UNIDAD 2: FASE 2 - DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN

ESCUELA DE CIENCIAS BÁSICAS, TECNOLOGÍA E INGENIERÍA

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD
25 DE OCTUBRE DE 2018
 INTRODUCCION

La cromatografía es un método físico de separación en el que los componentes

que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en
reposo (fase estacionaria, F.E.) mientras que la otra (fase móvil, F.M.). Es por ello
que en el presente trabajo explicaremos mediante ensayos la forma de
desarrollar matemáticamente ejercicios asociados a la cromatografía
específicamente HPLC Cromatografía líquida de alta presión o de alta eficacia y
cromatografía de gases temas propuestos en la unidad 2.
 INDIVIDUAL

Paso 4. De la lectura realizada en el paso anterior, de manera individual resuelva

los siguientes enunciados en un documento aplicando normas APA:
a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la
Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de R x.
b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en la
Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de R f.
c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?
d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento con
la composición de la fase móvil?
e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4 cm
en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

SOLUCION

Se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de la muestra.

La altura de la placa (h) es de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea de siembra
es de 0.4 cm. El desplazamiento de la solución patrón (a) fue de 3.4 cm y el
desplazamiento de la muestra (d) fue de 2.4 cm (ver Figura 1).

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de R x.
 3.4cm

Sustancias
5.7 cm
estándar

2.4cm

0.4 cm

Se empleó una fase móvil compuesta por 8% de Tolueno y 92% de Diclorometano,

y se sembraron cuatro muestras: a) 4-hidroxibenzaldehído, b) Vainilla, c)
Clorobenzaldehído y d) muestra problema. La altura de la placa (h) es de 5.7 cm,
la distancia del borde a la línea de siembra es de 0.6 cm y la distancia del borde a
la línea de frente de disolvente es de 0.4 cm. El desplazamiento de la muestra a)
es de 3.7 cm, de b) es de 2.9 cm, de c) es de 0 cm y de d) es de 2.3 cm (ver
Figura 2)

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en

la Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de R f.
 0.4 cm

3.7cm

2.9cm
5.7 cm

2.3cm

0cm

0.6 cm

Reemplazando los valores en x = es

decir :

Reemplazando los valores en y

Para la mancha (a)

Para la mancha (b)

Para la mancha (c)

Para la mancha (d)

c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

R// Por qué el Tolueno es un compuesto apolar mientras que el

Diclorometano es un compuesto polar que incrementa al aumentar la
polaridad de la fase móvil o eluyente. Perfecta para permitir el
desplazamiento de las sustancias.

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento

con la composición de la fase móvil?

R// Por qué la muestra ” c “ está compuesta de

Clorobenzaldehído que es un compuesto orgánico con alta polaridad esto
significa que el oxígeno atrae con mayor fuerza a los electrones que al
carbono, por lo que la nube electrónica se desplaza hacia él haciendo que
el doble enlace entre el carbono y el oxígeno sea de naturaleza polar, con
un momento dipolar importante. La polaridad de los aldehídos va a
influenciar en sus propiedades físicas como la solubilidad. Lo que sucedió
en el ensayo 2 de la situación problema consistió en que los compuestos
de la fase móvil son poco polares y no logran solubilizar al aldehído que es
ente caso es el Clorobenzaldehído.

e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4

cm en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

R// porque la sustancia (d) es más polar lo que significa que se le facilita
más el proceso de adsorción debido a interacciones intermoleculares de
tipo dipolo‐dipolo o enlaces de hidrógeno entre el soluto y el adsorbente.
Por lo cual luego de analizar , observamos que las sustancias ( a y b)
realizaron una distancia de desplazamiento mayor.
DESARROLLO
Pasó 4. De la lectura realizada en el paso anterior, de manera individual resuelva
los siguientes enunciados en un documento aplicando normas APA:
a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la
Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de Rx.
R/:

Se tiene que se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de

la muestra. La altura de la placa (h) es de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea
de siembra es de 0.4 cm. El desplazamiento de la solución patrón (a) fue de 3.4
cm y el desplazamiento de la muestra (d) fue de 2.4 cm. Entonces,

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en la

Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de Rf.
R/:

Se tiene que se empleó una fase móvil compuesta por 8% de Tolueno y 92%
de Diclorometano, en donde a altura de la placa (h) es de 5,7 cm, la distancia
del borde a la línea de siembra es de 0,6 cm y la distancia del borde a la línea
de frente de disolvente es de 0,4 cm. Se sembraron cuatro muestras:
a) 4-hidroxibenzaldehído, en donde el desplazamiento fue de 3,7 cm
En donde,
b) Vainilla, en donde el desplazamiento fue de 2,9 cm
En donde,

c) Clorobenzaldehído, en donde el desplazamiento fue de 0 cm

En donde,
 d) Muestra Problema, en donde el desplazamiento fue de 2,3 cm

c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

R/: Se usa esa composición ya que los compuestos son de polaridad Baja. [1]

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento con
la composición de la fase móvil?
R/: En la muestra C se usa una muestra de Clorobenzaldehído, siendo este
compuesto oxigenado (un aldehído) contiene un grupo carbonilo que le da alta
polaridad y este reacciona adhiriéndose con la placa de papel que contiene
Celulosa.

e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2,4 cm

en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?
R/: Después de la muestra C, la muestra D de que es la muestra Problema;
contuvo menor desplazamiento que las otras 2(a y b), debido a que debe ser
más polar que las otras dos (a y b).

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de R x.
R//
 Ensayo No. 1
Se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de la muestra.
La altura de la placa (h) es de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea de siembra
es de 0.4 cm. El desplazamiento de la solución patrón (a) fue de 3.4 cm y el
desplazamiento de la muestra (d) fue de 2.4 cm (ver Figura 1).
Figura 1. Ensayo No. 1

Rx= desplazamiento del Compuesto / desplazamiento del patrón

Rx = d/a
Rx = 2, 4 cm / 3, 4 cm
Rx = 0, 70

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en

la Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de R f.
R//
 Ensayo No. 2
Se empleó una fase móvil compuesta por 8% de Tolueno y 92% de Diclorometano,
y se sembraron cuatro muestras: a) 4-hidroxibenzaldehído, b) Vainilla, c)
Clorobenzaldehído y d) muestra problema. La altura de la placa (h) es de 5.7 cm,
la distancia del borde a la línea de siembra es de 0.6 cm y la distancia del borde a
la línea de frente de disolvente es de 0.4 cm. El desplazamiento de la muestra a)
es de 3.7 cm, de b) es de 2.9 cm, de c) es de 0 cm y de d) es de 2.3 cm (ver
Figura 2)
Figura 2. Ensayo No. 2

Rf es el factor de retardo o retraso, que mide la movilidad relativa de cada

componente con respecto al máximo posible, la distancia recorrida por el frente de
fase móvil.
Rf = Desplazamiento del compuesto / Desplazamiento del frente del disolvente
Desplazamiento del frente del disolvente = h – (0.4+0.6)
Desplazamiento del frente del disolvente = 4.7 cm
 Rf 4-hidroxibenzaldehído (a)
Rf = 3.7 / 4.7
Rf = 0.78

 Rf Vainilla (b)
Rf = 2.9 / 4.7
Rf = 0.61

 Rf Clorobenzaldehído (c)
Rf = 0 /4.7
Rf = 0

 Rf muestra problema (d)

Rf = 2.3 / 4.7
RF = 0.48

c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

R// Para mezclas poco polares como los aldehídos los sembrados en el ensayo 2
se pueden obtener buenos resultados con Mezclas de hexano con diferentes
proporciones de tolueno, cloruro de metileno y éter, empleado en mayor cantidad e
diclorometano o cloruro de metilo por ser un compuesto polar y de menor cantidad
el tolueno por ser apolar.
d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento
con la composición de la fase móvil?
R// El compuesto C no presento desplazamiento con la composición de la fase
móvil por que el Clorobenzaldehído es un compuesto oxigenado que contiene el
grupo funcional carbonilo en la molécula de alta polaridad que no deja ser
desplazo por la composición de la fase móvil y se adhiere a la placa de papel
e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4
cm en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?
R// El compuesto d se desplazó solamente 2,4 cm con respecto a las otras dos
muestras ya que después de la muestra c este sigue de las más polares,
impidiendo su desplazamiento por la fase móvil ya que el compuesto de la fase
móvil esta determino para sustancias pocos polares.

Situación problema
En un laboratorio de análisis químico, se quiere hacer la separación de
compuestos con polaridades medias y altas, por lo que deciden emplear
Cromatografía de reparto, que aplica para Cromatografía de papel y
Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC). En un ensayo aplicando
Cromatografía de papel y capa fina (cuya diferencia radica en la naturaleza del
lecho), se obtienen resultados por la migración diferencial de la mezcla dada por el
movimiento capilar en forma ascendente que ejerce la fase móvil, los cuales se
registran a continuación:
Ensayo No. 1
Se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de la muestra.
La altura de la placa (h) es de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea de siembra
es de 0.4 cm. El desplazamiento de la solución patrón (a) fue de 3.4 cm y el
desplazamiento de la muestra (d) fue de 2.4 cm (ver Figura 1).

Figura 3. Ensayo No. 1

a a

5.7 cm h 3.4 cm d

2.3 cm

0.4 cm Línea de siembra

Figura 1

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de R x.
Calculamos el valor Rx mediante la siguiente ecuación

Rx

Ensayo No. 2
Se empleó una fase móvil compuesta por 8% de Tolueno y 92% de Diclorometano,
y se sembraron cuatro muestras: a) 4-hidroxibenzaldehído, b) Vainilla, c)
Clorobenzaldehído y d) muestra problema. La altura de la placa (h) es de 5.7 cm,
la distancia del borde a la línea de siembra es de 0.6 cm y la distancia del borde a
la línea de frente de disolvente es de 0.4 cm. El desplazamiento de la muestra a)
es de 3.7 cm, de b) es de 2.9 cm, de c) es de 0 cm y de d) es de 2.3 cm (ver
Figura 2)
b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en
la Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de R f.
El factor Rf puede ser expresado como distancias recorridas por soluto y
disolvente en un mismo tiempo
Calculamos el valor Rx mediante la siguiente ecuación.
 0.4cm Frente de disolvente
a
3.7cm
b
5.7cm h ∑ = 0.4cm + 0.6cm =
2.9 cm
1cm
d
//
//
//// 0.6cm Línea de
siembra
Para hallar el desplazamiento del solvente debemos restar a la altura de la placa,
la distancia que hay desde el borde a la línea de siembra (0.6cm) y la distancia
desde el borde al frente de disolvente (0.4cm).
∑ = 0.4cm + 0.6cm = 1cm
= 5.7cm - 1cm = 4.7cm

RF (a) = 0.78cm

RF (d) = 0.61cm
RF(c) = 0.48cm

Rf (b) =0

COLABORATIVO

Paso 6. Con la lectura del Anexo asociado al análisis realizado por Cromatografía
de gas, calculen y respondan de manera colaborativa los siguientes enunciados:
a. Tiempo de retención corregido.

Es el tiempo que transcurre entre la aparición de la señal que corresponde a un

componente inerte y a la del componente considerado.

R// Se usará la siguiente formula:

Para Fq es

Para Hq es
b. Medida de retención de los solutos como factor de capacidad.

Cociente de la cantidad de soluto en fase estacionaria entre la cantidad en fase

móvil.

R//: Se usará la siguiente formula:

Para Fq sería,

Para Hq sería,
c. Número de platos teóricos.

R//: Se emplea la ecuación:

Para Fq sería,

Para Hq sería,

d. Altura de plato.
 R//: R/: Se emplea la ecuación:

Para Fq sería,

Para Hq sería,

e. Factor de selectividad.
Es la relación entre los tiempos de retención de dos componentes

R//: Se usará la siguiente formula

f. Resolución.
Es el parámetro que expresa el grado de separación que se puede obtener en un
sistema cromatográfico para dos componentes dados. Relaciona la capacidad
separadora de un sistema cromatográfico para dos componentes.

R//: Se usará la siguiente formula

g. Resolución en relación al factor de retención, a la selectividad y a la eficiencia.

Formula de Retención

Fq

Hq

Formula Eficiencia
Para Calcular la Eficiencia se calcula,

Para Fq sería,

Para Hq sería,

Formula Selectividad
Pasó 7. Con los resultados del paso seis, respondan las siguientes preguntas en
forma colaborativa:
a. ¿Qué indica el tiempo de retención en un análisis cromatográfico?

R// El tiempo de retención indica el tiempo que demora cada una de las
sustancias en dejar el sistema cromatográfico, por lo cual se puede decir que
este tiempo se da en función de las características moleculares de cada
compuesto. Para el caso de el compuesto Fq fue de 1,4 y para el compuesto
Hq fue de 1,84.

b. ¿Qué indica el número de platos?

R// El número de platos indica el número de tiempos y/o veces que el soluto se
dosifica o divide entre las fases durante su paso a través de la columna, el cual
para el caso del Fq fue de 711,84 y para el compuesto Hq fue de 528,96.

c. ¿Qué indica la altura de plato?

R// La altura del plato indica la distancia que el soluto viaja mientras se lleva
una división, con lo anterior se puede expresar la eficiencia de la columna en
unidades de longitud; el cual para el caso del Fq fue de 2,55 cm y para el
compuesto Hq fue de 3,44 cm.

d. ¿Qué relación tiene la resolución con el factor de retención, a la selectividad y

a la eficiencia?

R// la relación es muy importante debido a que:

 Si los solutos no se retienen no hay separación. (factor de retención)
 A mayor selectividad mejor separación. (selectividad)
 En cuanto a la eficiencia a mayor número de platos teóricos, mejor
separación. (eficiencia)
 CONCLUSIONES

 El tiempo de retención Indica el tiempo transcurrido al momento de eluir el

máximo de concentración del soluto.
 A mayor número de platos teóricos el poder de separación es mejor.
 La altura de los platos nos indica la eficiencia de la columna
cromatográfica.
 A mayor selectividad mejor separación.
 La resolución relaciona la capacidad separadora de un sistema
cromatográfico para dos componentes.
 La cromatografía es uno de los principales métodos analíticos y permite la
separación y cuantificación de sustancias muy similar en estructura y
propiedades químicas.
 Con el desarrollo de los anteriores ejercicios pudimos fortalecer nuestros
conocimientos en los temas relacionados a la unidad 2.
 BIBLIOGRAFÍA

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omatograf
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