a-Amilasa

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Alfa-amilasa
Salivary alpha-amylase 1SMD.png
Amilasa salival humana; se puede observar un ion calcio en color amarillo, y un ion
cloruro en verde. Adaptado de PDB 1SMD1?
Estructuras disponibles
PDB
Estructuras enzim�ticas[mostrar]
Identificadores
Identificadores
externos
Bases de datos de enzimas[mostrar]
N�mero EC 3.2.1.1
N�mero CAS 9000-90-2
Ontolog�a G�nica[mostrar]
Ort�logos
Especies
Humano Rat�n
PubMed (B�squeda)
[1]

PMC (B�squeda)
[2]
vde
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?-Amilasa
PDB 1cyg EBI.jpg
Ciclodextrina glucanotransferasa (EC 2.4.1.19) (cgtasa)
Identificadores
S�mbolo Alfa-amilasa
Pfam PF00128
InterPro IPR006047
SCOP 1ppi
Familia OPM 125
Prote�na OPM 1wza
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?-Amilasa
PDB 1rp8 EBI.jpg
Estructura cristalina de la isoenzima 1 alfa-amilasa de cebada (amy1). Mutante
inactiva d180a acomplejada con maltoheptaosa
Identificadores
S�mbolo Alpha-amyl_C2
Pfam PF07821
InterPro IPR012850
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?-Amilasa
PDB 5cgt EBI.jpg
Complejo con maltotriosa de una ciclodextrina glicosiltransferasa mutante
preacondicionada
Identificadores
S�mbolo Alpha-amylase_C
Pfam PF02806
InterPro IPR006048
SCOP 1ppi
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La a-amilasa (alfa-amilasa) es una enzima (EC 3.2.1.1) que cataliza la hidr�lisis
de los enlaces alfa-glucos�dicos, de los polisac�ridos alfa glucos�dicos de alto
peso molecular, tales como el almid�n y el gluc�geno, liberando glucosa y
maltosa.2? Es la principal amilasa encontrada en humanos y otros mam�feros.3?
Tambi�n se encuentra presente en semillas que contienen almid�n como reserva
alimenticia, y es secretada por muchos hongos.

�ndice
1 Fisiolog�a humana
1.1 Amilasa salival (ptialina)
1.1.1 Condiciones �ptimas para la ptialina
1.2 Variaciones gen�ticas de la amilasa salival en humanos
1.2.1 Amilasa pancre�tica
1.3 En patolog�a
1.3.1 Interpretaci�n
1.4 Genes
2 En granos
3 Usos industriales
4 Inhibici�n por buffer
5 Determinaci�n
6 Arquitectura de dominios
7 V�ase tambi�n
8 Referencias
9 Enlaces externos
Fisiolog�a humana
Aunque se encuentra en muchos tejidos, la amilasa es m�s prominente en el jugo
pancre�tico y saliva, los cuales poseen cada uno su propia isoenzima de a-amilasa
humana. Estas enzimas tienen un comportamiento diferentes en el isoelectroenfoque,
y pueden ser separadas en determinaciones utilizando anticuerpos monoclonales. En
los seres humanos, todas las formas de amilasa se encuentran codificadas en el
cromosoma 1 (1p21, v�ase AMY1A).

Amilasa salival (ptialina)

La saliva contiene amilasa que hidroliza el almid�n para formar maltosa y dextrina.
Esta isoforma de la amilasa se conoce tambi�n como ptialina, nombrada as� por el
qu�mico sueco J�ns Jacob Berzelius, el nombre deriva de la palabra griega pt??
(ptio, escupir), debido a que la sustancia se obtuvo de la saliva.4? La ptialina
hidroliza las grandes mol�culas de almid�n insoluble, para formar almidones
solubles (amilodextrina, eritrodextrina y acrodextrina), produciendo sucesivamente
mol�culas de almidones cada vez m�s peque�as, hasta formar al final maltosa. La
ptialina act�a sobre los enlaces glicos�dicos a(1,4), pero la hidr�lisis completa
requiere de una enzima que act�e adem�s sobre los productos ramificados. La amilasa
salival resulta inactivada en el est�mago por el �cido g�strico. En el jugo
g�strico a pH 3,3 la ptialina resulta totalmente inactivada en 20minutos a 37�C. En
contraste, luego de 150 minutos en jugo g�strico a pH 4,3, a�n se retiene el 50% de
la actividad amilasa.5? Tanto el almid�n, el sustrato para la ptialina, como el
producto, pol�meros de glucosa de cadena corta, son capaces de protegerla
parcialmente contra la inactivaci�n debida al �cido g�strico. Al a�adir ptialina a
una soluci�n tamponada a pH 3,0, esta resulta totalmente inactivada en 120 minutos;
sin embargo la adici�n de almid�n al 0,1% produce que luego de 120 minutos la
soluci�n a�n conserve 10% de actividad amilasa; y la adici�n de almid�n al 1,0
permite el mantenimiento del 40% de la actividad amilasa a los 120 minutos.6?

Condiciones �ptimas para la ptialina

pH �ptimo - 5.5 a 8.07?
Temperatura �ptima - 37�C
Presencia de ciertos i�nes y activadores:
Cloruro y bromuro - son los m�s efectivos
Ioduro � menos efectivo
Sulfato y fosfato � son los menos efectivos
Variaciones gen�ticas de la amilasa salival en humanos
El gen de la amilasa salival ha sufrido duplicaciones durante la evoluci�n, y los
estudios de hibridaci�n de ADN indican que muchos individuos poseen m�ltiples
repeticiones en t�ndem del gen. El n�mero de copias del gen se correlaciones con
los niveles de amilasa salival, como puede ser medida por ensayos tipo blot
utilizando anticuerpos contra la amilasa humana. El n�mero de copias del gen se
encuentra aparentemente asociado con la exposici�n evolutiva a dietas ricas en
almid�n.8? Por ejemplo, un individuo japon�s posee 14 copias del gen de la amilasa
(un alelo con 10 copias, y un segundo alelo con cuatro copias). La dieta japonesa,
tradicionalmente, contiene grandes cantidades de almid�n proveniente del arroz. En
contraste, un individuo de la etnia biaka posee solo seis (tres copias en cada
alelo). Los biaka son cazadores-recolectores de la selva h�meda que
tradicionalmente han consumido bajas cantidades de almid�n en su dieta. Perry y
colegas han especulado que este aumento en el n�mero de copias del gen de la
amilasa salival pudo haber desempe�ado un papel en el aumento de la supervivencia
durante la transici�n a dietas ricas en almid�n durante la evoluci�n humana.8?

Amilasa pancre�tica
La a-amilasa pancre�tica escinde aleatoriamente los enlaces a(1-4) glicos�dicos de
la amilosa para producir dextrina, maltosa, o maltotriosa. Esta enzima adopta un
mecanismo de doble desplazamiento con retenci�n de la configuraci�n anom�rica.

En patolog�a
La determinaci�n de amilasa en sangre es mucho m�s sencilla de llevar a cabo que la
de lipasa, haciendo de esta determinaci�n la elecci�n primaria para la detecci�n y
monitorizaci�n de pancreatitis. Los laboratorios m�dicos por lo general miden ya
sea la amilasa pancre�tica o la amilasa total. Si solo se mide la amilasa
pancre�tica, un aumento de esta no tendr� relaci�n con paperas o alg�n otro tipo de
inflamaci�n o trauma de las gl�ndulas salivales.

Sin embargo, debido a la muy peque�a cantidad presente en sangre, la sincronizaci�n

y rapidez es esencial cuando se hace la extracci�n de sangre para esta medici�n. La
sangre deber�a ser tomada muy poco tiempo despu�s de la aparici�n de un c�lico de
dolor pancre�tico, porque de otra forma, la enzima r�pidamente es excretada por los
ri�ones hacia la orina.

La a-amilasa salival ha sido utilizada como un biomarcador de estr�s que no

requiere de una extracci�n de sangre.9?

Interpretaci�n
Se encuentran niveles elevados de amilasa en plasma en:

Trauma de las gl�ndulas salivales (incluyendo la intubaci�n anest�sica).

Paperas � debido a la inflamaci�n de las gl�ndulas salivales.
Pancreatitis � debido al da�o que se produce en las c�lulas que fabrican la
amilasa.
Fallo renal � debido a una excreci�n disminuida.
Una amilasa total con valores 10 veces o m�s por encima del l�mite superior de
referencia es sugestiva de una pancreatitis. De cinco a diez veces el valor normal
puede indicar una afecci�n del �leo o duodeno, o un fallo renal, y elevaciones m�s
bajas son hallazgos frecuentes en enfermedades de las gl�ndulas salivales.

Genes
Salival - AMY1A, AMY1B, AMY1C
Pancre�tica - AMY2A, AMY2B
En granos
La actividad a-amilasa en granos se mide, por ejemplo en el n�mero de ca�da de
Harberg-Perten, un ensayo que sirve para determinar los da�os debidos a brotaci�n
en los granos,10? o en el m�todo Phadebas.
Usos industriales
La a-amilasa se utiliza para la producci�n de etanol, para hidrolizar los almidones
presentes en los granos y producir az�cares fermentables.

El primer paso en la producci�n del jarabe de ma�z de alta fructosa es el

tratamiento del almid�n de ma�z con a-amilasa, produciendo cadenas cortas de
oligosac�ridos.

Una a-amilasa llamada "Termamyl", extra�da de Bacillus licheniformis, se utiliza

tambi�n en algunos detergentes, especialmente en detergentes para el lavado de
platos y para la remoci�n de almid�n.11?

V�ase amilasa para mayor informaci�n sobre los usos de la familia de las amilasas
en general.

Inhibici�n por buffer

Se ha publicado que la mol�cula de tris es capaz de inhibir un cierto n�mero de a-
amilasas bacterianas,12?13? por lo que no deber�an ser utilizadas en un medio
tamponado con un buffer tris.

Determinaci�n
Existen varios m�todos disponibles para la determinaci�n de la actividad a-amilasa,
y diferentes industrias tienden a utilizar diferentes m�todos. El test de almid�n-
ioduro, un desarrollo del test de yodo, se basa en un cambio de color, ya que la a-
amilasa degrada el almid�n, este test es de uso com�n en numerosas aplicaciones. Un
test similar aunque de producci�n industrial es el ensayo de Phadebas para amilasa,
el cual se utiliza como un ensayo cuali y cuantitativo en muchas industrias, tales
como las de detergentes, varias harinas, granos y alimentos malteados, como as�
tambi�n en biolog�a forense.

Arquitectura de dominios
Las a-amilasas contienen varios dominios proteicos diferentes. El dominio
catal�tico posee una estructura secundaria consistente en ocho barriles alfa/beta
encadenados que contienen el sitio activo, interrupido por un dominio de uni�n al
calcio formado por unos 70 amino�cidos que protruye entre la tercer l�mina beta y
la tercer h�lice alfa, y un dominio carboxiterminal barril beta con un motivo de
clave griega.14? Varias alfa-amilasas contienen un dominio con forma de l�mina
beta, por lo general en el extremo C-terminal. Este dominio se encuentra formado
por cinco cadenas antiparalelas en configuraci�n de l�mina beta.15?16? Adem�s
varias alfa-amilasas contienen tambi�n un dominio todo-beta, por lo general en el
extremo C-terminal.17?