MARCAJE EX VIVO DE LEUCOCITOS

1.- Añadimos 100 µl de sangre total a un tubo y le añadimos los anticuerpos.

2.- Incubamos 15 minutos, a temperatura ambiente y en oscuridad.

3.- Lisamos los hematíes con solución lisante recién hecha (BD FACS lysing solution, BD
Biosciences) a una concentración 1/10 e incubamos 10 minutos a temperatura ambiente y en
oscuridad.

4.- Lavamos 2 veces con PBS 1X y centrifugamos 5 min a 1800 rpm.

5.- Decantamos, aspiramos la última gota y resuspendemos en 500 µl de PBS 1X.

6.- Guardamos a 4ºC.