Taller nº 1

1.Realice un cuadro comparativo de las estructuras de los dos tipos de células,

tanto en las diferencias como en similitudes

2. ¿Qué factores definen el crecimiento de los microorganismos?. Defina y

explique.
Los factores que definen el crecimiento microbiano pueden dividirse en 2 categorías
principales. Físicas y químicas.
 Físicas: comprenden temperatura, PH, y la presión osmótica
 Química: incluyen las fuentes de carbono, nitrógeno, azufre, fosforo,
oligamentos, oxígeno y factores de crecimiento orgánicos.
Físicas
 Temperatura: La mayor parte de los microorganismos, crecen bien a
temperaturas preferidas por los seres humanos. Sin embargo ciertas bacterias
pueden desarrollarse a temperaturas extremas que por cierto impedirían la
supervivencia de casi todos los organismos eucariontes.

La temperatura mínima de crecimiento, es la temperatura más baja, a la cual

crecerá la especie.
La temperatura óptima de crecimiento, es la temperatura a la cual la especie
crecerá mejor
 La temperatura máxima de crecimiento, es la temperatura más elevada en la
cual es posible el crecimiento.

 PH: se refiere a la acidez o alcalinidad de una solución, la mayoría de bacterias

crecen en un rango d PH estrecho, cercano a la neutralidad (6.5 y 7.5) y muy
pocas bacterias crecen en un PH acido por debajo de 4. No obstante algunas
bacterias, denominadas acidofilas toleran naturalmente la acidez.

 Quimioautotrofas: Aguas de desagüe de las minas de carbón oxidan el

azufre, para tomar ácido sulfúrico vivir a un valor de PH 1.
Los hongos filamentosos, y las levaduras crecerán en valores de PH más
amplios que las bacterias, si bien su PH optimo suele ser menor que el de las
bacterias (5 a 6).

 Presión osmótica: la importancia de este fenómeno radica en que el

crecimiento de la célula se inhibe cuando la membrana plasmática se separa de
la pared celular. En consecuencia al agregado de sales u otro soluto a una
solución y el aumento consiguiente de la presión osmótica puede utilizarse para
conservarlos.
 Químicos:

 Carbono: Además del H2O uno de los requerimientos más importantes para el
crecimiento microbiano es el carbono. Ya que este elemento constituye la
estructura básica de la materia viva, es necesario para todos los compuestos
orgánicos que forman una célula viva. La mitad del peso seco de una célula
bacteriana típica es carbono.

 Nitrógeno, azufre, fosforo: la síntesis de proteínas requiere cantidades

considerables de nitrógeno, así como de azufre. La síntesis de ADN y ARN
también requieren nitrógeno y algo de fosforo, lo mismo que la síntesis de ATP.
El Nitrógeno constituye cerca del 14 % del peso seco de una célula bacteriana y
el azufre y el fosforo, lo mismo que la síntesis de ATP.
Los microrganismos utilizan nitrógeno sobre todo para formar el grupo amino de
los aminoácidos de las proteínas.
Muchas bacterias cubren este requerimiento mediante la descomposición de
materia que contengan proteínas reincorporen los aminoácidos en proteínas
recién sintetizadas y otros compuestos que contiene nitrogeno.

 Oligamentos: los microorganismos requieren cantidades muy pequeñas de

otros elementos minerales como hierro, cobre y zinc estos denominados
oligamentos. Casi todos son esenciales para las funciones de ciertas enzimas,
por lo general cofactores.
Agua de canilla y otros elementos del medio.
 Oxigeno: estamos acostumbrados a pensar en el oxígeno molecular como
elemento necesario para la vida, pero en cierto sentido es un gas venenoso.
Los microbios que utilizan oxigeno molecular (aerobios) producen mas energía
a partir de los nutrientes, que los que utilizan oxigeno (anaerobio). Los
organismos que requieren oxígeno para vivir se denominan aerobios estrictos.

 Factores de crecimiento orgánico: compuestos orgánicos esenciales que un

organismo no puede sintetizar.
Pueden obtenerse directamente del ambiente.
 Las vitaminas constituyen un grupo de factores de crecimiento orgánico para los
seres humanos, la mayoría de ellos actúa como cofactores orgánicos que
necesitan ciertas enzimas para poder actuar.
Otros factores de crecimiento orgánico son aminoácidos, purinas y las
pirimidinas

3. Como se clasifican los microorganismos según los factores de crecimiento

microbiano ( temperatura, pH, fuente de energía, fuente de carbono, presión de
oxigeno etc.).
Según su:
 Temperatura
Mínima optima máxima
 Sicrofilos: 0ºC 4ºC 10ºC
 Mesofilos: 10ºC 37ºC 45ºC
 Termófilos: 40ºC 60ºC 69ºC
 Hipertermofilos: 69ºC 88ºC 90ºC

 También están los psicrotolerantes que son capaces de creer a bajas

temperaturas pero que también pueden crecer a una temperatura optima por
encima de 20ºC.

 PH
 Acidófilos; Son los microorganismos que viven a valores de pH por debajo de
2. En general los hongos tienden a tolerar valores de pH más ácidos que las
eubacterias.
 Alcalófilos: Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH
superiores a 10.
 Neutrófilos: Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH cercano
a la neutralidad (pH 6.0 a 8.0)

 Presión osmótica
 Halófilos extremos: crecen en concentraciones de sales elevadas 30%
 Halófilos estrictos: provienen de aguas saladas
 Halófilos facultativos: crecen en concentraciones salinas de 2%, no requieren
concentraciones altas de sales

 Carbono
 Quimioheterotrofos: obtiene la mayor parte de su carbono de la fuente de su
energía
 Quimioautotrofos y fotoautotrofos: obtiene su carbono del dióxido de
carbono.

 Nitrógeno, azufre y fosforo

 Cianobacterias fotosintetizadoras: utilizan nitrógeno gaseoso (N2)
directamente de la atmosfera.

 Oxigeno
 Aerobios: utilizan oxigeno molecular
 Anaerobios: no utilizan oxígeno.
  Aerobios estrictos: requieren oxígeno para vivir
 Anaerobios facultativos: crecen aun en ausencia de oxígeno, por fermentación
o respiración anaerobia.
 Anaerobias estrictos: no pueden utilizar el oxígeno molecular en las reacciones
que producen energía.
 Anaerobios Aerotolerantes: No pueden utilizar oxígeno para su crecimiento
pero lo toleran.
 Bacterias microaerofilas: son microorganismos aerobios que requieren
oxígeno, sin embargo crecen en concentraciones de oxigeno menores que las
presentes en el aire.

1. ¿Que son micronutrientes y micronutrientes?

Los micronutrientes son aquellas sustancias químicas, que ingeridas en pequeñas
cantidades, permiten regular los procesos metabólicos y bioquímicos de nuestro
organismo: son las vitaminas y los minerales sustancias de carácter orgánico e
inorgánico que cumplen una función esencial en nuestro proceso nutritivo ya que nos
aporta energía. Hierro, flúor, yodo, manganeso, en cantidad
Macronutrientes: son aquellos nutrientes que suministran la mayor parte de energía
metabólica del organismo.
Los principales son glúcidos, proteínas y lípidos, otros incluyen alcohol y ácidos
orgánicos. Son necesarios en pequeñas unidades para mantener la salud pero no para
producir energía. Carbono, hidrogeno, oxigeno, nitrógeno.
2. Que son medios de cultivo; según su naturaleza como se clasifican?
Un medio de cultivo, es un material nutritivo preparado para el crecimiento de
microorganismos en un laboratorio.
Se clasifican en:
Según sus cualidades físicas
 líquidos
 semisólidos
 sólidos
 Gaseosos
Según su origen
Naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o
vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se
conoce exactamente.
Sintéticos: son los medios que contienen una composición química definida
cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
Semisintéticos: son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo
una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.
Según su formulación
Químicamente definidos: se conoce la cantidad exacta de cada uno de los
compuestos que hay en el medio.
Complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura, sangre,
etc.); no se conoce exactamente cuál es la composición del medio; sin embargo,
presenta la ventaja de que ya están presentes todos o casi todos los elementos que una
célula puede requerir.
Según su uso
Medio general: medio en donde crecen todo tipo de microorganismos, excepto los que
necesitan condiciones especiales (por ejemplo, agar CLED).
Medio selectivo: permite seleccionar el crecimiento de una especie o grupo
determinado (hongos, bacterias entéricas, protozoos...).
Medio diferencial: permite identificar una especie con otra, ambas en el mismo medio.
Puede ser por su crecimiento, su metabolismo, su respiración, etc.
Medio de enriquecimiento: contiene los nutrientes necesarios para apoyar el
crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, se utiliza para la cosecha de
diferentes tipos de microorganismos en un mismo medio.
Medio mínimo: contiene la mínima cantidad de nutrientes posible que permite el
crecimiento de una especie.
3. Como se clasifican los medios de cultivo según la naturaleza química y
funcionalidad?
Complejo: crecimiento de la mayoría de organismos quimioheterotrofos.
Selectivo: crecimiento anaerobio estrictos
Reductor: su presión de microorganismos no deseados, favorece el crecimiento de los
microrganismos deseados
4. Que son inhibidores en los medios de cultivo, para que se utilizan? Explique.
Son sustancias añadidas a medios de cultivos selectivos que impiden totalmente el
crecimiento de una población microbiana. Se denominan inhibidores, podrían
considerarse como una variante restrictiva selectiva.
5. Que son indicadores de pH, menciónelos. Qué función cumplen en los medios
de cultivo.
Un indicador de pH es una sustancia que permite medir el pH de un medio.
Habitualmente, se utilizan como indicador de las sustancias químicas que cambian su
color al cambiar el pH de la disolución. Los indicadores Ácido-base tienen un intervalo
de viraje de una unidad arriba y otra abajo de pH, en la que cambian la disolución en la
que se encuentran de un color a otro, o de una disolución incolora, a una coloreada.
Los más conocidos son el naranja de metilo, que vira en el intervalo de pH 3,1 - 4,4, de
color rojo a naranja, y la fenolftaleína, que vira desde un pH 8 hasta un pH 10,
transformando disoluciones incoloras en disoluciones con colores rosados / violetas.
6. Como se mide o como se hace el conteo de microorganismos? ( Medición
decrecimiento de los microorganismos). Qué métodos existen, explique.

Recuento en placa
Filtración
Número más probable
Cuanto mayor sea el número de bacterias en una muestra mayor será la dilución
necesaria para reducir la densidad hasta el punto en el cual no se desarrolle ninguna
bacteria
Recuento
microscópico directo
Es el método más frecuente para determinar el número total de células en muestras
líquidas o secas se utiliza, cámaras de recuento especiales.
Turbidimetría
Se mide con la reducción de la transmisión de luz debido a las células dispersan en la
suspensión y cuantifica la luz residual transmitida.
* Espectrofotómetro
Longitud de onda:
Bacterias 540 nm
Protozoarios 580 nm
Levaduras 600 nm

Neftelometría
Basado en la dispersión de la radiación, atravesando las partículas suspendidas en la
solución. Se mide la intensidad de la luz dispersada.
El Crecimiento de las poblaciones microbianas puede medirse de diferentes maneras:
Directos
Indirectos
Algunos métodos determinan el número de células

Otros métodos determinan la masa total de la población que a menudo es

directamente proporcional al número de células la magnitud de la población
normalmente se indica cómo en número de células que hay en 1mL de líquido o en 1g
de material sólido.

El recuento en placa se basa en la suposición de que cada bacteria crece y se divide

para producir una sola colonia, no obstante esto no es siempre cierto:
las bacterias con frecuencia crecen en cadenas o grumos, según sea la dimensión de
división
Medida de la Biomasa

PESO HUMEDO
Se obtiene a partir de una muestra en suspensión que es pesada luego de la
separación de las células por filtración o centrifugación.
Técnica útil para grandes volúmenes de muestra
PROCEDIMIENTO
Tomar muestras de 5 mL de la solución inicial y colocar en 3 tubos de ensayo
previamente pesados.
Llevar los tubos a la centrífuga a 4000 rpm, por un tiempo de 10 minutos.
Luego pesar cada tubo de ensayo en la balanza analítica, anotamos los pesos y se
saca un promedio.
Cuando se realiza recuento en placa es importante tener cuidado de que sólo crezca
un número limitado de colonias en la placa, con el fin de que el desarrollo de las
bacterias no se vea perjudicado.

PESO SECO
Esta técnica permite el crecimiento Homogéneo de las colonias, dentro y fuera de la
superficie del agar
VENTAJAS
Útil para grandes volúmenes de muestra
DESVENTAJAS
Bajo costo
Componentes volátiles de la célula pueden perderse por el secado y puede existir
alguna degradación.
Éste método presenta algunos inconvenientes:
La muestra seca puede recobrar humedad durante el pesado, principalmente si el
ambiente tiene una humedad relativa alta.
Ciertos microorganismos sensibles al calor pueden dañarse con el agar fundido se
presentan alteraciones en los resultados con agares selectivos y se dificulta la
manipulación de las colonias internas en el agar
Es importante mencionar que el método de Peso Seco nos sirve para medir el
crecimiento de los organismos filamentosos y los mohos.
Se usa en muestras con contenido bacteriano muy bajo, como muestras de aguas

7. Que pruebas se utilizan para identificar un microorganismo. Explique con un

ejemplo.
 Métodos basados en criterios morfológicos
 Métodos basados en tinción diferencial
 Pruebas bioquímicas
 Tinciones

Tinción de Gram; Consiste en añadir una serie específica de pigmentos y mordientes

a una muestra de laboratorio, logrando así una tinción rosada o violeta, dependiendo
del tipo de bacteria: las Gram positivas responden al pigmento y aparecerán al
microscopio en color morado; mientras que las Gram negativas resisten la tinción y lo
harán de color rojo o rosado.
Esta diferencia de respuesta acusa una composición de la envoltura celular distinta, ya
que las grampositivas poseen una gruesa capa de peptidoglicano (mureína), lo cual les
confiere gran resistencia pero las hace retener mucho mejor el tinte.
Las gramnegativas, en cambio, poseen una doble membrana de lípidos en su envoltura,
por lo que requieren de una capa de peptidoglicano mucho más delgada y, por ende, no
se tiñen de la misma manera.
Este método revela una tipología bacteriana natural, útil a la hora de identificar la
especie y sobre todo el antibiótico requerido para combatirla.

8. Defina curva de crecimiento microbiano. Explique.

La curva de crecimiento microbiano muestra el crecimiento de las células en función del
tiempo. Hay 4 fases básicas de crecimiento.

Fase de retraso: periodo de escasa o nula división celular. Puede durar 1 hora o varios
días, sin embargo durante este tiempo las células no están inactivas.
Fase logarítmica o exponencial: La célula empieza a dividirse y entra en un periodo
de crecimiento o de incremento en la reproducción celular, alcanza una actividad
máxima durante este periodo y su tiempo de generación llega a un mínimo constante.
Como su tiempo de generación es constante la representación logarítmica de
crecimiento durante esta fase es una línea recta.
Fase estacionaria: periodo de equilibrio.
Las razones de cese de crecimiento exponencial no siempre son claras, se supone que
el agotamiento de los nutrientes, la acumulación de productos de desechos y los
cambios perjudiciales de PH pueden participar en este proceso.

Fase de declinación: al final el número de muertes supera al número de nuevas células

formadas. Esta fase continúa hasta que la población disminuye en una pequeña fracción
de células más resistentes o hasta que todas sus integrantes mueran.

9. ¿Qué es tiempo de generación?

Se le denomina tiempo de generación, al tiempo necesario para que una célula se
divida y su población se duplique.
Para calcular el tiempo de generación de las bacterias solo consideramos la
reproducción binaria, que de hecho es el método más frecuente. La división de una
célula produce dos células, la división de dos células produce 4 células.
10. Que aplicabilidad tiene la curva de crecimiento.
Mostrar el crecimiento de las células en función del tiempo.
Mostrar el aumento exponencial de una población, graficada de forma logarítmica
(línea interrumpida) y aritmética (línea llena)

11. Defina cultivo continuo o discontinuo.

 Un cultivo continuo es un sistema abierto con volumen constante, al que
continuamente se añade medio fresco de un reservorio y del cual se retira medio
usado que contiene microorganismos y sustancias de desechos a una velocidad
constante.
Por lo tanto el medio se renueva y su composición no cambia a lo largo del
tiempo, lo que permite mantener el crecimiento de la población en forma
indefinida, una vez alcanzado el estado de equilibrio.
Mediante el cultivo continuo es posible estudiar el efecto sobre el proceso de
variables como PH, temperatura, concentración de nutrientes, etc., manteniendo
constante el valor de m, o bien, fijadas las anteriores, analizar el efecto de m
sobre el proceso. De este modo es posible separar los distintos efectos y obtener
información valiosa para la mejora del proceso.
 El método de cultivo más simple es el cultivo discontinuo en el que el
microorganismo crece a partir de una limitada cantidad de medio hasta que se
agota un nutriente esencial o se acumulan productos tóxicos hasta niveles que
inhiben el crecimiento. En un sistema discontinuo el cultivo pasará por una serie
de fases.

El crecimiento no comienza inmediatamente después de la inoculación del medio

de cultivo, el periodo previo al crecimiento activo se denomina fase de
latencia que puede considerarse como un período de adaptación.
12. Que características tienen dichos cultivos, realice un cuadro comparativo.
 Cultivo continuo Cultivo discontinuo
El cultivo continuo opera bajo Crece a partir de una limitada cantidad de
condiciones de un estado de equilibrio ya medio hasta que se agota un nutriente
que las concentraciones de todos los esencial o se acumulan productos tóxicos
componentes del cultivo son constantes. hasta niveles que inhiben el crecimiento.

El cultivo continuo opera bajo El cultivo discontinuo, en la fase

condiciones limitantes de sustratos exponencial, funciona en presencia
de exceso de sustrato
La velocidad de crecimiento en el Por el contrario la velocidad
cultivo continuo está controlada por la específica de crecimiento en la fase
velocidad de dilución ( y por bajo el exponencial de un cultivo discontinuo
control del operario) y su valor es siempre alcanzará la µmax correspondiente a
menor que el de la velocidad las condiciones que prevalezcan en el
especifica de crecimiento máxima, cultivo.

13. Que son interacciones microbianas, explique cada una.

Neutralismo
El neutralismo ocurre entre poblaciones microbianas que están distantes en el
espacio. Establecen la falta de interacción entre dos poblaciones microbianas.
Comensalismo
En esta relación, una población obtiene un beneficio en tanto que la otra no resulta
perjudicada.
Sintrofía: aportan nutrientes mutuamente necesarios.
ej. E. faecalis y Escherichia coli
Mutualismo
Es una relación obligada entre dos poblaciones, en las que ambas se benefician; es
altamente especifica, normalmente un miembro de la asociación no puede ser
sustituida por ninguna otra especie relacionada.
Ejemplos: Bacterias fijadoras del Nitrogeno.
Competencia
Tiene lugar cuando dos poblaciones usan un mismo recurso, ya sea el espacio o el
nutriente limitante.
La competencia tiende a producir separaciones ecológicas de poblaciones
estrechamente relacionadas; es lo que se conoce como principio de exclusión
competitiva.
Ejemplos: Diferentes especies de
Paramecium

Amensalismo
Cuando una población microbiana produce una sustancia que es inhibidora para las
otras poblaciones; la primera puede que no se vea afectada por la sustancia inhibidora
o puede que gane una ventaja competitiva que le sea beneficiosa.
Parasitismo
En una relación de parasitismo, la población que se beneficia, el parásito, satisface
sus requerimientos nutricionales del organismo hospedador, que sale perjudicado.
Normalmente, pero no siempre, el parásito es mas pequeño que el hospedador.
Ectoparásitos y Endoparásitos.
ejemplos: Virus Bacteriofagos.
Depredación
Tiene lugar cuando un organismo, el depredador, traga y digiere a otro, la presa. en
cada ciclo, si la población de la presa aumenta, la del depredador la sigue, la alcanza y
la supera, tras lo cual se produce una disminución en la población de la presa.
ejemplos: Paramecium- Didinium
Interacciones dentro de la misma población microbiana.
Pueden ocurrir tanto interacciones positivas como negativas; aumentan la tasa de
crecimiento de una población o causan el efecto contrario.
Interacciones negativas la formación de colonias es un mecanismo de cooperación ya
que les permite una interacción dentro de la población.
También funciona como un mecanismo protector frente a factores ambientales
hostiles.
Está regulada por el uso del mismo nicho ecológico, si un individuo de la población
metaboliza una molécula de sustrato,ésta ya no estará disponible para el resto de la
población.
Simbiosis
Todas las relaciones simbióticas pueden considerarse beneficiosas porque mantienen
el equilibrio ecológico. el desarrollo de interacciones positivas permite a los
microorganismos utilizar los recursos disponibles con mayor eficacia y establecerse en
algunos hábitat que, de otro modo, no ha podido ocupar.
Las interacciones positivas se basan en la combinación de aptitudes físicas y
metabólicas que aumentan el crecimiento y las respectivas tasas de supervivencia o
ambos. Las interacciones negativas representan mecanismos de autorregulación que
limitan la densidad de la población, con el tiempo, estas interacciones negativas
benefician a las especies porque impiden la sobrepoblación, la destrucción del hábitat
y la extinción de esas mismas especies.
La competencia tiene lugar, cuando dos poblaciones usan un mismo recurso, ya sea el
espacio o el nutriente o un nutriente limitado
1.Competencia
realizada por microorganismos que producen sustancias que son toxicas para
poblaciones competidoras tendrán una ventaja competitiva natural.
competitiva.
Describe la relación en la que un organismo vive a expensas del otro, aunque es
común en poblaciones microbianas no tiene por qué darse siempre.

Comensalismo
Durante esta relación ambas poblaciones se benefician, a diferencia del mutualismo,
esta relación no es obligatoria.

14. Según la lectura “¿Se originó la vida fuera del planeta Tierra?”, cuál es la
idea principal? Argumente. Que puede concluir?.
No, el texto habla sobre el estudio biológico que se ha logrado hacer en Marte, gracias
a los avances tecnológicos.
Dice que si alguna vez hubo vida en Marte debería haber restos de biomoleculas, tales
como las proteínas, enzimas, ATP, oligamentos, compuestos poliméricos, etc.; en la
superficie.
Pero a pesar de contar con los equipos más completos en tecnología de última
generación, y con las herramientas necesarias para realizar la expedición y cumplir los
objetivos, en Marte aún no se ha logrado encontrar compuestos orgánicos; para algunos
se debe a los equipos empleados, supuestamente no son los más adecuados.
Para otros en la superficie no hay ningún tipo de compuesto orgánico, debido a que
estas moléculas orgánicas son descompuestas fotocataliticamente en la superficie de
los óxidos de hierro, abundante en este planeta, este proceso seria inverso a la
fotosíntesis y que para encontrarlos se debería buscar en el subsuelo donde no se ha
recibido nunca la luz del sol.
Sin embargo; las investigaciones hechas en Marte aun no arrojan resultados positivos
acerca de lo que realmente se busca; saber si en algún momento en Marte hubo o hay
vida.
15. Según la lectura “Biopelículas” que función tienen estas? argumente, que
puede concluir?
Las biopeliculas cumplen una función sumamente importante, tanto en el área
industrial, como en el área ambiental. Su papel se centra en el biofuling y la
bioremediacion.
El biofouling es la contaminación de un sistema producido por la actividad microbiana
de la biopelícula, mientras que la bioremediación utiliza las biopelículas para mejorar las
condiciones de un sistema contaminado.

Esto quiere decir que las biopelÌculas pueden eliminar elementos contaminantes del
ambiente, sin generar en sus procesos de biodegradacion desechos toxicos, las
biopelÌculas se encargan de procesos bioregenerativos donde el agua, el aire y los
suelos se podrán reutilizar.
Heidy Johana Aroyo Fontalvo
Maireth Botello Gutierrez