ISSN 0568-3076 agron.

21(2): 51 - 64, 2013

ESTUDIO PRELIMINAR DEL EFECTO DE MICROORGANISMOS

BENÉFICOS SOBRE EL TOMATE (Solanum lycopersicum L.) Y EL
NEMATODO DEL NUDO RADICAL (Meloidogyne spp.)

Óscar Adrián Guzmán Piedrahita*, Jairo Castaño Zapata** y Marina Sánchez de Prager***
* Ing. Agr., M.Sc. Profesor Asistente, Departamento de Producción Agropecuaria, Universidad de Caldas. Correo electrónico: oscar.guzman@ucaldas.edu.co
** Ph.D. Profesor Titular, Departamento de Producción Agropecuaria, Universidad de Caldas. Correo electrónico: jairo.castaño_z@ucaldas.edu.co
*** Profesora Titular, Departamento de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de Colombia. Correo electrónico: msanchezpr@unal.edu.co

Recibido: 26 de julio de 2013; aprobado: 3 de septiembre de 2013

ResUMeN aBstRaCt

Meloidogyne spp. ocasiona pérdidas del 14% en el ámbito
mundial. El objetivo de esta investigación fue conocer el
efecto de hongos que forman micorriza arbuscular (HMA) y
Bacillus subtilis, sobre plántulas de tomate, variedad Calima, y su
relación con Meloidogyne spp. El estudio se realizó en la granja
del ICA, Palmira, ubicada a 950 msnm, temperatura promedio
28ºC y humedad relativa promedio 60%. Plántulas de 23 días
de edad fueron sembradas en vasos de 2 kg de capacidad,
conteniendo suelo más arena estéril (v/v 3:1). A la siembra,
se inocularon seis plántulas con 10 g de suelo más HMA; seis,
con 1 mL de B. subtilis (1x106 UFC/mL); y seis con 1,0 mL de
Meloidogyne spp. (900 huevos + 54 estados juveniles infectivos,
J2). Se adicionó la combinación de estos microorganismos y
un testigo. Treinta días después de la siembra, las plántulas
que tenían B. subtilis o la combinación con HMA presentaron
mayor materia seca de raíces (>1,96 g). En la materia seca
aérea, los mayores valores (3,33 y 3,78 g), correspondieron a
B. subtilis y HMA cuando se inocularon solos y combinados.
La inoculación con Meloidogyne spp. fue la que tuvo el mayor
índice de severidad (60%), seguido de B. subtilis + Meloidogyne
spp. y HMA + B. subtilis + Meloidogyne spp. (50%). B. subtilis
aumentó la materia seca radical de las plántulas. La aplicación
de HMA al momento de la siembra, junto con Meloidogyne
spp. afectó adversamente el desarrollo de las plántulas,
indicando la necesidad de inocular microorganismos benéficos
preventivamente.
PReLiMiNaRY stUDY OF BeNeFiCiaL
MiCROORGaNisMs eFFeCt ON tOMatO
(solanum lycopersicum L.) aND ROOt-KNOt
NeMatODes (Meloidogyne spp.)
Meloidogyne spp. causes losses estimated in 14% worldwide. The
objective of this research was to know the effect of arbuscular
mycorrhiza fungi (AMF), and Bacillus subtilis, on tomato
seedlings, Calima variety, and its relationship with Meloidogyne
spp. The study was conducted at the research station of ICA,
Palmira, located at 950 masl, average temperature of 28ºC and
relative humidity of 60%. Twenty-three days old seedlings
were planted in glasses of 2 kg capacity, containing soil plus
sterile sand (v/v 3:1). At planting time, six seedlings were
inoculated with 10 g of soil plus AMF; six other with 1 mL
of B. subtilis (1x106CFU/mL); and six more with 1 mL of
Meloidogyne spp. (900 eggs + 54 infective juvenile stages, J2).
The combination of these microorganisms and a control were
added. Thirty days after planting, the seedlings containing
either B.subtilis or the combination with AMF showed higher
dry roots matter content (>1.96 g). In the aerial dry matter, the
highest values (3.33 and 3.78 g), corresponded to B. subtilis and
AMF when they were inoculated either alone or combined.
The inoculation with Meloidogyne spp., had the highest severity
index (60%), followed by B. subtilis + Meloidogyne spp. and AMF
+ B. subtilis + Meloidogyne spp. (50%). B. subtilis increased the
seedlings’ dry root matter content. The application of AMF at
planting time, together with Meloidogyne spp. adversely affected
the seedlings development, indicating the need to add benefic
microorganisms preventively.

Palabras clave: hongos micorriza arbuscular, Bacillus Key words: arbuscular mycorrhiza fungi, Bacillus subtilis,
subtilis, severidad. severity.

Guzmán Piedrahita, Ó.A., Castaño Zapata, J. & Sánchez de Prager, M. 2013. Estudio preliminar del efecto de microorganismos
benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.) y el nematodo del nudo radical (Meloidogyne spp.). Revista Agronomía. 21(2): 51-64.
52
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager
iNtRODUCCiÓN
En Colombia, el tomate (Solanum lycopersicum Linneo)
es utilizado para consumo directo en ensaladas o
como fruta, y en aplicaciones condimentarías para
la preparación de pastas y conservas. En el país hay
sembradas 16.000 ha con una producción de 659.915
t, siendo los departamentos de Boyacá con 22,4%,
Norte de Santander con 16,4%, Antioquia con 11,6,
Cundinamarca con 8,4% y Santander con 6,9% los
principales productores (Agronet, 2014).
El uso de insumos biológicos en la agricultura tiene
varias ventajas tanto en el ámbito económico como
en el ecosistémico, debido a que al utilizarlos se dis-
minuyen los costos de producción al no invertir de-
masiados recursos económicos en productos quími-
cos costosos, y a su vez, reducir la contaminación
del ambiente. Entre los insumos biológicos más
utilizados están los hongos formadores de Micorrizas
Arbusculares (HMA) y las Bacterias Promotoras de
Crecimiento Vegetal (PGPB, por su sigla en inglés),
ambos benefician la nutrición y crecimiento de las
plantas, y pueden ser utilizados en el manejo de pató-
genos radicales y aéreos (Toro et al., 2008; Pedraza et
al., 2010; Alarcón et al., 2013).
Los HMA son habitantes del suelo que forman sim-
biosis con las raíces de las plantas (Smith & Read,
1997; Ulloa & Hanlin, 2001; Rivillas, 2003; Sánchez de
Prager et al., 2007; INVAM, 2011; Alarcón et al., 2013).
Su importancia es muy notable, afectando desde
el nivel organismal hasta el ecosistémico (Van der
Heijden et al., 1998). Un 90% de las plantas podrían
tener estas asociaciones, las cuales tradicionalmente
se han clasificado en dos tipos, denominados con
base en su ubicación en las raíces: ectomicorrizas y
endomicorrizas. Las primeras forman una red extra
radical característica que le da una apariencia única a
las raíces micorrizadas, con algunas hifas que crecen
solo intercelularmente. Por su parte, las endomicorri-
zas penetran entre las células de las raíces y algunas
hifas atraviesan la pared celular vegetal para desar-
rollar una estructura arbuscular en el interior de las
células de las plantas (Van der Heijden et al., 1998).
Las ectomicorrizas son muy abundantes en los eco-
sistemas de zonas templadas, siendo ampliamente
documentadas en bosques de coníferas, encinos y
hayas. Estas micorrizas son formadas por más de
6.000 especies de hongos que podrían asociarse con
hasta el 10% de la flora mundial (Marx, 1991). La
interacción del hongo y las raíces es muy íntima y se
sabe que el hongo produce sustancias que alteran el
crecimiento del sistema radical, si bien se ha detectado
que no hay una gran especificidad, debido a que
una especie de planta puede formar micorrizas con
muchas especies de hongos. El efecto beneficioso de
esta asociación es evidente en suelos deficientes en
nutrientes, dado que las plantas que tienen micorrizas
se desarrollan mucho mejor en tales circunstancias
que las que no las poseen (Marx, 1991).
Las endomicorrizas o micorrizas vesículo arbuscula-
res (MVA) son formadas por unos cientos de espe-
cies de hongos, pero se ha estimado que entre el 70
y 80% de la flora mundial podría tener asociaciones
de este tipo (Sieverding, 1991). Las plantas que for-
man MVA son hierbas o árboles, silvestres o culti-
vadas, angiospermas, pteridófitas e incluso briófitas
(Sieverding, 1991).
Sus esporas y/o hifas están presentes en el suelo y/o
adheridas a trozos de raíces, después de reconocerse
biológicamente con la planta, colonizan las células
de la corteza radical externamente y luego penetran
en algunas de ellas y originan una estructura llamada
arbúsculo. Allí ocurre el mayor intercambio entre los
dos simbiontes: la planta provee al hongo de fuentes
de azúcares y este, a su vez, proporciona a la planta
minerales, especialmente fósforo y algunos elementos
menores como zinc, entre otros. La importancia de la
HMA radica en el incremento del volumen de suelo
a partir del cual la planta puede absorber nutrientes
(fósforo, nitrógeno, potasio, calcio, magnesio y el-
ementos menores), en el estímulo de la resistencia
al ataque de patógenos, en el ciclaje de nutrientes,
contribución a la formación de agregados, entre otros
(Tarafdar & Rao, 2002; Rivillas, 2003; Sánchez de
Prager et al., 2007; Sánchez de Prager & Velásquez,
2008).

Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...
Las PGPB generalmente se encuentran en el en-
torno rizosférico en donde se adhieren y colonizan
la superficie radical como respuesta a los exudados,
desde allí inducen la germinación de semillas y el de-
sarrollo de las plantas (Rodríguez & Romero, 2007).
Muchos de estos procariotas, producen y secretan
localmente metabolitos estimuladores del crecimiento
vegetal (fitohormonas), participan en la fijación y/o
solubilización de elementos del suelo (nitrógeno y
fósforo, en especial) (Kloepper et al., 1991). En otros
casos actúan como competidores o antagonistas de
patógenos de suelo y, con esta actividad, contribuyen
a que las plantas escapen y/o minimicen los efectos
nocivos de estos, mediante mecanismos como la
antibiosis, competencia, parasitismo y resistencia
sistémica inducida (Rodríguez & Romero, 2007). A
través de estas actividades, las PGPB favorecen el
desarrollo de las plantas, su sanidad y productividad.
Actualmente se registran aproximadamente 89
especies nominales de nematodos del nudo radical
(Meloidogyne spp.) que causan afección en diferentes
cultivos: hortalizas como el tomate, frutales, pastos y
muchas arvenses. Las pérdidas económicas causadas
por nematodos fitopatógenos alcanzan el 14% en el
ámbito mundial, equivalentes a unos 100 billones de
dólares anualmente. Esto hace que se los considere
como los nematodos fitoparásitos más comunes
y destructivos de plantas (Mitkowski & Abawi,
2003; Agrios, 2005; Pajovic, 2007; Perry et al., 2009;
Alarcón et al., 2013).
Los síntomas primarios ocasionados por Meloidogyne
spp. son la presencia de agallas en las raíces primarias
y secundarias. En estado avanzado del problema, el
tejido senescente se rompe originando cancros de
apariencia corchosa que, posteriormente, se necrosan
y mueren impidiendo así la formación de raíces con
sus consecuencias sobre la absorción de nutrientes y
agua. Los síntomas secundarios son desarrollo foliar
agron. 21(2): 51 - 64, 2013
deficiente, enanismo y clorosis de la parte aérea, las
hojas son más angostas, se detiene el crecimiento y
se puede disminuir al mínimo la producción. Estos
nematodos tienen un amplio rango de hospedantes,
53
especialmente plantas dicotiledóneas que, con fre-
cuencia, se encuentran en las áreas donde se cultivan
musáceas (De Waele & Davide, 1998; Perry et al.,
2009; Guzmán et al., 2012).
Este estudio tuvo como objetivo realizar un estudio
preliminar para conocer el efecto de hongos que
forman micorriza arbuscular (HMA) y Bacillus subtilis
(PGPB), en el desarrollo de plantas de tomate de mesa
y su relación con la severidad del nematodo del nudo
radical (Meloidogyne spp.).
MateRiaLes Y MÉtODOs
El estudio se realizó en condiciones de almácigo en
una casa de malla ubicada en el Instituto Colom-
biano Agropecuario (ICA), Palmira, Valle del Cauca,
ubicada a una altitud de 950 m, con una temperatura
promedio de 28ºC y humedad relativa promedio del
60%.
Se utilizaron plántulas de tomate de 23 días de edad,
variedad Calima, provenientes del vivero Carlos Ra-
mos Ltda., el cual se encuentra ubicado en la vía que
conduce de Palmira a Pradera.
Los HMA y Bacillus subtilis provenientes de ceparios
del Laboratorio de Microbiología de la Universidad
Nacional de Colombia, sede Palmira, fueron sumin-
istrados por el profesor Carlos Huertas de la misma
universidad. El inóculo de los HMA correspondió
a mezclas de ellos propagados en la Universidad
Nacional de Colombia - Palmira, en un suelo franco
limoso, cuya concentración fue de 128 esporas/g de
suelo seco. B. subtilis fue extraído de un suelo donde
se tenía establecido un cultivo de banano c.v. Gros
Michel.
Meloidogyne spp. se obtuvo de raíces de café variedad
Caturra severamente parasitadas provenientes del
corregimiento de Alta Gracia, Pereira, departamento
de Risaralda. El incremento del nematodo se realizó
en plántulas de tomate de mesa variedad Calima,
54
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

sembradas en un sustrato estéril suelo + arena en
relación volumétrica 2:1.
Las plántulas de tomate se trasplantaron a vasos de
plástico de 2 kg de capacidad, que contenían suelo
esterilizado de la granja del ICA, Palmira, mezclado
con arena de río estéril (relación volumétrica 3:1).
Al momento de la siembra, se realizó la inoculación
de seis plántulas con 10 g de suelo del inoculante de
HMA, el cual, además de esporas, contenía abun-
dancia de micelio externo y raíces micorrizadas de
Brachiaria decumbens, planta en la cual se propagaron los
HMA. A otras seis plántulas se les aplicó 1,0 mL de
suspensión de B. subtilis (1x106 unidades formadoras
de colonias/mL), la cual se preparó con el raspado
suave de la bacteria sembrada en Agar Nutritivo (AN),
24 horas antes. Otras seis plántulas se inocularon con
1,0 mL por plántula de Meloidogyne spp., compuesto
de 900 huevos + 54 estados juveniles infectivos (J2).
También se probó la combinación de los anteriores
microorganismos y un testigo (Tabla 1).

tabla 1. Descripción de tratamientos utilizados en el estudio

inoculación de microorganismos Número de

tratamiento
plántulas
inóculo de HMa Bacillus subtilis Meloidogyne spp.
1 Momento de siembra -- -- 6
2 Momento de siembra -- Momento de siembra 6
3 -- Momento de siembra -- 6
4 -- Momento de siembra Momento de siembra 6
5 Momento de siembra Momento de siembra -- 6
6 Momento de siembra Momento de siembra Momento de siembra 6
7 -- -- Momento de siembra 6
8 Testigo 6

Dado el carácter exploratorio y básico de este trabajo,
los tratamientos se planificaron evaluando la presen-
cia o no de los componentes: HMA, Bacillus subtilis,
Meloidogyne spp. desde el momento de la siembra en
bolsas, a pesar de los antecedentes de manejo pre-
ventivo de los biocontroladores. En caso de estos
funcionar desde el momento de la siembra, desde
el punto de vista de práctica agronómica a aplicar,
se evitaría un costo económico asociado con una
actividad extra.
En cada unidad experimental, el inóculo de los HMA
se depositó en un orificio superficial e inmediata-
mente se hizo la siembra de las plántulas de tomate
en el mismo lugar en busca de lograr mayor contacto
inoculante-raíces (Guzmán & Rivillas, 2008). En el
caso de B. subtilis y la mezcla de huevos y estados juve-
niles de Meloidogyne spp., las suspensiones se aplicaron
con la ayuda de una micropipeta con capacidad de
1 mL depositándolos directamente en las raíces de
las plántulas, en los tratamientos correspondientes.
Una vez inoculadas las plantas se llevaron a casa
de malla, organizadas en un diseño experimental
completamente aleatorio con ocho tratamientos y
seis repeticiones por tratamiento (Tabla 1). El riego

Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...
homogenizado se aplicó con un intervalo de 2-3
días manteniendo las plantas a 60% de capacidad
de campo.
Treinta días después de sembradas las plántulas, se
realizó un muestreo destructivo de todas las unidades
experimentales, con el fin de evaluar como variable
principal: materia seca de raíces y parte aérea de
cada plántula (g/planta) y como variables comple-
mentarias:
ü Altura de plántulas desde el cuello de la plántula
hasta el ápice meristemático (cm/plántula).
ü Colonización por HMA (%/planta). En todas
las unidades experimentales.
ü Diámetro del cuello de las plántulas (mm/
plántula).
ü Índice de daño (cantidad de agallas en las raíces)
mediante la escala de evaluación de Bridge &
Page (1980): 0 = Raíces sanas y limpias, 1-4
= Agallas sobre raíces secundarias solamente,
5-10 = Agallas sobre raíces laterales. En donde:
5 = 50% de raíces con agallas y 10 = 100% de
raíces con agallas.
La información obtenida se sometió a análisis es-
tadístico, así:
- Para cada tratamiento, estimación del promedio
y coeficiente de variación, tanto con la variable
de respuesta como con las variables comple-
mentarias.
- Análisis de varianza al 5% bajo el modelo de
análisis para el diseño completamente aleatorio,
con la variable de respuesta.
agron. 21(2): 51 - 64, 2013
- Si el análisis de varianza mostraba efecto de trata-
mientos, se aplicaría la prueba de Tukey al 5%,
55
para establecer la diferencia entre los promedios
de los tratamientos. En el caso de que el análisis
de varianza no mostrara efecto de tratamientos
con la variable de respuesta, se haría un análisis
con cada una de las variables complementarias.
ResULtaDOs Y DisCUsiÓN
Durante el desarrollo del experimento, la
temperatura promedio fue de 28ºC, óptima para
el establecimiento de los HMA y de B. subtilis.
Temperatura también adecuada para el parasitismo
de Meloidogyne spp., el cual completa su ciclo de vida
en 25 días a 27°C (Agrios, 2005).
A los 30 días, cuando se realizó el muestreo destruc-
tivo de las plántulas de tomate, se encontró que las
plántulas de los tratamientos inoculados con los HMA
presentaron un porcentaje bajo de colonización, el
cual estuvo entre el 15 y 20%. Este porcentaje de
colonización se puede explicar por el corto tiempo
transcurrido para su establecimiento, en café por
ejemplo, se ha encontrado una mayor colonización
de raíces y un mayor crecimiento de plantas después
de dos meses de la inoculación con Acaulospora melleae,
G. intraradices y G. clarum (Vaast & Zasoski, 1992).
Otra posible explicación, puede ser la contaminación
de los HMA con nematodos fitoparásitos de los
géneros Helicotylenchus con 156 individuos/100 g de
suelo y Dorylaimus con 77 individuos/100 g de suelo
(Figura 1), los cuales al ser inoculados junto con los
HMA pudieron haber afectado el establecimiento de
la simbiosis, además de parasitar el sistema radical de
las plántulas de tomate. Existen algunas referencias
(Leguizamón, 1995; Sánchez de Prager, 2007; Terry
& Leiva, 2006), en donde se ha encontrado reducción
en el nivel de colonización de los micosimbiontes por
fitonematodos, principalmente cuando se inoculan
primero las HMA y, posteriormente (un mes), los
nematodos fitoparásitos.
56
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

Figura 1. Esporas de HMA y nematodos fitoparásitos de los géneros Helicotylenchus (nematodo Espiral) y
Dorylaimus (nematodo Trozador de raíces y vector del Tobacco rattle tobravirus).

En relación con la PGPB B. subtilis, se encontró en incrementó nuevamente en la inoculación triple.

todos los tratamientos donde fue inoculada, con
mayor población en el tratamiento donde se inoculó
individual (Tabla 2). Lo contrario ocurrió cuando
estuvo asociada con los HMA y/o Meloidogyne spp.,
en los cuales descendió considerablemente y se
Esta disminución, se explicaría debido a mecanismos
de competencia, por sitios de parasitismo,
colonización y, también, podrían obedecer a efectos
antagónicos, que se minimizan en presencia de los
tres organismos.

tabla 2. Unidades formadoras de colonias de B. subtilis en los tratamientos donde se inoculó

Unidades formadoras de colonia

tratamiento Descripción
(UFC x 104/g de suelo)
3 PGPB (B. subtilis) 53
4 PGPB + Nematodos 14
5 HMA + PGPB 12
6 HMA + PGPB + Nematodos 43

Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...
Materia seca de raíces y parte aérea
Las plántulas de tomate asociadas solo con B. subtilis
(PGPB) o en combinación con los HMA presentaron
los valores mayores de materia seca de raíces (por
encima de 1,96 g) siendo estadísticamente iguales
entre sí (Figura 2A, Tabla 3), y difiriendo de los
demás tratamientos que tuvieron valores por debajo
de 1,1 g (Figura 2A). Estos resultados coinciden con
registros de beneficios asociados a incrementos de
materia seca aérea y raíces, cuando están presentes
microorganismos PGPB y HMA individuales y/o en
conjunto (Terry & Leiva, 2006; Alarcón et al., 2013).
La disminución altamente significativa en las plántulas
de tomate inoculadas con Meloidogyne spp., demostró
el efecto altamente patogénico de este nematodo
sobre el sistema radical (Gómez et al., 2008; Guzmán
et al., 2012).
En la materia seca aérea, estadísticamente los
resultados presentaron varias agrupaciones: los
mayores valores correspondieron a B. subtilis cuando
se inoculó sola y al testigo sin diferir significativamente
entre ellos, como tampoco, de un segundo grupo,
integrado por las plántulas inoculadas con HMA,
en la combinación B. subtilis + Meloidogyne spp. y
HMA + B. subtilis. En un tercer grupo se ubicaron
los tratamientos correspondientes a la combinación
HMA + nematodo fitoparásito y el cuarto grupo, con
el menor valor de materia seca aérea, correspondió
a la combinación triple de ellos (Figura 2B, Tabla 3).
Antes y después de realizar el muestreo destructivo
de las plántulas de tomate, a simple vista se observaba
que estaban asociadas con B. subtilis presentando un
mayor crecimiento y desarrollo del sistema radical
y parte aérea (Figuras 3A, 3B). Estas observaciones
se evidencian en el análisis estadístico y corroboran
los resultados benéficos documentados de inocular
PGPB.
agron. 21(2): 51 - 64, 2013
Estos resultados aparentemente señalan que, hasta
los 30 días, cuando se realizó el muestreo destructivo,
empezaba a hacerse evidente el daño de Meloidogyne
spp. en la materia seca aérea de las plántulas de tomate
57
inoculadas con este fitoparásito (Figura 2B) y, que
los posibles controladores comenzaban a evidenciar
respuestas, que el análisis estadístico logró detectar,
aunque posiblemente, en esta época se encontraban
las asociaciones aún en fase de establecimiento y
estabilización en la rizosfera, que llevaban incluso
a extenuar las plantas como se hizo evidente en el
tratamiento donde se combinaban los tres, hecho
manifestado tanto en la parte aérea como en las
raíces. Este resultado negativo, era de esperarse por
inocular al mismo el tiempo los biocontroladores con
el nematodo y también a la alta agresividad patogénica
de Meloidogyne en tomate.
Diámetro del tallo en el cuello de las plántulas
Consistente con los resultados anteriores, las
plántulas de tomate asociadas solo con B. subtilis o
en combinación con los HMA y Meloidogyne spp., al
igual que el testigo, se comportaron estadísticamente
iguales y fueron las que presentaron el mayor diámetro
del tallo (Figura 4). Asimismo, los tratamientos sin
B. subtilis se comportaron estadísticamente iguales
a algunos tratamientos asociados con la bacteria
(Figura 4).
Los resultados obtenidos con las variables evaluadas
demostraron que B. subtilis, PGPB, se hallaban en el
suelo y en la rizosfera, siendo capaces de adherirse y
colonizar la superficie radical (Rodríguez & Romero,
2007). El mayor peso de raíces en plantas inoculadas
con esta bacteria, confirma, como lo registran
Kloepper et al. (1991) y Rodríguez & Romero (2007),
la producción y secreción de metabolitos bacterianos
estimuladores del crecimiento vegetal (fitohormonas)
que influyeron en el desarrollo de las plántulas de
tomate que estuvieron asociadas a ella.
En este estudio, la capacidad biocontroladora de
HMA y B. subtilis sobre diferentes patógenos de
suelo, entre ellos, nematodos, no se hizo presente,
posiblemente por la época temprana en la cual se hizo
la evaluación, dado que los microorganismos cuando
se inoculan requieren un tiempo para reproducirse y
estabilizarse en la rizosfera, antes de manifestar su
58
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

acción (Sánchez de Prager et al., 2007). Durante este
período de establecimiento pueden causar incluso
una extenuación inicial de las plantas, dado el aporte
de energía que realizan sobre todo en el caso de los
HMA. La aplicación inmediata de los nematodos a
las plántulas no dio tiempo para el establecimiento
de estos dos posibles biocontroladores. Por ello,
normalmente en el caso de controles biológicos
exitosos, los microorganismos benéficos se aplican
en forma preventiva.
B. subtilis en las plántulas de tomate mostró ser una
PGPB con potencial para estimular el desarrollo
radical, íntimamente ligado a la sanidad vegetal
preventiva, lo cual podría demostrarse a través de
otros trabajos de investigación que complementen
estos resultados preliminares y con base en registros
como los de Kloepper et al. (1991), Rodríguez &
Romero (2007) y Pedraza et al. (2010).

Figura 2. Materia seca de raíces (a) y parte aérea (B) de plántulas de tomate,
variedad Calima, inoculadas con hongos que forman Micorriza
Arbuscular (HMA), Bacteria Promotora de Crecimiento Vegetal -
PGPB (Bacillus subtilis), y el nematodo del Nudo radical Meloidogyne
spp., 30 días después de la siembra.
 59
Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...
agron. 21(2): 51 - 64, 2013

Figura 3. Plántulas de tomate, variedad Calima, antes del muestreo destructivo (a) y después
(B) inoculadas con hongos formadores de micorriza arbuscular (HMA), Bacteria
Promotora de Crecimiento Vegetal - PGPB (Bacillus subtilis) y el nematodo del Nudo
radical Meloidogyne spp., 30 días después de la siembra.
60
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

Figura 4. Diámetro del tallo de plántulas de tomate, variedad Calima, inoculadas con hongos que
forman Micorrizas Arbusculares (HMA), Bacteria Promotora de Crecimiento Vegetal -
PGPB (Bacillus subtilis) y el nematodo del Nudo radical Meloidogyne spp., 30 días después
de la siembra.

tabla 3. Materia seca de raíces y parte aérea, diámetro de tallo y altura de plántulas de tomate, variedad Calima, inocu-
ladas con hongos que forman Micorrizas Arbusculares (HMA), Bacillus subtilis (PGPB), el nematodo del Nudo radical
Meloidogyne spp., la combinación de los anteriores y el testigo sin inocular, 30 días después de la siembra

altura de Materia seca Materia

C.v. Diámetro de tallo C.v. C.v. C.v.
tratamiento plántula de raíces seca aérea
(%) (cm) (%) (%) (%)
(cm) (g) (g)
HMa 49,67a* 5,93 5,33b 19,36 0,93c 28,42 3,33ab 12,04
HMa
+ 51,33a 3,63 5,50b 15,21 0,87c 11,40 2,82bc 15,73
Meloidogyne spp.
B. subtilis 53,50a 3,50 6,33ab 8,15 2,58a 32,42 3,78a 12,41
B. subtilis
+ 52,33a 6,00 6,17ab 6,62 0,82c 17,32 3,48ab 10,27
Meloidogyne spp.
HMa
+ 53,17a 10,33 6,83a 5,97 1,97ab 33,39 3,26abc 12,34
PGPB
HMa
+
B. subtilis 51,50a 6,23 5,83ab 7,00 0,68c 3,20 2,47c 10,32
+
Meloidogyne spp.
Meloidogyne spp. 49,40a 7,65 5,20b 8,60 0,91c 32,40 2,82bc 24,89
testiGO 50,83a 8,92 6,33ab 8,15 1,27bc 25,59 3,74a 9,83

* Dentro de las columnas, los valores seguidos por la misma letra no se diferencian significativamente de acuerdo a la
prueba de rangos múltiples de Tukey al 5%.

Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...
Nematodo del nudo radical Meloidogyne spp.
Después de realizar el muestreo destructivo, se
evaluó el índice de severidad o porcentaje de infec-
ción (cantidad de agallas por Meloidogyne spp. en las
raíces) mediante la escala de evaluación de Bridge &
Page (1980).
Se encontró que el tratamiento inoculado solo
con Meloidogyne spp., fue el que tuvo el índice de
severidad mayor con un valor de 60%, presentándose
una relación inversa en relación con las variables
de crecimiento como la materia seca de raíces y
parte aérea, al igual que el diámetro del tallo que
tuvieron valores menores (Tabla 4). Así mismo, los
tratamientos en los cuales se inocularon el nematodo
fitoparásito y los HMA (excepto en asocio con B.
subtilis), tuvieron los valores menores de materia seca
de raíces (Figura 2A, Tabla 3). Como se dijo con
anterioridad, era de esperarse debido a que los HMA
requieren de un tiempo de establecimiento antes
de mostrar sus efectos benéficos, unidos al hecho
de un ataque temprano de Meloidogyne spp., el cual
tabla 4. Índice de severidad o porcentaje de infección de Meloidogyne spp., en las raíces de tomate de mesa, evaluado
mediante la escala de Bridge & Page (1980)”.”
tratamiento Descripción
2 HMA + Meloidogyne spp.
4 B. subtilis + Meloidogyne spp.
6 HMA + B. subtilis + Meloidogyne spp.
7 Meloidogyne spp.
CONCLUsiONes
1. La inoculación con la bacteria promotora de
crecimiento vegetal B. subtilis, aumentó la materia
seca radical de plántulas de tomate de mesa con
los efectos benéficos que este hecho ejerce en el
agron. 21(2): 51 - 64, 2013
buen desarrollo del cultivo.
2. La inoculación del nematodo del nudo radical,
Meloidogyne spp., afectó en forma negativa y sig-
61
forma agallas en las raíces primarias y secundarias,
y en estado avanzado el tejido senescente se rompe
originando cancros de apariencia corchosa que
posteriormente se necrosan y mueren, impidiendo así
la formación de raíces lo que se traduce en deficiente
toma de nutrientes y agua por las plantas (De Waele
& Davide, 1998; Agrios, 2005) y en competencia de
puntos de colonización para los HMA (Sánchez de
Prager et al., 2007; Guzmán et al., 2012).
Fuera de ello, también pueden explicarse estos resul-
tados de valores menores de materia seca de raíces
en los tratamientos con HMA solos o asociados con
B. subtilis y Meloidogyne spp., debido a que el inóculo
de HMA presentaba nematodos fitoparásitos, a los
cuales se hizo alusión previamente. Esta puede ser
una voz de alerta acerca de la necesidad de control
de la calidad de inoculantes comerciales, en general, y,
en particular de HMA. En este caso, los inoculantes
correspondían solo a siembras destinadas a investig-
ación, cuya buena sanidad se asumió porque se había
revisado en un mes anterior.
Índice de severidad
(%)
40
50
50
60
nificativamente el desarrollo radical y aéreo de
las plántulas, tanto cuando se aplicó solo como
cuando se combinó con los HMA.
3. Los HMA inoculados presentaron bajos porcen-
tajes de colonización de las plántulas de tomate,
aunados a su contaminación con algunos nemato-
dos fitoparásitos. Estos factores unidos al hecho
de una evaluación temprana, a los 30 días de
establecido el ensayo, incidieron en la evidencia
62
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

de manifestación de los micosimbiontes sobre el negativamente el desarrollo aéreo y radical de las

desarrollo vegetal.
4. La aplicación de HMA en el momento de
la siembra, junto con Meloidogyne spp. afectó
plántulas de tomate, mostrando la necesidad de
inoculaciones de los microorganismos benéficos,
especialmente estos, en forma preventiva antes
que curativa. Esta limitación fue menos evidente
en B. subtilis.
 63
Estudio preliminar del efecto de microorganismos benéficos sobre el tomate (Solanum lycopersicum L.)...

ReFeReNCias

Agrios, G. 2005. Plant pathology. 5th edition. Elsevier Academic Press, Nueva York. 922 p.

Agronet. 2014. Sistema de estadísticas agropecuarias. Anuario 2012. Consulta: marzo 20 de 2014. http://www.agronet.gov.co/
agronetweb1/Estad%C3%ADsticas.aspx

Alarcón, A., Boicet, T., Godefoy, M., Bacilio-Jiménez, M., Ceiro, W. & Bazán, Y. 2013. Efecto de las micorrizas arbusculares y
Meloidogyne spp. en tomate (Solanum lycopersicum L.). Rev. Protección Vegetal. 28(3): 219-223.

Bridge, J. & Page, S.L.J. 1980. Estimation of root-knot nematodes infestation levels on roots using a rating chart. Tropical Pest
Management. 26:296-298.

De Waele, D. & Davide, R. 1998. Nematodos noduladores de las raíces del banano, Meloidogyne incognita (Kofoid & White, 1919)
Chitwood, 1949 y Meloidogyne javanica (Treub, 1885) Chitwood, 1949. Plagas de Musa. Hoja divulgativa No. 3.

Gómez, L., Rodríguez, M., De la Noval, B., Miranda, I. & Hernández, M.A. 2008. Interacción entre el Ecomic® y una población
cubana de Meloidogyne incognita en tomate. Rev. Protección Vegetal. 23(2):90-98.

Guzmán, O.A., Castaño-Zapata, J. & Villegas, B. 2012. Principales nematodos fitoparásitos y síntomas ocasionados en cultivos de
importancia económica. Revista Agronomía. 20(1):38-50.

Guzmán, O.A. & Rivillas, C.A. 2008. Relación de Glomus manihotis y G. fasciculatum con el crecimiento de plantas de café y la severidad
de la Mancha de hierro Cercospora coffeicola Berk. & Cooke. Cenicafé. 58(3):236-257.

International Culture Collection of Arbuscular and Vesicular-Arbuscular Mycorrhizal Fungi. INVAM. 2011. Taxonomy of fungi in
Glomales. West Virginia University, Virginia, USA. Consulta: octubre 1 de 2011. http://invam.caf.wvu.edu/Myc_Info/Taxonomy/
taxonomy.htm

Kloepper, J.W., Mahaffee, W., McInroy, J.A. & Backman, P.A. 1991. Comparative analysis of methods for recovering plant growth-
promoting rhizobacteria from roots. Can. J. Microbiol. 37:953-957.

Leguizamón, C.J.E. 1995. Interacción de una mezcla de micorrizas y el complejo Meloidogyne spp. en almácigos de café. En: Congreso
de la Asociación Colombiana de Fitopatología y Ciencias Afines, 16. Medellín (Colombia), Julio 5-7, 1995. Medellín (Colombia),
ASCOLFI-ICA.

Marx, D.H. 1991. Practical significance of ectomycorrhizae in forest establishment. Marcus Wallenberg Found. Symp. Pro. 7:54-90.

Mitkowski, A. & Abawi, G. 2003. Plant disease lessons: Root-knot nematode. Pathogen: Meloidogyne species. The American
Phytopathological Society. http://www.apsnet.org/education/LessonsPlantPath/RootKnotNema/default.htm

Pajovic, I. 2007. The Incidence of Root-Knot Nematodes Meloidogyne arenaria, M. incognita, and M. javanica on vegetables and weeds
in Montenegro. Plant Disease, notes. 91(11):1514.

Pedraza, R., Teixeira, K., Fernández, A., García, I., Baca, B., Azcón, R., Baldani, V. & Bonilla, R. 2010. Microorganismos que mejoran
el crecimiento de las plantas y la calidad de los suelos. Revista Corpoica - Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 11(2):155-164.

Perry, R., Moens, M. & Starr, J. 2009. Root knot nematodes. CAB International, London.
agron. 21(2): 51 - 64, 2013

Rivillas, C.A. 2003. Las micorrizas arbusculares en el cultivo del café. En: Enfermedades del cafeto en Colombia. Chinchiná
(Colombia). p.64-74.

Rodríguez, S. & Romero, J. 2007. Efecto de biofertilizantes y estrés por hidromorfía en vitroplantas de caña de azúcar, variedad C
120-78. Temas Agrarios. 12(2):4-20.
64
Óscar Adrián Guzmán Piedrahita, Jairo Castaño Zapata y Marina Sánchez de Prager

Sánchez de Prager, M., Gómez, L.E., Muñoz, F.J., Barrios, E., Prager, M.M. & Bravo, O.N. 2007. Las Endomicorrizas: Expresión
bioedáfica de importancia en el trópico. Universidad Nacional de Colombia, Sede Palmira, Colombia.

Sánchez de Prager, M. & Velásquez, D.C. 2008. Las micorrizas. El micelio externo de los hongos formadores de micorriza arbuscular
(HMA). Serie EL SUELO. Cuadernos Ambientales, No. 12. Universidad Nacional de Colombia, Sede Palmira.

Sieverding, E. 1991. Vesicular-arbuscular mycorrhiza management in tropical agrosystems. Eschborn (Alemania), GTZ. 371p. Ing.
(Schriftenreihe der GTZ No. 224).

Smith, S.E. & Read, D.J. 1997. Mycorrhizal symbiosis. 2th edition. Academic Press, San Diego, USA.

Tarafdar, J.C. & Rao, A.V. 2002. Possible role of arbuscular mycorrhizal fungi in development of soil structure. pp. 186-206. In:
Sharma, A.K. & Johri, B.N. (eds.). Arbuscular Mycorrhizae. Interactions in Plants, Rhizosphere and Soils. Science Publishers, Inc.
Enfield, USA.

Terry, E & Leyva, A. 2006. Evaluación agrobiológica de la coinoculación micorrizas-rizobacterias en tomate. Agronomía Costarricense.
30(1):65-73. Consulta: julio 1 de 2014. www.mag.go.cr/revagr/inicio.htm www.cia.ucr.ac.cr

Toro, M., Bazó, I. & López, M. 2008. Micorrizas arbusculares y bacterias promotoras de crecimiento vegetal, biofertilizantes nativos
de sistemas agrícolas bajo manejo conservacionista. Agronomía Tropical. 58(3):215-221.

Ulloa, M. & Hanlin, R.T. 2001. Illustrated dictionary of mycology. American Phytopatholocial Society, St. Paul, USA.

Vaast, P. & Zasoski, R.J. 1992. Effects of VA-mycorrhizae and nitrogen source on rhizosphere soil characteristics, growth and
nutrient acquisition of coffee seedlings Coffea arabica L. Plant and Soil (The Netherlands). 147(1):31-39.

Van der Heijden, M.G.A., Wiemken, A. & Sanders, I.R. 1998. Mycorrhizal fungal diversity determines plant diversity, ecosystem
variability and productivity. Nature. 396: 69-72.