluye cada media.
45
1.2 ANOVA SIMPLE - ÍNDICE INTERFASICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice interfásico
Factor: Tratamiento
interfásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice interfasico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test
en la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre
las medias.

95
Indice interfasico
94
93
92
91
90
Tratamiento
Tabla ANOVA para índice interfasico según Tratamiento
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 7.13442 2 3.56721 2.41 0.1708
Intra grupos 8.89167 6 1.48194
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 16.0261 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice interfásico en dos

estadísticamente significativa entre las índice interfasico medias de un nivel
de Tratamiento a otro para un 95%.
46
Tabla de Medias para índice interfasico según Tratamiento
--------------------------------------------------------------------------------
Error Estándar
--------------------------------------------------------------------------------
24 horas 3 93.1767 0.702838 91.9606 94.3927
48 horas 3 91.31 0.702838 90.0939 92.5261
Control 3 93.22 0.702838 92.0039 94.4361
--------------------------------------------------------------------------------
Total 9 92.5689
El StatAdvisor
Esta tabla muestra la índice interfásico media para cada nivel de

Tratamiento. También muestra el error estándar de cada media, que es
la medida de su variabilidad en la muestra. El error estándar es el resultado
de dividir la desviación típica agrupada por la raíz cuadrada del número de
incluye cada media.
47
1.3 ANOVA SIMPLE - ÍNDICE PROFASICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice Profásico
Factor: Tratamiento

Profásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice Profásico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test en
la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre
las medias.

58
Indice Profasico
55
52
49
46
43
Tratamiento
Tabla ANOVA para índice Profasico según Tratamiento
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 64.0105 2 32.0053 2.74 0.1425
Intra grupos 69.9854 6 11.6642
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 133.996 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice Profásico en dos

estadísticamente significativa entre las índice Profásico medias de un nivel
48
Tabla de Medias para índice Profasico según Tratamiento
--------------------------------------------------------------------------------
Error Estándar
--------------------------------------------------------------------------------
24 horas 3 47.25 1.97182 43.8383 50.6617
48 horas 3 53.2867 1.97182 49.875 56.6984
Control 3 52.4303 1.97182 49.0186 55.842
--------------------------------------------------------------------------------
Total 9 50.989
Esta tabla muestra la índice Profásico media para cada nivel de Tratamiento.
También muestra el error estándar de cada media, que es la medida de su
variabilidad en la muestra. El error estándar es el resultado de dividir la
desviación típica agrupada por la raíz cuadrada del número de
incluye cada media.
49
1.4 ANOVA SIMPLE - ÍNDICE METAFASICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: Índice Metafásico
Factor: Tratamiento

Metafásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice Metafásico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test
las medias.

27
Indice Metafasico
25
23
21
19
Tratamiento
Tabla ANOVA para índice Metafásico según Tratamiento
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 4.72996 2 2.36498 0.36 0.7134
Intra grupos 39.6936 6 6.6156
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 44.4235 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice Metafásico en dos

estadísticamente significativa entre las índice Metafásico medias de un nivel
50
Tabla de Medias para índice Metafásico según Tratamiento
--------------------------------------------------------------------------------
Error Estándar
--------------------------------------------------------------------------------
24 horas 3 21.9 1.48499 19.3306 24.4694
48 horas 3 23.5833 1.48499 21.014 26.1527
Control 3 22.252 1.48499 19.6826 24.8214
--------------------------------------------------------------------------------
Total 9 22.5784
Esta tabla muestra la índice Metafásico media para cada nivel de

incluye cada media.
51
1.5 ANOVA SIMPLE - ÍNDICE ANAFASICO SEGÚN TRATAMIENTO
Variable dependiente: índice Anafásico
Factor: Tratamiento

Anafásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice Anafasico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test
las medias.

23
Indice Anafasico
20
17
14
11
8
Tratamiento
Tabla ANOVA para índice Anafásico según Tratamiento
-------------------------------------------------------------------
Fuente Sumas de cuad. Gl Cuadrado Medio Cociente-F P-
Valor
--------------------------------------------------------------------
Entre grupos 76.4625 2 38.2312 3.30 0.1079
Intra grupos 69.4842 6 11.5807
--------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 145.947 8
El StatAdvisor
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice Anafásico en dos

estadísticamente significativa entre las índice Anafasico medias de un nivel
de Tratamiento a otro para un 95%
52
Tabla de Medias para índice Anafásico según Tratamiento
----------------------------------------------------------------
Error Estándar
Tratamiento Frec. Media (s agrupada) Límite inf. Límite
sup.
--------------------------------------------------------------------
--
24 horas 3 18.2133 1.96475 14.8139 21.6128
48 horas 3 11.43 1.96475 8.03053 14.8295
Control 3 12.8927 1.96475 9.4932 16.2921
--------------------------------------------------------------------
Total 9 14.1787
El StatAdvisor
Esta tabla muestra la índice Anafásico media para cada nivel de

incluye cada media.
53
1.6. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE TELOFÁSICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice Telofásico
Factor: Tratamiento

Telofásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice Telofásico para los 3 diferentes niveles de Tratamiento. El F-test
las medias.

18
Indice Telofasico
16
14
12
10
6
Tratamiento
Tabla ANOVA para índice Telofásico según Tratamiento
--------------------------------------------------------------------
Fuente Sumas de cuad. Gl Cuadrado Medio Cociente-F P-
Valor
--------------------------------------------------------------------
Entre grupos 1.44811 2 0.724057 0.03
0.9713
Intra grupos 148.588 6 24.7647
--------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 150.036 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice Telofásico en dos

grupos. El F-ratio, que en este caso es igual a 0,0292375, es el cociente de
la estimación entre grupos y la estimación dentro de los grupos. Puesto que
el p-valor del test F es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadísticamente significativa entre las índice Telofásico medias de un nivel
54
Tabla de Medias para índice Telofásico según Tratamiento
--------------------------------------------------------------------
Error Estándar
Tratamiento Frec. Media (s agrupada) Límite inf.
Límite sup.
--------------------------------------------------------------------
24 horas 3 12.6367 2.87314 7.66547 17.6079
48 horas 3 11.7 2.87314 6.72881 16.6712
Control 3 12.4253 2.87314 7.45414 17.3965
--------------------------------------------------------------------
Total 9 12.254
Esta tabla muestra la índice Telofásico media para cada nivel de

incluye cada media.
55
2. RECUENTO CELULAR EN EL TRATAMIENTO DE LAS RAICILLAS
DE Allium cepa L. (cebolla) FRENTE A 1-FENIL 3-METIL-5-[P-
DIMETILAMINOBENCILIDENAMINA] PIRAZOL
2.1. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE MITÓTICO SEGÚN TRATAMIENTOS

Variable dependiente: índice mitótico
Factor: tratamientos
Este procedimiento realiza un análisis de la varianza simple para indice
mitótico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios de
índice mitótico para los 3 diferentes niveles de tratamientos. El f-test en la
tabla de anova comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las
medias.

18
INDICE MITOTICO
15
12
0
24 HORAS 48 HORAS CONTROL
TRATAMIENTOS
56
Tabla ANOVA para INDICE MITÓTICO según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 162.499 2 81.2493 27.93 0.0009
Intra grupos 17.4511 6 2.90852
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 179.95 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice mitótico en dos

p-valor del test F es inferior a 0,05, hay diferencia estadísticamente
significativa entre el índice mitótico medias de un nivel de tratamientos a otro
para un nivel de confianza del 95%. Para determinar las medias que son
significativamente diferentes unas de otras, seleccione los Tests de Rangos
Múltiples.
Contraste Múltiple de Rango para INDICE MITOTICO según TRATAMIENTOS
--------------------------------------------------------------------------------
Método: 95.0 porcentaje LSD
TRATAMIENTOS Frec. Media Grupos homogéneos
--------------------------------------------------------------------------------
48 HORAS 3 6.639 X
24 HORAS 3 8.05667 X
CONTROL 3 16.2777 X
--------------------------------------------------------------------------------
Contraste Diferencias +/- Límites
--------------------------------------------------------------------------------
24 HORAS - 48 HORAS 1.41767 3.4073
24 HORAS - CONTROL *-8.221 3.4073
48 HORAS - CONTROL *-9.63867 3.4073
--------------------------------------------------------------------------------
* indica una diferencia significativa.
Esta tabla aplica un procedimiento de comparación múltiple para determinar

las medias que son significativamente diferentes unas de otras. La mitad
inferior de la salida muestra la diferencia estimada entre cada para de
medias. El asterisco que se encuentra al lado de los 2 pares, indica que
éstos muestran diferencias estadísticamente significativas a un nivel de
confianza 95%. En la parte superior de la página, se identifican 2 grupos
homogéneos según la alineación del signo X en la columna. Dentro de cada
columna, los niveles que tienen signo X forman un grupo de medias entre las
cuales no hay diferencias estadísticamente significativas. El método
actualmente utilizado para discernir entre las medias es el procedimiento de
las menores diferencias significativas de Fisher (LSD). Con este método,
hay un 5% de riesgo de considerar cada par de medias como
significativamente diferentes cuando la diferencia real es igual a 0.
57
2.2. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE INTERFASICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice interfásico
Factor: TRATAMIENTOS

interfásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice interfásico para los 3 diferentes niveles de tratamientos. El F-test
las medias.

INDICE INTERFASICO
97
94
91
88
85
82
TRATAMIENTOS
58
Tabla ANOVA para INDICE INTERFASICO según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 162.499 2 81.2493 27.93 0.0009
Intra grupos 17.4511 6 2.90852
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 179.95 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice interfásico en dos

p-valor del test F es inferior a 0,05, hay diferencia estadísticamente
significativa entre las índice interfásico medias de un nivel de tratamientos a
otro para un nivel de confianza del 95.0%. Para determinar las medias que
son significativamente diferentes unas de otras, seleccione los Tests de
Rangos Múltiples.
Contraste Múltiple de Rango para INDICE INTERFASICO según TRATAMIENTOS
--------------------------------------------------------------------------------
Método: 95.0 porcentaje LSD
TRATAMIENTOS Frec. Media Grupos homogéneos
--------------------------------------------------------------------------------
CONTROL 3 83.7223 X
24 HORAS 3 91.9433 X
48 HORAS 3 93.361 X
--------------------------------------------------------------------------------
Contraste Diferencias +/- Límites
--------------------------------------------------------------------------------
24 HORAS - 48 HORAS -1.41767 3.4073
24 HORAS - CONTROL *8.221 3.4073
48 HORAS - CONTROL *9.63867 3.4073
--------------------------------------------------------------------------------
* indica una diferencia significativa.
Esta tabla aplica un procedimiento de comparación múltiple para determinar

las medias que son significativamente diferentes unas de otras. La mitad
inferior de la salida muestra la diferencia estimada entre cada para de
medias. El asterisco que se encuentra al lado de los 2 pares, indica que
éstos muestran diferencias estadísticamente significativas a un nivel de
confianza 95%. En la parte superior de la página, se identifican 2 grupos
homogéneos según la alineación del signo X en la columna. Dentro de cada
columna, los niveles que tienen signo X forman un grupo de medias entre las
cuales no hay diferencias estadísticamente significativas. El método
actualmente utilizado para discernir entre las medias es el procedimiento de
las menores diferencias significativas de Fisher (LSD). Con este método,
hay un 5% de riesgo de considerar cada par de medias como
significativamente diferentes cuando la diferencia real es igual a 0.
59
2.3. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE PROFÁSICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice Profásico
Factor: tratamientos
profases. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice profases para los 3 diferentes niveles de tratamientos. El F-test en
la tabla de ANOVA comprobará si hay alguna diferencia significativa entre
las medias.

INDICE PROFASES
59
55
51
47
43
39
TRATAMIENTOS
60
Tabla ANOVA para INDICE PROFASES según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 35.2541 2 17.6271 0.39 0.6914
Intra grupos 269.348 6 44.8913
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 304.602 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice profásico en dos

estadísticamente significativa entre las índice Profásico medias de un nivel
de tratamientos a otro para un 95%.
61
2.4. ANOVA SIMPLE - INDICE METAFÁSICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice metafásico
metafásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice metafásico para los 3 diferentes niveles de tratamientos. El F-test
en la tabla de anova comprobará si hay alguna diferencia significativa entre
las medias. Si hay, los Tests de Rangos Múltiples le indicarán las medias
que son significativamente diferentes unas de otras. Si le preocupa la
presencia de valores atípicos, puede elegir el test Kruskal-Wallis que
compara las medianas en lugar de las medias. Los diferentes gráficos le
ayudarán a juzgar la significación práctica de los resultados, y le permitirán
buscar las posibles violaciones a las asunciones subyacentes en el análisis
de la varianza.

INDICE METAFASICO
29
26
23
20
17
14
TRATAMIENTOS
62
Resumen Estadístico para INDICE METAFÁSICO
TRATAMIENTOS Frecuencia Media Mediana Varianza Desviación típica Error

estándar
-------------------------------------------------------------------------------------
24 HORAS 3 19.9767 20.41 7.16333 2.67644 1.54524
48 HORAS 3 23.382 19.417 81.4049 9.02247 5.20912
CONTROL 3 22.551 22.613 1.79313 1.33908
0.773116
-------------------------------------------------------------------------------------
Total 9 21.9699 21.182 24.9546 4.99546 1.66515
Esta tabla muestra varios estadísticos de índice Metafásico para cada uno
de los 3 niveles de tratamientos. El análisis de la varianza simple está
pensado principalmente para comparar las medias de los diferentes niveles,
listados aquí bajo la columna Media.
Tabla ANOVA para INDICE METAFASICO según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 18.914 2 9.45702 0.31 0.7419
Intra grupos 180.723 6 30.1205
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 199.637 8
La tabla ANOVA descompone la varianza de índice metafásico en dos

estadísticamente significativa entre las Índice metafásico medias de un
nivel de tratamientos a otro para un 95%.
63
2.5. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE ANAFÁSICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice anafasico

anafásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice anafásico para los 3 diferentes niveles de tratamientos. El F-test
en la tabla de anova comprobará si hay alguna diferencia significativa entre
las medias.

INDICE ANAFASICO
15
12
0
TRATAMIENTOS
64
Resumen Estadístico para INDICE ANAFÁSICO

estándar
-------------------------------------------------------------------------------------
24 HORAS 3 6.38667 6.03 6.93363 2.63318 1.52027
48 HORAS 3 10.2727 9.709 39.922 6.31839 3.64792
CONTROL 3 9.00467 8.629 1.4341 1.19754 0.6914
-------------------------------------------------------------------------------------
Total 9 8.5546 8.629 15.0178 3.87528 1.29176
Esta tabla muestra varios estadísticos de índice anafásico para cada uno de
los 3 niveles de tratamientos. El análisis de la varianza simple está pensado
principalmente para comparar las medias de los diferentes niveles, listados
aquí bajo la columna Media.
Tabla ANOVA para INDICE ANAFASICO según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 23.5627 2 11.7814 0.73 0.5195
Intra grupos 96.5794 6 16.0966
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 120.142 8
La tabla anova descompone la varianza de índice anafásico en dos

grupos. El f-ratio, que en este caso es igual a 0,731918, es el cociente de la
p-valor del test f es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadísticamente significativa entre las índice anafásico medias de un nivel
65
2.6. ANOVA SIMPLE - ÍNDICE TELOFÁSICO SEGÚN TRATAMIENTOS
Variable dependiente: índice Telofásico

telofásico. Realiza varios tests y gráficos para comparar los valores medios
de índice telofásico para los 3 diferentes niveles de tratamientos. el f-test en
la tabla de anova comprobará si hay alguna diferencia significativa entre las
medias.

INDICE TELOFASICO
28
25
22
19
16
13
TRATAMIENTOS
Resumen Estadístico para INDICE Telofásico

estándar
-------------------------------------------------------------------------------------
24 HORAS 3 22.77 23.68 18.3873 4.28804 2.4757
48 HORAS 3 19.739 22.33 29.6415 5.4444 3.14333
CONTROL 3 17.701 17.259 1.52245 1.23388 0.712379
-------------------------------------------------------------------------------------
Total 9 20.07 19.095 17.2672 4.15538 1.38513
Esta tabla muestra varios estadísticos de índice Telofásico para cada uno de
los 3 niveles de tratamientos.
66
Tabla ANOVA para INDICE TELOFASICO según TRATAMIENTOS
------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------
Entre grupos 39.0352 2 19.5176 1.18 0.3692
Intra grupos 99.1025 6 16.5171
------------------------------------------------------------------------------
Total (Corr.) 138.138 8
la tabla anova descompone la varianza de índice telofásico en dos

grupos. el f-ratio, que en este caso es igual a 1,18166, es el cociente de la
p-valor del test f es superior o igual a 0,05, no hay diferencia
estadísticamente significativa entre las índice telofásico medias de un nivel
67
3. RECUENTO CELULAR EN EL TRATAMIENTO DE LAS RAICILLAS
DE Allium cepa L. (cebolla) FRENTE A 1-FENIL-3,4,6-TRIMETIL-
PiRAZOLO [3,4-b] PIRIDINA
3.1. ANOVA FACTORIAL - ÍNDICE MITÓTICO
Variable dependiente: índice mitótico
Factores: Tratamientos
Covariables: Acetona Inicial
Número de casos completos: 9
El Gráfico de Medias y el Gráfico de Interacción le ayudarán a

interpretar los efectos significantes.

15
Indice mitotico
12
0
Control Tratamiento 24
Tratamiento 48
Tratamiento
68
Análisis de la Varianza para Índice mitótico - Sumas de Cuadrados de Tipo III
--------------------------------------------------------------------------------
Fuente Suma de cuadrados GL Cuadrado Medio Cociente-F P-Valor
--------------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 0.0417985 1 0.0417985 0.01 0.9158
EFECTOS PRINCIPALES
A: Tratamiento 0.590625 2 0.295313 0.09 0.9178
RESIDUOS 16.919 5 3.3838

--------------------------------------------------------------------------------
TOTAL (CORREGIDO) 20.6826 8
--------------------------------------------------------------------------------
Los cocientes F están basados en el error cuadrático medio residual.
La tabla anova descompone la variabilidad de Índice mitótico en las

contribuciones debidas a varios factores. Puesto que se ha elegido la suma
de cuadrados Tipo III (valor por defecto), se ha medido la contribución de
cada factor eliminando los efectos del resto de los factores. Los P-valores
comprueban la importancia estadística de cada uno de los factores. Dado
que ningún P-valor es inferior a 0,05, ninguno de los factores tiene efecto
estadísticamente significativo en índice mitótico para un nivel de confianza
del 95%.
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para Índice mitótico

con 95.0 Intervalos de confianza
--------------------------------------------------------------------------------
Error Límite Límite
Nivel Frecuencia Media Estándar Inferior Superior
--------------------------------------------------------------------------------
Media Total 9 6.50222
Tratamiento
Control 3 7.7132 3.12405 -0.317443 15.7438
Tratamiento 24 3 6.11373 1.57726 2.05925 10.1682
Tratamiento 48 3 5.67974 2.06579 0.369446 10.99
--------------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice mitótico media para cada nivel de factores.
También presenta el error estándar de cada media, lo cual es una medida de
su variabilidad en la muestra. Las dos columnas de la derecha muestran
95% intervalos de confianza para cada una de las medias.
69
3.2. ANOVA FACTORIAL - ÍNDICE INTERFÁSICO
Variable dependiente: Índice interfásíco
Factores: Tratamientos
El Gráfico de Medias y el Gráfico de Interacción le ayudarán a interpretar los

efectos significantes.

101
Indice Interfasico
98
95
92
89
86
Tratamiento 48
Tratamiento
Análisis de la Varianza para Índice Interfásico - Sumas de Cuadrados de Tipo III

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 0.0417985 1 0.0417985 0.01 0.9158
EFECTOS PRINCIPALES
A:Tratamiento 0.590625 2 0.295313 0.09 0.9178
RESIDUOS 16.919 5 3.3838

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Los cocientes F están basados en el error cuadrático medio residual
La tabla anova descompone la variabilidad de índice interfásico en las

de cuadrados tipo iii (valor por defecto), se ha medido la contribución de
cada factor eliminando los efectos del resto de los factores. los p-valores
que ningún p-valor es inferior a 0,05, ninguno de los factores tiene efecto
estadísticamente significativo en índice interfasico para un nivel de confianza
del 95 %.
70
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para índice Interfasico
--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Tratamiento
Control 3 92.2868 3.12405 84.2562 100.317
Tratamiento 24 3 93.8863 1.57726 89.8318 97.9407
Tratamiento 48 3 94.3203 2.06579 89.01 99.6306
--------------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice Interfásico media para cada nivel de factores.
3.3. ANOVA FACTORIAL – ÍNDICE PROFASICO
Variable dependiente: Índice Profásico
Factores: Tratamiento


58
Indice Profasico
48
38
28
18
Tratamiento 48
Tratamiento
71
Análisis de la Varianza para Índice Profásico - Sumas de Cuadrados de Tipo III
--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 5.64392 1 5.64392 0.03 0.8640
EFECTOS PRINCIPALES
A:Tratamiento 25.938 2 12.969 0.07 0.9290
RESIDUOS 868.011 5 173.602

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
La tabla anova descompone la variabilidad de índice profásico en las

comprueban la importancia estadística de cada uno de los factores. dado
estadísticamente significativo en índice profásico para un nivel de confianza
del 95%.
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para Índice Profasico

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Tratamiento
Control 3 36.8062 7.84693 16.6349 56.9774
Tratamiento 24 3 32.8006 7.86862 12.5736 53.0276
Tratamiento 48 3 35.9666 8.5656 13.9479 57.9852
--------------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice Profasico media para cada nivel de factores.
72
3.4. ANOVA FACTORIAL - ÍNDICE METAFÁSICO
Variable dependiente: Índice Metafásico
El Gráfico de Medias y el Gráfico de Interacción le ayudarán a interpretar los

efectos significantes.

49
Indice Metafasico
44
39
34
29
24
19
Tratamiento 48
Tratamiento
Análisis de la Varianza para Índice Metafásico - Sumas de Cuadrados de Tipo III

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 9.38084 1 9.38084 0.26 0.6330
EFECTOS PRINCIPALES
A:Tratamiento 35.7253 2 17.8627 0.49 0.6385
RESIDUOS 181.733 5 36.3467

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Los cocientes F están basados en el error cuadrático medio residual
la tabla anova descompone la variabilidad de índice metafásico en las

estadísticamente significativo en índice metafásico para un nivel de
confianza del 95%.
73
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para Índice Metafásico
--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Tratamiento
Control 3 32.2579 6.97013 14.3405 50.1752
Tratamiento 24 3 32.0784 5.277 18.5134 45.6434
Tratamiento 48 3 27.6838 4.05105 17.2702 38.0973
--------------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice Metafásico media para cada nivel de factores.
95.0% intervalos de confianza para cada una de las medias.
74
3.5. ANOVA FACTORIAL - ÍNDICE ANAFÁSICO
Variable dependiente: Índice Anafasico


24
Indice Anafasico
21
18
15
12
9
Tratamiento 48
Tratamiento
75
Análisis de la Varianza para Índice Anafasico - Sumas de Cuadrados de Tipo III
--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 0.0296895 1 0.0296895 0.00 0.9658
EFECTOS PRINCIPALES
A:Tratamiento 11.1856 2 5.59278 0.38 0.7008
RESIDUOS 73.1868 5 14.6374

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
La tabla anova descompone la variabilidad de Índice Anafásico en las

que ningún P-valor es inferior a 0,05, ninguno de los factores tiene efecto
estadísticamente significativo en Índice Anafásico para un nivel de confianza
del 95%.
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para Índice Anafásico

--------------------------------------------------------------------------------
--------------------------------------------------------------------------------
Tratamiento
Control 3 13.624 2.4149 7.41625 19.8317
Tratamiento 24 3 16.6046 2.60382 9.91121 23.2979
Tratamiento 48 3 16.0148 2.24528 10.2431 21.7865
--------------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice Anafásico media para cada nivel de factores.
76
3.6. ANOVA FACTORIAL - ÍNDICE TELOFÁSICO

Variable dependiente: Índice Telofásico


40
Indice Telofasico
30
20
10
0
Tratamiento 48
Tratamiento
Análisis de la Varianza para Índice Telofásico -Sumas de Cuadrados de Tipo III

----------------------------------------------------------------------------
----------------------------------------------------------------------------
COVARIANTES
Acetona Inicial 105.335 1 105.335 0.78 0.4188
EFECTOS PRINCIPALES
A:Tratamiento 15.827 2 7.91349 0.06 0.9440
RESIDUOS 678.938 5 135.788

----------------------------------------------------------------------------
----------------------------------------------------------------------------
La tabla anova descompone la variabilidad de Índice Telofásico en las

que ningún P-valor es inferior a 0.05, ninguno de los factores tiene efecto
estadísticamente significativo en Índice Telofásico para un nivel de confianza
del 95%.
77
Tabla de Medias por mínimos cuadrados para Índice Telofásico
----------------------------------------------------------------------------
----------------------------------------------------------------------------
Tratamiento
Control 3 16.6371 7.78285 -3.36943 36.6436
Tratamiento 24 3 19.3718 7.69802 -0.416631 39.1603
Tratamiento 48 3 20.1645 6.72993 2.86457 37.4643
----------------------------------------------------------------------------
Esta tabla muestra la Índice Telofásico media para cada nivel de factores.
78
CONTROL DE AGUA FILTRADA
8 HORAS
48 HORAS
79
DESORDEN CROMOSONICA EN EL TRATAMIENTO CON SOLUCIÓN
DEL 0,1% DE 1-FENIL-3,6-DIMETIL-PIRAZOLO [ PIRIDIN-4-ONA
24 HORAS
48 HORAS
80
DESORDEN CROMOSONICA EN EL TRATAMIENTO CON SOLUCIÓN DEL
0,1% DE 1-FENIL 3-METIL-5-[P-DIMETILAMINOBENCILIDENAMINA]
PIRAZOL
24 HORAS
48 HORAS
81
DESORDEN CROMOSONICA EN EL TRATAMIENTO CON SOLUCIÓN
DEL 0,1% DE 1-FENIL-3,4,6-TRIMETIL-PiRAZOLO [3,4-b] PIRIDINA
24 HORAS
48 HORAS
82
ESPECTROS I.R DE LOS PRODUCTOS DERIVADOS DEL
5-AMINO-1-FENIL-3-METIL-PIRAZOL
5-AMINO -1-FENIL-3-METIL- PIRAZOL
1-FENIL-3,4,6-TRIMETIL-PIRAZOLO[3,4-B]PIRIDINA
83
1-FENIL-3-METIL-5-[P-DIMETILAMINOBENCILIDENAMINO]-PIRAZOL
1-FENIL-3,6-DIMETIL-PIRAZOLO [3,4-B]PIRIDINA-4-ONA
84
DISEÑO DEL TEST EN CELULAS MERISTEMATICAS DE Allium cepa L.
(CEBOLLA)
TRATAMIENTO DE LAS RAICILLAS DE Allium cepa L. (CEBOLLA) FRENTE A

LAS SUSTANCIAS SINTETIZADAS
85
RAICILLAS DE Allium cepa L. (CEBOLLA) PARA SU ENSAYO CITOTÁTICO
FRENTE A LAS SUSTANCIAS SINTETIZADAS
86

Tesis Doctorado - Segundo Saavedra Suarez PDF

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Tesis Doctorado - Segundo Saavedra Suarez PDF

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

INFORME DE TESIS PARA OPTAR EL GRADO DE DOCTOR EN

“SÍNTESIS DE COMPUESTOS HETEROCÍCLICOS DE

AUTOR: M.Sc. SEGUNDO FRANCISCO SAAVEDRA SUAREZ

ASESOR: Dr. JESUS GUILLERMO GALLARDO MELENDEZ

A MI PADRE QUE SE ENCUENTRAN CON NUESTRO SEÑOR JESUCRISTO, A MI

A MIS HIJOS: ALESSANDRO, PIERO, FABIANO Y GERALDINE

UN AGRADECIMIENTOA TODOS LOS DOCENTES Y AMIGOS

A USTEDES DOCENTES QUE FUERON MIS MAESTROS POR SU

ÍNDICE GENERAL iii

2.1.1. Material Químico 8

2.1.2. Material Biológico 8

2.1.3 Material de Laboratorio 8

2.2.1. Síntesis del 5-amino-1-fenil-3-metil-pirazol 9

2.2.2. Síntesis de 1-fenil-3,6-dimetil-pirazol [3,4-b] piridin-4-ona 10

2.2.3. Síntesis de 1-fenil-3-metil-5-(p-dimetilaminobenciliden-amino)-pirazol 11

2.2.4. Síntesis de 1-fenil-3,4,6-trimetil-pirazolo[3,4-b]-piridina 11

2.2.5. Ensayo citostático en raicillas de Allium cepa l. 12

El objetivo del presente trabajo fue investigar la síntesis de nuevos

PALABRAS CLAVES: Citostático, Heterocíclico y Aminopirazol.

KEYWORDS: Cytostatic, Heterocyclic and Aminopyrazole.

El cáncer, es un crecimiento tisular producido por la proliferación continua de

Puede originarse a partir de cualquier tipo de célula en cualquier tejido

Los carcinomas proceden de tejidos epiteliales como la piel o los epitelios

Los carcinomas de estructura similar a la piel se denominan carcinomas de

En el tercer subtipo se encuentran las leucemias y los linfomas, que incluyen

Todos los tumores, benignos y malignos, tienen dos componentes básicos

El cáncer es la segunda causa principal de muerte detrás de las

Los citostáticos son fármacos capaces de inhibir el crecimiento desordenado

Según sus efectos farmacológicos, pueden ser: agentes alquilantes,

Los citostáticos tienen un gran peligro toxicológico, que puede afectar al

La mayoría de citostáticos han demostrado propiedades mutagénicas,

Los compuestos heterocíclicos constituyen una importante familia dentro de

Un compuesto heterocíclico es una sustancia que contiene un anillo formado

Dentro de la amplia variedad de compuestos heterocíclicos se

También es importante mencionar otro tipo de enfermedades relacionadas

(Gilligan, He, y Clark, 2009) (MacArthur, y Borsini, 2006) (Yaryura-Tobias,

El método más común de síntesis de esta ceto-amina consiste en la reacción

(Insuasty et al, 2006)

Posteriormente el mismo Michaelis, y luego Stolz, reportaron la obtención de

(Insuasty et al, 2006)

Claisen sintetizó este aminopirazol a partir del 5-metil-isoxazol, por ebullición

Un interesante aporte para demostrar la validez del mecanismo propuesto

La reactividad de la 3-metil-1- fenil -2-pirazolin - 5- ona, guarda relación

La alta tasa de mortalidad causada por los diferentes tipos de cáncer y el

Todos los antecedentes condujeron a investigar Cuáles son los compuestos

Se planteó como hipótesis, que los compuestos heterocíclicos sintetizados

2.1.2. MATERIAL BIOLÓGICO

2.1.3. MATERIAL DE LABORATORIO.-

2.1.3.2. MATERIAL DE VIDRIO Y OTROS:

2.1.3.3. REACTIVOS : Grado ACS ( American Chemical Society)

2.2.1. SÍNTESIS DEL 5-AMINO -1- FENIL-3-METIL-PIRAZOL,

5-amino -1- fenil-3-metil-pirazol

Se disolvieron 6,9g de β-amino-crotonitrilo en 14 ml de alcohol absoluto y

2.2.2. SÍNTESIS DE 1-FENIL-3,6-DIMETIL- PIRAZOLO [3,4-b]-

1-fenil-3,6-dimetil- pirazolo [3,4-b]-piridin-4-ona

En un balón de 100 ml. con refrigerante a reflujo y tubo desecante de

En un balón equipado con refrigerante a reflujo provisto de un tubo

2.2.4 SíNTESIS DE 1-FENIL-3,4,6-TRIMETIL- PIRAZOLO [3,4-b]-

1-fenil-3,4,6-trimetil- pirazolo [3,4-b]-piridina

2.2.5. ENSAYO CITOSTÁTICO EN RAICILLAS DE AlIium cepa L.

Para identificar que los compuestos heterocíclicos tienen efecto citostático