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Objetivos:
Verificar el papel de diversas hormonas (insulina, glucagón) en la regulación de la
glucemia.
Comparar los perfiles metabólicos inmediatos en los metabolismos lipídico y
glucídico.
Adquirir destreza en venipunturas.
Química Biológica II Laboratorio Nº 4
FaCENA, UNNE 2013
Fundamentos teóricos:
Las acciones de la insulina abarcan diversas áreas del metabolismo y ponen
en juego variados mecanismos fisiológicos: modificación de la actividad de sistemas
de transporte de membrana, regulación de la síntesis de ARN y proteínas, y
modulación de la actividad de enzimas.
Los principales efectores de la acción de insulina son los tejidos muscular,
adiposo y hepático.
Efecto sobre el metabolismo de carbohidratos: la insulina es la principal
hormona hipoglucemiante. Esta acción se debe a su capacidad de estimular el
ingreso de glucosa en los tejidos con transportadores sensibles, y de activar la
utilización de glucosa en los mismos. Se estimula la glucogenogénesis, la glucólisis, la
oxidación total de la glucosa, la vía del fosfogluconato y la conversión de glucosa en
lípidos. Estos efectos se deben no sólo a la modulación directa de la actividad de las
enzimas, sino también a la inducción de la síntesis de enzimas de las vías citadas.
En cuanto al metabolismo lipídico es típicamente lipogénica, aumenta la
síntesis de ácidos grasos y de triacilglicéridos. Activa la lipoproteín-lipasa endotelial
para facilitar la síntesis de triglicéridos en tejido adiposo, e inhibe a la lipasa hormono-
sensible de los adipocitos para prevenir la lipólisis. Cuando hay exceso de alimentos,
la insulina dirige la acetil-CoA preferentemente hacia la síntesis de ácidos grasos.
Materiales y métodos:
Guantes descartables
Jeringas de 5 ml y agujas para venipuntura de 23/8” (estériles, descartables)
Lazos de goma
Alcohol y algodón
Descartador de agujas
Tubos de ensayo
Gradilla
Marcadores
Centrífuga
Baño a 37° C
Micropipetas de 10 microlitros
Pipetas de vidrio de 1 ml
Propipetas
Kits de reactivos para Glucosa, Triglicéridos y Colesterol (Total, HDL y LDL) (ver
técnicas adjuntas)
Agua destilada
Espectrofotómetro
Los alumnos deberán traer por grupo para este trabajo práctico:
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Los alumnos deberán traer por comisión para este trabajo práctico:
Guantes descartables.
Jeringas de 5 ml y agujas para venipuntura de 23/8” (estériles, descartables).
Lazo de goma.
Distribución de tareas:
A. Un alumno que haya almorzado normalmente una dieta mixta al mediodía (situación
post-absortiva en reposo).
Alumno: ………………………………………………………………………
B. Un alumno que haya tenido una ingesta rica en lípidos inmediatamente antes del
horario de inicio del práctico: 14:30 hs (situación absortiva inmediata en reposo).
Alumno: ………………..
C. Un alumno con ayuno de 8 horas (primera extracción). Luego, ingerirá una solución
glucosada al 20% en no más de 10 minutos, permaneciendo en reposo para
extracciones posteriores (segunda a los 60 minutos, y tercera a los 120 minutos de la
ingesta).
Alumno:…………………………………………………………………………………………
………
Precauciones
Centrifugar 5 min a 1000 rpm, separando luego los sueros en otros tubos
rotulados. Reservarlos para análisis y observación de su aspecto.
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Informe:
PRUEBAS A B C
TIEMPOS: Basal Basal Basal 60 min 120 min
Aspecto del suero
Glucosa
Triglicéridos
Colesterol Total
HDL Colesterol
LDL Colesterol
Cuestionario:
PRUEBAS A B C
TIEMPOS: Basal Basal Basal 60 min 120 min
Aspecto del suero
Glucosa
Triglicéridos
Colesterol Total
HDL Colesterol
LDL Colesterol
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2. ¿Concuerdan los resultados obtenidos con los esperados? Justifique las posibles
diferencias.
PRUEBAS A B C
TIEMPOS: Basal Basal Basal 60 min 120 min
Aspecto del suero
Glucosa
Triglicéridos
Colesterol Total
HDL Colesterol
LDL Colesterol
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Bibliografía:
- Bioquímica Humana. Orten J. M., Nehaus O. W. 10ma ed. Ed. Médica Panamericana. 1990.
- Química Biológica. Blanco A. 9na edición. Editorial El Ateneo. 2011.
- Todd-Sanford-Davidsohn. Diagnóstico y tratamiento clínicos por el laboratorio. Henry J.B.
8va ed. Salvat. 1988.
- Vademécum. Wiener Laboratorios. 2013.
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