INTRODUCCION.

La enfermedad causada por virus es, sin duda, uno de los factores más
limitantes en la producción de cultivos
[1] Los virus son el segundo mayor contribuyente a la pérdida de
rendimiento después de los hongos. Viral
la infección resulta en retraso del crecimiento, reducción del vigor y
disminución / pérdida total del rendimiento.
Desafortunadamente, no hay ningún producto químico disponible que
pueda proteger a las plantas de enfermedades virales. En
Además, los virus se pueden propagar rápidamente por los insectos
vectores. No tener técnicas claramente definidas
en la mano, los agricultores confían en prácticas de gestión cultural
tradicionales que incluyen
saneamiento de campo mediante la pulverización de plaguicidas, la
plantación de plantas trampa, la eliminación manual de infectados
plantas y cultivos en rotación [2,3]. Aunque los agricultores terminan con
costos adicionales, estos
las técnicas no garantizan que las plantas permanezcan no infectadas en
el campo.
Debido a las prácticas de gestión complejas e ineficaces, el uso de
las variedades y cultivares siguen siendo la mejor opción para manejar
enfermedades virales. sin embargo, el
la disponibilidad de variedades y cultivares resistentes es el mayor
desafío para la mayoría económicamente
cultivos importantes. Los enfoques tradicionales de mejora para mejorar
la resistencia son
tedioso, largo y costoso. Además, la resistencia a menudo es superada
por los recién emergidos
cepas y especies virales.

RESISTENCIA A VIRUS.
Las estrategias para la resistencia viral se clasifican principalmente
como (1) resistencia del gen de la planta huésped (R),
(2) resistencia derivada de patógenos (PDR) y (3) resistencia dirigida a
patógenos (PTR). En
la primera estrategia, los genes R naturales se usan para generar
resistencia en hospedadores susceptibles. por ejemplo, el gen N del
tabaco se usó para desarrollar un tomate transgénico con un
resistencia al virus del mosaico del tabaco (TMV) (4). Desde entonces,
muchos genes R han sido
identificado y utilizado para diseñar la resistencia contra virus. Una
lista de genes R con su
aplicaciones se da en la Tabla 4.1.
En la segunda estrategia, se introducen secuencias virales en el genoma
de una planta que
proporciona resistencia mediada por proteína o ARN. Las secuencias
virales presentes en el
el genoma de la planta interfiere con el ciclo de infección normal del
virus. En el primer intento de PDR, el gen de la proteína de la cubierta
(CP) de TMV se introdujo en el tabaco transgénico para desarrollar
resistencia contra TMV [86]. Desde entonces, varios genes virales y
regiones genómicas tienen
sido utilizado para ingeniería de resistencia a los virus invasores.
Algunos fueron diseñados utilizando
proteínas virales (pelaje, movimiento y replicasa) para mediar la
resistencia, mientras que otras
acumulación requerida de secuencias de ácido nucleico [interferencia
antisentido ARN y ARN
(RNAi)]. La tercera estrategia utiliza proteínas o enzimas que se dirigen
específicamente a componentes virales.
Por ejemplo, plantas de tabaco transgénicas diseñadas mediante la
introducción de la proteína
quinasa R, un componente de la vía del interferón en mamíferos, mostró
una significativa
resistencia cuando se desafía con múltiples virus [87].
La primera estrategia, el gen R, está limitada debido a la falta de
disponibilidad de genes R para la mayoría
grupo de virus dañino [88]; sin embargo, la segunda estrategia, PDR,
tiene un uso limitado porque
de sus altos niveles de especificidad para el virus de donde se deriva la
secuencia insertada.
Además, un silenciador supresor de virus no relacionados en infecciones
mixtas puede deshabilitar
el transgen-silenciamiento en las plantas habilitadas para PDR [89].

Resistencia Genética de la Planta Huésped

La presión de selección aplicada a patógenos ha contribuido
significativamente a la evolución de
genomas del hospedero La mayoría de los hosts asignan una porción
significativa de sus genomas para la codificación
defensas contra patógenos, incluidos los virus. Al igual que otros
organismos, las plantas están equipadas
con un sistema inmune innato La resistencia inmune del huésped se puede
clasificar como (1)
recesivo y (2) resistencia dominante. La resistencia recesiva es
relativamente más prominente
en las plantas, que es el resultado de la incompatibilidad entre factores
codificados por patógenos y
proteínas del huésped con las que necesitan interactuar para establecer
una infección [90]. Dominante
la resistencia a enfermedades (R) depende de la presencia de gen (es) en
el patógeno que hace que
patógeno avirulento contra un genotipo huésped que contiene un gen R
correspondiente. Los
La presencia de genes de avirulencia dominante (Avr) en un patógeno da
como resultado un reconocimiento activo
proceso (Fig. 4.1). La mayoría de los genes R codifican para unión a
nucleótidos (NB) ricos en eleucina
proteínas de repetición (LRR), nombradas sobre la base de la presencia de
un conservado (NB) y un
Dominio C-terminal (LRR) [91]. Los genes que codifican NBeLRR son uno de
los más grandes y
diversas familias de genes informadas en plantas [92], con
aproximadamente 500 miembros en
Medicago, 480 en arroz, 317 en álamo, 233 en uva, 149 en Arabidopsis y 54
en papaya
[93e98]. Es importante destacar que ninguna diferencia de características
puede distinguir dos NB-LRR
proteínas que reconocen virus o bacterias. De hecho, similares proteínas
NB-LRR son
capaz de reconocer patógenos completamente diferentes. Por ejemplo, el
alélico
Las proteínas Arabidopsis NB-LRR (RPP8, HRT y RCY1) confieren resistencia
a un oomiceto
y dos virus [6,12,79]. Además, la respuesta iniciada no es específica de
la clase de un
patógeno. Por ejemplo, el suministro de proteínas Avr fúngicas o
bacterianas usando un vector viral para
una planta que codifica la proteína NB-LRR correspondiente puede dar como
resultado una resistencia contra el
vector viral recombinante utilizado para la administración [99,100].
Estos hallazgos confirman que
Las proteínas NB-LRR desencadenan respuestas que son efectivas contra
todos los tipos de patógenos (bacterianos,
viral, hongos, etc.).

Protein-Mediated Resistance
En este enfoque, la proteína viral en sí misma es responsable de la
resistencia observada. Tres viral
proteínas, CP, proteína de movimiento (MP) y proteína asociada a la
replicación (Rep), tienen
sido utilizado con éxito para desarrollar resistencia contra virus de
plantas.

• Capa de resistencia mediada por proteínas:

• CP realiza múltiples tareas en el curso de la replicación del virus
y la infección para alojar plantas.
• Estos incluyen encapsidación, traducción de ARN viral, movimiento
sistémico, transmisión de vectores,
• y severidad de los síntomas de la enfermedad. En ejemplos exitosos,
plantas transgénicas
• expresar el gen CP de un virus proporcionó resistencia contra los
virus correspondientes
• y cepas relacionadas: por ejemplo, el gen CP del virus del mosaico
de la papa que se expresa en
• papa [101], gen TMV CP que se expresa en el tabaco [102] y virus de
la mancha anular de la papaya (PRSV)
• CP genes que expresan en papaya transgénica [103]. La resistencia
mediada por CP ha sido
• ampliamente utilizado (Tabla 4.2). Puede implicar los siguientes
mecanismos posibles: (1) CP sintetizado por un transgén es capaz de
interactuar subunidades subunitarias con el CP durante
• Desmontaje del virus desafiante [104]. Esta interacción finalmente
puede prevenir
• unión de ribosomas al ARN del virus invasor. (2) Unión de los
transgénicos
• CP mutante a los factores del huésped responsables del
desensamblaje del virión a través de la competencia
• inhibición de la CP del virus invasor [105]. (3) El CP puede
conferir resistencia contra
• un virus específico interactuando con la proteína de inclusión
nuclear b, específica de Potyviruses
• [106]. La resistencia mediada por el gen CP funciona en diferentes
etapas durante la infección del virus.
• Por ejemplo, TMV se ve muy afectado durante el desensamblaje del
virus y la etapa de movimiento
• [102], mientras que el virus de la papa X (PVX) se ve afectado
durante la replicación [107]. Muchos importantes
• los cultivos se han diseñado incorporando una copia del gen CP
viral: por ejemplo, (1)
• pepino transgénico resistente al virus del mosaico del pepino
(CMV); (2) papaya transgénica contra el virus de la mancha anular
de la papaya (PRSV); (3) patata transgénica resistente al rollizo
de patata
• virus (PLRV), PVX y virus de la papa Y (PVY); (4) resistencia
cirágica transgénica a la varicela
• virus; (5) calabaza transgénica resistente al virus del mosaico
amarillo del calabacín, CMV y agua
• virus del mosaico del melón; y (6) tomate transgénico resistente al
CMV, rizo de hoja amarillo de tomate
• virus (TYLCV), virus del mosaico del tomate y virus del mosaico
amarillo [108].
•
• Resistencia mediada por proteína de movimiento.
• Los virus de plantas codifican proteínas de movimiento que les
permiten propagar el virus localmente y
• sistémicamente, modificando la función de activación del
plasmodesmata [147]. El viral
• el movimiento implica plasmodesmata y los canales que se extienden
a través de la célula vegetal
• paredes. Una planta transgénica que expresa MP viral mutado puede
conferir resistencia a través de
• competencia por los sitios de unión del plasmodesmatal. El primer
experimento en MP-mediado
• resistencia reveló que un MP defectuoso compitió con el codificado
virus salvaje
• MP para los sitios de unión en el plasmodesmata y, por lo tanto,
proporciona resistencia contra
• el virus dirigido [148]. Además, la estrategia de resistencia
mediada por MP produjo un amplio espectro
 • resistencia al interferir con la propagación de relaciones
lejanamente relacionadas y no relacionadas
• virus [149].

Resistencia mediada por réplicas.

Los virus de plantas codifican Rep que permite la replicación de virus en

la célula huésped. Replicación
comienza con la interacción de los factores Rep y host. Plantas
transgénicas con Rep como transgén
confirió resistencia contra el virus del que se deriva la secuencia. Sin
embargo,
las plantas transgénicas que expresan un gen de ARN polimerasa
dependiente de ARN modificado
conferido resistencia específica de la cepa. Una proteína mutante con un
nivel de expresión más bajo
(20%) fue lo suficientemente eficaz como para proporcionar resistencia
contra el virus objetivo [150].
Se han propuesto posibles mecanismos de resistencia como: (1) la proteína
codificada por
el transgén interfiere con la función del desafiante virus Rep uniéndose
a viral
proteínas, o (2) al unirse a factores celulares del huésped que regulan
la replicación [151]. Promover
estudios sugirieron la coexistencia de resistencia mediada por proteínas
y ARN en Repexpressing
plantas transgénicas [152,153]. Por lo tanto, es posible que Rep plantas
transgénicas
provocar dos mecanismos posibles: (1) dirigir la replicación de un virus
desafiante, o (2)
interfiere con la propagación del virus al interactuar con los
parlamentarios [154,155].

Resistencia mediada por ARN.

La resistencia mediada por ARN se logra inhibiendo la expresión de un gen

mediante
silenciamiento dependiente de homología. Esta tecnología es versátil y se
usa para la función de genes
análisis, terapéutica y resistencia de ingeniería a patógenos de plantas.
El silenciamiento es provocado
mediante la formación de ARN bicatenario (dsRNA), que conduce a la
generación de pequeños
ARN, que eventualmente degradan el gen objetivo [156]. Aunque dsRNA es la
mejor herramienta
para provocar el desencadenante de silenciamiento, también se sabe que
otros fenómenos activan el silenciamiento
[157,158].

• Interferencia de ARN.
• El término "ARNi" fue acuñado por Fire y Mello en 1998 para
describir un silenciamiento de genes
• fenómeno basado en dsRNA [158]. RNAi trabaja en el mecanismo de la
postranscripción
• silenciamiento de genes, que es un mecanismo natural de defensa del
huésped. RNAi tiene
 • se ha utilizado para generar resistencia contra varios virus,
incluido el mosaico Bean pod
• virus, CMV, virus del mosaico enano del maíz, virus enano de la
soja, virus del mosaico de la caña de azúcar y
• TMV en tabaco o sus respectivas plantas hospedadoras [166e171].
Todos estos estudios produjeron el
• inducción efectiva de silenciamiento de ARN. Lo más importante, el
uso del enfoque RNAi proporcionado
• resistencia múltiple a virus usando una única construcción
combinando fragmentos de múltiples
• virus [172].

• Co-supresión
• Además de la resistencia mediada por proteínas, la expresión de CP
viral, MP y Rep
• los genes en plantas transgénicas conducen a resistencia mediada
por ARN. Este fenómeno fue primero
• observado durante la sobreexpresión del gen de la chalcona sintasa
de la petunia [159]. los
• banco de mecanismos sobre la sobreproducción de ARN sentido que da
como resultado la supresión de
• transgen y gen objetivo endógeno. Se predijo que la planta tiene un
mecanismo
• para eliminar todos los ARN homólogos al alcanzar un umbral crítico
de ARN
• acumulación [160]. El papel de la co-supresión en la resistencia a
los virus fue descubierto por un
• observación que reveló que la resistencia a virus de las líneas
transgénicas CP es directamente
• relacionado con el nivel de expresión de ARNm de CP y no con el
nivel de expresión de la proteína [166.

• ARN paralelo.

ARN antisentido (complementario a parte del genoma viral) inhibe la

expresión de genes por
formando dsRNA, emparejándose con el mRNA viral. El dsRNA es reconocido y
degradado por la maquinaria de silenciamiento del anfitrión. La técnica
fue reportada por primera vez
para inhibir la expresión del gen de poligalacturonasa en tomate
[162,163]. Antisentido
La tecnología de ARN fue rápidamente adaptada por biólogos de plantas y
aplicada para generar resistencia
contra muchos virus, incluidos PVY, PLRV y CMV [157, 164, 165]. Sin
embargo,
la resistencia fue superada por nuevas cepas virales con mutaciones en su
genómica
secuencias. Por lo tanto, la tecnología no pudo ser utilizada como se
esperaba.

MECANISMO DE INTERFERENCIA DE ARN.

RNAi es una vía celular en la que las secuencias diana se degradan sobre
la base de
homología a nivel de ARN mensajero (ARNm), evitando así la traducción del
objetivo
ARNs. Pequeños RNA interferentes (siRNA) se generan a partir de dsRNA
largo y están involucrados
en defensa a través de la interferencia de ARN [156,161]. Tras la
infección viral, los dsRNAs son
producido a partir de los intermedios de replicación de ARN virales que
actúan como sustrato para Dicer,
una endonucleasa [173]. Dicer reconoce los dsRNA y los divide en dobles
siRNA (21e25 nt) [174]. El ARNip bicatenario está compuesto por un
filamento
que es complementario al ARNm diana, conocido como cadena guía; el otro
es conocido como
Pasajero filamento. Luego, la cadena guía se carga en el complejo de
silenciamiento inducido por ARN (RISC). El ARNsi de guía se une al ARNm
diana, lo que da como resultado la escisión del ARNm
y degradación posterior. El mecanismo de RNAi se ilustra en la figura
4.2.

MicroRNA.

Los microARN (miARN) son ARN endógenos no codificantes de 20 a 25

nucleótidos de longitud
[175,176]. Similar a siRNA, miRNA también regula la expresión génica
postranscripcional.
miRNA se origina a partir de ARN no codificante endógeno monocatenario
con una secuencia secundaria
estructura [177,178]. En un estudio, dos miRNAs artificiales (amiRNAs),
diseñados contra P69
y HC-Pro of Turnip yellow mosaic virus y Turnip mosaic virus, se
encontraron
proporcionar resistencia a los virus [179]. En otro estudio, los amiRNAs
se usaron para silenciar
HcPro y TGB1 / p25 de PVY y PVX, respectivamente [180]. Sin embargo,
debido a la
rápida evolución del genoma viral, la aplicación en el campo de este
método permanece
cuestionable.

Resistencia dirigida a patógenos

Aunque el gen R y el PDR proporcionan un cierto nivel de resistencia a
los virus invasores,
ninguno confiere resistencia completa. En la mayoría de los casos, la
resistencia se rompe después de algunas generaciones.
En PTR, los constructos de silenciamiento no son de origen vegetal ni
patógeno
derivado. Son constructos sintéticos diseñados para dirigirse al genoma
viral para proporcionar
resistencia en plantas hospedadoras.

Resistencia dirigida a patógenos.

Aunque el gen R y el PDR proporcionan un cierto nivel de resistencia a

los virus invasores,
ninguno confiere resistencia completa. En la mayoría de los casos, la
resistencia se rompe después de algunas generaciones.
En PTR, los constructos de silenciamiento no son de origen vegetal ni
patógeno
derivado. Son constructos sintéticos diseñados para dirigirse al genoma
viral para proporcionar
resistencia en plantas hospedadoras

Oligoadenilato sintetasa.

El sistema 20,50A-oligoadenilato sintetasa (OAS) / RNasa L es un sistema

inmunitario antiviral
vía que es inducida por interferones en animales [181]. El sistema de la
OEA ha sido
informado no solo en mamíferos, sino también en aves, reptiles, anfibios,
marinas y
esponjas de agua dulce, anélidos, moluscos y algunas bacterias [182e184].
Un putativo
el componente de OAS1 también se encontró en las algas verdes [185]; Sin
embargo, no hay ningún informe de su
presencia en las plantas
La vía de la OEA es un sistema de inmunidad innato que responde a la
patogenicidad
patrones moleculares: por ejemplo, moléculas de dsRNA viral. En el
reconocimiento
de dsRNAs, la OEA cataliza la polimerización de adenosina trifosfato,
produciendo
Oligoadenilatos unidos 20-50. Los 20,50 A-oligonucleótidos resultantes
activan el latente
ribonucleasa, ARNasa L, que degrada los ARN virales y endógenos
[186e191].
La construcción de la vía de la OEA en el tabaco confiere resistencia a
virus de amplio espectro
[191e194]. La infección por virus se restringió como lesiones diminutas
necróticas en transgénicos
plantas de tabaco que expresan la vía de la OEA. La vía de la OEA también
era capaz de
activación de genes relacionados con la defensa y resistencia sistémica
adquirida en virus infectados
plantas de tabaco transgénico [195]. El sistema OAS / RNase L puede
proporcionar resistencia a
cualquier virus de planta que pase a través de intermediarios de
replicación de dsRNA en las células infectadas.

Transcripción como activador del Efecto de las Nucleasas.

La transcripción de la enzima efectora similar a un activador (TALEN) se

descubrió durante
Infección por Xanthomonas a su planta huésped [196,197]. Durante la
infección, Xanthomonas entrega
un conjunto de proteínas conocidas como efectores de tipo activador
transcripcional (TALE) [196,198].
Los CUENTOS modifican el transcriptoma del anfitrión uniéndose a regiones
promotoras e imitando
factores de transcripción del huésped [197]. Los CUENTOS tienen un
dominio de unión de ADN que consiste en
16e20 monómeros. Cada monómero tiene una longitud de 34 aminoácidos y
está muy conservado.
Los avances han permitido descifrar el código TALE para el reconocimiento
de ADN [199,200].
La decodificación del mecanismo de reconocimiento de ADN TALE recibió la
atención del genoma
ingenieros, lo que resultó en un mayor uso para la ingeniería del genoma
vegetal [198]. La cola
El dominio de unión al ADN se fusionó con el dominio catalítico de la
endonucleasa FokI para
crear TALEN (Fig. 4.3). La fusión de los dominios de unión de ADN (TALE)
a FokI lo hizo
es posible crear rupturas de doble cadena específicas (DSB) en secuencias
de ADN específicas [201].
El sistema de reconocimiento de ADN simple y único de los efectores TALE
permite su ensamblaje rápido con una mayor especificidad de unión al ADN
a las secuencias de ADN virales objetivo. CUENTO
La tecnología fue probada para generar resistencia a los begomovirus
(familia
Geminiviridae). Las proteínas artificiales TALE se ensamblaron en base a
los conservados
motivos a través de los genomas de begomoviruses. Plantas transgénicas de
Nicotiana benthamiana
expresando las proteínas artificiales TALE y la nucleasa FokI mostraron
resistencia a diferentes
begomovirus [202]. Los resultados sugieren que los TALEN diseñados
también se pueden usar para
otra clase de virus de ADN.

Nucleasas con dedos de Zinc.

De forma similar a TALEN, las nucleasas con dedos de zinc (ZFN) son un
sistema de escisión de ADN dirigible
que se ha utilizado para la orientación de genes en las plantas. Las
roturas de doble cadena inducidas por ZFN son
sujeto a procesos de reparación de ADN celular que conducen a mutagénesis
dirigida. ZFNs son
compuesto de proteínas zinc finger (ZF) y endonucleasa FokI. Descifrando
el cristal
La estructura de un conjunto de 3 ZF mostró que cada dedo contacta con 3
pares de bases de ADN en una
moda modular [203]. Este hallazgo dio como resultado la idea de diseñar
proteínas artificiales ZF
y atacando las secuencias genéticas deseadas. En estudios posteriores, se
descubrió que el dominio de escisión de FokI debe dimerizarse para cortar
un ADN [204,205]. Esto le dio al investigador
llevar a lograr una división más específica mediante la construcción de
dos conjuntos de ZF: los dedos izquierdos y
dedos derechos (Fig. 4.4). Cuando ambos juegos de dedos, el izquierdo y
el derecho, se unen
a sus secuencias de reconocimiento, se produce la dimerización del
dominio de escisión de FokI, que conduce a
roturas de doble cadena en el ADN dirigido (figura 4.4). Las proteínas
artificiales ZF fueron diseñadas para
objetivo el motivo de secuencia conservada de begomoviruses. El ZFN
artificial era entonces
construido fusionando la secuencia de codificación de ZF y la secuencia
de codificación de FokI
endonucleasa. Las plantas transgénicas que expresan la ZFN artificial
mostraron resistencia
contra begomovirus múltiples [206].
Sistema CRISPR-Cas9
En arqueas y bacterias, la repetición palindrómica regularmente
entremezclada (CRISPR) /
El sistema Cas9 (CRISPR / Cas9) asociado a CRISPR confiere inmunidad
molecular contra
fagos invasores [207e210]. El sistema CRISPR / Cas9 se ha utilizado en
animales y plantas
para llevar a cabo la edición y regulación del genoma específico
[211,212]. El sistema CRISPR / Cas9 está compuesto por la endonucleasa
Cas9 de Streptococcus pyogenes y un ARN guía sintético
(sgRNA). El sgRNA se une a sus secuencias complementarias en el genoma
objetivo y
guía al Cas9 para escindir el ADN [213,214]. Por lo tanto, desarrollar un
sistema CRISPR / Cas9 para
nuevo objetivo requiere solo la adición de 20 nucleótidos a la
construcción que codifica el sgRNA
(Fig. 4.5). La mutagénesis de ADN dirigida usando el sistema CRISPR /
Cas9 se usó para apuntar
diferentes virus de mamíferos. Por ejemplo, el uso de CRISPR / Cas9
erradicó el proviral del VIH
ADN del genoma del hospedador y prevención de la infección por VIH en
futuras infecciones [215].
CRISPR-Cas9 se ha usado también para virus de plantas. Tres estudios de
diferentes partes
del mundo demostró la aplicación exitosa de CRISPR / Cas9 para generar
resistencia contra TYLCV, virus rizado severa de la remolacha y virus de
la enana amarilla,
respectivamente. Las regiones conservadas entre las cepas virales
relacionadas fueron objetivo, resultando
en buen silenciamiento en los tres estudios [216e218].

Comentarios finales y perspectivas futuras

Antes de la era de la ingeniería genética de las plantas, la reproducción

tradicional de plantas junto con
la biología molecular contribuyó significativamente al desarrollo de
cultivares resistentes.
Desafortunadamente, el proceso fue tedioso y llevó mucho tiempo. Lo más
importante,
dependía de la disponibilidad de una fuente compatible para la
transferencia de resistencia, que limitaba
su uso. Como una opción alternativa, se descubrió la clonación y la
transferencia precisas del gen R.
Varios genes R han sido descubiertos, caracterizados y utilizados para
generar resistencia en
variedades agronómicamente importantes de diferentes cultivos. Mientras
tanto, los patógenos tienen
también evolucionó con virulencia mejorada y mecanismos alternativos, lo
que resultó en la
Desglose de la resistencia, causando graves pérdidas de rendimiento.
Además, la falta de disponibilidad del gen R en
cultivos económicamente importantes limitaron su uso. Con la invención de
la ingeniería genética,
PDR se ha utilizado como una herramienta para generar resistencia a virus
en diferentes cultivos. Ambos protegen
Las estrategias basadas en ARN se han explotado para desarrollar
resistencia. Sin embargo, similar a
La resistencia mediada por genes R, la resistencia basada en PDR fue
superada por los virus en posteriores
generaciones
Se dio cuenta de que hay una batalla continua entre la planta y los virus
y que
existe la necesidad de un nuevo enfoque para manejar la resistencia a los
virus. Los investigadores han llegado
con un nuevo concepto llamado PTR. En este enfoque, las nuevas vías están
diseñadas en el
planta huésped para atacar una amplia gama de virus de plantas.
Construcción de oligoadenilato sintetasa
vías en las plantas hospederas rindieron una amplia gama y resistencia
duradera contra
Virus de ARN con intermediarios de replicación de dsARN. La técnica
promete proporcionar
resistencia duradera en diferentes cultivos de importancia económica. Por
otra parte,
TALEN, ZFN y CRISPR-Cas9 proporcionaron una resistencia completa contra
los virus de ADN. De
los tres, TALEN, ZFN y CRISPR-Cas9, este último es el más fácil de
diseñar y proporciona
Mejores resultados. Debido a la facilidad de diseño, CRISPR-Cas9 ha sido
explotado rápidamente para
generar resistencia contra virus de ADN. CRISPR-Cas9 tiene ventajas
adicionales sobre
los dos porque es capaz de proporcionar resistencia contra muchos virus
simultáneamente. los
tres técnicas, TALEN, ZFN y CRISPR-Cas9, también se pueden usar para
suprimir (o golpear)
fuera) hospedar genes de susceptibilidad para proporcionar resistencia
contra una amplia gama de virus.