TEMA A

30 PREGUNTA Nº 1
0 a) Indique las reacciones involucradas en la transdesaminación de alanina. ¿Cómo será la velocidad de la
transdesaminación de alanina en el estado de saciedad? Justifique.
b) En qué reacción participa el esqueleto carbonado que se puede obtener a partir de la transdesaminación de la alanina?
Señale la reacción involucrada, sustratos, cofactores y productos de esta reacción
c) ¿Cómo se regula la actividad de la enzima mencionada en el ítem (b) en estado de ayuno? Justifique.
d) Señale los principales destinos metabólicos de los productos que se obtienen a partir de la reacción mencionada en el
ítem (b).

RESPUESTAS
a) alanina + alfa-cetoglutaratoglutamato + piruvato(transaminasa), y luego
glutamato + NADP+ (o NAD+)NH3 + alfa-cetoglutarato + NADPH (o NADH) + H+ (glutamato deshidrogenasa,
GDH). En saciedad: los niveles de ATP (o GTP) aumentados inhiben alostéricamente a la GDH, por lo tanto la
transdesaminación estará inhibida.
b) Reacción catalizada por la Piruvato Deshidrogenasa: piruvato + CoA + NAD+Acetil-CoA + NADH + H++ CO2.
Cofactores: pirofosfato de tiamina, ácido lipoico, NAD+, FAD, Coenzima A.
Alternativamente: Reacción catalizada por la piruvato carboxilasa: piruvato + HCO 3-+ ATPoxaloacetato + ADP + Pi
(biotina)
c) En ayuno: La actividad de la piruvato deshidrogenasa estará inhibida porque la enzima se fosforila por la quinasa
(PDK) que se activa por AcCoA, ATP y NADH, además el AcCoAy el NADH inhiben alostéricamente a la PDH. La
enzima piruvato carboxilasa se activa por el modulador alostérico Ac CoA, cuyos niveles se incrementan en el ayuno.
d) El producto de la actividad de la piruvato deshidrogenasa, el Acetil CoA puede: oxidarse completamente en el Ciclo de
Krebs, combinarse con oxaloacetato para formar citrato que se utiliza para la síntesis de AG, puede formar cuerpos
cetónicos. El NADH se reoxidará en la cadena de transporte de electrones y el CO2 se eliminara por la respiración
El producto de la piruvato carboxilasa, el oxaloacetato se utiliza para la gluconeogénesis.

40 PREGUNTA Nº2
0 a) Indique todas las enzimas involucradas en la reducción de la ubiquinona
b) Explique el efecto de la oligomicina sobre el consumo de oxígeno
c) Explique por qué se pueden formar radicales libres en la cadena de transporte de electrones. ¿Qué compuestos no
enzimáticos pueden regular la concentración de estas especies en la mitocondria?
d) Dados los potenciales de reducción estándar de las siguientes hemirreacciones:
R=1,98 cal/mol. K
F= 23062 cal/mol.V
Piruvato + 2 H+ + 2 e- → lactato E°´ = -0,185 V
NAD+ + 2 H+ + 2 e- → NADH + H+ E°´ = -0,320 V
Para el caso en el cual la temperatura es 37° C y las concentraciones intracelulares son
[piruvato] = 0,05 M [NAD+] = 0,15 M
[lactato] = 0,05M
Escriba la reacción de reducción del piruvato y calcule la concentración intracelular de [NADH] cuando la reacción se
encuentra en el equilibrio.

RESPUESTAS
a) Complejo I (NADH deshidrogenasa), Complejo II (Succinato Deshidrogenasa), Glicerol 3-fosfato deshidrogenasa,
Acil-CoA deshidrogenasa.
b) La oligomicina bloquea la entrada de protones a la matriz mitocondrial mediante la ATP sintetasa, y por lo tanto inhibe
la síntesis de ATP. Como consecuencia, aumenta el gradiente de H+ hasta que la cadena no puede seguir transfiriendo
más protones hacia el espacio intermembrana y por lo tanto se frena el consumo de oxígeno.
c) Los radicales libres se pueden formar en aquellas reacciones donde se transfieren electrones en forma individual. El
principal radical libre que se puede formar en la cadena de transporte de electrones es el anión superóxido, en el
proceso de reducción del oxígeno molecular. Durante la reducción de la molécula de oxígeno a agua se produce
ganancia de electrones en cuatro etapas, la primera de ellas genera el radical superóxido mientras que las
transferencias de los dos siguientes electrones producen la especie reactiva peróxido de hidrogeno y el radical
hidroxilo. Los compuestos no enzimáticos capaces de regular la concentración de estas especies son la vitamina E y
el glutatión.
d) Respuesta:
Piruvato + NADH + H+  Lactato + NAD+

ΔG = 0
ΔE = 0
E = E°’ + RTln [oxidado]
n F [reducido]

-0,185 V = -0,320 V + 1,98 cal/mol. K. 310K .ln y

2. 23062 cal/mol.V
-0,185 V = -0,320 V + 0,013 .ln y

-0,185 V + 0,320 V = ln y

1
 0,013
10,38 = ln y

y= 32208=0,15M y entonces X= 4,6 10-6M

X

También se aceptó el cálculo de la concentración de NADH utilizando la ecuación de G.

Se tuvo en cuenta el procedimiento seguido ya que los valores pueden cambiar según la aproximación utilizada.

30 PREGUNTA Nº3
0 Con respecto al trabajo práctico de determinación de los parámetros cinéticos de la ureasa, responda:
a) ¿Qué información se obtiene cuando Ud. incubó una determinada concentración de sustrato en presencia de la enzima
durante diferentes intervalos de tiempo?
b) Represente en un mismo gráfico los resultados que Ud. debería haber obtenido a partir de las mediciones de
absorbancia a distintos tiempos de incubación, comparando la concentración más baja de sustrato con respecto a la más
alta.
c) ¿Cómo transformó los valores de absorbancia en los de concentración de amoníaco?
d) Si la temperatura del baño de incubación hubiera sido menor que la deseada (20ºC en lugar de 37ºC), ¿qué resultado
diferente de los que calculó, hubiera obtenido en esta condición? Justifique.

RESPUESTAS
a) Se realizan incubaciones por distintos tiempos para cada concentración de sustrato con el fin de determinar la velocidad
inicial de la reacción (para cada concentración de sustrato), que se obtiene a partir de la tangente al origen de la curva
de [Producto] en función del tiempo.
b) Gráfico: Diferencias entre menor y mayor concentración: i) en el punto final: es mayor la cantidad de producto formado
a partir de más sustrato y ii) en la pendiente inicial: es mayor cuanto más sustrato inicial haya.

C2
Producto

C1

C2  C1

tiempo, min

c) En el TP lo hicieron con el coeficiente de extinción molar  (aplicando la ley de Beer donde A=  b c, donde
c=concentración y b, una constante) pero también podrían decir que se usa una curva de calibración.
d) El parámetro cinético que varía con la temperatura es la Vmax

TEMA B
30
PREGUNTA Nº 1.
a) Indique las reacciones involucradas en la transdesaminación de aspartato. ¿Cómo será la velocidad de la
0
transdesaminación de aspartato en el estado de ayuno? Justifique
b) El esqueleto carbonado que se obtiene a partir de aspartato puede reaccionar con Acetil-CoA. ¿Qué enzima cataliza esa
reacción y qué producto se obtiene?
c) ¿Cuáles son los principales destinos metabólicos del producto de la reacción que señaló en el ítem (b). Cuando los
niveles de ATP sean elevados, ¿cuál de éstos será el destino preferencial? Indique todas las enzimas que están
involucradas en esta vía metabólica.
d) ¿Cuál es la función de la carnitina-palmitoil-transferasa? Cuando los niveles de ATP sean elevados, ¿cómo será la
actividad de esta enzima? Justifique.

RESPUESTAS
a) aspartato + alfa-cetoglutaratoglutamato + oxaloacetato (transaminasa) y luego
glutamato + NADP+ (o NAD+)NH3 + alfa-cetoglutarato + NADPH (o NADH) + H+(GDH)
En el ayuno, la reacción estará favorecida por la regulación de la GDH (estimulada por ADP o GDP)
b) Oxaloacetato + Acetil CoAcitrato + CoA. Enzima: Citrato Sintasa.

2
 c) Citrato: transformación en isocitrato continúa en el ciclo de Krebs o salida al citosol para la síntesis de ácidos grasos
(AG). Cuando los niveles de ATP son elevados predomina la síntesis de AG. Enzimas: Citrato Liasa, Acetil
CoAcarboxilasa y AG sintasa
d) La enzima participa de la transferencia de ácidos grasos a la mitocondria para su oxidación. En caso de niveles
energéticos altos, se favorece la síntesis de ácidos grasos y el malonilCoA formado como intermediario en la síntesis
de AG inhibe a la carnitina palmitoil transferasa.

PREGUNTA Nº2
40
a) ¿Por qué se obtiene más energía a partir de la oxidación de NADH + H+ que de FADH2?
0 b) Explique cómo afecta la valinomicina (un ionóforo de potasio)la síntesis de ATP.
c) Explique por qué se pueden formar radicales libres en la cadena de transporte de electrones. ¿Qué sistemas enzimáticos
regulan la concentración de estas especies en la mitocondria?
d) Dados los potenciales de reducción estándar de las siguientes hemirreacciones:
R= 1,98 cal/mol. K
F= 23062 cal/mol.V
Piruvato + 2 H+ + 2 e- → lactato E°´ = -0,185 V
NAD + 2 H + 2 e → NADH + H E°´ = -0,320 V
+ + - +

Para el caso en el cual la temperatura es 37° C y las concentraciones intracelulares son

[piruvato] = 0,02m M [NAD+] = 0,5 mM

[NADH] = 0,5 mM

Escriba la reacción de reducción del piruvato y calcule la concentración intracelular de [lactato] cuando la reacción se
encuentra en el equilibrio.

RESPUESTAS
a) El potencial de reducción del par FADH2/FAD es mayor que el del NADH/NAD y por lo tanto la energía disponible
para la síntesis de ATP es menor. También podrían decir que el NADH transfiere electrones a través del complejo I
que cataliza la transferencia de 4 H+ al espacio intermembrana, en cambio el FADH2 lo hace a partir del complejo II
(que no transfiere H+). Por lo tanto, el gradiente de protones que se forma a partir de la oxidación del NADH (10 H +)
es mayor que el del FADH2 (6 H+)
b) la valinomicina es un ionóforo de potasio que disminuye el gradiente electroquímico (en su componente eléctrico) ya
que permite el pasaje de cargas positivas (K+) hacia la matriz independientemente de la ATP sintasa. Esto disminuye
la síntesis de ATP.
c) Los radicales libres, como el anión superóxido y el anión hidroxilo, se pueden formar por la reducción incompleta del
oxígeno por los electrones que se “escapan” de la transferencia correcta por la cadena de transporte de electrones.
Aparte de la correcta reducción del oxígeno molecular en la cadena de transporte de electrones, las reacciones que
regulan estas especies reactivas en la mitocondria son las catalizadas por las enzimas superóxido dismutasa y catalasa
o glutatión peroxidasa que transforman al anión superóxido en peróxido de hidrogeno (primera enzima) y a éste en
agua (las otras enzimas).
d)
Piruvato + NADH + H+  Lactato + NAD+

E = E°’ + RTln [oxidado] = E°’ +0,013ln y

n F [reducido]
-0,320 V = -0,185 V + 1,98 cal/mol. K. 310K .ln y
2. 23062 cal/mol.V
-0,320 V = -0,185 V + 0,013 ln y

0,185 V - 0,320 V = ln y
0,013

-10,38 = ln y

y= 3,1 10-5= 0,02 mM

X mM
XmM= 0,02 mM= 645 mM
0,000031

También se aceptó el cálculo de la concentración de NADH utilizando la ecuación de G.

Se tuvo en cuenta el procedimiento seguido ya que los valores pueden cambiar según la aproximación utilizada.

30 PREGUNTA Nº 3
0 Con respecto al trabajo práctico de determinación de los parámetros cinéticos de la ureasa, responda:
a) En el TP se incubaron distintas concentraciones de urea con ureasa por diferentes intervalos de tiempo ¿qué
información obtuvo para cada concentración de urea? ¿Cómo obtuvo esa información?

3
 b) ¿Cómo calculó los parámetros cinéticos de la ureasa a partir de los datos experimentales obtenidos en el laboratorio?
c) ¿Cómo transformó los valores de absorbancia en los de concentración de amoníaco?
d) Si la temperatura del baño de incubación hubiera sido menor que la deseada (25ºC en lugar de 37ºC), ¿qué resultado
diferente de los que calculó, hubiera obtenido en esta condición? Justifique.

RESPUESTAS
a) Las velocidades iniciales (Vo). Se grafica P en función del tiempo y de la pendiente de la tangente al origen(a tiempo
cero) se obtiene la Vo.
b) Se obtuvieron las Vo para diferentes concentraciones de sustrato y después se hizo el gráfico de Lineweaver-Burk de
1/Vo vs. 1/(S). De la pendiente y de la ordenada al origen se calculan Km y Vmax.
c) En el TP lo hicieron con el coeficiente de extinción molar  (aplicando la ley de Beer donde A=  b c, donde
c=concentración y b, una constante) pero también podrían decir que se usa una curva de calibración.
d) El parámetro cinético que varía con la temperatura es la Vmax.

TEMA C
PREGUNTA Nº1
40
a) Indique todos los intermediarios y las enzimas involucradas en la incorporación de glucosa libre a la molécula de
0 glucógeno. ¿Cuál es la etapa limitante de la velocidad de síntesis de glucógeno?
b) Un niño presenta episodios recurrentes de hipoglucemia desde su nacimiento. En un ensayo para determinar la causa de
la hipoglucemia, se le suministró una inyección de glucagon aproximadamente 1 hora después de una ingesta rica en
carbohidratos. La glucemia del niño aumentó de 70 a 110 mg/dL. Aproximadamente 10 horas después de la ingesta, la
glucemia del niño era de 45 mg/dL. Se le suministró otra dosis de glucagón pero no se observó aumento en la glucemia.
¿Qué conclusión saca de estos resultados?
c) En un individuo sano, ¿cuál es el efecto del glucagon sobre la síntesis de ácidos grasos? Justifique.
d) ¿Cómo afectará el glucagón la actividad de la carnitina-palmitoiltransferasa? Justifique.

RESPUESTAS
a) glucosa + ATPglucosa 6P + ADP, glucosa 6P glucosa 1P, glucosa 1P + UTP UDP-glucosa, UDP-glucosa+
glucógeno(n-1)UDP + glucógeno(n). Limitante: Glucógeno Sintasa
b) La vía afectada es la gluconeogénesis: La inyección de glucagón luego de 1 hora de la ingesta genera un aumento en la
glucemia. Significa que se formó glucógeno y que se puede utilizar. Unas pocas horas después de la ingesta
comienzan la gluconeogénesis que junto con la degradación del glucógeno mantienen la glucemia en los períodos de
ayuno. De haber un defecto en la gluconeogénesis, al agotarse el glucógeno la glucemia descenderá rápidamente. En
ese caso el glucagón ya no producirá un incremento en la glucemia.
c) El glucagón aumenta la fosforilación de la Acetil CoA carboxilasa y por lo tanto se inhibe la enzima y la síntesis de
AG.
d) Disminuyen los niveles de malonilCoA (se inhibe la enzima que lo sintetiza), intermediario en la síntesis de ácidos
grasos, y por lo tanto la CPT tendrá mayor actividad

30 PREGUNTA Nº2
0 a) ¿Cuáles son los productos de la oxidación completa de un mol de acetilCoA en el ciclo de Krebs?
b) Indique el rendimiento energético, en términos de ATP por mol de acetil CoA y justifique
c) ¿Cuál es el destino metabólico del NADH que se produce en la glucólisis hepática?
d) A partir de ácidos grasos de número impar de carbonos es posible obtener oxaloacetato. Indique los intermediarios
involucrados.

RESPUESTAS
a) CO2, 3 NADH + 3H+, FADH2 y GTP
b) 3 NADH= 7,5 ATP; 1 FADH2= 1,5 ATP; 1 GTP (= 1 ATP); Total= 10 ATP
c) NADH de la glucólisis hepática se reoxida en la cadena de transporte de electrones mitocondrial. Deben transportarse
a la mitocondria los equivalentes de reducción mediante las lanzaderas (generación de NADH o de FADH2 en la
mitocondria).
d) La beta-oxidación de AG de número impar de carbonos genera como producto final propionilCoA que se transforma
en SuccinilCoASuccinatoFumaratoMalatoOxaloacetato.

30 PREGUNTA Nº3
0 Se realiza un experimento con mitocondrias aisladas en un buffer adecuado y se agregan sucesivamente los siguientes
reactivos en el orden indicado: a) ADP y Pi; 2) malato; 3) oligomicina, 4) valinomicina y 5) rotenona. Grafique la
variación en el consumo de oxígeno y los niveles de ATP en función del tiempo, marcando en cada gráfico el agregado de
las sustancias mencionadas. Explique
b) ¿Cómo se afectaría el consumo de oxígeno y la síntesis de ATP si se agrega una solución de NADH al medio de
incubación de mitocondrias aisladas en presencia de ADP, Pi, y malato?
c) Mencione tres productos especializados que se sintetizan a partir de GLICINA
d) ¿Qué funciones cumplen los tres productos especializados mencionados?

RESPUESTAS
a) ADP + Pi y malato son los sustratos para la cadena de transporte de electrones y la síntesis de ATP; oligomicina inhibe
a la ATP sintasa y por lo tanto inhibe la síntesis de ATP y el consumo de oxígeno porque están acoplados; valinomicina
desacopla la cadena de transporte de electrones de la síntesis de ATP, con lo que se recupera el consumo de oxígeno; y la

4
 rotenona inhibe la cadena (complejo I) y por lo tanto se vuelve a bloquear el consumo de O2. Como referencia consultar la
Guía de TP 13 (Problemas Redox. Ejercitación, páginas 8 y 15)
b) No se afecta ya que el NADH no atraviesa la membrana mitocondrial (se requieren lanzaderas).
c) Creatinina, Glutation, porfirinas, nucleótidos, ácidos biliares
d) creatinina: Metabolismo energético muscular (CPK), se degrada a creatinina. La creatina fosfato regenera el ATP
partir de ADP en el músculo, por lo cual esta molécula juega un rol muy importante en el músculo durante el ejercicio. Es
excretada por orina y representa un indicador sensible de la función renal.
Glutatión, se encarga de mantener los sulfhidrilos proteicos reducidos, participa en la síntesis de desoxinucleótidos, y
detoxifica grupos peróxidos.
Síntesis de porfirinas y grupo HEMO. El grupo hemo está presente en una gran cantidad de proteínas, tales como la
hemoglobina, la mioglobina, los citocromos, lacatalasa, y la pirrolasa del triptófano con gran afinidad por iones metálicos,
en general Fe2+ y Fe3+.
Nucleótidos, síntesis de novo de los nucleótidos de purina y pirimidina.ADN y ARN. Síntesis de ácidos biliares que
aumentan la solubilidad de determinados compuestos en la bilis.

Tema D
PREGUNTA Nº1
40 a) ¿Cómo afecta la estructura del glucógeno a su velocidad de síntesis y degradación? Justifique.
0 b) Indique qué resultados esperaría de las siguientes pruebas realizadas en un paciente que padece la enfermedad de
McArdle (déficit de glucógeno fosforilasa muscular) en comparación con un individuo sano. Explique brevemente.
1) Glucemia en ayunas
2) Estructura y cantidad de glucógeno hepático
3) Estructura y cantidad de glucógeno muscular
4) Glucemia luego de la ingesta de galactosa
5) Niveles de lactato en sangre luego de un ejercicio intenso
6) Glucemia luego de la administración de glucagón
7) Glucemia luego de la administración de adrenalina
c) ¿Cómo regula la insulina la síntesis de glucógeno en el músculo? ¿Qué diferencia existe con respecto al efecto de la
insulina sobre la regulación de la síntesis de glucógeno en el hígado?

RESPUESTAS
a) Dada la estructura altamente ramificada la molécula presenta múltiples extremos no reductores por donde comienzan a
actuar las enzimas, tanto de síntesis como de degradación. Esto permite una mayor velocidad de ambos procesos
b) Lo único que es diferente entre un paciente con este déficit y un individuo sano es lo relacionado estrictamente con el
músculo (que no participa en la regulación de la glucemia). Se afecta el contenido de glucógeno (pero no su
estructura) y la cantidad de lactato en sangre luego de un ejercicio intenso.
c) La insulina activa a las fosfatasas que regulan el estado de fosforilación de las enzimas regulatorias. La defosforilación
activa a la glucógeno sintasa e inhibe a la glucógeno fosforilasa (y a la fosforilasa quinasa). Las fosfatasas quedan
unidas a la partícula de glucógeno (por fosforilación en la subunidad G) y cerca de sus sustratos. Se desfosforila el
inhibidor I que pierde su actividad. También disminuyen los niveles de AMPc y por lo tanto deja de estar activa la
PKA. La insulina promueve la entrada de glucosa al tejido muscular (GLUT4), lo que no ocurre en el hígado
(GLUT2).

30PREGUNTA Nº2
0 a) Con respecto a la alfa-cetoglutarato deshidrogenasa indique: 1) sustratos, productos y cofactores; 2) regulación.
b) Indique al menos dos reacciones alternativas en las que puede participar el sustrato de la reacción indicada en a), como
sustrato.
c) Con respecto a la beta-oxidación hepática, indique: 1) ¿Cuáles son los productos finales y cuáles son los destinos
metabólicos de estos productos, 2) ¿Cómo se regula la velocidad de oxidación de ácidos grasos?
d) ¿Cuál es el efecto de la adrenalina sobre la síntesis de ácidos grasos?Justifique.

RESPUESTAS
a) alfa-cetoglutarato + NAD+succinil-CoA + NADH + H+ + CO2 (cofactores: pirofostato de tiamina, ácido lipoico,
Coenzima A, NAD+ y FAD). Es inhibida por NADH y activada por el aumento en la concentración mitocondrial de
Ca2+
b) transaminasas, y GDH o pueden citar las reacciones correspondientes.
c) Acetil CoA que se oxida completamente en el ciclo de Krebs o la síntesis de cuerpos cetónicos; NADH + H+ y FADH2
que se reoxidan en la cadena de transporte de electrones. La velocidad se regula por la actividad de la carnitina
palmitoil transferasa (entrada de los ácido grasos a la mitocondria) que se inhibe por malonilCoA (cuando hay
síntesis de AG).
d) La adrenalina aumenta la fosforilación de la Acetil CoA carboxilasa y por lo tanto se inhibe la enzima y la síntesis de
ácidos grasos.

30PREGUNTA Nº3
0 a) Se realiza un experimento con mitocondrias aisladas en un buffer adecuado y se agregan los siguientes reactivos en el
orden indicado:1) ADP y Pi; 2) succinato; 3) oligomicina; 4) dinitrofenol y 5) amital. Grafique la variación en el consumo
de oxígeno y los niveles de ATP en función del tiempo, marcando en cada gráfico el agregado de las sustancias
mencionadas. Explique
b) ¿Cómo se afectaría el consumo de oxígeno y la síntesis de ATP si se agregara una solución de FADH 2 al medio de
incubación de mitocondrias aisladas en presencia de ADP, Pi, y malato?
5
c) Mencione tres productos especializados que se sintetizan a partir de TRIPTOFANO
d) ¿Qué funciones cumplen los tres productos especializados mencionados?

RESPUESTAS
a) ADP y Pi y succinato son los sustratos para la cadena y la síntesi de ATP utilizando el complejo II. Oligomicina inhibe
la entrada de protones por la ATPasa y por lo tanto no hay síntesis de ATP ni consumo de oxígeno ya que ambos procesos
están acoplados; el dinitrofenol desacopla a la cadena de transporte de electrones por lo que aumenta el consumo de
oxígeno; el amital inhibe el complejo I por lo que no afecta el consumo de oxígeno a partir de succinato. Como referencia
consultar la Guía de TP 13 (Problemas Redox. Ejercitación, páginas 8 y 15)
b) No se afecta ya que el FADH2 no atraviesa la membrana mitocondrial (se requiere una lanzadera)
c) Serotonina, melatonina, niacina
d) Serotonina: participa de la percepción del dolor, trastornos afectivos y regulación del sueño, la temperatura y la presión
sanguínea.
Melatonina: su nivel varía de manera significativa con los períodos de luz y oscuridad. Por tal motivo, se la
considera como una de las principales hormonas que controla los ritmos circadianos
Niacina: niacina se activa al combinarse con adenina para formar NAD+ y NADP+ importantes coenzimas en
procesos rédox celulares.